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2.2.1动物细胞培养 同步课时作业
一、单项选择题
1.在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是( )
A.获得不死性的细胞 B.10代以内细胞
C.原代细胞 D.传代细胞
2.动物细胞培养一段时间后，需要将原培养瓶内的细胞稀释后转移到多个培养瓶进行传代培养。下列不属于需要进行传代培养原因的是( )
A.细胞出现了接触抑制现象
B.细胞出现了贴壁生长现象
C.营养物质枯竭
D.培养空间有限
3.关于动物细胞培养的叙述，错误的是( )
A.培养液中通常需要添加血清等天然成分
B.传代培养前可用胃蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散
C.分瓶培养前需用培养液稀释调整到合适的细胞密度
D.培养过程中通过定期更换培养液以保证无毒环境
4.干细胞的成功培养是动物细胞培养领域的重大成就之一，干细胞的应用前景吸引着众多科学家投入到相关研究中。下列说法错误的是( )
A.将干细胞进行悬浮培养会因密度过大而分裂受阻
B.胚胎干细胞和成体干细胞都能够分化成各种组织和细胞
C.干细胞的培养需要95%空气和5%CO2的混合气体
D.可以通过直接将特定蛋白导人细胞中来诱导形成iPS细胞
5.如图为肾脏上皮细胞培养过程示意图，下列叙述正确的是( )
A.甲→乙过程可直接用胃蛋白酶进行处理
B.肾脏上皮细胞在培养过程中具有细胞贴壁的现象
C.丙到丁的过程只需要定期更换培养液
D.细胞培养液中需要加入血清以抑制微生物生长
6.下列有关动物细胞培养的叙述，正确的是( )
A.原代培养和传代培养前都可以使用胰蛋白酶
B.培养过程中需将细胞置于含95%O2和5%CO2的混合气体的培养箱中
C.配制合成培养基要加入糖、促生长因子、氨基酸、琼脂等成分
D.培养液中添加适量的抗生素可为细胞提供无菌、无毒的培养环境
7.下列关于动物细胞体外培养的叙述，错误的是( )
A.需要无毒、无菌的培养环境 B.配制培养基时需添加血清
C.培养温度与动物体温相近 D.向培养液中加入酸碱物质调节pH
8.植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是( )
A.纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性
B.植物细胞培养和动物细胞培养——细胞的全能性
C.原生质体融合和动物细胞融合——生物膜的流动性
D.紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂
9.实验小鼠皮肤细胞进行贴壁生长培养的基本过程如图所示。下列叙述不正确的是( )
实验小鼠皮肤组织皮肤细胞原代培养传代培养
A.甲过程需要在无菌条件下进行
B.乙过程需要将获得的皮肤组织分散成单个细胞
C.原代培养时可能出现接触抑制现象
D.丁过程可以直接离心来进行传代培养
10.下列有关植物组织培养和动物细胞培养的叙述，正确的是( )
A.植物组织培养和动物细胞培养均可用于培育脱毒个体
B.一般来说，容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养
C.植物组织培养和动物细胞培养所用培养基都是固体培养基
D.为了防止细胞培养过程中细菌污染，可向培养基中添加大量抗生素
11.小鼠的淋巴细胞在培养时常常悬浮在培养液中生长增殖，猪的输卵管上皮细胞在培养时则粘附在培养瓶内壁上生长增殖。下列相关叙述，正确的是( )
A.配制动物细胞培养液通常要加入血清等天然成分，属于天然培养基
B.小鼠的淋巴细胞和猪的输卵管上皮细胞在培养时会发生接触抑制现象
C.猪的输卵管上皮细胞进行传代培养时直接用离心法收集
D.小鼠的淋巴细胞会因细胞密度过大、有害代谢物积累和营养物质缺乏而分裂受阻
12.图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述不正确的是( )
A.步骤③所使用的培养液和培养用具均需要进行灭菌处理
B.步骤④的分瓶培养可降低有害物质积累对细胞分裂的抑制
C.步骤③到④的分瓶操作前常用胃蛋白酶处理使之分散为单个细胞
D.步骤②中常使用胰蛋白酶和胶原蛋白酶等使组织分散为单个细胞
13.在治疗烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对大面积烧伤的病人，自体健康的皮肤非常有限。为解决该问题，利用动物细胞培养技术可以得到大量的自体健康皮肤。下列关于该技术的叙述，正确的是( )
A.将烧伤病人的组织分散成单个细胞需要用胰蛋白酶或胃蛋白酶处理
B.培养的细胞需要经过脱分化形成愈伤组织
C.培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等
D.原代培养和传代培养所需的营养液成分不同
二、非选择题
14.如图所示为动物细胞培养过程中，动物细胞增殖情况的变化曲线（图中B、D两点表示经筛选后继续培养），请据图回答下面的问题：
（1）OA段的培养称为____________培养，AB段可能发生了____________现象，需要用____________酶处理，以使组织细胞分散开来。
（2）动物细胞培养和植物组织培养过程中，就细胞增殖、分化来说，动植物细胞都要进行____________，不同的是植物细胞还要进行____________。
15.某生物兴趣小组对一种抗癌新药进行实验时，以动物肝癌细胞为材料，测定抗癌药物对体外培养细胞增殖的影响。请回答下列有关问题：
（1）在动物细胞培养时，将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基称为____________培养基。
（2）体外培养的动物细胞有一类需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，这种现象称为____________，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖，这种现象称为____________。
（3）一般来说，在动物细胞培养过程中，除了提供细胞所需的营养物质外，还需提供____________、____________、____________等环境条件。
（4）进行传代培养时，悬浮培养的细胞直接用收集，贴壁细胞需要重新用酶等处理，使之分散成单个细胞，然后收集____________。
（5）请你帮助兴趣小组的同学分析本实验，实验的自变量和因变量分别是____________。
答案以及解析
1.答案：A
解析：A、动物细胞传代培养过程中产生的不死性的细胞，其遗传物质已发生改变，A正确；B、动物细胞培养过程中一般细胞可连续分裂10-50代，遗传物质不发生改变，B错误；C、原代培养的细胞具有继续增殖能力，遗传物质一般不发生改变，C错误；D、传代培养10代以内的细胞，细胞核型不变，遗传物质不变，D错误。故选A。
2.答案：B
解析：A、动物细胞培养可以分为原代培养和传代培养，原代培养到一定程度后要进行传代，因为细胞有接触抑制现象，当细胞接触时就会停止分裂，因此为了获得更多子细胞，需要进行传代培养，A不符合题意；
B、细胞贴壁生长不会抑制细胞分裂，因此这不是传代培养的原因，B符合题意；
CD、动物细胞培养技术的原理是细胞增殖，由于细胞不断的增殖，培养液中的营养物质被不断消耗，且由于培养空间有限，会使增殖后的细胞出现接触抑制，这些都会抑制细胞分裂，因此需要传代培养，CD不符合题意。
故选B。
3.答案：B
解析：A、培养液中通常需加入血清、血浆等天然成分，为动物细胞增殖过程提供必需的成分，A正确；
B、传代培养前可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散，不用胃蛋白酶，B错误；
C、分瓶培养前需用培养液稀释调整到合适的细胞密度，有利于细胞增殖，C正确；
D、细胞培养液应定期更换培养液，以便清除代谢废物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，D正确。
故选B。
4.答案：B
解析：悬浮培养的干细胞会因细胞密度过大、有害代谢产物积累等因素而分裂受阻，A说法正确；胚胎干细胞能够分化成各种组织和细胞，成体干细胞只能分化成特定的组织或细胞，B说法错误；干细胞的培养需要的气体条件是95%的空气和5%的CO2，C说法正确；可以通过借助载体将特定基因导入细胞中、直接将特定蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等方法来诱导形成iPS细胞，D说法正确。
5.答案：B
解析：A、甲剪碎肾脏组织块→乙制成细胞悬液过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，分散成单个细胞，而不能用胃蛋白酶，A正确；B、肾脏上皮细胞在原代培养和传代培养过程均会出现细胞贴壁现象，B正确；C、甲为原代培养过程，乙为传代培养过程，丙到丁的过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶将处理成单个细胞，制成细胞悬液后分瓶培养，C错误；D、细胞培养液中需要加入适量抗生素以抑制微生物生长，加入血清的目的是补充动物细胞所需的未知营养物质，D错误。故选B。
6.答案：A
解析：原代培养前用胰蛋白酶可使组织分散成单个细胞，传代培养前需要用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来，故A正确；将培养皿或培养瓶要置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养，而非细胞，故B错误；合成培养基是液体状态，无需加琼脂，故C错误；培养液中添加适量的抗生素以防培养过程中的污染，为细胞提供无菌、无毒的培养环境，需对培养液和所有培养用品进行无菌处理，故D错误。
7.答案：D
解析：A、动物细胞培养需要无菌、无毒的环境，A正确；B、合成培养基中通常需加入动物血清，B正确；C、温度会影响酶活性，因此培养过程中需要温度与动物体温相近，C正确；D、培养液中调节pH是通过通入5%的二氧化碳实现的，D错误。故选D。
8.答案：B
解析：A、植物细胞壁主要成分是纤维素和果胶，因此利用纤维素酶、果胶酶去除植物细胞壁是利用了酶的专一性；动物细胞之间主要是蛋白质，因此利用胰蛋白酶使动物组织分散成单个细胞也是利用了酶的专一性，A正确；B、动物细胞培养最终没有获得完整个体，因此不是利用细胞的全能性，B错误；C、原生质体融合和动物细胞融合都是细胞膜的融合，因此都利用了生物膜的流动性，C正确；D、紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养都是利用细胞分裂的原理来获得大量细胞，D正确。故选B。
9.答案：D
解析：A、离体动物细胞培养需要无菌无毒的环境，需要对实验小鼠进行消毒处理，A正确；B、乙表示用胰蛋白酶处理皮肤组织，使其分散成单个皮肤细胞，获得单细胞悬液后再进行细胞培养，B正确；C、丙表示原代培养，培养过程中会出现贴壁生长和接触抑制现象，此后用胰蛋白酶处理后获得单细胞悬液，再进行传代培养，C正确；D、丁是传代培养过程，小鼠皮肤细胞进行贴壁生长，因而不能直接离心进行传代培养，D错误。故选D。
10.答案：B
解析：A、植物组织培养可用于培育脱毒个体，动物细胞培养一般不能得到个体，A错误；B、组织培养技术也是无性繁殖技术的一种，一般来说，容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养，B正确；C、动物细胞培养一般用液体培养基，植物组织培养可以用固体培养基也可以用液体培养基，C错误；D、为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素，D错误。故选B。
11.答案：D
解析：A、在配制动物细胞培养液时，除了需要添加一定的营养物质（如糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等）外，往往还需加入动物的血清和血浆等天然成分，属于合成培养基，A错误；B、小鼠的淋巴细胞在培养时悬浮在培养液中生长增殖，不会发生接触抑制现象，B错误；C、猪的输卵管上皮细胞贴壁生长，需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，分散成单个细胞后，再用离心法收集，C错误；D、悬浮培养的小鼠淋巴细胞会因细胞密度过大、有害代谢物积累和营养物质缺乏而分裂受阻，D正确。故选D。
12.答案：C
解析：A、步骤③所使用的培养液和培养用具需要进行严格的灭菌处理，以避免杂菌污染，A正确；B、步骤④的分瓶培养可降低有害物质积累对细胞分裂的抑制和减少细胞间的相互抑制，B正确；C、步骤③到④的分瓶操作中，贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶处理，使之分散为单个细胞，胃蛋白酶的最适pH为1.5左右，不适合使用，C错误；D、步骤②中出现细胞的接触抑制，常使用胰蛋白酶和胶原蛋白酶等使组织分散为单个细胞，D正确。故选C。
13.答案：C
解析：A、培养动物细胞时不用胃蛋白酶将组织分散成单个细胞，A错误；B、动物细胞培养过程不存在脱分化形成愈伤组织，B错误；C、动物细胞的培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素，除此以外还需要添加动物血清或血浆等天然成分，C正确；D、原代培养和传代培养所需营养液成分一致，D错误。故选C。
14.答案：（1）原代；接触抑制；胰蛋白
（2）增殖/分裂；脱分化和再分化
解析：（1）人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养，分瓶后的培养称为传代培养；当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，即会发生接触抑制现象；用胰蛋白酶可使组织细胞分散开来。
（2）动物细胞培养和植物组织培养过程中，二者除了都需要增殖外，植物细胞不同于动物细胞的是还要进行脱分化和再分化。
15.答案：（1）合成
（2）细胞贴壁；接触抑制
（3）无菌、无毒；适宜的温度；气体环境
（4）收集细胞制成细胞悬液，分瓶培养
（5）是否加入抗癌药物、细胞增殖后的数量
解析：（1）将动物细胞所需要的各种营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。由于对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，因此，在使用合成培养基时，还要加入血清等天然成分。
（2）体外培养的动物细胞有一类需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，这种现象称为细胞贴壁，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖，这种现象称为接触抑制，若要继续培养需要利用胰蛋白酶处理获得单细胞悬液。
（3）由于动物细胞培养液中含有丰富的营养，因此，一般来说，在动物细胞培养过程中，除了提供细胞所需的营养物质外，还需提供无菌、无毒、适宜的温度和气体等环境条件。
（4）进行传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集，贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后收集，之后，将收集的细胞制成细胞悬液，分瓶培养。
（5）该实验的目的是测定抗癌药物对体外培养细胞增殖的影响，因此自变量为是否加入抗癌药物，因变量为细胞增殖后的数量，实验组和对照组除了自变量不同外，其他处理均应该相同，这是为了遵循实验设计的单一变量原则。

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