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福州第一中学2024-2025学年高二下学期期中考试生物试卷
一、单选题
1．土壤中有丰富的微生物，若要利用其中某种微生物，则需要进行菌种的分离和纯化，过程如图。下列相关叙述错误的是（ ）
A．若要筛选分解尿素[CO（NH2）2]的细菌，则尿素可以作为该菌的氮源
B．理论上每毫升菌液中2号试管的活菌数是4号试管的100倍
C．4号试管的结果表明每克土壤中的活菌数约为1.1×109个
D．该种方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少
2．有机物Y（不含N元素）是一种水体污染物。X菌是一种能够降解Y的异养厌氧型微生物。科研人员从污水中筛选出了X菌，主要步骤如图所示，设置甲培养基的目的是获得更多的X菌。下列说法错误的是（ ）

A．通常采用干热灭菌的方法对培养皿等玻璃器皿进行灭菌
B．筛选该种微生物时，培养基以有机物Y为唯一碳源
C．摇瓶M中振荡培养的目的是使X菌与氧气充分接触
D．从培养基的组分分析，甲、乙培养基的不同在于乙中含有琼脂
3．下列有关微生物培养的相关叙述错误的是（ ）
A．获得纯培养物的关键是防止杂菌污染，紫外线消毒前喷洒苯酚可加强消毒效果
B．在稀释涂布时，涂布器应灼烧灭菌后再蘸取0.1ml菌液均匀地涂布在培养基表面
C．使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境
D．通过接种环在固体培养基表面连续划线可将聚集的菌种逐步稀释到培养基表面
4．下列生物技术或实验过程中，不需要灭菌操作的是（　　）
A．传统发酵技术制作葡萄酒
B．植物组织培养
C．动物细胞培养
D．纯化大肠杆菌
5．甜酒酿（醪糟）是江南地区的传统小吃，是用蒸熟的糯米拌上酿酒酵母发酵而成的一种甜米酒，其制作流程为：浸米→蒸米→凉饭→拌酿酒酵母→发酵→检查→甜酒酿。下列有关叙述正确的是（ ）
A．“蒸米”的主要目的是通过杀灭杂菌，延长甜酒酿的保质期
B．“凉饭”后再拌入酿酒酵母，可避免高温杀死发酵所需菌种
C．“发酵”时应将拌有酿酒酵母的凉饭装满密闭的容器
D．在发酵过程中酒精的浓度会持续增加，pH值会持续降低
6．制作泡菜时，由于乳酸菌的发酵作用，发酵产物乳酸不断积累，因此可以根据微生物的活动情况和乳酸积累量，将泡菜发酵过程分为三个阶段：发酵初期、发酵中期和发酵后期。下列叙述正确的是（ ）
A．发酵初期会有气泡产生，原因是乳酸菌无氧呼吸产生了CO2
B．制作泡菜过程中，发酵初期先通气培养，发酵中期再密封发酵
C．发酵中期乳酸的产生使营养物质丰富，其他微生物的数量上升
D．发酵后期乳酸含量继续增加，发酵速度会逐渐变缓甚至停止
7．植物组织培养的不同阶段均涉及对光照的控制。下列叙述错误的是（　　）
A．在有光照的条件下培养植物组织，培养基中无需添加有机物
B．成分脱分化过程通常需要避光，有利于愈伤组织的形成和生长
C．再分化过程通常需提供光，无光条件下形成的试管苗一般为黄化苗
D．光既是培养物光合作用的能量来源，也是调节培养物生长发育的信号
8．研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌。根据堆肥温度变化曲线（如图）和选择培养基筛选原理来判断，下列最可能筛选到目标菌的条件组合是（　　）
A．a点时取样、尿素氮源培养基
B．b点时取样、角蛋白氮源培养基
C．b点时取样、蛋白胨氮源培养基
D．c点时取样、角蛋白氮源培养基
9．“筛选”是生物技术与工程中常用的技术手段。下列叙述错误的是（ ）
A．筛选纤维素分解菌时，培养基中需添加纤维素和刚果红
B．培育转基因抗虫棉时，需从分子水平及个体水平进行筛选
C．单倍体育种时，需对F1的花药进行筛选后才可继续进行组织培养
D．胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选
10．科研人员利用iPS细胞（诱导多能干细胞）与心肌细胞融合形成杂交细胞，研究其生物学特性，为心肌梗死后的细胞移植治疗提供一种新思路。下列叙述错误的是（ ）
A．进行心肌细胞培养时，可用胰蛋白酶处理心肌组织
B．可用PEG诱导细胞融合，并用特定的选择培养基进行筛选
C．杂交细胞既有iPS细胞的增殖能力，又有心肌细胞的特点
D．鉴定杂交细胞时，可通过PCR检测其基因的转录和翻译情况
11．人RecQ解旋酶可作为新的白血病和乳腺癌肿瘤干细胞标志物。以RecQ解旋酶免疫小鼠为材料，融合免疫小鼠脾脏中的细胞及骨髓瘤细胞，筛选出杂交瘤细胞以此制备抗RecQ解旋酶单克隆抗体，流程如图所示。下列叙述正确的是（　　）
A．在利用96孔板筛选杂交瘤细胞时，需要稀释至每孔最多1个细胞
B．③过程中灭活的病毒能诱导A和B细胞表面的糖蛋白失去活性促进细胞融合
C．将能产生抗体的杂交瘤细胞Ⅱ注入小鼠体内，从血浆中大量分离抗体
D．抗RecQ解旋酶单克隆抗体与RecQ解旋酶特异性结合，促进了肿瘤细胞的增殖
12．建构模型是生物学学习和研究的常用方法。关于下图所示模型，叙述正确的是（ ）
A．若为植物体细胞杂交模型，c→d过程需用秋水仙素处理
B．若为动物体细胞核移植模型，b可能为去核的卵母细胞
C．若为动物细胞融合模型，形成c的过程可用Ca2+诱导融合
D．若为哺乳动物体外受精模型，a、b细胞都需培养到MII期
13．如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是（ ）
A．双抗可同时与2种抗原结合
B．利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞
C．筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原
D．同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞
14．甘加藏羊是甘肃高寒牧区的优良品种，是季节性发情动物，每年产羔一次，每胎一羔，繁殖率较低。为促进畜牧业发展，研究人员通过体外受精、胚胎移植等胚胎工程技术提高藏羊的繁殖率，流程如下图。下列叙述错误的是（ ）
A．藏羊甲需用促性腺激素处理使其卵巢卵泡发育和超数排卵
B．藏羊乙的获能精子能与刚采集到的藏羊甲的卵母细胞受精
C．受体藏羊丙需和藏羊甲进行同期发情处理
D．后代丁的遗传物质来源于藏羊甲和藏羊乙
15．下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是（　　）
A．后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定
B．过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体
C．过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理
D．过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植
16．下列关于实验的叙述，正确的是（ ）
A．可通过观察石灰水是否变浑浊探究酵母菌呼吸方式
B．绿叶中色素提取和分离的实验应在通风条件下进行
C．DNA粗提取实验可以用鸡血细胞作材料，利用DNA易溶于酒精来初步分离DNA
D．在PCR扩增DNA时，当温度上升到50℃以上时，双链DNA解聚为单链
17．下列生物技术操作对遗传物质的改造，不会遗传给子代的是（　　）
A．将胰岛素基因表达质粒转入大肠杆菌，筛选获得基因工程菌
B．将花青素代谢基因导入植物体细胞，经组培获得花色变异植株
C．将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵，培育出产低乳糖牛乳的奶牛
D．将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者，进行基因治疗
18．某同学将质粒DNA进行限制酶酶切时，发现DNA完全没有被酶切，分析可能的原因并提出解决方法。下列叙述错误的是（　　）
A．限制酶失活，更换新的限制酶
B．酶切条件不合适，调整反应条件如温度和酶的用量等
C．质粒DNA突变导致酶识别位点缺失，更换正常质粒DNA
D．酶切位点被甲基化修饰，换用对DNA甲基化不敏感的限制酶
19．为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C(图1)，拟将其与质粒(图2)重组，再借助农杆菌导入菊花中。下列操作与实验目的不符的是（ ）

A．用限制性内切核酸酶EcoRⅠ和DNA 连接酶构建重组质粒
B．用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞
C．在培养基中添加卡那霉素，筛选被转化的菊花细胞
D．用PCR技术检测C基因是否整合到菊花染色体上
20．某小组利用PCR扩增某目的基因，设计了引物A和引物B．下列相关叙述错误的是（　　）
A．经过三轮循环后的产物中含有引物B的DNA片段所占的比例为1/2
B．经过二轮循环后的产物中只含有引物A的DNA片段所占的比例为1/4
C．经过四轮循环后的产物中同时含有两种引物的DNA片段所占的比例为7/8
D．耐高温的DNA聚合酶从引物的3’端延伸子链
21．为了对重金属污染的土壤进行生物修复，研究者将从杨树中克隆的重金属转运蛋白（HMA3）基因与外源高效启动子连接，导入杨树基因组中（如图）。
为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的HMA3基因，同时避免内源HMA3基因的干扰，在进行PCR扩增时，应选择的引物组合是（ ）
A．①+③ B．①+② C．③+② D．③+④
22．下表是几种限制酶的识别序列及切割位点（Y=C或T，R=A或G）。下列相关叙述正确的是（　　）
限制酶 HindⅡ AluⅠ BamHⅠ Sau3AⅠ
识别序列及切割位点 5'-GTY↓RAC-3' 5'-AG↓CT-3' 5'-G↓GATCC-3' 5'-↓GATC-3'
A．限制酶切割一次需切断2个磷酸二酯键，增加2个游离的磷酸基团
B．一种限制酶只能识别一种核苷酸序列，并在特定位点切割
C．AluⅠ切割后的DNA片段只可用E.coliDNA连接酶连接
D．BamHⅠ和Sau3AⅠ切割形成的片段进行重组后，BamHⅠ和Sau3AⅠ均不能识别并切割
23．某实验利用PCR技术获取目的基因，实验结果显示除目的基因条带（引物与模板完全配对）外，还有2条非特异条带（引物和模板不完全配对）。为了减少反应非特异条带的产生，以下措施中有效的是（ ）
A．增加模板DNA的量 B．延长热变性的时间
C．延长延伸的时间 D．提高复性的温度
24．某遗传病家系的系谱图如图甲所示，已知该遗传病由正常基因A突变成A1或A2引起，且A1对A和A2为显性，A对A2为显性。为确定家系中某些个体的基因型，分别根据A1和A2两种基因的序列，设计鉴定该遗传病基因的引物进行PCR扩增，电泳结果如图乙所示。
下列叙述正确的是（ ）
A．电泳结果相同的个体表型相同，表型相同的个体电泳结果不一定相同
B．若Ⅱ3的电泳结果有2条条带，则Ⅱ2和Ⅲ3基因型相同的概率为1/3
C．若Ⅲ1与正常女子结婚，生了1个患病的后代，则可能是A2导致的
D．若Ⅲ5的电泳结果仅有1条条带，则Ⅱ6的基因型只有1种可能
二、多选题
25．中国传统白酒多以泥窖为发酵基础，素有“千年老窖万年糟”“以窖养糟，以糟养泥”之说。多年反复利用的老窖池内壁窖泥中含有大量与酿酒相关的微生物。下列叙述正确的是（ ）
A．传统白酒的酿造是在以酿酒酵母为主的多种微生物共同作用下完成的
B．窖池内各种微生物形成了相对稳定的体系，使酿造过程不易污染杂菌
C．从窖泥中分离的酿酒酵母扩大培养时，需在或环境中进行
D．从谷物原料发酵形成的酒糟中，可分离出产淀粉酶的微生物
三、实验题
26．某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。
(1)实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用 的方法进行灭菌。甲、乙培养基均属于 培养基。乙培养基中的Y物质是 。
(2)实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释 倍。
(3)在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是 （答出1点即可）。
(4)上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即 。
四、解答题
27．以我国科学家为主的科研团队将OSNL（即4个基因Oct4/Sox2/Nanog/Lin28A的缩写）导入黑羽鸡胚成纤维细胞（CEFs），诱导其重编程为诱导多能干细胞（iPS），再诱导iPS分化为诱导原始生殖细胞（iPGCs），然后将iPGCs注射到孵化2.5天的白羽鸡胚血管中，最终获得具有黑羽鸡遗传特性的后代，实验流程如图。回答下列问题。

(1)CEFs是从孵化9天的黑羽鸡胚中分离获得的，为了获得单细胞悬液，鸡胚组织需用 处理。动物细胞培养通常需要在合成培养基中添加 等天然成分，以满足细胞对某些细胞因子的需求。
(2)体外获取OSNL的方法有 （答出1种即可）。若要在CEFs中表达外源基因的蛋白，需构建基因表达载体，载体中除含有目的基因和标记基因外，还须有启动子和终止子等。启动子功能是 。
(3)iPS细胞和iPGCs细胞的形态、结构和功能不同的根本原因是 。
(4)该实验流程中用到的生物技术有 （答出2点即可）。
28．病毒感染初期，机体会分泌干扰素并作用于细胞受体IFNAR来应对感染。麻疹是由麻疹病毒感染引起的急性传染病。已知人白细胞分化抗原46（hCD46）是麻疹病毒入侵细胞的主要受体，小鼠没有该受体，科研人员构建hCD46转基因小鼠用于相关研究，部分流程如图所示。
回答下列问题：
(1)利用PCR技术获取目的基因hCD46，复性温度下发生的扩增过程是 。
(2)将hCD46接入质粒应选用的限制酶组合是 。为提高转基因效率，同时避免标记基因进入胚胎体内，应选用 限制酶组合将重组质粒变为线性DNA。
(3)为获取大量胚胎用于移植，可用激素处理小鼠a，使其 。将胚胎移植到小鼠c的子宫中，应选用桑葚胚的原因是 。
(4)利用PCR技术对子代小鼠进行hCD46基因检测，应设置不加DNA模板的对照组，目的是 。
(5)若能进一步构建既表达hCD46受体又敲除IFNAR基因的小鼠，则该小鼠对麻疹病毒具有高易感性，原因是 。
29．新城疫病毒可引起家禽急性败血性传染病，我国科学家将该病毒相关基因改造为r2HN，使其在水稻胚乳特异表达，制备获得r2HN疫苗，并对其免疫效果进行了检测。
(1)实验所用载体的部分结构及其限制酶识别位点如图1所示。其中GtP为启动子，若使r2HN仅在水稻胚乳表达，GtP应为 启动子。Nos为终止子。r2HN基因内部不含载体的限制酶识别位点，因此，可选择限制酶 对r2HN基因与载体进行酶切，用于表达载体的构建。
(2)在PCR扩增r2HN基因时，通常会在所用引物的一端添加被限制酶识别的序列，该序列添加的位置位于引物的 （选填“3’端”或“5’端”）。如图2所示，在R1上添加的序列为 限制酶的识别序列。
(3)利用 方法将r2HN基因导入水稻愈伤组织。为检测r2HN表达情况，可通过PCR技术检测 。
(4)获得转基因植株后，通常选择单一位点插入目的基因的植株进行研究。此类植株自交一代后，r2HN纯合体植株的占比为 。
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 C C B A B D A D C D
题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
答案 A B D B B B D B C A
题号 21 22 23 24 25
答案 B A D B ABD
26．(1) 高压蒸汽灭菌 选择 琼脂
(2)104
(3)S的浓度超过某一值时会抑制菌株的生长
(4)水、碳源、氮源和无机盐
27．(1) 机械方法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶等 动物血清
(2) PCR技术（人工合成法） RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动目的基因转录出mRNA
(3)基因的选择性表达
(4)基因工程（转基因技术）、动物细胞培养
28．(1)两种引物分别与含hCD46基因的两条模板链结合
(2) EcoRⅠ和NotI AgeⅠ和HindⅢ
(3) 超数排卵 桑葚胚易于在小鼠子宫着床
(4)排除PCR体系中外源DNA的污染
(5)该小鼠能被麻疹病毒感染，且干扰素无法作用于IFNAR以应对感染
29．(1) 水稻胚乳细胞 HindⅢ和EcoRⅠ
(2) 5’端 HindⅢ
(3) 农杆菌转化 r2HN mRNA
(4)1/4

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