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第三节　通过细胞融合可产生具有新特性的细胞
[学习目标]　1.概述利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体的过程。2.举例说明单克隆抗体在医学等方面的应用价值。
一、利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体的过程
1．细胞融合
提醒　(1)诱导因素诱导细胞融合的原因：在这些诱导因素的作用下，细胞膜会发生一定程度的损伤，细胞就可以实现相互粘连而融合在一起。
(2)仙台病毒被灭活后才可用于细胞融合，灭活的手段是经紫外线照射。
2．多克隆抗体与单克隆抗体的比较
(1)多克隆抗体
①获取方法：给动物注射相应______后从其________中进行分离提取。
②不足：很多种抗体混合在一起，______差。
(2)单克隆抗体
①概念：由一个____________增殖形成的细胞群所产生的________抗体分子。
②制备原理：每一种B淋巴细胞只产生________特异的抗体，但B淋巴细胞的寿命有限，其在体外培养时不能______________。将寿命有限的B淋巴细胞与具有无限繁殖能力的________细胞融合，经筛选后就可以获得既能产生______________，又能在正常培养条件下进行____________的________细胞。通过对________细胞进行____________，就能得到单克隆抗体。
③制备过程
④优点：纯度高，可____________，在应用时具有____________、____________的特点。
判断正误
(1)聚乙二醇可以诱导植物原生质体融合，但不能诱导动物细胞融合(　　)
(2)灭活的病毒可用于诱导动物细胞融合(　　)
(3)一种B淋巴细胞只能产生一种特异的抗体(　　)
(4)单克隆抗体制备技术和植物体细胞杂交技术均依据细胞的全能性(　　)
任务一：动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较
1．19世纪30年代，科学家曾在患肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中，观察到多核细胞。如何解释这一现象？
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
2．比较动物细胞融合技术和植物体细胞杂交技术。
(1)动物细胞融合和植物体细胞杂交技术的原理分别是什么？
________________________________________________________________________
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(2)两者的细胞融合在方法上有什么异同？
________________________________________________________________________
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(3)两者在最终结果上有什么不同？
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任务二：制备单克隆抗体的过程
根据单克隆抗体的制备过程，回答以下问题：
(1)给小鼠注射特定抗原的目的是什么？
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(2)血清分离抗体和单克隆抗体有什么不同？
________________________________________________________________________
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(3)B淋巴细胞与骨髓瘤细胞经诱导融合后，融合的细胞有哪些(只考虑两两融合)？如何筛选杂交瘤细胞？
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________________________________________________________________________
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　动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较
提醒　灭活病毒诱导法是诱导动物细胞融合的特有方法，不适合用于诱导植物原生质体融合。
1．(2023·台州高二期末)下列关于动物细胞融合的说法不正确的是(　　)
A．常用于诱导动物细胞融合的方法有聚乙二醇融合法、电脉冲融合法、紫外线照射法和灭活病毒诱导法等
B．动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞
C．动物细胞融合反映了动物细胞的细胞膜具有一定的流动性
D．动物细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能
2．细胞中DNA的合成途径有两条，过程如图所示。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转移酶和激酶，其全合成途径可被A物质所阻断。制备单克隆抗体所使用的骨髓瘤细胞缺乏转移酶。现用加入H、A、T三种物质的HAT培养基来筛选特定的杂交瘤细胞。下列关于筛选原理的叙述，正确的是(　　)
A．HAT培养基上筛选出的所有杂交瘤细胞既能大量增殖又能产生高纯度的目标抗体
B．杂交瘤细胞在HAT培养基上可进行上述两条途径，所以能大量增殖
C．骨髓瘤细胞及其相互融合的细胞因无法进行上述两条途径而不能在HAT培养基上增殖
D．已免疫的B淋巴细胞及其相互融合的细胞因全合成途径被阻断而不能在HAT培养基上增殖
二、单克隆抗体的应用价值
单克隆抗体的应用
(1)作为特异性的________，研究相应抗原蛋白的结构、细胞学分布及功能。
(2)可以________、________地诊断和治疗一些疾病。例如，利用脊髓灰质炎病毒的单克隆抗体做__________，在10分钟内就可以确诊患病儿童是否感染脊髓灰质炎病毒。
(3)将____________连接到专门识别某种肿瘤细胞的单克隆抗体上，单克隆抗体就会像“生物导弹”一样携带药物________地聚集到肿瘤细胞，________地杀死肿瘤细胞。
判断正误
(1)单克隆抗体可作为诊断试剂，具有快捷、准确的特点(　　)
(2)单克隆抗体可以对体内的肿瘤进行定位(　　)
(3)单克隆抗体不能用于治疗疾病(　　)
任务三：单克隆抗体作为运载药物的应用
请根据资料，回答下列问题：
资料　使用高效的细胞毒素类药物进行化疗可以有效杀伤肿瘤细胞。但细胞毒素没有特异性，在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害，这限制了它在临床上的应用。抗体—药物偶联物(ADC)通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由抗体、接头和药物(如细胞毒素)三部分组成，它的作用机制如图所示。
(1)据图分析，ADC进入肿瘤细胞的方式是什么？需不需要能量？
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
(2)ADC的抗体和药物各具有什么作用？
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
(3)ADC与传统的化疗相比较具有什么优势？
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
　单克隆抗体在临床上的应用
(1)作为诊断试剂：单克隆抗体被广泛应用于一些感染性疾病的检测、肿瘤的诊断、激素和细胞因子的测定等。
(2)治疗疾病：单克隆抗体已被广泛应用于某些疾病的治疗。
(3)运载药物：单克隆抗体可以和抗癌药物结合，携带抗癌药物准确地聚集到癌细胞，专一地杀死癌细胞，具有靶点清楚、毒副作用小的优点。
3．下列关于单克隆抗体的说法，不正确的是(　　)
A．单克隆抗体可以治疗各种疾病
B．单克隆抗体在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥着重要的作用
C．单克隆抗体能准确地识别各种抗原物质的细微差别，并跟一定抗原发生特异性结合
D．单克隆抗体可以制成抗体—药物偶联物(ADC)
4．(2024·衢州高二期末)长春新碱(VCR)是一种从长春花中萃取的生物碱，通过抑制微管蛋白聚合妨碍纺锤体的形成，从而阻断细胞分裂，具有非常高的毒性。将 VCR 与单克隆抗体通过特殊的接头连接形成抗体—药物偶联物(ADC)，可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，ADC的作用机制如图。下列分析错误的是(　　)
A．单克隆抗体携带 VCR 与肿瘤细胞特异性结合
B．溶酶体内的蛋白酶催化 VCR 和抗体之间肽键的断裂
C．纺锤体形成异常可激活细胞凋亡相关基因的表达
D．VCR 通过抑制微管蛋白的聚合从而抑制细胞分裂
答案精析
一、梳理教材新知
1．融合因子　相同　不同　远　新特性　细胞膜的流动性　聚乙二醇　电脉冲融合　病毒诱导　单克隆抗体
2．(1)①抗原　血清　②特异性　(2)①B淋巴细胞　单一型　②一种　无限生长繁殖　骨髓瘤　特异性抗体　无限增殖　杂交瘤　杂交瘤　传代培养　③骨髓瘤　B淋巴　细胞融合　杂交瘤　专一抗体　④大量制备　特异性强　灵敏度高
判断正误
(1)×　(2)√　(3)√　(4)×
提示　(1)聚乙二醇能诱导植物原生质体融合和动物细胞融合。(4)制备单克隆抗体的结果是获得杂交瘤细胞的产物，未产生完整个体，不能体现细胞的全能性。
探究核心知识
任务一
1．病人体内的病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。
2．(1)动物细胞融合技术的原理是细胞膜的流动性；植物体细胞杂交技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
(2)都可用聚乙二醇融合法和电流刺激(电脉冲融合)法诱导融合；但动物细胞还可用灭活病毒诱导法诱导细胞融合。
(3)动物细胞融合技术最终得到的是杂交瘤细胞，而植物体细胞杂交技术最终得到的是杂种植株。
任务二
(1)目的是使小鼠发生免疫反应，能从该小鼠的脾中得到产生抗体的B淋巴细胞。
(2)血清分离抗体即多克隆抗体有很多种抗体混合在一起，能够识别很多种抗原，导致特异性差。单克隆抗体是由一个B淋巴细胞增殖形成的细胞群所产生的单一型抗体分子，特异性强。
(3)融合的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞、融合的B淋巴细胞和B淋巴细胞、融合的骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞。利用HAT选择培养基筛选杂交瘤细胞。
落实思维方法
1．A　[常用于诱导动物细胞融合的方法有聚乙二醇融合法、电脉冲融合法和灭活病毒诱导法等，不包括紫外线照射法，A错误。]
2．C　[HAT培养基上筛选出的杂交瘤细胞，并不都能产生高纯度的目标抗体，A错误；杂交瘤细胞因为可以通过补救合成途径合成DNA，所以能在HAT培养基上大量增殖，B错误；已免疫的B淋巴细胞及其相互融合细胞的全合成途径被A物质所阻断，但可以通过补救合成途径合成DNA，从而能在HAT培养基上增殖，D错误。]
二、梳理教材新知
(1)探针　(2)快捷　准确　诊断试剂　(3)抗癌药物　准确　专一
判断正误
(1)√　(2)√　(3)×
提示　(3)单克隆抗体能与抗原结合，能用于治疗某些免疫相关疾病。
探究核心知识
(1)胞吞；需要能量。
(2)抗体具有靶向运输作用；药物具有杀死肿瘤细胞的作用。
(3)ADC协同发挥了抗体特异性识别的靶向作用和细胞毒素对肿瘤细胞的杀伤作用，具有靶点清楚、毒副作用小的优点。
落实思维方法
3．A
4．B　[VCR 能与单克隆抗体通过特殊的接头连接形成抗体—药物偶联物(ADC)，可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，据此可知，单克隆抗体携带 VCR 与肿瘤细胞特异性结合，A正确；长春新碱(VCR)的化学成分不是蛋白质，据此可推测VCR和抗体之间并未形成肽键，B错误；结合图示可知，纺锤体形成异常可激活细胞凋亡相关基因的表达，进而诱发肿瘤细胞的凋亡，从而起到治疗肿瘤的目的，C正确。](共67张PPT)
第三节
通过细胞融合可产生具有新特性的细胞
第三章 动物细胞工程
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学习目标
1.概述利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体的过程。
2.举例说明单克隆抗体在医学等方面的应用价值。
内容索引
一、利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体的过程
课时对点练
二、单克隆抗体的应用价值
利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体的过程
一
梳理　教材新知
1.细胞融合
提醒　(1)诱导因素诱导细胞融合的原因：在这些诱导因素的作用下，细胞膜会发生一定程度的损伤，细胞就可以实现相互粘连而融合在一起。
(2)仙台病毒被灭活后才可用于细胞融合，灭活的手段是经紫外线照射。
融合因子
相同
不同
远
新特性
细胞膜的流动性
聚乙二醇
电脉冲融合
病毒诱导
单克隆抗体
2.多克隆抗体与单克隆抗体的比较
(1)多克隆抗体
①获取方法：给动物注射相应　　　后从其　　　中进行分离提取。
②不足：很多种抗体混合在一起，　　　　差。
抗原
血清
特异性
(2)单克隆抗体
①概念：由一个　　　　　增殖形成的细胞群所产生的 　　 抗体分子。
②制备原理：每一种B淋巴细胞只产生 　　特异的抗体，但B淋巴细胞的寿命有限，其在体外培养时不能　　　　　　　。将寿命有限的B淋巴细胞与具有无限繁殖能力的 细胞融合，经筛选后就可以获得既能产生　　　　　　，又能在正常培养条件下进行　　　　　的_______
细胞。通过对　　　　细胞进行　　　　　，就能得到单克隆抗体。
B淋巴细胞
单一型
一种
无限生长繁殖
骨髓瘤
特异性抗体
无限增殖
杂交瘤
杂交瘤
传代培养
③制备过程
骨髓瘤
B淋巴
细胞融合
杂交
瘤
④优点：纯度高，可　　　　　，在应用时具有　　　　　、_________的特点。
专一抗体
大量制备
特异性强
灵敏度高
(1)聚乙二醇可以诱导植物原生质体融合，但不能诱导动物细胞融合
(　　)
×
(2)灭活的病毒可用于诱导动物细胞融合(　　)
(3)一种B淋巴细胞只能产生一种特异的抗体(　　)
(4)单克隆抗体制备技术和植物体细胞杂交技术均依据细胞的全能性
(　　)
√
提示　聚乙二醇能诱导植物原生质体融合和动物细胞融合。
√
提示　制备单克隆抗体的结果是获得杂交瘤细胞的产物，未产生完整个体，不能体现细胞的全能性。
×
任务一：动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较
1.19世纪30年代，科学家曾在患肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中，观察到多核细胞。如何解释这一现象？
探究　核心知识
提示　病人体内的病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。
2.比较动物细胞融合技术和植物体细胞杂交技术。
(1)动物细胞融合和植物体细胞杂交技术的原理分别是什么？
提示　动物细胞融合技术的原理是细胞膜的流动性；植物体细胞杂交技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
(2)两者的细胞融合在方法上有什么异同？
提示　都可用聚乙二醇融合法和电流刺激(电脉冲融合)法诱导融合；但动物细胞还可用灭活病毒诱导法诱导细胞融合。
(3)两者在最终结果上有什么不同？
提示　动物细胞融合技术最终得到的是杂交瘤细胞，而植物体细胞杂交技术最终得到的是杂种植株。
任务二：制备单克隆抗体的过程
根据单克隆抗体的制备过程，回答以下问题：
(1)给小鼠注射特定抗原的目的是什么？
提示　目的是使小鼠发生免疫反应，能从该小鼠的脾中得到产生抗体的B淋巴细胞。
(2)血清分离抗体和单克隆抗体有什么不同？
提示　血清分离抗体即多克隆抗体有很多种抗体混合在一起，能够识别很多种抗原，导致特异性差。单克隆抗体是由一个B淋巴细胞增殖形成的细胞群所产生的单一型抗体分子，特异性强。
(3)B淋巴细胞与骨髓瘤细胞经诱导融合后，融合的细胞有哪些(只考虑两两融合)？如何筛选杂交瘤细胞？
提示　融合的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞、融合的B淋巴细胞和B淋巴细胞、融合的骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞。利用HAT选择培养基筛选杂交瘤细胞。
核心归纳
动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较
提醒　灭活病毒诱导法是诱导动物细胞融合的特有方法，不适合用于诱导植物原生质体融合。
1.(2023·台州高二期末)下列关于动物细胞融合的说法不正确的是
A.常用于诱导动物细胞融合的方法有聚乙二醇融合法、电脉冲融合法、
紫外线照射法和灭活病毒诱导法等
B.动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核
　细胞称为杂交细胞
C.动物细胞融合反映了动物细胞的细胞膜具有一定的流动性
D.动物细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能
√
落实　思维方法
常用于诱导动物细胞融合的方法有聚乙二醇融合法、电脉冲融合法和灭活病毒诱导法等，不包括紫外线照射法，A错误。
2.细胞中DNA的合成途径有两条，过程如图所示。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转移酶和激酶，其全合成途径可被A物质所阻断。制备单克隆抗体所使用的骨髓瘤细胞缺乏转移酶。现用加入H、A、T三种物质的HAT培养基来筛选特定的杂交瘤细胞。
下列关于筛选原理的叙述，正确的是
A.HAT培养基上筛选出的所有
　杂交瘤细胞既能大量增殖又
　能产生高纯度的目标抗体
B.杂交瘤细胞在HAT培养基上
　可进行上述两条途径，所以能大量增殖
C.骨髓瘤细胞及其相互融合的细胞因无法进行上述两条途径而不能在
　HAT培养基上增殖
D.已免疫的B淋巴细胞及其相互融合的细胞因全合成途径被阻断而不能
　在HAT培养基上增殖
√
HAT培养基上筛选出的杂交瘤细胞，并不都能产生高纯度的目标抗体，A错误；
杂交瘤细胞因为可以通过补
救合成途径合成DNA，所以能在HAT培养基上大量增殖，B错误；
已免疫的B淋巴细胞及其相互融合细胞的全合成途径被A物质所阻断，但可以通过补救合成途径合成DNA，从而能在HAT培养基上增殖，D错误。
单克隆抗体的应用价值
二
单克隆抗体的应用
(1)作为特异性的　　　，研究相应抗原蛋白的结构、细胞学分布及功能。
(2)可以　　　、　　　地诊断和治疗一些疾病。例如，利用脊髓灰质炎病毒的单克隆抗体做 　　　　，在10分钟内就可以确诊患病儿童是否感染脊髓灰质炎病毒。
(3)将　　　　　连接到专门识别某种肿瘤细胞的单克隆抗体上，单克隆抗体就会像“生物导弹”一样携带药物　　　地聚集到肿瘤细胞，_____地杀死肿瘤细胞。
梳理　教材新知
探针
快捷
准确
诊断试剂
抗癌药物
准确
专一
(1)单克隆抗体可作为诊断试剂，具有快捷、准确的特点(　　)
(2)单克隆抗体可以对体内的肿瘤进行定位(　　)
(3)单克隆抗体不能用于治疗疾病(　　)
√
√
×
提示　单克隆抗体能与抗原结合，能用于治疗某些免疫相关疾病。
任务三：单克隆抗体作为运载药物的应用
请根据资料，回答下列问题：
资料　使用高效的细胞毒素类药物进行化疗可以有效杀伤肿瘤细胞。但细胞毒素没有特异性，在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害，这限制了它在临床上的应用。抗体—药物偶联物(ADC)通过将细胞毒素与能特异性识别
探究　核心知识
肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由抗体、接头和药物(如细胞毒素)三部分组成，它的作用机制如图所示。
(1)据图分析，ADC进入肿瘤细胞的方式是什么？需不需要能量？
提示　胞吞；需要能量。
(2)ADC的抗体和药物各具有什么作用？
提示　抗体具有靶向运输作用；药物具有杀死肿瘤细胞的作用。
(3)ADC与传统的化疗相比较具有什么优势？
提示　ADC协同发挥了抗体特异性识别的靶向作用和细胞毒素对肿瘤细胞的杀伤作用，具有靶点清楚、毒副作用小的优点。
核心归纳
(1)作为诊断试剂：单克隆抗体被广泛应用于一些感染性疾病的检测、肿瘤的诊断、激素和细胞因子的测定等。
(2)治疗疾病：单克隆抗体已被广泛应用于某些疾病的治疗。
(3)运载药物：单克隆抗体可以和抗癌药物结合，携带抗癌药物准确地聚集到癌细胞，专一地杀死癌细胞，具有靶点清楚、毒副作用小的优点。
单克隆抗体在临床上的应用
3.下列关于单克隆抗体的说法，不正确的是
A.单克隆抗体可以治疗各种疾病
B.单克隆抗体在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥着重要的作用
C.单克隆抗体能准确地识别各种抗原物质的细微差别，并跟一定抗原发
　生特异性结合
D.单克隆抗体可以制成抗体—药物偶联物(ADC)
√
落实　思维方法
4.(2024·衢州高二期末)长春新碱(VCR)是一种从长春花中萃取的生物碱，通过抑制微管蛋白聚合妨碍纺锤体的形成，从而阻断细胞分裂，具有非常高的毒性。将 VCR 与单克隆抗体通过特殊的接头连接形成抗体—药物偶联物(ADC)，可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，ADC的作用机制如图。下列分析错误的是
A.单克隆抗体携带 VCR 与肿瘤细胞特异性结合
B.溶酶体内的蛋白酶催化 VCR 和抗体之间肽键
　的断裂
C.纺锤体形成异常可激活细胞凋亡相关基因的
　表达
D.VCR 通过抑制微管蛋白的聚合从而抑制细胞分裂
√
VCR 能与单克隆抗体通过特殊的接头连接形成抗体—药物偶联物(ADC)，可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，据此可知，单克隆抗体携带 VCR 与肿瘤细胞特异性结合，A正确；
长春新碱(VCR)的化学成分不是蛋白质，据此可推测VCR和抗体之间并未形成肽键，B错误；
结合图示可知，纺锤体形成异常可激活细胞凋亡相关基因的表达，进而诱发肿瘤细胞的凋亡，从而起到治疗肿瘤的目的，C正确。
网络构建
课时对点练
三
题组一　细胞融合技术
1.下列关于动物细胞融合的说法，错误的是
A.细胞融合前要用酶解法分散成单个细胞
B.细胞融合的原理是细胞膜的流动性
C.融合后得到的杂交细胞能表现出两个亲本细胞的特点
D.融合后得到的杂交细胞需经过脱分化和再分化过程
√
对点训练
1
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对点训练
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动物细胞融合前需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，将组织细胞分散成单个细胞，A正确；
融合后得到的杂交细胞获得了两个亲本的遗传物质，能表现出两个亲本细胞的特点，C正确；
动物细胞融合后得到的杂交细胞没有脱分化和再分化过程，D错误。
2.下列关于动物细胞融合技术的叙述，错误的是
A.细胞融合技术能应用于细胞遗传、细胞免疫等研究
B.动物细胞融合的成功是细胞膜具有流动性的有力证据
C.动物细胞融合的基本原理与植物原生质体融合的基本原理不同
D.除了化学法和物理法外，动物细胞融合还可以由灭活病毒诱导
√
对点训练
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动物细胞融合与植物原生质体融合的原理都是细胞膜的流动性，C错误。
3.如图表示仙台病毒诱导动物细胞融合的部分过程，下列叙述正确的是
A.细胞a和细胞b必须为同种细胞才能融合
B.细胞c同时有细胞a和细胞b的遗传物质
C.该融合过程体现了细胞膜具有选择透过性
D.此过程的原理是动物细胞具有全能性
对点训练
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不同种的细胞也能融合，如人、鼠细胞融合，A错误；
由题图可知，细胞a、b融合成了一个细胞c，细胞c同时有细胞a和细胞b的遗传物质，B正确；
该融合过程体现了细胞膜具有流动性，C错误；
此过程的原理是动物细胞膜具有流动性，D错误。
对点训练
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题组二　单克隆抗体的制备
4.(2024·杭州高二期末)缺失基因H的细胞无法在选择培养基甲中生存，正常的B淋巴细胞在体外培养时分裂次数有限。欲使用选择培养基甲筛选出骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合的能无限增殖的杂交瘤细胞。据此推测，在单克隆抗体制备过程中缺失基因H的细胞是
A.B淋巴细胞 B.骨髓瘤细胞
C.杂交瘤细胞 D.B淋巴细胞和骨髓瘤细胞
对点训练
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对点训练
缺失基因H的细胞无法在选择培养基甲中生存，正常的B淋巴细胞在体外培养时分裂次数有限，杂交瘤细胞可以在培养基中生存，因此缺失基因H的细胞是能无限增殖的骨髓瘤细胞。
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5.(2024·舟山高二期末)甲流是由甲流病毒H1N1引起的急性呼吸道感染。甲流病毒H1N1表面的血凝素抗原(HA)可识别宿主细胞的特定受体，利用杂交瘤技术制备的抗HA单克隆抗体可用于快速诊断甲流病毒的感染。为制备抗HA的单克隆抗体，研究人员设计如图所示的技术路线。下列叙述正确的是
A.图中小鼠多次注射HA后，从肝脏中
　获取B淋巴细胞
B.经选择培养后获得的杂交瘤细胞均
　能产生抗HA抗体
C.用多孔细胞板培养时每孔至少含有一个细胞
D.为获得纯度较高的抗HA抗体，扩大培养时一般不添加动物血清
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对点训练
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对点训练
经过免疫的小鼠，一般从脾脏中获得B淋巴细胞，A错误；
杂交瘤细胞既能产生抗体也能无限增殖，但杂交瘤细胞产生的未
必是HA抗体，需要再进行抗原抗体检测，B错误；
用多孔细胞板培养时，每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞，C错误；
动物血清中含有抗体，为了获得纯度高的抗体，不添加血清，D正确。
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6.关于制备单克隆抗体的过程，下列叙述错误的是
A.为获得足量相应的B淋巴细胞，可多次给小鼠注射特定抗原
B.细胞融合前，已免疫的脾细胞不需要经过原代培养扩大
C.用聚乙二醇诱导细胞融合后，可加入过量培养液终止融合
D.杂交瘤细胞在体外培养时，常会发生接触抑制现象
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对点训练
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对点训练
制备单克隆抗体的过程中，需反复向小鼠体内注射特定抗原，刺激相应B淋巴细胞的产生，A正确；
一般认为，已免疫的脾细胞(含浆细胞)已高度分化，不能通过原代培养扩大细胞数量，B正确；
通过添加适宜浓度的聚乙二醇诱导细胞融合，在细胞融合一定时间后，加入过量的培养液进行稀释，目的是降低聚乙二醇浓度，使其失去诱导融合作用，C正确；
杂交瘤细胞培养时不会出现接触抑制现象，D错误。
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题组三　单克隆抗体的应用
7.由一个B淋巴细胞增殖形成的细胞群所产生的单一型抗体分子称为单克隆抗体。下列有关单克隆抗体制备及应用的叙述，正确的是
A.单克隆抗体可直接用于流感病毒的核酸检测
B.部分杂交瘤细胞不能合成抗体可能是因为染色体丢失
C.杂交瘤技术制备单克隆抗体过程涉及多次抗原检测
D.“生物导弹”的原理是利用单克隆抗体能特异性结合癌细胞上抗原，
　从而使癌细胞死亡
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单克隆抗体的化学本质是蛋白质，不能直接用于流感病毒的核酸检测，A错误；
部分杂交瘤细胞不能合成抗体，可能发生了基因的缺失，基因缺失可能是因为染色体丢失，B正确；
杂交瘤技术制备单克隆抗体过程涉及多次抗体检测，结果呈阳性的才是需要的，C错误；
“生物导弹”的原理是借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，单克隆抗体只起定位作用，不能杀死癌细胞，D错误。
8.如图是一种“生物导弹”的作用原理示意图。阿霉素是微生物的代谢产物，进入人体后可抑制DNA和RNA的合成，是一种抗肿瘤药物，对正常细胞也有一定毒性。下列说法不正确的是
A.单克隆抗体由杂交瘤细胞合成和分泌
B.活化阿霉素抑制细胞中DNA的复制，
　不抑制转录
C.仅注射生物导弹不能对肿瘤细胞起抑制作用
D.单克隆抗体特异性强，能减轻对正常细胞的伤害
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阿霉素是一种抗肿瘤药物，可抑制DNA和RNA的合成，所以活化阿霉素能抑制细胞中DNA的复制和转录过程，B错误；
在治疗中应将非活化磷酸阿霉素和生物导弹同时注射，C正确；
单克隆抗体特异性强，使阿霉素能定位杀死肿瘤细胞，从而减轻阿霉素对正常细胞的伤害，D正确。
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9.(2024·台州高二期末)HCG(人绒毛膜促性腺激素)是女性怀孕后滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下列有关叙述正确的是
A.体外培养单个B细胞也可以获得大量抗HCG
　的单克隆抗体
B.多孔细胞板中的细胞为B淋巴细胞和鼠瘤细胞
　的融合细胞
C.过程③产生的细胞集落a～d既能大量繁殖，又能产生抗体
D.图中细胞集落c可用于扩大化培养生产抗HCG单克隆抗体
√
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体外培养的单个B细胞寿命有限，不能获得大量抗HCG的单克隆抗体，A错误；
多孔细胞板中有三种细胞，即未融合的亲本细胞、融合的具有同种核的细胞以及杂交瘤细胞，B错误；
图中 a～d是经过筛选的杂交瘤细胞，所以既能大量繁殖，又能产生抗体，C正确；
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细胞集落a能够产生阳性反应，故可用于扩大化培养生产抗HCG单克隆抗体，D错误。
10.一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是
A.注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大
B.单抗制备过程中通常将从血液中提取出的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合
C.利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗
D.p72部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况
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单抗的制作需要筛选，而多抗不需要筛选，抗原纯度越高，产生的多抗纯度越高，因此抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响小，A错误；
单抗制备过程中通常是免疫后将脾脏破碎，然后用离心法将脾细胞(包含各种产生或不产生抗体的B淋巴细胞)和红细胞分开，然后用脾细胞与骨髓瘤细胞融合，而不能直接分离出B淋巴细胞，B错误；
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非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72上有多种抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，所以向小鼠体内注入p72后，可以刺激小鼠产生多种抗p72的单抗，C错误；
p72部分结构改变只改变了部分抗原决定簇，因此由这部分抗原决定簇产生的抗体失效，但由于还存在由其他抗原决定簇刺激机体产生的抗体，所以多抗仍有效，D正确。
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11.(2024·丽水高二期末)次黄嘌呤和胸腺脱氧核苷为细胞生存的关键成分。科学家在研究基因定位时，将不能利用次黄嘌呤的人体突变细胞株(HGPRT—)和不能利用胸腺脱氧核苷的小鼠突变细胞株(TK—)进行融合，融合细胞在培养过程中人的染色体会逐代随机丢失。经选择培养基筛选后，得到3株稳定的细胞株，如表。下列叙述错误的是
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细胞株编号 甲 乙 丙
所含人染色体编号 11,14,17,22 7,11,14,17 5,7,17,21
A.可用聚乙二醇或灭活病毒诱导人和小鼠细胞融合
B.增殖过程中的细胞株甲最多含有8条人的染色体
C.该选择培养基中应缺乏次黄嘌呤和胸腺脱氧核苷
D.由表中信息可推测人的TK基因可能位于17号染色体上
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细胞株编号 甲 乙 丙
所含人染色体编号 11,14,17,22 7,11,14,17 5,7,17,21
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将人细胞与小鼠细胞进行细胞融合时，可用灭活的病毒作为诱导剂，也可以采用物理法(电脉冲融合)和化学法(聚乙二醇处理)，A正确；
据表格可知，细胞株甲含有4条人的染色体，在有丝分裂后期，着丝粒分裂，染色体数目加倍，因此最多含有8条人的染色体，B正确；
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所含人染色体编号 11,14,17,22 7,11,14,17 5,7,17,21
综合强化
用人体不能利用次黄嘌呤的突变细胞株和小鼠不能利用胸腺脱氧核苷的突变细胞株进行融合，不能同时利用这两类物质的细胞不能存活，故要筛选两两融合的细胞，可将融合细胞置于添加次黄嘌呤、胸腺脱氧核苷的培养基上进行筛选，C错误；
TK基因由人体细胞提供，因此，各细胞株都含有的染色体很可能就是TK基因所在的染色体，即17号染色体，D正确。
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细胞株编号 甲 乙 丙
所含人染色体编号 11,14,17,22 7,11,14,17 5,7,17,21
12.(2024·宁波余姚中学高二期中)如图所示，将由两种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是
A.双抗可同时与两种抗原结合
B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞
C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的两种抗原
D.同时注射两种抗原可刺激B淋巴细胞分化为产双抗的效应B细胞
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根据抗原和抗体发生特异性结合的原理推测，双抗可同时与两种抗原结合，A正确；
根据抗原与抗体能够发生特异性结合的特性，利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞，B正确；
在两种不同的抗原刺激下，B淋巴细胞增殖、分化产生不同的效应B细胞，因此，筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的两种抗原来进行抗原－抗体杂交检测，从而实现对双抗的筛选，C正确；
同时注射两种抗原可刺激B淋巴细胞增殖、分化成不同的效应B细胞，而不是分化成产双抗的效应B细胞，D错误。
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13.如图是单克隆抗体制备流程示意图。请回答下列问题：
(1)______________技术是单克隆抗体技术的基础。
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(2)在图中HAT培养基上，未融合的
细胞和融合的具有同核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长。动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用_________________作为诱导因素。
动物细胞融合
灭活的(动物)病毒
(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最主要的优点是____________
______________________________。
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纯度高，特异性强，灵敏度高，并可大量制备
(4)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的____________________特点，又具备淋巴细胞的______________
____________特点，经过选择培养
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的杂交瘤细胞，还需进行__________和__________，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。最后将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注入小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或_________中，就可以提取出大量的单克隆抗体了。
大量增殖(无限增殖)
分泌专一抗体
(特定抗体)
克隆培养
抗体检测
小鼠腹水
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14.(2024·嘉兴高二期末)乳腺癌严重威胁妇女健康。Her2基因属于原癌基因，如果Her2基因突变而过度表达，会生成大量Her2蛋白，从而导致细胞无限增殖。曲妥珠单抗(T)是抗Her2蛋白的单克隆抗体，它可附着在Her2蛋白上阻断癌细胞增殖。但是Her2蛋白阳性晚期乳腺癌治疗中会出现耐药性，临床疗效达
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到瓶颈。大量临床研究表明，曲妥珠单抗(T)与细胞毒性药物(DM1)偶联形成T－DM1，使用T－DM1能够突破Her2阳性晚期乳腺癌治疗的瓶颈，解决了耐药性问题。T－DM1在患者体内的作用如图所示。回答下列问题：
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(1)生产曲妥珠单抗(T)需用到的动物细胞工程技术有______________和______
__________。
动物细胞培养
动物
细胞融合
单克隆抗体制备过程所采用的技术手段有动物细胞培养和动物细胞融合。
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(2)DM1通过与_____________结合，实现了对________细胞的选择性杀伤，解决了DM1无差别地杀伤细胞的药物副作用，也解决了细胞对____________的耐药性。
曲妥珠单抗
乳腺癌
曲妥珠单抗
综合强化
综合强化
Her2基因属于原癌基因，原癌基因是
控制细胞生长和分裂的一类基因，如
果Her2基因突变而过度表达，会生成
大量Her2蛋白，从而导致细胞无限增
殖。曲妥珠单抗(T)与细胞毒性药物
(DM1)偶联形成T－DM1，实现了对乳腺癌细胞的选择性杀伤，同时也解决了细胞对曲妥珠单抗的耐药性。
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(3)在T－DM1发挥作用的机制中，曲妥珠单抗的作用是__________和________
_______________。
运载药物
特异性
识别Her2蛋白
由题图可知，在T－DM1发挥作用的机制中，曲妥珠单抗一方面可以运载细胞毒性药物(DM1)，另一方面可以特异性识别Her2蛋白，实现了对乳腺癌细胞的选择性杀伤。
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14作业13　通过细胞融合可产生具有新特性的细胞
(分值：100分)
第1～2题，每题5分；第3～12题，每题6分，共70分。
题组一　细胞融合技术
1．下列关于动物细胞融合的说法，错误的是(　　)
A．细胞融合前要用酶解法分散成单个细胞
B．细胞融合的原理是细胞膜的流动性
C．融合后得到的杂交细胞能表现出两个亲本细胞的特点
D．融合后得到的杂交细胞需经过脱分化和再分化过程
2．下列关于动物细胞融合技术的叙述，错误的是(　　)
A．细胞融合技术能应用于细胞遗传、细胞免疫等研究
B．动物细胞融合的成功是细胞膜具有流动性的有力证据
C．动物细胞融合的基本原理与植物原生质体融合的基本原理不同
D．除了化学法和物理法外，动物细胞融合还可以由灭活病毒诱导
3．如图表示仙台病毒诱导动物细胞融合的部分过程，下列叙述正确的是(　　)
A．细胞a和细胞b必须为同种细胞才能融合
B．细胞c同时有细胞a和细胞b的遗传物质
C．该融合过程体现了细胞膜具有选择透过性
D．此过程的原理是动物细胞具有全能性
题组二　单克隆抗体的制备
4．(2024·杭州高二期末)缺失基因H的细胞无法在选择培养基甲中生存，正常的B淋巴细胞在体外培养时分裂次数有限。欲使用选择培养基甲筛选出骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合的能无限增殖的杂交瘤细胞。据此推测，在单克隆抗体制备过程中缺失基因H的细胞是(　　)
A．B淋巴细胞
B．骨髓瘤细胞
C．杂交瘤细胞
D．B淋巴细胞和骨髓瘤细胞
5．(2024·舟山高二期末)甲流是由甲流病毒H1N1引起的急性呼吸道感染。甲流病毒H1N1表面的血凝素抗原(HA)可识别宿主细胞的特定受体，利用杂交瘤技术制备的抗HA单克隆抗体可用于快速诊断甲流病毒的感染。为制备抗HA的单克隆抗体，研究人员设计如图所示的技术路线。下列叙述正确的是(　　)
A．图中小鼠多次注射HA后，从肝脏中获取B淋巴细胞
B．经选择培养后获得的杂交瘤细胞均能产生抗HA抗体
C．用多孔细胞板培养时每孔至少含有一个细胞
D．为获得纯度较高的抗HA抗体，扩大培养时一般不添加动物血清
6．关于制备单克隆抗体的过程，下列叙述错误的是(　　)
A．为获得足量相应的B淋巴细胞，可多次给小鼠注射特定抗原
B．细胞融合前，已免疫的脾细胞不需要经过原代培养扩大
C．用聚乙二醇诱导细胞融合后，可加入过量培养液终止融合
D．杂交瘤细胞在体外培养时，常会发生接触抑制现象
题组三　单克隆抗体的应用
7．由一个B淋巴细胞增殖形成的细胞群所产生的单一型抗体分子称为单克隆抗体。下列有关单克隆抗体制备及应用的叙述，正确的是(　　)
A．单克隆抗体可直接用于流感病毒的核酸检测
B．部分杂交瘤细胞不能合成抗体可能是因为染色体丢失
C．杂交瘤技术制备单克隆抗体过程涉及多次抗原检测
D．“生物导弹”的原理是利用单克隆抗体能特异性结合癌细胞上抗原，从而使癌细胞死亡
8．如图是一种“生物导弹”的作用原理示意图。阿霉素是微生物的代谢产物，进入人体后可抑制DNA和RNA的合成，是一种抗肿瘤药物，对正常细胞也有一定毒性。下列说法不正确的是(　　)
A．单克隆抗体由杂交瘤细胞合成和分泌
B．活化阿霉素抑制细胞中DNA的复制，不抑制转录
C．仅注射生物导弹不能对肿瘤细胞起抑制作用
D．单克隆抗体特异性强，能减轻对正常细胞的伤害
9．(2024·台州高二期末)HCG(人绒毛膜促性腺激素)是女性怀孕后滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下列有关叙述正确的是(　　)
A．体外培养单个B细胞也可以获得大量抗HCG的单克隆抗体
B．多孔细胞板中的细胞为B淋巴细胞和鼠瘤细胞的融合细胞
C．过程③产生的细胞集落a～d既能大量繁殖，又能产生抗体
D．图中细胞集落c可用于扩大化培养生产抗HCG单克隆抗体
10．一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是(　　)
A．注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大
B．单抗制备过程中通常将从血液中提取出的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合
C．利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗
D．p72部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况
11．(2024·丽水高二期末)次黄嘌呤和胸腺脱氧核苷为细胞生存的关键成分。科学家在研究基因定位时，将不能利用次黄嘌呤的人体突变细胞株(HGPRT—)和不能利用胸腺脱氧核苷的小鼠突变细胞株(TK—)进行融合，融合细胞在培养过程中人的染色体会逐代随机丢失。经选择培养基筛选后，得到3株稳定的细胞株，如表。下列叙述错误的是(　　)
细胞株编号 甲 乙 丙
所含人染色体编号 11,14,17,22 7,11,14,17 5,7,17,21
A.可用聚乙二醇或灭活病毒诱导人和小鼠细胞融合
B．增殖过程中的细胞株甲最多含有8条人的染色体
C．该选择培养基中应缺乏次黄嘌呤和胸腺脱氧核苷
D．由表中信息可推测人的TK基因可能位于17号染色体上
12．(2024·宁波余姚中学高二期中)如图所示，将由两种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是(　　)
A．双抗可同时与两种抗原结合
B．利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞
C．筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的两种抗原
D．同时注射两种抗原可刺激B淋巴细胞分化为产双抗的效应B细胞
13．(16分)如图是单克隆抗体制备流程示意图。请回答下列问题：
(1)__________________________技术是单克隆抗体技术的基础。
(2)在图中HAT培养基上，未融合的细胞和融合的具有同核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长。动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用__________________________作为诱导因素。
(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最主要的优点是______________________________。
(4)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的____________________________特点，又具备淋巴细胞的___________________________________特点，经过选择培养的杂交瘤细胞，还需进行__________________________和____________________，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。最后将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注入小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或________________中，就可以提取出大量的单克隆抗体了。
14．(14分)(2024·嘉兴高二期末)乳腺癌严重威胁妇女健康。Her2基因属于原癌基因，如果Her2基因突变而过度表达，会生成大量Her2蛋白，从而导致细胞无限增殖。曲妥珠单抗(T)是抗Her2蛋白的单克隆抗体，它可附着在Her2蛋白上阻断癌细胞增殖。但是Her2蛋白阳性晚期乳腺癌治疗中会出现耐药性，临床疗效达到瓶颈。大量临床研究表明，曲妥珠单抗(T)与细胞毒性药物(DM1)偶联形成T－DM1，使用T－DM1能够突破Her2阳性晚期乳腺癌治疗的瓶颈，解决了耐药性问题。T－DM1在患者体内的作用如图所示。回答下列问题：
(1)生产曲妥珠单抗(T)需用到的动物细胞工程技术有________________和_______________。
(2)DM1通过与______________结合，实现了对________细胞的选择性杀伤，解决了DM1无差别地杀伤细胞的药物副作用，也解决了细胞对______________的耐药性。
(3)在T－DM1发挥作用的机制中，曲妥珠单抗的作用是____________和________________。
答案精析
1．D　[动物细胞融合前需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，将组织细胞分散成单个细胞，A正确；融合后得到的杂交细胞获得了两个亲本的遗传物质，能表现出两个亲本细胞的特点，C正确；动物细胞融合后得到的杂交细胞没有脱分化和再分化过程，D错误。]
2．C　[动物细胞融合与植物原生质体融合的原理都是细胞膜的流动性，C错误。]
3．B　[不同种的细胞也能融合，如人、鼠细胞融合，A错误；由题图可知，细胞a、b融合成了一个细胞c，细胞c同时有细胞a和细胞b的遗传物质，B正确；该融合过程体现了细胞膜具有流动性，C错误；此过程的原理是动物细胞膜具有流动性，D错误。]
4．B　[缺失基因H的细胞无法在选择培养基甲中生存，正常的B淋巴细胞在体外培养时分裂次数有限，杂交瘤细胞可以在培养基中生存，因此缺失基因H的细胞是能无限增殖的骨髓瘤细胞。]
5．D　[经过免疫的小鼠，一般从脾脏中获得B淋巴细胞，A错误；杂交瘤细胞既能产生抗体也能无限增殖，但杂交瘤细胞产生的未必是HA抗体，需要再进行抗原抗体检测，B错误；用多孔细胞板培养时，每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞，C错误；动物血清中含有抗体，为了获得纯度高的抗体，不添加血清，D正确。]
6．D　[制备单克隆抗体的过程中，需反复向小鼠体内注射特定抗原，刺激相应B淋巴细胞的产生，A正确；一般认为，已免疫的脾细胞(含浆细胞)已高度分化，不能通过原代培养扩大细胞数量，B正确；通过添加适宜浓度的聚乙二醇诱导细胞融合，在细胞融合一定时间后，加入过量的培养液进行稀释，目的是降低聚乙二醇浓度，使其失去诱导融合作用，C正确；杂交瘤细胞培养时不会出现接触抑制现象，D错误。]
7．B　[单克隆抗体的化学本质是蛋白质，不能直接用于流感病毒的核酸检测，A错误；部分杂交瘤细胞不能合成抗体，可能发生了基因的缺失，基因缺失可能是因为染色体丢失，B正确；杂交瘤技术制备单克隆抗体过程涉及多次抗体检测，结果呈阳性的才是需要的，C错误；“生物导弹”的原理是借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，单克隆抗体只起定位作用，不能杀死癌细胞，D错误。]
8．B　[阿霉素是一种抗肿瘤药物，可抑制DNA和RNA的合成，所以活化阿霉素能抑制细胞中DNA的复制和转录过程，B错误；在治疗中应将非活化磷酸阿霉素和生物导弹同时注射，C正确；单克隆抗体特异性强，使阿霉素能定位杀死肿瘤细胞，从而减轻阿霉素对正常细胞的伤害，D正确。]
9．C　[体外培养的单个B细胞寿命有限，不能获得大量抗HCG的单克隆抗体，A错误；多孔细胞板中有三种细胞，即未融合的亲本细胞、融合的具有同种核的细胞以及杂交瘤细胞，B错误；图中 a～d是经过筛选的杂交瘤细胞，所以既能大量繁殖，又能产生抗体，C正确；细胞集落a能够产生阳性反应，故可用于扩大化培养生产抗HCG单克隆抗体，D错误。]
10．D　[单抗的制作需要筛选，而多抗不需要筛选，抗原纯度越高，产生的多抗纯度越高，因此抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响小，A错误；单抗制备过程中通常是免疫后将脾脏破碎，然后用离心法将脾细胞(包含各种产生或不产生抗体的B淋巴细胞)和红细胞分开，然后用脾细胞与骨髓瘤细胞融合，而不能直接分离出B淋巴细胞，B错误；非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72上有多种抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，所以向小鼠体内注入p72后，可以刺激小鼠产生多种抗p72的单抗，C错误；p72部分结构改变只改变了部分抗原决定簇，因此由这部分抗原决定簇产生的抗体失效，但由于还存在由其他抗原决定簇刺激机体产生的抗体，所以多抗仍有效，D正确。]
11．C　[将人细胞与小鼠细胞进行细胞融合时，可用灭活的病毒作为诱导剂，也可以采用物理法(电脉冲融合)和化学法(聚乙二醇处理)，A正确；据表格可知，细胞株甲含有4条人的染色体，在有丝分裂后期，着丝粒分裂，染色体数目加倍，因此最多含有8条人的染色体，B正确；用人体不能利用次黄嘌呤的突变细胞株和小鼠不能利用胸腺脱氧核苷的突变细胞株进行融合，不能同时利用这两类物质的细胞不能存活，故要筛选两两融合的细胞，可将融合细胞置于添加次黄嘌呤、胸腺脱氧核苷的培养基上进行筛选，C错误；TK基因由人体细胞提供，因此，各细胞株都含有的染色体很可能就是TK基因所在的染色体，即17号染色体，D正确。]
12．D　[根据抗原和抗体发生特异性结合的原理推测，双抗可同时与两种抗原结合，A正确； 根据抗原与抗体能够发生特异性结合的特性，利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞，B正确；在两种不同的抗原刺激下，B淋巴细胞增殖、分化产生不同的效应B细胞，因此，筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的两种抗原来进行抗原－抗体杂交检测，从而实现对双抗的筛选，C正确；同时注射两种抗原可刺激B淋巴细胞增殖、分化成不同的效应B细胞，而不是分化成产双抗的效应B细胞，D错误。]
13．(1)动物细胞融合　(2)灭活的(动物)病毒　(3)纯度高，特异性强，灵敏度高，并可大量制备　(4)大量增殖(无限增殖)　分泌专一抗体(特定抗体)　克隆培养　抗体检测　小鼠腹水
14．(1)动物细胞培养　动物细胞融合　(2)曲妥珠单抗　乳腺癌　曲妥珠单抗　(3)运载药物　特异性识别Her2蛋白
解析　(1)单克隆抗体制备过程所采用的技术手段有动物细胞培养和动物细胞融合。(2)Her2基因属于原癌基因，原癌基因是控制细胞生长和分裂的一类基因，如果Her2基因突变而过度表达，会生成大量Her2蛋白，从而导致细胞无限增殖。曲妥珠单抗(T)与细胞毒性药物(DM1)偶联形成T－DM1，实现了对乳腺癌细胞的选择性杀伤，同时也解决了细胞对曲妥珠单抗的耐药性。(3)由题图可知，在T－DM1发挥作用的机制中，曲妥珠单抗一方面可以运载细胞毒性药物(DM1)，另一方面可以特异性识别Her2蛋白，实现了对乳腺癌细胞的选择性杀伤。

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