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泸化中学2024-2025学年高二下学期5月期中生物试题
一、单选题
1．“筛选”是生物技术与工程中重要的环节。下列叙述正确的是（　　）
A．用选择培养基筛选微生物，对照组不接种微生物，实验组接种微生物
B．诱导植物原生质体融合时，观察是否再生细胞壁可筛选异种融合细胞
C．制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞
D．胚胎移植前可取囊胚期内细胞团的细胞进行性别鉴定和遗传病筛查
2．稻瘟菌引起的水稻稻瘟病是危害最为严重的真菌病害之一，每年都给水稻生产带来重大的经济损失。土壤中某些微生物能合成并分泌几丁质酶，能抑制稻瘟菌的生长，可用于水稻稻瘟病的防治。科研人员试图从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株，通过微生物培养获得几丁质酶。下列相关叙述错误的是（ ）
A．筛选土壤中目的微生物时需用以几丁质为唯一碳源的培养基
B．纯化培养时，可选择稀释涂布平板法或平板划线法接种
C．在以几丁质为唯一碳源的培养基上生长的菌落均能分泌几丁质酶
D．利用能分泌几丁质酶的微生物对水稻稻瘟病进行的防治属于生物防治
3．植物组织培养技术在科学研究和生产实践中得到了广泛的应用。下列过程中不涉及植物组织培养技术的是（ ）
A．培育甘蓝一萝卜的体细胞杂交植株B．用秋水仙素处理二倍体西瓜幼苗获得四倍体植株
C．用植物茎尖培养脱毒苗D．将抗虫基因转入棉花体细胞中获得转基因抗虫棉
4．紫草细胞中富含紫草宁，科研人员利用紫草新生的营养芽进行培养获得愈伤组织，再进行细胞悬浮培养，以获得更多的紫草宁。下列叙述正确的是（　　）
A．紫草宁是紫草细胞生长和生存所必需的次生代谢物
B．愈伤组织是由高度分化的一团薄壁细胞组成，无特定形态
C．愈伤组织细胞可用于细胞产物工厂化生产，利用了愈伤组织细胞分裂快、代谢旺盛的特点
D．愈伤组织的诱导受植物激素配比的影响，不受营养物质和光照等因素的影响
5．抗体—药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC组成及作用机制如图，下列叙述错误的是（ ）
A．药物没有特异性，抗体的特异性是ADC能选择性作用于肿瘤细胞的关键。
B．ADC进入肿瘤细胞的运输方式为胞吞
C．接头的主要作用是保证药物不会脱落
D．ADC中药物的作用是通过诱发肿瘤细胞坏死而杀死肿瘤细胞
6．2023年11月，我国科研人员利用食蟹猴培育出世界首只胚胎干细胞高贡献的活体嵌合猴，该研究部分过程如图所示，由于供体猴胚胎干细胞在体外培养和妊娠期间高度嵌合于受体胚胎，使得后代活体嵌合猴的各种组织中，高达 90%的细胞来源于供体胚胎干细胞。下列有关叙述正确的是（　　）

（注：GFP 指表达绿色荧光标记蛋白，可监测供体干细胞的存活情况以及其在嵌合体不同组织中的分化、分布情况。）
A．代孕雌猴在移植嵌合囊胚前，需要饲喂含促性腺激素的饲料进行同期发情处理
B．图示过程中涉及动物细胞培养、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等工程技术
C．具有清晰 GFP 信号的囊胚才能被转移至代孕雌猴体内，否则难以获得嵌合猴
D．由图可知，代孕雌猴分娩的嵌合猴体细胞中，核遗传物质的一半来源于代孕雌猴
7．“嵌合体”是指由两个或两个以上具有不同遗传物质的细胞系形成的综合体。某大学利用二倍体小鼠和相应生物技术成功培育出作为科研动物的“嵌合体小鼠”。下列相关叙述正确的是（ ）

A．该实验成功的技术基础是动物细胞培养和动物细胞融合
B．“嵌合体小鼠”依然是二倍体
C．图中囊胚的细胞基因型都相同
D．代孕母鼠不需同期发情处理操作
8．研究表明，髓系细胞触发受体2（TREM2）是一种免疫抑制受体，在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。因此，TREM2抗体药物有望提高肿瘤免疫疗法的疗效。下图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，下列说法正确的是（　　）
A．步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射TREM2蛋白和分泌TREM2抗体的杂交瘤细胞
B．经步骤②诱导后融合的细胞既能分泌TREM2抗体又可无限增殖
C．步骤③和④的培养孔中均含有TREM2蛋白，依据的原理都是抗原一抗体杂交
D．步骤⑥的细胞在体外培养时会发生接触抑制，因此需要传代培养
9．克隆动物常用的核移植方法主要有细胞质内注射法和透明带下注射法。前者是用微型注射针将供体细胞核吸出并注入去核卵母细胞质内；后者是直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内，然后促使两个细胞融合。“中中”和“华华”是两只出生在我国的克隆猴，下图是它们的培育流程简图。下列说法错误的是（　　）
A．体细胞克隆猴的成功将有效缩短我国基于克隆猴疾病模型的药物的研发周期
B．供体细胞注入去核卵母细胞透明带内后需经诱导才能形成重构胚
C．“中中”和“华华”的遗传性状由图中的胎猴和母猴以及环境共同决定
D．相比之下，细胞质内注射法对供体细胞核和卵母细胞的损伤更小
10．大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述不正确的是（ ）
A．提取DNA时可加入酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解
B．将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后，加入二苯胺试剂溶液即呈现蓝色
C．电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理
D．根据电泳结果可知质粒上有限制酶Ⅲ的切割位点，可能没有限制酶Ⅰ和Ⅱ的切割位点
11．下图为不同限制酶的识别序列及切割位点（↓表示切割位点），下列叙述错误的是（　　）

A．用EcoRI切割DNA分子中部获得一个目的基因时，需断开的磷酸二酯键有2个
B．用BglII切出的目的基因与BamHI切割的质粒重组后，则不能再被这两种酶切开
C．酶切时需要控制好温度、酶浓度、PH等因素
D．图示4种限制酶均不能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列
12．下图为采用“实时荧光定量RT-PCR（即将病毒RNA逆转录后再进行PCR扩增）”技术检测2019nCoV核酸的基本流程，1~2h内即可得到检测结果。有关说法正确的是（ ）

A．过程①是逆转录过程，不属于中心法则的内容
B．过程②表示扩增DNA片段，需使用RNA聚合酶
C．荧光标记法还可以用于观察基因在染色体上的位置
D．过程②反应体系中加入的原料是4种核糖核苷酸
13．抗体—药物偶联物(ADC)由单克隆抗体、接头和药物三部分构成，是兼具靶向特异性与化疗药物杀伤性的新型抗肿瘤药物。ADC在治疗乳腺癌、胃癌和肺癌等多个领域卓有成效。ADC的作用机制如图所示。下列相关说法错误的是（ ）

A．经选择培养基筛选的杂交瘤细胞可直接用于生产单克隆抗体
B．单克隆抗体的制备过程中利用了细胞膜的流动性
C．利用荧光标记的单克隆抗体可定位诊断肿瘤
D．ADC发挥作用后，引起癌细胞中某些基因的表达增强
14．下图表示研究人员利用胚胎工程培自优质奶牛的过程，下列相关说法正确的是（ ）
A．①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精前精子需要获能
B．②代表胚胎的体外培养，可移植的胚胎应发育到原肠胚或囊胚阶段
C．③代表胚胎分割，需均等分割桑葚胚的内细胞团，以免影响胚胎发育
D．⑤代表胚胎移植，移植前需要使供体和受体的生理状况保持一致
15．DNA 琼脂糖凝胶电泳是一种分离、纯化或分析PCR 扩增后的待检DNA片段的技术。下列关于核酸片段的扩增及电泳鉴定的叙述，正确的是（　　）
A．DNA分子被电泳缓冲液中的核酸染料染成蓝色
B．若要分离较小DNA片段，可选择低浓度凝胶
C．电泳后凝胶中的DNA能直接在紫外灯下检测到
D．用生理盐水来配制0.8%~1.2%的琼脂糖溶液
16．如图表示利用棉花叶肉细胞原生质体培养进行遗传改良的过程。据图分析，下列叙述错误的是（　　）
A．①过程需用纤维素酶和果胶酶的混合物处理
B．②过程能定向诱导原生质体产生优良性状的突变
C．③过程中叶肉细胞失去了其特有的结构和功能
D．④过程需用适宜配比的生长素和细胞分裂素处理
17．科研人员从土壤中分离了五种能分解纤维素的细菌菌株并进行计数，操作过程如下图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．在该实验过程中不可使用平板划线法进行接种
B．倒平板、接种等操作都必须在酒精灯火焰旁进行
C．若平板中平均菌落数为130个，则1g土壤中含有能分解纤维素的细菌1.3×10 个
D．分解纤维素能力最强的是E菌株，应对其扩大培养或保存
18．HA蛋白是禽流感病毒的重要抗原。鸡卵清蛋白是由输卵管上皮细胞中卵清蛋白基因特异性表达后分泌至输卵管内，参与构成鸡蛋清的蛋白质。下图是利用基因工程技术制备HA蛋白鸡输卵管生物反应器的过程。几种可供选择的限制酶识别序列如下，下列说法错误的是（ ）
A．①为逆转录过程，该过程需要逆转录酶、4种游离的脱氧核苷酸等组分
B．启动子是转录的起点，是RNA聚合酶识别和结合的部位
C．目的基因与鸡卵清蛋白基因启动子拼接前应先在目的基因两端分别引入HindⅢ和EcoRI的识别序列
D．基因表达载体导入受精鸡胚的胚盘可以使用显微注射法
19．当目的基因和载体用同一种限制酶处理，连接后目的基因可能正向插入载体，也可能反向插入载体，为判断目的基因的插入方向，可设计引物进行PCR后再结合电泳检测。图示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，其中目的基因的长度为300bp（bp：碱基对数）。下列叙述错误的是（ ）
A．PCR扩增的原理与生物体内DNA复制的原理相同
B．抗性基因作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入目的基因
C．选取引物甲、丙，扩增出450bp长度片段时，可以说明目的基因正接
D．选取引物甲、乙，扩增出400bp长度片段时，可以说明目的基因反接
20．F基因突变可引发人类某种单基因遗传病。以下图1为该遗传病的家系图谱，图2为用限制酶M处理家系成员的F基因后，进行电泳的部分结果。下列叙述不正确的是（ ）
A．环状DNA分子和链状DNA分子在凝胶中的迁移速率可能不同
B．该遗传病的遗传方式为伴X隐性遗传
C．用限制酶M处理家系成员的待测基因之前，应先对待测基因进行PCR
D．Ⅱ-2体内的待测基因序列中共存在三个限制酶M的酶切位点
二、解答题
21．我国人民很早就能作坊式酿酒，并用果酒进一步发酵生产果醋。
(1)在 的条件下，醋酸菌可将酒精转化成醋酸酿成果醋；其化学反应原理是 。若酿造时得到了醋酸高产的菌群，可采用 的接种方法进一步纯化获得优良醋酸菌菌种。
(2)果酒中的酒精含量对果醋的醋酸产率会产生一定的影响。某技术组配制发酵液研究了初始酒精浓度对醋酸含量的影响，结果如图。该技术组使用的发酵液中，除酒精外还包括的基本营养物质有 。醋酸发酵的最适初始酒精浓度是 ；酒精浓度为10%时醋酸含量最低，此时，若要尽快提高醋酸含量，可采取的措施有 。 (填写两个方面)
22．基因工程作为现代生物技术的核心，为人类健康和农业生产带来了巨大变革。利用基因工程技术将人生长激素基因导入大肠杆菌，以获得转基因菌种，进而从中提取人生长激素的过程如图所示，限制酶的酶切位点如表所示。回答下列问题：
限制酶 识别序列
XhoⅠ 5′-C↓TCGAG-3′
SalⅠ 5′-G↓TCGAC-3′
EcoRⅠ 5′-G↓AATTC-3′
(1)本研究中的目的基因是 。图中以A为模板逆转录得到目的基因，其中A是 。获得目的基因后通过PCR技术对目的基因进行扩增，扩增时子链的延伸方向是 。
(2)为了避免质粒和目的基因自身环化，保证目的基因与质粒进行正确的拼接，需要用 酶处理目的基因，用 酶处理质粒，再用 酶连接。
(3)基因表达载体上除了目的基因，还应有启动子和终止子，启动子的作用是 。若将人生长激素基因转移到牛乳腺细胞中，应该使用的启动子是 ，可利用 技术检测转基因奶牛分泌的乳汁中是否含有人生长激素。
23．猴的克隆胚胎在发育过程中往往出现基因的异常甲基化修饰以及胎盘发育异常，导致克隆成功率较低。我国科学家采用一定的技术手段对克隆胚胎进行处理，提高了克隆成功率，并在2024年获得了首个活到成年的克隆猴。操作流程如图所示，请分析回答下列问题：
(1)培养杂种雌猴的成纤维细胞时，通常将细胞置于含有 的混合气体的CO2培养箱中进行培养，其中CO2的主要作用是 。
(2)成纤维细胞应注入去核的食蟹猴 期卵母细胞，去核的实质是去除 ，去核的常用方法是 。囊胚b是通过体外受精技术获得的胚胎，受精过程中防止多精入卵的两道屏障分别是 ，判断卵细胞受精的标志通常是 。
(3)选取囊胚a的内细胞团的原因是 ，囊胚b的滋养层将发育为 。
24．研究表明，哺乳动物体内含有一定量的ω-3多不饱和脂肪酸（ω-3PUFAs）可以起到预防心血管疾病、神经退行性疾病甚至癌症的作用。但ω-3PUFAs在大多数动物体内不能合成，只能从食物中摄取。科研人员从秀丽隐杆线虫中获得控制ω-3PUFAs合成的必需酶基因fat-1，培育转fat-1基因家兔的操作流程如图所示。回答下列问题：

(1)利用PCR技术扩增目的基因时，科研人员依据目的基因设计了种引物，还分析了目的基因内部限制酶酶切位点的分布情况，并在两种引物的一端分别加上限制酶 和 识别与切割的序列；在设计两种引物时，要求之一是两种引物之间不能碱基互补配对，理由是 。
(2)图中所构建的基因表达载体未标注出的必需元件除复制原点外还有 。
(3)家兔成纤维细胞原代培养过程中，在无菌条件下，取家兔胎儿表面组织块剪碎，用 酶处理一段时间，使组织分散成单个细胞后移至培养瓶中，置于CO2培养箱中培养，其中CO2的主要作用是 。
三、实验题
25．如图表示二倍体植株A（杂合子 Aa）和二倍体植株B（纯合子BB）培育植株①~⑤的过程。
(1)获得①植株的原理是 。获得原生质体常用到的酶是 ；诱导原生质体融合若采用化学法，除PEG融合法外，还有 等。
(2)培育植株①的过程称为 ，该植株 （填“能”或“不能”）稳定遗传。
(3)培育植株④时常选用 进行组织培养，该技术可培育脱毒苗。
(4)植株⑤为 倍体，基因型为 ，该植株 （填“可育”或“不可育”）。这项研究对于培育作物新品种方面的意义在于 。
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 C C B C D C B A D B
题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
答案 A C A D C B C C C D
21．(1) 糖源缺乏、氧气充足 C2H5OH+O2 CH3COOH（醋酸）+HO2+能量 稀释涂布平板法/平板划线法
(2) 氮源、无机盐、水 6%(5%-7%) 适当降低初始酒精浓度、适当增大菌种接种量、增加氧气供应、适当提高温度等
22．(1) 人生长激素基因 人生长激素mRNA 5′→3′
(2) EcoRⅠ和SalⅠ EcoRⅠ和XhoⅠ DNA连接
(3) 作为RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因的转录 乳腺中特异表达的基因的启动子 抗原—抗体杂交
23．(1) 95%的空气＋5%CO2 维持培养液的pH
(2) MⅡ期/减数分裂Ⅱ中 纺锤体-染色体复合物 显微操作法 透明带反应和卵细胞膜反应 观察到两个极体或雌、雄原核
(3) 内细胞团发育为胚胎的各种组织 胎盘和胎膜
24．(1) EcoRI BamHI 两种引物之间若通过碱基互补配对结合形成双链，会降低引物与DNA模板链结合的效率
(2)标记基因
(3) 胰蛋白酶或胶原蛋白 维持培养液的pH
25．(1) 植物细胞的全能性 果胶酶和和纤维素酶 高Ca2+-高pH融合法
(2) 花药离体培养 不能
(3)茎尖分生组织
(4) （异源）四 AaBB 可育 克服远缘杂交不亲和的障碍（或打破生殖隔离，实现远缘杂交育种）

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