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永春县第一中学2024-2025学年高二下学期4月期中生物试题
一、单选题
1．果酒口感较好，且富含维生素和人体所需的氨基酸等，因此广受欢迎。下列关于传统果酒制作的叙述，正确的是（ ）
A．酿酒之前应该用体积分数为95%的酒精对器具进行消毒
B．制作果酒时应该先去除枝梗和腐烂的籽粒再用清水冲洗
C．制作果酒时每隔12小时将瓶盖打开的目的是排出多余的CO2
D．果酒发酵时发酵瓶内液面不再有气泡产生，说明发酵基本完毕
2．液体深层培养是指以获得大量发酵产物为目的的发酵罐大容量液体培养，可通过调节培养液的pH和温度、营养条件以及气体环境促使微生物迅速生长，产生大量代谢产物，是发酵工业生产的基本培养方法。下列叙述正确的是（　　）
A．传统发酵技术不需要防止杂菌污染，液体深层培养前需要对发酵罐中的培养基进行严格灭菌
B．单细胞蛋白是从微生物细胞中提取的蛋白质，可作为食品添加剂、微生物饲料等
C．可通过过滤、沉淀等方法获得微生物代谢产物
D．利用液体深层培养进行谷氨酸发酵生产应在中性或弱碱性条件下进行
3．我国科学家将辽宁绒山羊的卵母细胞去核，并取出吕梁黑山羊体细胞的细胞核，将二者结合，体外培养获取胚胎，再移植到另一只辽宁绒母山羊体内孕育，最终成功培育出体细胞克隆黑山羊。下列叙述错误的是（ ）
A．上述克隆过程中需将去核的辽宁绒母山羊卵母细胞培养到MⅡ期
B．培养吕梁黑山羊体细胞时，常在培养液中加入动物血清以提供天然营养
C．克隆黑山羊兼具辽宁绒山羊和吕梁黑山羊的遗传物质，属于有性生殖产物
D．体细胞克隆技术对促进优良品种繁育和增加濒危品种数量均具有重要实践意义
4．如图表示植株A（杂合子Aa）和植株B培育植株①②③④⑤的过程，下列说法正确的是（ ）
A．培育植株①的过程为单倍体育种，获得的植株为纯合子
B．选择植物的愈伤组织进行诱变处理获得优质的突变体，未体现细胞的全能性
C．需要通过植物组织培养技术获得的植株只有①③④
D．植株①②④⑤与植株A基因型相同的概率分别是0、0、1、0（不考虑基因突变）
5．张九龄有诗云：红泥乍擘绿蚁浮，玉碗才倾黄蜜剖。寥寥数语生动描绘了色香味俱全的客家米酒。客家米酒的特点之一是甜腻入口，这与其酿酒过程使用的甜酒曲有关，甜酒曲主要含有根霉、毛霉和酵母菌等微生物。下列有关酿酒过程的叙述，错误的是（ ）
A．若酿制的米酒呈酸味，可能与长期封闭酿酒容器有关
B．酵母菌在密闭酿酒容器内初期种群数量呈近似J型增长
C．客家人用稻草为酿酒容器“保暖”，主要目的是为了促进酵母菌增殖
D．根霉、毛霉与酵母菌构成竞争关系，应控制酒曲中各种微生物的比例
6．研究人员将粉蓝烟草和朗氏烟草体细胞进行融合培育出新的烟草品种，其大致过程为：制备原生质体→促进原生质体融合→融合细胞→愈伤组织→烟草幼苗。同时研究人员探究了PEG 对原生质体融合的影响，结果如下表所示。下列相关叙述正确的是（　　）
编号 PEG用量（μL） PEG：原生质体悬浮液 融合率（%） 细胞碎片
1 20 1：5 6.5 +
2 40 2：5 15.5 +
3 60 3：5 19.4 +
4 80 4：5 20.4 ++
5 100 1：1 21.6 +++
注：原生质体悬浮液用量100μL，融合25 min。“+”表示很少；“++”表示少量；“+++”表示较多。
A．制备原生质体时需用含纤维素酶和果胶酶的低渗溶液处理细胞
B．若PEG对原生质体处理时间远长于 25 min，则融合率会提高
C．由实验结果可知，促进原生质体融合的较适 PEG用量为60μL
D．细胞融合完成的标志是再生出细胞壁，其经再分化形成愈伤组织
7．乌珠穆沁白山羊为绒肉兼用型品种，当前因种群小、近亲繁殖而出现品种资源危机。现利用生物技术开展保护工作，相关叙述正确的是（ ）
A．动物细胞培养液中可添加一定量的抗生素以保持无菌无毒的环境
B．核移植技术中需去除MⅡ期卵母细胞中的纺锤体—染色体复合物
C．胚胎移植操作前通常需对多只受体进行超数排卵和同期发情处理
D．为提高胚胎的利用率，可选用未分化的囊胚和桑葚胚进行胚胎分割
8．第三代试管婴儿技术（PGD/PGS）是对早期胚胎细胞进行基因诊断和染色体检测后再进行胚胎移植,流程如图所示。图中检测包括PGD、PGS（PGD是指胚胎植入前的基因诊断,PGS是指胚胎植入前的染色体数目和结构检测）。下列叙述正确的是（　　）
A．采集的卵子可直接与获能的精子进行受精
B．PGD和PGS技术可分别用于筛选红绿色盲和唐氏综合征
C．将成熟的精子放入ATP溶液中进行获能处理
D．“理想胚胎”需培养至桑葚胚或原肠胚才能植入子宫
9．PCR是一种在体外扩增DNA片段的技术，其最大的特点是能将微量的DNA大幅度扩增。引物的设计对DNA扩增至关重要，引物的长度一般为15~30bp，常用的是18~27bp，过长或过短均会影响产物的形成，如过短的引物会更容易与非目标序列结合，过长的引物会导致其延伸温度过高。下列相关叙述正确的是（ ）
A．扩增DNA时加入的引物使DNA连接酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸
B．引物内部以及两种引物之间不能有互补的碱基序列，否则会造成引物自连为双链
C．引物过短会导致复性的特异性变差，可能会在模板链上出现多个连接位点
D．引物过长，子链延伸时影响TaqDNA聚合酶的活性，直接影响氢键的形成
10．“筛选”是生物技术与工程中常用的技术手段。下列叙述错误的是（ ）
A．胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选
B．发酵生产中，性状优良的菌种可以从自然界中筛选
C．培育转基因抗虫棉时，需从分子水平及个体水平进行筛选
D．制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生多种抗体的杂交瘤细胞
11．荧光定量PCR检测技术可应用于新冠病毒核酸检测。其原理是在PCR反应体系中加入引物的同时，加入与某条模板链互补的荧光探针。当耐高温的DNA聚合酶催化子链延伸至探针处，会催化水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号。每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子产生（如图），通过实时检测荧光信号强度，可得Ct值（荧光信号达到设定阈值时所经历的循环次数）。下列关于该技术叙述错误的是（　　）
A．PCR反应体系需加入模版、脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶
B．耐高温的DNA聚合酶可催化形成磷酸二酯键和断开磷酸二酯键
C．最终监测的荧光强度与起始时反应管内目标DNA含量呈正相关
D．Ct值越大表明检测样本中病毒数目越多，患者的危险性越高
12．下图表示PCR过程中某个阶段反应体系的情况，①②③④表示相关物质，L、R表示方向。下列叙述正确的是（ ）
A．②链从L到R的方向为3′→5′，①②链均可作为子链合成的模板
B．PCR过程需要通过解旋酶断开氢键，且为边解旋边复制
C．以1个DNA为模板经3次循环需消耗7个引物③
D．物质③的5′端添加了某序列，至少需经3次循环才可获得该序列的双链产物
13．如图是“DNA的粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图，相关叙述正确的是（ ）
A．图1中溶液a是NaCl溶液，玻璃棒应沿不同方向进行搅拌
B．图1中丝状物为粗提取的DNA，其与蛋白质均可溶于酒精
C．若图2试管中溶液的液面高于烧杯中的液面，可能导致加热不充分
D．图2试管2起对照作用，溶液b是溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液
14．研究发现，大豆GmNF-YA19基因在干旱胁迫中有响应。科研人员利用PCR扩增GmNF-YA19基因，构建GmNF-YA19基因表达载体并转化烟草，实验过程如图1、2所示下列说法错误的是（ ）

A．PCR扩增GmNF-YA19基因的前提是根据已知核苷酸序列合成两种引物
B．为获得能正确表达目的基因的重组质粒，应选用限制酶KpnI、EcoRI进行切割
C．终止子为一段DNA序列，其作用是使转录在所需要的地方停下来
D．重组质粒转化烟草后，可使用含氨苄青霉素的培养基来筛选目的细胞
15．如图是几种不同限制性内切核酸酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列叙述正确的是（ ）
A．以上DNA片段由5种限制酶切割后产生，切割产生①片段的限制酶识别序列由5个核苷酸组成
B．限制酶只存在于原核生物中，作用的化学键为磷酸二酯键
C．上述能进行连接的两个黏性片段，其连接后形成的DNA分子是
D．两个③片段只能被E.coliDNA连接酶催化连接形成重组DNA
16．小鼠体细胞克隆胚胎着床后胎盘发育显著异常可能是与克隆胚胎中H3K27me3印记基因过度表达有关，H3K27me3印记基因敲除极大提高了体细胞克隆的成功率。科学家分别测量H3K27me3印记基因敲除的克隆小鼠（甲组）、H3K27me3印记基因不敲除的克隆小鼠（乙组）和受精卵来源的小鼠（丙组）的体重和胎盘直径，结果如下图所示。下列相关分析错误的是（ ）
A．克隆胚胎过大可能是克隆胚胎着床后成活率低的原因
B．克隆胚胎过大的原因可能是克隆胚胎的胎盘过大
C．H3K27me3印记基因过度表达抑制胎盘的发育
D．H3K27me3印记基因的表达产物可能影响早期胚胎滋养层细胞的发育
17．我国科研人员将番木瓜环斑病毒（PRSV，一种单链RNA病毒）的复制酶基因转入番木瓜，培育出抗病毒番木瓜“华农一号”。“华农一号”能产生与PRSV的RNA形成局部双链的RNA，阻止病毒的复制。下列分析错误的是（　　）
A．培育抗病毒番木瓜“华农一号”需要用到植物组织培养技术
B．培育“华农一号”时，可以用不同的限制酶切割质粒和目的基因
C．PCR扩增复制酶基因时，反应体系中需加入引物和TaqDNA聚合酶
D．“华农一号”通过表达出复制酶使番木瓜获得对PRSV病毒的抗性
18．基因组印记(通过甲基化实现受精卵中来自双亲的两个等位基因一个表达另一个不表达)阻碍了哺乳动物孤雌生殖的实现。某研究团队利用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术，改变了小鼠生殖细胞的“基因组印记”，使其“变性”，然后将一个极体注入修饰后的次级卵母细胞(类似受精作用)，最终创造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如下图所示。下列相关叙述正确的是（ ）

A．体外培养卵母细胞时，为防止污染，需将培养皿置于二氧化碳培养箱中进行培养
B．甲基化可能会关闭基因的活性，对某些基因进行去甲基化处理有利于其表达
C．“孤雌小鼠”的诞生过程没有精子参与，其基因型与提供卵母细胞的雌鼠相同
D．移植后的囊胚进一步扩大，会导致滋养层破裂，胚胎从其中伸展出来
19．新冠病毒通过表面的S蛋白与靶细胞膜上的血管紧张素转化酶2（ACE2）结合实现入侵。2022年3月，国家卫健委印发《新冠病毒抗原检测应用方案(试行)》，增加抗原检测作为核酸检测的补充手段。抗原检测采用双抗体夹心法，其原理如下图。结合垫处含有足量的、可移动的、与胶体金结合的抗体1，T处固定有抗体2，抗体1和抗体2与新冠病毒表面同一抗原N蛋白的不同位点发生特异性结合，呈红色。C处固定有抗体1的抗体，与抗体1结合也呈红色。下列叙述正确的是（ ）

A．若检测结果为阳性，检测过程中抗原-抗体的特异性结合发生4次
B．若待测样本中不含新冠病毒，显色结果为C处和T处均出现红色
C．用单克隆抗体制备技术制备抗体1，先给小鼠注射纯化的S蛋白
D．灭活病毒疫苗制备前期，需要用具有ACE2的细胞培养新冠病毒
20．甲基消草磷属于抗微管除草剂，可以使植物的微管系统彻底解聚，从而导致有丝分裂中期受到抑制。研究发现甲基消草磷能有效诱导玉米花药培养的单倍体愈伤组织染色体加倍，可由此获得纯合的玉米新品种。下列叙述错误的是（ ）
A．甲基消草磷的功能类似秋水仙素，可以使染色体数目加倍
B．利用玉米花药进行单倍体育种需要植物组织培养技术的支持
C．上述玉米的育种原理为染色体变异，染色体加倍发生在愈伤组织形成前
D．秋水仙素和甲基消草磷作用于有丝分裂的主要时期分别是前期和中期
21．甲植物具有由核基因控制的多种优良性状，远缘植物乙的细胞质中存在抗除草剂基因。科研人员通过以下途径培育出具有抗除草剂性状的优良品质丙。图中字母表示过程、数字序号表示细胞。

下列相关叙述正确的是（ ）
A．过程A应置于高渗溶液中处理，再将①②诱导融合成③
B．过程B无需筛选鉴定，形成杂种细胞后即可接种到培养基中
C．过程C、D采用固体培养基，添加激素的种类和比例相同
D．杂种植物丙为二倍体，有的配子不含抗除草剂基因
22．水体养殖过程中常会产生硝酸铵等而导致水体污染，反硝化细菌能在无氧环境中通过反硝化作用将硝酸铵转化为氮气。某人利用如图所示的方法从龙虾养殖池中筛选分离出了除氮效率高的反硝化细菌用于污水处理。下列叙述正确的是（ ）

注：BTB培养基初始pH为6.8，BTB是酸碱指示剂，酸性条件下为黄色，中性条件下为绿色，碱性条件下为蓝色
A．需将BTB培养基先灭菌后调节pH，以利于反硝化细菌的生长
B．挑选显蓝色的单菌落在固体培养基上划线分离，以获得纯菌株
C．BTB培养基应以硝酸铵为唯一氮源，不含氮源的培养基不能用于微生物的培养
D．通过观察未接种的BTB培养基表面是否有菌落，可判断该培养基是否起到选择作用
23．实验小组从苏云金芽孢杆菌中提取Bt毒蛋白，注射到小鼠体内使小鼠产生相应的抗体，再从转基因抗虫棉中提取蛋白质电泳分离后和抗体杂交，然后加入带有特殊标记的抗体以显示出杂交带，具体过程如图所示，下列说法错误的是（ ）

A．从转基因抗虫棉中分离出的蛋白质相当于抗原
B．二抗可能是带有放射性同位素标记的一抗的抗体
C．若未显示出杂交带，则说明目的基因未导入受体细胞
D．图示操作的目的是检测转基因棉花是否产生Bt毒蛋白
24．科研人员将寒带地区海鱼中的抗冻基因转入千禧果细胞中，成功培育出抗冻千禧果。下图为培育过程中使用的Ti质粒示意图，其中Vir区的基因活化能促进T-DNA的加工和转移，下列叙述正确的是（　　）

A．构建基因表达载体时，最好选择限制酶Ⅱ和Ⅲ来切割质粒
B．利用PCR扩增抗冻基因，需提前检测抗冻基因的全部碱基序列
C．Vir区的基因活化促进抗冻基因整合到千禧果细胞的染色体DNA上
D．利用含卡那霉素的培养基可筛选出成功导入抗冻基因的千禧果细胞
25．一次性口罩的主要成分为聚丙烯纤维(PP)，某科研团队准备从土壤中筛选出高效降解一次性口罩的细菌。图甲表示PP分解菌分离与计数的过程，6号试管涂布的三个平板的菌落数为550、601、688；7号试管涂布的三个平板的菌落数为58、73、97；8号试管涂布的三个平板的菌落数为8、15、28。图乙表示在培养基中加入能与PP结合而显色的染色剂，目的菌落周围出现透明圈的情况。下列说法正确的是（ ）
A．图甲、图乙所用培养基分别为选择培养基和鉴别培养基，都以PP作为唯一碳源
B．图甲、图乙所用接种方法分别为稀释涂布平板法和平板划线法，都需在酒精灯火焰旁进行
C．1 g土壤样品中含有PP分解菌的估算数目是7．6×1010个，此数值一般偏大
D．可选择图乙培养基中d/D比值大的PP分解菌作为目的菌种推广使用
二、解答题
26．Ⅰ乳糖酶缺乏症患者体内乳糖酶（LCT）的分泌量较少，导致患者无法完全消化母乳或牛乳中的乳糖，从而引起非感染性腹泻。工业化生产无乳糖奶粉时，需用乳糖酶将奶中的乳糖除去。为了提高乳糖酶的产量，科研人员从牧民的奶骼（一种近似固体的发酵牛奶制品）中分离纯化出了能高效生产乳糖酶的酵母菌，下图为流程示意图。请回答下列问题：
注：X-gal为乳糖酶的显色底物，乳糖酶可以将无色的X-gal分解成半乳糖和蓝色的溴靛蓝。
(1)将奶酪悬浮液接种到培养基甲中的目的是 。
(2)若要将培养基甲中的菌液稀释10倍，应进行的操作是从培养基甲中吸取1mL的菌液，置于盛有 的试管中。
(3)X-gal是一种无色物质，能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色。从含X-gal的培养基中挑选目的菌时，应挑选的是 。
Ⅱ科研工作者也利用生物技术培育出转基因低乳糖奶牛。如图为转基因低乳糖奶牛的培育流程。请据图分析回答下列问题：
(4)如图所示，转基因低乳糖奶牛的培育过程涉及的生物技术有基因工程、 （写出两项）
(5)科学家在构建重组质粒T时，首先采用PCR技术对LCT基因进行扩增，在扩增目的基因的操作过程中，加入的物质有：模板DNA、引物、4种 以及耐高温的DNA聚合酶。若一个该DNA分子在PCR仪中经过4次循环，需要 个引物。
(6)从分子水平上检测转基因牛细胞中LCT基因是否表达的方法是 。
(7)在转基因低乳糖奶牛的乳腺细胞中，可检测到的物质有_______（填字母）。
A．LCT基因 B．LCTmRNA
C．LCT D．LCT的抗体
27．我国中科院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖。实验流程如图所示，请回答下列问题：
(1)体内受精时，在精子触及卵细胞膜的瞬间， 会迅速产生生理反应阻止后来的精子进入。 作为受精的标志（写出两项）。
(2)用 对雌性小鼠进行 处理可得到大量卵母细胞，卵细胞转化为phESC的过程相当于植物组织培养中的 过程。
(3)不考虑致死情况，得到的孤雄小鼠性染色体组成为 。利用胚胎分割的方法对乙进行处理，得到了多只孤雄小鼠，在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意 。
(4)利用这些孤雄小鼠作为实验材料进行用于医学研究的优点是 。（从遗传物质角度分析）
三、实验题
28．成纤维细胞生长因子（FGF20）会在肺癌、胃癌和结肠癌细胞中过量表达，可作为潜在的肿瘤标志物。因此抗FGF20抗体可用于癌症的早期诊断筛查。研究者设计如图流程制备抗FGF20单克隆抗体。请回答下列问题：
(1)给小鼠注射FGF20，是为了获得 。②过程先诱导细胞融合，再进行筛选，经筛选获得的杂交瘤细胞的特点是 。
(2)③过程需对得到的杂交瘤细胞进行 和 ，经多次筛选，以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
(3)某些肿瘤细胞表面的PD-LI与细胞毒性T细胞（CTL）表面的PD-I结合能抑制CTL的免疫活性，导致肿瘤免疫逃逸。免疫检查点疗法使用单克隆抗体阻断PD-LI和PD-I的结合，可恢复CTL的活性，用于肿瘤治疗。为进一步提高疗效，研究者以黑色素瘤模型小鼠为材料，开展该疗法与化疗的联合治疗研究。部分结果见图。
①据图分析， 疗法的治疗效果最佳，推测其原因是 。
②某兴趣小组基于现有抗体——药物偶联物的思路提出了两种药物设计方案。方案一：将化疗药物与PD-L1单克隆抗体结合在一起。方案二：将化疗药物与PD-1单克隆抗体结合在一起。你认为 （填“方案一”或“方案二”）可行。
29．番茄不耐寒，冬季容易冻坏，难以储藏。我国科研人员从某植物中提取了一种抗冻基因AtCOR15a，经过一系列过程获得转基因抗冻的番茄新品种，操作流程如图。回答下列问题：
(1)用PCR技术扩增AtCOR15a基因时需要添加引物，引物的作用是 。
(2)如果要将AtCOR15a基因与质粒正确构建重组DNA分子，一般采用双酶切法，据图分析选用的两种限制酶组合是 。双酶切法的优势是 。
(3)图中是采用 法将目的基因转移到番茄细胞中，并将其整合到该细胞的 上。
(4)为了提高AtCOR15a基因的表达能力，可将AtCOR15a基因与外源强启动子连接，如下图所示。
（注：图中①、②、③、④表示引物）
利用PCR检测上述连接是否正确，可选择的引物组合是 。
(5)为了进一步提高番茄的储藏时间，可从该植物体内提取ErsⅠ基因（乙烯受体基因），按照下图流程将ErsⅠ基因重新导回该植物，致使该植物原有ErsⅠ基因翻译受抑制。已知限制酶EcoRⅠ和XhoⅠ、BamHⅠ切割后露出的黏性末端碱基序列不同，据图分析，提取的目的基因A、B两端需分别添加 、 的识别序列。
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 D D C D A C B B C D
题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
答案 D C C B C C D B D C
题号 21 22 23 24 25
答案 D B C C A
26．(1)增加目的菌的数量（或进行扩大培养）
(2)9mL的无菌水
(3)直径最大的蓝色菌落
(4)核移植、胚胎移植等
(5) 脱氧核苷酸 30
(6)抗原-抗体杂交
(7)ABC
27．(1) 透明带和卵细胞膜 在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体
(2) 促性腺激素 超数排卵 脱分化
(3) XX、XY或者YY 将内细胞团均等分割
(4)遗传物质相同，可以基本排除由基因不同造成的个体差异；同时可利用这些遗传背景相同的动物通过它们之间的对比来分析致病基因
28．(1) 更多的B细胞 既能迅速大量增殖，又能产生抗体
(2) 克隆化培养 抗体检测
(3) 联合 该疗法既发挥了化疗药物的作用，也增加了活化的CTL数量 方案一
29．(1)使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始复制
(2) BamH Ⅰ和Hind Ⅲ 防止目的基因与质粒自身环化，确保目的基因与质粒正向连接
(3) 农杆菌转化 染色体DNA
(4)①、③
(5) XhoI EcoRI

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