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主干知识排查
一、基因工程赋予生物新的遗传特性
1．基因工程的工具有限制性内切核酸酶(简称“限制酶”)、DNA连接酶和载体。基因工程的工具酶有限制性内切核酸酶、DNA连接酶。
2．限制性内切核酸酶(限制酶)的作用：识别____________上特定的核苷酸序列，催化其中特定的两个核苷酸之间的____________水解，使DNA双链在特定的位置断开。断开后的DNA末端分为__________________________。
3．细菌等微生物细胞内含有的限制酶能破坏____________，“限制”病毒在细菌内寄生等，限制酶的保护作用是细菌等进化出的一种防御机制。
4．DNA连接酶将不同来源的__________________通过____________分别连接起来，形成一个稳定的重组DNA分子。
5．E.coli DNA连接酶来自大肠杆菌，仅能连接________末端；________________来自T4噬菌体，能连接黏性末端和平末端。
6．载体通常是质粒，也可以是____________、________。质粒是独立于细菌拟核 DNA 之外的较小的____________。
7．DNA的粗提取与鉴定原理
(1)幼嫩的植物材料经过冷冻后再研磨，细胞结构容易被破坏；SDS能使核蛋白________并与DNA分离；EDTA能______________________，防止核DNA被酶解。
(2)DNA在2 mol/L的NaCl溶液中溶解度____；DNA钠盐不溶于酒精而某些蛋白质能溶于酒精，提取液中加入95%的冷酒精，能使DNA钠盐形成絮状沉淀物析出。
(3)DNA鉴定：DNA＋二苯胺蓝色。
8．真核基因的编码序列是__________的(外显子＋内含子)，原核基因的编码序列是________的。真核细胞中外显子和内含子均会被转录成RNA，再经过RNA加工过程形成可以直接用于翻译的mRNA，________对应部位会被切除。
9．基因工程的基本操作程序：获取目的基因(____________、借助载体建立______________、PCR技术体外扩增特定的DNA)、________________(基因工程的核心)、将重组DNA分子导入受体细胞、检测目的基因及其表达产物。
10．化学合成法需要已知目的基因全部序列，且成本较高，适于合成序列较短的基因。不同组织细胞的cDNA文库是________的；同一组织细胞在不同的发育阶段，cDNA文库也会有________________________________________________________________________。
11．PCR技术需要的基本条件：模板、原料(dNTP)、________________________酶和__________，包括________(90～95 ℃)、______(50～60 ℃)、________(约72 ℃)3个步骤。
12．PCR扩增中，DNA 呈________形式扩增；扩增 DNA 片段的起点和终点由________决定。
13．利用PCR扩增1个DNA片段，经过n次循环后，反应体系中共有________个DNA片段，其中目标DNA片段(两条核苷酸链等长的DNA分子)有________个，共消耗引物________个。
14．PCR的产物可利用________________来鉴定。在凝胶中，DNA的迁移速率主要受DNA片段________的影响。DNA分子越大，向正极迁移速率越____。
15．如果扩增条带不止一条，可能的原因有_______________________________________
____________________________________________________________________________等。
16．表达载体：使目的基因既能________又能________________的载体。表达载体包含适当的转录和翻译信号。
17．构建重组DNA分子过程：用____________或能产生__________的限制酶剪切含有目的基因的DNA片段以及表达载体→利用______________将目的基因与表达载体连接起来。
18．目的基因导入原核细胞时用________溶液处理，制备________细胞。将目的基因导入动物细胞时，常使用________法。将目的基因导入植物细胞时，常使用____________法。
19．将目的基因插入质粒的________ 中，用重组 Ti 质粒________农杆菌，再让农杆菌感染植物细胞，目的基因就会随 T－DNA 整合到植物_____________中，最后通过________________可培育出完整的转基因植株。
20．检测目的基因及其表达产物
(1)检测DNA——确定目的基因在受体细胞中是否稳定存在：借助载体上的________检测、________检测、核酸分子杂交。
(2)RNA、蛋白质及个体水平上的检测——确定目的基因是否正确表达：
①mRNA：______________技术，判断目的基因在受体细胞内是否成功转录出mRNA；
②蛋白质：______________技术，判断目的基因在受体细胞内是否成功表达出相应蛋白质；
③个体：观察测定个体是否表现出目的基因控制的____________并稳定遗传，是判断转基因成功的直接证据。
二、基因工程及其延伸技术应用广泛
1．基因工程可用于诊断、治疗、研究疾病、法医鉴定、培育具有优良性状的农牧业品种、保护生态环境等。
2．______________和____________常用来检测患者自身携带的缺陷基因；灵敏度极高的____________常用于诊断患者是否感染某种病原体。
3．哺乳动物的乳腺作为____________生产蛋白质类药物有以下优点：乳汁可以连续合成；频繁采集不会对动物产生危害；乳汁成分相对简单、明确，便于药物的提纯。
4．蛋白质工程实质：通过____________编码蛋白质的基因获得特定功能的蛋白质。结果：可生产自然界中________的蛋白质。
5．蛋白质工程流程：依据所需蛋白质的功能，设计改造天然蛋白质的__________→推测出其________________，并根据“中心法则”逆推出基因的____________→利用基因工程技术改变 DNA 上特定位点的__________→将改造了的基因导入受体细胞后进行表达。
1．基因工程：_______________________________________________________________
___________________________________________________________________________。
2．限制酶不剪切细菌本身的DNA分子的可能原因：_____________________________
___________________________________________________________________________。
3．限制酶XbaⅠ(T↓CTAGA)剪切产生的DNA片段能与限制酶SpeⅠ(A↓CTAGT)剪切产生的DNA片段相连接，因为________________________________________；连接完成后，该重组DNA分子的新连接处________(填“能”或“不能”)再被所用的限制酶剪切，因为____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________。
4．载体的条件：
(1)________________，能够独立自主复制并稳定存在。
(2)________________________________，方便外源基因插入载体中。
(3)________________________，如便能够通过表型鉴别含有载体的细胞。
5．耐高温的Taq DNA聚合酶的作用是_________________________________________
__________________________________________________________________________。
6．利用PCR扩增目的基因时，需向反应体系中加入两种引物，引物的作用是__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________。
7．为使PCR产物能被限制酶剪切，需在引物上添加相应的限制酶识别序列，该限制酶识别序列应添加在引物的________(填“3′端”或“5′端”)，不能添加在另一端的原因是__________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________。
8．启动子的作用：_________________________________________________________
__________________________________________________________________________。
9．构建基因表达载体时，目的基因插入的位置应该在________________________，因为__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________。
10．如图1、2分别是质粒和目的基因的结构模式图。在构建基因表达载体时，科学家们常选择双酶切(同时用两种限制酶剪切含目的基因的DNA和质粒)，需要用限制酶________________________，不选用其他限制酶的原因是__________________________。
实践中，双酶切与单酶切相比，优点是__________________________________________。
11．农杆菌侵染植物细胞时，可将外源基因递送到植物细胞中的原因：______________。
12．若目的基因的表达产物是某种特定的蛋白质，检测目的基因在子代转基因小鼠中是否成功表达，常用的分子检测方法是________________________，检测的基本思路：________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
13．为了检测转基因幼苗是否具有抗除草剂特性，可采用的方法是_______________
________________________________________________________________________。
14．微生物吸附是重金属废水的处理方法之一。金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在于动植物中的金属结合蛋白，具有吸附重金属的作用。科研人员将枣树的MT基因导入大肠杆菌构建工程菌。MT基因在工程菌的表达量如图所示。结果仍无法说明已经成功构建能较强吸附废水中重金属的MT工程菌，理由是_____________________________________________。
15．与大肠杆菌相比，用酵母菌生产人的胰岛素的优势：________________________。
16．W是一种具有特定功能的人体蛋白质。某研究小组拟仿照制备乳腺生物反应器的研究思路，制备一种膀胱生物反应器来获得W，基本过程如图所示。回答下列问题：
(1)步骤①中需要选择的启动子是________________________________，选择该启动子的目的是____________________________________。步骤②所代表的操作是__________。
(2)与乳腺生物反应器相比，用膀胱生物反应器生产W的优势在于____________________
_____________________________________________________________________________。
17．转基因微生物成为理想的合成蛋白质的分子工厂是因为_________________________
_____________________________________________________________________________。
18．将正常的血红蛋白基因导入患者的骨髓造血干细胞中，可以合成正常的血红蛋白以达到治疗的目的。此操作__________(填“属于”或“不属于”)蛋白质工程，理由是________。
19．如果将干扰素分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸，在一定条件下，可以延长保存时间。对蛋白质进行改造，一般通过对基因的操作来实现，原因：________________(答出两点)。
20．经研究发现，如果将凝乳酶的第20位和24位氨基酸变为半胱氨酸，则其催化能力将提高2倍。现已知通过蛋白质工程可生产高效凝乳酶，请写出有关制备步骤：_________。
21．如果已经推测出多肽中的氨基酸序列，那么推测出的基因中的碱基序列__________(填“唯一”或“不唯一”)，理由是_______________________________________________。
答案精析
知识梳理
一、
2．双链DNA　磷酸二酯键　黏性末端和平末端
3．外源DNA
4．2个DNA分子的双链　磷酸二酯键
5．黏性　T4 DNA连接酶
6．动、植物病毒　噬菌体　环状DNA分子
7．(1)变性　抑制DNA酶活性　(2)高
8．不连续　连续　内含子
9．化学合成法　基因文库　构建重组DNA分子
10．不同　差异
11．耐高温的Taq DNA聚合　引物　变性　退火　延伸
12．指数　2个引物
13．2n　2n－2n　2n＋1－2
14．琼脂糖凝胶电泳　长度　慢
15．模板被污染、引物设计不合理、退火温度过低、Taq DNA聚合酶质量不好
16．扩增　表达出相应蛋白质
17．同种限制酶　相同末端　DNA连接酶
18．CaCl2　感受态　显微注射　农杆菌转化
19. T－DNA　转化　染色体DNA 　植物组织培养技术
20．(1)标记基因　PCR技术　(2)①核酸分子杂交　②抗原－抗体杂交　③特定性状
二、
2．核酸分子杂交　PCR技术　PCR技术
3．生物反应器
4．设计和改造　不存在
5．空间结构　氨基酸的序列　核苷酸序列　核苷酸序列
长句表达
1．有意识地把一个人们所需要的基因转入另一个生物体中，使后者获得新的遗传性状或表达所需要产物的技术
2．细菌的DNA分子不具备这种限制酶的识别序列或细菌自身DNA经过相应的化学修饰不会被自身含有的限制酶破坏
3．XbaⅠ与SpeⅠ剪切产生了相同的黏性末端　不能　所用的两种限制酶均不能识别该重组DNA分子的新连接处的脱氧核苷酸序列
4．(1)含有复制起点　(2)含有一种或多种限制酶的识别序列　(3)具有筛选作用的标记基因
5．催化以单链DNA为模板的DNA子链的延伸
6．使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸
7．5′端　使引物的3′端与模板链严格互补配对，保证子链的延伸
8．是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA
9．启动子下游和终止子上游　只有插入在启动子和终止子之间，目的基因才可以正常表达
10．BclⅠ和HindⅢ　BamHⅠ会破坏四环素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因，Sau3AⅠ不能切割质粒　防止质粒和目的基因的自身环化及质粒和目的基因的反向连接
11．Ti质粒上的T－DNA能转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上
12．抗原—抗体杂交技术　从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体(对抗体进行同位素或荧光标记)进行抗原—抗体杂交，如果出现杂交带，表明目的基因已经表达成功
13．对该幼苗喷施除草剂，不喷施除草剂的幼苗作为对照组，对照观察幼苗的生长情况
14．尚未在个体生物学水平上对MT工程菌吸附重金属的能力进行鉴定
15．酵母菌为真核生物，有生物膜系统，可通过内质网和高尔基体对产生的胰岛素进行加工和修饰，从而产生有活性的胰岛素
16．(1)膀胱上皮细胞蛋白基因的启动子　使W基因在膀胱上皮细胞中特异性表达　显微注射　(2)不受转基因动物的性别、年龄的限制
17．微生物遗传物质简单、操作方便，可以在价格低廉的培养基中快速生长
18．不属于　该操作没有对现有的蛋白质进行改造
19．(1)蛋白质的结构由基因编码，蛋白质不能复制，基因可以遗传；(2)对基因的改造比对蛋白质的改造要容易操作
20．找到相对应的脱氧核苷酸序列→定向改造凝乳酶基因→将改造后的凝乳酶基因导入受体细胞
21．不唯一　氨基酸是由一个或多个密码子决定的，因此获得的基因中的碱基序列有多种(共22张PPT)
主干知识排查
第四章 基因工程
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知识梳理
一、基因工程赋予生物新的遗传特性
1.基因工程的工具有限制性内切核酸酶(简称“限制酶”)、DNA连接酶和载体。基因工程的工具酶有限制性内切核酸酶、DNA连接酶。
2.限制性内切核酸酶(限制酶)的作用：识别 上特定的核苷酸序列，催化其中特定的两个核苷酸之间的 水解，使DNA双链在特定的位置断开。断开后的DNA末端分为 。
双链DNA
磷酸二酯键
黏性末端和平末端
3.细菌等微生物细胞内含有的限制酶能破坏 ，“限制”病毒在细菌内寄生等，限制酶的保护作用是细菌等进化出的一种防御机制。
4.DNA连接酶将不同来源的 通过 分别连接起来，形成一个稳定的重组DNA分子。
5.E.coli DNA连接酶来自大肠杆菌，仅能连接 末端；_____________来自T4噬菌体，能连接黏性末端和平末端。
6.载体通常是质粒，也可以是 、 。质粒是独立于细菌拟核 DNA 之外的较小的 。
外源DNA
2个DNA分子的双链
磷酸二酯键
黏性
T4 DNA连接酶
动、植物病毒
噬菌体
环状DNA分子
7.DNA的粗提取与鉴定原理
(1)幼嫩的植物材料经过冷冻后再研磨，细胞结构容易被破坏；SDS能使核蛋白 并与DNA分离；EDTA能 ，防止核DNA被
酶解。
(2)DNA在2 mol/L的NaCl溶液中溶解度 ；DNA钠盐不溶于酒精而某些蛋白质能溶于酒精，提取液中加入95%的冷酒精，能使DNA钠盐形成絮状沉淀物析出。
(3)DNA鉴定：DNA＋二苯胺 蓝色。
变性
抑制DNA酶活性
高
8.真核基因的编码序列是 的(外显子＋内含子)，原核基因的编码序列是 的。真核细胞中外显子和内含子均会被转录成RNA，再经过RNA加工过程形成可以直接用于翻译的mRNA， 对应部位会被切除。
9.基因工程的基本操作程序：获取目的基因( 、借助载体建立_________、PCR技术体外扩增特定的DNA)、 (基因工程的核心)、将重组DNA分子导入受体细胞、检测目的基因及其表达产物。
10.化学合成法需要已知目的基因全部序列，且成本较高，适于合成序列较短的基因。不同组织细胞的cDNA文库是 的；同一组织细胞在不同的发育阶段，cDNA文库也会有 。
不连续
连续
内含子
化学合成法
基因文库
构建重组DNA分子
不同
差异
11.PCR技术需要的基本条件：模板、原料(dNTP)、__________________
_____酶和 ，包括 (90～95 ℃)、 (50～60 ℃)、 (约
72 ℃)3个步骤。
12.PCR扩增中，DNA 呈 形式扩增；扩增 DNA 片段的起点和终点由 决定。
13.利用PCR扩增1个DNA片段，经过n次循环后，反应体系中共有 个DNA片段，其中目标DNA片段(两条核苷酸链等长的DNA分子)有______个，共消耗引物 个。
14.PCR的产物可利用 来鉴定。在凝胶中，DNA的迁移速率主要受DNA片段 的影响。DNA分子越大，向正极迁移速率越 。
耐高温的Taq DNA
聚合
引物
变性
退火
延伸
指数
2个引物
2n
2n－2n
2n＋1－2
琼脂糖凝胶电泳
长度
慢
15.如果扩增条带不止一条，可能的原因有__________________________
_________________________________________等。
16.表达载体：使目的基因既能 又能 的载体。表达载体包含适当的转录和翻译信号。
17.构建重组DNA分子过程：用 或能产生 的限制酶剪切含有目的基因的DNA片段以及表达载体→利用 将目的基因与表达载体连接起来。
18.目的基因导入原核细胞时用 溶液处理，制备 细胞。将目的基因导入动物细胞时，常使用 法。将目的基因导入植物细胞时，常使用 法。
模板被污染、引物设计不合
理、退火温度过低、Taq DNA聚合酶质量不好
扩增
表达出相应蛋白质
同种限制酶
相同末端
DNA连接酶
CaCl2
感受态
显微注射
农杆菌转化
19.将目的基因插入质粒的 中，用重组Ti质粒 农杆菌，再让农杆菌感染植物细胞，目的基因就会随T－DNA整合到植物_________
______中，最后通过 可培育出完整的转基因植株。
20.检测目的基因及其表达产物
(1)检测DNA——确定目的基因在受体细胞中是否稳定存在：借助载体上的 检测、 检测、核酸分子杂交。
T－DNA
转化
染色体
DNA
植物组织培养技术
标记基因
PCR技术
(2)RNA、蛋白质及个体水平上的检测——确定目的基因是否正确表达：
①mRNA： 技术，判断目的基因在受体细胞内是否成功转录出mRNA；
②蛋白质： 技术，判断目的基因在受体细胞内是否成功表达出相应蛋白质；
③个体：观察测定个体是否表现出目的基因控制的 并稳定遗传，是判断转基因成功的直接证据。
核酸分子杂交
抗原－抗体杂交
特定性状
二、基因工程及其延伸技术应用广泛
1.基因工程可用于诊断、治疗、研究疾病、法医鉴定、培育具有优良性状的农牧业品种、保护生态环境等。
2. 和 常用来检测患者自身携带的缺陷基因；灵敏度极高的 常用于诊断患者是否感染某种病原体。
3.哺乳动物的乳腺作为 生产蛋白质类药物有以下优点：乳汁可以连续合成；频繁采集不会对动物产生危害；乳汁成分相对简单、明确，便于药物的提纯。
核酸分子杂交
PCR技术
PCR技术
生物反应器
4.蛋白质工程实质：通过 编码蛋白质的基因获得特定功能的蛋白质。结果：可生产自然界中 的蛋白质。
5.蛋白质工程流程：依据所需蛋白质的功能，设计改造天然蛋白质的
→推测出其 ，并根据“中心法则”逆推出基因的 →利用基因工程技术改变 DNA 上特定位点的___________
→将改造了的基因导入受体细胞后进行表达。
设计和改造
不存在
空间结构
氨基酸的序列
核苷酸序列
核苷酸序列
1.基因工程：___________________________________________________
______________________________________________。
2.限制酶不剪切细菌本身的DNA分子的可能原因：___________________
_______________________________________________________________________________________。
长句表达
有意识地把一个人们所需要的基因转入另一个生物体中，使后者获得新的遗传性状或表达所需要产物的技术
细菌的DNA分子不具备这种限制酶的识别序列或细菌自身DNA经过相应的化学修饰不会被自身含有的限制酶破坏
3.限制酶XbaⅠ(T↓CTAGA)剪切产生的DNA片段能与限制酶SpeⅠ(A↓CTAGT)剪切产生的DNA片段相连接，因为_________________________________
_____；连接完成后，该重组DNA分子的新连接处 (填“能”或“不能”)再被所用的限制酶剪切，因为_________________________________
______________________________________。
4.载体的条件：
(1) ，能够独立自主复制并稳定存在。
(2) ，方便外源基因插入载体中。
(3) ，如能够通过表型鉴别含有载体的细胞。
XbaⅠ与SpeⅠ剪切产生了相同的黏性
末端
不能
所用的两种限制酶均不能识别该重组DNA分子的新连接处的脱氧核苷酸序列
含有复制起点
含有一种或多种限制酶的识别序列
具有筛选作用的标记基因
5.耐高温的Taq DNA聚合酶的作用是_______________________________
_______。
6.利用PCR扩增目的基因时，需向反应体系中加入两种引物，引物的作用是________________________________________________。
7.为使PCR产物能被限制酶剪切，需在引物上添加相应的限制酶识别序列，该限制酶识别序列应添加在引物的______(填“3′端”或“5′端”)，不能添加在另一端的原因是________________________________
____________________。
8.启动子的作用：_______________________________________________
_______。
催化以单链DNA为模板的DNA子链
的延伸
使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸
5′端
使引物的3′端与模板链严格互补配对，保证子链的延伸
是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出
mRNA
9.构建基因表达载体时，目的基因插入的位置应该在______________________，因为______________________________________________________。
10.如图1、2分别是质粒和目的基因的结构模式图。在构建基因表达载体时，科学家们常选择双酶切(同时用两种限制酶剪切含目的基因的DNA和质粒)，需要用限制酶______________，不选用其他限制酶的原因是____________________________________
___________________________________。实践中，双酶切与单酶切相比，优点是__________________
________________________________________。
启动子下游和终止子上游
只有插入在启动子和终止子之间，目的基因才可以正常表达
BclⅠ和HindⅢ
BamHⅠ会破坏四环素抗性基因和氨苄青
霉素抗性基因，Sau3AⅠ不能切割质粒
防止质粒和目的基因的自身环化及质粒和目的基因的反向连接
11.农杆菌侵染植物细胞时，可将外源基因递送到植物细胞中的原因：
_____________________________________________________________________________。
12.若目的基因的表达产物是某种特定的蛋白质，检测目的基因在子代转基因小鼠中是否成功表达，常用的分子检测方法是___________________，检测的基本思路：_______________________________________________
_____________________________________________________________________________________。
Ti质粒上的T－DNA能转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上
抗原—抗体杂交技术
从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体(对抗体进行同位素或荧光标记)进行抗原—抗体杂交，如果出现杂交带，表明目的基因已经表达成功
13.为了检测转基因幼苗是否具有抗除草剂特性，可采用的方法是______
_______________________________________________________________________。
14.微生物吸附是重金属废水的处理方法之一。金属硫
蛋白(MT)是一类广泛存在于动植物中的金属结合蛋白，
具有吸附重金属的作用。科研人员将枣树的MT基因导
入大肠杆菌构建工程菌。MT基因在工程菌的表达量如
图所示。结果仍无法说明已经成功构建能较强吸附废水中重金属的MT工程菌，理由是___________________________________________________
_________。
幼苗喷施除草剂，不喷施除草剂的幼苗作为对照组，对照观察幼苗的生长情况
对该
尚未在个体生物学水平上对MT工程菌吸附重金属的能力进行鉴定
15.与大肠杆菌相比，用酵母菌生产人的胰岛素的优势：______________
_________________________________________________________________________________________________。
16.W是一种具有特定功能的人体蛋白质。某研究小组拟仿照制备乳腺生物反应器的研究思路，制备一种膀胱生物反应器来获得W，基本过程如图所示。回答下列问题：
酵母菌为真核生物，有生物膜系统，可通过内质网和高尔基体对产生的胰岛素进行加工和修饰，从而产生有活性的胰岛素
(1)步骤①中需要选择的启动子是______________________________，选择该启动子的目的是___________________________________。步骤②所代表的操作是_________。
(2)与乳腺生物反应器相比，用膀胱生物反应器生产W的优势在于______
______________________________。
膀胱上皮细胞蛋白基因的启动子
使W基因在膀胱上皮细胞中特异性表达
显微注射
转基因动物的性别、年龄的限制
不受
17.转基因微生物成为理想的合成蛋白质的分子工厂是因为____________
______________________________________________________。
18.将正常的血红蛋白基因导入患者的骨髓造血干细胞中，可以合成正常的血红蛋白以达到治疗的目的。此操作________(填“属于”或“不属于”)蛋白质工程，理由是__________________________________。
微生物遗传物质简单、操作方便，可以在价格低廉的培养基中快速生长
不属于
该操作没有对现有的蛋白质进行改造
19.如果将干扰素分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸，在一定条件下，可以延长保存时间。对蛋白质进行改造，一般通过对基因的操作来实现，原因：_________________________________________________________
__________________________________________(答出两点)。
20.经研究发现，如果将凝乳酶的第20位和24位氨基酸变为半胱氨酸，则其催化能力将提高2倍。现已知通过蛋白质工程可生产高效凝乳酶，请写出有关制备步骤：_______________________________________________
____________________________________。
(1)蛋白质的结构由基因编码，蛋白质不能复制，基因可以遗传；(2)对基因的改造比对蛋白质的改造要容易操作
找到相对应的脱氧核苷酸序列→定向改造凝乳酶基因→将改造后的凝乳酶基因导入受体细胞
21.如果已经推测出多肽中的氨基酸序列，那么推测出的基因中的碱基序列_______(填“唯一”或“不唯一”)，理由是______________________
_______________________________________________。
不唯一
氨基酸是由一个或多个密码子决定的，因此获得的基因中的碱基序列有多种

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