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2024-2025学年高二生物学苏教版（2019）下学期期中考试测试卷A卷
一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1.如表所示为某微生物培养基的配方，下列有关叙述正确的是( )
成分 NaNO3 K2HPO4 琼脂 葡萄糖
含量 3g 1g 15g 30g
成分 抗生素 MgSO4·7H2O FeSO4 H2O
含量 0.1万单位 0.5g 0.01g 定容至1000mL
A.根据物理特征划分，该培养基属于液体培养基
B.微生物无法在该培养基表面形成肉眼可见的菌落
C.根据培养基的配方可知，该培养基培养的微生物的同化作用类型是异养型
D.固体培养基中加入少量水就可制成液体培养基
2.“细菌喜荤，霉菌喜素”的意思是在配制培养基时( )
A.要考虑不同微生物的代谢特性
B.要考虑不同微生物的结构特性
C.要调节培养基的pH
D.要调节培养基的渗透压
3.梯度平板法是筛选细菌抗药性突变株的一种简单且有效的方法，其操作要点：先在培养皿中倒入不含抗生素的培养基，立即倾斜培养皿直到凝固为一个斜面，再将培养皿平放，继续倒入含一定浓度抗生素的培养基，直至形成平面。培养基内的抗生素浓度呈线性梯度，一端浓度高，另一端浓度低。将诱变处理的浓菌液涂在梯度平板上进行培养及筛选，筛选出的抗药性突变株再进行抗药性的测定。下列有关叙述错误的是( )
A.抗药性突变株产生的主要诱因是培养基中的抗生素
B.配制含有抗生素的培养基时，药物要与培养基混合均匀
C.培养后，在高浓度抗生素一端出现的菌落为抗药性较强的抗药性突变株菌落
D.未经诱变处理的该细菌群体中可能会有能生长在含抗生素的梯度平板上的个体
4.如图是探究果酒与果醋发酵的装置示意图。下列相关叙述错误的是( )
A.改变通入气体种类，可以研究呼吸作用类型对发酵的影响
B.果酒发酵中期通入氮气，酵母菌将只进行无氧呼吸
C.果醋的发酵周期与实验设定的温度密切相关
D.气体入口与气体出口可以交换使用
5.糯米营养价值较高，可加工成米酒、米醋等产品。酿酒、酿醋基本过程如图所示，其中①过程所用的纠，纤维素分解菌是经筛选后得到的优良菌种。下列有关叙述正确的是( )
A.酿酒和酿醋都是利用原核生物进行发酵
B.筛选①过程所用的优良菌种时，需将菌种接种到含刚果红的马铃薯培养基培养
C.酿酒和酿醋两个过程中,发酵液pH的变化趋势是前者上升，后者下降
D.利用纤维素分解菌和秸秆进行酿酒有助于对糯稻的充分利用
6.如图是“白菜—廿蓝”杂种植株的培育过程。下列说法不正确的是( )
A.去壁过程中需用纤维素酶和果胶酶处理获得原生质体，溶液的渗透压可略大于细胞液渗透压
B.杂种细胞培养的不同阶段需用不同浓度的细胞分裂素和生长素
C.最终得到的植株相对于白菜、甘蓝，发生了染色体数目变异，因此不具有可育性
D.与传统的有性杂交相比，细胞融合技术的优越性在于实现了远缘杂交
7.铁皮石斛是一种名贵中药，野生资源十分稀少，其繁殖主要通过植物组织培养实现。下列叙述正确的是( )
A.为保持石斛的优良遗传性状，应选用花粉进行组织培养
B.为获得无菌培养物，外植体要消毒处理后才可接种培养
C.利用组织培养技术培育脱毒苗，能获得抗病毒的新品种
D.用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗不会出现变异
8.如图表示植物细胞工程中利用愈伤组织培育植株或得到细胞产物的过程。下列叙述正确的是( )
A.利用花粉通过②⑤过程获得植株B的育种方法称为单倍体育种
B.植物的快速繁殖技术和脱毒苗的获得均需通过①④过程
C.可通过⑧过程获得人参皂苷，该过程体现了植物细胞的全能性
D.③⑦过程可用于突变体的获取，原因是诱变剂使细胞发生了定向突变
9.以下有关动物细胞培养所需的条件，错误的是( )
A.合成培养基中，通常还要加入血清等天然成分
B.哺乳动物细胞培养的温度在36.5℃左右
C.气体环境由95%O2和5%CO2组成,CO2用于维持培养液pH
D.为了防止杂菌污染，可在培养液中添加抗生素
10.如图是科研人员将药物与单克隆抗体连接形成的抗体－药物偶联物 (ADC) 的示意图，它由抗体、接头和小分子药物三部分组成，能实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。例如用于治疗乳腺癌的Kadcyla是由阿多曲妥珠单抗和药物美坦新偶联的ADC。下列叙述错误的是( )
A.单克隆抗体由杂交瘤细胞以胞吐方式释放体现了细胞膜的流动性
B.药物美坦新识别并杀伤乳腺癌细胞体现了抗原－抗体的特异性结合
C.ADC中接头稳定性偏低会导致药物分子容易脱落对正常细胞造成损伤
D.ADC设计需综合考虑抗体选择、药物分子大小及其细胞毒性等问题
11.下列关于胚胎工程的叙述，错误的是( )
A.培养“试管动物”过程离不开有性生殖
B.胚胎工程技术分为胚胎移植和胚胎分割技术
C.胚胎分割可以用分割针分割囊胚
D.胚胎移植时,不需要对受体进行免疫抑制处理
12.体细胞核移植技术最初是用玻璃微型吸管将供体细胞的细胞核吸出，再注入去核卵母细胞内，后来发展出了另外一种方法，即直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内，然后用病毒介导或者电脉冲等方式使两个细胞融合,下列有关叙述错误的是( )
A.与最初的方法相比,第二种方法操作简便，对卵母细胞和细胞核损伤较小
B.在最初的方法中，也需要利用某种方式诱导去核卵母细胞与体细胞核的融合
C.在第二种方法中，两个细胞融合形成的重构胚在体外可发育成克隆动物
D.用上述两种方法得到的克隆动物都不只具备一个亲本的遗传特性
13.下列关于基因工程技术的叙述，正确的是( )
①切割质粒的限制性内切核酸酶均特异性地识别6个核苷酸序列
②PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应
③载体质粒通常用抗生素合成基因作为标记基因
④抗虫基因即使成功插入植物细胞染色体DNA上也未必能正常表达
A.有一项 B.有两项 C.有三项 D.有四项
14.研究表明,美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用.为研究巨噬细胞的作用机制,科研人员利用大肠杆菌制备了巨噬细胞表面标志蛋白(CD14蛋白),如图为含CD14基因的DNA片段及载体的相关示意图。下列有关叙述正确的是( )
A.若B链为转录的模板链,则构建基因表达载体时B链的5'端与启动子相连
B.PCR扩增CD14基因时,DNA聚合酶催化引物的5'端与加入的脱氧核苷酸相连形成磷酸二酯键
C.用Xho I和Sal I双酶切CD14基因和载体,经DNA连接酶连接后,可用XhoI和Sal I对CD14基因的连接方向进行鉴定
D.将重组DNA分子导人受体细胞时,可用Mg2+处理大肠杆菌,使其处于感受态
15.我国科学家构建了B型血友病（由编码某种凝血因子的F基因发生碱基的替换导致）模型鼠，尝试对模型鼠进行基因治疗，并测定凝血时间，结果如图所示。下列分析错误的是( )
A.A组作为空白对照组，应选择健康鼠
B.基因治疗模型鼠完全恢复凝血能力
C.治疗中可能运用了基因编辑技术
D.设置B型血友病模型鼠组可判断基因治疗效果
二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
16.啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，发酵工程的主要流程如图所示，其中糖化主要是将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子。下列关于啤酒发酵的叙述正确的是( )
A.用赤霉素处理大麦,可使大麦无须发芽就能产生α-淀粉酶
B.破碎有利于淀粉进入酵母菌，提升发酵速率
C.通过转基因技术减少啤酒双乙酰的生成可缩短发酵周期
D.主发酵阶段完成酵母菌繁殖，后发酵阶段进行代谢产物的生成
17.三白草和鱼腥草二者因疗效相近且具有叠加效应常被中医用作“药对”。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到杂种细胞,并实现有效成分的工厂化生产，操作如图所示。下列有关叙述正确的是( )
A.①过程可利用盐酸和酒精混合（1:1）配制的解离液来完成
B.②过程通常在略高渗溶液中采用PEG融合法诱导原生质体融合
C.杂种细胞形成愈伤组织的过程中，其特有功能丧失，但结构不变
D.④过程愈伤组织细胞培养过程中使用的是液体培养基，且需要湿热灭菌
18.科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14的单克隆抗体，其流程如图所示。下列说法正确的是( )
A.步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射的是巨噬细胞和杂交瘤细胞
B.通过步骤②获得的融合细胞和SP2/0细胞都具有无限增殖的特点
C.步骤③的目的是筛选出能产生抗体的杂交瘤细胞
D.步骤⑤表示将步骤④获得的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔中
19.下列有关受精作用及胚胎发育的说法，错误的是( )
A.防止多精入卵的两道屏障是核膜反应和透明带反应
B.卵裂期胚胎中细胞数目在不断增加，有机物总量不断减少
C.囊胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化”
D.受精完成的标志是卵细胞膜和透明带之间是否出现两个极体
20.下列关于DNA片段的电泳鉴定实验的说法，错误的是( )
A.等琼脂糖凝固后插入梳子，形成加样孔
B.用微量移液器吸取不同的DNA样品时，需要更换枪头
C.电泳结束后，需用显微镜观察形成的电泳条带
D.电泳过程中既要使用核酸染色剂，也要使用电泳指示剂，它们的观察方法、作用一致
二、非选择题：本题共5小题，共55分。
21.（11分）奶酪是中国西北的蒙古族、哈萨克族等游牧民族的传统食品，在内蒙古称为奶豆腐，如图是天然奶酪的简要制作过程，其中凝乳是指凝固的牛奶，酸性物质一般都可以使牛奶变性凝固。某牛奶厂从自然发酵的凝乳中筛选具有优良发酵性能的微生物菌种。请据此回答问题：
（1）由奶酪制作过程可推测，儿童食用天然奶酪比牛奶更容易消化吸收，请分析原因：________。加热压缩过程可以去除凝乳中多余的________，有利于奶酪的硬化和保存。
（2）为了保证奶酪的品质和营养，牛奶在发酵之前应该进行消毒处理，请选择合理的处理方法___。
A.100℃处理30min
B.62~65℃处理30min
C.80~90℃处理30s~1min
（3）这一株优良菌株分离纯化常采用的接种方法是________法和________法。纯化培养时通常需要将接种培养基与未接种培养基同时培养，原因是________。纯化培养后，需将菌种临时保藏，可采取的保藏方法是________________。
（4）最终筛选出的菌种还需要进行产酸能力的测定，已知固体培养基会因为添加碳酸钙而呈乳白色，碳酸钙会被酸性物质反应形成透明圈，则此种培养基从功能上看属于________培养基。
22.（11分）猕猴桃因貌似猕猴而得名，是一种品质鲜嫩、营养丰富的美味水果。我国研究人员利用“中华猕猴桃”和“美味猕猴桃”两个不同种培育出了更加优良的品种，其过程如图所示。请分析并回答下列问题：
（1）因“中华猕猴桃”和“美味猕猴桃”之间存在__________，所以用有性杂交方法很难得到可育后代，上述①～⑥培育优良品种H的过程所应用的技术是________________、_____________技术。
（2）图中B、D是__________；G是__________；②过程需使用___________________酶进行处理。
（3）过程③使用的化学法包括：__________融合法和高Ca2+—高pH融合法等。
（4）⑤⑥过程分别称为___________________。该过程中，植物激素中__________是关键激素。
（5）过程③得到的两两融合的细胞有__________种，因此需要进行筛选。已知用X射线处理会使染色体受影响而导致细胞失去分裂能力；用碘乙酰胺处理会使细胞内的酶失活而抑制生长。为了能筛选到杂种细胞F，若在①过程对“中华猕猴桃”用X射线处理，需对“美味猕猴桃”用____________处理，以便最终能获得优良杂种植株H。
23.（11分）如图为研发治疗乳腺癌的某种单克降抗体的实验流程。请分析回答：
（1）对A组鼠注射______，是为了可以分离获取细胞1______。
（2）过程①经______诱导融合，需用______培养基进行筛选获得细胞2______。
（3）细胞2还需要经过______和______，方可筛选出______的杂交癌细胞（细胞3）。
（4）物质甲可以通过对小鼠B腹腔注射来大量获得，也可以通过______获得。
（5）C组鼠为已注射乳腺癌肿块的实验模型鼠，用于检测物质甲的治疗效果。需将C组鼠随机分成两组，一组的处理如图，另一组的处理为______，才能检测疗效。
24.（11分）研究发现，酶A能催化半纤维素降解，使棉纤维长度变短。为培育转基因长绒棉花品种，科研人员构建了酶A基因反义基因表达载体（目的基因反向连接到载体中），过程如图所示,其中Sma I、Not I、Hind Ⅲ和BamH I为酶切位点（四种限制酶切割后黏性末端不同）。回答下列问题:
（1）大量获取酶A基因的常用方法为_______，该方法需要特定的引物,引物的作用是________。若酶A基因两侧的碱基序列如下，请从① ④中选择获取酶A基因的引物组合________。
5'-GAAGTCCTCT.......ACGACGAACC-3'
3'-CTTCAGGAGA......TGCTGC1TGG-5'
①5'-GAAGTCCTCT-3'
②5'-GGTTCGTCGT-3'
③5'-AGAGGACTTC-3'
④5'-ACGACGAACC-3'
（2）图中构建基因表达载体，使用的限制酶为____________时，构建出的基因表达载体既有正义基因表达载体（目的基因正向连接到载体中）也有反义基因表达载体，原因是_____。可通过限制酶切割所产生的DNA片段长度区分上述两种载体，所选限制酶应为_________。
(3)利用农杆菌转化法将构建的反义基因表达载体导入棉花细胞,先将反义基因表达载体导入_________,该过程利用的原理是农杆菌Ti质粒上的______可转移到被侵染的细胞中。反义基因表达载体导入受体细胞后,通过抑制_______过程来影响酶A基因的表达,进而影响棉绒的长度。
25.（11分）铝毒是酸性土壤中限制作物生长的主要因素之一。某科研团队研究发现，铝胁迫可诱导铝耐受型大豆根尖SGF14a基因的表达。为了验证SGF14a基因在植物应答铝胁迫中的作用，研究人员构建含SGF14a基因的表达载体，将其转化到烟草细胞，进而获得转基因烟草，并对转基因烟草进行铝耐受性的研究，具体操作流程如图1所示。回答下列问题：
（1）提取铝耐受型大豆根尖细胞中的RNA，在______的催化下合成cDNA，最终获得SGF14a基因。根据SGF14a基因的核苷酸序列设计相应的引物进行PCR扩增，设计引物时，常在两条引物中加入不同的限制酶酶切位点，其主要目的是__________。已知图1中大豆SGF14a基因的A位点和B位点分别是起始密码子和终止密码子对应的位置，选用的引物组合应为______。
（2）将表达载体导入经处理的农杆菌后，筛选出含SGF14a基因的农杆菌，然后将其与烟草细胞共培养，携带SGF14a基因的_____整合到烟草细胞的染色体DNA上，进而获得转基因烟草细胞。
（3）将农杆菌转化后的烟草细胞诱导形成的愈伤组织先放在含_____（填抗生素）的生芽培养基中培养，待生芽后，转移到生根培养基中培养，以获得烟草植株，生芽培养基和生根培养基中相关植物激素含量的区别是____。
（4）为了探究转基因烟草对铝胁迫的耐受性，用50μmol/LA1Cl3处理含有SGF14a基因的两个转基因烟草株系（S1和S2）和野生型烟草（WT）的无菌苗的根，24h后分析烟草根相对生长量，结果显示转基因烟草根的相对生长量比野生型烟草的高30%~40%，请结合图2分析其原因可能是______。
（5）为验证转基因烟草植株的抗铝毒能力较野生型烟草植株强，实验小组设计实验进行个体生物学水平的鉴定：将______栽培到酸性土壤中，其他条件均相同且适宜，培养适宜时间后，观察______。
答案以及解析
1.答案：C
解析：题表所示的培养基配方中含有琼脂，琼脂为凝固剂，因此该培养基不属于液体培养基，固体培养基加水不能制成液体培养基，A、D错误；微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落，B错误；该培养基中的葡萄糖可作为碳源，NaNO3可作为氮源，故其培养的微生物的同化作用类型是异养型，C正确。
2.答案：A
解析：“细菌喜荤”、“霉菌喜素”的意思是在配制培养基时要考虑不同微生物的代谢特性，如细菌喜荤说明细菌的代谢类型是异养型，需要的有机营养物质应该取自动物性营养，如蛋白胨等；霉菌喜素的意思是在其培养基中一般要加入植物性营养成分，如豆芽汁等。
故选A。
3.答案：A
解析：培养基中的抗生素起筛选作用，不是抗药性突变株产生的诱因，A错误；
若抗生素与培养基混合不均匀，则可能无法准确筛选出抗药性突变株，故配制含有抗生素的培养基时，药物应与培养基混合均匀，B正确；
不具有抗药性的细菌会被抗生素杀死，培养后在高浓度抗生素一端出现的菌落为抗药性突变株菌落，该菌落中的细菌抗药性较强，C正确；
未经诱变处理的该细菌群体中可能也有具有抗药性的个体，其可以在含抗生素的梯度平板上生长，D正确。
4.答案：D
解析：由题图可知，若通入氧气，可研究有氧呼吸对发酵的影响；若不通入气体或通入氮气，可研究无氧呼吸对发酵的影响，A正确。发酵中期装置中的氧气被消耗完，而酵母菌无法利用氮气，将只进行无氧呼吸，B正确。温度通过影响相关酶的活性来影响微生物呼吸速率，进而影响发酵周期，C正确。通入气体的管子需插入液面以下，而排出气体的管子需在液面以上，故两者不能交换使用，D错误。
5.答案：D
解析：酒时利用的菌种是酵母菌，该菌为真核生物；酿醋时利用的菌种是醋酸菌，该菌为原核生物，A错误。筛选纤维素分解菌时，需将菌种接种到富含纤维素的培养基中培养，B错误。酿酒时，酵母菌通过呼吸作用产生的CO2溶于发酵液中，使发酵液酸性增加，发酵液的pH逐渐降低，C错误。
6.答案：C
解析：在植物体细胞去壁过程中，需要将植物组织置于含纤维素酶和果胶酶、略大于细胞液渗透压的溶液中，以使细胞处于微弱的质壁分离状态，有利于得到完整的原生质体，A正确；杂种细胞经组织培养形成杂种植株的过程中，在不同阶段需用不同浓度的细胞分裂素和生长素培养，B正确；最终得到的植株相对于白菜、甘蓝，发生了染色体数目变异，属于异源四倍体，细胞中有同源染色体，是可育的，C错误；传统的有性杂交不能突破生殖隔离，需在同一物种的雌雄个体之间进行，与传统的有性杂交相比，细胞融合技术的优越性在于能够克服远缘杂交不亲和的障碍，D正确。
7.答案：B
解析：产生花粉的过程属于减数分裂过程，该过程中会发生基因分离，选用花粉进行组织培养，不一定能保持铁皮石斛的优良遗传性状，应选用体细胞进行植物组织培养来保持石斛的优良遗传性状，A错误；为获得无菌培养物，外植体要经过表面消毒处理后进行培养，所用的培养基也必须彻底灭菌，B正确；利用植物组织培养技术培育的脱毒苗可能不带病毒，但不是抗病毒的新品种，C错误；用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗可能出现变异，如在愈伤组织的培养过程中可能发生基因突变等，D错误。
8.答案：B
解析：A、利用花粉通过②⑤⑥（染色体数目加倍）过程获得植株B的育种方法称为单倍体育种，A错误；
B、植物的快速繁殖技术和脱毒苗的获得均需通过①④过程获得植株，均是植物细胞工程的应用，B正确；
C、细胞全能性是指发育为完整个体或分化为各种细胞的潜能，⑧过程得到的是细胞产物，未体现植物细胞的全能性，C错误；
D、③⑦过程可用于突变体的获取，原因是细胞发生了基因突变，但不是诱变剂导致的，且突变是不定向的，D错误。
故选B。
9.答案：C
解析：用于动物细胞培养的合成培养基需加入糖类、氨基酸、无机盐、维生素等,还需加入血清等天然成分,A正确;乳动物细胞培养的温度多以(36.5±0.5)℃为宜,B正确:动物细胞培养需要一定的气体环境(95%空气和5%的CO2), CO2能维持培养液的pH,C错误;动物细胞培养时需要添加抗生素以防止杂菌污染,D正确。
10.答案：B
解析：单克隆抗体由杂交瘤细胞合成并分泌，分泌过程为胞吐过程，体现了细胞膜的流动性，A正确；药物美坦新并不具有识别作用，单克隆抗体具有识别作用，B错误；ADC中接头的作用是连接药物分子，其稳定性偏低可能会导致药物分子脱落，进而与正常细胞接触，造成正常细胞的损伤，C正确；ADC由药物与单克隆抗体连接形成，其设计需考虑抗体选择，选择能与靶细胞(或器官)结合的抗体，还需考虑药物分子大小及其细胞毒性，使药物分子能被顺利带到靶细胞处发挥作用，D正确。
11.答案：B
解析：培养“试管动物”需要体外受精、胚胎体外培养、胚胎移植等技术,体外受精过程属于有性生殖,A正确;胚胎工程技术包括胚胎移植、体外受精、胚胎体外培养、胚胎分割、胚胎干细胞培养等多项技术,B错误；胚胎分割的基本过程是将发育良好的桑葚胚或囊胚移入含有操作液的培养皿中,在显微镜下用分割针或分割刀分割,C正确；受体子宫对外来胚胎基本不发生免疫排斥反应,胚胎移植前不需要对受体进行免疫抑制处理,D正确。
12.答案：C
解析：直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内,然后用病毒介导或者电脉冲等方式使两个细胞融合,避免了吸取细胞核和注入去核卵母细胞内等操作,故与最初的方法相比,第二种方法操作简便,对卵母细胞和细胞核损伤较小,A正确。在最初的方法中,需要利用某种方式诱导体细胞核与去核卵母细胞的融合,B正确。利用核移植技术获得的重构胚需要移植给受体,才能发育成克隆动物,C错误。最初的方法获得的重组细胞中存在供体细胞细胞核中的遗传物质和卵母细胞细胞质中的遗传物质;第二种方法获得的重组细胞中存在供体细胞中的遗传物质和卵母细胞细胞质中的遗传物质,故用这两种方法得到的克隆动物都不只具备一个亲本的遗传特性,D正确。
13.答案：A
解析：大多数限制性内切核酸酶识别6个核苷酸序列，但也有少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成，①错误；PCR反应中，先高温是为了使氢键断开，DNA双链解开，接下来降低温度是为了使引物结合到解开
的两条DNA链上，再升高温度是为了使耐高温的DNA聚合酶发挥作用，②错误；载体质粒通常用抗生素抗性基因作为标记基因，而非抗生素合成基因，③错误；抗虫基因即使成功插入植物细胞染色体上也未必能正常表达，还需要进行检测和鉴定，④正确。综上分析，正确的只有④。
14.答案：C
解析：启动子的作用是启动转录,子链的延伸方向是从5'端到3'端,因此应是模板链B链的3'端与启动子相连, A错误。PCR扩增CD14基因时,引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸,B错误。若是同种限制酶切割产生的末端相连,重组DNA中有限制酶Xho I和Sal I的识别序列,则Xho I和Sal I能分别识别各自的特异性序列,并将CD14基因切下;若是不同种限制酶切割产生的末端相连,则重组DNA中没有Xho I和Sal I能识别的序列,不能将CD14基因切下,因此可用限制酶Xho I和Sal I对CD14基因的连接方向进行鉴定,C正确。将重组DNA分子导入受体细胞时,常用Ca2+处理大肠杆菌细胞,使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的感受态,D错误。
15.答案：B
解析：A、基于实验的对照原则，A组作为空白对照组，应选择健康鼠，A正确；
B、与B型血友病模型鼠相比，基因治疗模型鼠的凝血时间显著缩短，但略长于健康鼠的凝血时间，因此基因治疗模型鼠能部分恢复凝血能力，B错误；
C、B型血友病是由编码某种凝血因子的F基因发生碱基的替换导致的，因此可采用基因编辑技术对B型血友病模型鼠的异常F基因进行定点“修改”，C正确；
D、设置B型血友病模型鼠组与基因治疗模型鼠组对照，可判断基因治疗效果，D正确。
故选B。
16.答案：AC
解析：用赤霉素处理大麦，可诱导α-淀粉酶相关基因的表达，促进α-淀粉酶的合成，进而使大麦种子无须发芽就能产生α-淀粉酶，A正确；淀粉不能进入酵母菌细胞内，破碎有利于增加淀粉与酶的接触面积，促进糖化过程，B错误；转基因技术已被用来减少啤酒酵母双乙酰的生成，缩短啤酒的发酵周期，属于转基因技术在微生物领域的应用，C正确；酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成，D错误。
17.答案：BD
解析：植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此①过程，即获取三白草和鱼腥草的原生质体过程要利用纤维素酶和果胶酶水解细胞壁，盐酸和酒精混合（1:1）配制的解离液会杀死细胞，A错误；②过程通常在等渗或略高渗常白溶液中进行，因为在低渗溶液中，原生质体会吸水涨破，可以采用化学法（PEG融合法）或物理法诱导原生质体融合，B正确；植物细胞的脱分化就是让已分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能，转变为愈伤组织的过程，因此杂种细胞形成愈伤组织的过程中，其特有功能丧失，结构也发生改变，C错误；④过程愈伤组织细胞培养使用的是液体培养基，且需要湿热灭菌，如高压蒸汽灭菌，D正确。
18.答案：CD
解析：根据本实验的目的,步骤①应该是注射CD14的单克隆蛋白(抗原),步骤⑤注射的是能特异性分泌抗CD14的单克隆抗体的杂交瘤细胞,培养一段时间后,可从小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体,A错误、D正确;SP2/0细胞是骨髓瘤细胞,能够无限增殖,通过步骤②获得的融合细胞有SP2/0细胞—SP2/0细胞、SP2/0细胞—B淋巴细胞、B淋巴细胞—B淋巴细胞,不都具有无限增殖的特点,B错误;在步骤③所用的选择培养基上,只有杂交瘤细胞能生长,据此可将杂交瘤细胞筛选出来,C正确。
19.答案：AD
解析：A、防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵细胞膜反应，A错误；B、卵裂期胚胎中细胞数目在不断增加，而有机物的总量因为细胞呼吸消耗而减少，B正确；C、囊胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化”，C正确；D、卵子是否受精的标志是卵细胞膜和透明带之间是否出现两个极体，受精完成的标志是雌雄原核融合，D错误。故选AD。
20.答案：ACD
解析：进行琼脂糖凝胶电泳时，应将温热的琼脂糖溶液迅速倒入模具，并插入合适大小的梳子，以形成加样孔，等凝胶溶液完全凝固，小心拔出梳子，A错误；为保证实验结果的准确性，用微量移液器吸取不同的DNA样品时，需要更换枪头，B正确；电泳结束后，需将凝胶置于紫外灯下进行观察，C错误；电泳过程中既要使用核酸染色剂，也要使用电泳指示剂，它们的观察方法、作用不同，凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长300nm的紫外灯下被检测出来，D错误。
21.答案：（1）由制作过程可知，奶酪制作过程中经过了微生物发酵，将牛奶中蛋白质分解或变性处理，都有利于蛋白质的消化和吸收；水分
（2）BC
（3）平板划线法；稀释涂布平板法；检测培养基的制备是否合格，以保证培养基上的菌落均来自培养液（确定培养基灭菌处理合格，没有杂菌污染）；接种至固体斜面培养基，在合适温度下培养。当菌落长成后，将试管放入4℃条件下培养
（4）鉴别
解析：（1）由制作过程可知，奶酪制作过程中牛奶经过了微生物发酵，将牛奶中蛋白质分解为小分子或变性处理，都有利于蛋白质的消化和吸收，加热压缩过程去除水分，水分减少，奶酪的硬度加大，不利于微生物生长，有利于储存。
（2）煮沸消毒法是在100℃煮沸5~6分钟可以杀死微生物细胞和一部分芽孢，但对于牛奶这些不耐高温的液体，使用巴氏消毒法，在75~90℃中保温15秒，不仅可以杀死牛奶中的微生物，还可以使牛奶的营养成分不被破坏，A错误，BC正确。
故选BC。
（3）为检测培养基的制备是否合格，以保证培养基上的菌落均来自培养液，在纯化培养时通常需要将接种培养基与未接种培养基同时培养：若空白培养基上出现菌种，则证明培养基被污染。菌种临时保存的方法为：接种至固体斜面培养基，在合适温度下培养。当菌落长成后，将试管放入4℃条件下培养。
（4）因CaCO3可与产酸菌产生的酸反应，产酸菌周围的CaCO3与酸反应后产生无色物质，形成透明圈，故可利用此原理利用CaCO3筛选出产酸菌。此种培养基从功能上看属于鉴别培养基。
22.答案：（1）生殖隔离；植物组织培养技术；植物体细胞杂交
（2）原生质体；愈伤组织；纤维素酶和果胶酶
（3）聚乙二醇（PEG）
（4）脱分化、再分化；生长素、细胞分裂素
（5）3；碘乙酰胺
解析：（1）“中华猕猴桃”和“美味猕猴桃”是两个不同种，它们之间存在生殖隔离，通过①~⑥培育优良品种H杂种植株的过程所用的技术是植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术。
（2）图中B、D是去除细胞壁的原生质体，G为愈伤组织；②过程去除了植物细胞壁需使用纤维素酶和果胶酶。
（3）过程③为让两个不同种的原生质体进行融合，其中化学方法除了聚乙二醇（PEG）融合法，还有高Ca2+一高pH融合法等。
（4）过程⑤⑥为植物组织培养，⑤是细胞脱分化形成愈伤组织，⑥愈伤组织再分化发育为植株。在该过程中生长素和细胞分裂素的比例会影响细胞分裂和分化，是培养过程中的关键激素。
（5）过程③将两个不同种的原生质体进行融合，其中包括“中华猕猴桃”自身融合和“美味猕猴桃”自身高融合以及“中华猕猴桃”和“美味猕猴桃”融合的细胞共3种。射线处理会使胞失去分裂能力，碘乙酰胺处理会使细胞内的酶失活而抑制生长，已经对“中华猕猴桃”用X射线处理，需对“美味猕猴桃”用碘乙酰胺处理，它们自身融合的细胞无法生长，只有当两个不同种的原生质体融合才能生长，筛选到杂种细胞F，以便最终能获得优良杂种植株H。
23.答案：（1）特定（乳腺癌细胞）的抗原蛋白；经过免疫的B淋巴细胞
（2）PEG或灭活病毒；特定的选择（HAT）；杂交瘤细胞
（3）克隆化培养；抗体检测；分泌所需抗体
（4）动物细胞体外培养
（5）注射2mL（等量）溶解物质甲的溶剂
解析：（1）分析题意，本过程的目的是制备治疗乳腺癌的某种单克降抗体，根据抗原抗体特异性结合的原理可知，A组鼠应特定（乳腺癌细胞）的抗原蛋白，然后可以获得相应的经过免疫的B淋巴细胞。
（2）由题图信息分析可知，过程①是细胞融合，该过程可用PEG或灭活病毒诱导处理；用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。
（3）杂交瘤细胞，还需要进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得具备既能分泌所需抗体，又能无限增殖特点的细胞。
（4）物质甲可以通过对小鼠B腹腔注射（体内培养）来大量获得，也可以通过动物细胞体外培养，在培养液中获得。
（5）若C组鼠为已注射乳腺癌肿块的实验模型鼠，用于检测物质甲的治疗效果。为了保证实验结果的可靠性，C组鼠应该切除胸腺，进行检测疗效的实验时，需将C组鼠随机分成两组，一组处理如图，另一组处理为注射2mL生理盐水。
24.答案： (1)PCR；使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸；①②
(2)Sma I；使用同一种限制酶切割目的基因和质粒,黏性末端相同,目的基因与载体既可正向连接也可反向连接；Not I
(3)农杆菌；T-DNA；翻译
解析：(1)获取目的基因常用的方法为PCR,PCR中引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸;在引物的作用下,DNA聚合酶从引物的3'端开始延伸DNA链,即DNA的合成方向是从子链的5'端向3'端延伸, PCR过程需要两种引物分别与目的基因两条链的3'端通过碱基互补配对结合,结合图中相关序列可判断应选择的引物组合为①②。
(2)分析图中酶A基因与载体中限制酶的种类可判断构建基因表达载体时应使用限制酶Sma I,由于只使用一种限制酶对酶A基因与载体进行切割,黏性末端相同,酶A基因与载体既可正向连接又可反向连接,因此构建的基因表达载体为正义基因表达载体或反义基因表达载体;结合图示可知,构建的表达载体中含有两个Not I的切割位点,但正义基因表达载体与反义基因表达载体中二者距离不同,即用该限制酶切割后产生的DNA片段长度不同。
(3)利用农杆菌转化法将构建的反义基因表达载体导入棉花细胞,先将反义基因表达载体导入农杆菌,再让农杆菌感染棉花细胞,该过程利用的原理是农杆菌Ti质粒上的T-DNA可转移到被侵染的细胞中;反义基因表达载体表达出的mRNA与酶A基因转录产生的种mRNA互补,形成双链,抑制酶A基因的翻译过程,进而影响棉绒长度。
25.答案：（1）逆转录酶；使SGF14a基因能定向插入到表达载体中，防止反向连接和自身环化；引物1和引物4
（2）T-DNA
（3）卡那霉素；生芽培养中细胞分裂素与生长素的比值较高，生根培养基中细胞分裂素与生长素的比值较低
（4）烟草细胞中SGF14a基因的表达能够增加可溶性蛋白含量，提高烟草对铝胁迫的耐受性
（5）等量的转基因烟草植株和野生型烟草植株；植株的生长情况
解析：（1）提取铝耐受型大豆根尖细胞中的RNA，在逆转录酶的催化下合成cDNA，最终获得SGF14a基因。根据SGF14a基因的核苷酸序列设计相应的引物进行PCR扩增，设计引物时常在两条引物中加入不同的限制酶酶切位点，主要目的是使SGF14a基因能定向插入表达载体，防止反向连接和自身环化。已知图1中大豆SGF4a基因的A位点和B位点分别是起始密码子和终止密码子对应电位置，PCR扩增时要扩增A位点和B位点之间的片段，DNA聚合酶从引物的3'端开始沿着模板链合成新的DNA链，所以选用的引物组合应为引物1和引物4。
（2）将含SGF14a基因的农杆菌与烟草细胞共培养，农杆菌将携带SGF14a基因的①-DNA整合到烟草细胞的染色体DNA上，获得转基因烟草绅胞。
（3）卡那霉素抗性基因在T-DNA片段上，要筛选出含自的基因的植物细胞，应用卡那霉素进行筛选。培养过程中用到了生芽培养基和生根培养基，细胞分裂素与生长素的比值低时促进根的发生，细胞分裂素与生长素的比值高时有利于芽的形成。
（4）根据题意，转基因烟草根相对生长量比野生型烟草的高30%~40%，结合图2分析其原因可能是烟草细胞中SGF14a基因的表达能够增加可溶性蛋白含量，提高烟草对铝胁迫的耐受性。
（5）验证转基因烟草植株的抗铝毒能力较野生型烟草植株强，若进行个体生物学水平的鉴定，可将等量的转基因烟草植株和野生型烟草植株栽培到酸性土壤中，其他条件均相同且适宜，培养适宜时间后，观察植株的生长情

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