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专题七 基因工程及其延伸
——高二生物学浙科版（2019）选择性必修三速练100题
1.通过设计引物，运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变。下图是获取突变基因的过程，其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对，但不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中在目的基因两端的引物中分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。下列有关叙述错误的是( )
A.限制酶a和限制酶b的识别序列应分别增加至引物1和引物2的5'端
B.通过两种限制酶将扩增出的含突变位点的目的基因切割下来有利于其定向插入载体
C.第3轮PCR结束后，两条链完全等长的且含有突变碱基对的DNA分子有1个
D.PCR的一轮循环一般可分为变性、复性、延伸三步，其中延伸的温度高于复性的温度
2.研究人员利用绿色荧光蛋白基因(sGFP)转染大丽轮枝菌，培育表达绿色荧光蛋白的转基因菌株，主要过程如下图所示(图中a链和6链分别是相应基因转录的模板链)。下列说法正确的是( )
A.利用PCR扩增sGFP时需解旋酶打开DNA双链，b链的黏性末端碱基序列(5 →3 )为AGCT
B.应将目的基因插入到复制原点，以保证sGFP基因可以在大丽轮枝菌细胞中表达
C.先将目的基因导入农杆菌，再将农杆菌放置于含有潮霉素的培养基上，筛选出含有目的基因的农杆菌
D.最终通过抗原—抗体杂交技术检测绿色荧光以筛选出绿色荧光蛋白旺盛表达的大丽轮枝菌
3.如图为构建尚麻抗除草剂基因A重组质粒的技术流程,其中Npt Ⅱ基因编码新霉素磷酸转移酶,该酶作用可赋予生物抗卡那霉素的特性,GUS基因表达产物可催化底物呈蓝色。下列说法错误的是( )
A.构建重组质粒时需要的限制酶有Pst I、Xho I和EcoR I
B.在培养基中添加卡那霉素可初步筛选导入重组质粒的农杆菌
C.用农杆菌转化植物愈伤组织,不能选择呈现蓝色的组织进行培养
D.为进一步改良品种,可将启动子替换为除草剂诱导型启动子
4.DNA分子杂交时，常需要大量的单链DNA探针。不对称PCR是一种常见的单链DNA探针制备方法，其原理是反应体系中加入一对数量不相等的引物。假设在PCR反应的早期10个循环中，扩增产物是双链DNA，当较少的限制性引物耗尽后，数量较多的非限制性引物将引导合成大量目标DNA单链。下列说法正确的是( )
A.若A链为所需的DNA分子探针，则非限制性引物应选用引物Ⅲ
B.进行最初10个循环的目的是为了将限制性引物消耗完，以保证获得大量的单链DNA探针
C.设计较长的限制性引物与较短的非限制性引物，以便于后阶段通过提高温度来控制产物生成量
D.如果体系中原模板DNA的数量为a，共进行25次循环，则最终获得的单链探针数为15×210a
5.科学家将某病毒抗原蛋白的部分编码序列(RBD)拼接成融合基因2RBD和3RBD,探究RBD的二聚体蛋白和三聚体蛋白能否模拟RBD的天然构象并获得高效免疫原性。为鉴定重组质粒是否构建成功,将重组质粒用Nco Ⅰ和Sac Ⅰ双酶切处理后电泳,结果如图,其中泳道1为双酶切pNZ8149-2RBD的结果,两个条带大小分别为2507bp和2020bp。将构建好的重组质粒分别导入工程菌中进行表达产物的检测。下列说法错误的是( )
A.PCR扩增融合基因时,需在融合基因的两端添加限制酶Nco I和Sac I的识别序列
B.据图可知,融合基因3RBD的长度为3173bp
C.泳道2呈现一个条带的原因可能是酶切pNZ8149-3RBD产生的两个片段大小相近
D.从工程菌细胞表面提取蛋白质进行检测,从而进一步比较两者的免疫原性
6.下列关于基因工程应用的叙述，错误的是( )
A.科学家利用转基因技术抑制乙烯形成酶的活性和乙烯的生成量，从而延长番茄的储藏时间
B.将某些抗病毒的基因导人动物体内，使获得的转基因动物能抵抗相应病毒
C.抗虫基因只要成功地插入到植物细胞的染色体DNA上就能正常表达
D.可利用基因工程菌大规模生产细胞因子、抗体、疫苗、激素等医药产品
7.科学家将鼠抗人大肠癌单克隆抗体基因（ND-1）与酵母胞嘧啶脱氨酶基因（CD）融合，在大肠杆菌中成功地表达了单链抗体与酶的融合蛋白，这类蛋白的疗法称为由抗体介导的酶解前药疗法（ADEPT）。ND-1—CD融合基因的构建方法如图所示。下列有关叙述不合理的是( )
A.图中两条杂交链的获得至少需要经过2次扩增循环
B.图中杂交链延伸生成ND-1——CD融合基因的过程应不用加入引物
C.获得的融合基因在构建好基因表达载体后可直接被正常状态的大肠杆菌吸收
D.该融合蛋白应是利用抗体部分特异性的识别人大肠癌细胞并将酶带到靶部位
8.天然胰岛素易形成二聚体，使得其疗效被延缓。科研人员通过蛋白质工程使胰岛素第28位的脯氨酸替换为天冬氨酸，从而抑制了胰岛素的聚合，由此研发出的速效胰岛素类似物产品已经在临床上广泛应用，以下叙述错误的是( )
A.改造胰岛素的过程实际是改造胰岛素基因的过程
B.若要改变蛋白质的功能，可通过改进蛋白质的氨基酸序列实现
C.可将定点突变技术获得的新的胰岛素基因直接导入大肠杆菌用于发酵生产
D.在通过蛋白质工程对胰岛素改造的过程中，对蛋白质分子结构的了解是非常关键的
9.我国科学家构建了B型血友病（由编码某种凝血因子的F基因发生碱基的替换导致）模型鼠，尝试对模型鼠进行基因治疗，并测定凝血时间，结果如图所示。下列分析错误的是( )
A.A组作为空白对照组，应选择健康鼠
B.基因治疗模型鼠完全恢复凝血能力
C.治疗中可能运用了基因编辑技术
D.设置B型血友病模型鼠组可判断基因治疗效果
10.腈水合酶（N0）广泛应用于环境保护和医药原料生产等领域，但不耐高温。利用蛋白质工程技术在N0的α和β亚基之间加入一段连接肽，可获得热稳定的融合型腈水合酶（N1）。下列有关叙述错误的是( )
A.N1与N0氨基酸序列的差异是影响其热稳定性的原因之一
B.加入连接肽需要通过改造基因实现
C.获得N1的过程需要进行转录和翻译
D.检测N1的活性时先将N1与底物充分混合，再置于高温环境
11.已知生物体内有一种转运蛋白Y，如果将蛋白Y中某一个氨基酸替换，改变后的蛋白质Y1不但保留了蛋白Y原有的功能，而且具备了酶的催化功能。下列说法正确的是( )
A.蛋白质工程和基因工程的根本区别是操作对象的差异
B.可以通过对Y蛋白基因改造或人工合成获得Y1蛋白基因
C.蛋白质工程操作过程中，不需要酶和载体
D.细胞内合成Y1蛋白与Y蛋白的过程中，遗传信息的流向是相反的
12.基因工程与蛋白质工程的区别是( )
A.基因工程需对基因进行分子水平操作，蛋白质工程不对基因进行操作
B.基因工程合成的是天然存在的蛋白质，蛋白质工程合成的不一定是天然存在的蛋白质
C.基因工程是分子水平操作，蛋白质工程是细胞水平（或性状水平）操作
D.基因工程完全不同于蛋白质工程
13.视网膜感光细胞中的R蛋白由R基因编码，在视觉形成过程中有重要作用。为研究R蛋白的功能,科研人员利用基因工程获得R基因敲除的小鼠,并进行了相关实验。科研人员利用打靶载体敲除小鼠R基因，载体构建及R基因敲除过程如图所示。
（1）为构建能够敲除R基因的打靶载体,需先设计引物，通过______技术扩增R基因。在引物上添加Pst Ⅰ限制酶识别序列，据图分析应选择的引物是____（从图中a~d选填）。将得到的PCR产物酶切后连入打靶空载体，鉴定正确后进行后续实验。
（2）为将抗生素抗性基因neo（表达产物可以抵抗抗生素G418）从原有载体中切下以插入到R基因中，据图及下表中限制酶识别位点序列信息，应选择限制酶______分别对R基因和neo基因进行酶切，并用______连接,完成打靶载体构建。
限制酶 Kpn Ⅰ Mfe Ⅰ Hind Ⅲ EcoR Ⅰ BamH Ⅰ
识别序列及切割位点
（3）将构建好的打靶载体通过_____法导入小鼠受体细胞中，受体细胞基因组DNA中的R基因通过交换被替换为打靶载体上插入neo基因的R基因片段。打靶载体也可能整合到受体细胞基因组DNA的其他部位，引发TK基因表达，使细胞在加入物质G的培养基上无法存活。在选择培养基中除有动物细胞培养的必需成分外，还需加入______和物质G,可做出成功敲除R基因的受体细胞，其原因是_________。
答案以及解析
1.答案：C
解析：AB、由于PCR扩增的方向是5'→3'，如果要将相应的识别序列增加至扩增的DNA中，且最终可以通过限制酶a和限制酶b从两端将目的基因切割下来，应当将相应的序列增加至引物的5′端，用两种限制酶分别切割含有目的基因的DNA片段和载体能够保证目的基因与载体的正确连接，A正确，B正确；C、3轮循环结束，含有突变碱基对的且两条链完全等长的DNA分子有2个（可以画出第二轮循环结束后的所有的DNA分子的情况，再通过观察得出该结果），C错误；D、复性的温度约为50℃，而延伸的温度约为70℃，D正确。故选C。
2.答案：C
解析：利用PCR扩增sGFP时，高温可将DNA双链打开，A项错误；启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，终止子是使转录终止的序列，而目的基因不携带启动子和终止子，所以将sGFP插入到构巢曲霉启动子和终止子之间的目的是保证sGFP能在大丽轮枝菌细胞中表达，B项错误；先将目的基因导入农杆菌，再将转化后的农杆菌放置于含有潮霉素的培养基上，筛选出含有目的基因的农杆菌，C项正确；转基因成功的标志是形成目的基因的产物，最终可通过检测大丽轮枝菌菌丝细胞中绿色荧光强度，筛选出绿色荧光蛋白旺盛表达的大丽轮枝菌，绿色荧光可以直接观察到，不用通过抗原—抗体杂交技术，D项错误。
3.答案：A
解析：
由图分析可知,构建重组质粒时需要的限制酶有Pst I、Xho I、Hind Ⅲ(或BamH I)和EcoR I,A错误;由题图可知,在构建重组质粒时,质粒中的Pst Ⅱ基因保留下来作为标记基因,GUS基因被切除,因此在培养基中添加卡那霉素可初步筛选导入重组质粒的农杆菌,B正确;构建重组质粒时,GUS基因被切除,无法使细胞中底物呈蓝色,呈现蓝色的组织说明细胞中含有GUS基因,则该细胞中导入的是不含目的基因的空白质粒,因此不能选择呈蓝色的愈伤组织进一步培养,C正确;启动子若为除草剂诱导型启动子,则在无除草剂的环境中A基因不表达,在有除草剂的环境中A基因可表达,将减少细胞物质和能量浪费,D正确。
4.答案：D
解析：A、由于DNA聚合酶只能从3'端延伸DNA链，引物Ⅱ和Ⅲ不能作为扩增探针序列的引物，据题干信息“数量较多的非限制性引物将引导合成大量目标DNA单链”可知，若A链为所需的DNA分子探针，即目标DNA单链，则则非限制性引物应选用引物Ⅳ，A错误；B、进行最初10个循环的目的是增加模板DNA的量，以便后期更快得到较多数量的目标DNA单链（单链DNA探针），B错误；C、引物越短，复性时可与模板链形成的氢键数越少，越容易被高温破坏，因此可设计较短的限制性引物与较长的非限制性引物，适当提高复性温度以避免残留限制性引物与模板结合，从而提高产物生成量，C错误；D、如果体系中原模板DNA的数量为a，最初10次循环产物为双链DNA分子为210×a个，其中有B链为210×a个，以这些链为模板，利用引物又进行了15次循环，每次循环生成的都是A链，不改变B链的数目，即B每次循环开始都是210×a个，15次循环每次生成A也是210×a个，故最终获得的单链探针数共为15×210×a个，D正确。故选D。
5.答案：B
解析：由题图可知,质粒pNZ8149的启动子和终止子之间有Nco I和Sac I的酶切位点,为将2RBD与3RBD正确连入该质粒,PCR扩增融合基因(2RBD与3RBD)时, 在融合基因的两端需添加限制酶Nco I和Sac I的识别序列,A正确。
若pNZ8149-3RBD构建成功,双酶切后得到两个条带,一个为3RBD条带,大小为2686bp,一个为缺少Nco I和Sac I酶切位点之间片段的pNZ8149条带,大小为2507bp,这两个条带大小相近,电泳后条带会离得很近,视觉上呈现出一个条带,C正确。根据题目信息可知,该实验的目的是“探究RBD的二聚体蛋白和三聚体蛋白能否模拟RBD的天然构象并获得高效免疫原性”,U-M为信号肽-细胞壁锚定蛋白序列,据图可知,RBD与U-M相连,翻译后,RBD二聚体和三聚体蛋白会随信号肽-细胞壁锚定蛋白序列一起锚定在细胞壁,因此可以从工程菌细胞表面提取蛋白质进行检测,从而进一步比较两者的免疫原性,D正确。
6.答案：C
解析：抗虫基因即使成功插入到植物细胞的染色体DNA上也不一定能成功表达，C错误。
7.答案：C
解析：A、经过一次循环得到的杂交链，引物2端和引物3端都为相应链的5 '端，不可直接延伸子链，为了使杂交链顺利延伸子链，至少需要经过2次循环才能得到如图所示的引物2端和引物3端都为相应链的3 '端杂交链，A正确；B、杂交链延伸生成ND-1——CD融合基因的过程中，不需要加入引物，两条母链的起始位置的碱基序列即为引物，可以作为子链合成的引物，为DNA聚合酶提供3'端，B正确；C、需要利用氯化钙处理大肠杆菌获得感受态细胞，获得的融合基因在构建好基因表达载体才能更好的被大肠杆菌吸收，C错误；D、抗体可以特异性识别抗原成分，故该融合蛋白应是利用抗体部分特异性的识别人大肠癌细胞并将酶带到靶部位，D正确。故选C。
8.答案：C
解析：A、蛋白质工程最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成，即改造胰岛素的过程实际是改造胰岛素基因的过程，A正确；B、蛋白质结构多样性的直接原因构成蛋白质的氨基酸的种类、数目、排列顺序和肽链的空间结构千差万别，结构决定功能，因此若要改变蛋白质的功能，可通过改进蛋白质的氨基酸序列实现，B正确；C、将改造后获得的速效胰岛素基因直接导入大肠杆菌，没有进行基因表达载体的构建，目的基因在受体细胞中可能无法复制、表达，C错误；D、蛋白质工程的基本途径是预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因），因此在通过蛋白质工程对胰岛素改造的过程中，对蛋白质分子结构的了解是非常关键的，D正确。
故选C。
9.答案：B
解析：A、基于实验的对照原则，A组作为空白对照组，应选择健康鼠，A正确；
B、与B型血友病模型鼠相比，基因治疗模型鼠的凝血时间显著缩短，但略长于健康鼠的凝血时间，因此基因治疗模型鼠能部分恢复凝血能力，B错误；
C、B型血友病是由编码某种凝血因子的F基因发生碱基的替换导致的，因此可采用基因编辑技术对B型血友病模型鼠的异常F基因进行定点“修改”，C正确；
D、设置B型血友病模型鼠组与基因治疗模型鼠组对照，可判断基因治疗效果，D正确。
故选B。
10.答案：D
解析：在N0的和β亚基之间加入一段连接肽，可获得热稳定的融合型腈水合酶（N1），推测N1与N0氨基酸序列的差异是影响其热稳定性的原因之一，A正确；
蛋白质工程的作用对象是基因，即加入连接肽需要通过改造基因实现，B正确；
N1为蛋白质，蛋白质的合成需要经过转录和翻译两个过程，C正确；
为保证实验结果的准确性，检测N1的活性时应先将其置于高温环境，再与底物充分混合，D错误。
11.答案：B
解析：蛋白质工程和基因工程的根本区别是蛋白质工程可制造出自然界没有的蛋白质，A错误；可以通过对Y蛋白基因改造或人工合成获得Y1蛋白基因，B正确；蛋白质工程操作过程中，需要酶和载体作为工具，C错误；细胞内合成蛋白Y1与蛋白质Y的过程中，遗传信息的流向是相同的，D错误。
12.答案：B
解析：基因工程和蛋白质工程均是对基因进行操作，都是分子水平上的操作，A、C错误。基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，蛋白质工程可以合成非天然存在的蛋白质，B正确。基因工程是将一种生物的基因转移到另一种生物体内，产生它本不能产生的蛋白质，进而表现出新的性状，但原则上只能生产自然界已存在的蛋白质；蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过改造或合成基因，来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，蛋白质工程不完全等同于基因工程，蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，D错误。
13.答案：（1）PCR；a和d
（2）EcoR Ⅰ和Mfe Ⅰ（顺序不可颠倒）；DNA连接酶
（3）显微注射；G418；敲除R基因的受体细胞基因组DNA含有neo基因，无TK基因，使其具有G418抗性，且可在含物质G的培养基上存活
解析：（1）常用PCR技术特异性地快速扩增目的基因；DNA聚合酶只能从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸，且限制酶Pst Ⅰ的识别序列应添加在引物的5'端，所以应选择的引物是a和d。
（2）由题图可知，R基因内部有Hind Ⅲ、EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ的识别位点，因此切割R基因必须在这三种限制酶之间选择；neo基因两侧具有Mfe Ⅰ和Kpn Ⅰ的识别序列，切割neo基因只能在这两种限制酶之间选择，根据表中各种限制酶的识别序列可知，只有Mfe Ⅰ与EcoR Ⅰ切割得到的黏性末端相同，因此可用EcoR Ⅰ切割R基因，用Mfe Ⅰ切割neo基因，得到相同黏性末端之后再用DNA连接酶将二者连接，完成打靶载体构建。
（3）将目的基因（构建好的打靶载体）导入动物细胞（小鼠受体细胞）时，常用显微注射常专点法；将打靶载体导人受体细胞后，打靶载体上插入neo基因的R基因与受体细胞基因组DNA中的R基因发生交换，从而实现了基因之间的替换。打靶载体也可能整合到受体细胞基因组DNA的其他部位，引发TK基因表达，使细胞在加入物质G的培养基上无法存活。在选择培养基中除有动物细胞培养的必需成分外，还需加入G418和物质G，可筛选出成功敲除R基因的受体细胞，其原因是敲除R基因的受体细胞基因组DNA含有neo基因，无TK基因，使其具有G418抗性，且可在含物质G的培养基上存活。专题四 植物细胞工程
——高二生物学浙科版（2019）选择性必修三速练100题
1.许多植物病毒的衣壳蛋白和酶系统在高温（35~45℃）下会发生变性。在通过组织培养生产切花菊脱毒苗的过程中，常取高温处理后的切花菊茎尖分生区为外植体。下列叙述错误的是( )
A.选取茎尖分生区为外植体是因为其中病毒含量低
B.高温处理的主要目的是使组织中的病毒失去活性
C.高温处理后的外植体接种前不需再进行消毒处理
D.再分化过程通常需要给予适当时间和强度的光照
2.图示植物原生质体制备、分离和检测的流程。下列相关叙述正确的是( )
A.步骤①添加盐酸以去除细胞壁
B.步骤②吸取原生质体放入无菌水中清洗
C.原生质体密度介于图中甘露醇和蔗糖溶液密度之间
D.台盼蓝检测后应选择蓝色的原生质体继续培养
3.下图为培育甘蔗脱毒苗的两条途径，研究发现经②过程获得的幼苗脱毒效果更好。下列叙述正确的是( )
A. 带叶原基的芽与植物体其他组织中的病毒含量相同
B. 可推测②过程的温度处理有利于组织中的病毒失去活性
C. 过程③、④均属于再分化，所以培养基A和B各成分含量相同
D. 图中获得的脱毒苗与原甘蔗苗相比细胞核遗传物质发生了改变
4.鱼腥草中的次生代谢物一一萜类物质具有抗过敏作用，可用于治疗过敏性荨麻疹。通过植物细胞产物的工厂化生产，可大量获取鱼腥草细胞中的萜类化合物。下列说法错误的是( )
A.题中所述的萜类物质不是鱼腥草基本的生命活动所必需的
B.细胞产物的工厂化生产是为了提高单个细胞中萜类物质的含量
C.培养过程中所用的外植体一般取自鱼腥草的分生区
D.植物细胞培养的方式几乎不受季节、天气等因素的限制
5.下列关于植物愈伤组织的说法错误的是( )
A.用果胶酶和纤维素酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体
B.融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织
C.体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的2个细胞核
D.通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程属于无性繁殖
6.科研人员以携带葡萄灰比诺病毒的“阳光玫瑰”葡萄为材料,研究了外植体取材部位、光照处理和热处理方式对脱除病毒的影响,结果如下表所示相关叙述错误的是( )
组号 温度/光照+温度/黑暗 接种部位 存活率/% 株系脱毒率/%
1 38℃/16h+38℃/8h 茎尖 50.00 -
2 同上 第1腋芽 33.33 -
3 同上 第2腋芽 0 -
4 38℃/8h+32℃/8h 茎尖 88.89 100.00
5 同上 第1腋芽 94.44 100.00
6 同上 第2腋芽 94.44 83.33
A.接种前不应对外植体进行消毒,以免干扰各处理条件下的株系脱毒率
B.茎尖和第1、2腋芽都含有顶端分生组织,因此可以作为脱毒材料
C.研究人员未检测1~3组株系脱毒率的原因可能是该条件下外植体存活率较低
D.生产中应选择38℃/8h光照+32℃/8h黑暗处理,以第1腋芽为外植体进行脱毒
7.花椰菜(2n=18)易患黑腐病,而黑芥(2n=16)则有较好的黑腐病抗性.下图是科研人员培育具有黑腐病抗性的花椰菜植株m、n、s的过程,植株m、n、s均含有花椰菜的全部染色体下列叙述错误的是( )
A.①过程需用酶解法处理花椰菜和黑芥的细胞,并需检验得到的原生质体是否具有活力
B.对黑芥进行紫外线处理可能会使黑芥细胞发生染色体变异
C.②过程是植物组织培养,需在适宜条件下进行,杂种植株均为二倍体
D.③过程需接种黑腐病菌从而筛选获得具有黑腐病抗性的植株m、n、s
8.某小组以拟南芥原生质体为材料，研究了生长素（IAA）、组蛋白乙酰化及R基因对原生质体形成愈伤组织的影响。野生型（WT）和R基因突变型（rr）的原生质体分别经下表不同条件培养相同时间后，检测培养材料中R基因表达量，并统计愈伤组织形成率，结果如图所示。据此推断，下列叙述正确的是( )
编号 原生质体 培养条件
① WT 培养基
② WT 培养基+合适浓度的IAA
③ rr 培养基
④ rr 培养基+合适浓度的IAA
⑤ WT 培养基+组蛋白乙酰化抑制剂
A.组蛋白乙酰化有利于WT原生质体形成愈伤组织
B.R基因通过促进IAA的合成提高愈伤组织形成率
C.组蛋白乙酰化通过改变DNA碱基序列影响R基因表达量
D.若用IAA合成抑制剂处理WT原生质体，愈伤组织形成率将升高
9.狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉,其产生的黄酮类化合物可入药。由于狼爪瓦松野生资源有限,难以满足市场化需求,因此,目前一般通过植物细胞工程手段进行培养,具体过程如图所示,其中的数字序号代表处理或生理过程。下列叙述错误的是( )
A.所得三种植株中乙和丙的遗传物质与甲相同,植株丁和甲是同一物种
B.该培养过程中愈伤组织细胞的分裂能力最强、分化程度最低、细胞全能性最高
C.③可先诱导生芽再诱导生根,该再分化过程需要光照
D.黄酮类化合物可以通过植物细胞培养获得,即通过⑥愈伤组织细胞悬浮培养获得
10.青枯病是一种严重危害马铃薯的病害，茄子对青枯病具有一定抗性。研究者通过植物体细胞杂交技术培育抗青枯病的马铃薯新品种，在获得的90个杂种植株中，有6个具有明显的青枯病抗性。下列相关叙述错误的是( )
A.可以通过电融合法、高Ca2+—高pH融合法等诱导马铃薯与茄子的原生质体融合
B.杂种细胞中来自茄子的染色体随机丢失可以用来解释并非所有杂种植株均抗青枯病
C.植物体细胞杂交技术依赖细胞膜的流动性,没有体现细胞的全能性
D.茄子和马铃薯之间存在生殖隔离，不能采用杂交育种的方法来培育抗青枯病马铃薯
11.科学家利用马铃薯和西红柿叶片分离原生质体并进行细胞杂交，最终获得了杂种植株，相关过程如下图所示。有关分析正确的是( )
A.上述过程中包含了有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程
B.可根据是否发生质壁分离现象鉴别杂种细胞的细胞壁是否再生
C.过程①应将叶片上表皮向上，置于含纤维素酶和果胶酶的低渗溶液中
D.⑤进行脱分化和再分化过程，杂种植株一定具有马铃薯和西红柿的优良性状
12.黑腐病是花椰菜的主要病害，研究人员将花椰菜与抗黑腐病的黑芥进行体细胞杂交，获得了多种性状介于花椰菜和黑芥之间的杂种植株，并进一步筛选出抗病的优良品种。下列有关叙述错误的是( )
A.在体细胞杂交之前，需先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁
B.花椰菜细胞与黑芥细胞的细胞核融合标志着体细胞杂交成功
C.杂种植株出现多种性状并能抗病的原因源于其获得了双亲的遗传物质
D.某些杂种植株不抗病可能是因为基因之间相互影响，导致抗病基因无法表达
13.如图为利用某种低产耐酸植物甲（4N）和高产不耐酸植物乙（2N），培育高产耐酸植物丙的过程。请回答下列问题。
（1）植物丙的体细胞中有_____个染色体组，为筛选出耐酸的植物丙'，过程③所用的固体培养基需__________。
（2）通过单倍体育种技术，也可以利用上述低产耐酸植物甲（4N）和高产不耐酸植物乙（2N）培育出高产耐酸的新品种丁。如表是相关实验步骤，请根据题意完成表格。
实验目的 步骤要点
收集花粉 ①将甲和乙进行______后培养获得植株，收集其花粉
获得可增殖分化的细胞 ②利用______技术中的脱分化过程，获得______
诱导单倍体幼苗的形成 ③通过改变培养基中的______，诱导分化
获得染色体加倍的植株 ④用______处理单倍体幼苗
获得新品种丁 筛选符合要求的植株，收获其所结种子
答案以及解析
1.答案：C
解析：A、植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒，所以切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗，A正确；
B、高温处理的主要目的是使组织中的病毒失去活性，有利于获得脱毒苗，B正确；
C、高温处理后的外植体接种前需再进行消毒处理，否则会引起杂菌污染，C错误；
D、脱分化过程不需要光照条件，再分化过程通常需要给予适当时间和强度的光照，D正确。
故选C。
2.答案：C
解析：A、步骤①添加纤维素酶或果胶酶去除细胞，其原理是酶的专一性，A错误；
B、步骤②吸取原生质体放入等渗液中清洗，否则会导致原生质体吸水涨破，B错误；
C、结合图示可知原生质体处于甘露醇和蔗糖溶液之间，因而可推测原生质体的密度介于图中甘露醇和蔗糖溶液密度之间，C正确；
D、台盼蓝检测后应选择无色的原生质体继续培养，染成蓝色的原生质体活性差或死亡，D错误。
故选C。
3.答案：B
解析：A、带叶原基的芽几乎不含病毒，故与植物体其他组织中的病毒含量不同，A错误；B、经过热水处理脱毒效果好与阻碍病毒进入有关，其作用是使组织中的病毒在图中处理温度下部分或全部失活，B正确；C、过程③、④所用培养基中生长素和细胞分裂素的含量和比例不同，C错误；D、上图中脱毒苗的培育过程采用了植物组织培养技术，其体现了植物细胞的全能性，遗传物质不会改变，D错误。故选B。
4.答案：B
解析：题中所述的萜类物质属于次生代谢物，而次生代谢物一般认为不是植物基本的生命活动所必需的，A正确；细胞产物的工厂化生产一般是为了提高细胞整体萜类物质的含量，而不是为了提高单个细胞中萜类物质的含量，B错误；在植物细胞培养中，通常会选择分化程度低、分裂能力强的分生组织作为外植体，C正确；植物细胞培养的方式几乎不受季节、天气等因素的限制，D正确。
5.答案：C
解析：愈伤组织的细胞壁主要由纤维素和果胶组成，可以用纤维素酶和果胶酶去除愈伤组织的细胞壁，A正确。融合的原生质体再生出细胞壁标志着原生质体融合完成，之后才能形成愈伤组织，B正确。体细胞杂交获得的杂种植株细胞中只有一个细胞核，C错误。通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程没有生殖细胞的参与，属于无性繁殖，D正确。
6.答案：A
解析：植物组织培养中外植体发育为完整植株必须要有严格的无菌条件,故接种前应对外植体进行消毒,A错误；茎尖和第1、2腋芽都含有顶端分生组织,病毒极少甚至无病毒,因此可以作为脱毒材料,B正确；分析表格可知,1~3组未检测株系脱毒率,可能因为在38℃/16h光照+38℃/8h黑暗条件下外植体存活率较低,C正确；分析表格可知,在38℃/8h光照+32℃/8h黑暗条件下,第1腋芽为外植体进行接种时存活率和株系脱毒率均较高,因此生产中应选择38℃/8h光照+32℃/8h黑暗处理,以第1腋芽为外植体进行脱毒,D正确。
7.答案：C
解析：植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,①过程需用果胶酶和纤维素酶处理去除细胞壁,得到原生质体并需检验得到的原生质体是否具有活力,A正确；由获得的植株m、n、s的染色体条数可知,来自黑芥的染色体余数分别为2、7、3,黑芥的其他染色体可能在紫外线处理中被破坏掉,因此对黑芥进行紫外线处理会使黑芥细胞发生染色体变异,B正确;②过程是植物组织培养,需在适宜条件下培养才能获得杂种植株,获得的杂种植株有来自黑芥的染色体,因此杂种植株可能并非含有两个染色体组,即并非都是二倍体,C错误;③过程需接种黑腐病菌,筛选获得具有黑腐病抗性的植株m、n、s,D正确。
8.答案：A
解析：①和③进行对比可以看出R基因表达量高，愈伤组织形成率高，①和⑤对比，使用组蛋白乙酰化抑制剂之后，R基因的表达量下降，愈伤组织的形成率也会降低，因此推测组蛋白乙酰化有利于WT原生质体形成愈伤组织，A正确；
①②对比，②R基因相对表达量和愈伤组织形成率均高于①，③④对比，R基因相对表达量和愈伤组织形成率增均较低且相同，说明IAA通过促进R基因表达提高愈伤组织形成率，B错误；组蛋白乙酰化属于表观遗传，不改变DNA碱基序列，C错误；①和②对比可以看出，IAA能够促进愈伤组织的形成，因此若用IAA合成抑制剂处理WT原生质体，愈伤组织形成率将降低，D错误。
9.答案：A
解析：植株丙经历了诱变处理，发生了突变，其遗传物质与甲不同，A错误；高度分化的植物组织或细胞通过脱分化产生愈伤组织，图示培养过程中愈伤组织细胞的分裂能力最强、分化程度最低、细胞全能性最高，B正确；③表示再分化形成芽、根的过程，该过程需要光照，C正确；分析题图可知，⑥表示植物细胞培养的过程，将愈伤组织细胞悬浮培养，可以获得细胞代谢产物黄酮类化合物， D正确。
10.答案：C
解析：促进植物原生质体融合的方法有电融合法、高Ca2+—高pH融合法等，A正确；茄子对青枯病具有一定抗性，说明其细胞内含有抗该病的基因，但在获得的90个杂种植株中，只有6个具有明显的青枯病抗性，说明可能杂种细胞中来自茄子的染色体随机丢失，导致并非所有杂种植株均抗青枯病，B正确；植物体细胞杂交首先要使原生质体融合形成杂种细胞，其次要利用植物组织培养技术把杂种细胞培育成杂种植株，原生质体融合的原理是细胞膜具有一定的流动性，植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，C错误；茄子和马铃薯属于不同的物种，两者之间存在生殖隔离，不采用杂交育种的方法培育抗青枯病马铃薯，D正确。
11.答案：B
解析：A、该过程不涉及有性生殖，因此不包括减数分裂，A错误；B、融合后的杂种细胞再生出新的细胞壁是原生质体融合完成的标志，故可利用质壁分离现象鉴定细胞壁是否再生，B正确；C、应将叶片下表皮的一面朝下（能与溶液接触），原生质体没有细胞壁，为避免原生质体吸水涨破，将叶片置于等渗或略高渗溶液中，C错误；D、由于基因的选择性表达，获得的杂种植株不一定能够表现亲本的优良性状，如番茄-马铃薯杂种植物，地上没有接番茄，地下也没有长马铃薯，D错误。故选B。
12.答案：B
解析：A、植物细胞外面有一层细胞壁，这层细胞壁阻碍着细胞间的杂交。因此，在进行体细胞杂交之前，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除这层细胞壁，获得原生质体，A正确；B、杂种细胞细胞壁的再生，标志体细胞杂交成功，B错误；C、通过植物体细胞杂交获得的杂种植株含有两个物种的遗传物质，获得了多种性状并能抗病，C正确；D、生物基因的表达不是孤立的，它们之间是相互调控、相互影响的，导致某些杂种植株的抗病基因没有表达而不抗病，D正确。故选B。
13.答案：（1）6；将pH调整为酸性
（2）①植物体细胞杂交；②花药离体培养（或植物组织培养）；愈伤组织；③生长素和细胞分裂素的比例；④一定浓度的秋水仙素（或低温）
解析：（1）植物丙是植物甲和乙通过体细胞杂交技术形成的杂种植株，为异源多倍体，根据题意可知，低产耐酸植物甲（4N）体细胞中有4个染色体组，高产不耐酸植物乙（2N）体细胞中有2个染色体组，因此植物丙的体细胞中有6个染色体组。植物丙有耐酸的特性，因此过程③所用的固体培养基需将pH调整为酸性。
（2）利用低产耐酸植物甲（4N）和高产不耐酸植物乙（2N）培育出高产耐酸的新品种丁，需要先将两种植物的优良性状集中到一个个体上。①由于两种植物存在生殖隔离，因此不能进行有性杂交，故可将甲和乙细胞通过植物体细胞杂交技术获得植株，收集其花粉；②再利用花药离体培养技术培养花粉，经过脱分化过程形成愈伤组织；③由于植物组织培养的不同阶段需要的生长素和细胞分裂素的比例不同，因此通过改变培养基中的生长素和细胞分裂素的比例，诱导分化；④最后用一定浓度的秋水仙素（或低温）处理单倍体幼苗专题二 微生物的分离与纯化
——高二生物学浙科版（2019）选择性必修三速练100题
1.如下图为研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的意图，有关叙述不正确的是( )
A.步骤③纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散，以获得单细胞形成的菌落
B.配制步骤②、③的培养基都要进行严格灭菌
C.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力
D.步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
2.菌落总数可作为判定食品被污染程度的标志，稀释涂布平板法是基于一个菌落代表一个活菌。计算时取菌落数30～300的培养皿作为菌落总数的测定标准。当只有一个稀释浓度的平均菌落数符合此范围，以该培养皿菌落数×稀释倍数报告。当有两个浓度菌落值在30～300之间，报告结果由二者菌落数比值决定，若比值不大于2，则取平均数，且菌落数大于100取两位有效数字，两位之后的数值四舍五入；若比值大于2，则报告稀释度较低（稀释次数越多，稀释度越高）的培养皿菌落数。下表中例次2、3中“？”处的菌落总数为( )
例次 不同稀释度平均菌落数 两稀释度菌落数之比 菌落总数/［CFU/mL（g）］
10-1 10-2 10-3
1 1365 164 20 — 16400
2 2760 295 46 1.6 ？
3 2890 271 60 2.2 ？
A.29500和27100 B.38000和6000
C.38000和27100 D.29500和165500
3.圆褐固氮菌是一种异养型自生固氮细菌，能够在土壤中独立固定氮气。科研人员进行了土壤中圆褐固氮菌的分离、计数和鉴定，并将之用于农业生产。下列说法正确的是( )
A.选择培养圆褐固氮菌的培养基不需要加碳源和氮源
B.为促进圆褐固氮菌的生长，需将培养基pH调至酸性
C.通过计算可知每克土壤中的固氮菌数约为1.8×108个
D.将种子与自生固氮菌拌种后播种，可减少化肥使用
4.某生物兴趣小组从附近农田进行土壤取样，并对土壤中的尿素分解菌进行分离计数。同学甲从稀释倍数为104的培养基中筛选出约350个菌落，而其他同学只筛选出约50个菌落。下列相关叙述错误的是( )
A.同学甲在实验操作过程中可能因操作不当造成培养基的污染
B.同学甲出现这种结果可能是和其他同学取样的土壤不同
C.若同学甲的操作没有问题，则可能是稀释倍数太低导致
D.其他同学土样的细菌悬液中尿素分解菌的数量约为5×105个/mL
5.从自然界中筛选具有优良性状的菌种的一般步骤为：采集样品→富集培养（使菌体数量增多）→纯种分离→性能测定，若取10g土样加入90ml无菌水，摇匀后取1ml上清液加入盛有9ml无菌水，依次等比稀释。采用两种接种方法接种后纯化培养的效果图如a、b。下列相关叙述正确的是( )
A.一般可使用固体培养基进行富集培养
B.为获得纯种的目的菌种，需对采集的样品进行灭菌
C.获得图a所示结果的接种过程中，接种环需灼烧灭菌3次
D.利用图b计算出样品中菌体浓度为5.85×108个/ml，则接种稀释液的稀释倍数为106倍
6.某兴趣小组为从土壤中筛选出某类细菌制备相应培养基，培养基成分如表所示。下列有关分析错误的是( )
成分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂
质量/g 1.4 2.1 0.2 10.0 1.0 15.0
A.从物理性质角度分析，该培养基属于固体培养基
B.从功能角度分析，该培养基属于选择培养基
C.该培养基可以筛选出能分解尿素的微生物
D.该培养基灭菌后还需要将pH调至中性或弱碱性
7.下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是( )
A.采用稀释涂布平板法统计的菌落数目往往少于实际的活菌数
B.当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落
C.为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数
D.显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法
8.有些酵母菌能以工业废甲醇作为碳源进行繁殖，既可减少污染，又可降低成本。研究人员拟从土壤中分离该类酵母菌并大量培养，操作流程如图。下列相关叙述正确的是( )
注：25×16型血细胞计数板，表示计数室中有25个中格，每个中格又分成16个小格。
A.实验前需对玻璃器皿、金属用具和培养基进行干热灭菌
B.只有③过程中使用的培养基需以甲醇作为唯一的碳源
C.为了保证结果准确，对每一个平板的菌落都要进行计数并取平均值
D.将发酵液稀释1000倍后，用25×16(1mm×1mm×0.lmm)型血细胞计数板统计出10个中格中的细胞数为60个，则每毫升发酵液中有1.5×10个细胞
9.将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。M培养基可用于真菌a的筛选，某同学将获得的真菌a利用如图的方式进行稀释，统计甲、乙，丙三个平板中的菌落数分别是110、140和149。下列分析正确的是( )
A.若真菌a为酵母菌，通常采用血细胞计数板对活菌进行计数
B.若在培养真菌a的培养基中添加一定量的青霉素，可抑制细菌的繁殖
C.选取甲、乙、丙三个培养基的目的是排除无关变量对实验的干扰
D.根据三个平板中的菌落数可推算培养液中真菌a的密度为1.33×107个/mL
10.隔夜菜到底能不能吃一直是争议比较大的话题。隔夜菜中会产生亚硝酸盐，亚硝酸盐与人体中某些蛋白质的分解物合成亚硝胺类化合物，这些亚硝胺类化合物容易引发癌症。某兴趣小组进行相关实验来检测不同储存条件下隔夜菜中的亚硝酸盐含量和菌落总数,实验结果如表所示。下列有关叙述正确的是( )
表1不同菜品在不同储存条件下的亚硝酸盐含量（单位:mg/kg）
样品名称 0h 6h 12h 24h
/ 4℃ 25℃ 4℃ 25℃ 4℃ 25℃
红烧牛肉 <1 <1 <1 <1 <1 <1 3.2
炒大白菜 <1 <1 <1 <1 12.8 <1 >100
凉拌黄瓜 <1 <1 <1 <1 14.2 <1 30.4
表2不同菜品在不同储存条件下的菌落总数（单位:个）
样品名称 0h 6h 12h 24h
/ 4℃ 25℃ 4℃ 25℃ 4℃ 25℃
红烧牛肉 <100 <100 100 <100 6.2×105 <100 4.8×108
炒大白菜 <100 <100 2.2×104 <100 4.4×107 <100 5.9×108
凉拌黄瓜 7.1×105 8.3×105 1.9×106 9.2×105 4.4×108 9.5×105 1.9×109
A.统计菜品中的菌落数时，可以采用稀释涂布平板法或平板划线法
B.低温下菜品中亚硝酸盐含量、菌落总数均较少与酶的变性失活有关
C.菜品中菌落总数越多，亚硝酸盐含量越高
D.相对于肉类菜品，蔬菜类菜品更不适于隔夜食用
11.（多选）某研究小组对非灭菌的一次性口罩中的微生物进行检测，部分操作如下：从口罩上剪取总量9cm2样品（体积近似1mL），剪碎后加入已灭菌的生理盐水中，定容至10mL，充分混匀，得到样液。下列说法错误的是( )
A.取4个经灭菌处理的培养皿，将冷却到40°C的培养基倒入培养皿，待培养基凝固后，将平板倒置
B.向前3个平板中分别加入1mL样液，用涂布器将样液涂布均匀
C.第4个平板不接种样液并与前3个平板共同培养，可用于检测是否有杂菌污染
D.若一段时间后，4个平板上长出的菌落数依次为31、42、35和0个，可计算出1cm2口罩样品中菌体数量为36个
12.除草剂草铵膦(C5H15N2O4P)具有广谱性、低毒、活性高等特点,由于其结构与谷氨酸相似,故可能会导致人畜代谢紊乱、神经中毒等;草铵膦又因有着较强的水溶性,在土壤中易发生迁移,可对环境造成危害,且能进一步在食物链中富集,对人体产生潜在或长期的毒害。研究发现,草铵膦能被土壤中的某些微生物降解。分离降解草铵膦的菌株和探索其降解机制的实验过程分别如图甲、乙所示。回答下列问题:

(1)欲筛选出能降解草铵膦的细菌,土壤样品一般取自_____的土壤。需配制选用草铵膦作为_____的培养基进行筛选。
(2)由图甲可知,纯化培养目的菌时使用了_____(填“液体”或“固体”)培养基,所用的接种工具是_____。纯化培养时,需要将未接种的培养基同等条件下进行培养,目的是_____。
(3)为探究草铵膦被降解的机制,某实验室又做了如图乙所示实验,即将纯化得到的该菌种的培养液过滤离心,取上清液并加入某种酶溶液,然后加入草铵膦溶液中,结果测得草铵膦的降解率为0。已知酶溶液对草铵膦不起作用,于是该实验室得出结论:目的菌株能分泌降解草铵膦的物质,该物质能被酶催化水解。该结论_____(填“一定”“不一定”或“一定不”)成立,请设计实验加以完善:_____。
答案以及解析
1.答案：D
解析：A、以尿素为唯一氮源的培养基，利用涂布分离法将聚集的细菌分散，以获得单细胞形成的菌落是纯化分解尿素的细菌的原理，A正确；B、配制步骤②、③的培养基时，为防止杂菌污染，应进行严格灭菌，B正确；C、经过③筛选、纯化分解尿素的细菌，但不同菌分解尿素的能力不同，因此需要挑取③中的不同种的菌落接种于④中，比较细菌分解尿素的能力，C正确；D、要筛选出能高效分解尿素的细菌，所选用的培养基要以尿素为唯一氮源，但牛肉膏和蛋白胨中都含有氮源，因此步骤③所用的培养基中不能含有牛肉膏、蛋白胨，D错误。故选D。
2.答案：C
解析：例次2当有两个浓度菌落值在30～300之间，比值不大于2，取平均数，且菌落数大于100取两位有效数字，两位之后的数值四舍五入，计算列式为（29500+46000）/2≈38000，例次3有两个浓度菌落值在30～300之间，比值大于2，则报告稀释度较低（稀释次数越多，稀释度越高）的培养皿菌落数，例次3中菌落总数为27100，ABD错误，C正确。故选C。
3.答案：D
解析：A、依题意，圆褐固氮菌是一种异养型自生固氮细菌，能够在土壤中独立固定氮气。因此，选择培养圆褐固氮菌的培养基不需要加氮源，要加碳源，A错误；B、圆褐固氮菌是细菌，细菌适宜在中性或弱碱性条件下生存，因此，为促进圆褐固氮菌的生长，需将培养基pH调至中性或弱碱性，B错误；C、每克土壤中的固氮菌数约为：个，C错误；D、依题意，圆褐固氮菌是一种异养型自生固氮细菌，能够在土壤中独立固定氮气。因此，将种子与自生固氮菌拌种后播种，可减少化肥使用，D正确。故选D。
4.答案：D
解析：A、同学甲筛选出的菌落数明显比其他同学多，出现这种结果的可能原因是和其他同学取样的土壤不同，也有可能是培养基混入其他氮源或培养基被污染，A正确；B、同学甲出现这种结果可能是和其他同学取样的土壤不同，因而导致实验结果偏大，B正确；C、若同学甲的操作没有问题，则可能是稀释倍数太低进而导致菌落数过多，因而表现为数量偏多，C正确；D、其他同学选出约50个菌落，所以土样的细菌悬液中分解尿素的细菌数量约为50÷0.1×106=5×108个，D错误。故选D。
5.答案：D
解析：A、与使用固体培养基相比，使用液体培养基培养菌种时，菌体可以分布在整个培养基中，可充分利用其中的营养物质，提高培养液中氧气含量，菌体数量增加的更快，A错误；B、需从采集的样品分离得到目的菌种，不能对样品进行灭菌，B错误；C、图a所示结果的接种次数为3次，接种环需灭菌4次，C错误；D、利用稀释涂布平板法计算菌体浓度的方法为菌落数÷接种液体积×稀释倍数，而用于计数的平板的菌落数应在30-300之间，因此58.5个÷0.1ml×稀释倍数=5.85×108个/ml，计算得出稀释倍数为106倍，D正确。故选D。
6.答案：D
解析：A、该培养基中含有凝固剂琼脂，所以从物理性质角度分析，该培养基属于固体培养基，A正确；
BC、该培养基以尿素作为唯一氨源，所以该培养基可以用于筛选尿素分解菌，属于选择培养基，BC正确；
D、调节pH应在灭菌之前，D错误。
故选D。
7.答案：C
解析：采用稀释涂布平板法获得的菌落有些可能是由两个或多个细胞形成的，所以统计的菌落数目往往少于实际的活菌数目，A正确；当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落，B正确；为了保证结果准确，一般选取菌落数为30~300的平板进行计数，C错误；除平板计数法外，显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法，D正确。
8.答案：D
解析：培养基应采用高压蒸汽灭菌法灭菌，A错误；⑤过程中使用的培养基也需以甲醇作为唯一碳源，B错误；为了保证结果的准确性，应选择菌落数在30~300之间的平板进行计数并取平均值，C错误；每毫升发酵液中的细胞数为6010×25×10000×1000=1.5×109(个),D正确。:在同一稀释度下，应至少时3个平板进行重复计数，然后求出平均值。
9.答案：B
解析：A、酵母菌相对较大，可采用血细胞计数板进行计数，但该方法统计的是活菌数和死菌数的总和，A错误；B、青霉素可抑制细菌的繁殖，避免细菌对真菌a的干扰，B正确；C、选取甲、乙、丙三个培养基的目的是减小实验误差，C错误；D、根据三个平板中的菌落数可推算培养液中真菌a的密度为（110+140+149）÷3÷0.1×105=1.33×108个/mL，D错误。故选B。
10.答案：D
解析：对微生物进行计数时，可以采用稀释涂布平板法，平板划线法不适于对微生物进行计数，A错误；低温抑制了酶的活性，但不会使酶变性失活，B错误；25℃下储存24h时，凉拌黄瓜中的菌落总数高于炒大白菜，但亚硝酸盐含量却低于炒大白菜，C错误；由题表实验结果可知，蔬菜类菜品中的亚硝酸盐含量与菌落总数大多等于或高于肉类菜品，故蔬菜类菜品更不适于隔夜食用，D正确。
11.答案：ABD
解析：A、培养基要冷却到50℃左右时开始倒平板。温度过高会烫手，过低培养基又会凝固，A错误；B、用稀释涂布平板法统计细菌数量时，滴加到培养基表面的菌悬液的量一般不超过0.1mL，其原因是避免培养基表面的菌液出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果，B错误；C、培养未接种的固体培养基是为了作为对照组，第4个平板不接种样液并与前3个平板共同培养，可用于检测是否有杂菌污染，C正确；D、第4个平板没有菌落形成，说明没有杂菌污染，且前三个平板长出的菌落数均在30~300之间，说明操作中的稀释倍数（10倍）是合适的。若接种的样液是0.1ml，则9cm2口罩样品中菌体数量为（31+42+35）=36÷0.1×10=3600个，则lcm2口罩样品中菌体数量为400个，D错误。故选ABD。
12.答案：(1)被草铵膦污染;唯一碳源和氮源
(2)固体;接种环;检测培养基灭菌是否合格
(3)不一定;将纯化得到的该菌种的培养液过滤离心,取上清液,然后加入草铵膦溶液中,检测草铵膦的降解率,作为对照
解析：(1)该实验的目的是筛选能降解草铵膦的菌株,所以应该在被草铵膦污染的土壤中取样。草铵膦含有碳、氮元素,所以可以以草铵膦作为唯一碳源和氮源配制培养基进行筛选。
(2)由图甲可知,纯化培养目的菌时利用了平板划线法,此方法用到的培养基是固体培养基,使用的接种工具是接种环。
纯化培养时,需要将未接种的培养基同条件下一起培养,目的是检测培养基灭菌是否合格。
(3)由于该实验只设计了一个实验组,没有对照组,不能证明目的菌株能分泌出降解草铵膦的物质,该物质能被酶催化水解;若要完善实验,还需要设置对照组:将纯化得到的该菌种的培养液过滤离心,取上清液,然后加入草铵膦溶液中,检测草铵膦的降解率。专题五 动物细胞工程
——高二生物学浙科版（2019）选择性必修三速练100题
1.细胞直接共培养是指将2种或2种以上的细胞接种在同一孔中进行培养，以达到模拟体内不同种类的细胞直接接触来探究它们信息交流方式的目的，具体操作如图。下列分析错误的是( )
A.成块的组织中细胞与细胞靠在一起，在培养前需先将组织块分散成单个细胞
B.细胞培养过程需要对培养液进行灭菌，对所有培养用具进行消毒，以保证无菌无毒的培养环境
C.推测第二种细胞会贴壁到无细胞区，当两种细胞分裂生长到表面相互接触时停止分裂
D.通过检测混合培养液中是否存在信息类物质可初步推测两种细胞间的信息交流方式
2.Vero细胞是从非洲绿猴的肾脏上皮细胞中分离培养出来，可无限增殖且能悬浮培养，因不能合成抗病毒蛋白干扰素，因而广泛应用在病毒性疫苗生产上，下列叙述错误的是( )
A.培养Vero细胞时需要提供5%二氧化碳和95%空气
B.vero细胞是发生了转化的细胞，经过培养后可形成连续细胞系
C.Vero细胞无需胰蛋白酶等处理可传代培养
D.生产病毒性疫苗时，可将病毒接种到Vero细胞，培养后提取病毒可直接成为疫苗
3.下列有关植物组织培养和动物细胞培养的比较，正确的是( )
植物组织培养 动物细胞培养
原理 植物细胞的全能性 细胞增殖
培养前的处理 离体 将组织细胞分散开
特有成分 植物激素 血清
特殊环境条件 再分化需光 气体环境
主要过程 脱分化、再分化 原代培养、传代培养
A.后者没有体现细胞的全能性，是因为细胞核中没有本物种全套的遗传物质
B.将动物组织细胞分散开时只能使用胶原蛋白酶或胰蛋白酶
C.两者的培养过程都只涉及有丝分裂，不进行减数分裂
D.植物组织培养时也有将组织细胞分散开的操作
4.如图为肾脏上皮细胞培养过程示意图，已知肾脏上皮细胞属于需要贴附于某些基质表面才能生长增殖的细胞。下列相关叙述错误的是( )
A.甲→乙、丙→丁过程可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
B.细胞培养应在含有95%空气和5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸
C.丙过程会出现细胞贴壁和接触抑制现象
D.上述细胞培养过程的原理是细胞增殖，没有体现细胞的全能性
5.通过动物细胞融合技术获得的杂交瘤细胞,可以产生单克隆抗体。在此基础上,科研人员继续进行实验,获得双杂交瘤细胞以产生双特异性抗体,双特异性抗体可以同时结合两种不同的抗原,其制备过程如图所示。图中融合细胞经过多次检测和筛选,才能得到少量能产生双特异性单克隆抗体的单克隆杂交一杂交瘤细胞,不可能的原因是( )
A.融合细胞随机丢失部分染色体,缺少与抗体合成有关的基因
B.组成抗体的不同多肽链有多种组合,能够形成的抗体类型较多
C.融合处理时条件不适宜,单克隆杂交瘤细胞和脾脏细胞融合率较低
D.单克隆杂交瘤细胞和B细胞融合后,形成一种融合细胞
6.大熊猫是我国的国宝，尽管采取了许多保护措施，但由于其繁殖能力及幼仔成活率均较低,数量仍然非常少。有科学家尝试采用体细胞核移植技术来克隆大熊猫。下列错误的是( )
A.用体细胞核移植技术克隆大熊猫，体现了动物体细胞核具有全能性
B.在体细胞核移植过程中，普遍使用的去核方法是梯度离心法
C.由于体细胞分化程度高，因而体细胞核移植难度明显高于胚胎细胞核移植
D.在保护濒危物种方面，体细胞核移植技术有望增加濒危物种的存活数量
7.如图为核移植实验过程示意图。据图分析,下列相关叙述错误的是( )
A.去核的时期应该是MⅡ期,原因是该时期第一极体和卵细胞核较近
B.桑葚胚细胞的细胞核提取出后,应尽快注入去核的卵母细胞中
C.电融合法可促使重构胚形成,后期还需要其他方法激活重构胚
D.为了提高妊娠的成功率,受体动物应选择与供体相同的品种
8.动物体细胞融合后染色体核型不稳定，来自某一方的染色体往往随机丢失一至多条，这种现象常应用于基因的定位。在甲型流感单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞在克隆化培养过程中来自B淋巴细胞的染色体往往出现随机丢失现象。不考虑基因互作和其他变异，下列叙述错误的是( )
A.B淋巴细胞可从多次间歇注射甲型流感疫苗的动物脾脏中筛选获得
B.在筛选杂交瘤细胞的选择培养基上，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均死亡
C.与亲代杂交瘤细胞相比较，若减少某条染色体后分泌单克隆抗体的功能缺失，则该抗体的基因就位于这条染色体上
D.利用抗体检测筛选的杂交瘤细胞克隆化培养将具有持续产生甲型流感抗体的能力
9.癌细胞的恶性增殖和转移与癌细胞膜成分的改变有关。某些细胞在癌变过程中产生的CEA癌胚抗原明显增加。科学家用CEA癌胚抗原制备单克隆抗体，用于检测血清中的CEA含量，进而对某些癌症进行临床辅助诊断。下列相关叙述错误的是( )
A.用CEA癌胚抗原免疫小鼠可使小鼠产生相应的B淋巴细胞
B.用特定选择培养基筛选出的杂交癌细胞均能产生抗CEA单克隆抗体
C.杂交瘤细胞能无限增殖，且在体外培养的过程中无接触抑制现象
D.用抗CEA抗体检测血清中CEA的原理是抗原与抗体特异性结合
10.单克隆抗体相对于传统的注射相应抗原后从动物血清中分离的抗体，不仅产量高、纯度高，而且特异性强，已经广泛应用于科学研究、临床诊断和疾病的治疗等。下列有关单克隆抗体的说法，正确的是( )
A.单克隆抗体是将单一的某种B细胞克隆扩增，培养后获得的抗体
B.单克隆抗体的制备过程中要进行两次筛选，而且筛选的原理相同
C.动物细胞融合、体细胞核移植技术是单克隆抗体制备技术的基础
D.单克隆抗体不仅自身能治疗疾病，还可以运载药物以及诊断疾病
11.利用动物细胞融合方法，以SARS病毒棘突蛋白作为抗原制备出单克隆抗体（抗体D）。下图为使用不同抗体抑制病毒感染细胞的检测结果。下列相关叙述不正确的是( )
A.对照抗体应不与SARS病毒特异性结合
B.将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内，可获得大量抗体D
C.检测抗体效果时需将SARS病毒与细胞混合一段时间后再加入抗体
D.抗体D需达到一定浓度才有明显抑制效果
12.双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，可以通过细胞融合技术人工制备。下图为生产能同时识别癌胚抗原（一种与肿瘤相关的抗原）和长春碱（一种抗癌药物）的双特异性单克隆抗体的部分过程。下列叙述正确的是( )
A.细胞膜的选择透过性是动物细胞融合的基础
B.融合细胞均能在HAT培养基上生长，未融合细胞均不能生长
C.制备的双特异性抗体特异性强，故能精准杀死肿瘤细胞
D.图中方框内至少经过2次筛选，才可获取单克隆杂交—杂交瘤细胞
13.CD47是一种跨膜糖蛋白，可与巨噬细胞（一种吞噬细胞）表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6~5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。研究表明，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家设计了如下实验流程来验证这一结论。请回答：
（1）步骤①需多次给小鼠注射CD47，目的是________________。
（2）步骤②过程与植物体细胞杂交所利用的共同原理是________________。
（3）为了得到能产生抗CD47单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。其中“第一次筛选”需使用特定的选择培养基，筛选出来的细胞具有________________特点；对第一次筛选得到的细胞还需进行“第二次筛选”，即需要进行________________才能得到产生抗CD47单克隆抗体的杂交瘤细胞。第二次筛选所依据的基本原理是________________________________。
（4）根据单一变量原则可知，检测时应设置________________作为对照，若对照组中巨噬细胞的吞噬指数显著________________（填“高于”或“低于”）实验组，即可验证上述研究结果。
答案以及解析
1.答案：B
解析：A、成块的组织中细胞与细胞靠在一起，在培养前需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理将组织块成为单个细胞后才能进行培养，A正确；B、细胞培养过程需要对培养液、培养用具进行灭菌，细胞培养过程需要对培养液添加抗生素防止细菌污染，定期更换培养液以防止细胞代谢产物造成毒害，B错误；C、动物细胞在培养过程中均会出现细胞贴壁和接触抑制的现象，由此推测第二种细胞会贴壁到无细胞区，当两种细胞分裂生长到表面相互接触时停止分裂，C正确；D、细胞膜表面上可能存在接受邻近细胞信号的受体，以完成细胞间的信息交流，通过检测混合培养液中是否存在信息类物质可初步推测两种细胞间的信息交流方式，D正确。故选B。
2.答案：D
解析：A、动物细胞培养的过程中需要控制培养箱中的气体条件为95%空气+5%CO2，其中CO2起到维持培养液的pH的作用，A正确；B、vero细胞能连续培养，一定发生了转化，获得了不死性，B正确；C、Vero细胞炫富培养，无需胰蛋白酶处理可传达培养，C正确；D、生产病毒性疫苗时，可将病毒接种到Vero细胞，培养后提取病毒进行灭活或减毒处理方可成为疫苗，D错误。故选D。
3.答案：C
解析：动物细胞培养的原理是细胞增殖，该过程没有体现细胞的全能性，但动物细胞核中有本物种全套的遗传物质，A错误;将动物组织细胞分散开，除使用胶原蛋白酶或胰蛋白酶外，还可使用机械法，B错误；植物组织培养和动物细胞培养的原理分别是植物细胞的全能性和细胞增殖，这两个过程都只涉及有丝分裂，细胞不进行减数分裂，C正确；植物组织培养时设有将组织细胞分散开的操作D错误。
4.答案：B
解析：图中甲乙过程是将肾脏组织块剪碎并分散后制成细胞悬液，丙→丁是传代培养，需要将发生接触抑制的细胞分开，两个过程都可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，分散成单个细胞，A正确;细胞培养应在含有95%空气和5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pH,B错误；丙表示原代培养，由题意可知，丙过程会出现细胞贴壁和接触抑制现象，C正确;经细胞培养过程得到多个细胞，原理是细胞增殖，没有体现细胞的全能性，D正确。
5.答案：D
解析：第一步:整体浏览选项,与图示信息进行匹配;第二步:深入分析选项正误由图中细胞染色体数可知,动物细胞融合时会发生染色体的随机丢失,若丢失与抗体合成有关的染色体,则会影响融合细胞合成抗体,A符合题意。由图可知,抗体由两条重链和两条轻链组成,不同的多肽链组合可以形成的抗体类型较多,故部分融合细胞产生的抗体可能不是双特异性单克隆抗体,B符合题意。若融合处理时条件不适宜,单克隆杂交瘤细胞和脾脏细胞融合率较低,则形成所需的融合细胞较少,C符合题意。单克隆杂交瘤细胞和B细胞融合后,形成多种融合细胞,其中能产生双特异性单克隆抗体的占比较小,D不符合题意。
6.答案：B
解析：在体细胞核移植过程中,普遍使用的去核方法是显微操作法,B错误。
7.答案：B
解析：去核的时期应该是MⅡ期,此时第一极体和卵细胞核较近,利用显微操作法,可将细胞核和第一极体一并吸出,A正确；由图可知,桑葚胚细胞不需要提取出细胞核,可直接注入去核的卵母细胞中,B错误;电融合法可促使重构胚形成,后期还需要其他方法(如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)激活重构胚,C正确；受体动物应选择与供体相同的品种,是因为同种动物的生理特征一致,妊娠期相同,激素分泌同步,着床成功率D正确。
8.答案：D
解析：A、对动物进行间歇注射抗原处理，以刺激动物机体产生相应的B淋巴细胞，A正确；B、B淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行融合，再用特定的选择培养基进行筛选。在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长，B正确；C、与亲代杂交瘤细胞相比较，若减少某条染色体后分泌单克隆抗体的功能缺失，说明该抗体的基因位于这条染色体上，C正确；D、杂交瘤细胞在克隆化培养过程中来自B淋巴细胞的染色体往往出现随机丢失现象，若丢失的染色体含有产生甲型流感抗体的基因，则利用抗体检测筛选的杂交瘤细胞不一定具有持续产生甲型流感抗体的能力，D错误。故选D。
9.答案：B
解析：A、在免疫过程中，外来抗原（如CEA癌胚抗原）会刺激机体产生相应的免疫反应，包括B淋巴细胞的活化和抗体的产生。因此，用CEA癌胚抗原免疫小鼠确实可以使小鼠产生针对该抗原的B淋巴细胞，这些B淋巴细胞能够分泌特异性抗体来识别并结合CEA抗原，A正确；B、可用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，但筛选出的杂交瘤细胞不都能产生抗CEA的单克隆抗体，还需进行抗体检测和多次筛选，B错误；C、杂交瘤细胞是B淋巴细胞和骨髓瘤细胞通过融合形成的杂交细胞。由于骨髓瘤细胞具有无限增殖的能力，因此杂交瘤细胞也继承了这一特性，能够在体外无限增殖。同时，杂交瘤细胞在体外培养的过程中不会表现出接触抑制现象，即细胞不会因为相互接触而停止分裂，C正确；D、抗原与抗体之间的结合具有高度的特异性，即一种抗体只能与特定的抗原结合。因此，用抗CEA抗体检测血清中的CEA含量时，抗体会特异性地结合血清中的CEA抗原，从而实现对CEA含量的检测。这种检测方法在癌症的临床辅助诊断中具有重要应用，D正确。故选B。
10.答案：D
解析：A、能合成分泌抗体的B细胞高度分化，不能增殖。而单克隆抗体是由能合成分泌某种抗体的B细胞与骨髓瘤细胞融合成的杂交瘤细胞克隆培养分泌的，A错误；
B、单克隆抗体的制备过程中要进行两次筛选，但两次筛选的原理不同，第一次筛选利用选择培养筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选利用抗原抗体特异性结合原理，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，B错误；
C、单克隆抗体制备技术运用到动物细胞培养、动物细胞融合等技术，未用到体细胞核移植技术，C错误；
D、单克隆抗体不仅自身能治疗疾病，还可以运载药物以及诊断疾病，而且由于抗体能与抗原特异性识别结合，对机体的副作用较小，D正确。
故选D。
11.答案：C
解析：A、由图可知，加入对照抗体后病毒感染率基本不变，说明对照抗体不与SARS病毒特异性结合，不能抑制病毒感染细胞，A正确；B、抗体检测呈阳性，说明该杂交瘤细胞能产生相应的抗体D，因此将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内，可从小鼠腹水获取大量单克隆抗体D，B正确；C、检测抗体效果时，需先将SARS病毒与抗体混合，再让其侵染细胞，观察病毒感染细胞的效果，C错误；D、据图分析，当抗体D达到一定浓度后，感染率下降明显，抑制效果才明显，D正确。故选C。
12.答案：D
解析：A、动物细胞融合的基础是细胞膜的流动性，A错误；
B、未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞均不能在HAT培养基上生长，B错误；
C、双特异性单克隆抗体能同时识别癌胚抗原和长春碱，不能精准杀死肿瘤细胞，C错误；
D、图中方框内需要经过2次筛选，先筛选得到对长春碱免疫的B淋巴细胞，后筛选出杂交—杂交瘤细胞，D正确。
故选D。
13.答案：（1）诱导小鼠产生能够分泌抗CD47抗体的B淋巴细胞
（2）细胞质膜的流动性
（3）既能大量增殖，又能产生抗体；克隆化培养和抗体检测；抗原与抗体能发生特异性结合
（4）不加单克隆抗体的巨噬细胞+肿瘤细胞共培养体系；低于
解析：（1）欲生产抗CD47的单克隆抗体，则应以CD47为抗原，步骤①需多次给小鼠注射CD47，目的是诱导小鼠产生能够分泌抗CD47抗体的B淋巴细胞。
（2）步骤②为诱导动物细胞融合，融合的实现依赖于细胞质膜的流动性，植物体细胞杂交过程中不同原生质体的融合同样也依赖于细胞质膜的流动性。
（3）第一次筛选时用特定的选择培养基筛选出来的细胞为杂交瘤细胞，自身融合的细胞和未融合的细胞不能在此选择培养基上生长。第一次筛选出来的杂交瘤细胞不一定都能产生所需的抗体，还需要对筛选得到的细胞进行克隆化培养和抗体检测（即第二次筛选）才能得到产生抗CD47单克隆抗体的杂交瘤细胞。第二次筛选所依据的基本原理是抗原与抗体能发生特异性结合。
（4）本实验是为了验证抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，根据实验组的设置及单一变量原则可知，应设置不加单克隆抗体的巨噬细胞+肿瘤细胞共培养体
为对照组。若抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用专题一 微生物的培养条件
——高二生物学浙科版（2019）选择性必修三速练100题
1.在培养基配制和微生物接种的过程中，确保无杂菌污染被称为无菌操作。图中，符合无菌操作要求的有( )
①火焰烧瓶口并在火焰旁将培养基倒入灭菌培养皿
②菌种试管口在火焰上灼烧
③接种前灼烧接种环
④接种前培养皿在火焰上灼烧
⑤靠近火焰接种
A.①②③④ B.①②③⑤ C.①③④⑤ D.②③④⑤
2.下列关于培养基的叙述，错误的是( )
A.液体培养基常用于饷模煜却某种微生物
B.固体培养基表面的微生物生长速度比在液体培养基中快
C.平板常用于观察由单个细胞生长繁殖成的菌落
D.斜面培养基常用于菌种保存
3.如表所示为某微生物培养基的配方，下列有关叙述正确的是( )
成分 NaNO3 K2HPO4 琼脂 葡萄糖
含量 3g 1g 15g 30g
成分 抗生素 MgSO4·7H2O FeSO4 H2O
含量 0.1万单位 0.5g 0.01g 定容至1000mL
A.根据物理特征划分，该培养基属于液体培养基
B.微生物无法在该培养基表面形成肉眼可见的菌落
C.根据培养基的配方可知，该培养基培养的微生物的同化作用类型是异养型
D.固体培养基中加入少量水就可制成液体培养基
4.含碳、氮的苯胺除草剂严重污染土壤，为筛选降解苯胺除草剂的细菌，下列做法错误的是( )
A.从苯胺除草剂污染严重的土壤取土样
B.在牛肉膏蛋白胨培养基中加入苯胺除草剂
C.对土壤样液梯度稀释后进行涂布平板操作
D.设置一空白平板并与涂布后的平板在相同条件下培养
5.为了保持菌种的纯净需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是( )
A.对频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法
B.临时保藏的菌种一般是接种到试管的固体斜面培养基上
C.临时保藏菌种容易被污染或发生变异
D.对需要长期保存的菌种，可以采用低温-4 ℃ 保藏的方法
6.培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是( )
①化学消毒
②灼烧灭菌
③干热灭菌
④紫外线灭菌
⑤高压蒸汽灭菌
⑥巴氏消毒法
A.③⑤②①④⑥ B.⑤③②①④⑥ C.⑤②③①④⑥ D.⑤③②④①⑥
7.下列有关微生物培养基配制的原则，表述正确的是( )
A.任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水及琼脂
B.培养基中碳源和氮源具有明确的比例
C.微生物的生长除受营养因素影响外，还受到pH、氧浓度、渗透压的影响
D.营养物质的浓度越高越好
8.抗生素可由微生物产生，具有抑菌作用，能在琼脂培养基中扩散。在筛选产生抗生素的菌种时，先在琼脂培养基平板上划线接种一种从土壤中获得的甲菌，在27℃下培养3天，形成菌落。然后接种乙、丙、丁三种致病细菌（图A），继续在同样条件下培养3天，结果如图B。分析结果，可得出的结论是( )
①乙菌对甲菌落产生的抗生素敏感
②丁菌的生长被丙菌产生的抗生素抑制
③丙菌对抗生素不敏感
④丙菌产生的抗生素抑制了乙菌的生长
A.①③ B.①④ C.②③ D.②④
9.人们在研究、利用微生物时，需用无菌技术培养获取纯种微生物，并对其进行计数或保存。下列有关叙述正确的是( )
A.用稀释涂布平板法进行微生物计数时，结果往往比实际值低
B.培养基配制过程是计算、称量、溶化、调pH、定容、灭菌、倒平板
C.高压蒸汽灭菌后，打开排气阀，待压力表指针降至“0”后开盖取物
D.获得纯种微生物后，利用涂布平板法接种至斜面培养基上，进行低温保存
10.选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素、四环素等可抑制细菌或放线菌的生长；在培养基中加入数滴质量分数为10%的酚溶液可以抑制细菌和霉菌的生长。现有选项中四种微生物混杂的菌液，利用上述这些方法不能从中分离出( )
A.大肠杆菌 B.霉菌 C.放线菌 D.固氮细菌
11.某兴趣小组研究使用公筷对餐后菜品细菌数量的影响，实验选用凉拌黄瓜、盐水虾、干锅茶树菇3道菜，每道菜均分为3盘，一盘使用公筷，一盘不使用公筷，还有一盘不食用，实验者分别使用公筷和不使用公筷吃3道菜，同一实验者以不同方式吃同一道菜的次数必须相同，实验流程如图所示。请据图回答：
（1）图示流程中，应使用_________________________对样品进行稀释，接种时所用的接种工具是_________________________。对培养基X进行灭菌时，通常使用_________________________法。
（2）图中存在“冷藏”操作，进行该操作的目的是_________________________。实验结束后，培养基应进行______处理再丢弃。
（3）实验结果如表所示：
菜名 总菌数（CFU/kg）
餐前 餐后
公筷 非公筷 未食用
凉拌黄瓜 14000 16000 45000 14500
盐水虾 135 150 220 140
干锅茶树菇 30 45 530 40
结合生物学知识及常识分析，筷子上的微生物可能来自_______________________（答出三点）。与凉拌黄瓜组相比，盐水虾和干锅茶树菇两组的总菌数较少的主要原因是_______________________。基于上表和该兴趣小组的实验课题，可以得出的结论是______________________________________________。
答案以及解析
1.答案：B
解析：①火焰烧瓶口并在火焰旁将培养基倒入灭菌培养皿，这是因为酒精灯火焰旁具有无菌区域，能够防止杂菌污染，①正确；
②菌种试管口在火焰上灼烧，这样能够防止杂菌污染，②正确；
③接种前灼烧接种环，能够杀死接种环上的杂菌，③正确；
④接种前培养皿不能在火焰上灼烧，灼烧会导致培养基融化等，正确操作是接种时在酒精灯火焰旁进行操作，④错误；
⑤靠近火焰接种，这样能够防止杂菌污染，⑤正确。
综上所述，①②③⑤正确。故选B。
2.答案：B
解析：液体培养基中不含凝固剂,可以增大微生物与营养物质的接触面积,故常用于大规模快速繁殖某种微生物,固体培养基表面的微生物生长速度比在液体培养基中慢,A正确,B错误；平板常用于观察由单个细胞生长繁殖成的菌落,C正确;斜面培养基常用于菌种保存,D正确。
3.答案：C
解析：题表所示的培养基配方中含有琼脂，琼脂为凝固剂，因此该培养基不属于液体培养基，固体培养基加水不能制成液体培养基，A、D错误；微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落，B错误；该培养基中的葡萄糖可作为碳源，NaNO3可作为氮源，故其培养的微生物的同化作用类型是异养型，C正确。
4.答案：B
解析：在苯胺除草剂污染严重的土壤中降解苯胺除草剂的细菌数量较多，容易筛选出降解苯胺除草剂的细菌，A正确；牛肉膏蛋白胨培养基既可以为微生物提供碳源，也可以提供氮源，在该培养基中不能筛选出降解苯胺除草剂的细菌，应选择以苯胺为唯一碳源和氮源的培养基，B错误；对土壤样液梯度稀释后进行涂布平板操作，有利于获得单细菌菌落，C正确；将稀释一定倍数的稀释液涂布平板后，与空白平板在相同条件下培养，可检验平板是否灭菌合格或是否被污染，D正确。
5.答案：D
解析：对需要长期保存的菌种，可采用甘油管藏法，即在3mL甘油瓶中加入1mL甘油后灭菌，将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在-20 ℃ 的冷冻箱中保存，
D错误。
6.答案：B
解析：培养基用高压蒸汽灭菌；培养皿能耐高温，需用干热灭菌；接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；空气可用紫外线消毒；为不破坏其营养成分，对牛奶可采用巴氏消毒法。
7.答案：C
解析：培养微生物时，一般需要碳源、氮源、水和无机盐，配制固体培养基时需加入琼脂，A错误；
一般培养基中碳源、氮源具有一定的比例，但培养基中各物质的比例不一定是明确的，如天然培养基，B错误；
在培养基中营养物质的浓度并不是越高越好，D错误。
8.答案：A
解析：从图B中可以看出，乙菌在接近甲菌处不能生长，丙、丁菌不受影响，说明甲菌产生了抗生素，这种抗生素可抑制乙菌的生长，①、③正确，故选A。
9.答案：A
解析：A、用稀释涂布平板法进行微生物计数时,由于两个或多个细菌常形成一个菌落,因此结果往往比实际值低,A正确;B、培养基配制过程先定容,后调pH,B错误;C、灭菌后,等压力表指针降至“0”时,打开排气阀排气,打开锅盖,取出灭菌物品,C错误;D、获得纯种微生物后,利用划线分离法接种至斜面培养基上,进行低温保存,D错误。故选:A。
10.答案：A
解析：霉菌属于真菌，可以在添加了青霉素、四环素等的培养基上分离出霉菌；在培养基中加入数滴质量分数为10%的酚溶液可以抑制细菌和霉菌的生长，故该培养基可以分离出放线菌；利用缺乏氮源的培养基能分离出固氮细菌。大肠杆菌不能在上述几种培养基上生存，不能利用这些方法把大肠杆菌从混杂的菌液中分离出来，A符合题意。
11.答案：（1）无菌水；涂布器；高压蒸汽灭菌
（2）防止取样后细菌快速增殖；高温（灭菌）
（3）菜肴、空气、口腔；这两种菜的制作过程中都进行了高温处理；使用公筷可以有效减少餐后菜品细菌数量，抑制微生物传播
解析：（1）对样品进行稀释时，应选用无菌水，以防止杂菌污染。使用稀释涂布平板法便于对微生物进行计数，因而图示流程中的接种方法是稀释涂布平板法，所用接种工具是涂布器。常用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。
（2）冷藏可抑制微生物的生命活动，避免其快速增殖。实验所用培养基在丢弃前应进行高温灭菌处理，以防止污染环境。
（3）人的口腔、菜肴和空气中都存在微生物，这些微生物通过各种途径转移到筷子上使筷子上分布有微生物。凉拌黄瓜制作过程中未进行高温处理，而盐水虾和干锅茶树菇制作过程中都进行了高温处理，因而后两道菜的总菌数比凉拌黄瓜少。结合表格和研究课题可知，使用公筷组比不使用公筷组餐后菜品细菌的数量少，说明使用公筷可以有效抑制微生物传播。专题八 生物技术的安全与伦理
——高二生物学浙科版（2019）选择性必修三速练100题
1.以哺乳动物为研究对象的生物技术已获得了长足的进步。对生物技术应用于人类，在安全与伦理方面有不同的观点，下列叙述正确的是( )
A.试管婴儿技术应全面禁止
B.治疗性克隆不需要监控和审查
C.生殖性克隆不存在伦理道德方面的风险
D.我国禁止任何生殖性克隆人研究
2.设计试管婴儿没有利用下列技术手段中的( )
A.体外受精技术 B.胚胎移植技术
C.植入前胚胎遗传学诊断技术 D.转基因技术
3.转基因技术的研究正以惊人的速度发展，越来越多地影响人类的生产和生活。科学家在转基因研究工作中会采取很多方法确保转基因产品的安全性，各个国家也都制定了相关法规和政策规范转基因技术的应用。下列有关说法错误的是( )
A.我国对农业转基因生物实行标识制度，如转基因动植物要直接标注“转基因××”
B.用农业转基因生物加工制成的产品一定含有转基因成分
C.我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验
D.利用转基因技术制造的新型致病菌可能导致大批受感染者突然发病而又无药可医
4.下列哪项不属于转基因技术的成果？( )
A.转基因猪的细胞中含有人的生长激素基因，因而猪的生长速度快、个体大
B.转基因大米中含有β－胡萝卜素，营养丰富、产量高
C.转基因植物合成的某些新蛋白质，引起个别人过敏
D.让转基因牛为人类生产凝血因子，并在牛奶中提取
5.抗逆转基因作物的培育与推广带来的巨大社会效益是( )。
①在一定程度上使作物摆脱了土壤和气候条件的限制
②减少了化学农药对环境的污染和对人畜的危害
③减少了化肥的制造和使用量，有利于环境的保护
④已成为人类解决饥饿和贫困不可或缺的技术
A.①②③ B.①②④ C.①③④ D.②③④
6.下列关于生物武器的说法，错误的是( )
A.我们对待生物武器的态度应明确而坚定，坚决禁止研制生物武器
B.生物武器是利用致病菌类、病毒类或生化毒剂类等形成杀伤力
C.为了国家安全，可以进行必要的小范围的生物武器研究
D.生物武器不只对敌方人员有伤害
7.生物技术正越来越多地影响普通人的生活,下列人们对生物技术应用的认识,正确的是( )
A.应用试管动物技术产下新个体的过程属于无性生殖
B.我国禁止生殖性克隆人实验,允许治疗性克隆研究
C.食用转基因食品会导致外源基因整合入人的基因组
D.接种流感疫苗对预防变异的流感病毒感染一定无效
8.下列不属于生物武器的是( )
A.致病菌 B.病毒 C.抗生素 D.生化毒剂
9.与常规武器相比，生物武器具有( )
①致病能力强
②攻击范围广，不易被发现
③有一定的潜伏期
④像核武器一样破坏建筑物
⑤自然条件下的大雪、低温、干燥、日晒等不影响生物武器的杀伤力
A.①②③ B.②③④⑤ C.①②③④⑤ D.①②③④
10.下列有关生物技术的说法中，合乎伦理道德的是( )
A.运用试管婴儿技术解决不孕问题
B.进行生殖性克隆人的实验研究
C.利用个人基因资讯决定是否聘用就业申请者
D.通过基因检测禁止有基因缺陷的胎儿出生
11.下列关于用转基因动物作器官移植供体的研究的叙述，不正确的是( )
A.器官短缺和免疫排斥是目前制约人体器官移植的两大难题
B.猪的内脏构造、大小和血管分布与人的极为相似
C.灵长类动物体内隐藏的、可导致人类疾病的病毒少于猪
D.无论以哪种动物作为供体，都需要在其基因组中导入某种调节因子以抑制抗原决定基因的表达，或设法除去抗原决定基因
12.下列关于“克隆技术”的分析正确的是( )
A.生殖性克隆和治疗性克隆的生物学原理和技术流程完全一样，但两者的目的不同
B.将一个克隆的胚胎植入一个女性子宫发育成的婴儿的过程属于生殖性克隆
C.生殖性克隆人涉及伦理问题，而治疗性克隆不涉及伦理问题
D.我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何克隆技术
答案以及解析
1.答案：D
解析：我国政府一再重申四不原则:不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验，但治疗性克隆可在有效监控和严格审查下实施，A错误;我国政府同样重视治疗性克隆所涉及的伦理问题，主张对治疗性克隆进行有效监控和严格审查,B错误;生殖性克隆人冲击了现有的一些有关婚姻、家庭和两性关系的伦理道德观念，C错误;我国政府一再重申四不原则:不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验,D正确。
2.答案：D
解析：设计试管婴儿利用了体外受精技术、胚胎移植技术、植入前进行遗传学诊断技术，但没有外源基因的导入，不涉及基因工程技术。
3.答案：B
解析：我国对农业转基因生物实行了标识制度，如直接标注“转基因××”“加工原料为转基因××”“本产品为转基因××加工制成，但本产品中已不再含有转基因成分”等字样，A正确、B错误；我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验，C正确；利用转基因技术制造的新型致病菌，人类从来没有接触过，可能导致大批受感染者突然发病而又无药可医，D正确。
4.答案：C
解析：A、转基因猪的细胞中含有人的生长激素基因，因而猪的生长速度快，个体大，是转基因生物的成果，A不符合题意；B、转基因大米中含有β-胡萝卜素，营养丰富，产量高，是转基因生物的成果，B不符合题意；C、转基因植物合成的某些新蛋白质，引起个别人过敏，属于食品安全问题，C符合题意；D、让转基因牛为人类生产凝血因子，并在牛奶中提取，是转基因生物的成果，D不符合题意。故选C。
5.答案：B
解析：①抗逆转基因植物在一定程度上使作物摆脱了土壤和气候条件的限制，①正确；
②抗虫转基因植物和抗病转基因植物能减少农药对环境的污染和人畜的危害，②正确；
③抗逆转基因作物的培育与推广，不会减少化肥的制造和使用量，③错误；
④抗逆转基因植物使得作物在不良环境下更好地生长，提高产量，已成为人类解决饥饿和贫困不可或缺的技术，④正确。
综上所述，B符合题意。
故选B。
6.答案：C
解析：A、我们对生物武器的态度：不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，A正确；
B、生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等，B正确；
C、生物武器几乎对所有人都具有杀伤力，是一种不人道的武器，应坚决禁止，C错误；
D、生物武器可对军队和平民造成大规模杀伤后果，同时，使用者本身也会受伤害，D正确。
故选：C。
7.答案：B
解析：本题考查转基因生物安全性及生物技术的伦理问题。试管动物的培育需经过体外受精过程,属于有性生殖,A错误;我国政府禁止生殖性克隆人,也不接受任何生殖性克隆人的实验,但不反对治疗性克隆,B正确;食品中的基因会被消化分解,食用转基因食品不会导致外源基因转入人体细胞,C错误;接种流感疫苗可以预防病毒性流感的发生,对变异的流感病毒不一定完全无效,D错误。
8.答案：C
解析：生物武器的种类包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等，而抗生素不属于生物武器。
C错误，ABD正确。
故选C。
9.答案：A
解析：：①生物武器中所用病原体传染性强、致病能力强，①正确；
②病原体传染性强，攻击范围广，不易被发现，②正确；
③病原体有一定的潜伏期，③正确；
④生物武器为病原体，不会像核武器一样破坏建筑物，④错误；
⑤环境因素影响生物武器杀伤力，⑤错误。
故选A。
10.答案：A
解析：A、运用试管婴儿技术解决不孕问题，合乎伦理道德，故A正确；
B、我国政府禁止生殖性克隆，不反对治疗性克隆，B违背伦理道德；
C、个人基因资讯的泄露容易带来安全性和伦理问题，故C不合乎伦理道德；
D、通过基因检测禁止有基因缺陷的胎儿出生，也会带来关于伦理的争论，故D错误。
故选A
11.答案：C
解析：人体移植器官短缺是一个世界性难题，要实现器官移植，最大的难题是免疫排斥，A正确；
由于猪的内脏构造、大小和血管分布与人的极为相似，人类将解决器官短缺问题的目光集中在小型猪的身上，B正确；
猪体内隐藏的、可导致人类疾病的病毒远远少于灵长类动物，C错误；
无论以哪种动物作为供体，都需要在器官供体基因组中导入某种调节因子，以抑制抗原决定基因的表达，或设法除去抗原决定基因，再结合克隆技术，培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆器官，D正确。
12.答案：B
解析：A、生殖性克隆和治疗性克隆的技术流程不一样，治疗性克隆旨在利用克隆技术产生特殊的细胞核组织，不会得到个体，A错误；B、将一个克隆的胚胎植入一个女性子宫发育成的婴儿的过程属于生殖性克隆，该过程的目的是通过克隆技术获得完整的个体，因而属于生殖性克隆，B正确；C、不论生殖性克隆还是治疗性克隆都涉及伦理问题，故我国政府态度明确，对治疗性克隆监控、管理严格，C错误；D、我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆技术，D错误。故选B。专题三 发酵工程及其应用
——高二生物学浙科版（2019）选择性必修三速练100题
1.辽宁盛产南国梨，以南果梨为主要原料制酒，开创了世界“果粮混合固态发酵酒”之先河，该酒以果香为体、粮香为魂。下列叙述错误的是( )
A.“果粮混合固态发酵酒”的发酵全过程均需严格的灭菌操作
B.制作该酒所需的酵母菌的代谢类型为异养兼性厌氧型
C.将南国梨先用清水冲洗再去除果柄，沥干后用于发酵
D.南国梨和粮食中的多种糖类作为发酵的物质和能量来源
2.传统发酵食品的制作离不开各种微生物。乳酸菌常用于乳制品的发酵和泡菜的腌制。下列相关叙述正确的是( )
A.制作乳制品时，应该在发酵液中添加抗生素，防止杂菌污染
B.制作泡菜时，发酵液表面的白色菌膜是大量增殖的乳酸菌
C.丙酮酸分解为乳酸发生在乳酸菌的线粒体中
D.乳制品的发酵、泡菜的腌制需要严格控制空气的进入
3.啤酒是以大麦为主要原料，经酿酒酵母发酵制得。啤酒的工业化生产分为主发酵和后发酵两个阶段。精酿啤酒的制作工艺与普通啤酒不同，不添加食品添加剂，不进行过滤消毒处理。下列叙述正确的是( )
A.利用大麦作原料时，淀粉是酵母菌的直接碳源
B.啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在主发酵阶段完成
C.后发酵阶段会因pH或酒精含量升高而终止发酵
D.精酿啤酒不进行过滤和消毒，故发酵过程不需要在无菌条件下进行
4.如图所示装置可用于生物技术实践的相关实验，下列有关叙述错误的是( )
A.装置乙既可用于果酒的制作，又可用于果醋的制作
B.利用装置甲制作果酒时，瓶中的果汁不能装满，要留大约1/3的空间
C.用装置乙制作果酒时温度应控制在30℃左右，制作果醋时应适当降温
D.装置乙的充气口在制作果酒时要先打开后关闭，在制作果醋时要通入无菌空气
5.如图1为果酒、果醋制作装置，图2为果酒发酵中酵母菌数量、葡萄糖浓度和乙醇浓度的变化曲线，下列叙述正确的是( )
A.制作果酒的整个过程中，夹子a、b均关闭，制作果醋时，夹子a、b均打开
B.制作果酒时应将图1装置放在18~30℃环境中，制作果醋时应将温度提高至30~35℃
C.图2曲线A~B段，瓶内有大量二氧化碳和水产生，导致瓶内气压增大
D.随着发酵时间的推进，葡萄糖含量降低，乙醇的产生速率先增大后趋于稳定
6.啤酒是一种以大麦芽、啤酒花（一种草本植物）、水为主要原料，通过大麦种子发芽→麦芽糖化→加啤酒花、煮沸→糖汁发酵→过滤→分装保存等工艺流程而制成的低酒精度饮料。主发酵阶段按泡沫的形成和消退可分为低泡期、高泡期和落泡期等。下列有关叙述错误的是( )
A.发酵装置应保持密闭条件，但需要注意定时排气
B.啤酒发酵过程中，酵母菌以大麦中的淀粉为主要碳源
C.低泡期发酵液中的酵母菌数量低于高泡期
D.在高泡期应注意散热，防止发酵液温度过高
7.啤酒的工厂化生产流程中，涉及发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒和终止等若干工艺流程。下列相关说法错误的是( )
A.焙烤可以杀死大麦种子的胚，并使淀粉酶变性失活
B.糖化过程中淀粉酶将淀粉分解成为糖浆
C.蒸煮可以杀死糖浆中的微生物，避免杂菌污染
D.消毒可以杀死啤酒中的大多数微生物，从而延长其保存期
8.浆水是西北人熟知的夏季一种传统的发酵食品，它是用芹菜，卷心菜等蔬菜为原料发酵制成的，口感微酸，消暑解渴营养丰富。兰州大学近日发布了一项最新研究。从浆水中分离出有益菌--发酵乳酸杆菌JL-3，发现浆水可通过降解动物体内的尿酸来控制尿酸的积累。下列叙述错误的是( )
A.浆水制作过程中需要将器皿和原料用开水烫干净，目的是防止杂菌污染
B.发酵乳酸杆菌JL-3的遗传物质DNA主要分布在细胞核中
C.浆水的食用消暑解渴和控制尿酸体现了生物多样性的直接价值
D.浆水制作过程需要保持适宜温度，有利于微生物的发酵
9.利用卷心菜发酵制作泡菜过程中，乳酸菌、酵母菌细胞数量和pH的变化如图所示。下列叙述错误的是( )
A.酵母菌和乳酸菌均有核膜包被的细胞核
B.发酵初期乳酸菌建立了明显的菌种优势
C.前6天pH下降主要由乳酸菌代谢引起
D.发酵中期酵母菌通过无氧呼吸获取能量
10.腐乳味道鲜美，易于消化吸收，但因其较高的盐含量而存在健康隐患。研究人员探究了不同盐含量条件下的腐乳风味（感官评价分值越高表示品尝者越喜爱），并测量了氨基酸含量（以氨基酸态氮表示，含量越高，风味越好），结果如图所示。
下列说法错误的是( )
A.制作腐乳时加盐可以起到调味和抑菌的作用
B.氨基酸是豆腐中的蛋白质被氧化分解而产生的
C.过高的盐含量可能抑制了腐乳发酵相关微生物的繁殖
D.综合考虑发酵程度和风味后，发酵时可选择11%左右的盐含量
11.下列关于不同微生物的发酵作用及发酵食品的叙述，正确的是( )
A.酸豆角以其色泽金黄、咸酸适宜、鲜香嫩脆的特有品质深受人们的喜爱。酸豆角腌制过程中，仅有厌氧的乳酸菌活动，故发酵时需营造严格的无氧环境
B.《本草纲目拾遗》中记载：“豆腐又名菽乳，以豆腐腌过酒糟或酱制者，味咸甘心。”上述腐乳制作的原理主要是利用毛霉等微生物，毛霉中只存在一种与蛋白质合成有关的细胞器——核糖体
C.豆瓣酱制作过程中利用的微生物主要是曲霉。发酵过程中，上层酱的发酵效果好于下层，因而常需要将下层的酱翻至上层，说明参与发酵的菌种属于厌氧型
D.酒精发酵时，发酵液中的葡萄皮等固体物质会上浮覆盖在发酵液表面，形成“酒帽”，“酒帽”的出现会降低发酵速度，原因是葡萄皮上的菌种无法浸入发酵液
12.利用微生物制作发酵食品在我国有着悠久的历史。如图1表示泡菜的制作方法。请回答下列问题：
（1）制作泡菜利用的微生物是____________。发酵初期，泡菜坛水槽内经常有气泡产生，其主要原因是发酵初期酵母菌生长旺盛，产生了较多的____________。
（2）装坛时往往加入“陈泡菜水”，是为了增加____________的量。调味料除了蒜瓣、生姜及其他香辛料外，还要加入少量白酒以使泡菜更加脆爽、清香，同时还能起到____________的作用。
（3）泡菜制作过程中，泡菜表面的杂菌产生的硝酸还原酶将硝酸盐还原成亚硝酸盐，在特定条件下能转变成有致癌作用的亚硝胺。如图2是三种食盐浓度的泡菜中亚硝酸盐含量与发酵天数的关系。
①与食盐浓度为3%、7%的泡菜相比较，食盐浓度为5%的泡菜中亚硝酸盐含量变化的特点是____________。
②发酵初期食盐浓度为7%的泡菜中亚硝酸盐含量较低的原因主要是____________。
③泡菜虽然美味却不宜过量食用。根据图中的相关数据，对泡菜腌制和食用的合理建议有____________。
答案以及解析
1.答案：A
解析：A、酵全过程如果经过严格的灭菌操作，会将菌种杀死，A错误；B、制作该酒所需的酵母菌的代谢类型为异养兼性厌氧型，发酵前期酵母菌先进性有氧呼吸，促进酵母菌的繁殖，后期进行无氧呼吸产生酒精，B正确；C、将南国梨用清水将梨冲洗干净去除果柄（可防止因去除果柄而导致梨果皮的破损而导致材料污染），沥干水分后用于发酵，C正确；D、南国梨和粮食中富含多种糖类，可以作为酵母菌发酵所需的物质和能量的来源，D正确。故选A。
2.答案：D
解析：A、抗生素能抑制细菌生长，制作乳制品时所用菌种乳酸菌是细菌，故制作乳制品时，不能在发酵液中添加抗生素，A错误；
B、泡菜坛内的白色菌膜是酵母菌繁殖所致，B错误；
C、乳酸菌是原核生物，无线粒体，C错误；
D、乳制品的发酵、泡菜的腌制所用菌种均为乳酸菌，乳酸菌是厌氧生物，故乳制品的发酵、泡菜的腌制需要严格控制空气的进入，D正确。
故选D。
3.答案：B
解析：A、利用大麦作原料时，淀粉需要分解成葡萄糖才能被酵母菌的利用，A错误；
B、啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，但酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成，即酒精的产生积累主要在主发酵阶段完成，B正确；
C、主发酵结束后在低温、密闭环境下储存一段时间属于后发酵，后发酵阶段会因pH降低，且酒精含量升高而终止发酵，C错误；
D、精酿啤酒发酵时间长、产量低、价格高，保质期更短（在发酵工艺上，精酿啤酒发酵完成后，不会过滤和杀菌，保质期只有几十天，但发酵过程必须在无菌条件下进行，防止杂菌繁殖对发酵过程产生影响，D错误。
故选B。
4.答案：C
解析：AD、装置乙关闭充气口可用于果酒的制作，打开充气口通入无菌空气，可用于果醋的制作，AD正确；B、利用装置甲制作果酒时，瓶中的果汁不能装满，要留有1/3的空间，防止发酵液溢出，B正确；C、用装置乙制作果酒时温度应控制在18-25℃左右，制作果醋时温度为30-35℃，C错误。故选C。
5.答案：B
解析：制作果酒的整个过程中，夹子a、b可先同时打开一段时间，之后夹子a关闭，夹子b间歇打开，果醋发酵时需要氧气，因此用图1装置进行果醋发酵时，需打开夹子a、b,A错误；制作果酒时应将图1装置放在18~30℃环境中，多数醋酸菌的最适生长温度是30~35℃，因此制作果醋时应将温度提高至30~35℃，B正确；图2曲线A~B段，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，酵母菌有氧呼吸过程中氧气消耗量等于二氧化碳产生量，因此瓶内的气压基本不变，C错误；分析图2可知，随着发酵时间的推进，葡萄糖含量降低，乙醇的浓度先增大后趋于稳定，但乙醇的产生速率先增大，后下降为0，D错误。
6.答案：B
解析：A、酒精发酵利用了酵母菌无氧呼吸产生酒精，故发酵装置应保持密闭条件，但需要注意定时排气（排出二氧化碳），A正确；B、酵母细胞呼吸的底物为葡萄糖，不能直接利用淀粉，需要淀粉酶等将淀粉转化成酵母可利用的糖，B错误；C、主发酵阶段的泡沫的形成主要是二氧化碳的产生，泡沫越多，说明酵母菌越活跃，参与反应的酵母菌越多，因此低泡期发酵液中的酵母菌数量低于高泡期，C正确；D、高泡期应是主发酵中酵母菌最活跃的阶段，此时会产生大量的热，故在高泡期应注意散热，防止发酵温度升高，从而影响酵母菌的活性，D正确。故选B。
7.答案：A
解析：A、焙烤可以杀死大麦种子的胚，但不使淀粉酶失活，A错误；B、糖化过程中淀粉酶将淀粉分解成为糖浆，B正确；C、蒸煮相当于煮沸消毒法，可以杀死糖浆中的微生物，避免杂菌污染，C正确；D、消毒可以杀死啤酒中的大多数微生物，避免杂菌污染，从而延长其保存期，D正确。故选A。
8.答案：B
解析：A、浆水制作过程中需要将器皿和原料用开水烫干净，进行消毒，其目的是防止杂菌污染，A正确；B、乳酸杆菌JL-3属于原核生物，遗传物质DNA分布在细胞的拟核中，B错误；C、直接价值：对人类有食用、药用和工业原料等使用意义以及有旅游观赏、科学研究和文学艺术创作等非实用意义的，故对人类有食用、药用和工业原料等使用意义的可以体现生物多样性的直接价值，C正确；D、果酒、果醋、泡菜和腐乳制作过程中菌种生活的温度条件不同，因此浆水制作过程中，需要将温度控制在发酵菌种的最适温度范围内，D正确。故选B。
9.答案：A
解析：A、乳酸菌是原核生物，细胞内没有核膜包围的细胞核，A错误;B、根据曲线图中乳酸菌和酵母菌的数量变化曲线对比分析可知，发酵初期乳酸菌远多于酵母菌，所以乳酸菌成了明显的优势菌种，B正确;C、结合曲线图分析，前6天，由于乳酸菌远多于酵母菌，其产生的乳酸会降低培养液的pH,C正确;D、由于整个发酵过程都是在无氧环境条件下进行的，在发酵中期(22~26天)，酵母菌只能通过无氧呼吸获取能量，D正确。故选A。
10.答案：B
解析：制作腐乳时加盐可起到调味和抑菌的作用，A正确；蛋白酶催化蛋白质水解为小分子的肽和氨基酸，该过程不属于氧化分解，B错误；过高的盐含量会导致微生物失水死亡，抑制了腐乳发酵相关微生物的繁殖，C正确；据图可知，感官评价和氨基酸态氮含量都较高时的盐含量为11%左右，D正确。
11.答案：D
解析：本题考查传统发酵技术的应用。酸豆角腌制过程中主要是厌氧的乳酸菌活动，除此之外还有其他菌，如酵母菌等活动，发酵时需营造严格的无氧环境，A错误；腐乳制作的原理主要是利用毛霉等微生物，毛霉是一种真菌，是真核生物，其中存在的与蛋白质合成有关的细胞器包括核糖体、内质网、高尔基体等，B错误；上层的酱更容易接触到氧气，如果上层的酱发酵效果好于下层，说明参与发酵的菌种属于好氧型，C错误；“酒帽”的出现会降低发酵速度，原因是葡萄皮上的菌种无法浸入发酵液，D正确。
12.答案：（1）乳酸菌；CO2
（2）乳酸菌；抑制杂菌生长
（3）亚硝酸盐含量变化最大；亚硝酸盐峰值最高；高盐浓度有利于抑制杂菌的生长繁殖，产生的硝酸还原酶少，减缓了硝酸盐还原；使用适宜浓度的食盐腌制泡菜；泡菜腌制到一定时间后才能食用
解析：（1）制作泡菜利用的微生物主要是乳酸菌，利用乳酸菌厌氧呼吸产生乳酸。发酵初期，发酵初期大肠杆菌、酵母菌等生长旺盛，产生较多的CO2，因此泡菜坛水槽内经常有气泡产生；
（2）老泡菜水中含有乳酸菌，装坛时往往加入老泡菜水这是为了增加接种（乳酸菌）的量；调味料除了蒜瓣、生姜及其他香辛料外，还要加入少量白酒能使泡菜更加脆爽、清香同时还能起到抑制杂菌生长的作用；
（3）①从图中可以看出，与食盐浓度为3%、7%相比较，食盐浓度为5%的泡菜中亚硝酸盐含量变化的特点是亚硝酸盐含量变化最快；亚硝酸盐峰值最高，最低值最低；②高盐浓度有利于抑制杂菌的生长繁殖，产生的硝酸还原酶少，减缓了硝酸盐还原，因此发初期食盐浓度为7%的泡菜中亚硝酸盐含量较低；③泡菜虽然美味却不宜过量食用。根据图中的相关数据，对泡菜腌制和食用的合理建议有使用适宜浓度（或5%浓度）的食盐腌制泡菜：泡菜腌制到一定时间后（或9~11天后）才能食用。专题六 胚胎工程
——高二生物学浙科版（2019）选择性必修三速练100题
1.目前发现的双胞胎有同卵双胞胎、异卵双胞胎和“半同卵双胞胎”。1对“半同卵小姐弟双胞胎”形成过程如图所示，图中染色单体分离后分别移向细胞的三个不同方向，从而分裂成a、b、c三个细胞，染色体全部来自父系的“合子”致死。其中两个细胞发育成姐弟二人。下列说法，正确的是( )
A.卵子在子宫内发育成熟并完成受精过程
B.受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，孵化后进入囊胚期阶段
C.若细胞a的染色体组成为MP1，则细胞b的染色体组成也为MP1
D.这对双胞胎来源于母亲的染色体相同，来源于父亲的染色体一定不同
2.下列关于胚胎移植的说法，错误的是( )
A.早期胚胎形成后，在一定时间内处于游离状态
B.受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应
C.移入的胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系
D.在孕育过程中，移入胚胎的遗传特性受代孕母体的影响
3.目前，精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列说法错误的是( )
A.将外源基因整合到精子的染色体上，可保证外源基因稳定遗传
B.精子载体法与显微注射法相比，对受精卵中核的影响更小
C.①过程中的卵裂期，细胞的数量不断增加但胚胎总体积基本不变
D.②操作前需要对供体和受体进行免疫检查，以免发生免疫排斥
4.胚胎移植、胚胎分割过程中很多操作环节都需进行检查，下列叙述错误的是( )
A.体外受精后需检查受精状况和受精卵的发育能力
B.进行胚胎移植前需要对供体和受体进行免疫检查
C.胚胎移入受体母畜后需对其进行是否妊娠的检查
D.胚胎分割时可取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定
5.胚胎分割能有效提高胚胎的利用率，下列关于胚胎分割的叙述，正确的是( )
A.分割囊胚阶段胚胎时，需要将囊胚腔均等分制
B.不同发育阶段的胚胎，分割的具体操作完全相同
C.胚胎分割需要用到显微镜，显微操作仪，分割针等工具
D.分割后的胚胎不能直接移植给受体，需要进行体外培养
6.如图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法正确的是( )
A.①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精前精子需要获能
B.②代表早期胚胎培养，可移植的胚胎应发育到原肠胚或囊胚阶段
C.③代表胚胎分割，需均等分割囊胚的内细胞团，得到的后代个体间表型不一定完全相同
D.⑤代表胚胎移植，移植之前需要对供体和受体母牛同时饲喂相同的激素
7.如图表示某哺乳动物胚胎的早期发育过程,a~c表示相关过程，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ表示相关时期。下列相关叙述正确的是( )
A.过程a表示卵裂，该时期细胞数量和体积不断增加
B.过程b细胞逐渐分化，Ⅱ分为内胚层、中胚层和外胚层
C.Ⅲ时期表示原肠胚
D.早期胚胎发育过程中滋养层细胞会发育成胎儿的各种组织
8.杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，被称为“钻石级”肉用绵羊。科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下图所示，相关叙述正确的是( )
A.为了获得更多的卵母细胞，需用雌激素对雌性杜泊羊进行处理
B.从卵巢中采集的卵母细胞可直接与获能的精子进行体外受精
C.为避免代孕绵羊对植入胚胎产生排斥反应，应注射免疫抑制剂
D.为了进一步扩大繁殖规模，可通过胚胎分割技术获得同卵双胎
9.英国首批体内含有三人DNA信息的三亲婴儿已经诞生。三亲婴儿的培育技术过程如图所示。下列叙述错误的是( )
A.给捐献者卵母细胞去除细胞核可以采用显微操作去核技术
B.培育三亲婴儿是为了避免母亲的线粒体遗传病遗传给孩子
C.父亲携带的白化病基因的遗传不受三亲婴儿培养技术的影响
D.三亲婴儿的培育利用了核移植技术，属于无性生殖
10.牛胚胎移植试验的主要流程如图，下列相关叙述正确的是( )
①供体超数排卵→②配种→③胚胎收集→④________→⑤胚胎移植→子代小牛
A.①过程需要注射有关激素，目的是获得更多的卵原细胞并完成减数分裂
B.③过程用特定的装置，将供体母牛输卵管中的胚胎冲洗出来
C.④过程是对“胚胎进行质量检查”，可移植的胚胎应发育到囊胚或原肠胚
D.⑤过程成功率的高低主要取决于供、受体生理状况一致性的程度
11.下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法正确的是( )
A.②过程中，受精卵的分裂是在子宫内进行有丝分裂
B.在进行步骤③时，一般选择发育良好的原肠胚来操作
C.在胚胎发育中，桑葚胚时期的胚胎会从透明带中伸展出来
D.步骤①代表奶牛的体外受精，精子需要进行体外获能处理
12.下列关于早期胚胎培养的说法，不正确的是( )
A.发育培养液的成分通常含有血清
B.发育培养液的成分较一般动物细胞培养液的成分简单
C.动物种类不同，进行胚胎移植的早期胚胎所处阶段不同
D.进行胚胎移植之前，可将培养到适宜时期的早期胚胎进行冷冻保存
13.随着生物科学技术的发展,动物的繁殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况,供体1是良种荷斯坦高产奶牛,供体2是健康的黄牛。请据图回答下列问题:

(1)应用1中,细胞B的获取需对供体2注射_______;使用核移植技术获得重组细胞,最终获得良种小牛,该技术的原理是_______。
(2)应用2中,将早期胚胎移入受体牛子宫内的技术叫_______,为使受体牛生理状况更适合完成该操作,要对受体牛进行_______处理,以提高成功率。
(3)在应用2、3、4中,将收集的精子放在某种溶液中进行培养,使其获得受精能力,这一生理现象称为_______。从母体内获得的卵母细胞需要培养到_______(填时期)才能与精子结合。
受精过程中防止多精入卵的生理反应包括_______反应和_______反应。
(4)应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题:通过_______技术获得二分胚①和②,在分割囊胚阶段的胚胎时,要注意将_______均等分割。
(5)应用4中,对细胞进行定向诱导,可分化形成各种组织和器官。在胚胎干细胞培养过程中,由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚,因此在使用合成培养基时,通常需要加入_______等一些天然成分。培养过程中除需要适宜的温度、pH和渗透压、无菌、无毒等环境条件以外,在进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶,并将它们置于含有_______的混合气体的CO2培养箱中进行培养。
答案以及解析
1.答案：D
解析：A、卵子在输卵管内发育成熟并完成受精过程，A错误；B、囊胚期时，囊胚进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫作孵化，B错误；C、来自母系的染色体为M，来自父系的染色体为P1、P2，经过复制后，染色体进行组合，若细胞a的染色体组成为MP1，细胞c的染色体均来自父亲，其染色体组成为P1P2，细胞b的染色体组成为MP2，C错误；D、细胞a的染色体组成为MP1，细胞b的染色体组成为MP2，这对双胞胎发育为姐弟，来源于父亲的性染色体不同，D正确。故选D。
2.答案：D
解析：A、受精卵形成后要在输卵管中发育为早期胚胎，然后才能植入子宫内膜，因此早期胚胎形成后，在一定时间内处于游离状态，A正确；BC、在相同的生理状态下，移入的同种生物的早期胚胎可与母体建立联系，不发生排斥反应，BC正确；D、代孕母体仅为植入的胚胎提供营养物质及适宜的发育环境，不会影响其遗传特性，D错误。故选D。
3.答案：D
解析：A、受精卵中几乎不含精子的细胞质，将外源基因整合到精子的染色体上，是保证外源基因稳定遗传的关键，A正确；
B、精子载体法与显微注射法相比，对受精卵中核的影响更小，因为它依靠的是生理受精的过程，所以对原核影响更小，B正确；
C、①过程是早期胚胎培养过程，此过程中细胞的数量不断增加但胚胎总体积基本不变，C正确；
D、②胚胎移植操作前一般不需要对供体和受体进行免疫检查，不会发生免疫排斥反应，D错误。
4.答案：B
解析：A、哺乳动物的精子和卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力，A正确；B、代孕母体对移植的胚胎基本上不会发生排斥反应，不需要进行免疫检查，B错误；C、胚胎移植入子宫不代表妊娠成功，故需对其进行是否妊娠检查，C正确；D、滋养层细胞将来发育成胎膜胎盘，胚胎移植前，可取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定，不会影响胚胎的发育，D正确。故选B。
5.答案：C
解析：A、对囊胚阶段的胚胎分割时，要将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发展，A错误；B、对不同发育阶段的胚胎，分割的具体操作不完全相同，如早期胚胎可用胰酶或切割刀进行分割，而囊胚期等较晚期的胚胎用切割针切割，B错误；C、胚胎分割所需要的主要仪器设备为实体显微镜和显微操作仪、分割针等，C正确；D、分割后的胚胎或细胞可以直接移植给受体，也可以经过体外培养后再进行移植，D错误。故选C。
6.答案：C
解析：A、①代表体外受精，体外受精前和体内受精前精子均需要获能，A错误；B、②代表早期胚胎培养，可移植的胚胎应发育到桑椹（葚）胚或囊胚，B错误；C、③代表胚胎分割，在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割，得到的后代理论上遗传物质完全相同，但不排除发育过程中出现可遗传变异以及环境影响表型，导致后代个体间表型不一定完全相同，C正确；D、胚胎移植之间要对供体、受体进行同期发情处理，使供体和受体的生理状态相同，使用激素为促性腺激素，化学本质为蛋白质，只能注射，不能口服，D错误。故选C。
7.答案：C
解析：过程a表示卵裂，该时期细胞数目不断增加，但胚胎总体积并不增加，细胞体积变小，A错误；过程b细胞逐渐分化，Ⅱ时期表示囊胚期，没有形成内胚层、中胚层和外胚层，B错误；据图可知，过程c透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，形成的Ⅲ时期表示原肠胚，C正确；早期胚胎发育过程中滋养层细胞会发育成胎膜和胎盘，内细胞团发育成胎儿的各种组织，D错误。
8.答案：D
解析：超数排卵用促性腺激素而不是雌激素,A错误;根据采集部位而定,如果是从输卵管采集的卵细胞,已发育成熟,可直接与获能的精子在体外受精;如果是从卵巢采集的卵细胞,未发育成熟,都要经过体外人工培养成熟后才能与获能的精子受精,故B错误;受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应,C错误;为了进一步扩大繁殖规模,可通过胚胎分割技术获得同卵双胎或多胎,故D项正确。
9.答案：D
解析：A、给捐献者卵母细胞去除细胞核可以采用显微操作去核技术，此时的卵母细胞通常需要培养到减数第二次分裂中期，A正确；B、培育三亲婴儿是为了避免母亲的线粒体遗传病遗传给孩子，因此只采用了母亲的卵细胞的细胞核，B正确；C、父亲提供精子，三亲婴儿的培养过程中对精子没有特殊操作，因此父亲携带的白化病基因的遗传不受三亲婴儿培养技术的影响，C正确；D、三亲婴儿的培育利用了核移植技术，但是经过了精子和卵细胞的融合，子代的遗传物质来自双亲和捐献者，属于有性生殖，D错误。故选D。
10.答案：D
解析：A、①过程需要是注射有关激素（促性腺激素），目的是获得更多的卵原细胞，但所获得的卵原细胞还未完成减数分裂，通常减数第二次分裂在受精过程中完成，A错误；B、③过程是冲卵，该过程用特定的装置，将供体母牛子宫中的胚胎冲洗出来，此时的胚胎需要处于游离状态，B错误；C、④过程是“对胚胎进行质量检查”，可移植的胚胎应发育到桑椹胚或囊胚，C错误；D、⑤过程成功率的高低主要决定于供、受体生理状况的一致性，这也需要对供体和受体进行同期发情处理的原因，D正确。故选D。
11.答案：D
解析：A、受精卵形成后在输卵管内进行早期有丝分裂，然后进入子宫着床，A错误；B、③表示胚胎分割，进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的囊胚，因囊胚期的内细胞团未分化，而原肠胚已经分化，不能用于胚胎分割移植，B错误；C、在胚胎发育中，囊胚的扩大会导致透明圈破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫作孵化，发生在囊胚期，C错误；D、①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精前精子需要人工获能处理，体内受精的精子可在雌性生殖道内进行获能，D正确。故选D。
12.答案：B
解析：哺乳动物胚胎的培养液成分一般都比较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分以及血清等物质，动物细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同，A正确，B错误。不同动物胚胎移植的时间不同例如，牛、羊一般要培养到桑葚胚或囊胚阶段才进行移植，人的体外受精胚胎可在8~16个细胞阶段移植，C正确。当胚胎发育到适宜的阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存，D正确。
13.答案：(1)促性腺激素;动物细胞核的全能性
(2)胚胎移植;同期发情
(3)精子获能;减数第二次分裂中期(或MⅡ期);透明带;卵细胞膜
(4)胚胎分割;内细胞团
(5)血清;95%空气和5%CO2
解析：(1)应用1中是将供体1的体细胞的细胞核移植到取自供体2的去核卵母细胞中,故为了获取更多供体2的卵母细胞,需对供体2注射促性腺激素以促进超数排卵。使用核移植技术获得重组细胞,最终获得的小牛为克隆牛,该技术所依据的原理是动物细胞核的全能性。
(2)应用2属于有性生殖,将早期胚胎移入受体牛子宫内的技术叫胚胎移植:移植前需对受体牛进行同期发情处理,使供体和受体处于相同的生理状态,为移植胚胎提供相同的生理环境,提高成功率。
(3)在应用2、3、4中,将收集的精子放在获能液中进行培养,使其获得受精能力,这一生理现象称为精子获能。从母体内获得的卵母细胞不能立即用于受精,要在体外经人工培养至减数第二次分裂中期才具备受精能力,才能与精子结合。受精过程中防止多精入卵的两道屏障分别是透明带反应和卵细胞膜反应。
(4)应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题。通过胚胎分割技术可获得二分胚,对囊胚阶段的胚胎进行分割时需要将内细胞团均等分割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
(5)动物细胞培养液中,通常需要加入血清等天然成分。动物细胞培养需要在含95%空气和5%CO2的恒温培养箱中进行,其中CO2的主要作用是维持培养液的pH

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