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模块检测试卷
(分值：100分)
一、选择题(本题包括20小题，每小题2.5分，共50分)
1．(2024·浙江台金七校高二期中)为分离高产醋酸菌菌株，某研究小组配制的培养基配方如下：酵母膏1%、葡萄糖1%、碳酸钙2%、无水乙醇3%、琼脂2%。下列叙述错误的是(　　)
A．酵母膏可以为醋酸菌提供碳源、氮源及生长因子
B．由于无水乙醇易挥发，因此该培养基应采用过滤方法灭菌
C．无水乙醇可为醋酸菌提供碳源，并抑制某些微生物的生长
D．可用稀释涂布平板法接种，并选取培养基上具有较大透明圈的菌落
2．(2024·宁波高二期中)下列关于培养基的说法，正确的是(　　)
A．培养基中含量最高的是碳源
B．用以筛选固氮微生物的培养基，必须具备的特征是以尿素为唯一氮源
C．固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基
D．微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的菌落
3．(2023·宁波高二调研)获取纯净的微生物培养物是发酵工程的基础。下列叙述错误的是(　　 )
A．获取纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染
B．稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法
C．平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法
D．接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为纯培养物
(2024·宁波高二期中)阅读下列材料，回答第4、5小题。
啤酒是一种含多种氨基酸、低分子糖等物质的低酒精浓度饮料。啤酒花是大麻科葎草属植物，其雌花序和果穗可用于啤酒酿造，赋予啤酒独特的香味和苦味等。将适量啤酒花加入过滤后的麦芽汁中，煮沸1小时，使啤酒花中的物质溶出同时能够杀死杂菌，啤酒花还具有抑菌性作用。绍兴是黄酒之乡，“麦曲酶长，酵米复芳；白梅酒酿，伴淋寒香；压滤琼浆，煎煮陈藏”是对绍兴黄酒精致复杂酿造工艺的描述。在黄酒的主发酵过程中，“开耙”(搅拌)是极为关键的一步。
4．根据上述材料判断，下列说法错误的是(　　)
A．为研究啤酒花的抑菌作用，在LB固体培养基中添加不同浓度的啤酒花提取液，经灭菌后制成平板，采用稀释涂布平板法接种大肠杆菌后置于CO2培养箱中培养24小时，观察并比较菌落数量及生长情况
B．啤酒酿造过程中起主要作用的微生物是酵母菌，该微生物与乳酸菌在结构上存在明显区别
C．从物理特征看，工业酿酒的培养基属于液体培养基
D．发酵过程中发酵罐内的泡沫先逐渐增多后减少，泡沫减少的主要原因是酵母菌细胞呼吸产生的CO2减少
5．根据上述材料判断，下列相关叙述错误的是(　　)
A．接种麦曲有利于淀粉的糖化，有利于“酒酿”菌种发酵
B．煎煮的目的是除去发酵产品中的杂菌，利于酵母菌繁殖
C．陈藏有利于黄酒中醇与酸发生酯化反应，使酒更加芳香
D．“开耙”(搅拌)是送入氧气、排出二氧化碳，让酵母菌进行需氧呼吸，增加酵母菌的数量，使其成为优势菌种
6．(2024·浙江五校联盟高二期中)如图为“能分解尿素的微生物的分离与计数”实验中样品稀释示意图，据图分析正确的是(　　)
A．获取土壤样品要遵循无菌操作原则，故土壤样品要进行高压灭菌
B．实验的合理顺序为称量→溶解→灭菌→调pH→倒平板→接种土壤样本→菌落计数
C．为防止杂菌污染，需在酒精灯火焰附近进行接种
D．5号试管的结果表明每克土壤中的菌体数为1.7×108个
7．下列关于植物组织培养的叙述，正确的是(　　)
A．体细胞胚、芽可用于制作人工种子
B．菊花茎段在生根培养基上获得丛状苗，然后再进行分株培养
C．植物愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞
D．愈伤组织发育成胚状体的过程是器官发生途径
8．(2024·浙江台金七校高二期中)狼爪瓦松是一种具有观赏价值的二倍体野生花卉，其细胞中的黄酮类化合物可入药。为满足狼爪瓦松市场化需求，某科研小组利用植物细胞工程等技术手段，进行狼爪瓦松的扩大培养，具体过程如图所示(其中序号代表相应的处理过程)。下列有关分析正确的是(　　)
A．过程①前用无水乙醇对植株甲进行消毒，以保证外植体不被污染
B．过程③需要先在生长素和细胞分裂素的比值高的培养基中培养
C．过程⑥利用愈伤组织分裂能力强的特点进行细胞培养可获得大量黄酮类化合物
D．除了植株丙，植物乙、丁细胞核遗传物质与植株甲相同，属于同一物种
9．(2023·丽水高二期末)植物组织培养在植物生产领域有着广泛的应用。下列叙述错误的是(　　)
A. 初代培养物培养至一定时间可进行继代培养
B．从植物生长点取外植体进行组织培养可获得脱毒植株
C．生产人工种子的体细胞胚一定是由愈伤组织分化而来
D．利用发酵罐大规模培养植物细胞可用于细胞代谢产物的生产
10．(2024·嘉兴高二期中)如图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是(　　)
A．步骤①的操作不需要在无菌环境中进行操作
B．步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离
C．步骤③中细胞会在培养瓶底部呈现单层生长
D．步骤④培养过程中不会发生遗传物质改变
11．(2023·嘉兴高二质检)鼠源单克隆抗体制备的基本过程如图所示。下列关于鼠源单克隆抗体制备的叙述，错误的是(　　)
A．小鼠通常需要多次注射同种抗原蛋白，以提高相应B淋巴细胞的数量
B．在HAT培养基上能生长的细胞不一定能产生所需的抗体
C．克隆化培养过程中筛选抗体检验阳性的细胞以进行大规模培养
D．可将杂交瘤细胞注入小鼠血液中实现单克隆抗体的大规模生产
12．(2024·嘉兴高二月考)我国科学家利用基因编辑技术获得1只生物节律核心基因BMAL1“敲除”的猕猴，取其成纤维细胞与去核的卵母细胞融合形成重构胚，发育形成的早期胚胎植入代孕雌猴，最终获得5只克隆猕猴。下列叙述错误的是(　　)
A．克隆猴基因组成差异小，作为实验动物便于研究
B．受精卵经基因编辑后形成的胚胎可发育为克隆猴
C．可用电脉冲诱导去核卵母细胞和成纤维细胞融合
D．克隆猴的获得体现了动物体细胞的细胞核具有全能性
13．(2023·金华高二期末)如图为杂交瘤细胞的制备及初步筛选示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT－)，在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长。B淋巴细胞(HGPRT＋)能在HAT筛选培养液中正常生长。下列叙述正确的是(　　)
A．从HAT培养液中获得的抗体即为单克隆抗体
B．仙台病毒处理可使细胞膜发生一定程度的损伤，进而促进细胞融合
C．在HAT培养液中能长期存活的细胞具有特异性强、灵敏度高的特点
D．多个B淋巴细胞融合形成的多聚细胞在HAT培养液中死亡的原因是不能合成DNA
14．下列关于“核酸探针”的叙述，错误的是(　　)
A．核酸探针既可以检测某一特定的DNA，也可检测RNA
B．核酸探针是一小段具有特定核苷酸序列的单链核酸序列
C．核酸探针既可以检测核酸分子，又可以检测特定的蛋白质
D．核酸探针以单链形式发挥作用，其放射性和荧光标记便于检测
15．下列关于基因文库的说法，错误的是(　　)
A．基因文库包括基因组文库和cDNA文库
B．cDNA文库含有某种生物的部分基因
C．cDNA文库中的基因不含内含子，含有启动子
D．同种生物的cDNA文库中基因数量较基因组文库少
16．如图是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图，载体质粒具有四环素抗性基因(tetr)和氨苄青霉素抗性基因(ampr)。转化大肠杆菌后，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到A、B、C、D四种菌落，其生长情况如表所示(注：“＋”代表生长，“－”代表不生长)。根据表中结果判断，含有重组质粒的菌落是(　　)
平板类型 菌落类型 无抗生素 氨苄青霉素 四环素 氨苄青霉素＋四环素
菌落A ＋ ＋ ＋ ＋
菌落B ＋ ＋ － －
菌落C ＋ － － －
菌落D ＋ － ＋ －
A.菌落A B．菌落B C．菌落C D．菌落D
17．(2024·嘉兴高二联考)染色质是由一定长度的核小体为基本单位构成的。将大鼠肝细胞中分离出的染色质用非特异性核酸酶水解后去除染色质蛋白，对得到的DNA片段进行凝胶电泳，结果如图所示。若先将染色质中的蛋白质去除后用同样的非特异性核酸酶处理，则得到随机长度的DNA片段。据此分析，下列有关叙述错误的是(　　)
A．凝胶中的DNA分子通过染色可以被检测出来
B．染色质中的蛋白质可能对DNA具有保护作用
C．构成核小体的基本单位是脱氧核糖核苷酸
D．在凝胶中，DNA分子的迁移速率与凝胶浓度、DNA分子的大小和构象等有关
18．(2024·金华高二质检)将某转基因植株(导入了抗除草剂基因G)连续自交后获得后代群体。为检测该群体中含G基因植株的比例，用4种方法分别进行检测，预测所得结果最低的是(　　)
选项 检测方法 检测对象 检出的含G基 因植株的比例
A PCR技术 G基因 x1
B 核酸分子杂交 G基因转录产物 x2
C 抗原－抗体杂交 G基因编码的蛋白质 x3
D 喷洒除草剂 幼苗对除草剂的抗性 x4
19.(2023·湖州高二阶段检测)实时荧光定量PCR可用于对样品中特定DNA序列进行定量分析。将荧光标记的Taq man探针与待测样本DNA混合，当探针完整时，不产生荧光。在PCR过程中，与目的基因结合的探针被TaqDNA聚合酶水解，R与Q分离后，在特定光的激发下R发出荧光，随着循环次数的增加，荧光信号强度增加，通过实时检测荧光信号强度，可得Ct值(达到荧光阈值所经历的循环次数)。下列相关叙述正确的是(　　)
　
A．荧光基因R连接在探针的3′端
B．该反应体系中并未加入ATP，所以新链的合成不需要消耗能量
C．Taq DNA聚合酶在该反应中的作用是合成磷酸二酯键
D．Ct值越小，说明样品中特定DNA序列的含量越多
20．生物技术的发展给人类带来诸多好处的同时，也引发了许多关于生物技术安全与伦理问题的担忧。下列观点中合理的是(　　)
A．转基因生物的研究和应用均需要进行安全性评价后才能进行
B．通过试管婴儿无性生殖技术可解决不孕不育问题
C．应反对一切形式的针对人类细胞的克隆研究
D．可以通过微生物改造研究生物武器，提高国防实力
二、非选择题(本题包括5小题，共50分)
21．(每空1分，共8分)(2024·宁波高二期中)益生菌是一类能改变宿主某一部位菌群组成且对宿主有益的活性微生物，常见的益生菌有酵母菌、乳酸菌等。回答下列问题：
(1)对氧气的需求方面，与醋酸菌相比，乳酸菌的特点是____________________________；乳酸菌和酵母菌在细胞结构方面的主要区别是_____________________________________。
(2)乳酸菌常用于泡菜制作，制作过程中会用清水和食盐配制质量百分比为5%～20%的盐水，并将盐水煮沸，煮沸的目的是_________________________________________________
___________________________________________________________________________。
(3)培养乳酸菌时，对泡菜汁进行系列梯度稀释的目的是___________________________。培养乳酸菌时，培养基上形成的菌落并非全是乳酸菌菌落，为初步判断菌种类型，还需要观察培养基上菌落的________________等特征。配制好的培养基通常可以使用__________________法灭菌。
(4)某生物兴趣小组为测定泡菜水中的乳酸菌含量，利用显微镜直接计数，结果往往偏大，原因可能是________________________________________________________________。
(5)进行销售的泡菜食品还需要进行食品卫生微生物学检验，如对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等微生物进行培养和计数，该过程中所用到的接种方法是__________________。
22．(9分)通过动物细胞融合技术可以制备杂交瘤细胞，对健康的实验小鼠进行腹腔内免疫，一周后取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选。
(1)(1分)动物细胞融合一般用__________________进行生物诱导。
(2)(1分)正常细胞合成DNA有两条途径：a通路和b通路。骨髓瘤细胞是DNA合成b通路的缺陷型细胞株，让B淋巴细胞与其融合，再在加入DNA合成a通路阻断剂(氨基蝶呤)的培养液中培养，这种培养会产生以下哪些效果________(多选)。
A．促进细胞融合 B．淘汰B淋巴细胞
C．淘汰骨髓瘤细胞 D．阻断杂交细胞DNA合成
(3)经选择培养的杂交瘤细胞，还需要进行____________________和抗体检测，经多次筛选，可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
(4)(5分)杂交瘤细胞体外培养过程________(填“是”或“否”)需要添加血清。试分析原因：________________________________________________________________________，
通过杂交瘤细胞获得的单克隆抗体的最大优点是______________________________
________________________________________________________________________。
23．(15分)(2024·浙江高二期中)猪蓝耳病又称猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)，由动脉炎病毒科中的猪繁殖与呼吸综合征病毒(简称蓝病毒)引起。患病动物主要表现为繁殖障碍、呼吸困难、耳朵蓝紫。母猪感染该病毒后会在妊娠晚期流产，为培育抗蓝病毒的转基因猪，工作人员根据哺乳动物受精作用和早期胚胎的发育过程提出了解决方案(如图)。请回答下列问题：
(1)(3分)B猪体细胞在培养瓶中培养时，要保证培养液无菌、无毒，常在培养液中加入____________，另外还需定期更换培养液，以防止________________________________对细胞自身造成的伤害。培养到一定程度后，还需用__________________处理后分装到多个培养瓶中进行传代培养。
(2)由于目的基因不能直接导入受体细胞，因此需要构建基因表达载体，该过程需要用的酶有_________________________________。常采用双酶切法处理含目的基因的DNA片段和载体，其优点是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)(4分)通过步骤①的技术手段______________得到甲，培养至乙______________，然后移植到同种的、______________________的C猪体内，由于C猪对乙不发生______________，从而为胚胎在受体内的存活提供了可能。
(4)(4分)利用________________________技术检验D猪是否产生相应的抗体。该抗体也可使用杂交瘤技术来制备，通常情况下，杂交瘤细胞是由经培养的骨髓瘤细胞和________________________________________________________________________
细胞融合获得的，与诱导植物原生质体融合方法不同的是____________________________。
24．(每空1分，共10分)(2023·金华高二期末)甜玉米与普通玉米相比，甜玉米中可溶性糖向淀粉的转化速度较慢，含可溶性糖量高，汁多质脆，富含多种维生素。为了使甜玉米更富有生产应用价值，科研人员通过转基因技术培育出了超量表达P蛋白的转基因甜玉米。在超量表达P基因载体的构建中，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图所示。(注：强启动子是一段有特殊结构的DNA片段；BamH Ⅰ、Hind Ⅲ、EcoR Ⅰ、Not Ⅰ、Sac Ⅰ代表不同的限制酶；T－DNA是农杆菌的Ti质粒上的DNA片段。)
(1)为了特异性扩增P基因序列，可采用__________技术，一般要加入的原料为____________。
(2)强启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被______________识别并结合，驱动基因的持续转录。
(3)构建能超量表达P基因的载体，需选用______________限制酶的组合和DNA连接酶。将重组Ti质粒转入农杆菌，需先将农杆菌用________处理。
(4)将玉米愈伤组织经农杆菌液浸泡，超量表达P基因会随T－DNA______________________，从而获得转基因植物细胞。继而进行植物组织培养，培养基中需加入__________进行筛选，筛选出的愈伤组织经______过程形成丛芽，然后在__________(填激素名称)较多的培养基上形成根，最终获得多个玉米株系。发现某株系的P蛋白表达量较低，请对该现象作出合理的解释：________________________________________________________________________。
25．(8分)如图表示畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，请分析回答下列有关问题：
(1)(1分)过程①技术为________________________。
(2)(2分)过程②常用________________激素处理，目的是使B牛________________。
(3)(2分)自然条件下，A牛的精子必须在B牛的生殖道中经过相应的生理变化后，才能与B牛的卵细胞结合，完成受精作用，这个过程叫作________。完成受精的实质是__________。
(4)(3分)方法Ⅰ和方法Ⅱ培育优良种牛的本质区别是_________________________________。
答案精析
1．B　[培养基可在高压灭菌后加入无水乙醇，B错误；无水乙醇为含碳有机物，可为醋酸菌提供碳源，并抑制某些微生物的生长，C正确；醋酸和碳酸钙反应会出现透明圈，故首先需要进行醋酸菌的初步筛选，通常选择透明圈较大且生长良好的单菌落，D正确。]
2．D　[培养基中含量最高的是水，A错误；固氮微生物是一类能够还原分子态氮为氨态氮的微生物，用以筛选固氮微生物的培养基应不含氮源，B错误；固体培养基中含有凝固剂，即使加入少量水也无法制成液体培养基，C错误；微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的菌落，根据菌落特征可鉴定、筛选不同微生物，D正确。]
3．D　[纯培养物是由单一个体繁殖所获得的微生物群体，含特定种类微生物的群体不一定是由单一个体繁殖而来，D错误。]
4．A　[大肠杆菌是兼性厌氧菌，不需要在CO2培养箱中培养，A错误；酵母菌是真核细胞生物，乳酸菌是原核细胞生物，所以二者在结构上存在明显区别，B正确；从物理特征看，工业酿酒的培养基属于液体培养基，因为液体培养基能让菌种与培养液充分接触获得更多的营养，从而获得高品质的发酵产品，C正确；在发酵初期，酵母菌活性强，产生大量的CO2，导致泡沫逐渐增多，然而，随着发酵的进行，多种因素造成酵母菌细胞呼吸产生的CO2减少，从而导致泡沫减少，D正确。]
5．B　[淀粉属于生物大分子物质，水解为小分子糖有利于发酵过程中酵母菌对糖类的利用，A正确；煎煮是进行消毒，除去发酵产品中的酵母菌等微生物，利于储藏，B错误；陈藏是将榨出的酒放入罐内存放，有利于黄酒中醇与酸发生酯化反应，使酒更加芳香，C正确。]
6．C　[高压灭菌会杀死微生物，因此土壤样品不能高压灭菌，A错误；培养基配制过程中，调pH在灭菌之前完成，B错误；用稀释涂布平板法接种时，要在酒精灯火焰附近操作，防止杂菌的污染，C正确；5号试管的结果表明每克土壤中的菌体数为(168＋175＋167)/3÷0.1×106＝1.7×109(个)，D错误。]
7．A　[菊花茎段在生芽培养基中生长的丛状苗分株后，在无菌条件下再转入生根培养基中，B错误；植物细胞融合时必须先去除细胞壁，然后再加入诱导剂才能促使细胞融合，所以在愈伤组织培养中直接加入细胞融合的诱导剂，不能导致细胞融合，无法获得染色体加倍的细胞，C错误；愈伤组织发育成胚状体的过程是体细胞胚发生途径，D错误。]
8．C　[生长素和细胞分裂素的比值高时有利于生根，比值低时有利于生芽，过程③需要先生芽再生根，B错误；利用植物细胞培养进行细胞产物的工厂化生产可以获得目标产物，过程⑥利用愈伤组织分裂能力强的特点进行细胞培养可获得大量黄酮类化合物，C正确；植株丙经历了诱变处理，发生了基因突变，遗传物质与植株甲不同；植株乙是通过植物组织培养过程获得的，属于无性繁殖，基因型不变，和植株甲细胞核遗传物质相同；植物丁是将原生质体进行了融合，则遗传物质翻倍，与植株甲不相同，D错误。]
9．C　[植物生长点附近的病毒浓度很低甚至无病毒，从植物生长点取外植体进行组织培养可获得脱毒植株，B正确；生产人工种子的体细胞胚不一定都是由愈伤组织分化而来，如在外植体上直接分化出，C错误。]
10．C　[为防止细菌污染，培养过程中的各种操作都需要在无菌环境中进行，A错误；用胰蛋白酶溶解细胞间物质使细胞分离，B错误；由于细胞之间有接触抑制的特性，一般的正常细胞并不重叠于其他细胞之上，而是单层生长，C正确。]
11．D　[可将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔中，在小鼠腹腔中增殖，从腹水中提取单克隆抗体，实现单克隆抗体的大规模生产，D错误。]
12．B　[受精卵经基因编辑后形成的胚胎发育成的个体不能叫作克隆猴，克隆猴是通过核移植后发育而成的，B错误。]
13．B　[在HAT培养液中筛选出来的是杂交瘤细胞，可能有多种类型，因此后续还需要对这些杂交瘤细胞进行单一抗体检测，进而筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，可见从HAT培养液中获得的抗体不是单克隆抗体，A错误；仙台病毒处理可使细胞膜发生一定程度的损伤，进而促进细胞融合，据此可用灭活的仙台病毒作为促融剂，B正确；在HAT培养液中能长期存活的细胞为杂交瘤细胞，这些细胞可能产生多种类型的抗体，因而不具有特异性强、灵敏度高的特点，C错误；多个B淋巴细胞融合形成的多聚细胞在HAT培养液中死亡的原因是不能无限增殖，D错误。]
14．C　[核酸探针是通过碱基互补配对与目标物结合的，所以无法检测蛋白质，C错误。]
15．C　[由于基因转录过程中，不转录启动子序列，内含子序列转录下来后在RNA成熟的过程中被剪切掉，所以由mRNA逆转录形成的cDNA文库中的基因不含内含子和启动子，C错误。]
16．B　[分析题图可知，构建重组质粒时，目的基因插入四环素抗性基因(tetr)中间，破坏了四环素抗性基因(tetr)，氨苄青霉素抗性基因(ampr)没有被破坏。因此含有重组质粒的菌落在添加了四环素的培养基中不能生长，而在添加了氨苄青霉素的培养基中能生长，故选B。]
17．C　[由图可知，染色质用核酸酶处理后，得到的是部分水解的染色质，但若先将染色质中的蛋白质去除后用核酸酶处理，则得到随机长度的DNA片段，说明染色质中的蛋白质可能对DNA具有保护作用，B正确；染色质是由一定长度的核小体为基本单位构成的，核小体的组成成分是蛋白质和DNA，其基本单位是脱氧核糖核苷酸和氨基酸，C错误。]
18．D　[PCR技术可以用来鉴定受体细胞中是否导入目的基因；导入受体细胞中的目的基因不一定完成转录，则用核酸分子杂交检测目的基因转录产物含量一般比目的基因少；导入受体细胞中的目的基因虽然完成转录但不一定成功翻译，则检测目的基因翻译产物一般比转录产物含量少；即使目的基因表达出相应蛋白质，植株也不一定能表现出相应抗性，所以检测出含G基因植株的比例由高到低依次为x1、x2、x3、x4。]
19．D　[引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸，从图中引物1的方向可以分析出，荧光基因R连接在探针5′端，A错误；该反应体系中并未加入ATP，但新链的合成需要消耗能量，B错误；在该反应中Taq DNA聚合酶有两个作用，一是形成子链的磷酸二酯键，二是水解探针，破坏磷酸二酯键，C错误；Ct值越小，即达到阈值所经历的循环次数越少，说明样品中特定DNA序列的含量越多，D正确。]
20．A　[试管婴儿是通过体外受精的有性生殖技术，B不合理；生物武器具有致病性强、攻击范围广等特点，世界各国都应抵制，D不合理。]
21．(1)不需要氧气　乳酸菌不具有成形的细胞核　(2)杀灭杂菌，同时可去除部分溶解氧　(3)保证每个菌落都是由一个单细胞繁殖而来(答出为了获得单菌落即可)　形状、大小、颜色　高压灭菌　(4)利用显微镜直接计数时不能区分活菌和死菌　(5)稀释涂布平板法
22．(1)灭活的病毒　(2)BC　(3)克隆化培养　(4)是　人们对动物细胞所需要的营养物质没有完全搞清楚　纯度高，可大量制备，在应用时特异性强、灵敏度高
解析　(2)动物细胞融合方法有物理法、化学法(聚乙二醇)、生物法(灭活的病毒)，而该培养对细胞融合没有影响，A不符合题意；B淋巴细胞的复制次数有限，不能在培养基上长期存活，该培养基能淘汰B淋巴细胞，B符合题意；骨髓瘤细胞是b通路缺陷型细胞株，剩下的a通路被阻断，不能合成DNA，该培养基能淘汰骨髓瘤细胞，C符合题意；加入DNA合成a通路阻断剂后，杂交细胞还具有b通路，因此不能阻断杂交细胞DNA合成，D不符合题意。
23．(1)抗生素　细胞代谢产生的有毒物质　胰蛋白酶
(2)限制酶、DNA连接酶　防止目的基因和载体发生自身环化或反向连接　(3)核移植　囊胚　生理状态相同　免疫排斥　(4)抗原—抗体杂交　经蓝病毒抗原(外壳蛋白)免疫的B淋巴　灭活的(仙台)病毒诱导
24．(1)PCR　 四种脱氧核苷三磷酸(dNTP)　(2)RNA聚合酶　(3)BamH Ⅰ和Sac Ⅰ　CaCl2溶液　(4)整合到玉米细胞的染色体DNA中　潮霉素　再分化　生长素
该株系玉米中可能没有导入目的基因或目的基因未表达
解析　(2)启动子位于基因的“上游”，有RNA聚合酶结合的位点，控制转录的开始，因而强启动子能被RNA聚合酶识别并结合，驱动基因的持续转录。(3)在构建基因表达载体时，要想使P基因在玉米植株中超量表达，切割目的基因时需要把强启动子和P基因连在一起切割下来，因此需要用到限制酶BamH Ⅰ切割，限制酶EcoRⅠ和NotⅠ会破坏目的基因，因此应选用的限制酶是BamH Ⅰ和Sac Ⅰ。将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用CaCl2溶液处理农杆菌使之成为感受态细胞，易于重组Ti质粒导入。(4)由题图可知，潮霉素抗性基因位于Ti质粒的T－DNA，可以随T－DNA整合到玉米细胞的染色体DNA中，所以将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织进行植物组织培养，培养基中需加入潮霉素进行筛选，筛选出的愈伤组织可再分化形成丛芽，然后在生长素较多的培养基上形成根，最终获得多个转基因玉米株系。蛋白质的表达量与基因的表达有关，故P蛋白表达量较低的原因可能是该株系玉米中没有导入目的基因或者目的基因没有表达。
25．(1)动物体细胞核移植技术　(2)促性腺　超数排卵　(3)精子获能　雌、雄原核的融合　(4)方法Ⅰ的培育为有性生殖过程，方法Ⅱ的培育为无性生殖过程(共69张PPT)
模块检测试卷
1.(2024·浙江台金七校高二期中)为分离高产醋酸菌菌株，某研究小组配制的培养基配方如下：酵母膏1%、葡萄糖1%、碳酸钙2%、无水乙醇3%、琼脂2%。下列叙述错误的是
A.酵母膏可以为醋酸菌提供碳源、氮源及生长因子
B.由于无水乙醇易挥发，因此该培养基应采用过滤方法灭菌
C.无水乙醇可为醋酸菌提供碳源，并抑制某些微生物的生长
D.可用稀释涂布平板法接种，并选取培养基上具有较大透明圈的菌落
√
选择题
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
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15
16
17
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选择题
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25
培养基可在高压灭菌后加入无水乙醇，B错误；
无水乙醇为含碳有机物，可为醋酸菌提供碳源，并抑制某些微生物的生长，C正确；
醋酸和碳酸钙反应会出现透明圈，故首先需要进行醋酸菌的初步筛选，通常选择透明圈较大且生长良好的单菌落，D正确。
2.(2024·宁波高二期中)下列关于培养基的说法，正确的是
A.培养基中含量最高的是碳源
B.用以筛选固氮微生物的培养基，必须具备的特征是以尿素为唯一氮源
C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基
D.微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的菌落
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培养基中含量最高的是水，A错误；
固氮微生物是一类能够还原分子态氮为氨态氮的微生物，用以筛选固氮微生物的培养基应不含氮源，B错误；
固体培养基中含有凝固剂，即使加入少量水也无法制成液体培养基，C错误；
微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的菌落，根据菌落特征可鉴定、筛选不同微生物，D正确。
选择题
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3.(2023·宁波高二调研)获取纯净的微生物培养物是发酵工程的基础。下列叙述错误的是
A.获取纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染
B.稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法
C.平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常
用方法
D.接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为
纯培养物
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纯培养物是由单一个体繁殖所获得的微生物群体，含特定种类微生物的群体不一定是由单一个体繁殖而来，D错误。
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(2024·宁波高二期中)阅读下列材料，回答第4、5小题。
啤酒是一种含多种氨基酸、低分子糖等物质的低酒精浓度饮料。啤酒花是大麻科葎草属植物，其雌花序和果穗可用于啤酒酿造，赋予啤酒独特的香味和苦味等。将适量啤酒花加入过滤后的麦芽汁中，煮沸1小时，使啤酒花中的物质溶出同时能够杀死杂菌，啤酒花还具有抑菌性作用。绍兴是黄酒之乡，“麦曲酶长，酵米复芳；白梅酒酿，伴淋寒香；压滤琼浆，煎煮陈藏”是对绍兴黄酒精致复杂酿造工艺的描述。在黄酒的主发酵过程中，“开耙”(搅拌)是极为关键的一步。
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4.根据上述材料判断，下列说法错误的是
A.为研究啤酒花的抑菌作用，在LB固体培养基中添加不同浓度的啤酒花
提取液，经灭菌后制成平板，采用稀释涂布平板法接种大肠杆菌后置
于CO2培养箱中培养24小时，观察并比较菌落数量及生长情况
B.啤酒酿造过程中起主要作用的微生物是酵母菌，该微生物与乳酸菌在
结构上存在明显区别
C.从物理特征看，工业酿酒的培养基属于液体培养基
D.发酵过程中发酵罐内的泡沫先逐渐增多后减少，泡沫减少的主要原因
是酵母菌细胞呼吸产生的CO2减少
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大肠杆菌是兼性厌氧菌，不需要在CO2培养箱中培养，A错误；
酵母菌是真核细胞生物，乳酸菌是原核细胞生物，所以二者在结构上存在明显区别，B正确；
从物理特征看，工业酿酒的培养基属于液体培养基，因为液体培养基能让菌种与培养液充分接触获得更多的营养，从而获得高品质的发酵产品，C正确；
在发酵初期，酵母菌活性强，产生大量的CO2，导致泡沫逐渐增多，然而，随着发酵的进行，多种因素造成酵母菌细胞呼吸产生的CO2减少，从而导致泡沫减少，D正确。
选择题
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5.根据上述材料判断，下列相关叙述错误的是
A.接种麦曲有利于淀粉的糖化，有利于“酒酿”菌种发酵
B.煎煮的目的是除去发酵产品中的杂菌，利于酵母菌繁殖
C.陈藏有利于黄酒中醇与酸发生酯化反应，使酒更加芳香
D.“开耙”(搅拌)是送入氧气、排出二氧化碳，让酵母菌进行需氧呼吸，
增加酵母菌的数量，使其成为优势菌种
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淀粉属于生物大分子物质，水解为小分子糖有利于发酵过程中酵母菌对糖类的利用，A正确；
煎煮是进行消毒，除去发酵产品中的酵母菌等微生物，利于储藏，B错误；
陈藏是将榨出的酒放入罐内存放，有利于黄酒中醇与酸发生酯化反应，使酒更加芳香，C正确。
6.(2024·浙江五校联盟高二期中)如图为“能分解尿素的微生物的分离与计数”实验中样品稀释示意图，据图分析正确的是
A.获取土壤样品要遵循无菌操作原则，故土
壤样品要进行高压灭菌
B.实验的合理顺序为称量→溶解→灭菌→调
pH→倒平板→接种土壤样本→菌落计数
C.为防止杂菌污染，需在酒精灯火焰附近进行接种
D.5号试管的结果表明每克土壤中的菌体数为1.7×108个
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高压灭菌会杀死微生物，因此土壤样品
不能高压灭菌，A错误；
培养基配制过程中，调pH在灭菌之前完
成，B错误；
用稀释涂布平板法接种时，要在酒精灯火焰附近操作，防止杂菌的污染，C正确；
5号试管的结果表明每克土壤中的菌体数为(168＋175＋167)/3÷0.1× 106＝1.7×109(个)，D错误。
7.下列关于植物组织培养的叙述，正确的是
A.体细胞胚、芽可用于制作人工种子
B.菊花茎段在生根培养基上获得丛状苗，然后再进行分株培养
C.植物愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞
D.愈伤组织发育成胚状体的过程是器官发生途径
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菊花茎段在生芽培养基中生长的丛状苗分株后，在无菌条件下再转入生根培养基中，B错误；
植物细胞融合时必须先去除细胞壁，然后再加入诱导剂才能促使细胞融合，所以在愈伤组织培养中直接加入细胞融合的诱导剂，不能导致细胞融合，无法获得染色体加倍的细胞，C错误；
愈伤组织发育成胚状体的过程是体细胞胚发生途径，D错误。
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8.(2024·浙江台金七校高二期中)狼爪瓦松是一种具有观赏价值的二倍体野生花卉，其细胞中的黄酮类化合物可入药。为满足狼爪瓦松市场化需求，某科研小组利用植物细胞工程等技术手段，进行狼爪瓦松的扩大培养，具体过程如图所示(其中序号代表相应的处理过程)。下列有关分析正确的是
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A.过程①前用无水乙醇对植株甲进行消毒，以保证外植体不被污染
B.过程③需要先在生长素和细胞分裂素的比值高的培养基中培养
C.过程⑥利用愈伤组织分裂能力强的特点进行细胞培养可获得大量黄酮
类化合物
D.除了植株丙，植物乙、丁细胞核遗传物质与植株甲相同，属于同一物种
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生长素和细胞分裂素的比
值高时有利于生根，比值
低时有利于生芽，过程③
需要先生芽再生根，B错误；
利用植物细胞培养进行细胞产物的工厂化生产可以获得目标产物，过程⑥利用愈伤组织分裂能力强的特点进行细胞培养可获得大量黄酮类化合物，C正确；
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植株丙经历了诱变处理，发生了基因突变，遗传物质与植株甲不同；植株乙是通过植物组织培养过程获得的，属于无性繁殖，基因型不变，和植株甲细胞核遗传物质相同；植物丁是将原生质体进行了融合，则遗传物质翻倍，与植株甲不相同，D错误。
9.(2023·丽水高二期末)植物组织培养在植物生产领域有着广泛的应用。下列叙述错误的是
A. 初代培养物培养至一定时间可进行继代培养
B.从植物生长点取外植体进行组织培养可获得脱毒植株
C.生产人工种子的体细胞胚一定是由愈伤组织分化而来
D.利用发酵罐大规模培养植物细胞可用于细胞代谢产物的生产
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植物生长点附近的病毒浓度很低甚至无病毒，从植物生长点取外植体进行组织培养可获得脱毒植株，B正确；
生产人工种子的体细胞胚不一定都是由愈伤组织分化而来，如在外植体上直接分化出，C错误。
10.(2024·嘉兴高二期中)如图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是
A.步骤①的操作不需要在无菌环境中进行操作
B.步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离
C.步骤③中细胞会在培养瓶底部呈现单层生长
D.步骤④培养过程中不会发生遗传物质改变
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为防止细菌污染，培养过程中的各种操作都需要在无菌环境中进行，A错误；
用胰蛋白酶溶解细胞间物质使细胞分离，B错误；
由于细胞之间有接触抑制的特性，一般的正常细胞并不重叠于其他细胞之上，而是单层生长，C正确。
11.(2023·嘉兴高二质检)鼠源单克隆抗体制备的基本过程如图所示。下列关于鼠源单克隆抗体制备的叙述，错误的是
A.小鼠通常需要多次注射同种抗原蛋白，
以提高相应B淋巴细胞的数量
B.在HAT培养基上能生长的细胞不一定
能产生所需的抗体
C.克隆化培养过程中筛选抗体检验阳性的细胞以进行大规模培养
D.可将杂交瘤细胞注入小鼠血液中实现单克隆抗体的大规模生产
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可将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔中，在小鼠腹腔中增殖，从腹水中提取单克隆抗体，实现单克隆抗体的大规模生产，D错误。
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12.(2024·嘉兴高二月考)我国科学家利用基因编辑技术获得1只生物节律核心基因BMAL1“敲除”的猕猴，取其成纤维细胞与去核的卵母细胞融合形成重构胚，发育形成的早期胚胎植入代孕雌猴，最终获得5只克隆猕猴。下列叙述错误的是
A.克隆猴基因组成差异小，作为实验动物便于研究
B.受精卵经基因编辑后形成的胚胎可发育为克隆猴
C.可用电脉冲诱导去核卵母细胞和成纤维细胞融合
D.克隆猴的获得体现了动物体细胞的细胞核具有全能性
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受精卵经基因编辑后形成的胚胎发育成的个体不能叫作克隆猴，克隆猴是通过核移植后发育而成的，B错误。
13.(2023·金华高二期末)如图为杂交瘤细胞的制备及初步筛选示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT－)，在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长。B淋巴细胞(HGPRT＋)能
在HAT筛选培养液中正常生长。下列叙述正确的是
A.从HAT培养液中获得的抗体即为单克隆抗体
B.仙台病毒处理可使细胞膜发生一定程度的损伤，
进而促进细胞融合
C.在HAT培养液中能长期存活的细胞具有特异性强、灵敏度高的特点
D.多个B淋巴细胞融合形成的多聚细胞在HAT培养液中死亡的原因是不能合成
DNA
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在HAT培养液中筛选出来的是杂交瘤细胞，可
能有多种类型，因此后续还需要对这些杂交瘤
细胞进行单一抗体检测，进而筛选出能产生特
定抗体的杂交瘤细胞，可见从HAT培养液中获
得的抗体不是单克隆抗体，A错误；
仙台病毒处理可使细胞膜发生一定程度的损伤，进而促进细胞融合，据此可用灭活的仙台病毒作为促融剂，B正确；
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在HAT培养液中能长期存活的细胞为杂交瘤
细胞，这些细胞可能产生多种类型的抗体，
因而不具有特异性强、灵敏度高的特点，C
错误；
多个B淋巴细胞融合形成的多聚细胞在HAT
培养液中死亡的原因是不能无限增殖，D错误。
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14.下列关于“核酸探针”的叙述，错误的是
A.核酸探针既可以检测某一特定的DNA，也可检测RNA
B.核酸探针是一小段具有特定核苷酸序列的单链核酸序列
C.核酸探针既可以检测核酸分子，又可以检测特定的蛋白质
D.核酸探针以单链形式发挥作用，其放射性和荧光标记便于检测
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核酸探针是通过碱基互补配对与目标物结合的，所以无法检测蛋白质，C错误。
15.下列关于基因文库的说法，错误的是
A.基因文库包括基因组文库和cDNA文库
B.cDNA文库含有某种生物的部分基因
C.cDNA文库中的基因不含内含子，含有启动子
D.同种生物的cDNA文库中基因数量较基因组文库少
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由于基因转录过程中，不转录启动子序列，内含子序列转录下来后在RNA成熟的过程中被剪切掉，所以由mRNA逆转录形成的cDNA文库中的基因不含内含子和启动子，C错误。
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16.如图是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图，载体质粒具有四环素抗性基因(tetr)和氨苄青霉素抗性基因(ampr)。
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转化大肠杆菌后，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到A、B、C、D四种菌落，其生长情况如表所示(注：“＋”代表生长，“－”代表不生长)。
平板类型 菌落类型 无抗生素 氨苄青霉素 四环素 氨苄青霉素＋四环素
菌落A ＋ ＋ ＋ ＋
菌落B ＋ ＋ － －
菌落C ＋ － － －
菌落D ＋ － ＋ －
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根据表中结果判断，含有重组质粒的菌落是
A.菌落A B.菌落B
C.菌落C D.菌落D
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平板类型 菌落类型 无抗生素 氨苄青霉素 四环素 氨苄青霉素＋四环素
菌落A ＋ ＋ ＋ ＋
菌落B ＋ ＋ － －
菌落C ＋ － － －
菌落D ＋ － ＋ －
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分析题图可知，构建重组质粒时，目的
基因插入四环素抗性基因(tetr)中间，破
坏了四环素抗性基因(tetr)，氨苄青霉素
抗性基因(ampr)没有被破坏。因此含有重组质粒的菌落在添加了四环素的培养基中不能生长，而在添加了氨苄青霉素的培养基中能生长，故选B。
17.(2024·嘉兴高二联考)染色质是由一定
长度的核小体为基本单位构成的。将大
鼠肝细胞中分离出的染色质用非特异性
核酸酶水解后去除染色质蛋白，对得到
的DNA片段进行凝胶电泳，结果如图所
示。若先将染色质中的蛋白质去除后用同样的非特异性核酸酶处理，则得到随机长度的DNA片段。据此分析，下列有关叙述错误的是
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选择题
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A.凝胶中的DNA分子通过染色可以被检
测出来
B.染色质中的蛋白质可能对DNA具有保
护作用
C.构成核小体的基本单位是脱氧核糖核
苷酸
D.在凝胶中，DNA分子的迁移速率与凝胶浓度、DNA分子的大小和构象
等有关
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选择题
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√
由图可知，染色质用核酸酶处理后，
得到的是部分水解的染色质，但若
先将染色质中的蛋白质去除后用核
酸酶处理，则得到随机长度的DNA
片段，说明染色质中的蛋白质可能对DNA具有保护作用，B正确；
染色质是由一定长度的核小体为基本单位构成的，核小体的组成成分是蛋白质和DNA，其基本单位是脱氧核糖核苷酸和氨基酸，C错误。
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选择题
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18.(2024·金华高二质检)将某转基因植株(导入了抗除草剂基因G)连续自交后获得后代群体。为检测该群体中含G基因植株的比例，用4种方法分别进行检测，预测所得结果最低的是
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选择题
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选项 检测方法 检测对象 检出的含G基因植株的比例
A PCR技术 G基因 x1
B 核酸分子杂交 G基因转录产物 x2
C 抗原－抗体杂交 G基因编码的蛋白质 x3
D 喷洒除草剂 幼苗对除草剂的抗性 x4
√
PCR技术可以用来鉴定受体细胞中是否导入目的基因；导入受体细胞中的目的基因不一定完成转录，则用核酸分子杂交检测目的基因转录产物含量一般比目的基因少；导入受体细胞中的目的基因虽然完成转录但不一定成功翻译，则检测目的基因翻译产物一般比转录产物含量少；即使目的基因表达出相应蛋白质，植株也不一定能表现出相应抗性，所以检测出含G基因植株的比例由高到低依次为x1、x2、x3、x4。
选择题
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19.(2023·湖州高二阶段检测)实时荧光定量PCR可用于对样品中特定DNA序列进行定量分析。将荧光标记的Taq man探针与待测样本DNA混合，当探针完整时，不产生荧光。在PCR过程中，与目的基因结合的探针被TaqDNA聚合酶水解，R与Q分离后，在特定光的激发下R发出荧光，随着循环次数的增加，荧光信号强度增加，通过实时检测荧光信号强度，可得Ct值(达到荧光阈值所经历的循环次数)。下列相关叙述正确的是
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选择题
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A.荧光基因R连接在探针的3′端
B.该反应体系中并未加入ATP，所以新链的合成
不需要消耗能量
C.Taq DNA聚合酶在该反应中的作用是合成磷
酸二酯键
D.Ct值越小，说明样品中特定DNA序列的含量
越多
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选择题
引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸，从图中引物1的方向可以分析出，荧光基因R连接在探针5′端，A错误；
该反应体系中并未加入ATP，但新链的合成需要消耗能量，B错误；
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选择题
在该反应中Taq DNA聚合酶有两个作用，一是形成子链的磷酸二酯键，二是水解探针，破坏磷酸二酯键，C错误；
Ct值越小，即达到阈值所经历的循环次数越少，说明样品中特定DNA序列的含量越多，D正确。
24
25
选择题
20.生物技术的发展给人类带来诸多好处的同时，也引发了许多关于生物技术安全与伦理问题的担忧。下列观点中合理的是
A.转基因生物的研究和应用均需要进行安全性评价后才能进行
B.通过试管婴儿无性生殖技术可解决不孕不育问题
C.应反对一切形式的针对人类细胞的克隆研究
D.可以通过微生物改造研究生物武器，提高国防实力
√
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选择题
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试管婴儿是通过体外受精的有性生殖技术，B不合理；
生物武器具有致病性强、攻击范围广等特点，世界各国都应抵制，D不合理。
非选择题
21.(2024·宁波高二期中)益生菌是一类能改变宿主某一部位菌群组成且对宿主有益的活性微生物，常见的益生菌有酵母菌、乳酸菌等。回答下列问题：
(1)对氧气的需求方面，与醋酸菌相比，乳酸菌的特点是____________；乳酸菌和酵母菌在细胞结构方面的主要区别是______________________
______。
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不需要氧气
乳酸菌不具有成形的细
胞核
非选择题
(2)乳酸菌常用于泡菜制作，制作过程中会用清水和食盐配制质量百分比为5%～20%的盐水，并将盐水煮沸，煮沸的目的是__________________
_________________。
(3)培养乳酸菌时，对泡菜汁进行系列梯度稀释的目的是______________
__________________________________________________。
培养乳酸菌时，培养基上形成的菌落并非全是乳酸菌菌落，为初步判断菌种类型，还需要观察培养基上菌落的__________________等特征。配制好的培养基通常可以使用_________法灭菌。
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杀灭杂菌，同时可
去除部分溶解氧
保证每个菌落都是由一个单细胞繁殖而来(答出为了获得单菌落即可)
形状、大小、颜色
高压灭菌
非选择题
(4)某生物兴趣小组为测定泡菜水中的乳酸菌含量，利用显微镜直接计数，结果往往偏大，原因可能是______________________________________
______。
(5)进行销售的泡菜食品还需要进行食品卫生微生物学检验，如对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等微生物进行培养和计数，该过程中所用到的接种方法是________________。
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利用显微镜直接计数时不能区分活菌和
死菌
稀释涂布平板法
非选择题
22.通过动物细胞融合技术可以制备杂交瘤细胞，对健康的实验小鼠进行腹腔内免疫，一周后取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选。
(1)动物细胞融合一般用____________进行生物诱导。
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灭活的病毒
非选择题
(2)正常细胞合成DNA有两条途径：a通路和b通路。骨髓瘤细胞是DNA合成b通路的缺陷型细胞株，让B淋巴细胞与其融合，再在加入DNA合成a通路阻断剂(氨基蝶呤)的培养液中培养，这种培养会产生以下哪些效果____
(多选)。
A.促进细胞融合 B.淘汰B淋巴细胞
C.淘汰骨髓瘤细胞 D.阻断杂交细胞DNA合成
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BC
非选择题
动物细胞融合方法有物理法、化学法(聚乙二醇)、生物法(灭活的病毒)，而该培养对细胞融合没有影响，A不符合题意；
B淋巴细胞的复制次数有限，不能在培养基上长期存活，该培养基能淘汰B淋巴细胞，B符合题意；
骨髓瘤细胞是b通路缺陷型细胞株，剩下的a通路被阻断，不能合成DNA，该培养基能淘汰骨髓瘤细胞，C符合题意；
加入DNA合成a通路阻断剂后，杂交细胞还具有b通路，因此不能阻断杂交细胞DNA合成，D不符合题意。
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非选择题
(3)经选择培养的杂交瘤细胞，还需要进行____________和抗体检测，经多次筛选，可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
(4)杂交瘤细胞体外培养过程_____(填“是”或“否”)需要添加血清。试分析原因：______________________________________________，通过杂交瘤细胞获得的单克隆抗体的最大优点是_________________________
_________________________。
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克隆化培养
是
人们对动物细胞所需要的营养物质没有完全搞清楚
纯度高，可大量制备，在应用时特异性强、灵敏度高
非选择题
23.(2024·浙江高二期中)猪蓝耳病又称猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)，由动脉炎病毒科中的猪繁殖与呼吸综合征病毒(简称蓝病毒)引起。患病动物主要表现为繁殖障碍、呼吸困难、耳朵蓝紫。母猪感染该病毒后会在妊娠晚期流产，为培育抗蓝病毒的转基因猪，工作人员根据哺乳动物受精作用和早期胚胎的发育过程提出了解决方案(如图)。请回答下列问题：
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非选择题
(1)B猪体细胞在培养瓶中培养时，要保证培养液无菌、无毒，常在培养液中加入________，另外还需定期更换培养液，以防止_______________
__________对细胞自身造成的伤害。培养到一定程度后，还需用_______
______处理后分装到多个培养瓶中进行传代培养。
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抗生素
细胞代谢产生的
有毒物质
胰蛋
白酶
非选择题
(2)由于目的基因不能直接导入受体细胞，因此需要构建基因表达载体，该过程需要用的酶有_____________________。常采用双酶切法处理含目的基因的DNA片段和载体，其优点是_______________________________
______________。
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限制酶、DNA连接酶
防止目的基因和载体发生自身环化或反向连接
非选择题
(3)通过步骤①的技术手段________得到甲，培养至乙______，然后移植到同种的、______________的C猪体内，由于C猪对乙不发生__________，从而为胚胎在受体内的存活提供了可能。
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核移植
囊胚
生理状态相同
免疫排斥
非选择题
(4)利用________________技术检验D猪是否产生相应的抗体。该抗体也可使用杂交瘤技术来制备，通常情况下，杂交瘤细胞是由经培养的骨髓瘤细胞和___________________________________细胞融合获得的，与诱导植物原生质体融合方法不同的是______________________。
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抗原—抗体杂交
经蓝病毒抗原(外壳蛋白)免疫的B淋巴
灭活的(仙台)病毒诱导
非选择题
24.(2023·金华高二期末)甜玉米与普通玉米
相比，甜玉米中可溶性糖向淀粉的转化速
度较慢，含可溶性糖量高，汁多质脆，富
含多种维生素。为了使甜玉米更富有生产
应用价值，科研人员通过转基因技术培育出了超量表达P蛋白的转基因甜玉米。在超量表达P基因载体的构建中，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图所示。(注：强启动子是一段有特殊结构的DNA片段；BamHⅠ、HindⅢ、EcoRⅠ、NotⅠ、SacⅠ代表不同的限制酶；T－DNA是农杆菌的Ti质粒上的DNA片段。)
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非选择题
(1)为了特异性扩增P基因序列，可采用______技术，一般要加入的原料为__________________________。
(2)强启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被____________识别并结合，驱动基因的持续转录。
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PCR
四种脱氧核苷三磷酸(dNTP)
RNA聚合酶
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启动子位于基因的“上游”，有RNA聚合酶结合的位点，控制转录的开始，因而强启动子能被RNA聚合酶识别并结合，驱动基因的持续转录。
非选择题
(3)构建能超量表达P基因的载体，需选用________________限制酶的组合和DNA连接酶。将重组Ti质粒转入农杆菌，需先将农杆菌用__________处理。
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BamHⅠ和SacⅠ
CaCl2溶液
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在构建基因表达载体时，要想使P基
因在玉米植株中超量表达，切割目
的基因时需要把强启动子和P基因连
在一起切割下来，因此需要用到限
制酶BamHⅠ切割，限制酶EcoRⅠ和NotⅠ会破坏目的基因，因此应选用的限制酶是BamHⅠ和SacⅠ。将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用CaCl2溶液处理农杆菌使之成为感受态细胞，易于重组Ti质粒导入。
非选择题
(4)将玉米愈伤组织经农杆菌液浸泡，超
量表达P基因会随T－DNA___________
____________________，从而获得转基
因植物细胞。继而进行植物组织培养，
培养基中需加入________进行筛选，筛选出的愈伤组织经________过程形成丛芽，然后在________(填激素名称)较多的培养基上形成根，最终获得多个玉米株系。发现某株系的P蛋白表达量较低，请对该现象作出合理的解释：__________________________________________________。
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整合到玉米
细胞的染色体DNA中
潮霉素
再分化
生长素
该株系玉米中可能没有导入目的基因或目的基因未表达
非选择题
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由题图可知，潮霉素抗性基因位于Ti质
粒的T－DNA，可以随T－DNA整合到
玉米细胞的染色体DNA中，所以将农杆
菌浸泡过的玉米愈伤组织进行植物组织
培养，培养基中需加入潮霉素进行筛选，筛选出的愈伤组织可再分化形成丛芽，然后在生长素较多的培养基上形成根，最终获得多个转基因玉米株系。蛋白质的表达量与基因的表达有关，故P蛋白表达量较低的原因可能是该株系玉米中没有导入目的基因或者目的基因没有表达。
非选择题
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25.如图表示畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，请分析回答下列有关问题：
(1)过程①技术为______________________。
(2)过程②常用________激素处理，目的是使B牛__________。
动物体细胞核移植技术
促性腺
超数排卵
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(3)自然条件下，A牛的精子必须在B牛的生殖道中经过相应的生理变化后，才能与B牛的卵细胞结合，完成受精作用，这个过程叫作_________。完成受精的实质是__________________。
(4)方法Ⅰ和方法Ⅱ培育优良种牛的本质区别是______________________
____________________________________。
精子获能
雌、雄原核的融合
方法Ⅰ的培育为有性生
殖过程，方法Ⅱ的培育为无性生殖过程

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