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1.2.1 微生物的培养技术及应用 同步练习
1.（2024 福建厦门期末）下列关于培养基的叙述，错误的是（ ）
A. 培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质
B. 培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质
C. 牛肉膏蛋白胨培养基属于合成培养基
D. 培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素
2.（2023 广东广州月考）下列关于无菌技术的叙述，错误的是（ ）
A. 对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒
B. 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌
C. 为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行
D. 灭菌是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）
3.（2024 山东济南期末）下列关于消毒和灭菌的说法，正确的是（ ）
A. 消毒和灭菌的原理是相同的
B. 接种环常用灼烧灭菌法进行灭菌
C. 高压蒸汽灭菌锅灭菌时，锅内的物品越多越好
D. 巴氏消毒法可用于牛奶、果汁等的消毒，能杀死其中所有的微生物
4.（2023 湖北武汉月考）平板划线法和稀释涂布平板法是微生物接种常用的两种方法，下列关于这两种方法的叙述，错误的是（ ）
A. 平板划线法和稀释涂布平板法都可以用于分离微生物
B. 平板划线法中，每次划线前都要将接种环灼烧灭菌
C. 稀释涂布平板法中，需要将菌液进行一系列的梯度稀释
D. 平板划线法和稀释涂布平板法都能准确计数微生物的数量
5.（2024 湖南长沙期末）下列关于微生物培养的叙述，正确的是（ ）
A. 培养微生物的培养基都需要添加琼脂
B. 接种微生物时，为了避免杂菌污染，需要在酒精灯火焰旁进行操作
C. 培养微生物时，培养皿应正放在恒温培养箱中
D. 微生物的生长都需要充足的氧气
6.（2023 江苏南京月考）下列有关培养基配制的叙述，正确的是（ ）
A. 配制培养基时，应先调 pH 再灭菌
B. 配制培养基时，各种营养物质都要严格按照配方准确称量
C. 培养基中加入的琼脂能为微生物提供碳源
D. 所有培养基都必须含有碳源、氮源、水和无机盐
7.（2024 浙江杭州期末）下列关于微生物接种的叙述，错误的是（ ）
A. 用平板划线法接种时，最后一次划线不能与第一次划线相连
B. 用稀释涂布平板法接种时，接种前要将涂布器灼烧灭菌
C. 用平板划线法接种时，接种环在每次划线前后都要灼烧灭菌
D. 用稀释涂布平板法接种时，每个稀释度下都要涂布多个平板
8.（2023 河南郑州月考）下列关于微生物培养和计数的叙述，正确的是（ ）
A. 统计菌落数目时，为了保证结果准确，应选择菌落数在 300 以上的平板进行计数
B. 稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目高
C. 利用显微镜直接计数法统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和
D. 对微生物进行计数只能采用稀释涂布平板法
9.（2024 广东深圳期末）下列关于无菌技术的操作，正确的是（ ）
A. 用酒精擦拭双手属于灭菌
B. 对培养基进行高压蒸汽灭菌时，压力达到 100kPa 时，维持 15～30min
C. 为了避免杂菌污染，使用后的培养基要及时倒掉
D. 对接种环进行灼烧灭菌时，应将接种环在酒精灯火焰的内焰部分灼烧
10.（2023 四川成都月考）下列关于微生物培养技术的叙述，错误的是（ ）
A. 培养基的营养成分一般都含有碳源、氮源、水和无机盐等
B. 无菌技术除了防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效避免操作者自身被微生物感染
C. 平板划线法和稀释涂布平板法都可以用于微生物的分离和纯化
D. 微生物的培养都需要在恒温培养箱中进行
11.（2024 辽宁沈阳期末）下列关于微生物培养过程的叙述，正确的是（ ）
A. 制备培养基时，应先灭菌再倒平板
B. 倒平板时，培养基的温度应控制在 100℃左右
C. 平板冷凝后，要将平板倒置，目的是防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染
D. 接种微生物后，应将平板放在光照充足的地方培养
12.（2023 湖北宜昌月考）下列关于微生物计数的叙述，错误的是（ ）
A. 利用显微镜直接计数法计数时，需要借助血细胞计数板
B. 稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少
C. 统计菌落数目时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在 30～300 之间的平板进行计数
D. 利用显微镜直接计数法统计的结果是活菌数
13．（2024 辽宁沈阳期末）下图甲、乙是微生物接种常用的两种方式，回答相关问题：
（1）图甲是利用___________法进行微生物接种的，图乙是利用______法进行微生物接种的，这两种方法所用的接种工具分别是______和______；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是______和酒精消毒。
（2）平板划线时，为保证微生物的数目随划线次数的增加而逐步减少，每次划线都要从_______开始，平板划线结束后，最后一次划的线不能与第一次划的线______。
（3）接种操作为什么一定要在酒精灯火焰附近进行？______。
（4）假设用图乙所示方法接种培养结束后，发现培养基上菌落连成一片，可能的原因是_______。
14．（2024 广东深圳期末）奶酪是中国西北的蒙古族、哈萨克族等游牧民族的传统食品，在内蒙古称为奶豆腐，如图是天然奶酪的简要制作过程，其中凝乳是指凝固的牛奶，酸性物质一般都可以使牛奶变性凝固。某牛奶厂从自然发酵的凝乳中筛选具有优良发酵性能的微生物菌种。请据此回答问题：
（1）由奶酪制作过程可推测，儿童食用天然奶酪比牛奶更容易消化吸收，请分析原因：________。加热压缩过程可以去除凝乳中多余的________，有利于奶酪的硬化和保存。
（2）为了保证奶酪的品质和营养，牛奶在发酵之前应该进行消毒处理，请选择合理的处理方法___。
A.100℃处理30min
B.62~65℃处理30min
C.80~90℃处理30s~1min
（3）这一株优良菌株分离纯化常采用的接种方法是________法和________法。纯化培养时通常需要将接种培养基与未接种培养基同时培养，原因是________。纯化培养后，需将菌种临时保藏，可采取的保藏方法是________________。
（4）最终筛选出的菌种还需要进行产酸能力的测定，已知固体培养基会因为添加碳酸钙而呈乳白色，碳酸钙会被酸性物质反应形成透明圈，则此种培养基从功能上看属于________培养基。
参考答案
1.答案：C
解析：培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，A 正确；培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质，B 正确；牛肉膏蛋白胨培养基属于天然培养基，不是合成培养基，C 错误；培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素，D 正确。
2.答案：D
解析：对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒，A 正确；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌，B 正确；为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行，C 正确；灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，D 错误。
3.答案：B
解析：消毒和灭菌的原理不同，消毒是使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子），灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，A 错误；接种环常用灼烧灭菌法进行灭菌，B 正确；高压蒸汽灭菌锅灭菌时，锅内的物品不能过多，要留有一定空间，以利于蒸汽流通，C 错误；巴氏消毒法可用于牛奶、果汁等的消毒，只能杀死其中的部分微生物，D 错误。
4.答案：D
解析：平板划线法和稀释涂布平板法都可以用于分离微生物，A 正确；平板划线法中，每次划线前都要将接种环灼烧灭菌，以杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，B 正确；稀释涂布平板法中，需要将菌液进行一系列的梯度稀释，以便在平板上形成单个菌落，C 正确；稀释涂布平板法能准确计数微生物的数量，平板划线法不能准确计数，D 错误。
5.答案：B
解析：培养微生物的培养基不一定都需要添加琼脂，只有固体培养基需要添加琼脂，A 错误；接种微生物时，为了避免杂菌污染，需要在酒精灯火焰旁进行操作，B 正确；培养微生物时，培养皿应倒置放在恒温培养箱中，C 错误；有些微生物是厌氧菌，生长不需要充足的氧气，D 错误。
6.答案：A
解析：配制培养基时，应先调 pH 再灭菌，A 正确；配制培养基时，各种营养物质不一定都要严格按照配方准确称量，可根据实际情况适当调整，B 错误；培养基中加入的琼脂是凝固剂，不能为微生物提供碳源，C 错误；不是所有培养基都必须含有碳源、氮源、水和无机盐，如培养自养型微生物的培养基可以不含碳源，培养固氮菌的培养基可以不含氮源，D 错误。
7.答案：A
解析：用平板划线法接种时，最后一次划线可以与第一次划线相连，A 错误；用稀释涂布平板法接种时，接种前要将涂布器灼烧灭菌，B 正确；用平板划线法接种时，接种环在每次划线前后都要灼烧灭菌，C 正确；用稀释涂布平板法接种时，每个稀释度下都要涂布多个平板，以保证实验结果的准确性，D 正确。
8.答案：C
解析：统计菌落数目时，为了保证结果准确，应选择菌落数在 30～300 之间的平板进行计数，A 错误；稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，B 错误；利用显微镜直接计数法统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和，C 正确；对微生物进行计数可采用稀释涂布平板法和显微镜直接计数法等，D 错误。
9.答案：B
解析：用酒精擦拭双手属于消毒，A 错误；对培养基进行高压蒸汽灭菌时，压力达到 100kPa 时，维持 15～30min，B 正确；为了避免杂菌污染，使用后的培养基要进行灭菌处理后再倒掉，C 错误；对接种环进行灼烧灭菌时，应将接种环在酒精灯火焰的外焰部分灼烧，因为外焰温度最高，D 错误。
10.答案：D
解析：培养基的营养成分一般都含有碳源、氮源、水和无机盐等，A 正确；无菌技术除了防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效避免操作者自身被微生物感染，B 正确；平板划线法和稀释涂布平板法都可以用于微生物的分离和纯化，C 正确；微生物的培养不一定都需要在恒温培养箱中进行，有些微生物在常温下就能生长，D 错误。
11.答案：C
解析：制备培养基时，应先灭菌再倒平板，A 错误；倒平板时，培养基的温度应冷却至 50℃左右，B 错误；平板冷凝后，要将平板倒置，目的是防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，C 正确；接种微生物后，应将平板放在恒温培养箱中培养，不需要光照，D 错误。
12.答案：D
解析：利用显微镜直接计数法计数时，需要借助血细胞计数板，A 正确；稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，B 正确；统计菌落数目时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在 30～300 之间的平板进行计数，C 正确；利用显微镜直接计数法统计的结果是活菌数和死菌数的总和，D 错误。
13．答案：（1）平板划线；稀释涂布平板；接种环；涂布器；灼烧灭菌
（2）上一次划线的末端；相连（或相接、相交、交叉等）
（3）酒精灯火焰附近存在着无菌区域
（4）稀释倍数不够，菌液的浓度太高
解析：（1）根据图甲接种后的结果可知，甲接种微生物采用的是平板划线法，这种方法的接种工具是接种环；图乙在培养基中央滴了一滴培养液，可见其利用的是稀释涂布平板，该方法的接种工具是涂布器。对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是灼烧灭菌和酒精消毒。
（2）平板划线时，每次划线前都要从上一次划线的末端开始，这是因为接种环需通过上一次的划线获得菌种后再进行下一次的划线分离，这样才能保证微生物的数目随划线次数的增加而逐步减少。平板划线结束后，最后一次的划线不能与第一次的划线相连（或相接、相交、交叉等）。
（3）由于火焰附近存在着无菌区域，因此为了防止杂菌污染，接种操作一定要在火焰附近进行。
（4）采用稀释涂布平板法进行菌种分离时，如果稀释倍数不够，菌液的浓度太高，就会导致微生物不能分散成单个细胞，在培养基上会出现菌落连成一片的现象。
14．答案：（1）由制作过程可知，奶酪制作过程中经过了微生物发酵，将牛奶中蛋白质分解或变性处理，都有利于蛋白质的消化和吸收；水分
（2）BC
（3）平板划线法；稀释涂布平板法；检测培养基的制备是否合格，以保证培养基上的菌落均来自培养液（确定培养基灭菌处理合格，没有杂菌污染）；接种至固体斜面培养基，在合适温度下培养。当菌落长成后，将试管放入4℃条件下培养
（4）鉴别
解析：（1）由制作过程可知，奶酪制作过程中牛奶经过了微生物发酵，将牛奶中蛋白质分解为小分子或变性处理，都有利于蛋白质的消化和吸收，加热压缩过程去除水分，水分减少，奶酪的硬度加大，不利于微生物生长，有利于储存。
（2）煮沸消毒法是在100℃煮沸5~6分钟可以杀死微生物细胞和一部分芽孢，但对于牛奶这些不耐高温的液体，使用巴氏消毒法，在75~90℃中保温15秒，不仅可以杀死牛奶中的微生物，还可以使牛奶的营养成分不被破坏，A错误，BC正确。
故选BC。
（3）为检测培养基的制备是否合格，以保证培养基上的菌落均来自培养液，在纯化培养时通常需要将接种培养基与未接种培养基同时培养：若空白培养基上出现菌种，则证明培养基被污染。菌种临时保存的方法为：接种至固体斜面培养基，在合适温度下培养。当菌落长成后，将试管放入4℃条件下培养。
（4）因CaCO3可与产酸菌产生的酸反应，产酸菌周围的CaCO3与酸反应后产生无色物质，形成透明圈，故可利用此原理利用CaCO3筛选出产酸菌。此种培养基从功能上看属于鉴别培养基。

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