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作业15　重点突破练(三)
(分值：100分)
第1～4题，每题3分；第5～13题，每题4分，共48分。
题组一　动物细胞培养
1．下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是(　　)
A．动物细胞培养时不可采用开放式培养
B．培养基中成分不能都采用高压蒸汽灭菌
C．细胞系需经酶消化制成细胞悬液
D．细胞株可以通过克隆培养得到
2．(2024·湖州高二期末)“细胞培养肉”技术是一种新型动物蛋白生产技术，其主要过程如图所示。下列叙述正确的是(　　)
A．过程①需要用胰蛋白酶进行处理
B．在生物反应器中培养的细胞丧失了贴壁生长的特性
C．过程②获得的肌肉组织可继续培养发育形成动物个体
D．生物反应器中加入血清是为了提供抗体以防止杂菌污染
3．(2023·杭州高二期中)如图为动物细胞培养过程中，动物细胞增殖情况的变化曲线(图中b、d两点表示经处理或筛选后继续培养)，下列相关叙述不正确的是(　　)
A．0a段的培养称为原代培养，可从中选择纯化出细胞株
B．ab段可能发生了接触抑制现象，需用胰蛋白酶处理
C．制备单克隆抗体时，应选图中c点的细胞与浆细胞融合形成杂交瘤细胞
D．cd段细胞增殖缓慢，以至于完全停止，此时部分细胞的核型可能会发生改变
4．下列关于小鼠成纤维细胞的培养过程及原理的叙述，正确的是(　　)
A．用胰蛋白酶将组织细胞的膜蛋白消化可获得单个的细胞
B．在培养基中添加胰岛素可促进细胞对葡萄糖的摄取
C．培养到一定时期的细胞停止增殖的主要原因是营养枯竭
D．培养过程中二倍体细胞可能会经脱分化形成癌细胞
题组二　利用核移植技术克隆动物
5．(2024·绍兴高二联考)如图为科研人员用蛙的肠上皮细胞进行克隆的一系列操作，下列有关说法错误的是(　　)
A．图中①处应选用未受精的卵细胞
B．图中②处可用紫外线破坏其细胞核
C．图中③处需要借助显微操作仪
D．图中④处需要胚胎体外培养与胚胎移植
6．(2023·金华高二期末)科学家利用核移植技术克隆出了多种动物。下列关于动物细胞核移植技术的叙述，正确的是(　　)
A．胚胎细胞核移植比成熟体细胞核移植成功的难度大
B．核移植过程中可通过显微操作法去除卵细胞中的细胞核
C．经过核移植得到的动物是克隆动物，克隆动物的性别无法确定
D．通过核移植方法培育的克隆动物遗传物质全部来自供体细胞核
7．下列关于动物克隆与植物克隆的叙述，正确的是(　　)
A．动物克隆与植物克隆的基本操作流程相同
B．动物细胞培养时可用滋养细胞支持细胞生长
C．动物细胞培养和植物组织培养的目的一致，都是为了获得某种优良个体
D．植物组织培养过程中通常用MS培养基，其除蔗糖外不含其他有机成分
8．为研究治疗性克隆技术能否用于帕金森病的治疗，科研人员利用人帕金森病模型鼠进行如图所示的实验。下列有关叙述错误的是(　　)
A．过程①中选择减数第二次分裂中期的卵细胞有利于细胞核全能性的恢复
B．过程②重组细胞培养一般经历了桑葚胚和囊胚等过程
C．过程③的关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达
D．过程④需要对受体A鼠注射免疫抑制剂以避免发生免疫排斥反应
题组三　利用细胞融合技术制备单克隆抗体
9．(2023·舟山高二期中)如图表示单克隆抗体制备的部分流程图，下列叙述正确的是(　　)
A．制备单克隆抗体的技术有动物细胞培养、动物细胞融合和胚胎移植技术
B．若要将HAT培养基中的细胞分开培养，一般不需要用胰蛋白酶处理
C．选育出产生高特异性抗体的细胞群体即为细胞系
D．该技术不能用于制作流感病毒抗原检测试剂盒
10．(2024·浙江强基联盟高二联考)甲胎蛋白(AFP)与肝癌的发生密切相关，临床上主要利用甲胎蛋白作为原发性肝癌的血清标志物，用于其诊断及疗效监测，某研究小组为制备抗AFP的单克隆抗体，设计流程如图所示，其中杂交瘤细胞可以利用HAT培养基筛选(HAT培养基是含次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶的选择培养基)。下列叙述错误的是(　　)
A．过程①需要用 HAT培养基和检测的抗原多次筛选
B．过程②中会表现出细胞贴壁生长和接触抑制现象
C．克隆培养杂交瘤细胞的关键是得到单个杂交瘤细胞
D．杂交瘤细胞多次传代培养后，用 AFP检测可能会表现阴性反应
11．(2024·宁波高二期末)科研人员以甲型H1N1流感病毒的HA蛋白为抗原对小鼠进行免疫，将获取的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，获得产生抗HA蛋白抗体的杂交瘤细胞。下列叙述正确的是(　　)
A．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞1∶1混合后，发生融合的细胞均为杂交瘤细胞
B．选择培养基上获得的杂交瘤细胞均可无限增殖，并产生抗HA蛋白抗体
C．可在培养液中添加一定量的抗生素，以防止杂交瘤细胞培养过程中的污染
D．抗HA蛋白抗体特异性强、灵敏度高，可广泛用于各种流感病毒的检测
题组四　胚胎工程技术
12．(2023·嘉兴高二月考)如图所示为早期胚胎发育过程，下列相关叙述错误的是(　　)
A．从a到e中，适宜于牛的胚胎移植的时期有d、e
B．图e的②称为囊胚腔
C．图e的③将来可发育成胚胎的附属结构或胚外结构
D．图中各阶段的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能
13．据报道，世界上仅剩下两头雌性北方白犀牛，实验室只留有冷冻的北方白犀牛的精子。若通过胚胎工程技术尝试拯救该物种，下列叙述正确的是(　　)
A．体外受精需要对精子进行获能处理使其获得能量后，才能受精
B．可用雌性北方白犀牛体细胞进行克隆，获得多头子代后，让其自行繁衍
C．用胚胎分割技术对桑葚胚阶段的胚胎进行分割，要注意将内细胞团均等分割
D．这样人工繁育的种群与野生种群相比，遗传多样性降低且野外生存能力下降
14．(16分)如图为哺乳动物的生殖和个体发育过程，请据图回答下面的问题：
(1)哺乳动物的精子和卵细胞在__________中完成受精作用。
(2)哺乳动物个体发育的起点是__________。
(3)图中“？”处应为________，内细胞团出现于________时期。
(4)(8分)图示 Ⅰ 过程为______________。过程①需经过多次细胞分裂才能完成，请在图示中绘出该过程中每个细胞的体积、核DNA含量与时间的关系。
15．(22分)自世界上第一只体细胞克隆羊多莉诞生以来，人类已经成功克隆了马、牛和猪等大型家畜，但体细胞克隆灵长类动物一直没有取得进展，究其原因主要是灵长类动物的卵细胞极为敏感，极轻微挤压都可能导致异常分裂，且细胞核移植到去核卵细胞后不能完全恢复到分化前的功能状态，导致胚胎发育率低。2017年，我国科学家利用“聪明的化学方法和操作技巧”成功培育出了体细胞克隆猴“中中”和“华华”，该成果一经公布轰动了全世界。如图所示为克隆猴的培育过程，分析回答相关问题：
(1)动物成体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是___________________。
(2)我国科学家经过多年的反复试验，可以在10 s之内对卵细胞进行去核操作，在15 s之内完成核移植，操作迅速使卵细胞受损极小，在技巧上保证了实验的成功。实际操作中，去核前应保证采集的卵细胞在体外培养至____________________期；核移植前需用灭活的仙台病毒对体细胞进行短暂处理，作用是_____________________________________________。
(3)“聪明的化学方法”也是保证实验成功的条件。我国科学家将组蛋白去甲基化酶(Kdm4d)的mRNA注入重组细胞，同时用组蛋白去乙酰化酶抑制剂(TSA)处理重组细胞，提高了胚胎的发育率和妊娠率。Kdm4d和TSA的作用是_________________________________，从而改变组蛋白的表观遗传修饰来调控基因的表达。Kdm4d和TSA处理前后基因的碱基序列________(填“会”或“不会”)发生改变。
(4)除操作技巧和化学方法的运用外，克隆猴的成功也得益于每一步严谨科学的实验操作。体外培养重组细胞时，培养液中除应含有细胞所需要的各种营养物质外，通常需要加入________或其他天然成分，将其置于含有____________________________混合气体的二氧化碳培养箱中培养。胚胎移植前还需对代孕母猴进行____________处理，以保证胚胎能够继续发育。
(5)(6分)体细胞克隆可以得到大量遗传背景相似或相同的实验动物，这样的实验动物用于医学研究的好处是______________________________________。与克隆小鼠相比，克隆猴更有利于对人类疾病的致病机制进行研究，原因是____________________________________。
16．(14分)(2024·浙江大学附属中学高二期中)长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，而近年发展起来的细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机。请据图回答下列问题：
　
(1)和受精有关的过程有：①第一次卵裂开始；②精卵识别；③精子头部进入；④雌、雄原核的形成；⑤核膜消失，雌、雄原核融合，其正确的顺序为________________(填序号)。
(2)超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射__________________。
(3)动物的早期胚胎移植到同种且___________________________________________与供体相同的其他雌性动物体内，
使之继续发育为新个体的技术叫作胚胎移植。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是活细胞的细胞膜__________________________。
(4)图1中试管牛的性别为____________________。图2中克隆羊多莉的遗传物质来自____________________________________，性状和____________________最接近。
答案精析
1．A　[造成培养基pH波动的主要物质是细胞代谢产生的CO2，为了解决这一问题，可采用开放式培养的方式，使细胞代谢产生的CO2及时溢出培养器皿，再通过给培养箱提供恒定的5%的CO2浓度，使之与培养基中的NaHCO3处于平衡状态，调节pH的相对稳定，A错误。]
2．A　[过程①需要用胰蛋白酶进行处理，目的是将动物的组织分散成单个细胞，获得单细胞悬液，A正确；在生物反应器中培养的细胞依然具有贴壁生长的特性，只不过进行了人为处理，如添加细胞支架等，B错误；过程②获得的肌肉组织再继续培养也不能发育形成动物个体，因为此时的细胞不能分裂分化成各种组织细胞，C错误；生物反应器中加入血清是为了提供人类未知的动物细胞培养所需的营养物质和某种生长因子，D错误。]
3．C　[通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株，A正确；ab段细胞不再增殖，可能发生了接触抑制现象，需要用胰蛋白酶处理，然后继续分瓶培养，B正确；制备单克隆抗体时，应选图中d点的细胞(处理后能无限增殖的细胞)与已免疫的B淋巴细胞融合形成杂交瘤细胞，C错误。]
4．B　[胰蛋白酶可以将动物组织细胞之间相连的蛋白质水解掉，细胞彼此分离，形成单个细胞，A错误；胰岛素具有促进组织细胞加速摄取、储存和利用葡萄糖的作用，在培养基中添加胰岛素可促进细胞对葡萄糖的摄取，B正确；培养到一定时期的细胞停止增殖的主要原因是接触抑制，C错误；培养过程中二倍体细胞可能会发生基因突变，形成癌细胞，D错误。]
5．D　[为了使核移植得到的重组细胞能正常发育，需要卵细胞提供细胞质，A正确；紫外线可以破坏细胞核，从而获得去核卵细胞，B正确；需要借助精密的显微操作仪才能完成核移植，C正确；蛙不是哺乳动物，其受精卵是在体外发育成新个体的，不需要进行胚胎移植，D错误。]
6．B　[成熟体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是动物胚胎细胞分化程度低，全能性容易体现，A错误；克隆动物的性别与提供细胞核的动物性别一致，C错误；通过核移植方法获得的克隆动物的细胞核中遗传物质来自供体细胞核，细胞质中遗传物质来自去核卵细胞，D错误。]
7．B　[动物细胞培养是获得细胞或者组织器官，植物组织培养是获得某种个体，C错误；植物组织培养过程中通常用MS培养基，其除蔗糖外，还可能含有有机氮源，D错误。]
8．D　[过程④移植的神经元细胞是由该小鼠自身细胞诱导分化而来，不会发生免疫排斥反应，D错误。]
9．B　[单克隆抗体的制备过程中不涉及胚胎移植技术，A错误；HAT培养基中的细胞本来就是处于游离状态，不需要用胰蛋白酶处理，B正确；细胞系指原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体，选育出产生高特异性抗体的细胞群体可无限增殖，不需要经传代培养，C错误；用流感病毒感染动物后，从被感染动物脾脏中获取B淋巴细胞后制作单克隆抗体，即可用于制作流感病毒抗原检测试剂盒，D错误。]
10．B　[过程①需要用 HAT培养基和检测的抗原多次筛选出杂交瘤细胞，A正确；过程②是杂交瘤细胞的生长过程，能无限增殖，不会表现出接触抑制现象， B错误；克隆培养是把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术，故克隆培养杂交瘤细胞的关键是得到单个杂交瘤细胞，C正确；杂交瘤细胞多次传代培养后，也可能会发生染色体丢失等变异，因此用 AFP检测可能会表现阴性反应，D正确。]
11．C　[B淋巴细胞与骨髓瘤细胞1∶1混合后，发生融合的细胞有杂交瘤细胞、融合的B淋巴细胞与B淋巴细胞、融合的骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞，A错误；选择培养基上获得的杂交瘤细胞都能无限增殖，但未必都能产生抗HA蛋白抗体，因此还需要进行抗体检测，B错误；可在培养液中添加一定量的抗生素，以防止杂交瘤细胞培养过程中的污染，因为抗生素可以抑制细菌和真菌的生长，从而创造无菌、无毒环境，C正确；抗HA蛋白抗体特异性强、灵敏度高，因而可用于甲型H1N1流感病毒的检测，D错误。]
12．D　[从a到e中，适宜于牛的胚胎移植的时期有d(桑葚胚期)、e(囊胚期)，A正确；图e的③(滋养层)将来可发育成胚胎的附属结构或胚外结构，C正确；图中囊胚期发生了细胞分化，桑葚胚期前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，D错误。]
13．D　[体外受精需要对精子进行获能处理使其具有受精的能力，而不是获得能量，A错误；用雌性北方白犀牛体细胞进行克隆获得多头子代后，由于后代均为雌性，因此不能让其自行繁衍，B错误；对囊胚阶段的胚胎进行分割时需要注意将内细胞团进行均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，C错误。]
14．(1)输卵管　(2)受精卵　(3)原肠胚　囊胚　(4)胚胎发育　如图所示
15．(1)体细胞分化程度高，表现全能性困难　(2)减数第二次分裂中　诱导细胞融合　(3)降低组蛋白的甲基化水平，提高组蛋白的乙酰化水平　不会　(4)血清　95%空气和5%CO2　同期发情　(5)实验组和对照组的比较更具有说服力　猴与人的亲缘关系更近，可最大限度排除由基因差异造成的结构和机理方面的不同
解析　(3)我国科学家将组蛋白去甲基化酶(Kdm4d)的mRNA注入重组细胞，同时用组蛋白去乙酰化酶抑制剂(TSA)处理重组细胞，这样可降低组蛋白的甲基化水平，提高组蛋白的乙酰化水平，从而改变组蛋白的表观遗传修饰来调控基因表达，激活重组细胞，使其完成细胞分裂和发育进程，提高了胚胎的发育率和妊娠率。因为该处理只是对基因表达做出调控，因此，Kdm4d和TSA处理前后基因的碱基序列并不发生改变。(4)体外培养重组细胞时，培养液中除应含有细胞所需要的各种营养物质外，通常需要加入血清或其他天然成分，并将其置于含有95%空气和5%CO2混合气体的二氧化碳培养箱中培养，培养过程中需要定期更换培养液，并创造无菌、无毒的环境。胚胎移植前还需对代孕母猴进行同期发情处理，这样可以使移植的胚胎获得相同的生理环境，以保证胚胎能够继续发育。(5)体细胞克隆可以得到大量遗传背景相似或相同的实验动物，能够保证实验过程中选取材料的一致性，这样在实验过程中，实验组和对照组的比较更具有说服力。由于猴与人的亲缘关系更近，可最大限度排除由基因差异造成的结构和机理方面的不同，因此，与克隆小鼠相比，克隆猴更有利于对人类疾病的致病机制进行研究。
16．(1)②③④⑤①　(2)促性腺激素　(3)生理状态　对物质的吸收具有选择透过性　(4)雌性或雄性(不能确定)　白面绵羊和黑面绵羊　白面绵羊
解析　(1)受精过程为精卵细胞识别→精子头部进入卵细胞→雌、雄原核形成→核膜消失，雌雄原核融合，形成合子→第一次卵裂开始。因此，正确顺序为②③④⑤①。
(2)对母牛注射促性腺激素能促进其超数排卵。(3)动物的早期胚胎移植到同种且生理状态与供体相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫作胚胎移植。活细胞的细胞膜对物质的吸收具有选择透过性，因此用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色。(4)因为不知道性染色体的组成，所以试管牛的性别不能确定。克隆羊多莉的细胞核来自白面绵羊，胚胎细胞细胞质来自黑面绵羊，细胞质中存在少数遗传物质，生物体性状主要由核基因控制，因此克隆羊多莉的遗传物质来自白面绵羊和黑面绵羊，性状与白面绵羊最接近。(共48张PPT)
重点突破练(三)
第三章 动物细胞工程
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题组一　动物细胞培养
1.下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是
A.动物细胞培养时不可采用开放式培养
B.培养基中成分不能都采用高压蒸汽灭菌
C.细胞系需经酶消化制成细胞悬液
D.细胞株可以通过克隆培养得到
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造成培养基pH波动的主要物质是细胞代谢产生的CO2，为了解决这一问题，可采用开放式培养的方式，使细胞代谢产生的CO2及时溢出培养器皿，再通过给培养箱提供恒定的5%的CO2浓度，使之与培养基中的NaHCO3处于平衡状态，调节pH的相对稳定，A错误。
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2.(2024·湖州高二期末)“细胞培养肉”技术是一种新型动物蛋白生产技术，其主要过程如图所示。下列叙述正确的是
A.过程①需要用胰蛋白酶进行处理
B.在生物反应器中培养的细胞丧失了贴壁生长的特性
C.过程②获得的肌肉组织可继续培养发育形成动物个体
D.生物反应器中加入血清是为了提供抗体以防止杂菌污染
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过程①需要用胰蛋白酶进行处理，目的是将动物的组织分散成单个细胞，获得单细胞悬液，A正确；
在生物反应器中培养的细胞依然具有贴壁生长的特性，只不过进行了人为处理，如添加细胞支架等，B错误；
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过程②获得的肌肉组织再继续培养也不能发育形成动物个体，因为此时的细胞不能分裂分化成各种组织细胞，C错误；
生物反应器中加入血清是为了提供人类未知的动物细胞培养所需的营养物质和某种生长因子，D错误。
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3.(2023·杭州高二期中)如图为动物细胞培养过程中，动物细胞增殖情况的变化曲线(图中b、d两点表示经处理或筛选后继续培养)，下列相关叙述不正确的是
A.0a段的培养称为原代培养，可从中选择纯化出细胞株
B.ab段可能发生了接触抑制现象，需用胰蛋白酶处理
C.制备单克隆抗体时，应选图中c点的细胞与浆细胞融
合形成杂交瘤细胞
D.cd段细胞增殖缓慢，以至于完全停止，此时部分细胞的核型可能会发
生改变
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通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞
系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株，A正确；
ab段细胞不再增殖，可能发生了接触抑制现象，需
要用胰蛋白酶处理，然后继续分瓶培养，B正确；
制备单克隆抗体时，应选图中d点的细胞(处理后能无限增殖的细胞)与已免疫的B淋巴细胞融合形成杂交瘤细胞，C错误。
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4.下列关于小鼠成纤维细胞的培养过程及原理的叙述，正确的是
A.用胰蛋白酶将组织细胞的膜蛋白消化可获得单个的细胞
B.在培养基中添加胰岛素可促进细胞对葡萄糖的摄取
C.培养到一定时期的细胞停止增殖的主要原因是营养枯竭
D.培养过程中二倍体细胞可能会经脱分化形成癌细胞
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胰蛋白酶可以将动物组织细胞之间相连的蛋白质水解掉，细胞彼此分离，形成单个细胞，A错误；
胰岛素具有促进组织细胞加速摄取、储存和利用葡萄糖的作用，在培养基中添加胰岛素可促进细胞对葡萄糖的摄取，B正确；
培养到一定时期的细胞停止增殖的主要原因是接触抑制，C错误；
培养过程中二倍体细胞可能会发生基因突变，形成癌细胞，D错误。
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题组二　利用核移植技术克隆动物
5.(2024·绍兴高二联考)如图为科研人员用蛙的肠上皮细胞进行克隆的一系列操作，下列有关说法错误的是
A.图中①处应选用未受精的卵细胞
B.图中②处可用紫外线破坏其细胞核
C.图中③处需要借助显微操作仪
D.图中④处需要胚胎体外培养与胚胎移植
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为了使核移植得到的重组细胞能正常发
育，需要卵细胞提供细胞质，A正确；
紫外线可以破坏细胞核，从而获得去核
卵细胞，B正确；
需要借助精密的显微操作仪才能完成核移植，C正确；
蛙不是哺乳动物，其受精卵是在体外发育成新个体的，不需要进行胚胎移植，D错误。
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6.(2023·金华高二期末)科学家利用核移植技术克隆出了多种动物。下列关于动物细胞核移植技术的叙述，正确的是
A.胚胎细胞核移植比成熟体细胞核移植成功的难度大
B.核移植过程中可通过显微操作法去除卵细胞中的细胞核
C.经过核移植得到的动物是克隆动物，克隆动物的性别无法确定
D.通过核移植方法培育的克隆动物遗传物质全部来自供体细胞核
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成熟体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是动物胚胎细胞分化程度低，全能性容易体现，A错误；
克隆动物的性别与提供细胞核的动物性别一致，C错误；
通过核移植方法获得的克隆动物的细胞核中遗传物质来自供体细胞核，细胞质中遗传物质来自去核卵细胞，D错误。
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7.下列关于动物克隆与植物克隆的叙述，正确的是
A.动物克隆与植物克隆的基本操作流程相同
B.动物细胞培养时可用滋养细胞支持细胞生长
C.动物细胞培养和植物组织培养的目的一致，都是为了获得某种优良个体
D.植物组织培养过程中通常用MS培养基，其除蔗糖外不含其他有机成分
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动物细胞培养是获得细胞或者组织器官，植物组织培养是获得某种个体，C错误；
植物组织培养过程中通常用MS培养基，其除蔗糖外，还可能含有有机氮源，D错误。
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8.为研究治疗性克隆技术能否用于帕金森病的治疗，科研人员利用人帕金森病模型鼠进行如图所示的实验。下列有关叙述错误的是
A.过程①中选择减数第二次分裂中期的
卵细胞有利于细胞核全能性的恢复
B.过程②重组细胞培养一般经历了桑葚
胚和囊胚等过程
C.过程③的关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达
D.过程④需要对受体A鼠注射免疫抑制剂以避免发生免疫排斥反应
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过程④移植的神经元细胞是由该小鼠自身细胞诱导分化而来，不会发生免疫排斥反应，D错误。
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题组三　利用细胞融合技术制备单克隆抗体
9.(2023·舟山高二期中)如图表示单克隆抗体制备的部分流程图，下列叙述正确的是
A.制备单克隆抗体的技术有动物细胞培
养、动物细胞融合和胚胎移植技术
B.若要将HAT培养基中的细胞分开培养，
一般不需要用胰蛋白酶处理
C.选育出产生高特异性抗体的细胞群体即为细胞系
D.该技术不能用于制作流感病毒抗原检测试剂盒
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单克隆抗体的制备过程中不涉及胚胎
移植技术，A错误；
HAT培养基中的细胞本来就是处于游
离状态，不需要用胰蛋白酶处理，B
正确；
细胞系指原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体，选育出产生高特异性抗体的细胞群体可无限增殖，不需要经传代培养，C错误；
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用流感病毒感染动物后，从被感染动物脾脏中获取B淋巴细胞后制作单克隆抗体，即可用于制作流感病毒抗原检测试剂盒，D错误。
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10.(2024·浙江强基联盟高二联考)甲胎蛋白(AFP)与肝癌的发生密切相关，临床上主要利用甲胎蛋白作为原发性肝癌的血清标志物，用于其诊断及疗效监测，某研究小组为制备抗AFP的单克隆抗体，设计流程如图所示，其中杂交瘤细胞可以利用HAT培养基筛选(HAT培养基是含次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶的选择培养基)。下列叙述错误的是
A.过程①需要用HAT培养基和检测的抗原多次筛选
B.过程②中会表现出细胞贴壁生长和接触抑制现象
C.克隆培养杂交瘤细胞的关键是得到单个杂交瘤细胞
D.杂交瘤细胞多次传代培养后，用AFP检测可能会表
现阴性反应
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过程①需要用HAT培养基和检测的抗原多次筛选出杂交瘤细胞，A正确；
过程②是杂交瘤细胞的生长过程，能无限增殖，不会表现出接触抑制现象，B错误；
克隆培养是把一个单细胞从群体中分离出来单
独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术，故克隆培养杂交瘤细胞的关键是得到单个杂交瘤细胞，C正确；
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杂交瘤细胞多次传代培养后，也可能会发生染色体丢失等变异，因此用AFP检测可能会表现阴性反应，D正确。
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11.(2024·宁波高二期末)科研人员以甲型H1N1流感病毒的HA蛋白为抗原对小鼠进行免疫，将获取的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，获得产生抗HA蛋白抗体的杂交瘤细胞。下列叙述正确的是
A.B淋巴细胞与骨髓瘤细胞1∶1混合后，发生融合的细胞均为杂交瘤细胞
B.选择培养基上获得的杂交瘤细胞均可无限增殖，并产生抗HA蛋白抗体
C.可在培养液中添加一定量的抗生素，以防止杂交瘤细胞培养过程中的
污染
D.抗HA蛋白抗体特异性强、灵敏度高，可广泛用于各种流感病毒的检测
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B淋巴细胞与骨髓瘤细胞1∶1混合后，发生融合的细胞有杂交瘤细胞、融合的B淋巴细胞与B淋巴细胞、融合的骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞，A错误；
选择培养基上获得的杂交瘤细胞都能无限增殖，但未必都能产生抗HA蛋白抗体，因此还需要进行抗体检测，B错误；
可在培养液中添加一定量的抗生素，以防止杂交瘤细胞培养过程中的污染，因为抗生素可以抑制细菌和真菌的生长，从而创造无菌、无毒环境，C正确；
抗HA蛋白抗体特异性强、灵敏度高，因而可用于甲型H1N1流感病毒的检测，D错误。
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题组四　胚胎工程技术
12.(2023·嘉兴高二月考)如图所示为早期胚胎发育过程，下列相关叙述错误的是
A.从a到e中，适宜于牛的胚胎移植的时期有d、e
B.图e的②称为囊胚腔
C.图e的③将来可发育成胚胎的附属结构或胚外结构
D.图中各阶段的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能
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从a到e中，适宜于牛的胚胎移植的时期有d(桑葚胚期)、e(囊胚期)，A正确；
图e的③(滋养层)将来可发育成胚胎的附属结构或胚外结构，C正确；
图中囊胚期发生了细胞分化，桑葚胚期前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，D错误。
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13.据报道，世界上仅剩下两头雌性北方白犀牛，实验室只留有冷冻的北方白犀牛的精子。若通过胚胎工程技术尝试拯救该物种，下列叙述正确的是
A.体外受精需要对精子进行获能处理使其获得能量后，才能受精
B.可用雌性北方白犀牛体细胞进行克隆，获得多头子代后，让其自行繁衍
C.用胚胎分割技术对桑葚胚阶段的胚胎进行分割，要注意将内细胞团均
等分割
D.这样人工繁育的种群与野生种群相比，遗传多样性降低且野外生存能
力下降
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体外受精需要对精子进行获能处理使其具有受精的能力，而不是获得能量，A错误；
用雌性北方白犀牛体细胞进行克隆获得多头子代后，由于后代均为雌性，因此不能让其自行繁衍，B错误；
对囊胚阶段的胚胎进行分割时需要注意将内细胞团进行均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，C错误。
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14.如图为哺乳动物的生殖和个体发育过程，请据图回答下面的问题：
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(1)哺乳动物的精子和卵细胞在________中完成受精作用。
(2)哺乳动物个体发育的起点是________。
(3)图中“？”处应为________，内细胞团出现于______时期。
输卵管
受精卵
原肠胚
囊胚
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(4)图示Ⅰ过程为___________。过程①需经过多次细胞分裂才能完成，请在图示中绘出该过程中每个细胞的体积、核DNA含量与时间的关系。
胚胎发育
答案　如图所示
16
15.自世界上第一只体细胞克隆羊多莉诞生以来，人类已经成功克隆了马、牛和猪等大型家畜，但体细胞克隆灵长类动物一直没有取得进展，究其原因主要是灵长类动物的卵细胞极为敏感，极轻微挤压都可能导致异常分裂，且细胞核移植到去核卵细胞后不能完全恢复到分化前的功能状态，导致胚胎发育率低。2017年，我国科学家利用“聪
明的化学方法和操作技巧”成功培育出了体
细胞克隆猴“中中”和“华华”，该成果一
经公布轰动了全世界。如图所示为克隆猴的
培育过程，分析回答相关问题：
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(1)动物成体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是________
____________________________。
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分化程度高，表现全能性困难
体细胞
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(2)我国科学家经过多年的反复试验，可以在10 s之内对卵细胞进行去核操作，在15 s之内完成核移植，操作迅速使卵细胞受损极小，在技巧上保证了实验的成功。实际操作中，去核前
应保证采集的卵细胞在体外培养至
__________________期；核移植前需
用灭活的仙台病毒对体细胞进行短暂
处理，作用是______________。
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减数第二次分裂中
诱导细胞融合
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(3)“聪明的化学方法”也是保证实验成功的条件。我国科学家将组蛋白去甲基化酶(Kdm4d)的mRNA注入重组细胞，同时用组蛋白去乙酰化酶抑制剂(TSA)处理重组细胞，提高了胚胎的发育率和妊娠率。Kdm4d和TSA的作用是__________________________
________________________，从而改
变组蛋白的表观遗传修饰来调控基因
的表达。Kdm4d和TSA处理前后基因
的碱基序列_______(填“会”或“不
会”)发生改变。
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降低组蛋白的甲基化水平，
提高组蛋白的乙酰化水平
不会
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我国科学家将组蛋白去甲基化酶(Kdm4d)的mRNA注入重组细胞，同时用组蛋白去乙酰化酶抑制剂(TSA)处理重组细胞，这样可降低组蛋白的甲基化水平，提高组蛋白的乙酰化水平，从而改变组蛋白的表观遗传修饰来调控基因表达，激活重组细胞，使其完成
细胞分裂和发育进程，提高了胚胎
的发育率和妊娠率。因为该处理只
是对基因表达做出调控，因此，
Kdm4d和TSA处理前后基因的碱基
序列并不发生改变。
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(4)除操作技巧和化学方法的运用外，克隆猴的成功也得益于每一步严谨科学的实验操作。体外培养重组细胞时，培养液中除应含有细胞所需要的各种营养物质外，通常需要加入_______或其他天然成分，将其置于含有__________________混合气体的二
氧化碳培养箱中培养。胚胎移植前
还需对代孕母猴进行__________处
理，以保证胚胎能够继续发育。
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血清
95%空气和5%CO2
同期发情
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体外培养重组细胞时，培养液中除应含有细胞所需要的各种营养物质外，通常需要加入血清或其他天然成分，并将其置于含有95%空气和5%CO2混合气体的二氧化碳培养箱中培养，培养过程中需要定期更换培养液，并创造无菌、无毒的环
境。胚胎移植前还需对代孕母猴
进行同期发情处理，这样可以使
移植的胚胎获得相同的生理环境，
以保证胚胎能够继续发育。
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(5)体细胞克隆可以得到大量遗传背景相似或相同的实验动物，这样的实验动物用于医学研究的好处是_________________________________。与克隆小鼠相比，克隆猴更有利于对人类
疾病的致病机制进行研究，原因是
_______________________________
_______________________________
_________________。
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实验组和对照组的比较更具有说服力
猴与人的亲缘关系更近，可最大限度排除由基因差异造成的结构和机理方面的不同
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体细胞克隆可以得到大量遗传背景相似或相同的实验动物，能够保证实验过程中选取材料的一致性，这样在实验过程中，实验组和对照组的比较更具有说服力。由于猴与人的亲缘关系更近，可最大限度排除由基因差异造成的结构和机理方
面的不同，因此，与克隆小鼠相
比，克隆猴更有利于对人类疾病
的致病机制进行研究。
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16.(2024·浙江大学附属中学高二期中)长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，而近年发展起来的细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机。请据图回答下列问题：
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(1)和受精有关的过程有：①第一次卵裂开始；②精卵识别；③精子头部进入；④雌、雄原核的形成；⑤核膜消失，雌、雄原核融合，其正确的顺序为_____________(填序号)。
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②③④⑤①
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受精过程为精卵细胞识别→精子头部进入卵细胞→雌、雄原核形成→核膜消失，雌雄原核融合，形成合子→第一次卵裂开始。因此，正确顺序为②③④⑤①。
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(2)超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射_____________。
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促性腺激素
对母牛注射促性腺激素能促进其超数排卵。
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(3)动物的早期胚胎移植到同种且__________与供体相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫作胚胎移植。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是活细胞的细胞膜_____________________________。
生理状态
对物质的吸收具有选择透过性
动物的早期胚胎移植到同种且生理状态与供体相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫作胚胎移植。活细胞的细胞膜对物质的吸收具有选择透过性，因此用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色。
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(4)图1中试管牛的性别为_____________________。图2中克隆羊多莉的遗传物质来自____________________，性状和__________最接近。
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雌性或雄性(不能确定)
白面绵羊和黑面绵羊
白面绵羊
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因为不知道性染色体的组成，所以试管牛的性别不能确定。克隆羊多莉的细胞核来自白面绵羊，胚胎细胞细胞质来自黑面绵羊，细胞质中存在少数遗传物质，生物体性状
主要由核基因控制，因
此克隆羊多莉的遗传物
质来自白面绵羊和黑面
绵羊，性状与白面绵羊
最接近。
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