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吉林省长春市绿园区长春市十一高中2024-2025学年高二下学期4月月考生物试题
一、单选题
1．“碳中和”是指国家、企业、产品、活动或个人在一定时间内直接或间接产生的二氧化碳或温室气体排放总量实现正负抵消，达到相对零排放。新农村建设开发沼气工程，以人畜粪便、秸秆为原料，产生的沼气可以为燃料，沼渣可以作为家禽的饲料及食用菌的培养基，沼液通入养鱼池用于促进浮游生物的生长，增加鱼的饲料，减少对林灌草地进行滥采滥伐，保护生态环境。下列说法错误的是（ ）
A．沼气工程充分利用了循环原理，实现了能量的多级利用，大大提高了能量传递效率
B．在保护林灌草地改善水土流失的过程中，体现了生物多样性的间接价值
C．对林灌草地进行保护后，很多鸟类和小动物迁入、定居，改变了演替的速度和方向
D．可以通过植树造林、种草、开发沼气等绿色清洁能源来尽早实现“碳中和”
2．传统发酵食品的制作需要各种各样的微生物，且控制发酵条件至关重要。下列相关叙述正确的是（　　）
A．制作泡菜时，发酵后期尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需要定期开盖放气
B．醋酸菌在O2、糖源充足时将乙醇转化为乙醛，然后变为醋酸
C．葡萄皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后可直接通入无菌空气制作葡萄醋
D．腐乳制作过程中参与的微生物包括酵母、曲霉和毛霉等，其中毛霉起主要作用
3．两位同学食用冰激凌后出现腹泻症状，为此他们检验冰激凌中大肠杆菌数量是否超标。他们的实验流程和结果如下图。下列叙述不合理的是（ ）
A．①应采用涂布平板法
B．实验方案应增设仅接种无菌水的组别
C．①应接种至少3个平板
D．仅以深紫色菌落数估测会导致结果偏高
4．某实验小组测定土壤中能分解尿素的活菌数，在实验组的每个平板上接种0.1mL稀释105倍的土样稀释液，培养后发现实验组4个平板上的菌落数分别为17、68、69、75，下列相关叙述正确的是（ ）
A．用清水将土样制成1×103～107倍稀释的稀释液后灭菌处理
B．接种所用的培养基是湿热灭菌处理后的牛肉膏蛋白胨培养基
C．如果未接种的对照组平板上有菌落出现，应重新进行实验
D．该实验所用每克土样中能分解尿素的活菌数为5.7×107个
5．发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品．目前在许多领域得到了广泛的应用。下列说法错误的是（ ）
A．发酵工程大多使用单一菌种，可以从自然界中筛选也可以通过诱变育种或基因工程育种获得
B．发酵工程的中心环节是分离、提纯产物，如果产品是微生物细胞本身，可采用过滤、沉淀等方法分离
C．在酸性和碱性条件下谷氨酸棒状杆菌积累的代谢产物不同，发酵过程需严格控制pH值
D．发酵工程可用于生产微生物农药，主要是利用微生物或其代谢物来防治病虫害
6．科研人员以携带葡萄灰比诺病毒的“阳光玫瑰”葡萄为材料，研究了外植体取材部位、光照处理和热处理方式对脱除病毒的影响，结果如下表所示。相关叙述错误的是（ ）
组号 温度/光照+湿度/黑暗 接种部位 存活率/% 株系脱毒率/%
1 38℃/16h+38℃/8h 茎尖 50.00 ————
2 同上 第1腋芽 33.33 ————
3 同上 第2腋芽 0 ————
4 38℃/8h+32℃/8h 茎尖 88.89 100.00
5 同上 第1腋芽 94.44 100.00
6 同上 第2腋芽 94.44 83.33
A．接种前不应对外植体消毒，以免干扰各处理条件下的株系脱毒率
B．茎尖和第1、2腋芽都含有顶端分生组织，因此可以作为脱毒材料
C．研究人员未检测1～3组脱毒率的原因可能是该条件下外植体存活率较低
D．生产中应选择38℃/8h光照+32℃/8h黑暗，以第1腋芽为外植体脱毒
7．辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。下列表述正确的是（ ）
A．实现①过程的条件是外植体细胞发生基因突变
B．①过程受外源激素的调控，②过程受内源激素的调控
C．获得脱毒苗常用的外植体是成熟的根和茎，脱毒苗具有更强的抗病毒能力
D．通过细胞培养获得辣椒素的过程可不需要实现细胞的全能性
8．植物细胞工程在农业、医药等方面有着广泛的应用，并且取得了显著的社会效益和经济效益。下列相关叙述正确的是（ ）
A．取草莓茎尖进行植物组织培养可获得抗病毒苗
B．玉米花粉粒经花药离体培养得到的植株能稳定遗传
C．红豆杉细胞经植物组织培养技术可工厂化生产紫杉醇
D．可采用诱变处理烟草愈伤组织的方法来获得烟草抗盐碱突变体
9．某研究小组为测定药物对体外培养细胞毒性的大小，准备对某种动物的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行动物细胞培养。下列说法正确的是（　　）
A．制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶代替胰蛋白酶处理肝组织
B．CO2培养箱中CO2浓度维持在5%左右，以促进细胞呼吸
C．本实验应设置对照实验，以检测药物对甲、乙的毒性大小
D．为防止细胞培养过程中细菌的污染，需要对培养液和所有培养用具进行消毒处理以及在无菌环境下进行操作
10．2019年，南京农业大学的“人造肉”研发团队培养出中国第一块肌肉干细胞培养肉。其培养过程如图。下列相关叙述错误的是（ ）
A．分散肌肉细胞可以采用机械法或酶解法
B．体外大规模培养肌肉细胞的过程中不会出现接触抑制现象
C．与传统肉类生产方式相比，细胞培养肉对环境的污染更小，可以减少生态足迹
D．胚胎干细胞可以培养出肌肉组织、结缔组织等多种组织或器官，肌肉干细胞一般具有组织特异性，只能培养获得肌肉组织
11．干眼症是由于泪液分泌减少导致的眼睛干涩病症。将有关基因导入已分化的体细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），培养iPS细胞得到的眼结膜组织可分泌泪液成分“粘液素”，有望治疗干眼症。下列说法不正确的是（ ）
A．导入的基因具有促使体细胞恢复分裂能力的作用
B．利用iPS细胞获得眼结膜组织时，应加入分化抑制因子
C．利用iPS细胞治疗人类疾病理论上可避免免疫排斥反应
D．iPS细胞可在一定程度上避免胚胎干细胞涉及的伦理问题
12．我国科学家成功培育了体细胞克隆猴。在处理重构胚时，将组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA、组蛋白去甲基化酶KDM4D的mRNA注入了重构胚，促进囊胚的发育，提高代孕母猴的妊娠率。下列叙述错误的是（　　）
A．除显微操作去核外，还可采用梯度离心、紫外线照射、化学物质处理法在没有穿透卵母细胞透明带的去核或使其中的DNA变性
B．TSA能够抑制组蛋白脱乙酰酶的作用从而降低组蛋白的乙酰化水平
C．组蛋白去甲基化酶KDM4D能够降低组蛋白的甲基化水平
D．培育克隆猴对研究人类疾病致病机制和研发新药有重要意义
13．南开大学研究团队展开科研攻关，研制出了集检测分析与操作于一体的原位显微分析与操作仪，实现了机器人化的细胞核移植流程，世界首例机器人操作的体细胞克隆猪在天津诞生。下列有关克隆技术说法错误的是（ ）
A．体细胞克隆猪的核遗传物质绝大部分来自供体细胞，少部分来自受体细胞
B．通过植物组织培养克隆植物个体时，可通过增大培养基中生长素和细胞分裂素的比值来诱导生根
C．制备单克隆抗体时，灭活病毒表面的糖蛋白和一些酶类物质在促进B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的过程中发挥重要作用
D．机器人操作诞生体细胞克隆猪这一过程属于无性生殖
14．下列关于植物组织培养技术和动物细胞核移植技术的说法，错误的是（ ）
A．两项技术均说明细胞具有全能性
B．两项技术均可用于濒危物种的保护
C．植物细胞全能性表达需要离体、一定的营养物质、植物激素等条件
D．去核的受体卵母细胞中可能含有促进供体细胞核表达全能性的物质和条件
15．下表为细胞工程技术的相关应用，各组所选择的实验材料、材料特点与实验目的匹配正确的是（ ）
组别 实验目的 实验材料 材料特点
A 克隆高产奶牛 受精卵 细胞大，细胞质能有效调控核发育
B 培育脱毒草莓 茎尖 分裂能力强，易诱发突变
C 培育西红柿马铃薯超级杂种 花粉粒 易于获取，易于组织培养
D 烧伤患者皮肤细胞移植 自体皮肤生发层细胞 分裂能力强，且不会引起免疫排斥
A．A B．B C．C D．D
二、多选题
16．野外曾一度消失的中华穿山甲在衡阳、永州等地相继出现；5只美丽的彩鹦在郴州市区的农田中悠闲觅食；水松、银杉等珍贵濒危野生植物种群得到恢复性增长……近年来，一些珍稀野生动植物频频“亮相”山水之间。下列叙述正确的是（　　）
A．以上信息体现了生物遗传多样性和种群多样性
B．对濒危物种可采取克隆的方法放归自然，可增加物种多样性
C．在保护生物与环境的同时，也关注农民的生产和生活，这遵循整体原理
D．为了实现可持续性发展，人类不可过度从土地索取更多资源
17．细胞产物的工业化生产可以使植物细胞内一些具有药用价值的次生代谢产物分泌到细胞膜外，然后从培养基中直接分离纯化得到目标次生代谢产物。例如，Aoyagi将长春花体细胞用富含古罗糖醛酸的藻酸盐凝胶固定起来，然后大量生产吲哚类生物碱。以下说法正确的是（ ）
A．需筛选吲哚类生物碱产量大的细胞进行培养，利用促进细胞生长的培养条件可进一步提高单个细胞的产量
B．悬浮培养生产代谢物时，若添加抑制细胞壁生长的物质，可能会达到较好的分泌效果
C．在原生质体培养中，还可以通过添加各种化合物以研究其对植物细胞生长分化的影响
D．反应器中培养基为液态，培养物处于愈伤组织阶段，除了营养物质以外一般还需要提供诱导代谢物产生的物质和条件
18．由单一B细胞克隆产生的针对某一特定抗原的抗体，称为单克隆抗体；由多种抗原刺激机体，相应地就产生多种抗体混杂在一起，称为多克隆抗体。如图表示单克隆抗体和多克隆抗体的制备过程，下列相关叙述错误的是（ ）
A．两种技术均依赖于细胞膜的流动性，②③④⑤的差异是由细胞内基因不同造成的
B．两种技术均需要对小鼠进行特定抗原的免疫和特定细胞的筛选、鉴定和培养
C．两种技术均需要从小鼠的血清中收集抗体，但单克隆抗体具有更高的特异性
D．①含有的多种抗体，源于不同的浆细胞，可与同种病原体的不同抗原结合
19．粤东黑猪由于生长速度慢、瘦肉率低等缺点，近年来已被列入我国濒危地方猪种。科研人员通过体细胞核移植技术，顺利获得6头健康状况良好的纯种粤东黑猪，具体流程如图。下列相关叙述正确的是（ ）
A．①首先要将取得的耳部组织分散成单个细胞，用培养液将细胞制成细胞悬液
B．②是细胞融合过程，常用PEG融合法，电融合法和灭活病毒等诱导细胞融合
C．③是用电刺激、Ca2+载体，乙醇或蛋白酶合成抑制剂等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程
D．通过体细胞克隆技术可大量生产粤东黑猪，对地方猪的保种工作具有重大现实意义
20．为保证实验的成功，选择合适的生物材料非常关键。下列选择合理的是（ ）
A．选择胚胎细胞作为核供体进行核移植可提高克隆动物的成功率
B．选择草莓的茎尖进行组织培养可获得抗病毒草莓
C．以病人的体细胞诱导成iPS细胞，进而形成无免疫排斥的移植器官
D．对愈伤组织进行诱变处理可筛选出有用的突变体
三、非选择题
21．世界上许多热带、亚热带国家或地区，由于环境温度过高，普通酵母菌难以进行正常乙醇发酵，因此选育耐高温菌株具有重要价值。下表是科学家选用合适菌株进行属间细胞融合培育耐高温的高产酵母菌株的过程。
(1)请完成下表
实验步骤 简易操作 原理及分析
①.选择菌株 选用产酒率低但可以耐受45℃高温的呼吸缺陷型克鲁维酵母Y菌株和产酒率高但无法在45℃下生长的酿酒酵母A菌株为亲株。 呼吸缺陷型Y菌株线粒体功能丧失，只能进行无氧呼吸，与A菌株相比，菌体细胞较 （大、小）。
②. 将亲本菌株活化培养后，先用脱壁预处理剂处理一定时间，然后加入2%蜗牛酶液，摇床振荡处理0.5-1hr。 蜗牛酶液可以消化真菌细胞壁。
③. 先用碘乙酸处理Y菌株，然后与A菌株等量混合，加入 （促融剂名称），在28℃下，保温45min。 碘乙酸可以不可逆地抑制细胞中酶的活性，使其失活；融合过程需要在 中进行，以免吸水涨破。
④.筛选A-Y融合菌株 将步骤3得到的菌液用 法接种在高渗再生平板上，45℃培养3天，然后加入TTC， （无色、红色）菌落即为融合株。 无色的TTC可被线粒体内的琥珀酸脱氢酶还原为红色物质，使菌落呈现红色。
⑤.筛选高产融合株 第4步选出的菌株在 ℃，18%葡萄糖溶液中发酵，并进行比较。 通过对比产酒率和糖利用率选出更优良的菌株。
(2)第3步操作依据的原理是 。除上述方法外，还可用紫外线处理Y菌株或A菌株，并从中筛选合适的菌株，该育种方法的原理是 。
(3)A-Yoos为复筛获得的产酒率最高的菌株，将其与亲株Y菌株放在相同葡萄糖基质中，在相同且适宜温度下充分发酵，糖利用率见图1；同时检测该温度下两菌株对不同浓度酒精的耐受性，结果见图2（吸光度值越大表示活细胞数量越多）。

试分析A-Y005产酒率更高的原因是 。
22．枸杞是一味传统中药，野生黑果枸杞富含花青素，且抗逆性强，但比人工种植的宁夏枸杞个体小、产量低。研究人员尝试利用不对称植物体细胞杂交技术将野生黑果枸杞的抗逆性状转移到宁夏枸杞中。
(1)愈伤组织细胞生长旺盛，是制备原生质体的良好材料。在特定的培养条件下，外植体经过 转变成愈伤组织，培养基中 是影响该过程中植物细胞发育方向的关键因素。
(2)不对称植物体细胞杂交操作过程如下：
①对黑果枸杞原生质体进行辐射处理，使其细胞核中的 部分断裂，用药物处理宁夏枸杞原生质体，使其细胞质中的某些酶失活，两种原生质体都失去分裂能力。
②用化学诱导剂 诱导原生质体融合，培养体系中只有两种不同枸杞的融合原生质体可分裂形成再生愈伤组织。
(3)研究人员对3种愈伤组织的同工酶进行检测。同工酶是功能相同，但酶本身的分子结构、理化性质等方面有所不同的一组酶。
①过氧化氢酶的功能是 。将提取的愈伤组织蛋白质进行电泳，电泳后的凝胶浸泡在淀粉、KI和H2O2混合溶液中，已知KI遇O2生成I2，一段时间后过氧化氢酶所在部位显色，如下图所示。显色条带为 色，显色深浅由酶的 决定。
②结果显示融合原生质体再生愈伤组织中缺乏来自 的部分过氧化氢同工酶，原因可能是 。
(4)本研究中，获得多株杂种植株后下一阶段的研究方向是 。
23．动物细胞培养在实践中有很大的用途——在检验药物毒性和开发药物方面有重要的应用。为研究药物的抗肝癌效果，需要大量肝癌细胞作为实验材料。回答下列问题：
(1)癌细胞其中一个特点是能够无限增殖，据此推测培养肝癌细胞时， （填“会”或“不会”）发生接触抑制现象。
(2)为了初步检测药物X和Y的抗癌效果，在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肝癌细胞，使其贴壁生长，实验组加入等体积相同浓度的溶于二甲基亚矾（溶剂）的药物X或Y，培养过程及结果如图表所示。对照组应加入的是 。根据实验结果判断，药物X、药物Y均有抗癌作用，抗癌效果更好的是 ，判断依据是 。
(3)为降低药物X治疗肝癌的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体一药物偶联物（ADC），制备单克隆抗体的过程中，可用灭活病毒诱导法诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与 发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的 分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。ADC进入肝癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物作用于肝癌细胞，可导致 （填“细胞凋亡”或“细胞坏死”）。与直接使用抗肿瘤药物相比，ADC对人体的副作用更小，原因是 。
24．癌症免疫疗法通过重新激活抗肿瘤的免疫细胞，克服肿瘤的免疫逃逸。科研人员在研究中发现多种免疫治疗方法结合是提高治疗效果的途径之一。
图2
(1)某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白PSMA和PD-L1，如图1。PD-L1能抑制T细胞的活化，使癌细胞发生免疫逃逸。临床上可利用PD-1的单克隆抗体进行癌症治疗。其制备方法如下：将等量的纯化PD-1蛋白分别注射到5只小鼠体内，再经过二次免疫后测定小鼠抗PD-1抗体的免疫效果，取免疫效果最好的小鼠用于后面的融合实验。该过程中，进行二次免疫的目的是 。接着从小鼠的 中取B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。
(2)一段时间后，将（1）所得细胞接种到96孔培养板上，静置培养一段时间，进行抗体阳性检测，如图2。
①检测原理是 。在检测时需要将PD-1蛋白固定于固相载体表面，并加入96孔板培养槽中的 （沉淀/上清液），即待测样本。
②加入酶标抗体后一段时间，需要用洗涤剂将未与 结合的酶标抗体洗去。
③加入相应酶促反应底物显色，颜色 （填“深”或“浅”）的组更符合需求。
(3)CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。因此，科研人员尝试构建既能结合PSMA，还能结合CD28的双特异性抗体PSMA×CD28，如图3。这种双特异性抗体的优势在于 。
图3
25．我国研究人员培育出了细胞核移植灵长类动物——食蟹猴，流程如图甲所示，①~②表示过程。研究发现向融合细胞中注入酶X的mRNA后，能显著提高融合细胞发育成囊胚的成功率，这与染色体组蛋白动态可逆地被修饰酶所改变，调控了相关基因的表达有关，过程如图乙所示。据图分析回答下列问题：
(1)在动物体细胞核移植中，非人灵长类动物的体细胞核移植非常的困难，一方面是由于 ，导致胚胎发育率低；另一方面是对非人灵长类动物胚胎进行操作的技术尚不完善。
(2)图甲过程①在原代培养时，细胞分裂生长到表面相互接触就会停止分裂增殖，这种现象叫 ，进行传代培养时制备细胞悬液的操作是 。过程②中供体核进入卵母细胞形成重构胚，可用 （填出两种）的方法使其激活，完成细胞分裂和发育的进程。
(3)图甲中向融合细胞中注入酶X的mRNA有利于相关基因恢复表达，从而提高实验成功率，据图乙分析，酶X可能是 。
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 A D D C B A D D C B
题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
答案 B B A A D CD BCD ABC ACD ACD
21．(1) 小 制备原生质体 诱导原生质体融合 PEG 等渗或略高渗溶液（“等渗”给分） 稀释涂布平板 红色 45
(2) 细胞膜具有一定的流动性 基因突变
(3)A-Y005对酒精耐受性强，对糖的利用率高
22．(1) 脱分化 生长素、细胞分裂素的浓度、比例
(2) 染色体（DNA） 聚乙二醇（PEG）
(3) 催化过氧化氢分解 蓝 活性 宁夏枸杞和黑果枸杞 相关基因丢失或未表达
(4)依据其抗逆性进一步筛选
23．(1)不会
(2) 等体积的二甲基亚矾（溶剂） 药物X 添加药物X的组别肝癌细胞数目最少
(3) 细胞膜上的糖蛋白 蛋白质分子和脂质分子/磷脂分子 细胞凋亡 将药物送到肿瘤部位，对肿瘤进行特异性杀伤
24．(1) 刺激机体产生更多相应的B淋巴细胞 脾
(2) 抗原与抗体的特异性结合 上清液 抗PD-1抗体 深
(3)使T细胞更容易（更精确或更高概率）接触到癌细胞
25．(1)供体细胞的细胞核在去核卵母细胞中不能完全恢复其分化前的功能状态
(2) 接触抑制 重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集，之后再将收集的细胞制成细胞悬液，分瓶培养 电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等
(3)组蛋白乙酰化酶或组蛋白去甲基化酶

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