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机密*启用前
2025 年 4 月山东师大附中高二阶段性检测试题
生 物
注意事项：
1 ．答卷前，考生务必将自己的姓名、考生号等填写在答题卡和试卷指定位置。
2 ．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮 擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
3 ．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
一、单项选择题：本题共 15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。
1 ．真核细胞线粒体的起源可追溯到十几亿年前，原始需氧细菌被真核细胞吞噬后与宿主细胞共同生存，并进化 为宿主细胞内专门进行细胞呼吸的细胞器。下列推测不正确的是( )
A ．线粒体和醋酸杆菌的 DNA 都是环状的
B ．被吞噬的细菌可从宿主细胞中获取有机物
C ．原始需氧细菌和真核细胞都具有生物膜系统
D ．线粒体的内膜可能来源于原始需氧细菌的细胞膜
2 ．新冠病毒主要攻击人体的肺部细胞，它是一种正链 RNA 病毒。新冠病毒的正链 RNA 侵入宿主细胞后，首先 作为模板合成病毒的蛋白质，然后在依赖于 RNA 的 RNA 聚合酶的作用下，合成负链 RNA ，进而以负链 RNA 为模板合成正链 RNA ，最终组装成子代病毒颗粒。下列有关叙述错误的是( )
A ．新冠病毒的正链 RNA 具有mRNA 的功能
B ．在宿主细胞内，子代新冠病毒是由有关蛋白质与负链 RNA 组装成的
C ．通过抑制依赖于 RNA 的 RNA 聚合酶的活性可阻止新冠病毒在人体内的增殖
D ．新冠病毒在宿主细胞中能够合成自身的蛋白质依赖于密码子的通用性
3 ．豆豉是一种古老的传统发酵豆制品，发酵原理与腐乳类似，豆豉制作流程如下图。装坛后放在室外日晒，每 天搅拌两次。下列相关叙述正确的是( )
A ．传统方法制作豆豉，以混合菌种的液体发酵为主
B ．前期发酵利用的是自然界的微生物，此时微生物会大量繁殖
C ．调味过程中加盐可抑制杂菌生长，白酒和风味料只是调节口味
D ．发酵的目的主要是让酵母菌产生酶，搅拌能增加发酵液的溶氧量
4 ．某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在 底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌 T ，培养一段时间后，再用清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌 T 不会流失），
在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵）。实验流程如图所示。下列选项不正确的是( )
A ．菌 T 可能产生分解纤维素的酶，能够高效催化纤维素分解
B ．淋洗液中还需要加入氮源等营养成分，氮源的主要作用是合成一些氨基酸、核苷酸等含氮物质
C ．可采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌，在使用该方法时需要注意必须将冷空气充分排除再开始加压
D ．将酵母菌接种到灭菌后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。发酵过程中，要始终保持
密封状态
5 ．饮用被细菌污染的水后，细菌在消化道内会繁殖并产生毒素，引起急性肠胃炎。某同学利用图 1 所示方法， 检测饮用水的细菌含量，图 2 为不同稀释度下得到的平板。下列相关叙述不正确的是( )
A ．配制图 1 所示固体培养基时，需要先调整到适宜的 pH ，再灭菌
B ．图 1 中① ~③三个培养皿菌落数的平均值乘稀释倍数即为样品中细菌数 C ．图 2 是稀释涂布平板法的结果，统计的菌落数比活菌的实际数目要少 D ．图 2 所示的平板中，a 和 c 的计数结果不适合用于计算样品中的细菌数
6 ．安莎霉素主要用于治疗结核分枝杆菌导致的肺部感染。该抗生素是一种产自深海的赖氨酸缺陷型放线菌所产 生的。为筛选出能产安莎霉素的菌种，科研工作者用紫外线对采自深海的放线菌进行诱变与选育，实验的部分流 程如下图所示。下列叙述正确的是( )
注：原位影印可确保在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落。
A ．经过 A 处理，试管中大多数放线菌都可产生安莎霉素
B ．在①中进行扩大培养时，接种后需对培养基进行灭菌处理 C . ②和④是完全培养基， ③是缺赖氨酸的不完全培养基
D ．D 菌落不能产生安莎霉素，而 E 菌落能产生安莎霉素
7 ．在发酵过程中，多个黑曲霉菌体常聚集成团形成菌球体，菌球体大小仅由菌体数量决定。黑曲霉利用糖类发 酵产生柠檬酸时需要充足的氧。菌体内铵离子浓度升高时，可解除柠檬酸对其合成途径的反馈抑制。下列说法错 误的是( )
A ．相同菌体密度下，菌球体越大柠檬酸产生速率越慢
B ．发酵中期添加一定量的硫酸铵可提高柠檬酸产量 C ．发酵过程中 pH 下降可抑制大部分细菌的生长
D ．发酵结束后，将过滤所得的固体物质进行干燥可获得柠檬酸产品
8 ．花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植 物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图 1 所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中 某些特异性蛋白，结果图 2 所示。下列有关叙述错误的是( )
A ．图 1 过程①可在渗透压略高于细胞液渗透压的溶液中进行
B ．图 1 培育的杂种植株体细胞染色体数目最多可达到 32 条 C ．图 2 中属于杂种植株的是 4 和 5 ，1 可能是花椰菜
D ．病菌悬浮液均匀喷施于杂种植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，可筛选抗 病性强的杂种植株
9 ．CTLA-4 和 PD-1 均是 T 细胞表面的受体分子，与特定分子结合后，能抑制 T 细胞活性甚至使 T 细胞凋亡， 从而使机体肿瘤细胞免受 T 细胞攻击。抗 CTLA-4 或抗 PD-1 的单克隆抗体有较好的抗肿瘤效果。科研人员将两 种不同的杂交瘤细胞融合得到双杂交瘤细胞（能够悬浮在液体培养基中生长繁殖），可以从培养液中筛选出同时 抗 CTLA-4 和 PD-1 的双特异性抗体（如图），实验显示疗效更好。下列叙述正确的是( )
A ．双杂交瘤细胞需要 CTLA-4 和 PD-1 刺激，才能产生双特异性抗体
B ．双特异性抗体与肿瘤细胞的结合具有更强的特异性，从而减少副作用
C ．对培养到一定密度的双杂交瘤细胞进行传代培养时，需使用胰蛋白酶处理
D ．双特异性抗体可以靶向作用两种受体分子，增强细胞免疫达到更好的抗肿瘤效果 10 ．阅读以下两项科研成果，并利用所学知识判断相关评价，其中不科学的是( )
①MyoD 蛋白是细胞分化的调控因子之一 ，将 MyoD 蛋白基因转入体外培养的成纤维细胞中并使其表达，结果使 来自皮肤结缔组织的成纤维细胞表现出骨骼肌细胞的特征。
②某种名为 reversine 的人工合成小分子化合物能诱导体外培养的人体细胞去分化，即诱使高度分化的细胞发生 生长倒退，返回到未分化状态。
A ．MyoD 蛋白可能对成纤维细胞中的基因表达有一定的调控作用
B ．经 reversine 诱导形成的未分化细胞中遗传信息不会发生改变 C ．以上两项研究成果说明人体内细胞的分化具有可逆性
D ．以上研究可用于病人自体细胞培养并移植，以治疗某些疾病
11 ．胚胎工程技术的应用为优良牲畜的大量繁殖提供了有效的解决办法，如奶牛活体采卵—体外胚胎生产
（OPU-IVP）技术，该技术流程如图。已知雄性奶牛 Y 染色体上有一段雄性特异的高度重复序列，依据该重复 序列设计引物，建立了用于奶牛胚胎性别鉴定的 PCR 体系（SRY-PCR）。下列叙述错误的是( )
A ．体外受精后，在透明带和卵细胞膜间观察到两个极体说明受精
B ．活体采卵前诱导母牛超数排卵所注射的激素只能作用于特定细胞
C ．取滋养层细胞进行 SRY-PCR ，应选择结果为阴性的胚胎进行移植 D ．为防止受体母牛发生免疫排斥反应，胚胎移植前需要进行免疫检查
12 ．研究人员用酶 M 和酶 N 两种限制酶同时处理某DNA 分子和质粒，得到的DNA 片段如图所示。图中 DNA 片段只注明了黏性末端处的碱基种类，其他碱基的种类未注明。下列叙述错误的是( )
A ．该 DNA 分子和质粒上均含有酶 M 的一个切割位点和酶 N 的一个切割位点
B ．根据图示信息不能确定图中形成的不同黏性末端与这两种限制酶的对应关系 C ．用 T4 DNA 连接酶或 E.coli DNA 连接酶均可以将片段乙和片段丁连接起来 D ．片段乙、片段丁、片段戊可依次连接形成一个环状 DNA 分子
13 ．通过引物设计运用 PCR 技术可以实现目的基因的定点突变。如图为基因工程中获取突变基因的过程，其中 引物 1 序列中含有一个碱基 T 不能与目的基因片段配对，但不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中引物 1 和引物 2 的 5'端分别设计增加限制性内切酶 a 和限制性内切酶 b 的识别位点。
有关叙述正确的是( )
A ．两种引物中设计两种限制酶识别位点有利于目的基因的定向插入
B ．在 PCR 反应体系中还需要加入 4 种游离核糖核苷酸、解旋酶、Taq 酶、ATP 等
C ．第 2 轮 PCR ，引物 1 与图中@结合并且形成两条链等长的突变基因
D ．在第 3 轮 PCR 结束后，含突变碱基对且两条链等长的 DNA 占 1/8
14 ．研究人员将编码 OsGLO1、EcCAT、EcGCL 和 TSR 四种不同的酶的四个基因分别与叶绿体转运肽 （引导合 成的蛋白质进入叶绿体）基因连接，构建多基因表达载体（载体中部分序列如下图所示），利用农杆菌转化法转
化水稻，在水稻叶绿体内构建了一条新代谢途径，提高了水稻的产量。下列叙述不正确的是( )
A ．可用抗原-抗体杂交技术检测四种酶在转基因水稻中的表达量
B ．四个基因转录时以 DNA 的不同条单链为模板
C ．应选用含潮霉素的培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞
D ．四个基因在水稻叶绿体内进行转录翻译
15 ．人干扰素（IFN）是机体免疫细胞产生的一类细胞因子。用白细胞生产干扰素时，每个细胞最多只能产生 100 ~
1000 个干扰素分子，而用基因工程技术改造的大肠杆菌发酵生产（原理如图），在 1～2 天内每个菌体能产生 20 万个干扰素分子。天然的干扰素在体外保存相当困难，如果将干扰素分子上的一个半胱氨酸变为丝氨酸，在一定 条件下可以延长保存时间。下列说法正确的是( )
A ．基因工程核心步骤需要的工具酶有 DNA 聚合酶、限制酶、 DNA 连接酶，其作用部位都是磷酸二酯键
B ．将重组质粒导入大肠杆菌常用显微注射技术
C ．酵母菌或大肠杆菌都可作受体菌，二者生产的干扰素在结构上没有区别
D ．为延长保存时间，对干扰素进行改造，需通过改造干扰素基因来实现 二、不定项选择题：本题共 5小题，每小题3分，共 15分。
16 ．多种发酵食品中含有生物胺（低分子量含氮有机化合物），人体摄入过量生物胺会引起不良反应。某些微生 物可产生多铜氧化酶（MCO）降解生物胺，但降解过程中会产生过氧化氢，可能会导致 MCO 氧化损伤，进而使 其降解生物胺的效率下降。科研人员筛选产生 MCO 的微生物，并用于食品发酵。下列说法正确的是( )
A ．筛选产生 MCO 微生物的培养基中应加入生物胺作为唯一氮源，该培养基中生长的微生物不一定都具有 降解生物胺的能力
B ．发酵食品生产时为了维持 MCO 的活性，可能需要向发酵罐中加入适量的过氧化氢酶
C ．将 MCO 加入发酵罐，并进行加热处理，既可以减少过氧化氢对 MCO 的损伤，又一定能得到生物胺含量 较低的发酵食品
D ．将控制过氧化氢酶与 MCO 合成的基因采用转基因技术转入大肠杆菌中，可能得到能同时产生两种酶的 工程菌
17 ．毛状根是植物感染发根农杆菌（其 T-DNA 含有生长素合成基因）后产生的病理结构，在生产某些次生代谢 物方面具有独特的优势。下图为利用植物组织或细胞培养技术进行次生代谢物生产的流程，下列正确的有( )
A ．诱导愈伤组织时，在酒精灯火焰旁将外植体的 1/3~1/2 插入培养基
B ．培养体系 1 制备过程中导入外源基因可采用花粉管通道法
C ．与培养体系 1 和 2 不同，培养体系 3 的获得不需要添加外源植物激素 D ．培养体系 1 和 3 的制备都利用了基因重组原理，且可产生相同代谢产物
18 ．CD47 是一种跨膜糖蛋白，可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌肿 瘤细胞表面的 CD47 含量比正常细胞高 1.6～5 倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为验证抗 CD47 的单克隆抗体可以解除 CD47 对巨噬细胞的抑制作用，研究人员按照如下流程进行了实验。下列叙述正确的是( )
A ．抗 CD47 的单克隆抗体与巨噬细胞结合，增强其吞噬作用
B ．过程@可利用CD47 筛选出产生所需抗体的杂交瘤细胞 C ．该实验的对照组应直接将巨噬细胞与肿瘤细胞共同培养 D ．预期实验结果为实验组巨噬细胞的吞噬指数低于对照组
19 ．大引物 PCR 定点突变常用于研究蛋白质结构改变导致的功能变化。单核苷酸的定点诱变需要通过 PCR 获得， 其过程如图所示。下列有关分析正确的是( )
A ．向 PCR 体系中加入引物能激活耐高温的 DNA 聚合酶
B ．PCR-I 经过一次循环后即可获得大引物模板 C ．PCR-I 得到的产物均作为 PCR-Ⅱ 的引物
D ．PCR-Ⅱ 选用大引物和引物乙以获得定点诱变的基因片段
20 ．FSHD 是一种罕见的神经肌肉疾病，该病是由于 DUX4 基因突变产生对骨骼肌有毒的 DUX4 蛋白。研究发 现利用反义疗法可治疗该病，即将 DUX4 的反义基因导入患病组织，从而达到抑制 DUX4 基因表达的目的。构 建 DUX4 反义基因表达载体的过程如下图所示，已知 DUX4 的反义基因与 DUX4 基因的碱基序列相同，但转录 的模板链不同。下列说法正确的是( )
A ．利用图中质粒和 DUX4 基因构建反义基因表达载体时，应选择的限制酶为 EcoRI 和 XbaI
B ．可采用显微注射法将 DUX4 反义基因表达载体导入患病组织细胞
C ．DUX4 反义基因转录的 mRNA 可与 DUX4 基因转录的 mRNA 发生碱基互补配对抑制翻译过程
D ．利用 DUX4 基因序列制备的引物进行 PCR 可检测 DUX4 反义基因是否导入受体细胞 三、非选择题：本题共 5小题，共55分。
21 ．（ 10 分）芽孢杆菌和假单胞菌既能产生抑菌物质来抑制植物病原菌的生长，又能产生激素类物质促进植物 生长。为研究复合使用两种菌对植物生长的影响，科研人员进行了以下实验。
(1)为研究混合培养后对两种菌生长的影响，首先利用绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白分别标记芽孢杆菌和假单胞 菌，然后将两种菌接种于同一个平板上，如图 1 所示。接种芽孢杆菌和假单胞菌的工具分别是 和 ，接种后为防止皿盖上的水珠滴落和杂菌污染，要将平板培养。实验中还需检测培养基是 否被污染，方法是。若假单胞菌抑制芽孢杆菌的生长，则将平板放在能观察到荧光的显微镜下，出现 的现象是
(2)欲研究假单胞菌产生的不同物质对植物病菌 DZ-12 的抑制作用，可采用滤纸片法，首先取适量 的菌 液涂布于固体培养基上，将无菌滤纸片在中浸泡后覆盖于固体培养基上，测量以判断抑制 作用的强弱。实验结果表明假单胞菌产生的 orfA 是抑制 DZ-12 生长的关键物质。
(3)通过图 2 所示实验发现，假单胞菌抑制芽孢杆菌生长的物质除 orfA 以外，还有其他物质，判断依据是 。
平板 M 和 N 上分别涂布 DZ-12、芽孢杆菌，菌落周围形成的无菌区域为抑菌圈 菌落 1 ：野生型假单胞菌
菌落 2 ：orfA 合成缺陷突变体 菌落 3 ：orfA 合成过量突变体
22 ．（ 12 分）科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和 鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示。
(1)为获得原生质体，过程①需要利用处理两种植物细胞。两种植物细胞的原生质体融合成功的依据 是。
(2)写出促进原生质体融合的方法（写出两个）。
(3)过程③和④利用的植物细胞工程技术是。该技术依据的生物学原理是。
(4)细胞融合完成后，融合细胞的细胞膜表面的荧光颜色可能是 ，细胞融合过程是否受温度的影响 （填“ 是”或“ 否” ）。
(5)已知番茄细胞内有 12 对同源染色体，马铃薯细胞内共48 条染色体，则在“ 番茄一马铃薯”细胞分裂过程中 最多可以观察到条染色体。
23 ．（12 分）猪细小病毒（PPV）会导致猪患细小病毒传染病。NS1 蛋白参与 PPV 的复制等生命活动，猪感染
PPV 后会产生抗 NS1 蛋白抗体，研究人员开发了一种通过检测该抗体以快速检测 PPV 的试纸。 (1)研究发现，金黄色葡萄球菌 A 蛋白（SPA）和 NS1 蛋白均能与抗 NS1 蛋白抗体特异性结
合。为探究它们与抗体的结合位点是否相同，研究人员首先制备了抗 NS1 蛋白的单克隆抗体，
基本思路是：将从注射过的小鼠中提取的 B 淋巴细胞与细胞融合，再经过 两次筛选最终获得具有特点的杂交瘤细胞。然后将得到的 抗 NS1 蛋白抗体分为 Fab 和 Fc 两部分，电泳后分别用 SPA 和 NS1 蛋白作探针进行杂交，结 果如图 1 所示，由此得出的实验结论为。
(2)利用 NS1 蛋白和 SPA 制备的 PPV 检测试纸，原理如图 2 所示。其中 PPV 多抗 IgG 可特异性结合包含 NS1 蛋白在内的多种 PPV 抗原，当胶体金在检测线、质控线处聚集时，会出现可见条带。
若检测结果为检测线和质控线处均出现可见条带，则说明样品中含有 。
(3)研究发现，只有当PPV 在细胞内大量繁殖后，才会在猪血清中检测到抗 NS1 蛋白抗体。据此推测，若将灭活 的 PPV 疫苗接种到健康猪体内后，取其血清利用上述试纸进行检测的结果应为 ，原因是 。
24 ．（9 分）玉米籽粒中的类胡萝卜素含量是衡量其营养价值的重要指标。野生型玉米籽粒呈黄色。科研人员将 野生型玉米经甲基磺酸乙酯（EMS）诱变处理获得 3 株单基因隐性突变体，其籽粒均为白色，分别记为 M1、M2、
M3。回答下列问题：
(1)推测 P 基因参与玉米籽粒中类胡萝卜素的合成，野生型与 M1 的 P 基因非模板链部分序列如图 1 所示。与野 生型相比，M1 的 P 基因控制合成的多肽链长度（填“ 不变”“ 变长”或“ 变短” ）（起始密码子为 AUG ，终止密码子为 UAA、 UAG、UGA）。
(2)从野生型和 M2、M3 的籽粒细胞提取总 RNA 逆转录为 cDNA ，扩增 P 基因的 cDNA 并测序，发现 M2 的 cDNA 缺失 36 个碱基，M3 由于某种原因导致其 cDNA 含P 基因的部分内含子序列。电泳验证野生型、M2、 M3 的扩
增产物，结果如图 2 所示。泳道 1、泳道 2、泳道 3 对应的样品分别是 。
(3)为验证P 基因参与玉米籽粒中类胡萝卜素的合成，利用无缝克隆in-fusion 技术构建含 P 基因的重组载体，相 关流程如图 3 所示。in-fusion 酶具有 3'→ 5'外切酶活性，从 DNA 的 3'端切除 15 个核苷酸，进而出现单链区域， 最终实现目的基因与线性化质粒连接。
①PCR1 中的引物 A 和B 应包含 对应的部分序列。
②选用引物 进行 PCR2 ，获得线性化质粒。
③目的基因和线性化质粒同侧各含 15bp 相同序列，且左右两侧之间的序列是不同的，这样做的目的 是 。（答出两点）
25 ．（12 分）二化螟的幼虫主要危害水稻的叶和茎，严重影响产量。转Bt 基因水稻能一定程度抵抗二化螟的侵 害，cryIC 基因能促进Bt 基因的表达。科研人员采用GAL4/UAS 基因调控系统构建了转基因抗虫水稻，实验部 分流程如图 1 所示。GAL4/UAS 系统调控基因表达的机理如图 2 所示：UAS 序列抑制靶基因表达使靶基因沉默， GAL4 是一种转录活性因子，可特异性地识别并结合于UAS 序列激活 UAS 下游基因的转录。
(1)图 1 中①②过程所用基因常用 PCR 扩增的方法获得。 PCR 的原理是 ；此过程需要用引物，引物 与模板链的端结合。①②过程前需要构建基因表达载体，此过程需用相同的限制酶切割目的基因与载体， 原因是。③④过程除了要进行目的基因的检测和鉴定外，还需植物组织培养才能培养成转基因个体。 (2)现已获得 crylC 基因、 Bt 基因和绿色荧光蛋白基因GFP。拟采用农杆菌转化法导入目的基因，图 3 为 Ti 质粒 的 T-DNA 片段示意图。若要以 GFP 基因为标记基因筛选受体细胞，通过特异性启动子GAL4 调控 UAS 靶基因 的表达，使 Bt 基因只在杂交子代的叶片和茎鞘中高效表达，则构建UAS-靶基因表达载体时，应将 Bt、crylC、 GFP 三个基因插入到图 3 所示 T-DNA 中的位置分别 。（用序号①②③作答）
(3)将 GAL4 转基因个体与 UAS-Bt 转基因个体杂交得 F1 ，F1 全表现为抗虫，F1 自交得 F2 ，F1 植株表现抗虫性状 的原因是。若 F2 中表型及其比例为 ，则 GAL4 基因和Bt 基因插入一对同源染色体上； （假设插入的基因均有效，个体的存活率相等）
(4)采用 GAL4UAS 系统培育转基因水稻，构建 GAL4 基因表达载体时采用叶片和茎鞘中特异性表达基因的启动 子，可使靶基因只在植株叶片和茎鞘中表达。该技术在提高食品安全方面可能存在一定的意义，具体表现为 。
参考答案
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 C B B D B C D B D C
题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
答案 D D A D D ABD AC BC D BC
21 ．(1) 涂布器 接种环 倒置 将未接种的培养基在适宜温度下放置相应的 时间，观察培养基上是否有菌落产生 红色荧光和绿色荧光中间有空白
(2) 植物病菌 DZ-12 假单胞菌产生的不同物质的无菌液 抑菌圈大小
(3)左图的2 号菌落周围没有抑菌圈，右图的2 号菌落周围出现抑菌圈
22 ．(1)纤维素酶和果胶酶 杂种细胞再生出新的细胞壁
(2)离心法、电融合法、聚乙二醇(PEG)融合法、高 Ca2-高 pH融合法
(3) 植物组织培养 植物细胞具有全能性
(4) 红色荧光和绿色荧光、红色荧光、绿色荧光 是 (5)144
23 ．(1) NS1 蛋白 骨髓瘤 既能大量增殖又能产生特定抗体 SPA 和 NS1 蛋 白与抗体的结合位点不同
(2) 抗 NS1 蛋白抗体
(3) 质控线处出现可见条带，检测线处不出现可见条带；灭活的 PPV 不能大量繁殖，血清 中检测不到抗 NS1 蛋白抗体
24 ．(1)变短
(2)野生型、M3、 M2
(3) P 基因和质粒（或 P 基因和引物 1 与 4） 1 和 4 in-fusion 酶切割后形成互补的 黏性末端，防止目的基因与线性化质粒反向连接。
25 ．(1) DNA 的半保留复制 3’
产生相同的末端，以便能用 DNA 连接酶将载体和目的基因连接
(2)②③①（或③②① )
(3)F1 同时含有 GAL4 基因和 UAS-Bt 基因，GAL4 基因表达产生的 GAL4 蛋白与 UAS 结合 激活 Bt 基因的表达 抗虫：不抗虫=1 ：1
(4)利用 GAL4UAS 调控系统，使目的基因只在特定的部位表达，而在人食用的部位不表达

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