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2024-2025学高二生物学浙科版（2019）下学期期中考试测试卷A卷
一、选择题：本题共20小题，每小题2分，共40分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1.在生产、生活和科研中，经常通过无菌技术避免杂菌的污染。下列叙述正确的是( )
A.高压灭菌锅灭菌时所需的温度、压力和时间是固定的
B.接种环、涂布器等接种用具的灭菌方式只有灼烧灭菌
C.为避免污染，接种等操作尽量在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行
D.对于牛奶等不耐高温的液体，一般采用紫外线照射法进行消毒
2.传统发酵食品是我国饮食文化的重要组成部分。下表中发酵食品制作使用的主要菌种或制作条件有错误的是( )
选项 食品名称 主要菌种 制作条件
A 腐乳 毛霉 有氧
B 泡菜 酵母菌 无氧
C 酸奶 乳酸菌 无氧
D 果醋 醋酸曲 有氧
A.A B.B C.C D.D
3.下列有关发酵工程的基本环节的叙述，正确的是( )
A.发酵工程的基本环节有菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等
B.接种是发酵工程的中心环节，接种必须在无菌条件下进行
C.发酵过程中，不能再向发酵罐中添加营养物质，以免造成污染
D.整个发酵过程中通过人工方法对发酵过程中温度、pH和溶解氧等进行检测和控制，从而使发酵过程处于最佳状态
4.土壤中95%以上的磷为植物很难利用的无效磷。解磷菌能够将磷矿粉等无效磷转化为植物易利用的速效磷。为研究解磷菌的解磷机理，科研人员将磷矿粉制成培养液，培养从土壤中分离出的2种解磷菌（M-3-01、B3-5-6），测定培养液的上清液pH及其中的速效磷含量，结果如图，下列叙述错误的是( )
A.由图可知，168h以内M-3-01解磷能力较强
B.2种解磷菌是用只含磷矿粉的培养基分离出来的
C.B3-5-6转化无效磷的能力与培养溶液pH显著相关
D.据图推测B3-5-6可能借助分泌酸性物质溶解磷矿粉
5.臭豆腐是中国传统美食。制作时，需要将豆腐浸入含有乳酸菌、芽抱杆菌等微生物的卤汁中发酵。为探究卤汁中细菌的种类和数量，某兴趣小组采用如图方法进行实验。下列说法正确的是( )
A.实验前，微生物培养的器皿、接种工具、操作者的手等应进行灭菌
B.若用该方法培养了3组，菌落数分别为65、63、64,则可以推测每毫升卤汁中所含细菌数约为6.4×106个
C.该方法测得的结果通常比实际值大
D.若使用显微镜直接计数，统计结果通常比实际值大
6.细菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在与其他细菌的竞争中占优势，其中tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白。研究人员利用野生型细菌X及其不同突变体进行了如下实验：在固体培养基表面放置一张能隔离细菌的滤膜，将一种菌（下层菌）滴加在滤膜上后再放置第二张滤膜，滴加等量的另一种菌（上层菌），共同培养后，对上、下层菌计数得到的结果如图所示。下列叙述正确的是( )
A.实验中的培养皿、固体培养基和滤膜均需要进行消毒处理
B.对上、下层菌计数可以将滤膜菌体稀释后采用血球计数板计数
C.由甲、乙，丙三组结果可推测tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性
D.野生型细菌X在与tcel—tcil双突变体和tcel突变体的竞争中均占优势
7.花椰菜(2n=18)易患黑腐病,而黑芥(2n=16)则有较好的黑腐病抗性.下图是科研人员培育具有黑腐病抗性的花椰菜植株m、n、s的过程,植株m、n、s均含有花椰菜的全部染色体下列叙述错误的是( )
A.①过程需用酶解法处理花椰菜和黑芥的细胞,并需检验得到的原生质体是否具有活力
B.对黑芥进行紫外线处理可能会使黑芥细胞发生染色体变异
C.②过程是植物组织培养,需在适宜条件下进行,杂种植株均为二倍体
D.③过程需接种黑腐病菌从而筛选获得具有黑腐病抗性的植株m、n、s
8.科研人员以携带葡萄灰比诺病毒的“阳光玫瑰”葡萄为材料,研究了外植体取材部位、光照处理和热处理方式对脱除病毒的影响,结果如下表所示相关叙述错误的是( )
组号 温度/光照+温度/黑暗 接种部位 存活率/% 株系脱毒率/%
1 38℃/16h+38℃/8h 茎尖 50.00 -
2 同上 第1腋芽 33.33 -
3 同上 第2腋芽 0 -
4 38℃/8h+32℃/8h 茎尖 88.89 100.00
5 同上 第1腋芽 94.44 100.00
6 同上 第2腋芽 94.44 83.33
A.接种前不应对外植体进行消毒,以免干扰各处理条件下的株系脱毒率
B.茎尖和第1、2腋芽都含有顶端分生组织,因此可以作为脱毒材料
C.研究人员未检测1~3组株系脱毒率的原因可能是该条件下外植体存活率较低
D.生产中应选择38℃/8h光照+32℃/8h黑暗处理,以第1腋芽为外植体进行脱毒
9.下列关于植物愈伤组织的说法错误的是( )
A.用果胶酶和纤维素酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体
B.融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织
C.体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的2个细胞核
D.通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程属于无性繁殖
10.下图为培育甘蔗脱毒苗的两条途径，研究发现经②过程获得的幼苗脱毒效果更好。下列叙述正确的是( )
A. 带叶原基的芽与植物体其他组织中的病毒含量相同
B. 可推测②过程的温度处理有利于组织中的病毒失去活性
C. 过程③、④均属于再分化，所以培养基A和B各成分含量相同
D. 图中获得的脱毒苗与原甘蔗苗相比细胞核遗传物质发生了改变
11.下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法正确的是( )
A.①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精精子需要获能
B.②代表早期胚胎培养，该过程中细胞进行有丝分裂，无细胞分化
C.③代表胚胎分割，需均等分割桑葚胚的内细胞团，以免影响胚胎发育
D.⑤代表胚胎移植，受体应处于适合的生理状态，可事先用激素对供体和受体进行同期发情处理
12.自杀基因系统是指将外源基因导入受体细胞后会表达相应的酶,该酶可催化无毒的药物前体转化为有毒物质，从而导致受体细胞死亡。为探究外源基因TK与药物更昔洛韦能否组成自杀基因系统，研究人员以肝癌细胞为受体细胞进行实验，结果如图所示。下列说法正确的是( )
A.培养肝癌细胞的过程中不需要定期更换培养液
B.肝癌细胞在细胞培养过程中会发生接触抑制
C.对照组和实验组应分别为导入TK和未导入TK的肝癌细胞
D.实验结果表明外源基因TK与更昔洛韦可组成自杀基因系统
13.下列关于植物组织培养、微生物培养、动物细胞培养过程的描述，正确的是( )
A.纯化微生物、植物组织培养和动物细胞培养所用的都是固体培养基
B.利用选择培养基筛选土壤中尿素分解菌的过程中，尿素分解菌细胞中水的来源包括从培养基中吸收水分和细胞代谢产水两部分
C.植物组织培养过程中，愈伤组织细胞的代
D.动物细胞培养过程中需要严格控制培养条件，无外界条件干扰,细胞不会发生突变
14.由于胚胎发育率低,导致非人灵长类动物的体细胞核移植非常困难。我国科学家经过反复实验，成功培育出了体细胞克隆猴（2n=54）,流程如图所示。下列叙述错误的是( )
A.体细胞克隆猴的线粒体DNA完全来自提供卵母细胞的母猴
B.灭活的病毒失去感染能力,具有抗原结构
C.重构胚中组蛋白的甲基化水平降低、乙酰化水平提高可能会提高胚胎发育率
D.重构胚细胞中含有2个染色体组,54条染色体
15.下列关于动物细胞培养的叙述中，错误的是( )
A.用于培养的细胞多取自动物胚胎或幼龄动物
B.培养过程中需要使用胰蛋白酶等获得细胞悬液
C.动物细胞培养时要保证氧气供应，不能通二氧化碳
D.动物细胞培养时的培养基是液体培养基，并要加入血清
16.治疗乳腺癌“HER2”的抗体—药物偶联物（T-DM1）被纳入2023年国家医保药品目录。T-DM1由曲妥珠单抗和细胞毒性药物DM1偶联形成。T-DM1作用机制如图，下列有关叙述错误的是( )
A.连接物在内环境中要保持稳定，在细胞内能被断开
B.T-DM1中的抗体主要发挥治疗效应，杀伤靶细胞
C.经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞不能直接生产单克隆抗体
D.利用同位素标记的曲妥珠单抗在乳腺组织成像中可定位诊断肿瘤的位置
17.下列关于胚胎工程的叙述，错误的是( )
A.培养“试管动物”过程离不开有性生殖
B.胚胎工程技术分为胚胎移植和胚胎分割技术
C.胚胎分割可以用分割针分割囊胚
D.胚胎移植时,不需要对受体进行免疫抑制处理
18.胚胎移植、胚胎分割过程中很多操作环节都需进行检查，下列叙述错误的是( )
A.体外受精后需检查受精状况和受精卵的发育能力
B.进行胚胎移植前需要对供体和受体进行免疫检查
C.胚胎移入受体母畜后需对其进行是否妊娠的检查
D.胚胎分割时可取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定
19.限制性内切核酸酶可以在特异的位点将DNA分子剪切开。如图为不同种限制酶识别的序列，箭头所指的是酶切位点，下列叙述错误的是( )
A.能被BamH I识别的序列也一定能被Sau3A I识别
B.一个DNA分子被EcoR I切成两个片段时会发生8个氢键的断裂
C.质粒作为基因工程的常用载体，通常会有多种限制性内切核酸酶切割位点
D.用BamH I切割的目的基因和用Sau3A I切割的质粒无法连接
20.数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理如图所示。下列有关叙述不正确的是( )
A.应根据目的基因的两端已知序列设计两种引物
B.PCR每一循环包括变性、复性和延伸三个过程
C.PCR结束后有靶分子的反应单位能检测出荧光
D.每个反应单位中都需要加入解旋酶和耐高温DNA聚合酶
二、非选择题：本题共5小题，共60分。
21.（12分）我国卫生部门规定饮用水标准是1mL自来水中细菌总数不超过100个（37°C培养24h），1000mL自来水中大肠杆菌菌落数不能超过3个（37°C培养48h）。水中大肠杆菌的含量常采用伊红—亚甲基蓝琼脂培养基进行检测，生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色且带有金属光泽。某校生物兴趣小组开展校园桶装纯净水微生物含量检测活动，请回答问题：
（1）为了检测饮用水中细菌的数量，该兴趣小组按下表配方配制伊红—亚甲基蓝琼脂培养基：
蛋白胨 乳糖 磷酸氢二钾 琼脂 蒸馏水 2%伊红水溶液 0.5%亚甲基蓝水溶液
10g 10g 2g 20～30g 1000ml 20mL 13mL
从物理状态和用途两个角度分析，该培养基分别属于____________培养基，其中蛋白胨可以为细菌生长提供____________（至少写出两点）等营养物质。培养基灭菌____________（前/后）需要调节培养基的PH值。
（2）某同学分别向3个培养基中各加入1mL未经稀释的待测水样，涂布均匀后置于37°C的恒温培养箱中培养24h，结果如图1所示。检测时使用的接种量为1mL而不是0.1mL，其理由是____________。
（3）下图2为用滤膜法测定饮用水中大肠杆菌数目的流程示意图，请完成下表。
实验步骤的目的 简要操作过程
①____________ 将滤膜放入装有蒸馏水的烧杯中，加热煮沸15min，共煮沸三次
过滤细菌 装置安装好后，向漏斗内加入1000mL水样，加盖抽滤。
冲洗漏斗壁 再向漏斗内加等量②____________继续抽滤。
培养大肠杆菌 用无菌镊子取滤膜，将其紧贴在伊红一亚甲基蓝琼脂平板上，然后将平板③____________，37℃培养48小时
统计大肠杆菌菌落数 选取④____________的菌落进行计数，统计结果为2个
（4）综合（2）（3）测定结果，你认为所测桶装纯净水的微生物含量____________（能/不能）达到饮用水卫生标准，理由是____________。
22.（12分）同源四倍体的紫花苜蓿被誉为“牧草之王”，但易造成家畜鼓胀病；二倍体的百脉根因富含缩合单宁，饲喂时可防止家畜鼓胀病的发生。研究人员设计了下列技术路线，以期获得抗鼓胀病的新型苜蓿。
（注：R-6G可阻止线粒体的呼吸作用，IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，二者有效抑制不同植物细胞正常代谢的临界浓度不同）
（1）培育抗鼓胀病的新型苜蓿依据的生物学原理有____________。培养原生质体时，需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是____________。
（2）在实验前需通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，设计思路是____________。
（3）步骤②到步骤③需要更换新的培养基，原因之一是培养基中____________是影响植物细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素。
（4）科研人员研究了不同浓度的聚乙二醇（PEG）对紫花苜蓿和百脉根原生质体融合率的影响，实验结果如下图。异源融合率是指不同种的原生质体发生融合的概率，已知PEG浓度较高时对细胞具有毒害作用。
①诱导原生质体融合的方法除了使用聚乙二醇外，还可以利用的化学方法是____________。
②实验结果表明诱导苜蓿与百脉根原生质体融合的最佳PEG浓度为____________，理由是____________。
23.（12分）现代社会压力使人们的作息很难严格遵循体内的生物钟。频繁的加班、熬夜等导致人的生物钟紊乱,最终出现失眠、日间过度嗜睡等问题。通过实验,我国科研团队成功获得了5只BMAL1基因(与生物节律有关)敲除的克隆猴,极大地推动了生物钟紊乱相关问题的研究。培育克隆猴的步骤如图所示,回答下列问题:
(1)哺乳动物利用胚胎细胞核移植较体细胞核移植更易成功,原因是____。
(2)对卵母细胞去核所采用的方法是____,克隆猴的性状与____ (填“A”或“B”)猴的性状相似度最高,与母体相比,克隆猴体细胞染色体数目____ (填“加倍”、“不变”或“减半”)。
(3)在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞中前,必须先去掉受体卵母细胞的细胞核,原因是____。
(4)为了研究这5只BMAL1基因敲除的克隆猴是否存在昼夜节律紊乱问题,科学家进行相关实验,如表所示。
组别 实验个体
对照组
实验组 5只BMAL1基因敲除的克隆猴
①表中对照组的实验个体是____。
②结果显示,与对照组相比,实验组猴的神经内分泌激素褪黑素分泌减少;与睡眠剥夺、抑郁症以及衰老等相关的基因表达增强;不再按照24小时的周期活动,在夜间活动明显增多,这说明____。
24.（12分）亚麻酸（LA）能够促进卵母细胞体外成熟和囊胚发育。为了给水牛体外胚胎产业化生产中合理使用亚麻酸提供理论依据，科研人员研究了不同浓度的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟、早期胚胎发育的影响。分析回答：
①卵母细胞的收集和体外培养：从屠宰场水牛的卵巢中收集并处理卵母细胞，随机分成5组，分别置于不同浓度亚麻酸的培养液中，在5%CO2的培养箱中培养22~24 h。
②卵母细胞成熟判断：在显微镜下观察卵母细胞，其培养到减数分裂Ⅱ中期视为成熟，统计结果如表1。
③体外受精：在受精溶液中进行体外受精后，用显微镜观察判断是否完成受精。
④早期胚胎培养：将受精卵移入胚胎培养液中培养44~48 h后检查分裂情况，每隔48 h更换一次培养液，第5~9天观察囊胚发育情况，统计结果如表2。
表1 亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟的影响
LA浓度（μmol·L-1） 卵母细胞数 核成熟卵子数
0 229 137
10 201 133
50 227 166
100 215 137
200 215 135
表2 亚麻酸对水牛早期胚胎发育的影响
LA浓度（μmol·L-1） 培养卵数 分裂数 囊胚数
0 309 171 75
10 325 182 82
50 292 185 97
100 310 188 84
200 231 145 68
（1）步骤①中，细胞培养箱中加5%CO2的作用是____________________。
（2）步骤②中，成熟卵母细胞内染色体的行为特征是_____________。步骤③中，体外受精过程主要包括__________和受精等主要步骤。
（3）步骤④中，受精卵在经过__________（填一个时期）期后发育成囊胚。
（4）根据实验数据分析，亚麻酸溶液浓度为200 μmol·L-1时，对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起__________（填“促进”或“抑制”）作用。
（5）实验结果表明，__________μmol·L-1的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都最有利，判断依据是______________________________。
25.（12分）某山区地市，镉矿开采是当地国民经济的主要来源之一，但镉矿开采加工时产生的废弃物导致镉（Cd）在土壤中过量积累。利用植物修复技术将土壤中的Cd富集到植物体内，进行后续处理（例如收集植物组织器官异地妥善储存），可降低土壤中Cd的含量。为提高植物对Cd污染土壤的修复能力，研究者将酵母液泡Cd转运蛋白（YCF1）基因导入实验植物，并检测了相关指标。
回答下列问题：
（1）由题意可知，YCF1基因表达的蛋白质能够富集周围环境中的镉离子，表明该转运蛋白转运镉离子的运输方式是_____。
（2）将YCF1基因插入Ti质粒构建重组载体时，所需要的两种酶是_____。构建的重组基因表达载体中必须含有标记基因，其作用是_____。
（3）研究者最终获得了转YCF1基因的不育杨树、柳树等植物品系，采用不育株系作为实验材料的优点是_____。
（4）为测定转基因柳树与野生型柳树对Cd污染土壤净化效率的差异，科研小组将两种柳树分别种植在Cd污染土壤中，半年后测定植株干重（图1）及不同器官中Cd含量（图2）。据图1可知，野生型与转基因植株相比，转基因柳树对Cd具有更强的耐性，原因是_____；据图2可知，转基因植株具有更强的富集Cd的能力，通过不断收集并处理_____对于缓解土壤Cd污染最为方便有效。
（5）相较于草本植物，采用柳树这种乔木作为Cd污染土壤修复植物的优势在于_____（写出2点即可）。
答案以及解析
1.答案：C
解析：使用高压灭菌锅灭菌时所需的温度、压力和时间是根据要消灭的微生物芽孢等结构的耐热性来确定的,A错误;接种环、涂布器等接种用具的灭菌方式除了灼烧灭菌外,也可用干热灭菌,B错误;为避免杂菌污染,接种等操作尽量在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行,超净工作台台面每次实验前要用70%酒精擦拭,然后紫外线消毒30min,C正确；对于一些不耐高温的液体,如牛奶,一般采用巴氏消毒法,D错误。
2.答案：B
解析：泡菜制作过程中起主要作用的微生物是乳酸菌,而非酵母菌,B错误.
3.答案：A
解析：发酵工程的基本环节有菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等，A正确；发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，B错误；在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量产物浓度等，以了解发酵进程，同时要严格控制发酵条件，如温度、pH、溶解氧等，还要及时添加必要的营养物质等，C错误；现代发酵工程中，计算机控制系统可以通过反馈机制，使发酵罐内的发酵全过程处于最佳状态，D错误。
4.答案：B
解析：A、据图可知,168h以内M-3-01解磷菌的速效磷含量高于B3-5-6解磷菌,说明168h以内M-3-01解磷能力较强,A正确;B、培养基的主要成分是水、碳源、氮源、无机盐,只含磷矿粉的培养基无法满足解磷菌对全部营养物质的需求,2种解磷菌是用只含磷矿粉为唯一磷源的培养基分离出来的,B错误;C、在培养72h以后B3-5-6解磷菌中的pH下降,速效磷含量也迅速上升,则说明B3-5-6转化无效磷的能力与培养溶液pH显著相关,C正确;D、当pH下降时B3-5-6培养液上清液中速效磷含量也迅速上升,当pH上升到7.0以上时,速效磷的含量不再上升,推测B3-5-6可能借助分泌酸性物质溶解磷矿粉,D正确。故选B。
5.答案：D
解析：消毒是指使用较为温和的物理、化学方法杀死物体表面或内部一部分不需要的微生物:灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,操作者的手应进行消毒处理,A错误。该方法培养的3组培养基上的菌落数分别为65、63、64,故每毫升卤汁中所含细菌数约为(63+64+65)÷3÷0.1×105=6.4×107(个)。B错误。当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,所以该方法测得的结果通常比实际值小,C错误。利用显微镜直接计数时,由于不能区分活菌和死菌,因此统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和,即统计结果通常比实际数值大,D正确。
6.答案：C
解析：A、为避免杂菌的污染，实验中的滤膜、培养皿、固体培养基等均需灭菌处理，A错误；B、对活菌进行计数的方法是稀释涂布平板法，具体方法是：先将菌体进行梯度稀释，再涂布到滤膜的表面，待菌落数稳定时进行计数，不能用显微镜直接计数的原因是显微镜直接计数不能区分死菌和活菌，B错误；C、tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白，乙组中野生型可产生tce1蛋白作用于tcel-tcil双突变体，后者无法产生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生菌在竞争中占据优势；而在丙组中，野生型可产生tce1蛋白作用于tcel突变体，后者可以产生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生型的生长受到抑制，由此推测，tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性，C正确；D、由甲组、乙组可知，野生型细菌X在与tcel-tcil双突变体的竞争中均占优势，由甲组、丙组可知，野生型细菌X在与tcel突变体的竞争中不占优势，D错误。故选C。
7.答案：C
解析：植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,①过程需用果胶酶和纤维素酶处理去除细胞壁,得到原生质体并需检验得到的原生质体是否具有活力,A正确；由获得的植株m、n、s的染色体条数可知,来自黑芥的染色体余数分别为2、7、3,黑芥的其他染色体可能在紫外线处理中被破坏掉,因此对黑芥进行紫外线处理会使黑芥细胞发生染色体变异,B正确;②过程是植物组织培养,需在适宜条件下培养才能获得杂种植株,获得的杂种植株有来自黑芥的染色体,因此杂种植株可能并非含有两个染色体组,即并非都是二倍体,C错误;③过程需接种黑腐病菌,筛选获得具有黑腐病抗性的植株m、n、s,D正确。
8.答案：A
解析：植物组织培养中外植体发育为完整植株必须要有严格的无菌条件,故接种前应对外植体进行消毒,A错误；茎尖和第1、2腋芽都含有顶端分生组织,病毒极少甚至无病毒,因此可以作为脱毒材料,B正确；分析表格可知,1~3组未检测株系脱毒率,可能因为在38℃/16h光照+38℃/8h黑暗条件下外植体存活率较低,C正确；分析表格可知,在38℃/8h光照+32℃/8h黑暗条件下,第1腋芽为外植体进行接种时存活率和株系脱毒率均较高,因此生产中应选择38℃/8h光照+32℃/8h黑暗处理,以第1腋芽为外植体进行脱毒,D正确。
9.答案：C
解析：愈伤组织的细胞壁主要由纤维素和果胶组成，可以用纤维素酶和果胶酶去除愈伤组织的细胞壁，A正确。融合的原生质体再生出细胞壁标志着原生质体融合完成，之后才能形成愈伤组织，B正确。体细胞杂交获得的杂种植株细胞中只有一个细胞核，C错误。通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程没有生殖细胞的参与，属于无性繁殖，D正确。
10.答案：B
解析：A、带叶原基的芽几乎不含病毒，故与植物体其他组织中的病毒含量不同，A错误；B、经过热水处理脱毒效果好与阻碍病毒进入有关，其作用是使组织中的病毒在图中处理温度下部分或全部失活，B正确；C、过程③、④所用培养基中生长素和细胞分裂素的含量和比例不同，C错误；D、上图中脱毒苗的培育过程采用了植物组织培养技术，其体现了植物细胞的全能性，遗传物质不会改变，D错误。故选B。
11.答案：D
解析：A、①代表体外受精，体外受精前和体内受精前精子均需要获能，A错误；
B、②代表早期胚胎培养，该过程中细胞进行有丝分裂，当胚胎发育至囊胚阶段，会开始进行细胞分化，B错误；
C、③代表胚胎分割，在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分裂，以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，而桑葚胚阶段的胚胎还未形成内细胞团，C错误；
D、⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关，要对供、受体母牛进行同期发情处理，使供体和受体的生理状态相同，D正确。
12.答案：D
解析：培养肝癌细胞的过程中需定期更换培养液,以补充细胞生长所需的营养物质,清除细胞代谢物等,A错误；肝癌细胞具有无限增殖的特点,在培养过程中不会发生接触抑制,B错误；对照组应为未导入TK的肝癌细胞,实验组应为导入TK的肝癌细胞,C错误;从图中可以看出,添加更昔洛韦后,实验组细胞数量明显少于对照组,说明外源基因TK与更昔苷洛韦可组成自杀基因系统,D正确。
13.答案：B
解析：动物细胞培养所用的是液体培养基,纯化微生物、植物组织培养所用的是固体培养基,A错误；利用选择培养基筛选土壤中尿素分解菌的过程中,尿素分解菌细胞中水的来源包括从培养基中吸收水分和细胞代谢产水两部分(如有氧呼吸的过程中会产生水),B正确；愈伤组织细胞没有叶绿体,不能光合作用合成有机物,代谢类型为异养需氧型,C错误；在无外界因素干扰的条件下,细胞可能由于DNA复制错误发生基因突变,D错误。
14.答案：A
解析：据图可知，体细胞克隆猴是由去核卵母细胞和胎猴体细胞融合后发育而成，故体细胞克隆猴的线粒体DNA来自母猴的卵母细胞和胎猴的体细胞，A错误；灭活的仙台病毒失去感染能力，但并没有破坏抗原结构，B正确；据图可知，需要向重构胚中注人组蛋白去甲基化酶的mRNA、组蛋白去乙酰酶抑制剂，再移入代孕母猴体内，故推测重构胚中组蛋白的甲基化水平降低、乙酰化水平升高可能会提高胚胎发育率，C正确；克隆猴的染色体和胎猴是一样的，均为2n=54，所以含有2个染色体组，54条染色体，D正确。
15.答案：C
解析：A、动物胚胎或幼龄动物组织细胞分裂能力旺盛，所以用于培养的细胞多取自动物胚胎或幼龄动物，A正确；B、培养过程中，细胞会接触抑制，因此需要使用胰蛋白酶等获得细胞悬浮液，B正确；C、动物细胞培养时需要一定的其他环境，即95%空气和5%二氧化碳，C错误；D、动物细胞培养时的培养基是液体培养基，并要加入血清等天然成分，D正确。故选C。
16.答案：B
解析：结合图示可知,连接物在内环境中要保持稳定,在细胞内能被断开,A正确；T-DM1由曲妥珠单抗与细胞毒性药物DM1偶联形成,曲妥珠单抗可以与细胞膜表面的HER2+特异性结合,将DM1准确带至乳腺癌细胞,细胞毒性药物才能杀伤靶细胞,其中的抗体只是起定位的作用,B错误；经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞有多种,不能直接生产单克隆抗体,还需要经过克隆化培养和抗体检测,才能用于生产单克隆抗体,C正确；曲妥珠单抗可以与HER2+特异性结合,因此可以利用同位素标记的曲妥珠单抗定位诊断肿瘤的位置,D正确。
17.答案：B
解析：培养“试管动物”需要体外受精、胚胎体外培养、胚胎移植等技术,体外受精过程属于有性生殖,A正确;胚胎工程技术包括胚胎移植、体外受精、胚胎体外培养、胚胎分割、胚胎干细胞培养等多项技术,B错误；胚胎分割的基本过程是将发育良好的桑葚胚或囊胚移入含有操作液的培养皿中,在显微镜下用分割针或分割刀分割,C正确；受体子宫对外来胚胎基本不发生免疫排斥反应,胚胎移植前不需要对受体进行免疫抑制处理,D正确。
18.答案：B
解析：A、哺乳动物的精子和卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力，A正确；B、代孕母体对移植的胚胎基本上不会发生排斥反应，不需要进行免疫检查，B错误；C、胚胎移植入子宫不代表妊娠成功，故需对其进行是否妊娠检查，C正确；D、滋养层细胞将来发育成胎膜胎盘，胚胎移植前，可取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定，不会影响胚胎的发育，D正确。故选B。
19.答案：D
解析：A、能被BamH I识别的序列中包含了被Sau3A I识别的序列，A正确；B、一个DNA分子被EcoR I切成两个片段时，四个AT碱基对间的氢键断裂，每个AT碱基对有2个氢键，一共会发生8个氢键的断裂，B正确；C、质粒作为基因工程的常用载体，通常会有多种限制性内切核酸酶切割位点，以便于把目的基因插入，C正确；D、用BamH I切割的目的基因和用Sau3A I切割的质粒，其黏性末端是相同的，可以连接，D错误。故选D。
20.答案：D
解析：A、由于DNA聚合酶只能从3'端延伸DNA链，因此要用两种引物才能确保DNA两条链同时被扩增，A正确；B、PCR技术中的每个循环由变性退火（复性）、延伸三个基本反应步骤构成，B正确；C、荧光的出现是荧光探针水解导致的，荧光探针将首先与模板DNA的相应区段结合（靶分子），随着DNA复制延伸至荧光探针部位，导致荧光探针的水解进而产生荧光，显然每个反应单位有无荧光取决于是否含有靶分子，C正确；D、PCR技术通过高温解旋，不需要解旋酶，所以每个反应单位中都需要加入耐高温DNA聚合酶，D错误。故选D。
21.答案：（1）固体、鉴定；碳源、氮源、无机盐、维生素；前
（2）0.1mL水样中细菌数目较少，经培养后平板菌落数可能达不到30个
（3）滤膜消毒；无菌水；倒置；呈深紫色且带有金属光泽
（4）能；1mL水样中细菌总数约为99个，没有超过100个；1000mL水样中大肠杆菌为2个，没有超过3个
解析：（1）从物理状态来看，该培养基含有琼脂等凝固剂，属于固体培养基；从用途来看，培养基中含有伊红—亚甲基蓝，用于鉴别是否存在大肠杆菌，所以该培养基属于鉴定培养基；蛋白胨富含有机氮化合物，也含有一些维生素和糖类，故其中蛋白胨可以为细菌生长提供碳源、氮源、无机盐、维生素等营养物质；培养基灭菌前需要调节培养基的pH，一般培养基高温高压对其pH值影响不大，且灭菌后调pH培养基易受污染。
（2）经稀释涂布平板法获得的平板上菌落数要求是30～300，图1中3个平板上所长菌落数均位于30～300之间，适合计数，检测时使用的接种量为1mL而不是0.1mL，其理由是0.1mL水样中细菌数目较少，经培养后平板菌落数可能达不到30个，故在接种时吸取1mL样液。
（3）“将滤膜放入装有蒸馏水的烧杯中，加热煮沸15min，共煮沸三次”煮沸能起到消毒的作用，故步骤①的目的是对滤膜进行消毒；实验需要避免杂菌的污染，故冲洗漏斗壁时需要再向漏斗内加等量的无菌水，继续抽滤；将平板倒置，放入培养箱中培养，将平板倒置，既有利于培养基表面水分更好地挥发，又能防止冷凝水滴到培养基上造成杂菌污染；若存在大肠杆菌，伊红—亚甲基蓝用于检测大肠杆菌，选取呈深紫色且带有金属光泽的菌落进行计数。
（4）（2）中3个平板的菌落数的平均值为99，取样体积为1mL，（3）中平板菌落数为2，取样体积为1000mL，综合（2）（3）测定结果，以及题干“我国卫生部门规定饮用水标准是1mL自来水中细菌总数不超过100个（37°C培养24h），1000mL自来水中大肠杆菌菌落数不能超过3个（37°C培养48h）”可知所测桶装纯净水的微生物含量能达到饮用水卫生标准。
22.答案：（1）细胞膜的流动性和植物细胞的全能性；保持原生质体的完整性
（2）将获取的原生质体分别放置在不同浓度的R-6G或IOA溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况
（3）细胞分裂素和生长素的浓度和比例
（4）高Ca2+—高pH融合；35%；该浓度下异源融合率最高，同时PEG浓度相对较低对细胞的毒害作用较小
解析：（1）由图可知，培育抗鼓胀病的新型苜蓿采用的是植物体细胞杂交技术，该生物技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。将植物细胞的细胞壁去除即可获得原生质体。培养原生质体时，为了防止原生质体吸水涨破，需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是保持原生质体的完整性。
（2）在实验前需通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，由于需要获得具体的浓度，因此需要将获取的原生质体分别放置在不同浓度的R-6G或IOA溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况，根据再生情况获得各自的临界值。
（3）步骤②是脱分化，步骤③是再分化。步骤②到步骤③需要更换新的培养基，原因之一是培养基中细胞分裂素和生长素的浓度和比例是影响植物细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素。
（4）①诱导原生质体融合的化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH融合法等。
②已知PEG浓度较高时对细胞具有毒害作用。分析柱形图可知：当PEG浓度为35%时，异源融合率最高，同时PEG浓度相对较低，对细胞的毒害作用较小，因此诱导苜蓿与百脉根原生质体融合的最佳PEG浓度为35%。
23.答案：(1)动物胚胎细胞分化程度低,表现全能性相对容易
(2)显微操作法;B;不变
(3)使克隆后代的核遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞
(4)①5只(与克隆猴生理状态相同的)未敲除BMALl基因的猴个体
②克隆猴的生物钟紊乱可能与BMAL1基因有关
解析：(1)与动物体细胞相比,动物胚胎细胞分化程度低,表现全能性相对容易。
(2)图中克隆猴的细胞核来自B猴,细胞质来自A猴,因此克隆猴的性状与B猴的性状相似度最高,其染色体数目与母体相同。
(3)在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞中前，必须先去掉受体卵母细胞的细胞核使克隆后代的核遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞。
(4)从表中可知,对照组应该选择数量相同(5只)的BMAL1基因未敲除的猴个体。实验结果显示,敲除BMAL1基因的克隆猴个体的生物钟紊乱,说明克隆猴的生物钟紊乱可能与BMAL1基因有关。
24.答案：（1）维持培养液pH的相对稳定
（2）染色体的着丝粒排列在赤道板上；卵母细胞的采集、精子的获取
（3）桑葚胚
（4）促进
（5）5；该浓度下核成熟卵子数占卵母细胞数的比例最高，囊胚数占培养卵数的比例最高
解析：（1）动物细胞培养时，细胞培养箱中加5%CO2的作用是维持培养液pH的相对稳定。
（2）根据题意，卵母细胞培养到减数分裂Ⅱ中期时视为成熟，而减数分裂Ⅱ中期的染色体行为特征是染色体的着丝粒排列在赤道板上。哺乳动物的体外受精过程主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等主要步骤。
（3）早期胚胎发育过程为：受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚。
（4）分析表格可知，与亚麻酸溶液浓度为0 μmol·L-1的组别（对照组）相比，亚麻酸溶液浓度为200 μmol·L-1时，核成熟卵子数占卵母细胞数的比例较高，囊胚数占培养卵数的比例较高，说明此浓度的亚麻酸溶液对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起促进作用。
（5）分析表格可知，亚麻酸溶液浓度为50 μmol·L-1时，核成熟卵子数占卵母细胞数的比例最高，囊胚数占培养卵数的比例最高，因此50 μmol·L-1的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都最有利。
25.答案：（1）主动运输
（2）限制酶和DNA连接酶；便于目的基因的筛选和鉴定
（3）避免目的基因在自然界中扩散造成基因污染（合理即可）
（4）转基因柳树地上部、地下部的生长状况均好于野生型；茎叶
（5）柳树具有发达的根系和高大的树冠，更适应污染矿区等不良环境，同时可充分吸收土壤中的Cd，木材也方便运输、利用（合理即可）
解析：（1）YCF1基因表达的蛋白质能够富集周围环境中的镉离子，表明该转运蛋白转运镉离子的方向是从低浓度到高浓度，运输方式属于主动运输。
（2）构建重组载体所需的两种酶是限制酶和DNA连接酶；重组基因表达载体中必须含有标记基因，以便于筛选出含有重组DNA的受体细胞。
（3）获得转YCF1基因的不育杨树、柳树等不育株可以防止目的基因通过花粉传播给近缘植物，避免造成基因污染。
（4）据图1可知，野生型与转基因植株相比，转基因柳树地上部、地下部及整株干重均大于野生型，表明转基因植株在Cd污染的环境中更具生存优势，具有更强的耐性；据图2可知，转基因植株的单位干重所含的Cd量明显大于野生型，说明转基因植株具有更强的富集Cd的能力，可通过不断收集并处理植株的可转移再生部位（茎叶），不断吸收土壤中的Cd，以降低污染。
（5）柳树属于乔木，相较于草本植物，乔木的根系、树冠更发达，生长周期更长，更有利于吸收土壤中的Cd，木材也方便运输、利用。

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