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成都外国语学校高 2026 届高二下半期考试
生物试题
一、单选题（每题 2 分，共 40 分）
1．GA3 是一种由 C、H、O 三种元素构成的与赤霉素作用类似的植物生长调节剂，能促进茎伸长和种子萌
发。GA3 的广泛施用会导致其在土壤中残留，研究小组从长期施用 GA3 农田的土壤中筛选出了能降解 GA3
的菌株并调查了土壤中能降解 GA3 的菌的数量，如图所示。下列相关实验内容错误的是（ ）
A．过程②将稀释的含有降解 GA3 的菌株接种到甲瓶培养液中来富集培养 GA3 降解菌
B．乙培养基中应以 GA3 为唯一的碳源，可能还有其他微生物的存在
C．图中 3 号试管中样品液的稀释倍数为 104 倍
D．5 号试管的结果表明每克土壤中的活菌数为 1.7×108 个
2．产黄青霉菌生产青霉素的发酵流程如下图所示，其中“补料”是指补充培养基，其成分有花生饼粉、玉米
浆、葡萄糖、磷酸二氢钠等。下列关于该发酵过程的叙述，错误的是（ ）
A．对产黄青霉菌分离纯化时采用的接种方法是稀释涂布平板法
B．“种母培养”时采用液体培养基有利于增加产黄青霉菌的数量
C．产黄青霉菌为异养厌氧型真菌，添加的磷酸二氢钠具有多种作用
D．向主发酵罐添加 pH 调节液是因为环境条件会影响青霉素的形成
3．紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的二萜类生物碱类化合物，是一种有效的抗癌药物，传统生产方法是从
红豆杉树皮和树叶中提取，下图为利用植物细胞工程生产紫杉醇的流程图，相关叙述正确的是（ ）
A．紫杉醇是植物代谢活动产生的，属于初生代谢物
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B．①②过程通常采用液体培养基，需要适当强度的光照
C．可利用传代培养的动物癌细胞来检测紫杉醇的效果
D．植物细胞培养的原理是植物细胞具有全能性
4．植物细胞工程在植物繁殖新途径等方面都有广泛的应用，并取得了显著的社会效益和经济效益。下图表示
植物细胞工程应用的相关操作，相关叙述正确的是（ ）
A．A 途径中发生的可遗传变异有基因突变和基因重组
B．经 B 途径得到的大多数植株的隐性性状容易显现
C．D 途径的理论依据是茎尖新生组织具有抗病毒的能力
D．上述应用得到的植株体细胞中的染色体数均相同
5．下图 1 为某单克隆抗体的制备流程，图 2 为图 1 过程②的具体操作。下列相关叙述错误的是（ ）
A．图 1 中制备细胞悬液时可采用机械方法或用胰蛋白酶处理
B．过程②中筛选出的杂交瘤细胞还需要抗原刺激才能产生特异性抗体
C．用多孔玻璃板培养和筛选杂交瘤细胞时，每个孔中尽量只接种 1 个细胞
D．出现阳性反应的原因是抗原与抗体发生了特异性的结合
6．随着动物细胞工程和胚胎工程的迅猛发展，用引进的良种奶牛大量、快速繁殖满足了我国对奶类的大量需
求。下图表示畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，相关分析错误的是（ ）
A．方法 I、Ⅱ获得的胚胎通常需培养至囊胚阶段再移植入 D 牛的子宫内
B．方法 I 中 B 牛的卵子需培育到 MⅡ期才具备与精子受精的能力
C．在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体可作为受精的标志
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D．通过方法 I、Ⅱ培育优良种牛 E 和 F 的本质都是有性生殖
7．CRlaa 和 mCRlaa 是两种早期胚胎培养常用的培养液，这两种培养液中除 NaCl 浓度不同外，其他成分及
浓度均相同。为了比较这两种培养液对体外胚胎培养的差异情况，科研人员进行了相关实验，所得实验结果
如下表所示。下列叙述错误的是（ ）
组别 卵裂数 卵裂率 囊胚数 囊胚率
CRlaa 769 84.9% 189 20.6%
mCRlaa 750 83.7% 252 28.1%
注：卵裂率（%）=卵裂数/卵母细胞总数 x100%。囊胚率（%）=囊胚数/卵母细胞总数 x100%
A．CRlaa 和 mCRlaa 培养液中应含有动物血清 B．mCRlaa 培养液更有利于囊胚发育
C．卵裂期随着细胞数量增加，胚胎的总体积不断增加 D．囊胚期细胞逐渐分化，形成内细胞团和滋养层
8．抗体-药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细
胞的选择性杀伤。ADC 通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，它的作用机制如下图所示。下
列说法错误的是（ ）
A．理论上放射性同位素可以代替 ADC 偶联的药物
B．ADC 进入肿瘤细胞要消耗能量
C．ADC 中的抗体可导致肿瘤细胞凋亡
D．单克隆抗体制备过程中，B 细胞和骨髓瘤细胞
融合后可存在 5 种类型的细胞
9．2023 年 11 月，我国科研人员利用食蟹猴培育出世界首只胚胎干细胞高贡献的活体嵌合猴，该研究部分过
程如图所示，由于供体猴胚胎干细胞在体外培养和妊娠期间高度嵌合于受体胚胎，使得后代活体嵌合猴的各
种组织中，高达 90%的细胞来源于供体胚胎干细胞。下列有关叙述正确的是（ ）
（注：GFP 指表达绿色荧光标记蛋白，可监测供体干细胞的存活情况以及其在嵌合体不同组织中的分化、分
布情况。）
A 代孕雌猴在移植嵌合囊胚前，需要饲喂含促性腺激素的饲料进行同期发情处理．
B．图示过程中涉及动物细胞培养、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等工程技术
C．具有清晰 GFP 信号的囊胚才能被转移至代孕雌猴体内，否则难以获得嵌合猴
D．由图可知，代孕雌猴分娩的嵌合猴体细胞中，核遗传物质的一半来源于代孕雌猴
10．将新鲜猪肝剪碎后加入食盐研磨成匀浆，加入蒸馏水搅拌后再加入 SDS（SDS 能破坏膜结构，使蛋白质
变性，形成 SDS-蛋白复合物）。65℃水浴 10min，经搅拌、过滤获取滤液。向滤液中加入氯化钾溶液，搅拌
混匀后离心，得到 DNA 滤液。取 2 倍滤液体积的 95%乙醇沿着烧杯壁缓慢加入滤液中，静置后得到白色絮
状物。取一部分白色絮状物与双缩脲试剂反应，颜色变化不明显。若上述过程未经氯化钾溶液处理，得到的
白色絮状物用双缩脲试剂鉴定，出现紫色络合物。下列说法错误的是（ ）
A．加入食盐的目的是溶解 DNA 和过滤去除不溶的杂质
B．65℃水浴处理可使蛋白质变性，而 DNA 不降解
C．获取白色絮状物后加入二苯胺试剂，沸水浴加热时即可观察到鉴定结果
D．氯化钾溶液处理可更好地去除 SDS-蛋白复合物
11．下图为不同限制酶的识别序列及切割位点（↓表示切割位点），下列叙述错误的是（ ）
A．用 EcoR I 切割 DNA 分子中部获得一个目的基因时，需断开的磷酸二酯键有 2 个
B．用 Bgl II 切出的目的基因与 BamH I 切割的质粒重组后，则不能再被这两种酶切开
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C．酶切时需要控制好温度、酶浓度、PH 等因素
D．图示 4 种限制酶均不能够识别和切割 RNA 分子内的核苷酸序列
12．目的基因 A 有 100 对碱基，其中腺嘌呤占 30%，现利用目的基因 A 片段两侧的特异性序列设计引物 I、
引物Ⅱ，用 PCR 技术扩增该目的基因，结构如图所示。PCR 扩增共循环 50 次。下列说法错误的是（ ）
A．PCR 仪实质上是一台温度自动调控仪器，循环 50 次理论上复制 50 代
B．含目的基因 A 的 DNA 片段经 PCR 循环 50 次，需要两种引物共 250个
C．PCR 过程与体内 DNA 复制的方式相同，但是只需要一种酶的参与
D．若只考虑目的基因 A，经 PCR 循环 50 次需要鸟嘌呤(250-1)×40 个
13．实验结果产物能成功检出用阳性（+）表示，无法检出用阴性（-）表示。假阳性是指检查结果是阳性，
但实际是阴性；假阴性则与之相反。某流感患者进行甲型病毒检测，下列可导致假阳性结果的是（ ）
A．抗原检测：单克隆抗体保存温度过高 B．核酸检测：PCR 扩增时所用引物序列过短
C．核酸检测：PCR 扩增时复性温度设置过高 D．核酸检测：病毒发生变异与 PCR 引物不匹配
14．下图为利用奶牛乳腺生物反应器生产人血清白蛋白的过程，有关说法正确的是（ ）
A．步骤①将牛组织置于无菌水中并加入适量的胰蛋白酶处理可得到单细胞
B．步骤②将目的基因与乳腺细胞中基因的启动子重组在一起
C．步骤④常用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程
D．若要获得同卵双胎或多胎，分割原肠胚时需将内细胞团均等分割
15．蛛丝有超强韧性，其主要成分蛛丝蛋白是一种特殊的纤维蛋白，具有独特的结构与性质。科学家将蛛丝
蛋白基因转入羊的乳腺中以生产蛛丝蛋白，下图是蛛丝蛋白基因的 DNA 片段。在基因工程中可通过 PCR 技
术和琼脂糖凝胶电泳技术检测目的基因是否导入受体细胞。下列说法错误的是（ ）
A．PCR 过程中为了减少非特异性扩增，可考虑调节引物长度适当提高退火温度
B．用 PCR 技术扩增图中的蛛丝蛋白基因，可选择图中的引物①和④
C．科学家将蛛丝蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起
D．若电泳结果显示羊体细胞中含有蛛丝蛋白基因，则用抗原-抗体结合法可在其乳汁检测到蛛丝蛋白
16．毛状根是植物感染发根农杆菌（其 T﹣DNA 含有生长素合成基因）后产生的病理结构，在生产某些次生
代谢物方面具有独特的优势。如图为利用植物组织或细胞培养技术进行次生代谢物生产的流程，下列叙述错
误的是（ ）
A．诱导愈伤组织时，在酒精灯火焰旁将外植体的 1/3-1/2 插入培养基
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B．培养体系 1 制备过程中导入外源基因可采用 PEG 介导法或花粉管通道法
C．与培养体系 1 和 2 不同，培养体系 3 的获得不需要添加外源植物激素
D．培养体系 1 和 3 的制备都利用了基因重组原理，且可产生相同代谢产物
17．纤维素酶是一种复合酶，包括 C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶能使纤维素分解成纤维二糖，第三
种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。科研人员从某菌株中获得了 C1 酶基因，将其与 HT 质粒进行连接，构建基因
表达载体生产高效 C1酶。过程如图所示，已知 C1 酶基因以 B 链为转录模板链，下列说法错误的是（ ）
A．在含有纤维素的固体培养基中加入刚果红，能形成红色
复合物，滴加适量 C1酶和 CX 酶后周围会出现透明圈
B．酶切位点 1 加上 SmaI 的识别序列，酶切位点 2 加上
BamHⅠ的识别序列
C．启动子是一段有特殊序列的 DNA 片段，是 RNA 聚合
酶识别和结合的位点
D．基因工程的载体除了质粒外，还可以是噬菌体或动植物
病毒
18.新冠病毒（SARS-CoV-2）S 蛋白的受体结合结构域（RBD）是引导病毒进入宿主细胞的关键结构。我国
科研人员将 GP67 基因（指导合成一段信号肽，引导新合成的蛋白分泌到细胞外）与 RBD 基因融合，构建融
合基因，大量生产 RBD 蛋白，用于制备疫苗，流程见下图。下列相关叙述错误的是（ ）
A．过程①的理论基础是 DNA 具有相同的结构
B．过程②必须将融合基因与载体连接形成基因表达载体才能注射到受精卵内
C．过程③需用 DNA 分子杂交技术检测融合基因是否成功表达
D．过程④可直接从培养液获得 RBD，无需裂解细胞
19．DNA 琼脂糖凝胶电泳是一种分离、纯化或分析 PCR 扩增后的待检 DNA 片段的技术。下列关于核酸片段
的扩增及电泳鉴定的叙述，正确的是（ ）
A．DNA 分子被电泳缓冲液中的核酸染料染成蓝色
B．若要分离较小 DNA 片段，可选择低浓度凝胶
C．电泳后凝胶中的 DNA 能直接在紫外灯下检测到
D．用生理盐水来配制 0.8%~1.2%的琼脂糖溶液
20. 最早的双脱氧测序法是 PCR 反应体系中，分别再加入一种少量的双脱氧腺苷三磷酸（ddATP、ddCTP、
ddGTP 或 ddTTP），子链延伸时，双脱氧核苷三磷酸也遵循碱基互补配对原则，以加入 ddATP 的体系为例：
若配对的为 ddATP，延伸终止；若配对的为脱氧核苷三磷酸（dATP），继续延伸；PCR 产物变性后电泳检
测。通过该方法测序某疾病患者及对照个体的一段序列，结果如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．上述 PCR 反应体系中需加入两种引物
B．电泳时产物的片段越小，迁移速率越慢
C．5′－CTACCCGTGAT－3′为对照个体的一段序列
D．患者该段序列中某位点的碱基 C 突变为 G
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二．填空题
21．ε-聚赖氨酸（ε-PL）能抑制多种微生物的活性，且人体可将其分解为赖氨酸，是一种优良的天然食品防
腐剂。科研人员欲从土壤中分离能分泌 ε-PL 的微生物，做了如图所示的实验（1~V 表示过程，①~③表示菌
落），已知 ε-PL 可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈。
(1)图中第 I 步最常用的接种方法是 。若经第Ⅱ步培养后发现菌落铺满了整个培养基、无法分辨出单菌
落，则应在第 I 步之前 ，再进行接种。
(2)第Ⅲ步接种，应挑选 （①/②/③）号菌落。一般来说，在相同培养条件下，用不同微生物表现出的稳
定的 来判断微生物种类。
(3)本实验中用到了 4 种培养基，其中乙、丁培养基的作用分别是 、 。
(4)为检测上述收集到的 ε-PL 对不同种类微生物的抑制能力，研究人员将大肠杆菌等菌种分别涂布于某培养
基表面，再将浸有不同浓度 ε-PL 的滤纸圆片置于平板培养基表面，培养后测量清晰区（单位：mm）的宽
度，得到了表所示的结果。
ε-PL 浓度/mg·L-1微生物 20 30 40 50 60 70
大肠杆菌 + + 7.2 10.8 11.6 13.3
沙门氏菌 + + 6.5 9.2 10.9 13.0
酿酒酵母 7.2 9.1 12.6 13.4 14.8 -
红曲霉 + + + + 5.1 6.3
注：“+”表示无清晰区，“-”表示未进行实验。
下列关于上述抑菌实验的叙述，正确的是 。
A．结果显示 ε-PL 对酿酒酵母的抑制作用最强B．ε-PL 对四种微生物的抑制效果与浓度正相关
C．用于实验的培养基应该用液体的选择培养基 D．接种需在超净工作台上酒精灯火焰周围进行
22．不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细
胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴
胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如图所示。请回答下列问题：
（注：X 射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位或染色体消除，使细胞不再持续分裂；碘乙
酰胺处理能使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。）
(1)过程①中需将植物组织经 后接种于 MS 培养基上诱导 过程，产生愈伤组织。对原生质体进行的 A
处理为 。
(2)采用二乙酸荧光素（FDA）法可测定原生质体活力。已知 FDA 本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分
解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过活细胞质膜，会留在细胞内发出荧光。据此分析应选
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择 __ 的原生质体用于融合。融合前对原生质体在显微镜下用血细胞计数板计数，以确定原生质体密度。
(3)获得的原生质体经诱导融合后，只有异源融合的原生质体可持续分裂形成再生细胞团，原因是 。
过程④再分化阶段，芽的分化要求培养基中 （激素）比例较高。
(4)科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和 DNA 分子标记鉴定，结果如表所示。后代植株
中 类型一定不是所需植株。科研人员推测杂种植株的染色体主要来源于亲本柴胡的染色体，另一方亲本
的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中，而是以 DNA 片段的方式整合进柴胡的基因
组，作出以上推测的依据有 。
后代植株类型 染色体数目、形态 DNA 分子标记鉴定
甲 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲 DNA 片段
乙 12，形态与柴胡染色体相似 无红豆杉 DNA 片段
丙 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲 DNA 片段和新的 DNA片段
23．中国科学院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小
鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，实验流程如图所示。请回答下列问题：
(1)用 对雌性小鼠进行超数排卵处理可得到大量卵母细胞，受精时的卵母细胞所处的时期
为 。
(2)体外培养动物细胞时，除需要满足无菌、无毒的环境及适宜的营养物质、温度等条件外，还需要满足的气
体条件是 。
(3)为了获得更多甲的后代，在得到的重构胚发育到 或囊胚期时，对其进行分割；在分割囊胚阶段的
胚胎时，应注意 ，否则会影响胚胎的恢复和进一步发育。
(4)卵细胞、精子分别转化为 phESC、ahESC，它们类似于胚胎干细胞，胚胎干细胞具有 的潜能。不
考虑致死情况，得到的孤雄小鼠性染色体组成为 。
(5)据图分析，只依赖雄性小鼠不能得到孤雄小鼠，请写出一个理由： 。
24. 凝乳酶是食品生产中常用的凝结剂，科研人员从动物体内获得了凝乳酶 mRNA，拟利用大肠杆菌通过基
因工程生产凝乳酶。据下图回答下列问题：
（1）利用凝乳酶 mRNA，在逆转录酶的作用下，可以得到凝乳酶的 cDNA，进一步通过 PCR 扩增时需要 2
种引物，引物的作用是_____。
{#{QQABAQEl5gAQghRACB6KA0XSCEgQsJASJSoGhVCYKAwCgBFABCA=}#}
（2）图 1 和图 2是选用的质粒及其几种相关限制酶的识别位点，在构建基因表达载体时，最好选用的限制酶
有_________，这样选择的优点是_____（至少答出两点）。为在凝乳酶基因两侧加上相应的酶切位点，设计引
物时需在引物前添加相应酶切位点，PCR过程中至少复制_____次可以得到含所需酶切位点的凝乳酶基因。
（3）将构建的重组质粒导入大肠杆菌，需要用钙离子处理，使大肠杆菌处于一种_____。
（4）图 1 中青霉素抗性基因的作用_____。
25．将天然 Ti 质粒改造成含有 Vir 基因的辅助质粒（辅助 T-DNA 转移）和不含有 Vir 基因、含有 T-DNA 的
穿梭质粒，共同转入农杆菌，可提高转化效率。细菌和棉花对密码子偏好不同，为提高翻译效率，增强棉花
抗病虫害能力，进行如下操作。回答下列问题。
注：F1-F3，R1-R3 表示引物；T-DNA-LB 表示左边界；T-DNA-RB 表示右边界；Ori 表示复制原点；KanR 表
示卡那霉素抗性基因；HygBR 表示潮霉素 B 抗性基因。
(1)从苏云金杆菌提取 DNA 时，需加入蛋白酶，其作用是 。提取过程中加入体积分数为 95%的预冷酒
精，其目的是 。
(2)本操作中获取目的基因的方法是 和 。
(3)穿梭质粒中 p35s 为启动子，其作用是 ，驱动目的基因转录；插入两个 p35s 启动子，其目的可能
是 。
(4)根据图中穿梭质粒上的 KanR和HygBR 两个标记基因的位置，用 基因对应的抗生素初步筛选转化的棉
花愈伤组织。
(5)为检测棉花植株是否导入目的基因，提取棉花植株染色体 DNA 作模板，进行 PCR，应选用的引物是
和 。
(6)本研究采用的部分生物技术属于蛋白质工程，理由是______。
A．通过含有双质粒的农杆菌转化棉花细胞
B．将苏云金杆菌 Bt 基因导入棉花细胞中表达
C．将 1-1362 基因序列改变为棉花细胞偏好密码子的基因序列
D．用 1-1362 合成基因序列和 1363-1848 天然基因序列获得改造的抗虫蛋白
{#{QQABAQEl5gAQghRACB6KA0XSCEgQsJASJSoGhVCYKAwCgBFABCA=}#}高二生物半期答案
单选题（每题2分，共40分）
DCCBB DCCCC ABBCB BBCCC
21．（10分，除标注外每空2分）
(1) 稀释涂布平板法（1分） 稀释（1分）
(2) ① （1分） 菌落特征（菌落的形状、大小和颜色等）（1分）
(3) 选择产ε-PL的菌种 增加目的菌数量和生产ε-PL
(4)ABD
22．（12分，除标注外每空2分）
(1) 消毒（1分） 脱分化（1分） X射线
(2)有荧光
(3)杂种细胞由于融合后在细胞核和细胞质的功能上实现互补，使细胞恢复正常分裂 细胞分裂素（1分）
(4) 乙（1分） 甲、丙类型植株细胞的染色体与柴胡细胞中的染色体数目、形态相似，且含有双亲的DNA片段
23．（12分，除标注外每空2分）
(1) 促性腺激素（1分） MⅡ期（1分）
(2)95%空气和5%CO2的混合气体
(3) 桑葚胚（1分） 将内细胞团均等分割（1分）
(4) 分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体 XX、XY或YY
(5)需要将ahESC和另一个精子一起注入一个去核卵细胞中或重构胚必须移植到雌性小鼠体内才能发育为个体
24（12分，除标注外每空2分）
（1）使DNA聚合酶从引物3’端开始连接脱氧核苷酸 （与模板单链结合延伸子链）
（2） EcoRⅠ、BglⅡ或EcoRⅠ、BamHⅠ 避免标记基因被破坏、避免质粒自身环化、避免目的基因反向连接（确保目的基因与质粒正向连接） 3 （1分）
（3）能吸收周围DNA分子的生理状态
（4）便于重组DNA分子的筛选（1分）
25．（14分，除标注外每空2分）
(1) 除去蛋白质杂质 溶解蛋白质等物质，析出不溶于酒精的DNA
(2) PCR技术扩增 （1分） 人工合成（1分）
(3) RNA聚合酶识别并结合的部位（1分） 增强目的基因的表达（1分）
(4)HygBR
(5) F3 （1分） R2（1分）
(6)D成都外国语学校高 2026 届高二下半期考试
生物试题
一、单选题（每题 2分，共 40分）
1．GA3 是一种由 C、H、O 三种元素构成的与赤霉素作用类似的植物生长调节剂，能促进茎伸长和种子萌
发。GA3 的广泛施用会导致其在土壤中残留，研究小组从长期施用 GA3 农田的土壤中筛选出了能降解 GA3
的菌株并调查了土壤中能降解 GA3 的菌的数量，如图所示。下列相关实验内容错误的是（ ）
A．过程②将稀释的含有降解 GA3 的菌株接种到甲瓶培养液中来富集培养 GA3 降解菌
B．乙培养基中应以 GA3 为唯一的碳源，可能还有其他微生物的存在
C．图中 3 号试管中样品液的稀释倍数为 104 倍
D．5 号试管的结果表明每克土壤中的活菌数为 1.7×108 个
2．产黄青霉菌生产青霉素的发酵流程如下图所示，其中“补料”是指补充培养基，其成分有花生饼粉、玉米
浆、葡萄糖、磷酸二氢钠等。下列关于该发酵过程的叙述，错误的是（ ）
A．对产黄青霉菌分离纯化时采用的接种方法是稀释涂布平板法
B．“种母培养”时采用液体培养基有利于增加产黄青霉菌的数量
C．产黄青霉菌为异养厌氧型真菌，添加的磷酸二氢钠具有多种作用
D．向主发酵罐添加 pH 调节液是因为环境条件会影响青霉素的形成
3．紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的二萜类生物碱类化合物，是一种有效的抗癌药物，传统生产方法是从
红豆杉树皮和树叶中提取，下图为利用植物细胞工程生产紫杉醇的流程图，相关叙述正确的是（ ）
A．紫杉醇是植物代谢活动产生的，属于初生代谢物FAFKA=}#
B．①②过程通常采用液体培养基，需要适当强度的光照
C．可利用传代培养的动物癌细胞来检测紫杉醇的效果
D．植物细胞培养的原理是植物细胞具有全能性
4．植物细胞工程在植物繁殖新途径等方面都有广泛的应用，并取得了显著的社会效益和经济效益。下图表示
植物细胞工程应用的相关操作，相关叙述正确的是（ ）
A．A 途径中发生的可遗传变异有基因突变和基因重组
B．经 B 途径得到的大多数植株的隐性性状容易显现
C．D 途径的理论依据是茎尖新生组织具有抗病毒的能力
D．上述应用得到的植株体细胞中的染色体数均相同
5．下图 1 为某单克隆抗体的制备流程，图 2 为图 1 过程②的具体操作。下列相关叙述错误的是（ ）
A．图 1 中制备细胞悬液时可采用机械方法或用胰蛋白酶处理
B．过程②中筛选出的杂交瘤细胞还需要抗原刺激才能产生特异性抗体
C．用多孔玻璃板培养和筛选杂交瘤细胞时，每个孔中尽量只接种 1 个细胞
D．出现阳性反应的原因是抗原与抗体发生了特异性的结合
6．随着动物细胞工程和胚胎工程的迅猛发展，用引进的良种奶牛大量、快速繁殖满足了我国对奶类的大量需
求。下图表示畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，相关分析错误的是（ ）
A．方法 I、Ⅱ获得的胚胎通常需培养至囊胚阶段再移植入 D 牛的子宫内
B．方法 I 中 B 牛的卵子需培育到 MⅡ期才具备与精子受精的能力
C．在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体可作为受精的标志
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D．通过方法 I、Ⅱ培育优良种牛 E 和 F 的本质都是有性生殖
7．CRlaa 和 mCRlaa 是两种早期胚胎培养常用的培养液，这两种培养液中除 NaCl 浓度不同外，其他成分及
浓度均相同。为了比较这两种培养液对体外胚胎培养的差异情况，科研人员进行了相关实验，所得实验结果
如下表所示。下列叙述错误的是（ ）
组别 卵裂数 卵裂率 囊胚数 囊胚率
CRlaa 769 84.9% 189 20.6%
mCRlaa 750 83.7% 252 28.1%
注：卵裂率（%）=卵裂数/卵母细胞总数 x100%。囊胚率（%）=囊胚数/卵母细胞总数 x100%
A．CRlaa 和 mCRlaa 培养液中应含有动物血清 B．mCRlaa 培养液更有利于囊胚发育
C．卵裂期随着细胞数量增加，胚胎的总体积不断增加 D．囊胚期细胞逐渐分化，形成内细胞团和滋养层
8．抗体-药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细
胞的选择性杀伤。ADC 通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，它的作用机制如下图所示。下
列说法错误的是（ ）
A．理论上放射性同位素可以代替 ADC 偶联的药物
B．ADC 进入肿瘤细胞要消耗能量
C．ADC 中的抗体可导致肿瘤细胞凋亡
D．单克隆抗体制备过程中，B 细胞和骨髓瘤细胞
融合后可存在 5 种类型的细胞
9．2023 年 11 月，我国科研人员利用食蟹猴培育出世界首只胚胎干细胞高贡献的活体嵌合猴，该研究部分过
程如图所示，由于供体猴胚胎干细胞在体外培养和妊娠期间高度嵌合于受体胚胎，使得后代活体嵌合猴的各
种组织中，高达 90%的细胞来源于供体胚胎干细胞。下列有关叙述正确的是（ ）
（注：GFP 指表达绿色荧光标记蛋白，可监测供体干细胞的存活情况以及其在嵌合体不同组织中的分化、分
布情况。）
A 代孕雌猴在移植嵌合囊胚前，需要饲喂含促性腺激素的饲料进行同期发情处理．
B．图示过程中涉及动物细胞培养、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等工程技术
C．具有清晰 GFP 信号的囊胚才能被转移至代孕雌猴体内，否则难以获得嵌合猴
D．由图可知，代孕雌猴分娩的嵌合猴体细胞中，核遗传物质的一半来源于代孕雌猴
10．将新鲜猪肝剪碎后加入食盐研磨成匀浆，加入蒸馏水搅拌后再加入 SDS（SDS 能破坏膜结构，使蛋白质
变性，形成 SDS-蛋白复合物）。65℃水浴 10min，经搅拌、过滤获取滤液。向滤液中加入氯化钾溶液，搅拌
混匀后离心，得到 DNA 滤液。取 2 倍滤液体积的 95%乙醇沿着烧杯壁缓慢加入滤液中，静置后得到白色絮
状物。取一部分白色絮状物与双缩脲试剂反应，颜色变化不明显。若上述过程未经氯化钾溶液处理，得到的
白色絮状物用双缩脲试剂鉴定，出现紫色络合物。下列说法错误的是（ ）
A．加入食盐的目的是溶解 DNA 和过滤去除不溶的杂质
B．65℃水浴处理可使蛋白质变性，而 DNA 不降解
C．获取白色絮状物后加入二苯胺试剂，沸水浴加热时即可观察到鉴定结果
D．氯化钾溶液处理可更好地去除 SDS-蛋白复合物
11．下图为不同限制酶的识别序列及切割位点（↓表示切割位点），下列叙述错误的是（ ）
A．用 EcoR I 切割 DNA 分子中部获得一个目的基因时，需断开的磷酸二酯键有 2 个
B．用 Bgl II 切出的目的基因与 BamH I 切割的质粒重组后，则不能再被这两种酶切开
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C．酶切时需要控制好温度、酶浓度、PH 等因素
D．图示 4 种限制酶均不能够识别和切割 RNA 分子内的核苷酸序列
12．目的基因 A 有 100 对碱基，其中腺嘌呤占 30%，现利用目的基因 A 片段两侧的特异性序列设计引物 I、
引物Ⅱ，用 PCR 技术扩增该目的基因，结构如图所示。PCR 扩增共循环 50 次。下列说法错误的是（ ）
A．PCR 仪实质上是一台温度自动调控仪器，循环 50 次理论上复制 50 代
B．含目的基因 A 的 DNA 片段经 PCR 循环 50 次，需要两种引物共 250 个
C．PCR 过程与体内 DNA 复制的方式相同，但是只需要一种酶的参与
D．若只考虑目的基因 A，经 PCR 循环 50 次需要鸟嘌呤(250-1)×40 个
13．实验结果产物能成功检出用阳性（+）表示，无法检出用阴性（-）表示。假阳性是指检查结果是阳性，
但实际是阴性；假阴性则与之相反。某流感患者进行甲型病毒检测，下列可导致假阳性结果的是（ ）
A．抗原检测：单克隆抗体保存温度过高 B．核酸检测：PCR 扩增时所用引物序列过短
C．核酸检测：PCR 扩增时复性温度设置过高 D．核酸检测：病毒发生变异与 PCR 引物不匹配
14．下图为利用奶牛乳腺生物反应器生产人血清白蛋白的过程，有关说法正确的是（ ）
A．步骤①将牛组织置于无菌水中并加入适量的胰蛋白酶处理可得到单细胞
B．步骤②将目的基因与乳腺细胞中基因的启动子重组在一起
C．步骤④常用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程
D．若要获得同卵双胎或多胎，分割原肠胚时需将内细胞团均等分割
15．蛛丝有超强韧性，其主要成分蛛丝蛋白是一种特殊的纤维蛋白，具有独特的结构与性质。科学家将蛛丝
蛋白基因转入羊的乳腺中以生产蛛丝蛋白，下图是蛛丝蛋白基因的 DNA 片段。在基因工程中可通过 PCR 技
术和琼脂糖凝胶电泳技术检测目的基因是否导入受体细胞。下列说法错误的是（ ）
A．PCR 过程中为了减少非特异性扩增，可考虑调节引物长度适当提高退火温度
B．用 PCR 技术扩增图中的蛛丝蛋白基因，可选择图中的引物①和④
C．科学家将蛛丝蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起
D．若电泳结果显示羊体细胞中含有蛛丝蛋白基因，则用抗原-抗体结合法可在其乳汁检测到蛛丝蛋白
16．毛状根是植物感染发根农杆菌（其 T﹣DNA 含有生长素合成基因）后产生的病理结构，在生产某些次生
代谢物方面具有独特的优势。如图为利用植物组织或细胞培养技术进行次生代谢物生产的流程，下列叙述错
误的是（ ）
A．诱导愈伤组织时，在酒精灯火焰旁将外植体的 1/3-1/2 插入培养基
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B．培养体系 1 制备过程中导入外源基因可采用 PEG 介导法或花粉管通道法
C．与培养体系 1 和 2 不同，培养体系 3 的获得不需要添加外源植物激素
D．培养体系 1 和 3 的制备都利用了基因重组原理，且可产生相同代谢产物
17．纤维素酶是一种复合酶，包括 C1 酶、CX 酶和葡萄糖苷酶，前两种酶能使纤维素分解成纤维二糖，第三
种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。科研人员从某菌株中获得了 C1 酶基因，将其与 HT 质粒进行连接，构建基因
表达载体生产高效 C1 酶。过程如图所示，已知 C1 酶基因以 B 链为转录模板链，下列说法错误的是（ ）
A．在含有纤维素的固体培养基中加入刚果红，能形成红色
复合物，滴加适量 C1 酶和 CX 酶后周围会出现透明圈
B．酶切位点 1 加上 SmaI 的识别序列，酶切位点 2 加上
BamHⅠ的识别序列
C．启动子是一段有特殊序列的 DNA 片段，是 RNA 聚合
酶识别和结合的位点
D．基因工程的载体除了质粒外，还可以是噬菌体或动植物
病毒
18.新冠病毒（SARS-CoV-2）S 蛋白的受体结合结构域（RBD）是引导病毒进入宿主细胞的关键结构。我国
科研人员将 GP67 基因（指导合成一段信号肽，引导新合成的蛋白分泌到细胞外）与 RBD 基因融合，构建融
合基因，大量生产 RBD 蛋白，用于制备疫苗，流程见下图。下列相关叙述错误的是（ ）
A．过程①的理论基础是 DNA 具有相同的结构
B．过程②必须将融合基因与载体连接形成基因表达载体才能注射到受精卵内
C．过程③需用 DNA 分子杂交技术检测融合基因是否成功表达
D．过程④可直接从培养液获得 RBD，无需裂解细胞
19．DNA 琼脂糖凝胶电泳是一种分离、纯化或分析 PCR 扩增后的待检 DNA 片段的技术。下列关于核酸片段
的扩增及电泳鉴定的叙述，正确的是（ ）
A．DNA 分子被电泳缓冲液中的核酸染料染成蓝色
B．若要分离较小 DNA 片段，可选择低浓度凝胶
C．电泳后凝胶中的 DNA 能直接在紫外灯下检测到
D．用生理盐水来配制 0.8%~1.2%的琼脂糖溶液
20. 最早的双脱氧测序法是 PCR 反应体系中，分别再加入一种少量的双脱氧腺苷三磷酸（ddATP、ddCTP、
ddGTP 或 ddTTP），子链延伸时，双脱氧核苷三磷酸也遵循碱基互补配对原则，以加入 ddATP 的体系为例：
若配对的为 ddATP，延伸终止；若配对的为脱氧核苷三磷酸（dATP），继续延伸；PCR 产物变性后电泳检
测。通过该方法测序某疾病患者及对照个体的一段序列，结果如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．上述 PCR 反应体系中需加入两种引物
B．电泳时产物的片段越小，迁移速率越慢
C．5′－CTACCCGTGAT－3′为对照个体的一段序列
D．患者该段序列中某位点的碱基 C 突变为 G
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二．填空题
21．ε-聚赖氨酸（ε-PL）能抑制多种微生物的活性，且人体可将其分解为赖氨酸，是一种优良的天然食品防
腐剂。科研人员欲从土壤中分离能分泌 ε-PL 的微生物，做了如图所示的实验（1~V 表示过程，①~③表示菌
落），已知 ε-PL 可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈。
(1)图中第 I 步最常用的接种方法是 。若经第Ⅱ步培养后发现菌落铺满了整个培养基、无法分辨出单菌
落，则应在第 I 步之前 ，再进行接种。
(2)第Ⅲ步接种，应挑选 （①/②/③）号菌落。一般来说，在相同培养条件下，用不同微生物表现出的稳
定的 来判断微生物种类。
(3)本实验中用到了 4 种培养基，其中乙、丁培养基的作用分别是 、 。
(4)为检测上述收集到的 ε-PL 对不同种类微生物的抑制能力，研究人员将大肠杆菌等菌种分别涂布于某培养
基表面，再将浸有不同浓度 ε-PL 的滤纸圆片置于平板培养基表面，培养后测量清晰区（单位：mm）的宽
度，得到了表所示的结果。
ε-PL 浓度/mg·L-1 微生物 20 30 40 50 60 70
大肠杆菌 + + 7.2 10.8 11.6 13.3
沙门氏菌 + + 6.5 9.2 10.9 13.0
酿酒酵母 7.2 9.1 12.6 13.4 14.8 -
红曲霉 + + + + 5.1 6.3
注：“+”表示无清晰区，“-”表示未进行实验。
下列关于上述抑菌实验的叙述，正确的是 。
A．结果显示 ε-PL 对酿酒酵母的抑制作用最强B．ε-PL 对四种微生物的抑制效果与浓度正相关
C．用于实验的培养基应该用液体的选择培养基 D．接种需在超净工作台上酒精灯火焰周围进行
22．不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细
胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴
胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如图所示。请回答下列问题：
（注：X 射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位或染色体消除，使细胞不再持续分裂；碘乙
酰胺处理能使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。）
(1)过程①中需将植物组织经 后接种于 MS 培养基上诱导 过程，产生愈伤组织。对原生质体进行的 A
处理为 。
(2)采用二乙酸荧光素（FDA）法可测定原生质体活力。已知 FDA 本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分
解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过活细胞质膜，会留在细胞内发出荧光。据此分析应选
{#{QQABDQ6t4giQkhTACR5rEwG0CAuQkIGgLYoMgVAcuA5igBFAFKA=}#}
择 __ 的原生质体用于融合。融合前对原生质体在显微镜下用血细胞计数板计数，以确定原生质体密度。
(3)获得的原生质体经诱导融合后，只有异源融合的原生质体可持续分裂形成再生细胞团，原因是 。
过程④再分化阶段，芽的分化要求培养基中 （激素）比例较高。
(4)科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和 DNA 分子标记鉴定，结果如表所示。后代植株
中 类型一定不是所需植株。科研人员推测杂种植株的染色体主要来源于亲本柴胡的染色体，另一方亲本
的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中，而是以 DNA 片段的方式整合进柴胡的基因
组，作出以上推测的依据有 。
后代植株类型 染色体数目、形态 DNA 分子标记鉴定
甲 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲 DNA 片段
乙 12，形态与柴胡染色体相似 无红豆杉 DNA 片段
丙 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲 DNA 片段和新的 DNA 片段
23．中国科学院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小
鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，实验流程如图所示。请回答下列问题：
(1)用 对雌性小鼠进行超数排卵处理可得到大量卵母细胞，受精时的卵母细胞所处的时期
为 。
(2)体外培养动物细胞时，除需要满足无菌、无毒的环境及适宜的营养物质、温度等条件外，还需要满足的气
体条件是 。
(3)为了获得更多甲的后代，在得到的重构胚发育到 或囊胚期时，对其进行分割；在分割囊胚阶段的
胚胎时，应注意 ，否则会影响胚胎的恢复和进一步发育。
(4)卵细胞、精子分别转化为 phESC、ahESC，它们类似于胚胎干细胞，胚胎干细胞具有 的潜能。不
考虑致死情况，得到的孤雄小鼠性染色体组成为 。
(5)据图分析，只依赖雄性小鼠不能得到孤雄小鼠，请写出一个理由： 。
24. 凝乳酶是食品生产中常用的凝结剂，科研人员从动物体内获得了凝乳酶 mRNA，拟利用大肠杆菌通过基
因工程生产凝乳酶。据下图回答下列问题：
（1）利用凝乳酶 mRNA，在逆转录酶的作用下，可以得到凝乳酶的 cDNA，进一步通过 PCR 扩增时需要 2
种引物，引物的作用是_____。
{#{QQABDQ6t4giQkhTACR5rEwG0CAuQkIGgLYoMgVAcuA5igBFAFKA=}#}
（2）图 1 和图 2 是选用的质粒及其几种相关限制酶的识别位点，在构建基因表达载体时，最好选用的限制酶
有_________，这样选择的优点是_____（至少答出两点）。为在凝乳酶基因两侧加上相应的酶切位点，设计引
物时需在引物前添加相应酶切位点，PCR 过程中至少复制_____次可以得到含所需酶切位点的凝乳酶基因。
（3）将构建的重组质粒导入大肠杆菌，需要用钙离子处理，使大肠杆菌处于一种_____。
（4）图 1 中青霉素抗性基因的作用_____。
25．将天然 Ti 质粒改造成含有 Vir 基因的辅助质粒（辅助 T-DNA 转移）和不含有 Vir 基因、含有 T-DNA 的
穿梭质粒，共同转入农杆菌，可提高转化效率。细菌和棉花对密码子偏好不同，为提高翻译效率，增强棉花
抗病虫害能力，进行如下操作。回答下列问题。
注：F1-F3，R1-R3 表示引物；T-DNA-LB 表示左边界；T-DNA-RB 表示右边界；Ori 表示复制原点；KanR 表
示卡那霉素抗性基因；HygBR 表示潮霉素 B 抗性基因。
(1)从苏云金杆菌提取 DNA 时，需加入蛋白酶，其作用是 。提取过程中加入体积分数为 95%的预冷酒
精，其目的是 。
(2)本操作中获取目的基因的方法是 和 。
(3)穿梭质粒中 p35s 为启动子，其作用是 ，驱动目的基因转录；插入两个 p35s 启动子，其目的可能
是 。
(4)根据图中穿梭质粒上的 KanR 和HygBR 两个标记基因的位置，用 基因对应的抗生素初步筛选转化的棉
花愈伤组织。
(5)为检测棉花植株是否导入目的基因，提取棉花植株染色体 DNA 作模板，进行 PCR，应选用的引物是
和 。
(6)本研究采用的部分生物技术属于蛋白质工程，理由是______。
A．通过含有双质粒的农杆菌转化棉花细胞
B．将苏云金杆菌 Bt 基因导入棉花细胞中表达
C．将 1-1362 基因序列改变为棉花细胞偏好密码子的基因序列
D．用 1-1362 合成基因序列和 1363-1848 天然基因序列获得改造的抗虫蛋白

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