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高2023级2024-2025学年度下期第二次月考
生 物 试 题
一、选择题 （共16题，每题3分，共48分。在每题列出的四个选项中，选出最符合题目要求的一项）。
1．2021年3月，习近平总书记在考察武夷山国家公园时指出，建立以国家公园为主体的自然保护地体系，保持自然生态系统的原真性和完整性，保护生物多样性。根据以上精神，结合生物学知识，下列叙述错误的是（ ）
A.在国家公园中引人外来物种，有可能导致生物多样性下降
B.建立动物园和植物园，能够更好地对濒危动植物进行就地保护
C.规范人类活动、修复受损生境，有利于自然生态系统的发育和稳定
D.在破碎化生境之间建立生态廊道，是恢复自然生态系统完整性的重要措施
2. 嗜盐单胞菌可利用海水合成聚羟基脂肪酸酯（PHA，一种新型生物塑料），在细胞内形成由膜包裹的不溶性颗粒。科研人员从海水中分离得到一株嗜盐单胞菌，在非灭菌、高盐、高pH的发酵液中连续发酵生产PHA，其流程如下图所示。下列相关叙述不正确的是（ ）
A. 利用含PHA的选择培养基筛选嗜盐单胞菌
B. 高盐、高pH的发酵液抑制了杂菌生长
C. 培养液上清循环利用，有利于节约物质和能量
D. 发酵完成后收集沉淀的菌体以得到PHA
3. 为解决中药藿香种质退化、易感染病虫害等问题，研究者对组织培养不同阶段的藿香进行辐射处理，以期获得性状优良的突变株。
据图分析，相关叙述正确的是（ ）
①②应持续照光以诱导外植体的再分化
③④过程细胞表达基因种类和水平相同
培养材料在射线的作用下发生定向突变
筛选出的优良突变株可再进行快速繁殖
4．某湖泊早年受周边农业和城镇稠密人口的影响，常年处于C02过饱和状态。经治理后，该湖泊生态系统每年的有机碳分解量低于生产者有机碳的合成量，实现了碳的零排放。下列叙述错误的是( )
A.低碳生活和绿色农业可以减小生态足迹
B.水生消费者对有机碳的利用，缓解了碳排放
C.湖泊沉积物中有机碳的分解会随着全球气候变暖而加剧
D.在湖泊生态修复过程中，适度提高水生植物的多样性有助于碳的固定
5. 下图为幼鼠肾脏上皮细胞培养过程示意图，已知肾脏上皮细胞属于需要贴附于某些基质表面才能生长增殖的细胞。
下列叙述不正确的是（ ）
A. 甲→乙过程需要用机械的方法和特定的酶处理
B. 丙过程会出现细胞贴壁生长和接触抑制的现象
C. 丙在CO2培养箱中培养以维持培养液pH相对稳定
D. 丁过程为传代培养，利用了动物细胞全能性的原理
6. 科学家将某些诱导基因转入小鼠成纤维细胞中成功获取诱导多能干细胞，这类细胞可用于一系列的研究，具体过程如下图所示。
以下说法错误的是（ ）
A. 干细胞具有自我更新能力和分化潜能
B. 过程③可用物理、化学等方法诱导
C. 还可通过导入特定蛋白来实现过程①
D. 过程④裂解丁细胞后获得单克隆抗体
7. 2017年，我国科学家培育出轰动世界的体细胞克隆猴“中中”和“华华”，下图为其培育流程。下列相关叙述错误的是（ ）
过程①可将成纤维细胞显微注射到去核卵母细胞的透明带
过程②通常需在液体培养基中加入血清等天然成分
C 该过程需用到体外受精、细胞培养和胚胎移植技术
D.体细胞核移植技术的难度明显高于胚胎细胞核移植
8. 研究者通过下图所示的操作过程，获得导入S基因的基因编辑小鼠。
下列相关叙述正确的是（ ）
A. 过程①获得的卵母细胞需培养至MⅡ期
B. 过程②在雌鼠a的输卵管内完成受精
C. 过程③需将表达载体注射到子宫中
D. 过程④需抑制雌鼠b对植入胚胎的免疫排斥
9. 反向PCR是一种通过已知序列设计引物对未知
序列（图中L、R）进行扩增的技术，其过程如下图所示。下列相关叙述不正确的是（ ）
A. 过程①用同一种限制酶对未知序列两端进行切割
B. 过程②需要使用DNA连接酶，形成磷酸二酯键
C. 过程③PCR体系需要添加DNA聚合酶和解旋酶
D. 该技术可检测T-DNA整合到植物染色体DNA的位置
10.如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作流程，下列说法正确的是（ ）
A.实验中选择培养基含有无机盐、葡萄糖、尿素、蛋白胨、琼脂、水等物质
B.培养基用高压蒸汽灭菌后，将pH调至中性或弱碱性
C.平均每克土壤中分解尿素的细菌数约为2.2×108个
D.为判断培养基的选择作用，需设置未接种的培养基作对照
11. 巢式PCR是一种特殊的聚合酶链式反应，使用两组不同的引物实现目标DNA片段的扩增。第一组外引物扩增出的DNA片段(中间产物)长度超出目标区域，第二组内引物称为巢式引物，其结合部位在中间产物内部的目标区域，从而扩增出目标产物，具体过程如图所示。下列有关叙述错误的是(　　)
A. 巢式PCR反应体系中所用的两组引物需先后加入
B. 巢式PCR过程中反应温度最低的一步是复性阶段
C. 若直接用内引物对模板DNA扩增，不易得到目标产物
D. 巢式PCR获得的产物与常规PCR相比特异性更低
12. 为利用链霉菌生产药物A，研究者构建重组DNA并导入链霉菌。重组DNA含启动子P、药物A基因和Neo基因（卡那霉素抗性基因）,两个基因可共同表达。培养和筛选过程如下图所示。
下列叙述不正确的是（ ）
A. 导入成功的链霉菌细胞内可能发生基因重组
B. 诱变处理可能获得产药物A能力更强的菌株
C. 卡那霉素抗性强弱可反映药物A基因的表达强度
D. 应选用b培养基上的菌株作为工程菌生产药物A
13. 快速、准确地确定蛋白质的三维空间结构，一直是生命科学领域的研究热点和难点。人工智能程序AlphaFold 2对大部分蛋白质结构的预测极为精准，接近真实的蛋白质结构，达到了人类利用冷冻电镜等复杂仪器观察预测的水平。下列相关叙述不正确的是（ ）
A. 蛋白质的氨基酸序列是预测其空间结构的重要基础
B. 预测、设计并制造新蛋白质的技术属于蛋白质工程
C. 结构预测能帮助揭示蛋白质分子间相互作用的机制
D. 依据新蛋白质的氨基酸序列能推出唯一的基因序列
14. 下列与高中生物学实验相关的叙述中，不合理的是（ ）
A. 接种环和涂布器在使用前后均需要进行灼烧灭菌
B. DNA粗提取时使用酒精溶解DNA使之与蛋白质分离
C. 通过调整培养基中植物激素的比例诱导愈伤组织分化
D. 通过改变反应体系的温度来控制PCR反应的进程
15. 如图1表示的是细胞内DNA复制的过程，图2表示图1 中RNA引物去除并修复的过程。下列相关叙述错误的有(　　)
　　　　图1　　　　　　　　图2
A. 两条子链合成过程所需的RNA引物数量不同
B. 酶1、2可催化RNA降解，去除引物
C. 酶3是DNA聚合酶，需要新增加引物才能合成DNA单链
D. 酶4是DNA连接酶，催化两个DNA单链片段的连接
16．随着转基因成果的不断涌现，人们对转基因生物安全性的关注与日俱增。下列叙述中不正确的是（ ）
A．转基因生物不会对生物多样性构成威胁
B．对农业转基因生物的生产应该严格控制，以避免产生对人类有害的物质
C．一旦发现转基因生物出现了安全性问题，应该马上停止实验，并销毁重组生物
D．外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的，有可能会出现意想不到的后果
二、非选择题（共52分）
17. (12分）豆汁是久负盛名的传统风味名吃，以其独特的风味及丰富的营养深受当地居民的喜爱。下图是以绿豆为原料制备豆汁的传统工艺流程。在此过程中，淀粉分离和发酵产酸是豆汁加工的关键工序。
（1）豆汁中的酸味主要来自乳酸菌在________条件下所产生的乳酸，绿豆液中的糖类为乳酸菌的生命活动提供了__________，乳酸发酵的反应简式是____________________。（2分）
（2）研究人员通过筛选豆汁中的发酵菌株，优化发酵工艺。将额外添加了碳酸钙（酸性条件下分解）培养基经______________法灭菌后倒平板，将经自然发酵得到的生豆汁采用__________________法接种于平板上，进行分离和计数。在适宜条件下培养一段时间后，选取培养基上________（选填“有”或“没有”）碳酸钙溶解圈的菌落，进一步纯化和培养。
（3）将得到的乳酸菌分别接种到绿豆液后，在相同条件下，检测相关指标，结果见下表。应优先选取菌株__________作为优化发酵工艺的菌种，理由是__________________。（2分）
菌株类型 检测指标 菌株A 菌株B 菌株C 菌株D
絮凝率（%） 51.61 65.42 53.87 61.37
发酵液pH 3.59 4.09 4.15 3.78
豆汁风味 腐味 清香味 清香味 弱清香味
注：絮凝率与淀粉沉降分离速度正相关，淀粉沉降分离速度越快，豆汁品质越佳。
若要对筛选出的菌株进行工业化生产，还需研究其进行发酵的最佳条件，为此请提出一个可以进一步研究的问题______________________________________________。（2分）
18.（11分） 常规种植的棉花（陆地棉）含有棉酚，具有一定毒性，主要分布在茎、叶、苞片、铃壳及种子里的许多黑色细小的腺体中，高棉酚植株这些腺体也比较丰富。科研人员选取低棉酚的野生棉（2n=26）和品质好的陆地棉（4n=52）来培育棉酚含量低且品质好的棉花新品种。
（1）科研人员用__________________酶处理野生棉和陆地棉的悬浮细胞，分别获得两种棉的原生质体。
（2）将紫外线处理后的野生棉原生质体与陆地棉原生质体用化学诱导剂_______诱导融合，获得的原生质体经过__________过程，成为完整植物细胞，进而分裂和脱分化形成______，最终经过_________过程形成完整的再生植株。
（3）①用特异性引物对陆地棉和野生棉基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。图2是用该引物对双亲及再生植株1~6进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1~6中属于杂种植株的有_____________________。（2分）
②在个体水平上，可通过观察杂种植株______________________________________，（2分）筛选出低棉酚的杂种植物，并对其产棉品质进行鉴定，以获得所需棉花新品种。
（4）上述培育棉花新品种所用到的生物技术称为_______________________，该技术的原理是__________________________________________________________________。（2分）
(
ADC
抗体
药物
接头
)19．（8分）单克隆抗体特异性强、灵敏度高，可以大量制备，已被广泛应用于疾病的诊断和治疗。用H7N9病毒制备单克隆抗体的流程如下图所示：
（1）过程①常用的酶 。向小鼠体内注射抗原蛋白的目的是 。细胞Ⅱ应具有的特点是 。（2分）
（2）对于转基因成功的细胞Ⅱ还要进行克隆化培养和 检测。
（3）可以利用蛋白质工程技术对抗H7N9抗体进行改造以延长其体外保存的时间，蛋白质工程的操作手段通过 来间接的改造蛋白质。
（4）单克隆抗体还可以用于抗体—药物偶联物（ADC），实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC中抗体主要作用是 ，杀伤肿瘤细胞的是 。
20. (11分)人的血清蛋白(HSA)具有重要的医用价值，研究人员欲用乳腺生物反应器来大量生产HSA。图1为HSA基因片段和人工构建的大肠杆菌质粒pBR322，其中Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因，箭头表示切割形成末端完全不同的4种限制酶的切割位点。HSA只能从血浆中制备，以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的三条途径如图2所示。请回答下列问题。
(
转录方向
)
图1 图2
(1) 据图1分析，选择限制酶_________________切割质粒和目的基因，可提高目的基因和载体的正确连接率。双酶切法的优点之一是避免质粒与目的基因之间的___________________________。
(2) 为了排除普通受体细胞(未导入质粒)、空质粒受体细胞(导入pBR322质粒而非重组质粒)的干扰，目的基因导入后进行了进一步筛选：制备甲、乙两种培养基，甲培养基中有新霉素，乙培养基中有氨苄青霉素，含重组质粒的受体细胞在甲培养基上__________(填“能”或“不能”)生存，在乙培养基上__________(填“能”或“不能”)生存。
(3) 将农杆菌与水稻受体细胞混合后共同培养，旨在让Ti质粒的T DNA进入水稻受体细胞。常用____________标记的目的基因片段作为探针检测目的基因是否整合到受体细胞的染色体DNA上。为检测目的基因的表达情况，可提取受体细胞的蛋白质，用________________进行杂交实验。
(4) 人体合成的初始HSA多肽，需要经过加工形成正确的空间结构才能有活性。与图2中途径Ⅱ相比，选择途径Ⅰ获取rHSA的优势是水稻具有______________（填细胞器名称），能对初始HSA进行高效加工。为证明rHSA具有医用价值，需确认rHSA与____________________的生物学功能一致。
(5) 科学家培养出一种转基因羊，其膀胱上皮细胞可以合成人血清白蛋白并分泌到尿液中。其培育方法中将重组质粒通过_____________法导入山羊的________细胞。与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受________________限制，受体来源更广泛。
21. (10分)SLA 2基因是猪白细胞抗原基因，在动物免疫应答中发挥作用。为研究SLA 2基因的结构和功能，科研人员克隆到SLA 2基因，先构建大肠杆菌质粒A，再增加特异性启动子后，构建真核表达质粒B后，然后转化感染猪肾上皮细胞，进行后续研究，其主要过程如下图(质粒中数字代表限制酶切点与复制原点间的距离)。请回答下列问题。
限制酶 BclⅠ NotⅠ XhaⅠ Sau3AⅠ
识别序列及切割位点 T↓GATCA ACTAG↑T GC↓GGCCGC CGCCGG↑CG T↓CTAGA AGATC↑T ↓GATC CTAG↑
(1) 从猪基因组中特异地克隆出SLA 2基因的关键是__________________，依据基因片段的大小，实验室可利用________________技术初步鉴定该基因。
(2) 限制酶BclⅠ与Sau3AⅠ切割相同DNA形成的黏性末端是否相同？___________，其中________在该DNA上的切点可能更多。
(3) 下列引物序列中，图示过程①中的引物是________。为提高SLA 2基因的表达量，研究人员同时对基因的5′端序列进行密码子优化设计(如GGT优化为GGC)，优化的序列位于基因的______________(填“编码区”“编码区上游”或“编码区下游”)，这种优化实现的变异属于____________________。
A. 5′—GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAATCCTC—3′
B. 5′—GTTGCGGCCGCTCACACTGTGGCTTGGTAACAC—3′
C. 5′—GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAATCCTC—3′
D. 5′—GTTTGATCACTCACACTCTAGGCCCTTGGTC—3′
(4) 过程②和过程⑤中均构建了重组质粒，其中属于真核表达质粒是在过程________中构建的，这类表达质粒上必须有目的基因、________________________________等结构，其目的是____________________________________________。
2025年春季高2023级第二次月考
生物试题
选择题
1-5 BADBD 5-10DCACC 10-15BDDBC 16A
二、非选择题
17.（12分）
（1）①. 无氧 ②. 碳源（和能源）
③. C6H12O62C3H6O3+少量能量（2分 ）
（2）①. 高压蒸汽灭菌 ②. 稀释涂布平板法 ③. 有
（3）①. B ②. 菌株B的发酵液酸味柔和有清香味，且絮凝率高（2分 ）
（4）单位时间、单位体积的最适接种量、发酵条件最适发酵温度和pH、最佳发酵时间等。（2分 ）
18.（11分）
（1）纤维素酶、果胶酶
（2） ①. 聚乙二醇PEG ②. 再生细胞壁 ③. 愈伤组织 ④. 再分化
（3） ①. 1、3、5、6 ②. 茎、叶等结构中黑色细小腺体的数量（2分 ）
（4） ①. 植物体细胞杂交技术 ②. 细胞膜的流动性、细胞全能性（2分 ）
19.（8分）
（1）逆转录酶 产生已免疫B淋巴细胞（能产生抗体的B淋巴细胞） 既能无限增殖，又能产生特异性抗体（2分 ）
(2)（专一）抗体
(3)改造或者合成基因
（4）靶向运输药物，并识别肿瘤细胞 药物
20. （11分）
(1) EcoRⅠ和PstⅠ　 反向连接　
(2) 能　 不能　
(3) 放射性同位素(或荧光)　 抗人血清蛋白(HSA)的抗体　
(4) 内质网、高尔基体 　 HSA　
(5) 显微注射　受精卵　性别和年龄
21. （10分）
(1) 设计特异性引物　 凝胶电泳　
(2) 相同　Sau3AⅠ　
(3) B、C　编码区　基因突变
(4) ⑤ 启动子、终止子　保证目的基因能够转录(表达)
答案：
1.【答案】B 最好的保护方式是就地保护，建立自然保护区，国家森林公园等
2【答案】A
【详解】A、嗜盐单胞菌可利用海水合成PHA，不能用含PHA选择培养基筛选嗜盐单胞菌，A错误；
B、高盐、高pH的发酵液使杂菌因失水过多或蛋白质变性而死亡，故可抑制杂菌生长，B正确；
C、培养液上清可以循环利用，可避免物质和能量的浪费，有利于节约物质和能量，C正确；
D、嗜盐单胞菌可利用海水合成PHA，在细胞内形成由膜包裹的不溶性颗粒，因此发酵完成后收集沉淀的菌体以得到PHA，D正确。
故选A。
3.【答案】D
【详解】A、①和②脱分化，不需要持续光照，A错误；
B、③诱导生芽，④过程诱导生根，二者基因表达种类不同，水平不同，B错误；
C、射线为物理诱变因素，导致基因不定向突变，C错误；
D、筛选出的优良突变株可以再进行快速繁殖，进而能保持亲本的优良遗传特性、繁殖种苗的速度快，D正确。
故选D。
4【答案】B 消费者呼吸作用利用有机碳，会产生二氧化碳，不会缓解碳排放
5【答案】D
【详解】A、甲→乙过程表示将组织块分散成单个细胞，需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，A正确；
B、丙过程表示原代培养，对于需要贴附于某些基质表面才能生长增殖的细胞而言，在培养过程中会出现细胞贴壁和接触抑制现象，B正确；
C、丙过程表示原代培养，在CO2培养箱中培养，CO2可以维持培养液pH相对稳定，D正确；
D、丁过程是传代培养过程，利用细胞增殖的原理，D错误。
故选D。
6【答案】D
【详解】A、干细胞是具有分裂分化能力的细胞，具有自我更新能力和分化潜能，A正确；
B、过程③为细胞融合成杂交细胞的过程，可用物理、化学等方法诱导，B正确；
C、科学家已尝试采用多种方法来制备iPS细胞（诱导多能干细胞），包括借助载体将特定基因导入细胞中，直接将特定蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞，C正确；
D、杂交瘤细胞可分泌抗体，不需要裂解细胞，D错误。
故选D。
7.【答案】C
【详解】A、图示的是动物细胞核移植技术，①代表利用显微注射将成纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，A正确；
B、进行体外动物细胞培养需要在培养基中添加血清等天然成分，培养基物理状态为液体培养基，B正确
C、图中过程需用到细胞培养、胚胎移植等技术，没用到体外受精技术，C错误；
D、体细胞分化程度高全能性低，胚胎细胞分化程度低全能性高，因此体细胞核移植技术的难度明显高于胚胎细胞核移植，D正确。
故选C。
8.【答案】A
【详解】A、卵母细胞需要培养到MⅡ期才具备与精子受精的能力，因此过程①获得的卵母细胞需培养至MⅡ期，A正确；
B、过程②是体外受精，体外受精是将获能的精子和培养成熟的卵子置于适当的培养液中共同培养一段时间，来促使它们完成受精，B错误；
C、③是导入含S基因的表达载体，应该将含S基因的表达载体通过显微注射法注射至小鼠的受精卵中，C错误；
D、受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应，故过程④不需要抑制雌鼠b对植入胚胎的免疫排斥，D错误。
故选A。
9.【答案】C
【详解】A、由图可知，过程①即酶切后，已知序列能环化，说明两端的黏性末端相同，故过程①是用同一种限制酶对未知序列两端进行切割，A正确；
B、过程②即环化，将DNA片段连接起来，该过程中使用DNA连接酶催化相邻核苷酸之间形成磷酸二酯键，B正确；
C、过程③即PCR扩增，PCR体系需要添加耐高温的DNA聚合酶，不需要解旋酶解旋断氢键，高温变性即可断开DNA分子的氢键，C错误；
D、PCR分析可以使用一种叫做引物的专用分子，它能够识别被复制的DNA并且在指定的区域进行复制。引物的位置很重要，因为以给定的位置与目的基因互补。如果目的基因已经整合到染色体DNA上，那么PCR产物（也就是复制得到的DNA）就会在对应的位置出现。可以快速确认目的基因是否整合到染色体DNA上，因此该技术可检测T-DNA整合到植物染色体DNA的位置，D正确；
故选C。
【答案】C
A筛选尿素分解菌，应该以尿素作为唯一碳源
B.应该选调节Ph在灭菌
C.稀释倍数为105根据计算公式C/V×M 228/0.1×105=2.28×108
D.为判断培养基的选择作用，需设置接种在基础培养基（牛肉膏蛋白胨培养基），选择培养基上菌落数应该明显少于选择培养基
11.【答案】D
A. 巢式PCR反应体系中所用的两组引物需先后加入，第一组外引物扩增出的DNA片段(中间产物)长度超出目标区域，第二组内引物称为巢式引物，其结合部位在中间产物内部的目标区域，从而扩增出目标产物。正确
B. 巢式PCR过程中反应温度最低的一步是复性阶段 变性90 复性50 延伸72。正确
C. 若直接用内引物对模板DNA扩增，模板链较长，容易增加非特异性片段，不易得到目标产物。正确
D. 巢式PCR获得的产物与常规PCR相比特异性更低。特异性应该更高 错误
12.【答案】D
【详解】A、导入成功的链霉菌细胞内可能发生基因重组，目的基因会插入到受体细胞的基因组中，发生的可遗传变异类型为基因重组，A正确；
B、基因突变可能大幅度提升生物的优良性状，因此诱变处理可能获得产药物A能力更强的菌株，B正确；
C、药物A基因和Neo基因（卡那霉素抗性基因）共用一个启动子，二者共同表达，所以卡那霉素抗性强弱可反映药物A基因的表达量，C正确；
D、诱变处理后将菌液稀释后涂布，在含不同浓度卡那霉素的培养基上各接种等量同一稀释度的培养液，应该选择含卡那霉素浓度最高的培养基（即d）上所长出的菌落，其生产药物A的能力也较强，D错误。
故选D。
13.【答案】D
【详解】A、蛋白质多样性与组成蛋白质的氨基酸的种类、数目、排列顺序及肽链盘曲折叠形成的蛋白质的空间结构不同有关，因此蛋白质的氨基酸序列是预测其空间结构的重要基础，A正确；
B、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过化学、物理和分子生物学的手段进行基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类对生产和生活的需求，因此预测、设计并制造新蛋白质的技术属于蛋白质工程，B正确；
C、结构决定功能，结构预测能帮助揭示蛋白质分子间相互作用的机制，C正确；
D、一个氨基酸的密码子可能有多个，因此依据新蛋白质的氨基酸序列能推出多个基因序列，D错误。
故选D。
14.【答案】B
【详解】A、为了防止杂菌污染和感染操作者，每次接种前后，接种环和涂布器在使用前后均需要进行灼烧灭菌，A正确；
B、DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精，可利用这个特性将DNA与蛋白质分离，B错误；
C、细胞分裂素与生长素的比例可以影响细胞分化的方向，因此通过调整细胞分裂素与生长素的比例可诱导愈伤组织形成完整的植株，C正确；
D、PCR反应中，每次循环一般分为变性（超过90°C）、复性（50°C左右）和延伸（72°C左右），所以通过改变体系中的温度，控制PCR的反应进程，D正确。
故选B。
C
【解析】A. 两条子链合成过程所，其中一条子链合成多段冈崎，每一个片段需要一个引物，而另一条子链完整合成。
B. 由图可知酶1、2可催化RNA降解，去除引物
C. 酶3是DNA聚合酶，延子链片段5’→3’合成，不需要另外添加引物 错误
D. 酶4是DNA连接酶，催化两个DNA单链片段的连接
16【答案】A
【详解】A.转基因生物可能会对生物多样性构成威胁，A错误；
B.应该严格选择转基因植物的目的基因，以避免产生对人类有害的物质，B正确；
C.一旦发现转基因生物出现了安全性问题，应该马上停止实验，并销毁重组生物，C正确；
D.外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的，有可能会出现意想不到的后果，D正确。
17.【答案】
（1） ①. 无氧 ②. 碳源（和能源） ③. C6H12O62C3H6O3+少量能量
（2） ①. 高压蒸汽灭菌 ②. 稀释涂布平板法 ③. 有
（3） ①. B ②. 菌株B的发酵液酸味柔和有清香味，且絮凝率高
（4）单位时间、单位体积的最适接种量、发酵条件最适发酵温度和pH、最佳发酵时间等。
解析：（1）乳酸菌是厌氧型细菌，需在无氧条件下进行发酵。绿豆液中的糖类为乳酸菌的生命活动提供了碳源，乳酸发酵的反应简式是C6H12O62C3H6O3+少量能量。
（2）对培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌。灭菌后倒平板，将经自然发酵得到的生豆汁采用稀释涂布平板法接种于平板上，进行分离和计数。产酸菌能在含CaCO3的培养基上产生溶解圈，故需选取由碳酸钙溶解圈的单菌落作为目的菌种，采用稀释涂布平板法进一步纯化，挑选出碳酸钙溶解圈大的菌落作为目标菌株扩大培养。
（3）对比表中A、B、C、D四种菌株，菌株B发酵液中酸味柔和、有清香味，絮凝率最高，可作为优化发酵工艺的菌种。
（4）菌株发酵需要在特定条件下进行，若要对筛选出的菌株进行工业化生产，还需研究其进行发酵的最佳条件，可从单位时间、单位体积的最适接种量；最适温度；最佳的发酵时长等方面进行研究。
18.【答案】（1）纤维素酶、果胶酶
（2）B、C、A （3） ①. 聚乙二醇 ②. 再生细胞壁 ③. 愈伤组织 ④. 再分化
（4） ①. 1、3、5、6 ②. 茎、叶等结构中黑色细小腺体的数量
（5） ①. 植物体细胞杂交技术 ②. 细胞膜的流动性、细胞全能性
【解析】（1） 进行植物体细胞杂交，首先需用纤维素酶和果胶酶处理野生棉和陆地棉的悬浮细胞，去除细胞壁，获得各自获得有活力的原生质体。
（2）一定剂量的紫外线处理野生棉原生质体，可破坏部分染色体。用流式细胞仪测定上述各种原生质体细胞的DNA含量，据图1可知，图A中大多数细胞的DNA含量约为100，图B中大多数细胞的DNA约等于50，图C细胞中DNA含量差异较大，未经处理的野生棉、紫外线处理后的野生棉、陆地棉细胞的检测结果依次为图中B、C、A。
（3） 将紫外线处理后的野生棉原生质体与陆地棉原生质体用化学诱导剂聚乙二醇（PEG） 诱导融合，形成的融合细胞经过细胞壁再生，成为完整细胞，进而分裂和脱分化形成愈伤组织，经过再分化形成完整的再生植株。
（4）①杂种植株含有两个亲本的遗传物质，据图可知，1、3、5、6含有两个亲本的遗传物质，属于杂种植株。
②棉酚主要分布在茎、叶、苞片、铃壳及种子里的许多黑色细小的腺体中，对杂种植株可通过观察茎、叶黑色细小腺体的多少，筛选出低酚的杂种植物。
（5）上述培育棉花新品种所用到的生物技术称为植物体细胞杂交技术，植物体细胞杂交技术的原理：细胞膜的流动性、细胞的全能性。
19.【答案】（1） 逆转录酶 产生已免疫B细胞 既能无限增殖，又能产生特异性抗体 （2）（专一）抗体 改造或者合成基因
1、单克隆抗体的制备流程：人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，通过培养获得的杂交瘤细胞得到单克隆抗体。
2、动物细胞培养需要满足以下条件：
（1）充足的营养供给--微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。
（2）适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。
（3）无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理，通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染，此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。
（4）气体环境：95%空气+5%CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。
【详解】（1）过程①是逆转录过程，常用的酶是逆转录酶；向小鼠体内注射抗原蛋白的目的是引起小鼠的特异性免疫，使小鼠产生已免疫的B淋巴细胞；细胞Ⅱ为杂交瘤细胞，具有既能无限增殖，又能产生特异性抗体的特点。
（2）对于转基因成功的细胞Ⅱ还要进行克隆化培养和抗体检测，以确保细胞能产生特异性抗体。
（3）可以利用蛋白质工程技术对抗H7N9抗体进行改造以延长其体外保存的时间，蛋白质工程的操作手段有改造基因和合成基因。
（4）抗体主要发挥靶向运输作用，即通过特异性结合靶细胞表面抗原，将连接的药物输送到靶细胞；药物发挥治疗效应，杀伤靶细胞
20. (1) EcoRⅠ和PstⅠ　反向连接　(2) 能　不能　(3) 放射性同位素(或荧光)　抗人血清蛋白(HSA)的抗体　(4) 内质网 高尔基体 　HSA　(5) 显微注射　受精卵　性别和年龄
解析：(1) 据图1可知，BamH Ⅰ会切割目的基因，TthⅢ 1会切割质粒中的复制原点，而EcoRⅠ和PstⅠ这两种酶能切割质粒和目的基因，不破坏Neor抗性基因和复制原点等，且能得到不同的黏性末端，避免质粒和目的基因自连及反向连接，因此在构建基因表达载体时，选择EcoRⅠ和PstⅠ作为切割质粒和目的基因的限制酶可提高目的基因和载体的正确连接效率。
分析题图1可知，Pst Ⅰ破坏了氨苄青霉素抗性基因(Ampr)，构建的重组质粒无氨苄青霉素抗性，但具有新霉素抗性基因，而甲培养基中含有新霉素，因此，含重组质粒的受体细胞能在甲培养基上能生存；乙培养基中含有氨苄青霉素，能杀死含有目的基因的受体细胞，不能在乙培养基中生存。
农杆菌细胞内含有Ti质粒，当它侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的T DNA(可转移的DNA)转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上，所以将农杆菌与水稻受体细胞混合后共同培养，旨在让Ti质粒的T DNA进入水稻受体细胞；目的基因片段作为探针检测目的基因是否整合到受体细胞的染色体DNA上，常用荧光标记(或放射性同位素标记)；为检测目的基因的表达情况，可提取受体细胞的蛋白质，利用的原理是抗原—抗体特异性结合，所以用抗人血清蛋白(HSA)的抗体进行杂交实验来检测血清蛋白(HSA)。(4) 由于大肠杆菌为原核生物，无生物膜系统，而水稻为真核生物，具有生物膜系统，而人体合成的初始HSA多肽，需要经过生物膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性，因此与途径Ⅱ相比，选择途径Ⅰ获取rHSA的优势是水稻是真核生物，具有生物膜系统，能对初始rHSA多肽进行高效加工；为证明rHSA具有医用价值，需确认rHSA生物活性和功能与人的血清蛋白(HSA)是否一致。
(5) 将重组质粒通过显微注射法导入动物的受体细胞时，常选用受精卵作为受体细胞，主要原因是动物受精卵具有发育的全能性，由于生物界共用一套遗传密码子，所以人血清白蛋白基因能在山羊膀胱上皮细胞中表达出相应的蛋白质；“乳腺细胞生物反应器”只能从哺乳期雌性动物的乳汁中获取产物，与“乳腺细胞生物反应器”相比，“膀胱生物反应器”的优点是雌性和雄性动物的尿液中都可提取到产物，且不受性别、年龄等限制，因而受体来源更广泛。
21. (1) 设计特异性引物　凝胶电泳　(2) 相同　Sau3AⅠ　(3) B、C　编码区　基因突变　(4) ⑤ 启动子、终止子　保证目的基因能够转录(表达)
解析：(1) 利用PCR技术克隆出SLA 2基因的关键是根据目的基因两端的碱基序列设计特异性引物。扩增后的产物可依据基因片段的大小，利用凝胶电泳技术初步鉴定该基因。
据图可知，限制酶BclⅠ与Sau3AⅠ识别的序列不同，但是切割后形成的黏性末端相同，都是—GATC—，其中Sau3AⅠ在该DNA上的切点可能更多。
PCR是在体外进行DNA复制，原理是DNA复制；引物需与经限制酶剪切过的黏性末端互补配对，为防止基因发生自身环化和反向链接，需要双限制酶切，经分析表格中相关限制酶的切割位点和引物序列，氨苄青霉素抗性基因可被BclⅠ识别，Sau3AⅠ为BclⅠ的同尾酶，也可切割氨苄青霉素抗性基因，故选择XbaⅠ和NotⅠ两种限制酶，使切割后的质粒A和扩增后的SLA 2基因能正确连接，可知对应引物中应分别包含XbaⅠ和NotⅠ的识别序列，根据XbaⅠ和NotⅠ的识别序列，可知B、C符合题意。研究人员同时对基因的5′端序列进行密码子优化设计(如GGT优化为GGC)，由于编码蛋白质的基因序列位于编码区，故优化的序列位于基因的编码区，这种优化改变了基因结构，属于基因突变。
(4) 根据题意“构建真核表达质粒后，转染猪肾上皮细胞”可知，过程②和过程⑤中均构建了重组质粒，其中属于真核表达质粒是在过程⑤中构建的，这类表达质粒上必须有目的基因、启动子、终止子等结构，其目的是保证目的基因能够转录(表达)。

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