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湖南省常德市汉寿县第一中学2024-2025学年高二下学期5月期中生物试题
学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________
一、单选题
1．胚胎工程等生物技术促进了具有优良性状和经济价值的动物快速繁殖和应用。下列相关叙述正确的是（　　）
A．核移植时需要用物理、化学或者灭活的病毒等方法激活重构胚
B．进行胚胎移植前，要对供体和受体进行免疫检查，以防止发生免疫排斥反应
C．哺乳动物卵子形成过程中，减数第二次分裂是不连续的
D．动物排出的卵子成熟程度不同，都要在卵巢中进一步发育到MⅡ期才具备受精能力
2．下列有关限制酶的叙述，正确的是（ ）
A．限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越小
B．—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制酶切出的黏性末端碱基数相同
C．只有用相同的限制酶处理含目的基因和质粒，才能形成重组质粒
D．用限制酶切割DNA分子中部，获得一个目的基因时被水解的磷酸二酯键有2个
3．下列有关变异与育种的叙述中，正确的是（　　）
A．某植物经X射线处理后未出现新的性状，则没有新基因产生
B．利用生长素处理得到无子备茄的过程中发生的变异是不可遗传的
C．二倍体植株的花粉经离体培养便可得到稳定遗传的植株
D．通过基因工程获得的抗虫棉，其原理是基因突变
4．我国科研人员利用大鼠、小鼠两个远亲物种创造出世界首例异种杂合二倍体胚胎干细胞（AdESCs），具体流程如图。下列叙述正确的是（　　）

A．干细胞存在于多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等
B．单倍体囊胚中的细胞还没有分化
C．培养AdESCs时应定期更换培养液，因为培养液中各种物质的含量都会越来越少
D．AdESCs的染色体组数与大鼠——小鼠体细胞融合的杂种细胞相同
5．培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是（ ）
A．植物组织培养 B．植物体细胞杂交
C．花药离体培养 D．细胞核移植
6．研究人员将一种海鱼的抗冻蛋白基因afp整合到土壤农杆菌的Ti质粒上，然后用它侵染番茄细胞，获得了抗冻的番茄品种。下列相关表述正确的是（　　）
A．afp基因是培育抗冻番茄用到的目的基因
B．构建含有afp基因的Ti质粒需要限制酶、DNA连接酶和核酸酶
C．只要检测出番茄细胞中含有afp基因，就代表抗冻番茄培育成功
D．抗冻蛋白基因afp导入番茄细胞前，一般先用Ca2+处理
7．细胞融合不仅在自然条件下常见，在现代生物技术中也被经常应用。下图为细胞融合的简略过程，下列说法正确的是（　　）
A．细胞融合过程都涉及膜的流动性，常用聚乙二醇、电激等进行促融处理
B．若细胞a、b分别取自优良奶牛，则采集的卵母细胞和精子可直接体外受精
C．若细胞a、b分别代表白菜、甘蓝细胞，则完成融合的标志为核的融合
D．若细胞d是杂交瘤细胞，则在选择性培养基中筛选后即可大规模培养生产单抗
8．下列有关细胞工程的叙述，不正确的是（ ）
A．细胞工程应用的是细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法
B．可以通过在细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人的意愿来改变细胞核内的遗传物质
C．可以通过在细胞、细胞器或组织水平上的操作，有目的地获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品
D．根据操作对象的不同，可以分为植物细胞工程和动物细胞工程两大领域
9．花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。科研人员利用植物体细胞杂交技术获得抗黑腐病杂种植株。下列相关叙述正确的是（ ）
A．原生质体需放在无菌水中以防杂菌污染
B．需要使用胰蛋白酶除去细胞壁
C．融合后体积较大的原生质体一定是杂种细胞
D．进行黑腐病接种实验可鉴定抗病杂种植株
10．科研人员制备抗δ病毒N蛋白的单克隆抗体，并鉴定其与N蛋白的结合位点。将N蛋白第91-170位氨基酸（aa）分成3个片段（图a），检测该抗体与3个片段结合的情况，电泳结果如图b。相关叙述错误的是（　　）
A．用N蛋白免疫小鼠即可获得单克隆抗体
B．体外培养杂交瘤细胞时需加入动物血清
C．第110-130位氨基酸之间存在结合位点
D．对照组需添加无关抗原
11．中科院动物所利用大熊猫细胞和兔卵母细胞克隆出世界上第一批大熊猫早期胚胎，下列有关叙述正确的是（ ）

A．可用性激素对兔进行超数排卵来获取更多的卵母细胞
B．去核的实质是去除兔卵母细胞中核膜包被的细胞核
C．可用电刺激的方法激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育进程
D．该过程涉及动物细胞培养、动物细胞融合和早期胚胎培养等技术
12．动物体细胞核移植技术的原理是动物细胞核具有全能性。下列说法正确的是（　　）
A．为提高成功率，将卵母细胞培养到MⅡ期，在尽可能短的时间内去除纺锤体一染色体复合物并注入体细胞
B．需用电刺激、Ca2+载体和聚乙二醇等激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程
C．胚胎发育到桑葚胚阶段，胚胎内部开始出现含有液体的腔
D．早期胚胎培养需要无菌的O2和CO2，O2是细胞代谢所必需，CO2的主要作用是调节培养液的pH
二、多选题
13．若某种限制性核酸内切酶的识别序列是CCTAGG，它在C和C之间切断线性DNA。下图表示用该酶处理某基因后产生的片段。下列有关叙述正确的是（ ）
A．该正常基因中有3个CCTAGG序列
B．产生的DNA片段可用DNA聚合酶连接起来
C．用该酶处理得到图示基因片段要水解3个磷酸二酯键
D．若该基因某处有一个CCTACG突变为CCTAGG，用该酶处理后将产生5个片段
14．下列有关同源染色体的叙述，不正确的是（　　）
A．能进行有丝分裂的细胞都含有同源染色体
B．同源染色体上都有相对应的等位基因
C．位于同源染色体上的非等位基因之间可以发生基因重组
D．减数第一次分裂后期，着丝点断裂导致同源染色体相互分离
15．下列有关动物细胞工程操作的叙述，错误的是（　　）
A．动物细胞培养是动物细胞工程的基础，在进行细胞培养时，培养基中除了加入细胞所需的各种营养物质外，还需要加入琼脂
B．动物细胞融合与植物体细胞杂交都能形成杂种个体
C．干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等，有着自我更新能力及分化潜能
D．动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植
16．重组腺病毒载体疫苗是通过将腺病毒中与复制相关的基因剔除，替换为目标病毒的抗原蛋白基因而研发的疫苗。图为其结构示意图。下列叙述正确的是（ ）
A．腺病毒载体疫苗构建过程中利用了限制酶和DNA连接酶
B．抗原蛋白基因不属于抗原，不能直接引起机体免疫反应
C．注射疫苗后，机体可产生与纤突蛋白特异性结合的抗体
D．需要采用完全培养基培养重组后的病毒以大规模生产疫苗
三、非选择题
17．重组人血小板生成素（rhTPO）是一种新发现的造血生长因子，下图为科学家通过培育出转基因山羊生产rhTPO的过程。其中编号①-⑨表示过程，A表示含有rhTPO基因的DNA，四种限制性内切核酸酶的识别序列及切割位点见下表，请回答下列问题：
限制酶 BamHI BglⅡ HindⅢ XbaI
识别序列和切割位点 G↓GATCC A↓GATCT A↓AGCTT T↓CTAGA

(1)②过程需要的限制性内切核酸酶是 （从题干表格中选取）。为了使目的基因能够表达，构建重组质粒时，目的基因的上游必须有 ，其为 酶的识别和结合部位，目的基因的下游必须有 。
(2)体外受精时需要将卵母细胞培养至 期。将重组质粒导入受精卵的方法是 。
(3)为了一次获得较多的卵子，可通过注射 激素对供体母羊进行超数排卵处理；可从转基因动物分泌的乳汁中获得重组人血小板生成素，人们把这种转基因动物称为 。
(4)培育转基因羊的过程，用到的胚胎工程技术有 。
四、解答题
18．“端稳中国碗，装满中国粮”，为了培育好中国种，科研人员在基因工程育种领域开展了大量的研究。有研究发现花生细胞中的S基因在抗真菌类病害中发挥着重要作用。科研人员提取花生细胞中S基因的mRNA，通过基因重组技术，以Ti质粒为表达载体，导入水稻叶片外植体细胞中，使水稻获得了对稻瘟病（由真菌感染引起，导致水稻减产）的抗性。据图示信息回答下列问题：

(1)科学家提取花生细胞的mRNA后通过 过程获得其cDNA，经PCR技术扩增S基因。通过该方法获得的S基因与花生细胞中的S基因的DNA序列是否完全一致？ （填“完全一致”或“不完全一致”），原因是 。
(2)用PCR技术扩增S基因时，需要设计引物，引物的作用是 。为了使目的基因能够被限制酶切割，需要在引物的 （填“3'端”或“5'端”）添加限制酶识别序列。
(3)为了成功构建重组表达载体，确保目的基因插入载体中方向正确，最好选用 （填图中限制酶）酶切割S基因的cDNA和载体。用农杆菌侵染水稻叶片外植体，其目的是 。
(4)转基因水稻是否表现出了抗性，需要进行个体水平的检测，检测的方法是 。
19．白菜和甘蓝均是可育的二倍体，利用白菜和甘蓝可以培育新植物体，如图A、B分别表示白菜和甘蓝的原生质体：
(1)可采用 （写一点）等方法诱导这两原生质体融合为C．则C细胞再生出细胞壁后需要通过 技术才能发育成杂种植株“白菜-甘蓝”，该技术的原理是 ，该实施过程中无菌操作，原因是 ，该过程也需要更换培养基，原因主要是 。
(2)若白菜和甘蓝杂交产生了子代，该子代 （填“可育”或“不可育”），原因是 。
20．2018年1月25日，《细胞》杂志报道了我国研究人员在世界上率先利用去甲基化酶（Kdm4d）的mRNA，经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴，作为研究癌症等人类疾病的动物模型如图为体细胞核移植技术培育食蟹猴的操作过程，请回答下列问题：
(1)2001年，美国科学家已经培育出胚胎细胞核移植猴。获得食蟹猴的体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是： 。
(2)进行过程①时，为提供成纤维细胞培养所需的无毒环境，应进行的实验措施是需定期 ，其目的是 。
(3)图中过程⑤的实质是早期胚胎在 条件下空间位置的转移。
(4)上述实验的突破之处是使用了去甲基化酶（Kdm4d）的mRNA，在确定其作用时，研究人员用正常培养液培养融合细胞得到A组实验数据，用正常培养液培养注入去甲基化酶（Kdm4d）mRNA的融合细胞得到B组实验数据。图中X为融合细胞发育成的胚胎数、Y为囊胚数、Z为内细胞团数。分析实验数据可知，Kdm4d的mRNA的作用是： 。
(5)图中融合细胞的形成也用到了动物细胞融合技术，基于动物细胞融合技术发展而来的杂交瘤技术是制备单克隆抗体的重要手段，其过程包含两次筛选，其中第二次筛选的目的是 ，用到的方法是 。单克隆抗体相比传统血清分离的多抗相比，具备的特点是 。
湖南省常德市汉寿县第一中学2024-2025学年高二下学期5月期中生物试题参考答案
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 C B B A A A A B D A
题号 11 12 13 14 15 16
答案 C A AD ABD AB ABC
17．(1) BamHⅠ、HindⅢ 启动子 RNA聚合 终止子
(2) 减数第二次分裂中 显微注射法
(3) 促性腺 乳腺生物反应器/乳房生物反应器
(4)早期胚胎培养、胚胎移植
18．(1) 逆转录或反转录 不完全一致 以花生细胞的mRNA通过逆转录过程获得的cDNA不含内含子、启动子和终止子等非编码序列
(2) 使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸 5'端
(3) XbaI、HindⅢ 通过农杆菌的转化作用，使目的基因进入植物细胞
(4)对转基因水稻植株接种相应的真菌，观察其是否患稻瘟病
19．(1) 聚乙二醇（PEG）融合法 植物组织培养 植物细胞的全能性 防止杂菌污染 诱导形成愈伤组织和诱导分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例和浓度不同
(2) 不可育 杂交子代细胞中无同源染色体，减数分裂时无法正常联会，无法产生正常配子，所以不可育
20．(1)体细胞分化程度高，恢复其全能性较难
(2) 更换培养液 防止细胞自身的代谢产物积累对细胞自身造成危害
(3)相同生理
(4)既能提高融合细胞发育成囊胚的成功率、又能提高囊胚中内细胞团的形成率
(5) 筛选出既能大量增殖，又能产生所需抗体的杂交瘤细胞 克隆化培养和抗体检测的方法 特异性强，灵敏度高，能大量制备

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