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2024-2025学年高二生物学人教版（2019）下学期期中考试测试卷B卷
一、选择题：本题共20小题，每小题2分，共40分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1.《尚书》中有“若作酒醴，尔惟曲蘖”的记载。《齐民要术》记载：“世人云：‘米过酒甜’，此乃不解法候。酒冷沸止，米有不消者，便是曲势尽。”下列叙述错误的是( )
A.“醴”是甜酒的意思，酒曲中含酵母菌菌种
B.“曲势尽”的原因是发酵过程中pH升高或营养物质不足
C.“酒冷沸止”是指酵母菌代谢产热和释放CO2的过程逐渐停止
D.家庭酿酒过程中发酵液不经灭菌处理，杂菌也难以正常繁殖
2.《中馈录》中记载：“泡盐菜法，定要覆水坛。此坛有一外沿如暖帽式，四周内可盛水；坛口上覆一盖，浸于水中使空气不得入内，则所泡之菜不得坏矣。泡菜之水，用花椒和盐煮沸，加烧酒少许…如有霉花，加烧酒少许…”下列说法不正确的是( )
A.“坛口上覆一盖，浸于水中”有利于保持坛内的无氧环境
B.“泡菜之水，用花椒和盐煮沸”的目的之一是消毒杀菌
C.泡菜制作过程用到的乳酸菌属于厌氧菌，发酵会产生乳酸
D.坛盖边沿水槽有气泡冒出是乳酸菌大量繁殖所致
3.在进行微生物计数时，下列情况会造成统计结果偏大的是( )
A.利用显微镜计数法计数时，滴加菌液时产生了气泡
B.利用显微镜计数法计数时，滴加菌液后再盖盖玻片
C.使用稀释涂布平板法计数时，涂布器经火焰灼烧后直接进行涂布
D.使用稀释涂布平板法计数时，平板上有不少菌落是两个细胞连在一起形成的
4.脲酶催化尿素水解，产生的氨可作为细菌的氮源。脲酶被去除镍后失去活性。下列叙述错误的是( )
A.镍是组成脲酶的重要元素
B.镍能提高尿素水解反应的活化能
C.产脲酶细菌可在以NH4Cl为唯一氮源的培养基生长繁殖
D.以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌
5.在微生物的培养过程中，离不开培养基的配制和灭菌技术。下列相关叙述正确的是( )
A.使用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时,需在100kPa、121℃条件下维持15~30min
B.不同微生物生长所需的pH不同，配制完成的培养基在灭菌后按需要调节相应的pH
C.为防止杂菌污染，灭菌后的培养基应立即倒入培养皿中并盖上皿盖，待冷却后倒置
D.进行接种工作前，需用紫外线对接种室、接种箱、工作台及人的双手进行消毒处理
6.下列关于传统发酵技术的说法中，正确的是( )
A.图1能表示在果酒的制作过程中酵母菌产生酒精速率（V1）随时间的变化
B.图2能表示在果醋的制作过程中溶氧量对醋酸菌产生醋酸速率（V2）的影响
C.图3能表示在利用毛霉制作泡菜的过程中乳酸含量的变化趋势
D.图4能表示在密闭锥形瓶中,加入含酵母菌的葡萄糖溶液，溶液的pH随时间的变化
7.黑曲霉是一种丝状真菌，食品工业以红薯粉为原料经黑曲霉发酵获得柠檬酸，如图为生产柠檬酸的简要流程图。下列叙述正确的是( )
A.黑曲霉与生产果醋时所用主要微生物细胞结构相同，代谢类型也相同
B.将菌种接种至A培养基时，每次划线前涂布器都需要灼烧灭菌
C.发酵罐C中的发酵过程是发酵工程的中心环节，该环节直接影响产品的产量和质量
D.黑曲霉发酵适宜温度较高，所以发酵罐C需要不断加热将温度维持在35℃
8.运用植物悬浮细胞培养技术，可以大量生产药物成分，如图是获得植物悬浮细胞的操作流程。相关叙述错误的是( )
A.X为愈伤组织,过程①涉及的主要原理是植物细胞具有全能性
B.过程②通过振荡来分散细胞，是因为愈伤组织细胞壁薄、排列疏松
C.过程③中探究的培养条件可以是接种量、pH、温度等
D.悬浮细胞培养生产药物成分可缓解药用植物资源紧缺
9.束顶病毒是引起香蕉束顶病的病原体。农业上，常用感病植株的茎尖作外植体以获得脱毒苗，科研人员进行了相关实验，结果如表所示。下列叙述错误的是( )
处理方法 茎尖数量 成活茎尖数 成活率（%） 脱毒茎尖数 脱毒率（%）
未低温保存 32 30 93.755 8 26.67
超低温保存 60 33 55 20 60.61
A.感病植株的茎尖病毒极少，甚至无病毒，可被用作外植体
B.表中的茎尖脱毒率可采用接种病毒的方法来进行检测
C.由表可知，超低温保存茎尖可提高其脱毒率，但会降低成活率
D.脱毒苗培养过程中要适时调整生长素与细胞分裂素的用量比值
10.动物细胞培养是动物细胞工程的基础，科研人员将数量相等的动物肝脏肿瘤细胞和肝脏正常细胞分别置于相同培养液中培养。下列有关叙述正确的是( )
A.培养动物细胞一般使用固体培养基
B.细胞培养液中通常含有维生素、激素、糖类等多种能源物质
C.定期更换培养液可以防止代谢产物的积累对细胞造成危害
D.培养液和所有培养用具要进行消毒处理
11.T细胞表面的受体(CTLA-4)可阻断T细胞的抗原呈递，从而抑制细胞毒性T细胞增殖。抗CTLA-4的抗体可解除细胞毒性T细胞增殖的抑制，从而提高机体的免疫力。科研人员通过动物细胞融合技术制备抗CTLA-4单克隆抗体的过程如图所示，只考虑细胞的两两融合。下列叙述错误的是( )
A.多次给小鼠注射CTLA-4后获取已免疫的B细胞
B.过程①通过PEG或灭活病毒诱导可得到多种细胞
C.第一次筛选的过程中需要进行抗体检测
D.培养杂交瘤细胞的培养基通常需要加入血清
12.由于人类的活动,郊狼的生存受到了严重威胁，野生郊狼的数量不断减少，濒临灭绝。科研人员利用如图所示流程培育出郊狼乙，该培育郊狼乙的流程中涉及多项生物技术。下列相关叙述正确的是( )
A.获取郊狼供体细胞的过程无需在无菌无毒环境中进行
B.该流程可得出郊狼体细胞的细胞核具有全能性
C.将胚胎植入代孕家犬后，通常代孕家犬需要进行同期发情处理
D.郊狼乙的遗传物质与代孕家犬不同,与郊狼甲的完全相同
13.中国科学家首次利用嵌合胚胎成功构建了高比例胚胎干细胞的活嵌合体猴，部分过程如图所示。下列说法错误的是( )
A.胚胎干细胞具有发育成各种细胞的能力
B.嵌合囊胚需发育至原肠胚期才可进行胚胎移植
C.培养胚胎干细胞的培养液中应添加一定的抗生素
D.嵌合体猴不同体细胞中的遗传信息可能不同
14.某科研团队通过孤雌生殖技术、核移植技术获得幼猪的过程如图所示。下列说法错误的是( )
A.获得孤雌生殖猪的过程没有精子参与,但其仍是二倍体生物
B.可用促性腺激素处理良种母猪,使其超数排卵
C.胚胎移植前,需对供体和受体进行免疫检查,避免发生免疫排斥反应
D.核移植中的“去核”是指去除卵母细胞中纺锤体一染色体复合物
15.Sau3AI和BamHI的识别序列及切割位点如表所示。某DNA分子经Sau3AⅠ和BamHⅠ分别切割以后，可形成4个和2个大小不同的片段。下列有关叙述正确的是( )
限制酶 识别序列和切割位点
BamHI G↓GATCC
Sau3AI ↓GATC
A.两种限制酶切割后形成的黏性末端不相同
B.能被Sau3AI识别的DNA位点均能被BamHI识别
C.该DNA分子上有2个BamHⅠ不能识别但Sau3AⅠ能识别的酶切位点
D.该DNA分子经Sau3AⅠ和BamHⅠ共同切割后可形成6个片段
16.巢式PCR是指先后用外内引物扩增目的基因的方法。其原理为：先以比目的基因大的DNA片段为模板，用外引物（F1，R1）进行扩增，获得大量含目的基因的中间产物，再以扩增后的中间产物为模板，用内引物（F2，R2）扩增目的基因，如图所示。下列说法错误的是( )
A.PCR反应缓冲液中Mg2+的作用是激活DNA聚合酶
B.与传统PCR相比，巢式PCR能有效提高产物中目的基因的比例
C.由于和两套引物都互补的靶序列较少，该技术可大大提高扩增的特异性
D.如果两套引物一起加入反应体系中，外引物的复性温度应显著低于内引物
17.下图为转基因抗冻植株培育过程的示意图（其中ampr为抗氨苄青霉素基因）。下列叙述错误的是( )
A.过程④中可利用目的基因作为探针对植株进行筛选
B.可同时选用限制酶PstI、SmaI对含目的基因的DNA进行剪切
C.过程②可采用农杆菌转化法将含目的基因的表达载体导入受体细胞
D.质粒上的抗性基因有利于筛选含目的基因的细胞和促进目的基因的表达
18.植物生物反应器主要以整株植物、植物组织或植物悬浮细胞为加工场所,生产药物蛋白。叶绿体遗传转化体系是近年发展起来的一种新的植物生物反应器。叶绿体转化是以同源重组原理将外源目的基因整合到目标叶绿体基因组中的一种方式,是一种高表达、安全性极高的遗传转化方法。下列相关叙述错误的是( )
A.植物生物反应器涉及的现代生物学技术是基因工程和植物细胞工程
B.构建的基因表达载体中含有叶绿体特异启动子,使得目的基因只能在叶绿体中表达
C.植物叶绿体表达体系可以防止转基因作物的目的基因通过花粉在自然界中扩散
D.把目的基因导入叶绿体DNA中,将来产生的配子一定含有此目的基因
19.CDR移植就是将鼠源单克隆抗体(简称鼠源性单抗)可变区中的互补决定区(CDR)序列取代人源抗体相应CDR序列,重组构成嵌合抗体。下列叙述错误的是( )
A.制备鼠源性单抗时使用的灭活病毒可保证细胞膜分子排布不发生改变
B.制备鼠源性单抗过程需进行两次筛选,第二次筛选的原理是抗原—抗体杂交
C.CDR移植中构建基因表达载体的过程需要DNA连接酶和限制酶
D.嵌合抗体既有鼠源性单抗的特异性与亲和力,又能最大限度地降低免疫原性
20.通过设计引物，运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变。下图为基因工程中获取突变基因的过程，其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对，但不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中引物1和引物2的5'端分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。下列有关叙述正确的是( )
A.在该PCR反应体系中还需要加入4种游离核苷酸、解旋酶、耐高温的DNA聚合酶等
B.第2轮PCR，引物1能与图中②结合并且形成两条链等长的突变基因
C.引物中设计两种限制酶识别位点有利于目的基因定向插入载体
D.第3轮PCR结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA分子占1/2
二、非选择题：本题共5小题，共60分。
21.（12分）某实验小组以洋葱组织为实验材料，进行DNA的粗提取与鉴定的实验，实验主要过程如图所示，回答下列问题：
（1）对于不同的实验材料，提取DNA的方法可能________（填“相同”或“不同”）。步骤一中需加入一定量的________，并充分研磨。
（2）步骤二将洋葱研磨液过滤到烧杯中，在________冰箱中放置几分钟后再取上清液；也可直接将研磨液倒入离心管中，离心5 min，再取上清液。
（3）步骤三中需向滤液中加入体积分数为95%的预冷酒精，目的是________________，依据的原理是________________________。得到粗提取的DNA后，可利用DNA与________在沸水浴条件下发生显色反应，来对其进行鉴定。
22.（12分）鼠李糖脂是一种生物表面活性剂，是微生物在代谢过程中产生的次级代谢产物。鼠李糖脂与驱油剂混合使用具有驱油效果好、见效时间长的优，点。鼠李糖脂也可应用于生活污水处理和景观水治理中。科研人员欲从某污水厂底泥中筛选能够产生鼠李糖脂的细菌，纯化鼠李糖脂生产菌，进行了如下实验：
1.菌株的筛选：
①取该污水厂底泥6份，分别编号后保存于4℃冰箱，然后进行富集培养。
②取富集液，用无菌水进行10-4、10-6和10-8倍的梯度稀释后，涂布于含有质量分数1%植物油的平板培养基上.，于30℃条件下培养36h。挑取有______（填“较大”或“较小”）排油圈的单菌落，在固体平板上得到初筛菌株。
2.菌株培养条件的优化：
将5L初筛菌株接种于装有100mL培养基的三角烧瓶中，分别于16℃、27℃、37℃和42℃摇床中培养，并绘制该菌的温度生长曲线，如图1所示。
3.菌株发酵液中产物的提取：在适宜条件下培养菌株后，除去菌体，收集发酵液，并进一步萃取获得黄色黏稠状物质，真空冷冻干燥至恒质量。
4.菌株发酵产物的检测：在培养皿中加入20mL蒸馏水和3mL液体石蜡，待液体石蜡覆盖蒸馏水表面后，加入质量浓度为0.04gL菌株发酵产物水溶液100μL与相同浓度、相同体积的化学表面活性剂标准品，于室温下测量排油圈的直径，结果如图2所示。
请回答下列问题：
（1）菌株筛选过程中空白处应填______。除上述分离细菌的方法外，还可采用______法分离纯化该细菌，二者中______还可以用于细菌的计数。
（2）由图1可知：适合该菌株生长的温度范围为______℃。若想探究培养该菌株最适温度，进一步的操作是______。
（3）由提取产物的过程分析，鼠李糖脂属于______（填“胞内物质”或“分泌物”）。
（4）由图2可知，______，这可为研究鼠李糖脂生产菌提供一定的依据。
23.（12分）如图为利用某种低产耐酸植物甲（4N）和高产不耐酸植物乙（2N），培育高产耐酸植物丙的过程。请回答下列问题。
（1）植物丙的体细胞中有_____个染色体组，为筛选出耐酸的植物丙'，过程③所用的固体培养基需__________。
（2）通过单倍体育种技术，也可以利用上述低产耐酸植物甲（4N）和高产不耐酸植物乙（2N）培育出高产耐酸的新品种丁。如表是相关实验步骤，请根据题意完成表格。
实验目的 步骤要点
收集花粉 ①将甲和乙进行______后培养获得植株，收集其花粉
获得可增殖分化的细胞 ②利用______技术中的脱分化过程，获得______
诱导单倍体幼苗的形成 ③通过改变培养基中的______，诱导分化
获得染色体加倍的植株 ④用______处理单倍体幼苗
获得新品种丁 筛选符合要求的植株，收获其所结种子
24.（12分）某研究小组利用水稻细胞培育能产生HPV（人乳头瘤病毒）-L1蛋白的水稻胚乳细胞生物反应器，为获得HPV-L1蛋白提供一种新的高效、低廉的途径，用于制备HPV疫苗。其基本流程包括表达载体的构建、农杆菌转化、水稻细胞转化、转基因植株的筛选等步骤，最终获得能产生含HPV-L1蛋白胚乳细胞的转基因水稻。回答下列问题：
（1）目的基因的获取：根据研究目标，科研人员可以从____获取HPV-L1基因，或者也可以分析HPV-L1蛋白的氨基酸序列，经______得到目的基因。随后，在合成基因的两端分别引入MlyI和XhoI酶切位点，目的基因两端设置不同酶切位点的目的是________。PCR是获取HPV-L1基因的一种方法，PCR反应体系设计的两种引物，在引物间和引物内的碱基都不能互补，其原因是________。
（2）农杆菌转化：科研人员构建了如图所示的表达载体，将其与经_______处理成感受态的农杆菌细胞混合，并控制温度进行______培养，完成转化和细胞复苏，随后将菌液涂布在含______的培养基上培养，挑取菌落进行PCR鉴定后再扩大培养待用。
（3）水稻细胞转化：取水稻种子脱壳后经_______处理，置于诱导培养基中发生_____过程形成愈伤组织。挑取生长良好的愈伤组织加入（2）得到的菌液中共培养，完成转化过程。为提高转化效率，下列措施中可以采用的是哪几项？_____（A.定时摇动培养液B.缩短培养时间C.控制菌液中农杆菌浓度D.降低培养温度）。
（4）转基因水稻的筛选：将转化处理后的水稻愈伤组织放在含抗生素的培养基中除菌处理后，转移至含有_的固体选择培养基中培养，并诱导出______，继续培养得到转基因水稻。
（5）为了检测是否成功导入HPV-L1基因并培育出能产生HPV-L1蛋白的水稻胚乳细胞生物反应器，请完善以下实验思路：
I.分别提取纯化________的总DNA和蛋白质，经处理后分别固定在硝酸纤维素膜上。
Ⅱ.让待测DNA与HPV-L1基因探针发生______，放射自显影检测以确定目的基因已经成功导入。
Ⅲ.让待测蛋白质与_______，放射自显影检测以确定目的基因已经成功表达。
25.（12分）恶性肿瘤往往先向淋巴结初始转移形成淋巴结转移瘤,再经淋巴结实现远端转移。科学家开展实验探索肿瘤初始转移的机制以及淋巴结转移对远端转移的影响。
(1)正常情况下,原位瘤细胞转移至淋巴结会激活NK细胞和细胞毒性T细胞,前者非特异性杀伤瘤细胞,后者则在辅助T细胞分泌的_____________的作用下,经_____________过程产生新的细胞毒性T细胞裂解瘤细胞。
(2)将原位瘤细胞FO和淋巴结转移的瘤细胞LN6等量接种于同一健康小鼠体内进行研究,过程如图1。

①已知FO和LN6的增殖能力无显著差异,图1结果说明_____________向淋巴结转移的能力更强。
②为排除红绿荧光蛋白可能存在的检测差异干扰实验结果,需增设一组实验,大致思路为____________。
(3)为探究原位瘤细胞初始转移的机制,科研人员又开展了如下实验:
①将FO中编码MHC-1分子关键蛋白的基因敲除,再将其接种于小鼠体内,发现其向淋巴结转移的能力降低,但去除该小鼠的NK细胞后其转移能力恢复。说明NK细胞通过识别_____________(高表达/低表达)的MHC-1杀伤瘤细胞。
②PD-L1可与T细胞表面的特定蛋白结合,抑制其杀伤作用。进一步研究表明原位瘤细胞通过调节MHC-1分子和PD-L1的表达量,抑制NK和T细胞的杀伤作用,以增强转移能力。请在表格中填写“高”或“低”,将支持上述结论的实验结果补充完整______。
肿瘤细胞的类型 MHC-1分子表达量 PD-L1分子表达量
来自于正常小鼠的淋巴结转移瘤 A C
来自于T细胞缺失小鼠的淋巴结转移瘤 B 低
来自于T和NK细胞缺失小鼠的淋巴结转移瘤 低 D
答案以及解析
1.答案：B
解析：利用酵母菌发酵产生酒精的原理酿酒，“醴”是甜酒的意思，酒曲中含酵母菌菌种，A正确：微生物无氧呼吸产生的CO2导致瓮中液体pH降低，“曲势尽”的原因可能是发酵过程pH降低或发酵液中酒精含量升高抑制酵母菌发酵，B错误；“酒冷沸止”说明酵母菌代谢产热和释放CO2逐渐停止，C正确；在缺氧、呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都无法适应这一环境而受到抑制，因此家庭酿酒过程中发酵液不经灭菌处理，杂菌也难以正常繁殖，D正确。
2.答案：D
解析：“坛口上覆一盖，浸于水中”目的是阻止空气进入坛内，有利于保持坛内的无氧环境，A正确；“泡菜之水，用花椒和盐煮沸”的目的包括改善泡菜味道，减少水中的溶氧量，消毒杀菌以防止杂菌污染，B正确；泡菜的制作离不开乳酸菌，乳酸菌的代谢类型是异养厌氧型，发酵过程中，乳酸菌无氧呼吸会产生乳酸，C正确；坛盖边沿有气泡冒出是因为杂菌污染，产生气体，乳酸菌进行无氧呼吸，不产生气体，D错误。
3.答案：B
解析：利用显微镜计数法计数时，滴加菌液时产生了气泡，会导致实际所测的菌液体积减少，造成统计结果偏小，A错误；利用显微镜计数法计数时，若先滴加菌液，再盖盖玻片，则盖玻片可能由于菌液表面的张力作用而不能严密地盖到计数板上，从而导致计数室内的菌液体积增多，造成统计结果偏大，B正确；使用稀释涂布平板法计数时，涂布器经火焰灼烧后直接进行涂布会杀灭部分微生物，导致统计结果偏小，C错误；使用稀释涂布平板法计数时，平板上有不少菌落是两个细胞连在一起形成的，统计时会按一个菌落计数，造成统计结果偏小，D错误。
4.答案：B
解析：A、根据题意，脲酶被去除镍后失去活性，说明镍是组成脲酶的重要元素，A正确；B、脲酶催化尿素水解的机理为降低化学反应所需的活化能，镍作为脲酶的重要组成元素，应该与降低尿素水解反应的活化能有关，B错误； C、产脲酶细菌可利用NH4Cl里的氮源进行代谢活动，因此产脲酶细菌可在以NH4Cl为唯一氮源的培养基生长繁殖，C正确;D、产脲酶细菌能利用脲酶催化尿素分解产生NH3， NH3可作为细菌生长的氮源，不能产脲酶的细菌则无法分解尿素获得氮源，因此以尿素为唯一氨源的培养基可用于筛选产脲酶细菌，D正确。
5.答案：A
解析：对培养基灭菌效果较好的方法是高压蒸汽灭菌,该方法需将培养基置于高压蒸汽灭菌锅内,在100kPa、121℃条件下维持15~30min,A正确;不同微生物生长所需的PH不同,配制完成的培养基需在灭菌之前根据培养的微生物种类调节相应的PH,B错误;刚灭菌的培养基需冷却到50℃左右才能倒平板,C错误;工作人员的双手不能用紫外线进行消毒,D错误。
6.答案：D
解析：果酒制作初期，酵母菌进行有氧呼吸，并随O2的减少，无氧呼吸逐渐增强，产生酒精速率逐渐加快，发酵后期由于产物积累，影响酒精发酵，所以曲线应是先上升再下降，A错误；在果醋的制作过程中，一定范围内，溶氧量越多，醋酸菌产生乙酸的速率（V2）越快，B错误；参与泡菜制作的微生物是乳酸菌，且泡菜制作过程中乳酸含量不会大幅下降，C错误；在一个普通的密闭锥形瓶中，加入含酵母菌的葡萄糖溶液，一定时间内随时间的延长，溶液的pH逐渐降低，最后趋于稳定，D正确。
7.答案：C
解析：黑曲霉是真菌，是真核生物，发酵果醋的微生物醋酸杆菌是细菌，属于原核生物，A错误；将菌种接种至A培养基时，平板划线法的接种工具接种环在使用前需在火焰上灼烧灭菌，B错误；C、发酵工程的中心环节是发酵过程，C正确；发酵时，黑曲霉代谢会产生大量热量，通常需要进行降温处理，D错误。
8.答案：A
解析：A、据题图可知，过程①是外植体经脱分化形成X（愈伤组织）的过程，不能体现植物细胞的全能性，A错误；
B、愈伤组织是松散的薄壁细胞团，故过程②可通过振荡来分散细胞，B正确；
C、接种量、pH、温度等均是植物细胞培养过程中需控制的条件，需通过实验探究来确定其适宜的范围，C正确；
D、利用悬浮细胞培养技术生产药物成分不会破坏植物资源，可缓解药用植物资源紧缺，D正确。
故选A。
9.答案：B
解析：茎尖、根尖病毒极少，甚至无病毒，一般选取茎尖、根尖作为外植体，A正确；为检测脱毒苗的质量，可采用抗原—抗体杂交的方法检测病毒的蛋白质，也可采用核酸分子杂交的方法检测病毒的基因，B错误；由题表可知，超低温保存的茎尖脱毒率远高于未低温保存的，而成活率远低于末低温保存的，C正确；在植物组织培养过程中生长素与细胞分裂素的用量比值不同，诱导结果不同，比值低时有利于生芽，比值高时有利于生根，D正确。
10.答案：C
解析：动物细胞培养一般使用液体培养基，有利于细胞的大量增殖，A错误。维生素既不是细胞的结构物质，也不能提供能量，只是对细胞的生长和代谢起到调节作用：激素是信息分子，对细胞的生长只具有调节作用，不是能源物质，B错误。动物细胞培养过程中，随着细胞增殖，细胞代谢产物积累，故定期更换培养液可以防止代谢产物的积累对细胞造成危害，C正确。培养液和所有培养用具要进行灭菌处理，消毒不能起到彻底杀灭所有微生物的作用，D错误。
11.答案：C
解析：
12.答案：B
解析：获取郊狼供体细胞的过程需用到动物细胞培养,而动物细胞培养需要无菌、无毒的环境,A错误;由郊狼甲通过体细胞核移植技术克隆出郊狼乙,可得出郊狼体细胞的细胞核具有全能性,B正确；将胚胎植入代孕家犬前,需对其进行同期发情处理,C错误；图中是供体细胞与去核卵母细胞融合,故郊狼乙的细胞质遗传物质来自家犬和郊狼甲,D错误。
13.答案：B
解析：胚胎干细胞具有全能性,能够发育成各种细胞, A正确;应选桑葚胚或囊胚进行胚胎移植,B错误;为防止杂菌滋生,培养胚胎干细胞的培养液中应添加一定的抗生素,C正确；结合图示及题干信息可知,嵌合体猴是由嵌合囊胚发育而成的,嵌合囊胚中含有两种类型的细胞,这两种细胞的遗传信息可能不同,导致嵌合体猴不同体细胞中的遗传信息有差异,D正确。
14.答案：C
解析：由题图可知,孤雌生殖技术通过阻止猪次级卵母细胞释放极体,激活孤雌生殖从而获得早期胚胎,再利用胚胎移植技术将其移植到受体子宫,最后妊振得到幼猪,该过程中没有精子参与,但获得的幼猪仍是二倍体生物,A正确；超数排卵是指应用外源促性腺激素,诱发卵巢排出比自然情况下更多的成熟卵子,即可用促性腺激素处理良种母猪,使其超数排卵,B正确；受体对来自供体的胚胎基本上不会产生免疫排斥反应,即胚胎移植前,不需对供体和受体进行免疫检查,C错误；次级卵母细胞中的“核”其实是纺锤体一染色体复合物,核移植中的“去核”是指去除该复合物,D正确。
15.答案：C
解析：A、BamHI和Sau3AI两种限制酶切割后形成的黏性末端均为GATC，A错误；
B、分析表格可知，BamHI的识别序列为GGATCC，Sau3AI的识别序列为GATC，由此可知，能被BamHⅠ识别的序列中包含了被Sau3AI识别的序列，所以能被BamHⅠ识别的序列也一定能被Sau3AI识别，但能被Sau3AI识别的DNA位点不一定能被BamHI识别，B错误；
C、分析题意，某DNA分子经Sau3AⅠ和BamHⅠ分别切割以后，可形成4个和2个大小不同的片段，由此可知，该DNA分子上有2个BamHⅠ不能识别但Sau3AⅠ能识别的酶切位点，C正确；
D、该DNA分子上有4个Sau3AI的酶切位点，有2个BamHI的酶切位点，但是BamHI识别序列中包含Sau3AI的识别序列，所以同时用两种酶共同处理，不会形成6个大小不同的DNA片段，D错误。
故选C。
16.答案：D
解析：A、PCR技术的原理是细胞内DNA复制，需要Mg2+、模板、原料、能量、酶、引物等条件，PCR反应缓冲液中Mg2+的作用是激活DNA聚合酶，A正确；B、与传统PCR相比，巢式PCR用外引物扩增后获得含有目的基因的中间产物，再以扩增后的中间产物为模板，能有效提高产物中目的基因的比例，B正确；C、由于和两套引物同时都互补的靶序列较少，该技术可大大提高扩增的特异性，将需要的目的基因扩增出来，C正确；D、如果两套引物一起加入反应体系中，外引物复性温度要明显高于内引物，使外引物先进行反应，D错误。故选：D。
17.答案：D
解析：氨苄青霉素抗性基因是标记基因其作用是选出含有目的基因的细胞,D错误。
18.答案：D
解析：A、植物生物反应器首先需要用基因工程技术将目的基因导入植物细胞,其次需要采用植物细胞工程技术将转基因植物细胞培育成转基因植株或转基因植物组织或转基因植物悬浮细胞,因此涉及基因工程和细胞工程技术。A正确;
B、要使得目的基因只能在叶绿体中表达,则构建的基因表达载体中要含有叶绿体特异性启动子,B正确;
C、由于受精卵中的细胞质几乎全部来自卵细胞,因此植物叶绿体表达体系可以防止转基因作物的目的基因通过花粉在自然界中扩散,C正确;
D、把目的基因导入叶绿体DNA中,叶绿体DNA存在于细胞质中,在配子产生过程中并不遵循遗传定律,所以将来产生的配子中不一定含有该目的基因,D错误。
19.答案：A
解析：制备鼠源性单抗时使用的灭活病毒可使细胞膜分子排布发生改变,进而促进细胞融合,A错误;制备鼠源性单抗过程需进行两次筛选,第一次筛选的原理是利用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选的原理是抗原—抗体杂交,获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞,B正确；CDR移植中构建基因表达载体的过程需要DNA连接酶和限制酶,其中限制酶可以识别特定的核苷酸序列,并在特定部位切割开,DNA连接酶可以将两个DNA片段连接起来,C正确；嵌合抗体既有鼠源性单抗的特异性与亲和力,又能最大限度地降低免疫原性,减弱免疫排斥,降低单抗的副作用,D正确。
20.答案：C
解析：A、PCR反应体系中还需要加入4种游离的核苷酸、耐高温的DNA聚合酶，直接利用高温解旋，不需要加解旋酶，A错误；B、第2轮PCR，引物1能与图中②结合并且形成两条链不等长的突变基因，其中②较长，B错误；C、引物中设计两种限制酶识别位点，可以配合载体的限制酶识别位点，帮助目的基因定向定点插入运载体，避免发生自身环化，C正确；D、第3轮PCR结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA有2个，而子代DNA有23=8个，故含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/4，D错误。故选C。
21.答案：（1）不同；研磨液
（2）4 ℃
（3）初步分离DNA与蛋白质；DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精；二苯胺
解析：（1）进行DNA的粗提取和鉴定时，对于不同的实验材料，提取DNA的方法可能稍有不同。步骤一中需加入一定量的研磨液。
（2）步骤二可将洋葱研磨液过滤到烧杯中，在4 ℃冰箱中放置几分钟后再取上清液；也可直接将研磨液倒入离心管中，离心5 min，再取上清液。
（3）由于DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，故步骤三中向滤液中加入体积分数为95%的预冷酒精的目的是初步分离DNA与蛋白质。得到粗提取的DNA后，可利用DNA与二苯胺在沸水浴条件下发生显色（蓝色）反应，来对其进行鉴定。
22.答案：（1）较大；平板划线稀释涂布平板法
（2）16~37；在16~37℃之间，进一步缩小温度梯度，重复上述培养条件的优化实验
（3）分泌物
（4）菌株发酵产物的排油圈大于化学表面活性剂标准品（或菌株发酵产物比化学表面活性剂标准品具有更好的排油效果）
解析：（1）由题干可知，鼠李糖脂可用于驱油，因此筛选产鼠李糖脂细菌时，产生排油圈越大的细菌越符合条件。分离纯化细菌的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法还可以用于细菌的计数。
（2）由图1可知，在16~37℃之间，该菌株可以生长，当达到42℃时，该菌株几乎不生长。若想探究最适浓度，应在16~37℃之间，进一步缩小温度梯度，重复上述培养条件的优化实验，细菌生长最快的温度即该细菌的适宜温度。
（3）菌株发酵产物提取过程中，先除去菌体，再收集发酵液，说明鼠李糖脂已经分泌到细胞外，因此属于分泌物。
（4）出图2可知，菌株发酵产物和化学表面活性剂标准品的排油圈直径分别为5.6cm和3.7cm，表明菌株发酵产物比化学表面活性剂标准品具有更好的排油效果。
23.答案：（1）6；将pH调整为酸性
（2）①植物体细胞杂交；②花药离体培养（或植物组织培养）；愈伤组织；③生长素和细胞分裂素的比例；④一定浓度的秋水仙素（或低温）
解析：（1）植物丙是植物甲和乙通过体细胞杂交技术形成的杂种植株，为异源多倍体，根据题意可知，低产耐酸植物甲（4N）体细胞中有4个染色体组，高产不耐酸植物乙（2N）体细胞中有2个染色体组，因此植物丙的体细胞中有6个染色体组。植物丙有耐酸的特性，因此过程③所用的固体培养基需将pH调整为酸性。
（2）利用低产耐酸植物甲（4N）和高产不耐酸植物乙（2N）培育出高产耐酸的新品种丁，需要先将两种植物的优良性状集中到一个个体上。①由于两种植物存在生殖隔离，因此不能进行有性杂交，故可将甲和乙细胞通过植物体细胞杂交技术获得植株，收集其花粉；②再利用花药离体培养技术培养花粉，经过脱分化过程形成愈伤组织；③由于植物组织培养的不同阶段需要的生长素和细胞分裂素的比例不同，因此通过改变培养基中的生长素和细胞分裂素的比例，诱导分化；④最后用一定浓度的秋水仙素（或低温）处理单倍体幼苗，并通过筛选获得符合要求的植株丁。
24.答案：（1）基因文库；化学方法合成；使目的基因定向插入，减少自身环化，以便其正确转录和表达；防止引物内或引物间结合形成双链，导致引物与DNA模板链结合效率降低
（2）氯化钙；液体悬浮；卡那霉素
（3）消毒；脱分化；AC
（4）潮霉素；根和芽分生组织（或胚状体）
（5）I.胚乳细胞;Ⅱ.核酸分子杂交;Ⅲ.放射性HPV-L1蛋白抗体发生抗原-抗体杂交（反应）
解析：（1）科研人员可以从基因文库中获取HPV-L1基因，也可以利用化学合成方法根据HPV-LI蛋白的氨基酸序列进行合成；在合成基因的两端分别引入MlyI和XhoI酶切位点，设置不同酶切位点，形成不同的末端，使目的基因定向插入，减少自身环化，以便其正确转录和表达；PRR过程的引物间和引物内的碱基都不能互补，其原因是防止引物内或引物间结合形成双链，导致引物与DNA模板链结合效率降低。
（2）农杆菌细胞需要经过氯化钙溶液处理成感受态，并且放入液体培养基进行液体悬浮培养，完成转化和细胞复苏；由于T-DNA上潮霉素抗性基因的启动子属于真核细胞表达系统，故农杆菌菌液应涂布在含卡那霉素的培养基上培养，挑取菌落进行PCR鉴定后再扩大培养待用。
（3）植物组织培养应防止杂菌的污染，故水稻种子脱壳后经消毒处理，置于诱导培养基中发生脱分化过程形成愈伤组织；为提高转化率，可定时摇动培养液，使受体细胞与农杆菌充分接触，还可以通过控制菌液中农杆菌浓度来实现，AC正确，BD错误。
（4）将转化处理后的水稻愈伤组织放在含抗生素的培养基中除菌处理后转移至含有潮霉素的固体选择培养基中培养，因为潮霉素抗性基因可在真核细胞中表达；将愈伤组织诱导形成根和芽分生组织或胚状体，继续培养得到转基因水稻。
（5）I.为了检测是否成功导入HPV-L1基因并培育出能产生HPV-L1蛋白的水稻胚乳细胞生物反应器，需将胚乳细胞的总DNA和蛋白质提取出来。Ⅱ.让待测DNA与HPV-L1基因探针发生核酸分子杂交，放射自显影检测以确定目的基因已经成功导入。Ⅲ.让待测蛋白质与放射性HPV-L1蛋白抗体发生抗原-抗体杂交，放射自显影检测以确定目的基因已经成功表达。
25.答案：(1)细胞因子;分裂(增殖)分化
(2)LN6;对F0转入红色荧光蛋白基因,对LN6转入绿色荧光蛋白基因,重复上述实验。
(3)低表达
肿瘤细胞的类型 MHC-1分子表达量 PD-L1分子表达量
来自于正常小鼠的淋巴结转移瘤 高 高
来自于T细胞缺失小鼠的淋巴结转移瘤 高 低(给出)
来自于T和NK细胞缺失小鼠的淋巴结转移瘤 低(给出) 低
解析：(1)辅助性T细胞能分泌细胞因子,加强免疫效应,细胞毒性T细胞在辅助性T细胞分泌的细胞因子的作用下,经分裂(增殖)分化过程产生新的细胞毒性T细胞裂解瘤细胞。
(2)①由图1可知,每组小鼠的红色荧光细胞的百分比都比绿色荧光蛋白细胞的百分比高,FO和LN6的增殖能力无显著差异,图1结果说明LN6向淋巴结转移的能力更强。
②为排除红绿荧光蛋白可能存在的检测差异干扰实验结果,需增设一组实验,大致思路为对FO转入红色荧光蛋白基因,对LN6转入绿色荧光蛋白基因,重复上述实验。
(3)①FO中编码MHC-1分子关键蛋白的基因敲除,MHC-1分子关键蛋白减少,发现其向淋巴结转移的能力降低,但去除该小鼠的NK细胞后其转移能力恢复。说明NK细胞通过识别低表达的MHC-1杀伤瘤细胞。
②NK细胞通过识别低表达的MHC-1杀伤瘤细胞。所以来自于T细胞缺失小鼠的淋巴结转移瘤和来自于正常小鼠的淋巴结转移瘤中MHC-1分子表达量高,从而抑制NK细胞的杀伤作用,PD-L1可与T细胞表面的特定蛋白结合,抑制其杀伤作用,所以来自于T细胞缺失小鼠的淋巴结转移瘤和来自于T和NK细胞缺失小鼠的淋巴结转移瘤中PD-L1分子表达量,来自于正常小鼠的淋巴结转移瘤中PD-L1分子表达量高。表格如下所示。
肿瘤细胞的类型 MHC-1分子表达量 PD-L1分子表达量
来自于正常小鼠的淋巴结转移瘤 高 高
来自于T细胞缺失小鼠的淋巴结转移瘤 高 低(给出)
来自于T和NK细胞缺失小鼠的淋巴结转移瘤 低(给出) 低

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