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生物试题
本试卷分选择题和非选择题两部分，共 8 页，满分为 100 分。考试用时 75 分钟。
注意事项：1.答卷前，考生务必用黑色字迹的钢笔或签字笔将自己的姓名和准考证号填写在答题卡相应的
位置上，用 2B 铅笔将自己的准考证号填涂在答题卡上。
2.选择题每小题选出答案后，用 2B 铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑；如需改动，用
橡皮擦干净后，再选涂其他答案；在试卷上作答无效。
3.非选择题必须用黑色字迹的钢笔或签字笔在答题卡上作答，答案必须写在答题卡上各题目指
定区域内的相应位置上，超出指定区域的答案无效；如需改动，先划掉原来的答案，然后再写
上新的答案；不准使用涂改液。不按以上要求作答的答案无效。
4.考生必须保持答题卡的整洁和平整。
第Ⅰ卷 （本卷共计 40 分）
一．选择题：（每小题只有一个选项，1-10 题，每小题 2 分，11-15 题，每小题 4 分，共计 40 分）
1．与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量明显提高。下列有关发酵工程表述
正确的是
A．该工程的中心环节是菌种的选育 B．绝大多数酶制剂是由该技术生产
C．可从微生物细胞中提取单细胞蛋白 D．条件变化不影响微生物的代谢途径
2．在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，需要的条件是
①消毒和灭菌 ②一定浓度的植物激素 ③适宜的温度 ④充足的光照 ⑤充足的养料
A．①③④⑤ B．②③④⑤ C．①②③④ D．①②③⑤
3．对某种动物的肝肿瘤细胞进行细胞培养，下列说法正确的是
A．传代培养时，用胰蛋白酶处理悬浮的细胞，再用离心法收集
B．细胞培养应在含 5%CO2 的恒温培养箱中进行，CO2 的主要作用是刺激细胞呼吸
C．定期更换培养液是为了给体外培养的细胞提供无菌环境
D．在合成培养基中，通常需加入血清等天然成分
4．下列关于生物技术安全与伦理问题的叙述，错误的是
A．我国禁止进行任何生殖性克隆人实验 B．治疗性克隆不会产生道德、伦理问题
C．我国反对生物武器的研发、生产和扩散 D．转基因食品存在引发过敏的风险
5．如图为快速培育优质奶牛的过程，下列叙述正确的是
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A．精子和卵子分别需经获能、成熟处理后才能受精
B．胚胎移植前需要对受体牛进行免疫抑制处理
C．可取②进行性别鉴定，两子代牛犊的性别不同
D．胚胎移植的实质是生产和孕育胚胎的时间分离
6．某检测小组为验证使用公筷的必要性，将聚餐时的每道菜品分为两份，一份使用公筷进食，一份不使
用公筷进食。通过无菌操作采集样品，定量稀释后等量接种于牛肉膏蛋白胨培养基上，恒温培养适宜时
间，进行细菌菌落总数统计，结果如表，其中 CFU/g 表示每克样品在培养基上形成的菌落总数。下列叙
述不正确的是
细菌菌落总数（CFU/g）
菜名 餐后
餐前
公筷 非公筷
凉拌黄瓜 14000 16000 45000
香辣牛蛙 60 150 560
A．每道菜品应用公筷和非公筷夹取相同次数，目的是排除无关变量的干扰
B．使用公筷可明显降低菜品细菌污染，使用非公筷会导致菜品之间的交叉污染
C．实验采用稀释涂布平板法统计活菌数目，实验结果一般比实际值偏低
D．牛肉膏蛋白胨培养基需经高压蒸汽灭菌后再调整 pH，完全冷却后倒平板
7．如图所示三个 DNA 片段依次表示 EcoRⅠ、BamHⅠ和 Sau3AⅠ三种限制酶的识别序列与切割位点。下
列有关叙述错误的是
A．三种限制酶切割产生的末端的长度大小相同
B．这三种限制酶切割后形成的都是黏性末端
C．BamH Ⅰ和 Sau3A Ⅰ切割 DNA 片段形成的末端不能彼此连接
D．图中的 DNA 片段被 EcoR Ⅰ切割后，会增加两个游离的磷酸基团
8．高浓度的铵盐对池塘养殖的对虾有一定的毒害作用，硝化细菌是一种好氧菌，可有效净化水体中的铵
盐，降低对虾的死亡率。科研人员拟从当地对虾养殖池塘中筛选出对铵盐降解率高且稳定的硝化细菌菌
株，操作流程如图所示。下列叙述错误的是
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A．从对虾死亡率低的养殖池塘中取样，能提高筛选的成功率
B．纯化菌种时，若按图中所示的接种方法接种，接种环需要灼烧 4 次
C．在锥形瓶中培养硝化细菌时需要振荡培养，目的是增加硝化细菌与营养物质、溶解氧的充分接触
D．可选择铵盐浓度减小得最多的一组候选菌进行后续培养
9．如图为核移植实验过程示意图，根据图示分析下列叙述正确的是
A．去核的时期应该在 MⅠ期，原因是该时期第一极体和卵细胞核较近
B．桑葚胚细胞应提取出细胞核后，尽快注入去核的卵母细胞中
C．电融合法可促使重构胚形成，后期还需要其他方法激活重构胚
D．动物体细胞核移植比动物胚胎细胞核移植难度低
10．如图表示某种哺乳动物受精作用及早期胚胎发育的部分过程。下列有关叙述正确的是
A．图 1 中各细胞内的 DNA 分子数目与体细胞中相同
B．图 2 和图 3 中的极体都将继续分裂
C．同期发情处理能使供体产生更多的图 4 结构
D．图 1 到图 4 的过程发生在输卵管和子宫中
11．采用 PCR 技术可获取并扩增目的基因。下列说法正确的是
A．若 PCR 的模板是 mRNA，完成扩增只需要逆转录酶
B．预变性有利于模板 DNA 充分解聚为单链
C．复性温度太高会导致引物和模板的非特异性结合增加
D．一个 DNA 模板完成第 20 轮循环需要（220-2）个引物
12．2024 年诺贝尔化学奖授予了三位科学家，以表彰其在蛋白质结构预测方面的贡献。下列有关蛋白质的
说法正确的是
A．真丝、棉花、羊毛等制品不宜用含蛋白酶的洗衣粉洗涤但可以用洗发精洗涤
B．利用胶原蛋白制成的手术缝合线不宜吸收过快否则不利于患者恢复身体健康
C．利用黑曲霉等生产的牛凝乳酶比天然产物中提取的酶纯度更高属于蛋白质工程
D．大分子物质特有的通过胞吞、胞吐的跨膜运输方式也需要蛋白质分子的协助
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13．自杀基因系统是指外源基因导入受体细胞后会表达相应的酶，该酶可催化无毒的药物前体转化为有毒
物质，从而导致受体细胞被杀死。为探究外源基因 TK 与药物更昔洛韦能否组成自杀基因系统，研究人
员以肝癌细胞为受体细胞进行实验，结果如图所示。下列说法正确的是
A．培养肝癌细胞的过程中需定期更换培养液以保持无菌、无毒的环境
B．肝癌细胞在细胞培养过程中没有接触抑制，因而无需进行传代培养
C．对照组和实验组应分别为导入 TK 和未导入 TK 的肝癌细胞
D．实验结果表明外源基因 TK 与更昔洛韦可组成自杀基因系统
14．蛋白质工程被用于改进酶的性能或开发新的工业用酶时，常用两种策略：合理设计，需了解蛋白质的
结构及控制性状的基因序列，过程如下图；定向进化，在试管中模拟自然进化，利用人工诱变技术诱发
大量突变，按照特定的需要给予选择压力，选择具有所需特征的蛋白质。下列叙述错误的是
A．对某种蛋白质进行合理设计可能得到多种基因序列
B．⑤过程的完成依赖于基因的改造或基因的合成
C．定向进化也需要事先了解蛋白质的空间结构情况
D．定向进化策略与自然选择实质基本相同，但速度不同
15．毕赤酵母（能以甲醇为唯一碳源）可作为生产抗原蛋白的工程菌。研究人员以图 1 所示质粒为载体，
构建含乙型肝炎病毒表面抗原蛋白基因 HBsAg 的重组质粒，导入大肠杆菌中进行扩增后，再经酶切后
导入毕赤酵母，经同源重组整合到其染色体 DNA 上，其中的 T 启动子是一种甲醇诱导型启动子。图 1、
图 2 中的限制酶酶切位点对应的碱基序列如图 3 所示。下列说法正确的是
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A．利用 PCR 技术获取 HBsAg 基因时，引物 B 结合的单链是 b 链
B．科研人员利用限制酶和 E.coliDNA 连接酶将 HBsAg 基因正确插入图 1 所示质粒时，应选用 XmaⅠ、
BclⅠ酶对质粒进行酶切处理
C．构建重组载体后，导入大肠杆菌，在含有氨苄青霉素的培养基上进行培养，无法将含空白质粒的
大肠杆菌菌落和含有重组质粒的大肠杆菌菌落区分开
D．将大肠杆菌中获取的 HBsAg 基因导入毕赤酵母后，转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向
其中加入甲醇，其目的只是诱导 HBsAg 基因表达。
第Ⅱ卷 （本卷共计 60 分）
二、非选择题：（本题共 5 小题，共 60 分。）
16．（8 分）尼帕病毒（NV）是一种新型人畜共患病毒，该病毒的结构蛋白（X 蛋白）可诱导动物机体产生
中和抗体，从而防御病毒感染。制备单克隆中和抗体的流程如图所示。回答下列问题。
(1)制备单克隆抗体过程中涉及的动物细胞工程技术包括 和 。
(2)在特定培养基 Y 中不能存活的细胞包括下列 。①B 淋巴细胞；②小鼠的骨髓瘤细胞；③B
淋巴细胞自身融合的细胞；④小鼠的骨髓瘤细胞自身融合的细胞；⑤杂交瘤细胞
(3)图中符合生产的杂交瘤细胞具有 的特点。最终可从 或 中获得大量的单克隆
抗体。
(4)为鉴定单克隆抗体识别抗原的具体区域，可将抗原（X 蛋白）进行逐步截短，分别与纯化的单克隆
抗体反应，实验结果如图所示（“+”表示有反应，“-”表示无反应，“aa”表示氨基酸）。
结果证明该单克隆抗体识别抗原（X 蛋白）的区域大概为 （填“40~50”、“40~55”或“40
~60”）位氨基酸。
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17．（11 分）野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。利用相关工程技
术可以获得抗黑腐病杂种黑芥—花椰菜植株。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段
化，并丧失再生能力，再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，流程
如下图。据图回答：
(1)该过程用到的细胞工程技术称为 。
(2)过程①所需的酶是 ，过程②中 PEG 的作用是 ，经过②操作后，需筛选出融合的杂种细
胞，显微镜下观察融合的活细胞中有黑芥叶肉细胞的 （填写细胞器名称）存在可作为初步筛选
杂种细胞的标志。
(3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的 ，从而维持原生质体的形态和活
性。原生质体经过细胞壁再生，进而脱分化形成 ，其是处于无定形状态的 （填“分化”
或“未分化”）细胞。
(4)若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和双亲植株的根尖，制成装片，在显微镜下观察
并比较染色体的 。将杂种植株栽培在含有 的环境中，可筛选出具有高抗性的杂种植株。
在植物组织培养的过程中，为了除去植物体表面的微生物，外植体需要先后用酒精和 处理，每
次处理后都要用无菌水清洗。
18．（14 分）大量农作物的秸秆及其附属物的焚烧，曾经一度成为人们的热门话题。有的人认为，秸秆焚
烧省时省力，焚烧后的灰烬可以肥田；有的人认为，秸秆焚烧产生的烟雾对环境有害，也易引发火灾；
有的人认为，可以利用现代生物技术处理农作物秸秆及其附属物，以获得更大的经济效益和社会效益。
回答下列问题。
(1)玉米秸秆中的纤维素能被土壤中的纤维素分解菌分解，这是因为纤维素分解菌能够产生 。
(2)为了获得纤维素分解菌，可以把滤纸埋在土壤中，经过一段时间后，再从腐烂的滤纸上筛选纤维素分
解菌。原因是 。
(3)玉米棒脱粒后的玉米芯含较多的木聚糖，利用从土壤中筛选出来的菌株 H 发酵，能使木聚糖转化为木
寡糖等高附加值低聚糖，发酵设备如下图所示：
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①为了得到使木聚糖转化为木寡糖等高附加值低聚糖的性状优良的菌种，可以从土壤中直接筛选，也
可以通过 获得。
②为了获得更多的发酵产品，需要进一步优化提升发酵设备性能，可将该发酵设备改造后连接计算机
系统，以对发酵过程中的 （至少答两点）等条件进行监测和
控制，还可以进行反馈控制，使发酵全过程处于最佳状态。
③生产过程中，以一定的速度在加料口不断添加新的培养基，同时又以同样速度在出料口放出旧的培
养基，可大大提高生产效率，原因是 （答 2 点）。
(4)图 1 和图 2 是培养大肠杆菌的结果图，可以用来计数的接种方法是 （填图 1 或者图 2）其
可以用来计数的原理为 。
19．（14 分）绿色荧光蛋白（GFP）是由一条肽链组成的蛋白质，通过蛋白质工程技术可获得增强型荧光
蛋白。某研究人员设计引物，通过 3 次 PCR 反应（一次 PCR 反应包括多轮循环）将一对突变碱基引入
编码 GFP 的 DNA 片段（片段甲），获得了编码增强型荧光蛋白的 DNA 片段（目的基因）。实验过程如
图所示，图中 a、b、c、d 表示引物，→表示 5＇→3＇方向，■代表突变碱基。
回答下列问题。
(1)以片段甲为模板，通过两次独立的 PCR 反应（步骤①和步骤②在不同的试管中进行）分别获得 DNA
片段乙和丙，步骤①和步骤②所用的引物对分别是 、 。
(2)步骤③是将纯化的 DNA 片段乙和丙混合，经热变性、复性，得到产物 X 和 Y；步骤④是在热稳定
DNA 聚合酶的催化下进行的延伸反应。步骤③的产物中能形成 DNA 片段丁的是 ，原因
是 。
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(3)以DNA片段丁为模板，通过PCR反应扩增目的基因时，所选用的PCR引物为 。
(4)上述获得增强型荧光蛋白的过程利用了蛋白质工程技术，其基本思路是从预期的蛋白质功能出发→设
计预期的蛋白质结构→ →找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或 →获得所
需要的蛋白质。
20．（13 分）葡聚糖和木聚糖等物质具有一定的粘度，添加在某些饮品中会影响口感或堵塞过滤装置。某
实验室科研工作者采用构建共表达 GluZ（葡聚糖酶基因）和 XylB（木聚糖酶基因）两种融合基因的工
程酵母，降低酿造饮品中的葡聚糖和木聚糖等物质含量以降低粘度。图 1 中 PGK 是酵母菌的特异性启
动子，ADH 为终止子，KanMX 是遗传霉素抗性基因。GluZ 和 XylB 两种融合基因的结构如图 2 所示，
MFα是酵母菌特有的信号肽基因（信号肽可以引导分泌型蛋白的表达）。请回答下列问题。
(1)PCR 扩增序列时，需设计相应的引物，引物的本质是 ，其作用是 。
(2)结合图 1 和图 2，应选择限制酶 对质粒进行切割，原因是 （答出两点）。为使 MFα
与 GluZ（或 XylB）连接形成融合基因，引物 R1 与引物 F2（或引物 F3）的 5'端引入的限制酶种类的
要求是 。
(3)科研人员将两种融合基因分别重组至质粒 YE 得到重组质粒 G 和 X，并对处于特殊状态的酵母菌进行
转化。为检测转化是否成功，可在培养基中加入遗传霉素，其作用是 ，在获得的酵母菌单菌
落中选取 6 个单菌落分别制成菌悬液，标号为 1~6，然后分别加入含木聚糖或葡聚糖的刚果红平板的
圆孔中，观察透明圈的产生情况，结果如图 3 所示，其中同时含有质粒 G 和质粒 X 的菌悬液是
（用序号表示），判断依据是 。
(4)为验证（3）中获得的转基因酵母菌能降低啤酒的粘度，请设计合理的实验进行探究，要求写出实验
思路、预期结果及结论。（实验材料：盛有等量大麦汁的发酵容器、普通酵母菌菌液、转基因酵母菌
菌 液 等 ） 实 验 思 路 ： 。 预 期 结 果 及 结
论： ，说明转基因酵母菌能降低啤酒的粘度。
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一、选择题：（本题共 15 小题，1-10 题，每小题 2 分，11-15 题，每小题 4 分，共 40 分。在每
小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求）
题号 1 2 3 4 5 6 7 8
答案 B D D B A D C B
题号 9 10 11 12 13 14 15
答案 C D B B D C B
二、非选择题：（本题共 5 小题，共 60 分）
16.（8 分，除标注外，每空 1 分）
(1) 动物细胞培养 动物细胞融合
(2) ①②③④
(3) 既能无限增殖、又能产生所需抗体（2 分） 小鼠腹水 培养液
(4) 40~55
17.（11 分，除标注外，每空 1 分）
(1)植物体细胞杂交和植物组织培养（2 分）
(2)纤维素酶和果胶酶 诱导原生质体融合 绿色的叶绿体
(3)渗透压 愈伤组织 未分化
(4)形态和数目 含有黑腐病菌 次氯酸钠
18.（14 分，每空 2 分）
(1)纤维素酶
(2)人为创造适合纤维素分解菌生存的环境，腐烂的滤纸上可能密布纤维素分解菌
(3)诱变育种或基因工程育种 温度、pH、溶解氧、罐压、通气量、搅拌、泡沫和营养 保证微生
物对营养物质的需求：防止代谢产物对菌株造成危害
(4)图 1 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，
因此通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌
19.（14 分，每空 2 分）
(1)a 和 c b 和 d
(2)Y DNA 聚合酶只能从有模板的 3＇端延伸 DNA 链
(3)a 和 d
(4)推测应有的氨基酸序列 合成新的基因
20.（13 分，除标注外，每空 1 分）
(1)短单链核酸 使 DNA 聚合酶能够从引物的 3'端开始连接脱氧核苷酸
(2)NdeⅠ、KpnⅠ 保证目的基因插入启动子和终止子之间、不破坏标记基因、防止质粒和目的基因
自身环化等（2 分） 同种限制酶或能产生相同末端的限制酶
(3)对转入重组质粒的酵母菌进行初步筛选 5 5 号菌悬液在木聚糖刚果红平板和葡聚糖刚果红平
板上均出现了透明圈，表明其既能分解木聚糖又能分解葡聚糖
(4)取两个相同的盛有等量大麦汁的发酵容器，标号为 A 和 B，将等量等浓度的转基因酵母菌和普通酵母
菌的菌液分别接种于 A 和 B 中（1 分）；在相同且适宜的条件下进行发酵（1 分）；一段时间后检测啤酒
的粘度（1 分）。 若 A 组啤酒的粘度明显小于 B 组（1 分）

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