资源简介

2024-2025学年度高二生物期中考试卷
考试时间：75分钟；
第I卷（选择题）
一、单选题
1．米醋是一种营养价值较高的调味品，《醒园录》中有“赤米不用舂，洗净蒸饭，拌曲发香，用水或用酒泼皆可发，……俟月余可用。如有发霉，用铁火针烧极红淬之。”的记载。下列有关米醋酿制的说法正确的是（ ）
A．“不舂”保留稻壳的目的是为后续发酵提供菌种
B．米饭“拌曲”后要密封，有利于产生酒精和醋酸
C．“用水或用酒泼皆可发”，说明利用糖和乙醇都可以酿醋
D．为防止霉菌感染，米醋制作时温度应控制在30℃以下
2．某野生型细菌能通过图1途径合成色氨酸，其突变株则不能。将突变株TrpB、TrpC、TrpE（仅图1中的某一步受阻）分别接种在图2培养基的I、Ⅱ、Ⅲ区域，短时间培养三个区域均有少量细菌生长增殖，继续培养后I区域的两端和Ⅱ区域的一端的菌株继续生长增殖，而Ⅲ区域菌株不再生长。下列叙述正确的是（　　）

A．配制培养色氨酸缺陷型菌株的图2培养基没有加入色氨酸
B．使用涂布器接种3种突变菌株，涂布前需对涂布器进行灼烧灭菌
C．TrpC菌株继续生长增殖的一端为靠近I区域的一端
D．TrpE菌株不再生长可能是由于缺乏催化吲哚合成色氨酸的酶
3．下列对发酵工程及其应用的叙述，正确的有几项（ ）
①发酵工程的中心环节是灭菌，培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌
②发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物及菌体本身
③利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物肥料可以促进植物生长
④发酵工程所用的菌种大多是混合菌种
⑤生产柠檬酸需要筛选产酸量高的黑曲霉
⑥用单细胞蛋白制成的微生物饲料，可通过发酵工程从微生物细胞中提取
A．4项 B．3项 C．2项 D．5项
4．生物碱为铁皮石斛的次级代谢产物。下图是以铁皮石斛为材料，培养拟原球茎(简称PLBs, 类似愈伤组织)生产生物碱的实验流程。下列说法正确的是（ ）
A．生物碱是铁皮石斛生长所必需的物质
B．图中过程①为脱分化形成PLBs, 过程②为再分化生产生物碱
C．培养高产细胞系应选择细胞数量/生物碱产量值大的PLBs
D．该过程运用了植物细胞培养技术，原理是植物细胞增殖
5．脱毒甘蔗具有产量高、品质佳的特点。图示为培育脱毒甘蔗的部分过程，相关叙述正确的是（ ）
A．过程①宜选择带叶原基的芽，主要原因是其分裂能力强
B．过程②用52℃热水处理芽可杀死其中部分残有的病毒
C．过程③④除激素含量外，温度、pH、光照等条件相同
D．过程⑤可通过将病毒接种于甘蔗苗，筛选出脱毒品种
6．我国科学家利用人的体细胞制备多能干细胞，再用小分子TH34成功诱导衍生成胰岛B细胞。下列相关叙述错误的是（ ）
A．基因选择性表达被诱导改变后，可使体细胞去分化成多能干细胞
B．在小分子TH34诱导下，多能干细胞发生基因突变，获得胰岛素基因
C．衍生的胰岛B细胞在葡萄糖的诱导下能表达胰岛素，才可用于移植治疗糖尿病
D．若衍生的胰岛B细胞中凋亡基因能正常表达，细胞会发生程序性死亡
7．普通的肿瘤治疗——单克隆抗体（单抗）只能结合单一的抗原，无法有效地聚集于肿瘤组织处。双特异性单克隆抗体（双抗）可以将抗肿瘤的药物直接导至靶细胞，通过靶向多个抗原发挥协同抗肿瘤作用。基因工程制备双抗的原理是对传统单抗进行基因工程方面的改造，从而形成双特异性抗体。利用杂交瘤细胞融合也可以制备双抗，先将每个杂交瘤细胞受抗原刺激产生单克隆抗体，然后将这两个杂交瘤细胞融合在一起，此融合的杂交瘤细胞能够重新随机组合“双亲”单抗肽段，从而产生双抗。下列叙述正确的是（ ）
A．诱导两个杂交瘤细胞融合，一定会产生双抗
B．基因工程改造传统单抗，操作对象是肽链
C．制备杂交瘤过程中需要将能分泌特定抗体的浆细胞与骨髓瘤细胞融合
D．相比于普通化疗，双抗治疗能减少药物的用量并降低正常组织的不良反应
8．制备单克隆抗体时需要经过两次筛选，第一次筛选需要用HAT培养基，已知哺乳动物细胞可通过D途径和S途径合成DNA，而小鼠的骨髓瘤细胞只能通过D途径合成DNA．其中进行D途径合成时叶酸及其衍生物是必不可少的，而氨基蝶呤是叶酸的拮抗剂。第二次筛选需要用96孔培养板进行克隆化培养和抗体检测。下列相关叙述正确的是（　　）
A．HAT培养基中要加入叶酸从而把杂交瘤细胞筛选出来
B．在HAT培养基中杂交瘤细胞可通过D途径和S途径合成DNA因此可以大量增殖
C．用96孔培养板克隆化培养时要用培养液对第一次筛选所得的杂交瘤细胞进行充分稀释以保证分配到每个孔中的细胞数不超过1个
D．克隆化培养后需要向每个孔中加入相应抗体从而进行抗体检测，呈阳性反应的孔中的细胞即为能产生所需抗体的杂交瘤细胞
9．蝙蝠是一种具有长寿、抗病毒和回声定位等生物学特性的哺乳动物，有重要研究价值。研究者将蝙蝠的诱导多能干细胞（iPS细胞）标上绿色荧光，将其注入到小鼠的囊胚中，发现内细胞团某些细胞带有绿色荧光，将上述胚胎移入雌鼠子宫，发现三胚层的细胞中均有部分带绿色荧光。下列说法错误的是（ ）
A．可从蝙蝠囊胚的内细胞团中获得其iPS细胞
B．可通过体外受精和胚胎培养技术获得小鼠囊胚
C．接受胚胎的小鼠需进行同期发情处理
D．结果表明蝙蝠iPS细胞在体内仍具有分化能力
10．哺乳动物排出的卵母细胞进一步成熟后会停留在MI期不再继续分裂。受精时，卵母细胞内的Ca2+浓度显著升高，这会破坏细胞内静止因子（CSF）的结构，进而导致成熟促进因子（MPF）的含量下降，最终激活卵子完成减数分裂。利用卵母细胞进行核移植的过程中，需用Ca2+载体等方法处理重构胚，才能激活其完成细胞分裂和发育进程。下列说法错误的是（ ）
A．被激活的卵子在输卵管中完成减数分裂Ⅱ
B．未经处理的重构胚内CSF和MPF水平均较低
C．Ca2+载体可能通过提高重构胚内的Ca2+浓度而使其激活
D．被激活的重构胚通常需培养至囊胚或桑葚胚再进行胚胎移植
11．如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的部分操作流程。下列相关叙述正确的是（ ）

A．将图1中的研磨液过滤后保留沉淀
B．图2过程，用玻璃棒进行快速交叉搅拌会使DNA析出更快
C．图2析出得到的白色丝状物只能溶于2 mol/L的NaCl溶液
D．图3对提取后的DNA进行鉴定，两支试管中均要加入二苯胺试剂
12．基因工程需要三种工具：限制酶、DNA连接酶和载体。下列相关叙述正确的是（　　）
A．限制酶主要是从真核生物中分离纯化出来的，具有特异性
B．DNA连接酶与DNA聚合酶催化合成的化学键相同，催化的反应底物也相同
C．质粒的基本单位是核糖核苷酸，另外两种工具的基本单位是氨基酸
D．基因工程中常用的载体除质粒外，还包括噬菌体、动植物病毒等
13．下图表示PCR过程中某个阶段反应体系的情况，①②③④表示相关物质，L、R表示方向。下列叙述正确的是（ ）
A．②链从L到R的方向为3′→5′，①②链均可作为子链合成的模板
B．PCR过程需要通过解旋酶断开氢键，且为边解旋边复制
C．以1个DNA为模板经3次循环需消耗7个引物③
D．物质③的5′端添加了某序列，至少需经3次循环才可获得该序列的双链产物
14．下列相关实验操作正确的是（ ）
A．利用添加核酸染料的凝胶对PCR产物进行电泳后，在紫外灯下观察结果
B．配制PCR反应体系时，加入等量的4种核糖核苷酸溶液作为扩增原料
C．在琼脂糖凝胶电泳中，同一电场作用下，DNA片段越长，向负极迁移速率越快
D．琼脂糖凝胶浓度的选择不需考虑待分离DNA片段的大小
15．“筛选”是生物技术与工程中常用的技术手段。下列叙述错误的是（ ）
A．筛选纤维素分解菌时，培养基中需添加纤维素和刚果红
B．培育转基因抗虫棉时，需从分子水平及个体水平进行筛选
C．单倍体育种时，需对F1的花药进行筛选后才可继续进行组织培养
D．胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选
16．抗凝血酶是一种药物，目前科学家可以在牛、山羊等动物的乳腺生物反应器中获得。下列说法错误的是（　　）
A．需要将抗凝血酶基因与乳腺中特异性表达的基因的启动子结合
B．用显微注射法将抗凝血酶基因直接注入哺乳动物的乳腺细胞中
C．乳腺生物反应器产品的获得受年龄和性别的限制
D．将抗凝血酶基因导入大肠杆菌内可能不能产生有正常生理功能的酶
17．科学家利用蛋白质工程研制赖脯胰岛素，与天然胰岛素相比，赖脯胰岛素经皮下注射后易吸收、起效快。图示为利用大肠杆菌制备工程菌获取赖脯胰岛素的操作过程，以下叙述错误的是（　　）
A．该技术属于第二代基因工程，需对基因进行改造或合成
B．该技术能改造现有的蛋白质，也能制造一种新的蛋白质
C．图中①②过程可同时发生
D．基因表达过程中，物质a若发生变化，物质b一定改变
18．有人认为种植转基因农作物对人类有利，下列叙述属于支持该观点的是（　　）
A．推广种植抗虫棉可降低农药使用对环境的污染
B．转基因农作物的扩散会威胁生物的多样性
C．转基因农作物会产生毒性蛋白或过敏蛋白
D．转基因生物有可能成为“入侵的外来物种”，威胁生态系统中其他生物的生存
第II卷（非选择题）
请点击修改第II卷的文字说明
二、填空题
19．填写图中序号代表的含义：
① ；② ；③ ；④ ；⑤ ；⑥ ；⑦ ；⑧ 。
三、非选择题
20．石油对土壤的污染不仅给周边生态环境带来严重的损害，还严重影响居民的健康生活，且污染物含量越多。降解难度越大。为解决石油污染问题。某科研小组用了将近1年的时间，从长庆油田中被石油污染最严重的土壤中分离出了高效分解石油的细菌。如图所示。回答下列问题：
(1)配制好的培养基通常可以使用 法灭菌。步骤③的培养基成分与普通液体培养基相比最大的区别是步骤③培养基中以 为唯一碳源。过程④所用的培养基通常添加 作为凝固剂。
(2)倒平板冷却后，需要倒置，目的是防止皿盖上的水珠落回培养基造成污染和 。进行过程④之前，常需要检验培养基平板灭菌是否合格，方法是随机取若干灭菌后的平板倒置于恒温箱中培养24h，观察是否有菌落出现。
(3)常采用 法对石油分解菌进行分离和计数。某同学用该法进行了过程④的操作：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接种0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为46、58和52，据此可得出每升该样品中的活菌数为 。
21．随着经济水平的提高，春节期间购买花卉、盆栽的家庭越来越多。为了满足市场需求，我国科技工作者采用植物组织培养技术，在温室大棚内生产出大量质优价廉的各种花卉、盆栽。如图所示为兰花芽尖通过无菌操作接入试管后，在一定条件下形成试管苗的培育过程。请回答下列问题：

(1)芽尖组织在接种到培养基之前，必须进行 处理，整个组织培养过程需 操作，并控制好各个时期的培养条件。
(2)在一定的 等条件的诱导下，已经分化的细胞可以经过 ，转变成未分化的细胞，进而形成 ，称为愈伤组织。愈伤组织能重新分化成芽、根等器官，该过程称为 。植物激素中的 是启动细胞分裂、分化的关键激素。
(3)切取芽尖进行组织培养出的兰花植株有可能不带病毒，原因是 。
22．和牛是世界公认的高档肉牛品种，其体型较小，肉质鲜嫩，营养丰富。我国科研人员利用胚胎移植技术，按如图所示流程操作，成功地批量培育了和牛这一优良品种。请回答问题：
(1)用 激素处理，可使供体母牛超数排卵，过程①中产生的精子需要进行 处理后才具有与卵细胞受精的能力。在实际胚胎工程操作中常以 作为受精的标志。
(2)上图移植的胚胎处于 期，移入的甲胚胎能在代孕雌牛子宫中存活的生理基础是 ；为培育雌性子代小牛，胚胎移植前须进行性别鉴定，需取图中乙细胞进行 。胚胎移植前，需对供、受体犬进行 处理，目的是 。
(3)为提高胚胎利用效率，尽快获得数量较多的子代和牛，图中甲环节是对牛胚胎所做的处理，使用的技术称为 ；这一过程中，要特别注意将内细胞团 分割。
23．亚洲玉米螟、黏虫是造成我国玉米减产的主要害虫。我国科研人员通过图示过程将Bt基因（能够控制合成Bt毒蛋白）转入玉米细胞培育出了抗虫转基因玉米。回答下列问题：
(1)用PCR扩增下面的Bt基因的DNA片段：5'-GACCTGTGGAAGC．.....CATACGGGATTG-3'3'-CTGGACACCTTCG......GTATGCCCTAAC-5'供选择的引物有：①5'-GACCTGTGGAAGC-3'②5'-CTGGACACCTTCG-3'③5'-GTTAGGCATAC-3'④5'-CAATCCCGTATG-3'共四种，应选择________（填字母）。
A．①② B．②③ C．③④ D．①④
(2)据图分析，为确保目的基因能够与Ti质粒正确连接，形成含有目的基因的重组Ti质粒，科研人员应选用限制酶 切割Ti质粒和含Bt基因的DNA片段。在获得重组Ti质粒后，可将其加入经 处理的农杆菌；导入重组质粒的玉米细胞经 成为转基因玉米植株。
(3)为检测转基因玉米是否培育成功，科研人员利用 检测Bt基因是否插入受体细胞，利用 法检测Bt基因是否成功翻译。
(4)某科研小组在做抗虫棉试验时，虽已经检测出棉花植株中含有抗虫基因，但让棉铃虫食用棉花叶片时，棉铃虫并没有被杀死，这说明 ，为此，科学家对棉花植株中的Bt毒蛋白基因进行了修饰，结果食用了棉叶的棉铃虫中毒死亡了，从变异类型分析，这种对Bt毒蛋白基因的修饰属于 。
参考答案
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 C D B D B B D C A B
题号 11 12 13 14 15 16 17 18
答案 D D C A C B D A
1．C
【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精。
【详解】A、“不舂”保留稻壳，稻壳的保留并非为了提供菌种，而是为了保护米粒在蒸煮过程中不被破坏，A错误；
B、“拌曲”后密封，密封的目的是为了创造厌氧环境，促进酒精发酵，但醋酸发酵需要氧气，B错误；
C、“用水或用酒泼皆可发”，说明米醋的酿制可以利用糖（通过水泼）或乙醇（通过酒泼）作为原料，C正确；
D、米醋制作时温度是30-35℃，D错误。
故选C。
2．D
【分析】 微生物常见的接种的方法：
（1）平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基，通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。
（2）稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。
【详解】A、从接种后短时间三个区域均有少量细菌生长增殖可知，培养基中加入了少量色氨酸，能让突变株短时间生长，A错误；
B、得到图2所示菌落，应使用接种针接种，B错误；
C、Ⅲ区域菌株不再生长，说明不能利用其他两种突变体合成的物质，应是最后一环节受阻；Ⅰ区域的两端菌株继续生长增殖，说明可以利用其他两种突变体合成的物质，应是第一环节受阻；从色氨酸合成途径来看，TrpC 突变株是邻氨基苯甲酸合成吲哚这一步受阻。Ⅰ 区域的两端和 Ⅱ 区域的一端的菌株继续生长增殖，说明Ⅲ区域能为TrpC 突变株提供吲哚，所以 TrpC 菌株继续生长增殖的一端为靠近 Ⅲ 区域的一端（因为 Ⅲ 区域能产生吲哚，扩散到 Ⅱ 区域靠近Ⅲ区域的一端，使TrpC突变株能继续生长），C错误；
D、TrpE突变株不能生长，根据色氨酸合成途径，可能是由于缺乏催化吲哚合成色氨酸的酶，导致无法合成色氨酸，在培养基中少量色氨酸消耗完后就不能再生长，D正确。
故选D。
3．B
【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵、产品的分离、提纯等步骤。
【详解】①发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵，①错误；
②发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身，②正确；
③微生物肥料利用了微生物在代谢过程中产生的有机酸、生物活性物质等来增进土壤肥力，改良土壤结构，促进植株生长，常见的有根瘤菌肥、固氨菌肥等，③正确；
④现代发酵工程通常采用单一菌种纯培养，以控制产物质量和避免污染，混合菌种多见于传统发酵，④错误；
⑤柠檬酸可以通过黑曲霉的发酵制得，所以生产柠檬酸需要筛选产酸量高的黑曲霉，⑤正确；
⑥单细胞蛋白即微生物菌体，不需要从微生物细胞中提取，⑥错误。
综上所述，正确的是②③⑤。
故选B。
4．D
【分析】在一定的激素和营养等条件的诱导下，外植体可脱分化形成愈伤组织。在脱分化过程中，植物细胞的分化程度逐渐降低，全能性逐渐升高。脱分化形成的愈伤组织由一些排列疏松而无规则，高度液泡化、呈无定形状态的薄壁细胞组成。
【详解】A、生物碱是铁皮石斛的次生代谢物，不是细胞进行正常生命活动必需的物质，A错误；
B、题意显示PLBs类似愈伤组织，因此，图中过程①为脱分化形成PLBs，过程②为植物细胞培养过程，不属于再分化，B错误；
C、该实验目的是要生产生物碱，故需要选择生物碱产量/细胞数量的值大的PLBs作为高产细胞系，C错误；
D、该过程中的PLBs类似愈伤组织，运用了植物细胞培养技术，过程②为植物细胞培养过程，原理是植物细胞增殖，D正确。
故选D。
5．B
【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
【详解】A、过程①宜选择带叶原基的芽，主要原因是其带有的病毒极少或无毒，A错误；
B、过程②用52℃热水处理芽其目的是消毒，起到消灭杂菌的作用，也可杀死其中部分残有的病毒，B正确；
C、过程③④除激素含量外，温度、pH、光照等条件也有不同，如诱导生芽阶段需要光照，而诱导愈伤组织阶段不需要光照，C错误；
D、过程⑤将病毒接种于甘蔗苗，会使甘蔗苗感染病毒，D错误。
故选B。
6．B
【分析】诱导多能干细胞（iPS细胞）：通过特定的因子导入和培养条件，可以从人的皮肤等体细胞出发，诱导其成为具有无限增殖能力并可分化为人体各种组织脏器的多能干细胞。
在正常情况下，胰岛B细胞对血糖水平的变化非常敏感，能够根据血糖水平的高低调节胰岛素的分泌。当血糖水平升高时，胰岛B细胞会增加胰岛素的分泌，帮助降低血糖水平；反之，当血糖水平降低时，则减少胰岛素的分泌，以避免低血糖。
细胞凋亡指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同，细胞凋亡不是一件被动的过程，而是主动过程，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用，它并不是病理条件下，自体损伤的一种现象，而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。
【详解】A、被诱导改变后，可使体细胞去分化成多能干细胞 这个说法是正确的。体细胞可以通过特定的因子导入和培养条件，基因的调控和表达模式的改变，使得原本专一功能的体细胞去分化成为多能干细胞，A正确；
B、小分子药物通常是通过调节现有的生物通路和基因表达来实现其功能，而胰岛素基因在人体所有细胞中都存在，但只有在胰岛细胞中才会表达 ，所以多能干细胞在诱导分化的过程中不会突然发生基因突变获得胰岛素基因，B错误；
C、胰岛B细胞在较高的血糖浓度下分泌胰岛素，降低血糖，所以衍生的胰岛B细胞需在葡萄糖的诱导下成功表达胰岛素，以确保衍生的胰岛B细胞能够正常发挥功能，才可用于移植治疗糖尿病，C正确；
D、凋亡基因的正常表达会导致衍生的胰岛B细胞发生程序性死亡，也就是发生细胞凋亡，D正确。
故选B。
7．D
【分析】单克隆抗体的制备过程：①给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，然后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；②诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合；③利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；④进行克隆化培养和(专一)抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；⑤用培养基培养筛选出来的杂交瘤细胞或将其注入小鼠腹腔中培养，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、诱导两个杂交瘤细胞融合，结果有不融合的单个杂交瘤细胞、融合成功的双杂交瘤细胞，不一定会产生双抗，即使融合成功的细胞，单抗肽段随机组合，也不一定能产生双抗，A错误；
B、基因工程改造传统单抗，应在基因水平操作，操作对象是DNA分子（或基因），B错误；
C、制备杂交瘤细胞的过程中是免疫后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，但是此时的B淋巴细胞包括多种产生不同抗体的浆细胞，C错误；
D、将抗肿瘤的药物直接导至靶细胞，能减少药物的用量，避免了药物作用于正常组织细胞，降低正常组织的不良反应，D正确。
故选D。
8．C
【分析】1、单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
2、单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点。②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。由于单克隆抗体的特异性强，能特异性识别抗原，因此可以把抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同位素、药物等相结合，制成“生物导弹”，借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞，疗效高，副作用小，位置准确。
【详解】AB、进行D途径合成时叶酸及其衍生物是必不可少的，而氨基蝶呤是叶酸的拮抗剂，所以在HAT培养基中需要添加氨基蝶呤以阻断D途径。在HAT培养基上瘤-瘤杂交细细胞由于不能合成DNA而无法增殖，B-B杂交细胞虽然可通过S途径合成DNA但本身无法增殖，只有杂交瘤细胞能通过S途径合成DNA且具有骨髓瘤细胞的增殖特性而能大量增殖，AB错误：
C、第二次筛选前先要用培养液对第一次筛选所得的杂交瘤细胞进行充分稀释以保证分配到每个孔中的细胞数不超过1个，C正确：
D、克隆化培养后应向每个孔中加入相应抗原从而进行抗体检测，D错误。
故选C。
9．A
【分析】1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。2、胚胎干细胞的特点：具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。3、胚胎干细胞可用于治疗人类的某些顽症，如帕金森综合症。还可培育出人造器官，解决目前临床上存在的供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。
【详解】A、囊胚的内细胞团具有发育的全能性，不需要诱导形成多能干细胞，可以从蝙蝠囊胚的滋养层中获得其iPS细胞，A错误；
B、可通过体外受精获得受精卵，在通过体外早期培养技术获得囊胚，B正确；
C、胚胎移植时需要对受体即接收胚胎的个体进行同期发情处理，使移植的胚胎处于相同的生理环境，C正确；
D、发荧光的诱导多能干细胞注入到小鼠的囊胚中，发现内细胞团某些细胞带有绿色荧光，再将上述胚胎移入雌鼠子宫，发现三胚层的细胞中均有部分带绿色荧光，由此可说明蝙蝠iPS细胞在体内仍具有分化能力，D正确。
故选A。
10．B
【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体．用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。
【详解】A、动物排出的卵子需要在输卵管中进一步成熟，精子入卵后被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ，A正确；
B、分析题干信息可知，卵母细胞内的Ca2+浓度显著升高，会破坏CSF的结构，导致MPF的含量下降，最终激活卵子完成减数分裂，由此说明未经处理的重构胚未被激活，CSF和MPF水平应均较高，B错误；
C、Ca2+载体可能通过提高重构胚内的Ca2+浓度，从而破坏CSF的结构，导致MPF的含量下降使其激活，C正确；
D、桑葚胚及囊胚的内细胞团具有发育的全能性，故被激活的重构胚通常需培养至囊胚或桑葚胚再进行胚胎移植，D正确。
故选B。
11．D
【分析】DNA的粗提取与鉴定的实验原理：
①DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度变化而改变的，当NaCl的物质的量浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低，利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出；
②DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液，利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA；
③洗涤剂能瓦解细胞膜但是对DNA没有影响；
④蛋白质不能耐受较高温度，在80°C条件下会变性，而DNA对温度的耐受性较高；
⑤DNA遇二苯胶（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
【详解】A、图1中新鲜洋葱研磨后DNA存在于研磨液中，过滤后应保留滤液，A错误；
B、图2过程，用玻璃棒要轻轻搅拌且搅拌要沿同一方向进行，防止DNA分子断裂，B错误；
C、图2析出得到的白色丝状物主要成分是DNA，DNA在2 mol/L的NaCl溶液中溶解度高，并不是只能溶于2 mol/L的NaCl溶液，C错误；
D、图3对提取后的DNA进行鉴定，作为对照，两支试管中均要加入等量的二苯胺试剂，D正确。
故选D。
12．D
【分析】1、限制性内切核酸酶（限制酶）能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
2、DNA连接酶将双连DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
3、基因工程中使用的载体有质粒、噬菌体、动植物病毒等。
【详解】A、限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，而不是真核生物。原核生物容易受到外源 DNA 的入侵，限制酶能切割外源 DNA 以保护自身，它具有特异性，即一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割 DNA 分子，A错误；
B、DNA 连接酶与 DNA 聚合酶催化合成的化学键都是磷酸二酯键，但催化的反应底物不同。DNA 连接酶是将两个 DNA 片段连接起来，作用于 DNA 片段；而 DNA 聚合酶是将单个的脱氧核苷酸连接到已有的 DNA 链上，作用于单个脱氧核苷酸，B错误；
C、质粒是小型环状 DNA 分子，其基本单位是脱氧核苷酸，而不是核糖核苷酸；限制酶和 DNA 连接酶的化学本质是蛋白质，基本单位是氨基酸，C错误；
D、基因工程中常用的载体除质粒外，还包括噬菌体、动植物病毒等。这些载体都能将目的基因导入受体细胞，并且在受体细胞中能自我复制或整合到受体细胞的染色体 DNA 上，D正确。
故选D。
13．C
【分析】PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）：过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开）：低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。
【详解】A、根据DNA分子中两条链的反向平行关系可判断，②链从 L 到 R 的方向为 5′→3′，图中①②链均可作为子链合成的模板，A错误；
B、PCR 过程需要通过高温处理使双链中氢键断裂成为单链，而后通过降温使子链和引物之间形成双链结构，而后调节温度是子链沿着引物的3’端延伸，B错误；
C、以 1 个 DNA 为模板经 3 次循环产生的DNA分子数目为23=8，则需消耗 引物③的数目为（8×2-2）÷2=7，C正确；
D、物质③的 5′端添加了某序列，至少需经 2 次循环才可获得以该序列为模板合成的双链DNA产物，D错误。
故选C。
14．A
【分析】琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物的原理主要基于DNA分子在电场作用下的迁移行为以及琼脂糖凝胶的特性。
【详解】A、利用添加核酸染料的凝胶对PCR产物进行电泳后，核酸染料可与DNA结合，在紫外灯下能观察到DNA条带，从而观察PCR产物的电泳结果，A正确；
B、PCR反应的扩增原料是4种脱氧核糖核苷酸，而不是核糖核苷酸，B错误；
C、在琼脂糖凝胶电泳中，DNA带负电，在同一电场作用下向正极迁移，且DNA片段越长，迁移速率越慢，C错误；
D、琼脂糖凝胶浓度的选择需要考虑待分离DNA片段的大小，一般来说，DNA片段越大，应选择浓度越低的琼脂糖凝胶，D错误。
故选A。
15．C
【分析】胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选，此时胚胎应发育到桑葚胚或囊胚阶段。
【详解】A、筛选纤维素分解菌时，培养基中需添加纤维素和刚果红，A正确；
B、培育转基因抗虫棉时，在将目的基因导入受体细胞后，需要从分子水平上鉴定目的基因（Bt基因）是否成功导入、稳定存在和表达，还需要通过采摘抗虫棉的叶片饲喂棉铃虫来从个体水平上确定Bt基因是否赋予了棉花抗虫特性和评估其抗性程度，从而筛选出有较好抗虫特性的转基因抗虫棉。所以，培育转基因抗虫棉时，需从分子水平及个体水平进行筛选，B正确；
C、单倍体育种时，F1的花药不需要筛选直接进行组织培养，之后用秋水仙素处理单倍体幼苗使染色体加倍后，再进行筛选，C错误；
D、胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选，挑取质量好，活性强的胚胎进行培养或保存，可以提高胚胎移植成功的概率，D正确。
故选C。
16．B
【分析】动物乳腺生物反应器是基于转基因技术平台，使外源基因导入动物基因组中并定位表达于动物乳腺，利用动物乳腺天然、高效合成并分泌蛋白的能力，在动物的乳汁中生产一些具有重要价值产品的转基因动物的总称。
【详解】A、为了在乳汁中能获得目的蛋白质，需要让目的基因在乳腺细胞中特异性表达，故需要将抗凝血酶基因与乳腺中特异性表达的基因的启动子结合，A正确；
B、用显微注射法将凝血酶基因构建的基因表达载体注入哺乳动物的受精卵中，而不是直接将基因注入哺乳动物的乳腺细胞中，B错误；
C、乳腺生物反应器产品的获得受年龄和性别的限制，只有雌性动物处于泌乳期时才能获得所需蛋白质，C正确；
D、大肠杆菌为原核生物，无内质网和高尔基体，对于转入其体内的真核生物的基因的表达出来的肽链无法进行修饰和加工，故将抗凝血酶基因导入大肠杆菌，大肠杆菌可能不能产生有正常生理功能的酶，D正确。
故选B。
17．D
【分析】蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过改造或合成基因，来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质。
【详解】A、该技术是蛋白质工程，是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，操作对象也是DNA，需对基因进行改造或合成，A正确；
B、蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需，B正确；
C、图中①为转录，②为翻译，大肠杆菌是原核生物，没有核膜，转录和翻译可同时进行，C正确；
D、物质a为mRNA，mRNA序列改变，由于密码子的简并性，最终编码的氨基酸序列可能不变，D错误。
故选D。
18．A
【分析】转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。
【详解】A、推广种植抗虫棉可降低农药使用对环境的污染，支持种植转基因农作物对人类有利的观点，A符合题意；
B、转基因农作物的扩散会对生物的多样性构成潜在的风险和威胁，该点不支持种植转基因农作物对人类有利的观点，B不符合题意；
C、转基因农作物会产生毒性蛋白或过敏蛋白，存在潜在风险，该点不支持种植转基因农作物对人类有利的观点，C不符合题意；
D、转基因生物获得外源基因后，可能具备某些特殊性状，增强生存能力，威胁其他生物的生存，该点不支持种植转基因农作物对人类有利的观点，D不符合题意。
故选A。
19．(1) 高压蒸汽灭菌 石油 琼脂
(2)防止培养基中的水分过快挥发
(3) 稀释涂布平板 5.2×107个
【分析】1、在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基；
2、统计菌落数目的方法：
（1）显微镜直接计数法：
①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；
②方法：用计数板计数；③缺点：不能区分死菌与活菌；
（2）间接计数法（活菌计数法）：
①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌；
②操作：a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性；b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数；③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。
【详解】（1）配制好的培养基通常使用高压蒸汽灭菌法灭菌；由题干信息分析可知，该实验的目的是分离和纯化高效分解石油的细菌，故步骤③培养基为选择培养基，培养基成分与普通液体培养基相比，最大的区别是培养基中以石油为唯一碳源，从而分离出能分解石油的细菌；过程④所用的培养基为固体培养基，通常添加琼脂作为凝固剂；
（2）平板冷却后需要倒置，目的有两个：一是防止皿盖上的水珠落回培养基造成污染；二是防止培养基中的水分过快挥发；
（3）稀释涂布平板法统计的是活菌数目，常采用稀释涂布平板法对石油分解菌进行分离和计数；将1mL样品稀释100倍在3个平板上分别接种0.1mL稀释液；经适当培养后3个平板上的菌落数分别为46、58和52，据此可得出每升样品中的活菌数为（46+58+52）÷3÷0.1×1000×100=5.2×107（个）。
20．(1) 消毒 无菌
(2) 激素和营养 脱分化 不定形的薄壁组织团块 再分化 生长素和细胞分裂素
(3)植物顶端分生区附近（如芽尖、茎尖）的病毒极少，甚至无病毒，因此切取芽尖进行组织培养出的兰花植株有可能不带病毒
【分析】植物组织培养技术：
1、过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）。
2、原理：植物细胞的全能性。
3、条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。
【详解】（1）为预防杂菌的感染，芽尖组织在接种至培养基之前，必须进行消毒处理，整个组织培养过程需在无菌条件下操作，并严格控制好各个时期的培养条件。
（2）植物细胞一般具有全能性。在一定的激素和营养等条件的诱导下，已经分化的细胞可以经过脱分化，即失去其特有的结构和功能，转变成未分化的细胞，进而形成不定形的薄壁组织团块，这称为愈伤组织。愈伤组织能重新分化成芽、根等器官，该过程称为再分化。植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素，它们的浓度、用量的比例等都会影响植物细胞的发育方向。将愈伤组织接种到含有特定激素的培养基上，就可以诱导其再分化成胚状体，长出芽和根，进而发育成完整的植株。
（3）植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒。因此，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗。
21．(1) 促性腺 获能 观察到两个极体或雌、雄原核
(2) 囊胚 DNA分析 同期发情 (3) 胚胎分割 均等
【分析】1、体外受精包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、体外受精，该技术产生的动物称为试管动物；
2、胚胎分割：胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一，在处理过程需特别注意的是要将内细胞团均等分割，否则将影响分割后胚胎的恢复和发育，结果是获得多个基因型相同的后代；
3、胚胎移植的基本程序主要包括：(1)对供、受体的选择和处理：选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理；(2)配种或人工授精；(3)对胚胎的收集、检查、培养或保存(对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段)；(4)对胚胎进行移植；(5)移植后的检查；
4、分析题图：图中①表示精子的采集；②表示卵母细胞的采集；③表示体外受精过程。通过胚胎工程培育试管牛的过程，包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等过程。
【详解】（1）用促性腺激素处理雌牛后，可使供体母牛一次性排出多个卵细胞；采集的精子往往需要经过获能处理后才具有与卵细胞受精的能力；在实际胚胎工程操作中常以观察到两个极体或雌、雄原核作为受精的标志；
（2）由图可知，移植的胚胎具有内细胞团和滋养层细胞，因此移植的胚胎处于囊胚期；移入的胚胎能在代孕雌牛子宫中存活，其生理基础是代孕雌牛子宫对外来胚胎基本不会发生免疫排斥反应；胚胎移植前的性别鉴定应取早期胚胎的滋养层细胞进行DNA分析；胚胎移植前，需对供、受体犬进行同期发情处理，目的是为供体胚胎移入受体提供相同的生理环境；
（3）为提高胚胎利用效率，尽快获得数量较多的子代和牛，应对胚胎进行胚胎分割处理，即图甲环节，此操作的最终目的是获得多个基因型相同的后代；在处理过程需特别注意的是要将内细胞团均等分割，否则将影响分割后胚胎的恢复和发育，比如含内细胞团少的部分发育不良或不发育。
22．(1)D
(2) XbaⅠ和HindⅢ Ca2+ 植物组织培养
(3) PCR技术 抗原-抗体杂交
(4) Bt毒蛋白基因没有成功表达 基因重组
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。
【详解】（1）PCR引物应分别与待扩增片段两端的互补链3′端结合，且引物序列与其结合处应保持“正向一致”。Bt基因的DNA片段的上链(5′→3′)是GACCTGTGGAAGC…CATACGGGATTG，对应的下链(3′→5′)是CTGGACACCTTCG…GTATGCCCTAAC。前向引物通常与上链5′端相同序列（①），后向引物则与上链3′端互补且方向为5′→3′（④），应选①和④。
故选D。
（2）据图分析，在构建目的基因表达载体外，由于BamHⅠ能将目的基因切割，因此不能用BamHⅠ切割，因此对于目的基因的左侧只能用XbaⅠ切割，而右侧HindⅢ和EcoRⅠ是目的基因和终止子近侧共有的限制酶，但目的基因的左侧有EcoRⅠ的识别序列，因此目的基因右侧需要用HindⅢ切割，因此，为确保目的基因能够与Ti质粒正确连接，形成含有目的基因的重组Ti质粒，科研人员应选用限制酶XbaⅠ和HindⅢ切割Ti质粒和含Bt基因的DNA片段；在获得重组Ti质粒后，可将其加入经Ca2+处理（使其处于易于吸收周围环境DNA分子的状态）的农杆菌；导入重组质粒的玉米细胞经植物组织培养成为转基因玉米植株，该操作的原理是植物细胞的全能性。
（3）翻译的产物是蛋白质，由于抗原与抗体的结合具有特异性，故为检测转基因玉米是否培育成功，可在分子水平条件下，科研人员首先利用抗原—抗体杂交法检测Bt基因是否成功翻译；在进行个体生物学水平的鉴定时，科研人员将获得的多株转基因玉米进行自交，发现除少数植株的子代均抗虫外，多数植株的子代中均出现了不抗虫植株，统计这些植株的子代中抗虫与不抗虫的比例，发现有3∶1和15∶1两种情况。其中15∶1为9∶3∶3∶1的变式，说明目的基因转入了两条具有非同源染色体的两条染色体上，即在两对同源染色体的各一条染色体上转入了抗虫基因，进而通过自交产生了性状分离比为15∶1的后代表现。
（4）科学家最初做抗虫棉试验时，虽已经检测出棉花植株中含有抗虫基因，但让棉铃虫食用棉花叶片时，棉铃虫并没有被杀死，这说明Bt毒蛋白基因没有成功表达；为此，科学家对棉植株中的Bt毒蛋白基因进行了修饰，结果食用了棉叶的棉铃虫中毒死亡了，从变异类型分析，这种对Bt毒蛋白基因的修饰是蛋白质工程的应用，是第二代基因工程，其原理是基因重组。

展开更多......

收起↑