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2024-2025学年高二生物学苏教版（2019）下学期期中考试测试卷B卷
一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1.下列关于微生物培养基种类划分的叙述，错误的是( )
A.培养基按其物理性质可以分为液体培养基和固体培养基
B.培养基按其化学成分可以分为天然培养基和合成培养基
C.培养基按其功能用途可以分为鉴别培养基和选择培养基
D.培养基按其营养构成可以分为含水培养基和无水培养基
2.制备各种牛肉膏蛋白胨固体培养基，倒平板的具体描述正确的是( )
①待培养基冷却至40℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板
②将灭过菌的培养皿盖放在桌面上，左手拔出棉塞
③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰
④用左手的拇指和食指打开皿盖
⑤右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖并通过酒精灯火焰
⑥等待平板冷却，将平板倒过来放置，使皿盖在上，皿底在下
A.①③④⑤ B.④⑤⑥ C.①②④⑥ D.③⑤
3.一次性塑料餐盒的成分以聚丙烯［(C3H6)n］为主，在土壤中不易降解，长期使用会污染土壤。为修复被塑料餐盒碎片污染的土壤，按图示过程选育能降解塑料餐盒碎片的细菌。下列叙述错误的是( )
A.若溶液在1号试管的稀释倍数与定容时的相同，则y应为1.8
B.该实验采用稀释涂布平板法进行接种
C.筛选目的菌的培养基应以聚丙烯为唯一氮源
D.利用培养皿上的菌落进行计数，所得数值比实际细菌数少
4.图甲是果酒和果醋发酵的装置图，图乙是果酒和果醋制作过程中发生的物质变化。下列相关叙述中正确的是( )
A.用图甲中的装置制作果酒时，要加入适量的酵母菌，且一直关紧阀门a和阀门b
B.用图甲中的装置制作果醋时，发酵后期阀门a要关闭
C.在缺氧条件下能发生图乙中的①②过程
D.过程③和④都需要O2的参与，且反应场所相同
5.平湖糟蛋是浙江的名特产，有“天下第一蛋”的美誉。平湖糟蛋的制作工艺主要包括：“浸米→蒸饭→配药→发酵→成糟（酒糟）”和“洗蛋→晾蛋→击蛋→落蛋→封坛”等工序。研究发现，平湖糟蛋中的钙、铁等营养物质含量比鲜蛋都要高。下列叙述错误的是( )
A.“洗蛋”能去除蛋壳表面的杂质和微生物，保证发酵中只有单一菌种
B.“封坛”是为了创造密闭环境，能让“配药”中的菌种更有效地进行发酵
C.平湖糟蛋丰富的营养得益于酶的催化和酒糟浸渍后长时间的生化反应
D.“蒸饭”后，要将蒸好的米饭降温，防止“配药”中的菌种被高温伤害
6.运用植物悬浮细胞培养技术，可以大量生产药物成分，如图是获得植物悬浮细胞的操作流程。相关叙述错误的是( )
A.X为愈伤组织,过程①涉及的主要原理是植物细胞具有全能性
B.过程②通过振荡来分散细胞，是因为愈伤组织细胞壁薄、排列疏松
C.过程③中探究的培养条件可以是接种量、pH、温度等
D.悬浮细胞培养生产药物成分可缓解药用植物资源紧缺
7.紫花苜蓿是常用的豆科牧草,但易使家畜患鼓胀病;百脉根富含物质X,X可与紫花苜蓿中特定蛋白结合,防止鼓胀病的发生。为培育抗鼓胀病的紫花苜蓿新品种,我国科学家以紫花苜蓿和百脉根为材料进行了实验,主要流程如图所示。下列叙述正确的是( )
A.①过程为使用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞形成A、B两种原生质层
B.为确保最终得到的F植株为所需的新品种,可对②过程形成的C进行筛选和鉴定
C.③过程中C的高尔基体活动增强,D的形成是植物体细胞杂交完成的标志
D.将细胞培养至E阶段的过程④需进行光照处理
8.胚胎工程的研究对象主要是哺乳动物,重点内容有体外受精、胚胎体外培养等,如图是利用胚胎工程相关技术产生子代的流程示意图。下列叙述错误的是( )
A.对母体进行超数排卵处理后可以从输卵管、子宫中采集卵细胞
B.⑤为胚胎移植技术,是研究哺乳动物胚胎工程的重要环节
C.通过注射适量的外源促性腺激素,可增加排卵数量
D.一般通过对囊胚的内细胞团细胞进行染色体组型检测可判断胚胎的性别
9.科研人员利用核移植技术成功地克隆了高产奶牛。下列关于核移植技术的叙述错误的是( )
A.从卵巢中采集的卵母细胞需体外培养至MⅡ才能用于核移植
B.获取高产奶牛的体细胞后还需进行体外培养，以获得较多体细胞
C.用乙醇处理重构胚的目的是使其完成细胞分裂和发育进程
D.上述克隆奶牛的培育依据的原理是动物细胞具有全能性
10.人的乳腺癌包含HER2（肿瘤细胞表面表达的一种受体，可作为治疗靶点）高表达、低表达等类型。2024年8月，抗体药物偶联物T-DXd已经获得相关认定,被用于治疗乳腺癌。在临床试验中，科学家发现T-DXd对HER2表达水平不同的乳腺癌均表现出非常好的疗效,将疾病进展风险降低了一半。有关说法正确的是( )
A.也可以选择细胞呼吸酶作为抗原,来制作特异性识别肿瘤细胞的单克隆抗体
B.培养杂交瘤细胞时需要加入CO2,目的是调节气体环境，刺激细胞呼吸
C.制备单克隆抗体时利用鉴别培养基可以获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞
D.T-DXd对HER2表达水平不同的乳腺癌均有疗效说明单克隆抗体特异性强、灵敏度高
11.DNA重组技术需要使用多种工具酶，下图为4种限制性内切核酸酶的切割位点示意图。下列叙述正确的是( )
A.限制性内切核酸酶的识别序列只能由6个核苷酸组成
B.Spe Ⅰ和Xba Ⅰ切割的DNA片段可以用T4DNA连接酶连接
C.Sma Ⅰ和EcoR V切割的DNA片段可以用E.coli DNA连接酶连接
D.Spe Ⅰ和Xba Ⅰ切割的DNA片段连接后，仍能被Spe Ⅰ和Xba Ⅰ识别切割
12.DNA分子杂交时，常需要大量的单链DNA探针。不对称PCR是一种常见的单链DNA探针制备方法，其原理是反应体系中加入一对数量不相等的引物。假设在PCR反应的早期10个循环中，扩增产物是双链DNA，当较少的限制性引物耗尽后，数量较多的非限制性引物将引导合成大量目标DNA单链。下列说法正确的是( )
A.若A链为所需的DNA分子探针，则非限制性引物应选用引物Ⅲ
B.进行最初10个循环的目的是为了将限制性引物消耗完，以保证获得大量的单链DNA探针
C.设计较长的限制性引物与较短的非限制性引物，以便于后阶段通过提高温度来控制产物生成量
D.如果体系中原模板DNA的数量为a，共进行25次循环，则最终获得的单链探针数为15×210a
13.如图为构建尚麻抗除草剂基因A重组质粒的技术流程,其中Npt Ⅱ基因编码新霉素磷酸转移酶,该酶作用可赋予生物抗卡那霉素的特性,GUS基因表达产物可催化底物呈蓝色。下列说法错误的是( )
A.构建重组质粒时需要的限制酶有Pst I、Xho I和EcoR I
B.在培养基中添加卡那霉素可初步筛选导入重组质粒的农杆菌
C.用农杆菌转化植物愈伤组织,不能选择呈现蓝色的组织进行培养
D.为进一步改良品种,可将启动子替换为除草剂诱导型启动子
14.如图是利用奶牛乳腺生产血清白蛋白的过程。下列有关叙述错误的是( )
A.将血清白蛋白基因通过显微注射技术直接导入受体细胞
B.图中涉及基因工程、动物细胞培养、核移植、胚胎移植等技术
C.图中选用未受精的卵细胞是因为其具有让细胞核全能性得以表达的环境
D.若要获得同卵双胎或多胎，分割囊胚时需将内细胞团均等分割
15.据报道，在美国佛罗里达大学基因治疗中心接受基因治疗的三名遗传性失明患者都恢复了一定的视力，并且没有严重的副作用。基因治疗是指( )
A.把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，达到治疗疾病的目的
B.对有缺陷的细胞进行修复，从而使其恢复正常，达到治疗疾病的目的
C.运用人工诱变方法，使有基因缺陷的细胞发生基因突变，从而恢复正常，达到治疗疾病的目的
D.运用基因工程技术，把有缺陷的基因切除，达到治疗疾病的目的
二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
16.某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病，其筛选流程及抗性检测如图。下列操作正确的是( )
A.在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内，从感病植株上采集样品
B.将采集的样品充分消毒后，用蒸馏水冲洗，收集冲洗液进行无菌检测
C.将无菌检测合格的样品研磨，经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落
D.判断内生菌的抗性效果需比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑大小
17.通过动物细胞融合技术获得的杂交瘤细胞，可以产生单克隆抗体。在此基础上,科研人员继续进行实验，获得双杂交瘤细胞以产生双特异性抗体，双特异性抗体可以同时结合两种不同的抗原，其制备过程如图所示。图中融合细胞经过多次检测和筛选，才能得到少量能产生双特异性单克隆抗体的单克隆杂交一杂交瘤细胞，可能的原因是( )
A.融合细胞随机丢失部分染色体,缺少与抗体合成有关的基因
B.组成抗体的不同多肽链有多种组合，能够形成的抗体类型较多
C.融合处理时条件不适宜,单克隆杂交瘤细胞和脾脏细胞融合率较低
D.单克隆杂交瘤细胞和B细胞融合后，形成一种融合细胞
18.我国科学家利用体外受精及培养技术成功建立了小鼠（2n=40）单倍体胚胎干细胞系。过如图所示。下列说法正确的是( )
A.该过程运用了体外受精、胚胎培养、胚胎移植等多种生物技术
B.图中“？”处的处理应为将精子放入ATP溶液使其获得能量
C.对早期胚胎进行胚胎分割可获得更多的单倍体胚胎干细胞
D.小鼠单倍体细胞在进行细胞分裂时最多出现40对同源染色体
19.为给工厂化繁殖脱毒甘薯苗提供技术支持，科研人员利用植物组织培养技术研究甘薯茎尖（外植体）大小对诱导分化苗和脱毒苗的影响，结果如表所示，下列相关叙述正确的是( )
茎尖大小 外植 体数/个 分化 苗数/株 脱毒 苗数/株
小于0.3 mm 20 1 1
0.3~0.5 mm 20 10 7
大于0.6 mm 20 13 4
A.为防止细菌污染，应使用体积分数为95%的酒精对外植体消毒
B.不同培养阶段的培养基中激素种类和比例应适时调整
C.可利用病毒的cDNA制作探针对甘薯苗进行病毒检测
D.0.3~0.5 mm大小的茎尖有利于脱毒甘薯苗的培养
20.某科研团队运用CRISPR/Cas9基因编辑技术，蓄意逃避监管，实施了人类胚胎基因编辑活动。该技术的原理是通过设计向导RNA中的识别序列，引导内切核酸酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割（如图所示）。下列有关叙述正确的是( )
A.向导RNA可在RNA聚合酶催化下，以核糖核苷酸为原料合成
B.向导RNA中的识别序列可与目标DNA单链特定区域进行碱基互补配对
C.Cas9蛋白的作用是破坏DNA特定位点脱氧核苷酸之间的氢键
D.该技术由于存在脱靶等风险，可能会带来一系列安全性及伦理问题
二、非选择题：本题共5小题，共55分。
21.（11分）采矿污染和不当使用化肥导致重金属镉（Cd）在土壤中过量积累。利用植物修复技术将土壤中的Cd富集到植物体内，进行后续处理（例如，收集植物组织器官异地妥善储存），可降低土壤中Cd的含量。为提高植物对Cd污染土壤的修复能力，研究者将酵母液泡Cd转运蛋白（YCF1）基因导入受试植物，并检测了相关指标。回答下列问题：
（1）为获取YCF1基因，将酵母细胞的全部DNA提取、切割后与载体连接，导入受体菌的群体中储存，这个群体称为________。
（2）将DNA序列插入Ti质粒构建重组载体时，所需要的两种酶是________。构建的重组基因表达载体中必须含有标记基因，其作用是________。
（3）进行前期研究时，将含有YCF1基因的重组载体导入受试双子叶植物印度芥菜，采用最多的方法是________。研究者进一步获得了转YCF1基因的不育杨树株系，采用不育株系作为实验材料的目的是_________。
（4）将长势一致的野生型和转基因杨树苗移栽到Cd污染的土壤中，半年后测定植株干重（图1）及不同器官中Cd含量（图2）。据图1可知，与野生型比，转基因植株对Cd具有更强的__________（填“耐性”或“富集能力”）；据图2可知，对转基因植株的________进行后续处理对于缓解土壤Cd污染最为方便有效。
（5）已知YCF1特异定位于转基因植物细胞的液泡膜上。据此分析，转基因杨树比野生型能更好地适应高Cd环境的原因是_________。相较于草本植物，采用杨树这种乔木作为Cd污染土壤修复植物的优势在于_________（写出两点即可）。
22.（11分）紫罗兰(2n=14)花色丰富、抗虫性强、种子油富含亚麻酸。为了让油菜(2n=38)具有紫罗兰的诸多优良性状,科研工作者进行了如图1所示实验,分析回答下列问题:
(1)用酶解法制备原生质体时,需先用较_____(填“高”或“低”)渗透压的溶液处理植物细胞,使细胞处于微弱的_____状态,然后用酶去除细胞壁,获得原生质体。
(2)筛选出所需的杂种细胞后,还要采用_____技术才能获得杂种植株,该过程需要在培养基中加入一定浓度的_____(填写相关植物激素的名称),使其脱分化形成愈伤组织,继而再分化,并生长发育成完整植株。
(3)运用传统有性杂交方法不能得到紫罗兰—油菜的杂种后代,原因是_____。
(4)科研工作者分别用4种浓度的PEG对两种原生质体进行了融合试验,结果如图2所示:
注:a.两个原生质体融合在一起称为二源融合;多于两个原生质体融合在一起称为多源融合;b.紫罗兰—油菜是由一个紫罗兰原生质体和一个油菜原生质体融合后培养产生的。
该实验的自变量是______,根据实验结果,为提高紫罗兰—油菜的成功率,应选用的最佳PEG浓度为_____%。
23.（11分）合理使用消毒液有助于减少传染病的传播。某同学比较了3款消毒液A、B、C杀灭细菌的效果，结果如图所示。回答下列问题。
（1）该同学采用显微镜直接计数法和菌落计数法分别测定同一样品的细菌数量，发现测得的细菌数量前者大于后者，其原因是____________。
（2）该同学从100mL细菌原液中取1mL加入无菌水中得到10mL稀释菌液，再从稀释菌液中取200μL涂布平板，菌落计数的结果为100，据此推算细菌原液中细菌浓度为____________个/mL。
（3）菌落计数过程中，涂布器应先在酒精灯上灼烧，冷却后再涂布。灼烧的目的是____________，冷却的目的是____________。
（4）据图可知杀菌效果最好的消毒液是____________，判断依据是____________。（答出两点即可）
（5）鉴别培养基可用于反映消毒液杀灭大肠杆菌的效果。大肠杆菌在伊红美蓝培养基上生长的菌落呈____________色。
24.（11分）狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其产生的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限，难以满足市场需求。因此，目前一般通过植物细胞工程进行培养，具体过程如图所示，其中的数字序号代表处理或生理过程。请回答下列相关问题：
（1）图中②③过程培养获得植株乙所利用技术的细胞学原理是______，利用植物组织培养技术培养植株乙的优点有_________。图中形成植株丁的过程中，PEG的作用是______。
（2）进行植物组织培养前要对狼爪瓦松植株甲幼嫩的叶进行消毒处理，所用的试剂为体积分数为70%的酒精和_______。②③过程需要使用的植物激素为_____，它们的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向。②③过程中通常需要光照的是______(填序号)过程。
（3）黄酮类化合物是广泛分布于植物体内的次生代谢物。某同学认为利用细胞产物的工厂化生产黄酮类化合物主要是利用促进细胞生长的培养条件，来提高单个细胞中黄酮类化合物的含量，你同意该同学的观点吗，并说明相应的理由：___________。
25.（11分）癌症的免疫疗法通过重新激活抗肿瘤的免疫细胞，克服肿瘤的免疫逃逸，科研人员在不断研究中发现多种免疫治疗方法的结合是提高治疗效果的途径之一。请回答下列问题：
（1）免疫系统能够识别和清除突变的细胞，这体现了免疫系统的________功能。
（2）由于基因突变，癌细胞表面物质发生改变，如某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白PSMA和PD-L1。图1中PD-L1能抑制T细胞的活化，使癌细胞发生免疫逃逸。临床上可利用PD-1的单克隆抗体进行癌症治疗，据图1推测，其原因是________。
（3）CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。因此，科研人员尝试构建既能结合PSMA，又能结合CD28的双特异性抗体PSMA×CD28，诱导T细胞定向杀伤癌细胞，如图2所示。
制备过程：先将________分别注射到小鼠体内，分离出B淋巴细胞，诱导其与小鼠的骨髓瘤细胞融合，筛选得到________，再诱导两种细胞融合。成功融合的细胞会表达两种L链和两种H链，由于________会产生多种抗体，因此还需进行筛选，才能获得所需的双特异性抗体PSMA×CD28。
（4）科研人员将癌细胞和T细胞共同培养，加入不同抗体，比较不同抗体对T细胞活化的作用。实验各组由活化T细胞产生的细胞因子IL-2含量如图3所示，实验结果说明________。
答案以及解析
1.答案：D
解析：本题考查微生物培养基的相关知识点。A项，培养基按其物理性质可以分为液体培养基和固体培养基，故A项正确；B项，培养基按其化学成分可以分为天然培养基和合成培养基，故B项正确；C项，培养基按其功能用途可以分为鉴别培养基和选择培养基，故C项正确；D项，水是微生物必须的营养之一，培养基中必须含有水，故D项错误。综上所述，本题正确答案是D。
2.答案：D
解析：①等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，防止杂菌污染，①错误；②不能将灭过菌的培养皿盖放在桌面上，因为桌面上可能有杂菌，②错误；③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰，高温可防止杂菌污染，③正确；④倒平板时皿盖只需要倾斜出一定角度，在酒精灯火焰旁进行，④错误；⑤右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖，并通过酒精灯火焰，⑤正确；⑥等待平板冷却，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，⑥错误。
3.答案：C
解析：根据土壤定容时的稀释倍数为10%，可推知y应为1.8，A正确；根据培养基上的菌落特点可知，该实验采用的接种方法是稀释涂布平板法，B正确；聚丙烯的分子式为[（C3H6）n]，不含氮，C错误；利用培养皿上的菌落进行计数时，当两个或多个细菌挨得较近，会形成一个菌落，因此，所得数值会比实际细菌数少，D正确。
4.答案：C
解析：图甲装置中，阀门a控制进气，阀门b控制排气。用该装置制作果酒时，由于前期酵母菌进行有氧呼吸快速繁殖，所以开始时阀门a需打开；而在发酵过程中会产生CO2，所以要每隔一段时间打开阀门b，以排出装置中的CO2，A错误。由于果醋制作所需的微生物是醋酸菌，醋酸菌是好氧细菌，所以制作果醋时阀门要始终打开，B错误。图乙中的过程①可以表示酵母菌细胞呼吸第一阶段，过程②可以表示酵母菌无氧呼吸的第二阶段，二者都可在缺氧条件下进行，C正确。过程③表示有氧呼吸的第二和第三阶段，反应场所是酵母菌的线粒体，该过程需要O2的参与；过程④表示果醋发酵，该过程发生的场所为醋酸菌的细胞质基质，需要O2的参与，D错误。
5.答案：A
解析：根据题干描述可知该工艺为传统发酵技术，“洗蛋”能去除蛋壳表面的杂质和微生物，但很难保正发酵中只有单一菌种，A错误；“封坛”是为了创造密闭的无氧环境，让“配药”中的菌种更有效地进行无氧呼吸（发酵），B正确；在糟蛋制作过程中，微生物产生的酶会发生催化作用，酒槽中的醇类、糖类、有机酸等物质，逐渐渗入蛋内，产生一系列的物理和化学反应，使平湖糟蛋具有营养丰富和易于消化的特点，C正确；“蒸饭”后，要将蒸好的米饭降温，防止高温杀死“配药”中的菌种，D正确。
6.答案：A
解析：A、据题图可知，过程①是外植体经脱分化形成X（愈伤组织）的过程，不能体现植物细胞的全能性，A错误；
B、愈伤组织是松散的薄壁细胞团，故过程②可通过振荡来分散细胞，B正确；
C、接种量、pH、温度等均是植物细胞培养过程中需控制的条件，需通过实验探究来确定其适宜的范围，C正确；
D、利用悬浮细胞培养技术生产药物成分不会破坏植物资源，可缓解药用植物资源紧缺，D正确。
故选A。
7.答案：B
解析：①是制备原生质体的过程,由于植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶,故过程①需要用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞,A错误;②过程形成的细胞类型可能有紫花苜蓿—紫花苜蓿型、百脉根—百脉根型、紫花苜蓿—百脉根型等,为确保最终得到的F植株为所需的新品种,可对②过程形成的C进行初步的筛选和鉴定, B正确；③过程中由于要形成新的细胞壁,故高尔基体的活动增强,植物体细胞杂交完成的标志是形成新植株,而非图中D的形成,C错误；④过程是脱分化过程,诱导细胞脱分化形成愈伤组织期间一般不需要光照,D错误。
8.答案：D
解析：对母体进行超数排卵处理后,可以从卵巢中采集处于不同发育时期的卵细胞,也可以从输卵管或子宫内采集卵细胞,A正确；⑤为胚胎移植技术,由于无法进行全体外胚胎培养,胚胎移植成为胚胎工程中获得后代的唯一方法,也是研究哺乳动物胚胎工程的重要环节, B正确;促性腺激素可促进雌性动物产卵,因此通过注射适量的外源促性腺激素,可增加排卵数量,C正确;一般通过对囊胚的滋养层细胞进行染色体组型检测可判断胚胎的性别,D错误。
9.答案：D
解析：从卵巢中采集的卵母细胞需体外培养至MⅡ期才能用于核移植,A正确;为保证实验成功,获取高产奶牛的体细胞后还需进行体外培养,以获得较多的体细胞进行实验,B正确;用乙醇处理重构胚的目的是使其完成细胞分裂和发育进程,C正确；题述培育克隆奶牛依据的原理是动物细胞核具有全能性,D错误。
10.答案：D
解析：细胞呼吸酶是所有活细胞都具有的酶,不是肿瘤细胞特有的标志物,且细胞呼吸酶是胞内蛋白,因此,不可以选择细胞呼吸酶作为抗原,来制作特异性识别肿瘤细胞的单克隆抗体,A错误;在细胞培养中,加入CO2的主要目的是维持培养液的H,B错误；制备单克隆抗体时利用选择培养基可以筛选得到杂交瘤细胞,通过克隆化培养和抗体检测可以获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞,C错误;T-DXd对HDR2表达水平不同的乳腺癌均有疗效说明单克隆抗体特异性强、灵敏度高,D正确。
11.答案：B
解析：A、多数限制酶识别的序列是6个核苷酸组成的，也有少数限制酶的识别序列由4、5或8个核苷酸组成，A错误；B、Spe Ⅰ和Xba Ⅰ切割的DNA片段有相同的黏性末端，可以用T4DNA连接酶连接，B正确；C、由图可知，Sma Ⅰ和EcoR V切出的为平末端，应用T4DNA连接酶连接，C错误；D、由图可知，Spe Ⅰ和Xba Ⅰ识别序列不同，Spe Ⅰ和Xba Ⅰ切割的DNA片段连接后，若为SpeⅠ切割的两个片段连接，则不能被Xba Ⅰ切割，反之亦然，D错误。故选B。
12.答案：D
解析：A、由于DNA聚合酶只能从3'端延伸DNA链，引物Ⅱ和Ⅲ不能作为扩增探针序列的引物，据题干信息“数量较多的非限制性引物将引导合成大量目标DNA单链”可知，若A链为所需的DNA分子探针，即目标DNA单链，则则非限制性引物应选用引物Ⅳ，A错误；B、进行最初10个循环的目的是增加模板DNA的量，以便后期更快得到较多数量的目标DNA单链（单链DNA探针），B错误；C、引物越短，复性时可与模板链形成的氢键数越少，越容易被高温破坏，因此可设计较短的限制性引物与较长的非限制性引物，适当提高复性温度以避免残留限制性引物与模板结合，从而提高产物生成量，C错误；D、如果体系中原模板DNA的数量为a，最初10次循环产物为双链DNA分子为210×a个，其中有B链为210×a个，以这些链为模板，利用引物又进行了15次循环，每次循环生成的都是A链，不改变B链的数目，即B每次循环开始都是210×a个，15次循环每次生成A也是210×a个，故最终获得的单链探针数共为15×210×a个，D正确。故选D。
13.答案：A
解析：
由图分析可知,构建重组质粒时需要的限制酶有Pst I、Xho I、Hind Ⅲ(或Bam H I)和EcoR I,A错误;由题图可知,在构建重组质粒时,质粒中的pst Ⅱ基因保留下来作为标记基因,GUS基因被切除,因此在培养基中添加卡那霉素可初步筛选导入重组质粒的农杆菌,B正确;构建重组质粒时,GUS基因被切除,无法使细胞中底物呈蓝色,呈现蓝色的组织说明细胞中含有GUS基因,则该细胞中导入的是不含目的基因的空白质粒,因此不能选择呈蓝色的愈伤组织进一步培养,C正确;启动子若为除草剂诱导型启动子,则在无除草剂的环境中A基因不表达,在有除草剂的环境中A基因可表达,将减少细胞物质和能量浪费,D正确。
14.答案：A
解析：基因工程中需将含目的基因的表达载体导入受体细胞，而不能直接导入目的基因，A错误；图示涉及基因工程、动物细胞培养、核移植、早期胚胎培养及胚胎移植等技术，B正确；未受精的卵母细胞较大，营养物质丰富，含有促进细胞核全能性表达的物质，C正确；为获得同卵双胎或多胎，一般对囊胚阶段的胚胎进行分割，且需将内细胞团均等分割，D正确。
15.答案：A
解析：A、基因治疗是把健康外源基因导入有基因缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，A正确；
B、基因治疗只是把健康外源基因导入有基因缺陷的细胞中，并没有对有基因缺陷的细胞进行修复，B错误；
C、人工诱变具有不定向性，并且是多害少利的，C错误；
D、基因治疗是把健康外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的，并没有切除有缺陷的基因，D错误。
故选：A。
16.答案：CD
解析：根据题干信息“某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病”知，若要筛选出该内生菌，应该从未感染香蕉枯萎病的植株上采样，A错误。要筛选内生菌，同时防止样品表面杂菌对实验结果的影响，需要对样品进行消毒，用蒸馏水冲洗样品表面，收集冲洗液，对冲洗液进行无菌检测，B正确。稀释涂布平板法可用于分离微生物。将无菌检测合格的样品研磨，经稀释涂布平板法分离能获得内生菌的单菌落，C正确。要想判断内生菌对病原菌的抗性效果，需要比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑大小，D正确。
17.答案：ABC
解析：第一步:整体浏览选项,与图示信息进行匹配;第二步:深入分析选项正误由图中细胞染色体数可知,动物细胞融合时会发生染色体的随机丢失,若丢失与抗体合成有关的染色体,则会影响融合细胞合成抗体,A符合题意。由图可知,抗体由两条重链和两条轻链组成,不同的多肽链组合可以形成的抗体类型较多,故部分融合细胞产生的抗体可能不是双特异性单克隆抗体,B符合题意。若融合处理时条件不适宜,单克隆杂交瘤细胞和脾脏细胞融合率较低,则形成所需的融合细胞较少,C符合题意。单克隆杂交瘤细胞和B细胞融合后,形成多种融合细胞,其中能产生双特异性单克隆抗体的占比较小,D不符合题意。
18.答案：C
解析：A、据图分析，图示过程是利用体外受精及培养技术功建立小鼠（2n=40）单倍体胚胎干细胞系，该过程中运用了体外受精（精子与卵细胞结合）、胚胎培养（早期胚胎培养），但不涉及胚胎移植技术，A错误；
B、图中“？”处的处理是精子获能，是指精子获得受精的能力而非获得能量，B错误；
C、胚胎分割是一种无性生殖技术，对早期胚胎进行胚胎分割可获得更多的单倍体胚胎干细胞，C正确；
D、小鼠（2n=40）单倍体胚胎干细胞系细胞中含有n=20条染色体，所得的单倍体的胚胎干细胞不存在同源染色体，D错误。
故选C。
19.答案：BCD
解析：外植体消毒所用的酒精的体积分数为70%，A错误；不同培养阶段对细胞分裂素和生长素的需求不同，故不同培养阶段培养基中激素种类和比例应适时调整，B正确；根据DNA分子杂交原理，可利用病毒的cDNA制作探针对甘薯苗进行病毒检测，C正确；根据表格中数据可知，利用0.3~0.5 mm大小的茎尖培养获得的脱毒苗数最多，因此有利于培养脱毒甘薯苗，D正确。
20.答案：ABD
解析：Cas9蛋白是一种内切核酸酶，作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，C错误。
21、（1）答案：基因组文库
解析：本题考查基因工程的相关知识。
将酵母细胞的全部DNA提取、切割后与载体连接，导入受体菌的群体中储存，这个群体含有酵母菌的全部基因，因此称为基因组文库。
（2）答案：限制酶和DNA连接酶；便于筛选含有重组基因表达载体的受体细胞
解析：构建重组载体时，需要用限制酶切割供体DNA和质粒以产生相应的黏性末端，然后用DNA连接酶进行连接。构建的重组基因表达载体中的标记基因，可用于检测目的基因是否导入受体细胞，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
（3）答案：农杆菌转化法；防止外源基因传给其他植物，造成基因污染
解析：将重组载体导入双子叶植物，采用最多的方法是农杆菌转化法。采用不育株系作为实验材料可防止外源基因传给其他植物，造成基因污染。
（4）答案：耐性；叶
解析：由题图1可知，与野生型相比，转基因植株地上部分、地下部分和植株干重均增加，即转基因植株在Cd污染的土壤中生长较好，说明转基因植株对Cd具有更强的耐性。由题图2可知，转基因植株的叶中Cd含量最高，对其进行后续处理对于缓解土壤Cd污染最为方便有效。
（5）答案：转基因杨树细胞把Cd运入液泡中，防止Cd破坏细胞核以及各种细胞器，减少Cd对细胞的损伤；相比于草本植物，杨树更高大，吸收的Cd更多；杨树为多年生植物，可以源源不断从土壤中吸收Cd
解析：由于YCFl特异定位于转基因植物细胞的液泡膜上，可推测转基因杨树能特异性的将Cd转运至液泡中，适应高Cd环境。相较于草本植株，杨树的根系发达，有利于吸收土壤中的Cd，且杨树属于多年生木本植物，可多次收集叶片对Cd进行处理。
22.答案：(1)高;质壁分离
(2)植物组织培养;生长素和细胞分裂素
(3)紫罗兰、油菜是两个不同的物种,两者之间存在生殖隔离
(4)PEG浓度;30
解析：(1)用酶解法制备原生质体时,需先用较高渗透压的溶液处理植物细胞,使细胞失水,处于微弱的质壁分离状态,然后用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁,获得原生质体。
(2)通过植物组织培养技术,将筛选出的杂种细胞培养为杂种植株,该过程需要在培养基中加入一定浓度的生长素和细胞分裂素,使其脱分化形成愈伤组织,继而再分化,并生长发育成完整植株。
(3)由于紫罗兰、油菜是两个不同的物种,两者之间存在生殖隔离,所以运用传统有性杂交方法不能得到紫罗兰—油菜的杂种后代。
(4)根据柱形图中的横坐标可知,该实验的自变量是PEG浓度;根据实验结果可知,PEG浓度为30%时,二源融合率较高,且多源融合率很低,因此为提高紫罗兰—油菜的成功率,应选用的最佳PEG浓度为30%。
23.答案：（1）前者微生物分散的活菌和死菌一起计数，后者存在多个活菌形成一个菌落的情况且只计数活菌
（2）5000
（3）杀死涂布器上可能存在的微生物，防止涂布器上可能存在的微生物污染防止温度过高杀死菌种
（4）A；A消毒液活菌数减少量最多，且杀菌时间较短，效率最高
（5）黑
解析：（1）显微镜直接计数法把死菌和活菌一起计数。菌落计数法计数只计活菌数，还可能存在多个活菌形成一个菌落的情况，故前者的数量多于后者。
（2）从100mL细菌原液中取1mL加入无菌水中得到10mL稀释菌液，即稀释了10倍，1mL细菌原液中细菌浓度=（菌落数÷菌液体积）×稀释倍数=（100÷200μL）×10个=5000个。
（3）菌落计数过程中，涂布器应先在酒精灯上灼烧，冷却后再涂布。灼烧的目的是杀死涂布器上可能存在的微生物，防止涂布器上可能存在的微生物污染，冷却的目的是防止温度过高杀死菌种。
（4）A消毒液活菌数减少量最多，且杀菌时间较短，效率最高，因此A消毒液杀菌效果最好。
（5）大肠杆菌在伊红美蓝培养基上生长的菌落呈黑色。
24.答案：(1)植物细胞一般具有全能性可以高效、快速地实现种苗的大量增殖；保持优良品种的遗传特性；诱导原生质体融合
(2)(质量分数为5%左右的)次氯酸钠溶液；生长素和细胞分裂素；③
(3)不同意，植物细胞的次生代谢物含量很低，利用细胞产物的工厂化生产黄酮类化合物主要是通过增加细胞数量从而增加黄酮类化合物的含量
解析：（1）植物组织培养所利用的原理是植物细胞一般具有全能性；植物组织培养技术不仅可以高效、快速地实现种苗的大量繁殖，从生殖方式上来说植物组织培养技术属于无性生殖,因此还可以保持优良品种的遗传特性。培育形成植株丁的过程中,PEG的作用是诱导原生质体融合。
（2）对外植体消毒用的是体积分数为70%的酒精和质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液,生长素和细胞分裂素的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向。利用植物组织培养技术培养植株时，脱分化过程（②）一般不需要光照，再分化过程（③）需要光照。
（3）不同意该同学的观点，黄酮类化合物属于植物的次生代谢物，植物细胞的次生代谢物含量很低,利用细胞产物的工厂化生产黄酮类化合物主要是通过增加细胞数量从而增加黄酮类化合物的含量。
25.答案：（1）免疫监视
（2）PD-1的单克隆抗体与PD-1结合，阻断了PD-1和PD-L1的结合，避免PD-L1抑制T细胞的活化
（3）PSMA、CD28；两种杂交瘤细胞；L链和H链随机组合
（4）PSMA×CD28和PD-1单抗联合使用能够显著激活T细胞，且在一定范围内激活作用随PSMA×CD28浓度的增加而增强；单独使用PSMA×CD28或PD-1单抗都不能显著激活T细胞
解析：（1）免疫系统能够识别和清除突变的细胞，这体现了免疫系统的免疫监视功能。
（2）图1中癌细胞表面的PD-L1和T细胞表面的PD-1结合，抑制T细胞的活化。PD-1的单克隆抗体与PD-1特异性结合，阻断了PD-L1和PD-1的结合，避免PD-L1抑制T细胞的活化。
（3）制备双特异性抗体PSMA×CD28，则抗原是CD28和PSMA，将两种物质分别注射到小鼠体内，分离出两类B淋巴细胞，将这两类B淋巴细胞分别和小鼠的骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞，再诱导杂交瘤细胞融合。成功融合的细胞会表达两种L链和两种H链，所需的双特异性抗体PSMA×CD28是特定的L链和H链结合形成的，由于L链和H链随机组合，因此还需要进行筛选，才能获得所需的抗体。
（4）自变量是抗体种类，分析图3可知，PSMA×CD28+PD-1单抗联合使用能够显著激活T细胞，且在一定范围内激活作用随PSMA×CD28浓度的增加而增强；单独使用PSMA×CD28或PD-1单抗都不能显著激活T

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