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河北省沧州市泊头市第一中学2024-2025学年高二下学期3月月考生物试题
一、单选题
1．《诗经》中“八月剥枣，十月获稻。为此春酒，以介眉寿。”记录了古人用新鲜稻米酿酒，以求延年益寿的习俗。米酒酿造主要包括蒸米，拌酒曲、发酵三步，酒曲中的微生物主要是霉菌和酵母菌，霉菌主要把米中的淀粉转化成葡萄糖（称糖化作用）。下列说法错误的是（ ）
A．米酒发酵过程中，酵母菌细胞呼吸的方式有有氧呼吸和无氧呼吸
B．蒸米既可以将米粒上的微生物杀死，又有利于淀粉的快速糖化
C．蒸米后需要进行冷却，目的是防止温度过高杀死酒曲中的微生物
D．发酵时应将拌有酒曲的凉饭装满密闭的容器，发酵过程中适时排气
2．利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。某企业利用脱脂大豆、小麦等原料通过发酵装置制作酱油，罐装前经过了严格的灭菌质检。下列有关叙述正确的是（ ）
A．脱脂大豆中的蛋白质和小麦中的淀粉可为米曲霉的生长提供氮源
B．参与酱油酿造过程的米曲霉、酵母菌和乳酸菌都属于真核生物
C．发酵装置中添加的盐水及产生的酒精、乳酸等均可抑制杂菌生长
D．成品酱油中富含多种微生物，有助于人体对食物中营养物质的消化吸收
3．微生物的纯培养过程中要使用无菌技术。下列有关叙述正确的是（ ）
A．无菌技术主要包括消毒和灭菌，二者的杀菌程度存在差异
B．培养基的灭菌既可用湿热灭菌法，也可用干热灭菌法
C．使用平板划线法接种细菌时需对菌液进行多倍稀释
D．对微生物进行纯培养时，不需要设置对照组
4．解钾菌分泌的有机酸能使土壤中不溶性钾转化为可溶性钾，被植物吸收利用。根据选择培养基中出现的透明圈大小筛选出高效解钾菌菌种，扩大培养后添加到有机肥中制成生物菌肥，改善土壤钾元素供应。下列说法错误的是（　　）
A．选择培养时，应以不溶性钾为钾元素的唯一来源
B．有机酸是解钾菌的次生代谢物，是其生长发育必需的
C．筛选过程中菌落透明圈越大，相应的解钾菌活性越高
D．增施生物菌肥可减少化肥的使用，推动农业可持续发展
5．噬菌蛭弧菌是一类专门以捕食细菌为生的胞内寄生菌，其主要以机械钻孔和酶解的方式破坏宿主细菌的细胞壁。下列叙述错误的是（ ）
A．可以用牛肉膏蛋白胨培养基培养噬菌蛭弧菌
B．用噬菌蛭弧菌对水质进行消毒属于生物消毒法
C．使用细菌计数板对噬菌蛭弧菌计数时，统计的结果比实际活菌数偏大
D．与使用抗生素相比，噬菌蛭弧菌能解决细菌出现的耐药性问题
6．在发酵过程中，多个黑曲霉菌体常聚集成团形成菌球体，菌球体大小仅由菌体数量决定。黑曲霉利用糖类发酵产生柠檬酸时需要充足的氧。菌体内铵离子浓度升高时，可解除柠檬酸对其合成途径的反馈抑制。下列说法错误的是（　　）
A．相同菌体密度下，菌球体越大柠檬酸产生速率越慢
B．发酵中期添加一定量的硫酸铵可提高柠檬酸产量
C．发酵过程中pH下降可抑制大部分细菌的生长
D．发酵结束后，将过滤所得的固体物质进行干燥即可获得柠檬酸产品
7．野生型大肠杆菌能在未添加某些氨基酸的基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在添加了多种氨基酸的完全培养基上生长。如图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，①、②、③、④代表培养基，A、B、C表示操作步骤，D、E为菌落。下列叙述错误的是（ ）
A．图中①、②、④为基本培养基，③为完全培养基
B．紫外线照射的目的是诱变，增加突变株的数量
C．图中B的正确操作是用涂布器把菌液均匀地涂布在②表面
D．经图中C过程原位影印及培养后，可从④中挑取D进行纯化培养
8．从古至今，兰花都是高洁、典雅的象征，很多人喜欢养兰花，但兰花在自然条件下萌发率极低。目前，我国已将组织培养技术广泛应用于兰花种苗的规模化繁殖，让名贵的兰花也“走入”了寻常百姓家。下列相关叙述错误的是（ ）
A．利用植物组织培养技术快速繁殖兰花种苗利用了植物细胞的全能性
B．生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素
C．组织培养过程中，脱分化和再分化过程均需要保持恒温、避光的环境条件
D．幼苗移栽前需要先将其移植到消过毒的蛭石或珍珠岩中，待长壮后再移栽入土
9．中医常说：“百病从肝治，养肝如养命。”近年来，我国酒精性肝病的发病率逐年提升，其危害仅次于病毒性肝炎。研究发现，雪莲花次生代谢物对急性酒精肝损伤具有较好的防治作用，利用植物细胞培养技术生产雪莲次生代谢物的大致流程如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
A．从雪莲中提取的次生代谢物是雪莲生长所必需的
B．利用射线处理①后可能获得雪莲次生代谢物高产的细胞
C．培养细胞获得次生代谢物时使用的是液体培养基
D．细胞产物的工厂化生产对于社会、经济、环境保护具有重要意义
10．某杂种植株的获取过程如图所示。下列有关分析错误的是（ ）

A．叶片经消毒后需用无菌水多次冲洗，避免消毒剂长时间作用而产生毒害作用
B．图示过程①中添加的渗透压稳定剂有利于获得的原生质体维持活性
C．将酶解装置改为锥形瓶并置于低速摇床上，有利于获得原生质体
D．细胞杂交后获得的杂种细胞进行植物组织培养后，即可获得目标杂种植株
11．细胞培养肉技术是一种新型食品合成生物技术，细胞培养肉的合成过程是先将肌肉干细胞从肌肉组织中分离出来，随后在体外大规模培养细胞获得肌肉等组织，再经食品化加工得到肉类食品。下列有关说法正确的是（ ）
A．肌肉干细胞只能从胚胎中分离提取
B．细胞培养过程中需要定期更换培养液，以防止杂菌污染
C．体外大规模培养细胞时，培养箱中需要O2，不需要CO2
D．肌肉干细胞具有组织特异性，经培养只能获得肌肉等组织
12．2023年，我国某科研团队发表了小鼠桑葚胚样全潜能细胞体外培养的相关研究。该团队通过提高小鼠胚胎干细胞pSTAT3基因的表达水平，体外制备出桑葚胚样全潜能细胞（该细胞在分子水平及发育潜能上具有桑葚胚时期细胞的特性），并在体外成功模拟了小鼠胚胎发育至原肠胚阶段的过程。下列有关叙述错误的是（ ）
注：pSTAT3是调控胚胎发育的关键基因
A．可诱导桑葚胚样全潜能细胞发育至囊胚期
B．诱导桑葚胚样全潜能细胞分化时，基因的碱基序列和表达情况都会发生改变
C．囊胚期细胞重置至桑葚胚样全潜能细胞的过程类似于脱分化
D．桑葚胚发育成囊胚的过程中，pSTAT3基因的表达量下降
13．在家畜优良品种培育过程中常涉及胚胎工程的相关技术。下列叙述错误的是（ ）
A．经获能处理的精子才能用于体外受精 B．受精卵经体外培养可获得早期胚胎
C．胚胎分割技术提高了移植胚胎的成活率 D．胚胎移植前需对受体进行选择和处理
14．如图为通过相关技术获得某种克隆哺乳动物（二倍体）的流程。下列叙述正确的是（ ）
A．A表示细胞核，其供体应选用雌性个体
B．从雌性动物体内获得的卵母细胞可直接用于过程①
C．进行过程②前必须对受体动物注射适量免疫抑制剂
D．胚胎发育的卵裂阶段细胞数量增加，胚胎总体积不增加
15．波尔山羊享有“世界山羊之王”的美誉，具有生长速度快、肉质细嫩等优点。生产中常采用胚胎工程技术快速繁殖波尔山羊。下列叙述错误的是（ ）
A．选择遗传性状优良的健康波尔母山羊进行超数排卵处理
B．胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测
C．普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受体
D．生产中对提供精子的波尔公山羊无需筛选
16．豆粕是大豆提取豆油后的一种副产品。为提高其利用价值，研究人员拟从发酵的豆粕中，筛选出能高效地将豆粕蛋白质转化为有机酸的乳酸菌菌株，乳酸菌产生的乳酸能溶解碳酸钙，过程如下：
步骤1：乳酸菌的富集
将发酵豆粕接种于添加了放线菌酮的液体培养基。
步骤2：纯化与鉴定
取一定量的富集菌液，进行梯度稀释，接种于添加了碳酸钙的培养基，挑选单菌落纯化培养并鉴定菌种。
步骤3：探究不同添加物对菌种发酵效果的影响
下列分析正确的是（ ）
A．步骤1添加放线菌酮的目的是抑制细菌生长
B．步骤1适用划线接种，步骤2适用涂布接种
C．步骤2通过观察溶钙圈的大小挑选目标菌落
D．步骤3培养基中的碳源和氮源全部来自豆粕
17．利用山金柑愈伤组织细胞（2n）和早花柠檬叶肉细胞（2n）进行体细胞杂交可以得到高品质、抗逆性强的杂种植株。如图是7组杂种植株核DNA和线粒体DNA来源鉴定的结果。下列分析正确的是（ ）
A．本实例中促进原生质体融合有多种方法，如电刺激、离心、聚乙二醇、病毒等
B．应将融合的原生质体培养在无菌水中，若其再生出细胞壁，则融合成功
C．对于发生了融合的原生质体，可通过观察细胞是否为绿色进行初步筛选，淘汰所有非杂种细胞
D．杂种植株是二倍体，其核基因只来自早花柠檬，线粒体基因只来自山金柑
18．哺乳动物排出的卵子进一步成熟后会停留在MⅡ期不再继续分裂。受精时，卵子内的Ca2+浓度显著升高，这会破坏细胞静止因子（CSF）的结构，进而导致成熟促进因子（MPF）的水平下降，最终激活卵子，使其完成减数分裂Ⅱ。利用卵母细胞进行核移植的过程中，需用Ca2+载体等方法激活重构胚，才能使其完成细胞分裂和发育进程。下列说法锴误的是（ ）
A．被激活的卵子在输卵管中完成减数分裂Ⅱ
B．未被激活的重构胚内CSF和MPF水平均较低
C．Ca2+载体可能通过提高重构胚内的Ca2+浓度来激活重构胚
D．被激活的重构胚通常需培养至桑葚胚或囊胚阶段再进行胚胎移植
19．狂犬病病毒（RABV）具有较高的致死率，注射疫苗是预防狂犬病的最有效措施。目前制备狂犬疫苗的主要步骤有生物反应器培养Vero细胞（非洲绿猴肾细胞，贴壁细胞）、接种病毒、纯化病毒等。如图表示培养过程中测定的相应数值（培养一定时间后接种病毒，病毒滴度指单位体积培养液中病毒数量）。下列叙述错误的是（ ）
A．应在无菌、无毒的环境中培养Vero细胞
B．生物反应器中加入供细胞附着的微载体可高效培养Vero细胞
C．接种病毒的时间可能为培养Vero细胞的第4天
D．第6天细胞密度开始下降只与培养液中营养物质减少有关
20．肺类器官拥有类似支气管和肺泡的结构，与人肺部组织结构功能相似，肺上皮干细胞诱导生成的肺类器官，可自组装或与成熟细胞组装成肺类装配体，过程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．培养肺上皮干细胞的过程中要定期更换培养液
B．肺上皮干细胞分化程度高于ES细胞且具有组织特异性
C．肺类装配体形成过程中利用了动物细胞融合技术
D．肺类装配体可用于研究肺部疾病的致病机制和开发药物等
二、多选题
21．《中馈录》中记载了泡菜腌制之法：“泡盐菜法，定要覆水坛。此坛有一外沿如暖帽式，四周内可盛水……泡菜之水，用花椒和盐煮沸……如有霉花，加烧酒少许……坛沿外水须隔日一换，勿令其干。”下列说法错误的是（ ）
A．“泡菜之水，用花椒和盐煮沸”，煮沸的目的是杀菌和去除水中的溶解氧
B．发酵初期坛盖边沿水槽有气泡冒出，是因为乳酸菌发酵产生了CO2
C．“坛沿外水须隔日一换，勿令其干”是为了保证坛内适宜的湿度和温度
D．“如有霉花，加烧酒少许”既可以抑制杂菌的繁殖，又可以调节泡菜的风味
22．人脐带间充质干细胞（hUCMSCs）被广泛应用于神经组织、心肌组织和骨骼肌、皮肤创面的再生和修复。科研人员用含不同浓度血清的培养液培养hUCMSCs，48h后收集各组上清液，用以培养人角膜上皮细胞（HCECs），处理及结果如表。下列叙述不正确的是（ ）
实验步骤 A组 B组 C组 D组
配制含不同浓度（体积分数）血清的培养液 1% 3% 5% 7%
培养hUCMSCs 48h后，取上清液 进行 进行 进行 进行
用上清液培养HCECs 进行 进行 进行 进行
24h后测吸光度（数值越大代表活细胞数目越多） 0.67 0.67 0.52 0.48
A．两种细胞增殖需要的氨基酸、葡萄糖主要由血清提供
B．可用胶原蛋白酶使HCECs分散，以检测吸光度
C．血清浓度越低越有利于获得更多的HCECs
D．hUCMSCs产生了某种能调控HCECs增殖的物质
23．科研人员制备了抗δ病毒N蛋白的单克隆抗体，为进一步确定其与N蛋白的结合位点，将N蛋白第91到170位氨基酸分成3个片段（图a），电泳后以带标记的该单克隆抗体为探针与这3个片段杂交，杂交结果如图b所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A．用N蛋白对小鼠进行免疫即可获得单克隆抗体
B．体外培养杂交瘤细胞时需要加入血清
C．图b对照组中添加的是无关抗原
D．N蛋白第110到130位氨基酸之间存在该单克隆抗体的结合位点
24．乳腺癌细胞表面有大量的HER2蛋白，T细胞表面有CD3蛋白和CD28蛋白。研究人员将上述三种蛋白作为抗原分别制备单克隆抗体，然后将它们在体外解偶联后重新偶联，得到三特异性抗体，简称三抗（如图）。下列说法正确的是（ ）

A．同时注射三种抗原蛋白，可刺激小鼠产生可分泌三抗的B淋巴细胞
B．利用抗原与抗体特异性杂交的原理筛选图示三抗时需要三种合位点相应抗原蛋白
C．与诱导植物原生质体融合相比，制备单克隆抗体时可采用灭活的病毒进行诱导融合
D．与单克隆抗体相比，三抗增加了两个特异性抗原结合位点，对乳腺癌细胞的杀伤力更强
25．线粒体DNA突变会导致多种线粒体遗传病。为了研究线粒体遗传病的分子机制，可构建永生淋巴细胞系和转线粒体细胞系，构建过程如图所示。淋巴细胞被EB病毒（EBV）感染后能获得可无限增殖的永生淋巴细胞，但该细胞会被BrdU杀死，p0细胞不会被BrdU杀死，但其在含有尿嘧啶和丙酮酸的培养基中才能生长。下列叙述正确的是（ ）
A．可使用紫外线短时间照射的方法去核
B．水生淋巴细胞为核供体细胞；p0细胞为线粒体DNA供体细胞
C．为了筛选出转线粒体细胞，选择培养基中应添加BrdU，不添加尿嘧啶和丙酮酸
D．经选择培养基筛选后，还需要进行克隆化培养和抗体检测
三、非选择题
26．天津独流老醋历史悠久、独具风味，其生产工艺流程如图所示。
(1)在糖化阶段添加酶制剂后需要控制反应温度，这是因为酶 。
(2)独流老醋生产过程中先进行酒精发酵，后进行醋酸发酵，其中醋酸发酵的原理是 （写出反应简式），该种发酵方式的优势是 。
(3)在醋酸发酵阶段，独流老醋采用独特的固态分层发酵法发酵30天左右。
①发酵过程中，定期取样，测定醋酸菌的密度变化。据图分析，与颠倒前相比，B层醋酸菌在颠倒后密度变化的特点是 ，由此推断，影响醋酸菌密度变化的主要环境因素是 。
②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要原因。发酵过程中，发酵缸中的 （填“上”或“下”）层醋醅有利于乳酸菌繁殖，积累乳酸。
③成熟醋酪中乳酸菌的种类明显减少，主要原因是发酵后期营养物质消耗等环境因素的变化加剧了不同种类乳酸菌的 ，淘汰了部分乳酸菌种类。
④为检测发酵过程中乳酸菌的含量，取不同稀释度的样品各0.1mL涂布到固体培养基上，在适宜条件下培养一段时间，统计得到106、107、108三个稀释度的培养基上的平均菌落数依次为377个、125个、16个，据此估算，每毫升样品中的乳酸菌数约为 个。上述统计的菌落数往往比活菌的实际数目 ，原因是 。
27．根瘤菌与豆科植物之间是互利共生关系，根瘤菌侵入豆科植物根内可引起根瘤的形成，根瘤中的根瘤菌具有固氮能力。为了寻找抗逆性强的根瘤菌，某研究小组做了如下实验：从盐碱地生长的野生草本豆科植物中分离根瘤菌；选取该植物的茎尖为材料，通过组织培养获得试管苗（生根试管苗）；在实验室中探究试管苗根瘤中所含根瘤菌的固氮能力。回答下列问题。
(1)从豆科植物的根瘤中分离根瘤菌进行培养，可以获得纯培养物，此实验中的纯培养物是 。
(2)取豆科植物的茎尖作为外植体，通过植物组织培养可以获得豆科植物的试管苗。外植体经诱导形成试管苗的流程是：外植体愈伤组织试管苗。其中①表示的过程是 ，②表示的过程是 。由外植体最终获得完整的植株，这一过程说明植物细胞具有全能性。细胞的全能性是指 。
(3)研究小组用上述获得的纯培养物和试管苗为材料，研究接种到试管苗上的根瘤菌是否具有固氮能力，其做法是将生长在培养液中的试管苗分成甲、乙两组，甲组中滴加根瘤菌菌液，让试管苗长出根瘤。然后将甲、乙两组的试管苗分别转入 的培养液中培养，观察两组试管苗的生长状况，若甲组的生长状况好于乙组，则说明 。
(4)若实验获得一种具有良好固氮能力的根瘤菌，可通过发酵工程获得大量根瘤菌，用于生产根瘤菌肥。根瘤菌肥是一种微生物肥料，在农业生产中使用微生物肥料的作用是 （答出2点即可）。
28．中医治疗疾病多用复方，三白草（2n=22）和鱼腥草（2n=24）是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”。研究人员欲利用植物体细胞杂交技术将复方中的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如图所示。
(1)取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用酒精和次氯酸钠对其 （填“消毒”或“灭菌”），每次处理后用无菌水冲洗叶片2～3次，去除残留在叶片上的药剂，处理后的叶片撕去表皮，切成小片备用。
(2)过程①通常使用 酶去除细胞壁获取原生质体，同时向三白草和鱼腥草细胞的酶解液中分别加入红、绿荧光色素（荧光色素不影响原生质体的活性）。过程②常利用 （化学诱导剂名称）诱导融合，随后在荧光显微镜下选择 的融合细胞（杂种原生质体）。
(3)过程③为 ，该过程一般 （填“需要”或“不需要”）光照，得到的愈伤组织细胞通常含有 条染色体。
(4)研究人员研究不同的原生质体密度对三白草和鱼腥草原生质体融合率的影响，结果如图所示。
注：双核异核融合体指具有两个不同来源细胞核的细胞。
由图可知，促进三白草和鱼腥草原生质体融合的适宜密度为 。
(5)通常情况下，能增加免疫器官重量的物质一般具有一定的增强免疫力的作用。为判断杂种细胞的代谢物对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组；实验处理如表所示（溶剂为蒸馏水）。
组别 A组 B组 C组（空白对照组）
实验处理 三白草和鱼腥草杂种细胞代谢物溶液 三白草代谢物和鱼腥草代谢物混合溶液 ______
每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量
①在表格中将C组的实验处理补充完整 。
②若实验结果为 ，则支持利用植物体细胞杂交技术将复方中的配伍提前到生产过程，并实现有效成分的工厂化生产。
29．某些种类癌细胞表面有高表达膜蛋白PD-L1，PD-L1能与T细胞表面的PD-1结合，抑制T细胞的活化，使癌细胞实现免疫逃逸。临床上可利用抗PD-1的单克隆抗体进行癌症治疗。制备过程如下：
(1)将等量的纯化PD-1蛋白分别注射到4只小鼠体内，经过二次免疫后测定小鼠抗PD-1抗体的免疫效果。实验中常用半抑制浓度（IC50）评价抗体灵敏度：即取同样浓度的不同来源抗体，分别检测一半抗体被同一种抗原结合时所需抗原的最低浓度。下图为4只小鼠的血清抗体相对浓度和IC50值。
据图分析，制备抗PD-1单克隆抗体时应选择 号小鼠用作细胞融合的供体，依据是 。取对应小鼠的脾脏细胞用 试剂诱导与骨髓瘤细胞融合，用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。
(2)一段时间后，将（1）所得细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，检测原理如下图。
①在检测时需要将PD-1蛋白固定于载体表面制成固相抗原，并加入多孔板培养槽中的 （填“细胞”或“上清液”），待充分反应后洗脱。
②加入酶标抗体，一段时间后需要用洗脱液将未与 结合的酶标抗体洗去。
③加入相应酶促反应底物显色后，颜色越深代表 。
(3)选择抗体检测阳性且产量较高的杂交瘤细胞，可注射入小鼠腹腔，从 中提取、分离抗PD-1抗体。
参考答案
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 D C A B A D A C A D
题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
答案 D B C D D C D B D C
题号 21 22 23 24 25
答案 BC AC BCD BCD AC
26．(1)在最适温度下催化活性最高
(2) C2H5OH+O2CH3COOH+H2O+能量 先进行酒精发酵可产生较多酒精，为醋酸发酵提供充足底物，且前期酒精发酵产生的二氧化碳可排出空气，营造无氧环境， 有利于后续醋酸发酵进行
(3) 增长更快 氧气含量 下 种间竞争 1.25×1010 少 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
27．(1)由根瘤菌繁殖形成的单菌落　
(2) 脱分化 再分化 细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性。
(3) 无氮源 接种到试管苗上的根瘤菌具有固氮能力
(4)①促进植物生长，增加作物产量　②能够减少化肥使用，改良土壤，减少污染，保护生态环境
28．(1)消毒
(2) 纤维素酶、果胶酶 聚乙二醇 红、绿荧光
(3) 脱分化 不需要 46
(4)1×106个·mL-1
(5) 等量的蒸馏水 A、B两组的胸腺重量相同且都大于C组
29．(1) Ⅳ 其抗体相对浓度较高且IC50值最低 PEG
(2) 上清液 抗PD-1抗体 抗PD-1抗体含量越高
(3)腹水

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