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宁夏回族自治区银川市贺兰县第二高级中学2023-2024学年高二下学期4月第二次月考生物试题
一、单选题
1．黄豆酱是人们喜爱的传统美食，早在春秋时期就有制作方法的相关记载。它以黄豆为主要原料，经米曲霉（好氧菌）、酵母菌、乳酸菌等微生物发酵而成。劳动人民在制作过程中不断改进发酵技术，总结出以下经验。下列叙述错误的是（　　）
①选用具有高蛋白酶活性的米曲霉
②用蒸煮后的大豆与米曲霉混合堆积
③将初步发酵后含米曲霉等微生物的曲料摊薄，并适当通风
④在装坛时，添加适量食盐
⑤发酵过程中，需保持发酵坛密封
⑥发酵过程中，需定期搅拌
A．①和④对黄豆酱风味的形成起重要作用，利于提升品质
B．②和⑥可以促使微生物和物料充分混合，提高发酵效率
C．③有利于米曲霉和酵母菌进行有氧呼吸并快速大量增殖
D．⑤中乳酸菌主要集中于发酵坛上部而米曲霉集中于下部
2．下列是某同学分离高产脲酶菌的实验设计，不合理的是（ ）
A．选择农田或公园土壤作为样品分离目的菌株
B．在选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源
C．适当稀释样品是为了在平板上形成单菌落
D．可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌
3．酿酒酵母菌种的性能是决定果酒品质的重要因素。如图表示从土壤中筛选酿酒酵母的过程。下列叙述正确的是（　　）
A．图示接种方法为稀释涂布平板法，据结果推测1g土壤中酵母菌数最多为1．6×106
B．分离、纯化酵母菌时，还可采用平板划线法且该方法也需要进行③步骤操作
C．获得酿酒酵母纯培养物的关键是防止杂菌污染，故应对土壤、培养基及用具进行灭菌
D．进行步骤⑤时，应用液体培养基培养④中的酵母菌，并检测酵母菌的数量和酒精含量
4．一般情况下，一定浓度的抗生素会杀死细菌，但变异的细菌可能产生耐药性。为探究某种抗生素对细菌的选择作用，实验人员在接种了金黄色葡萄球菌的培养基中放置了含某种抗生素的圆形滤纸片和不含抗生素的圆形滤纸片，一段时间后测量滤纸片周围抑菌圈的直径。从抑菌圈边缘的菌落上挑取细菌富集培养，然后重复上述步骤培养三代，结果如下表所示。下列有关叙述错误的是（　　）
培养代数 平板各区域滤纸片周围抑菌圈的直径/cm
①号区域 ②号区域 ③号区域 ④号区域
第一代 0 2.27 2.13 2.27
第二代 0 1.95 2.02 1.87
第三代 0 1.80 1.87 1.78
A．一定浓度的抗生素会诱导细菌产生耐药性的变异
B．采用稀释涂布平板法将金黄色葡萄球菌接种到固体培养基上
C．平板中①号区域的滤纸片不含抗生素，起空白对照的作用
D．随培养代数增多，抑菌圈的直径越小，说明细菌的耐药性越强
5．由于发酵工程生产条件温和、原料来源丰富、价格低廉等，在食品工业、医药工业、农牧业等许多领域得到了广泛的应用。下列有关发酵工程在食品工业上应用的描述，不正确的是（ ）
A．日常生活中食用酱油的制作以大豆为主要原料，利用产蛋白酶的霉菌的作用，将原料中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸
B．啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，其中，酵母菌的繁殖在主发酵阶段完成，大部分糖的分解和代谢物的生成在后发酵阶段完成
C．味精是由谷氨酸棒状杆菌发酵得到的谷氨酸经过一系列处理而获得的
D．精酿啤酒发酵时间长、产量低、价格高，所以饮用更健康、保质期更短
6．如图表示用某植物未成熟的花粉培育成完整植株的过程，X表示结构，①～④表示相关过程。下列相关叙述正确的是（ ）
A．过程①表示脱分化，X是愈伤组织
B．过程②和过程③所用激素种类不同
C．该过程没有体现植物细胞的全能性
D．培养过程需对培养器具和操作台进行消毒
7．如图为植物体细胞杂交过程示意图。下列说法不正确的是（　　）
A．①过程要取得成功，可用酶解法去除细胞壁获得原生质体C和D
B．②过程要取得成功，需借助一定的技术手段进行人工诱导获得E
C．甲中愈伤组织的细胞是一种高度液泡化、呈无定形状态、排列疏松的薄壁细胞
D．乙中的植株幼苗移栽到室外环境中，就会出现地上长番茄，地下结马铃薯现象
8．植物细胞培养的基本过程如下图。相关叙述错误的是（ ）
A．过程①常选择幼嫩的组织或器官与其具有较强增殖能力有关
B．过程②应定期更换培养基以满足细胞对营养、激素等的需求
C．培养的愈伤组织需要经过再分化产生特定的组织细胞后才能产生特定的细胞产物
D．利用植物细胞培养技术可实现细胞活性成分的工厂化生产
9．花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果图2所示。下列有关叙述错误的是（　　）

A．图1培育杂种植株所用的技术能克服植物远缘杂交不亲和的障碍
B．图1过程①是在无菌水中进行，过程②是在固体培养基中进行
C．图2中属于杂种植株的是4和5，1可能是花椰菜
D．病菌悬浮液均匀喷施于杂种植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，可筛选抗病性强的杂种植株
10．下图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是（　　）
A．步骤①的操作不需要在无菌环境中进行
B．步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离
C．步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理
D．步骤④培养过程中不会发生细胞转化
11．治疗性克隆有望解决供体器官短缺和免疫排斥等问题。下图表示治疗性克隆的过程，下列说法错误的是（　　）

A．细胞A常采用去核卵母细胞作为移植的受体细胞
B．动物细胞的培养需提供95%空气和5%CO2的混合气体
C．胚胎干细胞分化为多种体细胞是基因选择性表达的结果
D．该治疗性过程应用了核移植、动物细胞培养和胚胎移植等技术
12．如图为核移植实验过程示意图，根据图示分析下列叙述正确的是（ ）
A．去核的时期应该在MⅠ期，原因是该时期第一极体和卵细胞核较近
B．桑葚胚细胞应提取出细胞核后，尽快注入去核的卵母细胞中
C．电融合法可促使重构胚形成，后期还需要其他方法激活重构胚
D．受体动物应选择与供体相同的品种，防止出现免疫排斥现象
13．再生医学领域在2019年首次利用异源诱导多能干细胞（iPS细胞）培养出的眼角膜组织，移植到病人体内，成功治疗一名失明患者，且未发生免疫排斥反应。下列有关叙述正确的是（　　）
A．造血干细胞和诱导多能干细胞（iPS细胞）的分化程度相同
B．神经干细胞和iPS细胞在治疗阿尔茨海默病等方面有重要价值
C．体外培养iPS细胞时培养液中不需要加入血清等物质
D．患者未发生免疫排斥反应是因为移植细胞与其自身细胞的基因相同
14．单峰骆驼在野外几乎灭绝，科学家欲通过胚胎工程的方法拯救野化单峰骆驼，进行了如图所示研究。请据图分析，下列说法正确的是（　　）

A．为使A野化单峰骆驼超数排卵，可注射适量的促性腺激素
B．为提高胚胎利用率，可采用体外受精等无性繁殖技术
C．卵裂期，胚胎的总体积不增加，但有机物总量增加
D．若①表示体外受精，可直接利用B野化单峰骆驼的新鲜精子与处于MⅡ期卵母细胞完成受精作用
15．甲型流感单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞在克隆化培养过程中来自B淋巴细胞的染色体往往出现随机丢失现象，不考虑基因互作和其他变异，相关叙述错误的是（ ）
A．可从多次间歇注射甲型流感疫苗的动物脾脏中筛选获得已免疫的B淋巴细胞
B．在HAT 选择培养基上，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均无法长期存活
C．用96孔板培养和筛选杂交瘤细胞时每一个孔尽量只接种一个细胞
D．抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞即具有持续产生甲型流感抗体的能力
16．下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法正确的是（　　）
A．①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精前精子需要获能
B．②代表胚胎的体外培养，可移植的胚胎应发育到原肠胚或囊胚阶段
C．③代表胚胎分割，需均等分割桑葚胚的内细胞团，以免影响胚胎发育
D．⑤代表胚胎移植，此时要使供体和受体的生理状况保持一致
17．下列属于获取目的基因的方法是（ ）
①利用mRNA逆转录形成 ②利用PCR技术扩增 ③从基因组文库中提取 ④从受体细胞中提取⑤人工合成 ⑥利用DNA转录
A．①②③⑤ B．①②⑤⑥ C．①②③④ D．①②③⑥
18．如表列举了几种限制酶的识别序列及其切割位点（箭头表示相关酶的切割位点）。图是酶切后产生的几种末端。下列说法正确的是（ ）
限制酶 AluI BamHI SmaI Sau3AI
识别序列
A．BamHⅠ切割的是氢键，AluⅠ切割的是磷酸二酯键
B．Sau3AⅠ和BamHⅠ切割产生的片段能够相连，但连接后的片段两者都不能再切割
C．②④⑤对应的识别序列均能被Sau3AⅠ识别并切割
D．T4DNA连接酶即能连接①③，也能连接②⑤，但后者连接效率低
19．“DNA粗提取与鉴定”的实验步骤是：研磨→去杂质→析出→鉴定：某研究小组欲探究不同的去杂质方法对实验结果的影响，实验结果如下表所示。下列说法错误的是（ ）
去杂质方式 沉淀质量（g） DNA浓度（ng/μL） OD260/OD280 二苯胺鉴定
离心 0.068 81.5 1.53 蓝色
4℃冰箱静置 0.1028 336.4 1.41
（注：OD260与OD280的比值可检查DNA纯度。纯DNA的OD260/OD280为1.8，当存在蛋白质污染时，这一比值会明显降低）
A．猪肝和菜花均可作为提取DNA的材料
B．对研磨液进行离心是为了加速DNA的沉淀
C．离心法可以获得更高纯度的DNA
D．析出时的离心转速明显高于去杂质时
20．荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量，其原理是在PCR体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当耐高温的DNA聚合酶催化子链延伸至探针处时，会水解探针，使荧光监测系统接荧光探针收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成，过程如图所示。下列相关叙述错误的是（　　）

A．引物与探针均具特异性，与模板结合时遵循碱基互补配对原则
B．反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量呈正相关
C．若用cDNA作模板，上述技术也可检测某基因的转录水平
D．耐高温的DNA聚合酶催化DNA的合成总是从子链的3’端向5’端延伸的
21．下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，正确的是（　　）

A．②的构建需要有DNA聚合酶参与
B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上
C．④的染色体上含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状
D．⑤表现出抗虫性状表明植株发生了可遗传变异
22．转基因食品已大量进入我们的日常生活，如转基因西红柿、转基因草莓等，涉及的问题甚至关系到国家之间的贸易竞争，如图为“霸占中国市场的转基因大豆油”的部分图示。下列关于转基因大豆的叙述，不正确的是（ ）
质量等级：一级 工艺：浸出 生产日期：瓶身所示 保质期：18个月 （请贮藏于避光及干燥处） 加工原料为转基因大豆
A．培育过程中可能用到抗病、抗虫等抗性基因
B．固氮菌的固氮基因也是必需的目的基因之一
C．转基因大豆的种植过程中减少了农药等的使用量，生产成本更低
D．目的基因的受体细胞可以是大豆受精卵，也可以是体细胞
23．下列有关基因工程应用的说法，错误的是（ ）
A．将外源生长激素基因导入动物体内可提高动物生长速率
B．将必需氨基酸含量多的蛋白质基因导入农作物，提高农产品的品质
C．利用基因工程技术，得到的乳腺生物反应器可以解决很多重要的药品的生产问题
D．用转基因动物作为器官移植的供体时，由于导入的是调节因子，而不是目的基因，因此无法抑制抗原的合成
24．科学家利用蛋白质工程技术将水蛭素（一种可用于预防和治疗血栓的蛋白质）第47位的天冬酰胺替换为赖氨酸，显著提高了它的抗凝血活性，流程图如下。已知天冬酰胺对应的密码子为AAU、AAC，赖氨酸对应的密码子为AAA、GUA等。下列叙述错误的是（　　）
A．上图的操作流程是从预期的水蛭素功能出发的
B．在这项替换研究中目前可行的直接操作对象是基因
C．上图中大分子物质a和b的单体序列均是唯一的
D．用蛋白质工程可生产基因工程所不能生产的蛋白质
25．以哺乳动物为研究对象的生物技术已获得了长足的进步。对生物技术应用于人类，在安全与伦理方面有不同的观点，下列叙述正确的是（ ）
A．试管婴儿技术应全面禁止
B．治疗性克隆不需要监控和审查
C．生殖性克隆不存在伦理道德方面的风险
D．我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验
二、非选择题
26．某污水处理厂欲处理一批含As3＋和硝酸盐浓度较高的污水，研究人员通过对肠道微生物的分离与筛选，得到了耐砷的反硝化细菌，它在厌氧条件下能够将硝酸盐还原为N2O和N2。分离耐砷的反硝化细菌具体步骤如下：
采集健康人体的新鲜粪便样本。
(1)配制培养基以筛选 ：该培养基中含有适宜浓度的 ，从而有利于该菌的生长，抑制其他微生物的生长。此种培养基属于 培养基。
接种：取采集的人体新鲜粪便样品0.3 g，接种至该培养基上。
(2)耐砷反硝化细菌的分离与纯化：取200～300μL上述培养液，均匀地涂布在已经添加了5 mmol/L As3＋和10 mmol/L NO3-的细菌固体培养基上。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是 ；涂布完成后，将平板置于温度为 的恒温培养箱中培养24 h。挑取长势比较良好、形态大小不同的菌落利用平板划线法进行分离纯化，用该种方法进行接种时，接种工具是 ，该接种工具的灭菌方法是 。操作时，在第二次及其以后的划线时，总是从上一次划线的 开始划线，目的是 。
对分离纯化后的菌株进行鉴定。
(3)测定菌株在不同砷浓度下的生长、繁殖能力：挑取单菌落加入到液体培养基中进行培养，吸取1 mL菌液离心收集菌体后，分别接种到含有0 mmol/L、1 mmol/L、2 mmol/L、5 mmol/L、10 mmol/L As3＋和10 mmol/L NO3-的液体培养基中，测定其OD值(OD值越大，表明菌体数量越多)，并绘制曲线如下图。结合曲线可以得出结论： 。
27．电影《我不是药神》中的格列宁是一种治疗癌症的靶向药物，此类靶向药物可称为“生物导弹”。利用单克隆抗体来诊断和治疗癌症可能会成为攻克癌症的重要手段，以下为单克隆抗体制备流程图：
丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体的影响
丁酸钠的浓度（mmol/L） 时间（h）
48 96 144
0 1:320 1:640 1：1200
0.25 1：320 1:1280 1:2500
0.5 1:160 1:2500 1：2500
0.75 1:320 1:320 1:640
（注：表中比值表示抗体效价，1：#中#值越高表明越有利于抗体的产生。）
(1)若该图中的单克隆抗体与药物结合制成“生物导弹”治疗肠癌，则图中特定抗原通常是 。靶向药物比普通的化疗药物疗效高、毒副作用小是因为 。
(2)图中诱导细胞融合时需要采用 诱导法、聚乙二醇融合法或物理法等方法诱导，杂交瘤细胞的特点是 。
(3)用特定的选择培养基筛选出融合的杂交瘤细胞进行 和 ，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
(4)在动物细胞原代培养过程中，悬液中分散的细胞很快就贴附在培养瓶的瓶壁上，这种现象称为 。当细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为 。在体外培养杂交瘤细胞时，瓶壁上形成的细胞层数是 （单层/多层）。
(5)利用筛选出的符合要求的细胞生产单克隆抗体时，既可以将细胞注入小鼠腹腔内进行生产，也可以在体外生产，两种方式相比，后者的缺点有 。
(6)近年来，科学家发现丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体有一定的影响，某科研小组进行了相关实验，结果如表所示，该实验过程中培养杂交瘤细胞的培养瓶放在了含5%CO2的培养箱中培养，CO2的主要作用是 ，该实验的自变量为 。
28．人的血清蛋白（HSA）具有重要的医用价值，研究人员欲用转基因牛来大量生产HAS。下图所示为HSA基因片段和人工构建的大肠杆菌质粒pBR322，图中Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因，箭头表示切割形成末端完全不同的4种限制酶的切割位点。请据图回答问题：
(1)人工构建pBR322质粒除了含特定限制酶切割位点、标记基因、复制原点外，还必须有 （答出两点）等。
(2)若选用牛作为受体动物，可用 作为受体细胞，可将人血清蛋白基因与 等调控组件重组在一起通过 方法将目的基因导入牛的受精卵中，然后使其发育成转基因牛。
(3)基因工程的核心步骤是 ，据图分析，选择 作为切割质粒和目的基因的限制酶可提高目的基因和载体的正确连接效率，其原因是 。
(4)为了排除普通受体细胞（未导入质粒）、空质粒受体细胞（导入pBR322质粒而非重组质粒）的干扰，目的基因导入后，进行了进一步筛选：制备甲、乙两种培养基，甲培养基含新霉素，乙培养基含新霉素和氨苄青霉素，含重组质粒的受体细胞在甲培养基上 （填“能”或“不能”）生存，在乙培养基上 （填“能”或“不能”）生存。
(5)实验室可采用PCR技术扩增蛋白A基因。PCR技术的原理是 ,PCR缓冲液中加入Mg2+的作用是 。已知蛋白A基因的部分序列为5＇-ATCTTAGATATC……ACTGCCATTCGG-3＇,因此用PCR技术扩增蛋白A基因时用到的一段引物的序列为3＇- -5＇（写出6个含氮碱基即可）
(6)据下图分析，利用PCR技术获取HSA基因时，应选择甲、乙、丙、丁四种引物中的 ,需扩增 次后得到HSA目的基因。

29．我国研究人员在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的mRNA,经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴，流程如图所示，①~⑥表示过程，该动物可作为研究癌症等人类疾病的动物模型。请据图分析回答：
(1)2001年，美国科学家已经培育出胚胎细胞核移植猴，获得食蟹猴的体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是 ，恢复其全能性较难。
(2)进行过程①时，细胞培养的培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有 ，在进行细胞原代培养时会出现 和细胞接触抑制现象。
(3)动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是 ，去掉卵母细胞细胞核的目的是 。
(4)图中过程⑤用到胚胎移植技术，其实质是早期胚胎在 条件下空间位置的转移。
(5)研究人员在确定去甲基化酶（Kd4d）的mRNA的作用时，做了两组实验，其中A组用正常培养液培养融合细胞，B组用正常培养液培养注入了Kd4d的mRNA的融合细胞，实验结果如下图所示。分析实验数据可知，Kd4d的mRNA的作用是 。
(6)科研人员发现对于灵长类动物的体细胞来说，单靠核移植本身并不足以使重构胚顺利发育成存活个体，还需要对供体细胞核进行表观遗传修饰才能开启细胞核的全能性。研究表明染色体组蛋白动态可逆地被修饰酶所改变，控制着基因的表达（如图所示）。
①据图分析， 组蛋白乙酰化水平和 组蛋白去甲基化水平有利于相关基因恢复表达，开启细胞核全能性，从而显著提高重构胚的发育率。（提示：横线填入“提高”、“降低”、“几不提高也不降低”）
②科研人员通过设计实验验证以上观点。供选择试剂为：组蛋白去甲基化酶的mRNA、组蛋白甲基化酶的mRNA、组蛋白去乙酰化酶抑制剂、生理盐水。
实验思路：将重构胚均分为甲、乙、丙、丁四组，分别注入等量的组蛋白去乙酰化酶抑制剂 、 、等量生理盐水。一段时间后分别检测各组的胚胎发育率。
实验结果：各组的胚胎发育率丙组>甲组=乙组>丁组。
参考答案
1．D
2．D
3．D
4．A
5．B
6．A
7．D
8．C
9．B
10．C
11．D
12．C
13．B
14．A
15．D
16．D
17．A
18．C
19．B
20．D
21．D
22．B
23．D
24．C
25．D
26．(1) 耐砷的反硝化细菌 As3＋和NO3-（或硝酸盐） 选择
(2) 检测培养基平板灭菌是否合格 37℃ 接种环 灼烧灭菌 末端 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落
(3)当砷浓度低时，该菌能生长；过高浓度的砷使该菌株的生长繁殖受到抑制
27．(1) (肠)癌细胞(膜)表面的蛋白质 既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量
(2) 灭活病毒 既能迅速大量增殖，又能产生抗体
(3) 克隆化培养 抗体检测
(4) 细胞贴壁 接触抑制 多层
(5)培养条件难控制，培养液易被污染
(6) 维持培养液的pH 丁酸钠的浓度和培养时间
28．(1)启动子、终止子
(2) 乳腺细胞 乳腺蛋白基因的启动子 显微注射
(3) 构建基因表达载体 EcoRⅠ和PstⅠ 这两种酶能切割质粒和目的基因，能得到不同的黏性末端，避免质粒和目的基因自连及反接（这两种酶切割DNA形成不同的黏性末端，可避免质粒和目的基因的自身环化和反向连接）
(4) 能 不能
(5) 体外DNA复制 保持TaqDNA聚合酶的活性 3'-TAGAAT-5'
(6) 乙、丙 3＃＃三
29．(1)与胚胎细胞相比，动物体细胞分化程度更高
(2) 动物血清 细胞贴壁生长
(3) 显微操作法 使核移植得到动物的核遗传物质全部来自有重要利用价值的动物的体细胞
(4)相同生理
(5)提高融合细胞发育成囊胚的成功率和囊胚中内细胞团的形成率
(6) 提高 提高 等量组蛋白去甲基化酶的mRNA 等量组蛋白去乙酰化酶抑制剂和组蛋白去甲基化酶的mRNA

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