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侨光中学2025年春季高二年第2次阶段考生物试卷
（考试时间：90 分钟 满分：100 分 ）
一、选择题（共25小题，每题2分，共50分）
1. 传统发酵技术是直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保留下来的面团、卤汁等发酵物中的微生物进行发酵，制作食品的技术。下列相关叙述正确的是（　　）
A. 酿酒过程中密封的时间越长，酵母菌产生的酒精量就越多
B. 制作泡菜时坛口要密封，主要是为了避免外界杂菌的污染
C. 利用酵母菌制作馒头时，馒头松软与酵母菌产生的酒精有关
D. 在制作腐乳的过程中，毛霉能将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸
2. “林都”伊春盛产蓝莓，下图是当地居民以鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋过程简图。下列叙述正确的是（ ）
A. 发酵过程中为了减少杂菌污染要去梗后再清洗
B. 过程③在氧气、糖源都充足条件下可直接发酵为蓝莓醋
C. 过程③、④中主要发酵菌种的细胞结构相同
D. 过程④⑤的发酵条件不同，过程④所需的最适温度高于过程⑤
3.下表表示某培养基的配方（生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色，并有金属光泽），下列叙述正确的是（　　）
成分 蛋白胨 葡萄糖 KH2PO4 伊红 亚甲基蓝 蒸馏水 琼脂
含量 10g 10g 2g 0.4g 0.065g 1000mL 15g
A．从用途分析该培养基属于选择培养基
B．蛋白胨可为目标微生物提供氮源
C．该培养基的制备流程为配置培养基→灭菌→加入琼脂→倒平板
D．该培养基pH值应调节至酸性
4.微生物油脂又称单细胞油脂，是由酵母菌、细菌等产油的单细胞微生物在一定培养条件下，在体内大量合成并积累的游离脂肪酸类及其他的脂类。下列有关叙述，不正确的是（　　）
A．实验室获得纯净的产油单细胞微生物的关键是通过消毒、灭菌等无菌技术防止杂菌污染
B．鉴定产油单细胞微生物的种类一般用固体培养基，生产微生物油脂一般用液体培养基
C．稀释涂布平板法可用于产油单细胞微生物活菌计数，不适合用于分离产油单细胞微生物
D．产油单细胞微生物可以从自然界中去筛选，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得
5. 下列关于发酵工程应用的叙述，错误的是（　　）
A. 在青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，动物食用后能提高免疫力
B. 将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌，再通过发酵可生产乙型肝炎疫苗
C. 与传统的化学农药不同，微生物农药可利用微生物或其代谢物防治病虫害
D. 啤酒生产的主发酵过程应控制合适温度和较高溶解氧以保证酵母菌繁殖
6. 青霉菌是一种好氧微生物，在青霉菌发酵时，在合成的开始阶段青霉素和头孢霉素有共同的前体，不久出现分支。生产抗生素的发酵罐如图所示，以下叙述正确的是（ ）
A. 由于青霉素的抗菌作用，通入发酵罐的空气无需灭菌
B. 搅拌能够使氧气与培养液快速混合，但不利于散热
C. 将外源扩环酶基因导入青霉菌，可增加头孢霉素产量
D. 青霉菌的发酵最终获得的青霉素是一种单细胞蛋白
7.抗生素可由微生物产生，具有抑菌作用，能在琼脂培养基中扩散。学习小组为探究一种从土壤中获得的甲菌是否产生抗生素，先在琼脂培养基平板上划线接种，在27 ℃下培养3天，形成甲菌落。然后在该培养基中接种乙、丙、丁三种致病菌(图A)，继续在同样条件下培养3天，结果如图B。分析结果，得出的结论是（ ）
①甲菌产生了抗生素
②丁菌的生长被丙菌产生的抗生素抑制
③乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制
④丙菌产生的抗生素抑制了乙菌生长
A.①③ B. ①④
C. ②③ D. ②④
8.酵母菌的品质影响葡萄酒的产量和质量，研究人员为分离出产酒精能力强的酵母菌菌株，进行了如图1所示实验，甲、乙、丙、丁锥形瓶内分别加入100mL完全培养基，下列说法错误的是（ ）
A. 用稀释涂布平板法统计的菌落数可能低于实际的活菌数
B. 用图1中合适的数据计算出葡萄酒过滤液的活菌数为6.8×109个/L
C. 菌种接种过程中的试管口、瓶口等需用灼烧灭菌
D. 由图2可知，丁组酵母菌产酒精能力与乙相同
9.树莓果实营养丰富，应用组织培养技术可以在短时间内获得大量优质种苗，实现树莓的工厂化生产。下列与树莓组织培养相关叙述正确的是（ ）
A．采用组织培养技术对树莓茎尖脱毒处理后，可以抵抗病毒的感染
B．使用MS培养基时，应将茎尖的形态学上端朝上，并完全插入到培养基中
C．用幼茎进行组织培养时，需用适宜浓度的酒精和次氯酸钠的混合液进行消毒
D．试管苗移栽前应将其在培养箱中打开封口膜几天，再用流水清洗掉根部的培养基
10. 现有甲、乙两物种 （均为二倍体纯种），其中甲种植株的光合作用能力高于乙种植株，但乙种植株很适宜在盐碱地种植。要利用甲、乙两种植株的各自优势，培育出高产耐盐的可育植株，有多种生物技术手段可以利用。下列所采用的技术手段中可行的是（　　）
A. 利用植物体细胞杂交技术，可获得满足要求的四倍体目的植株
B. 两种植株杂交后，得到的F1再连续自交可培育出纯种目的植株
C. 两种植株杂交后，得到的F1再利用单倍体育种可较快获得纯种目的植株
D. 诱导两种植株的花粉融合并培育成幼苗，可培育出二倍体目的植株
11. 图中甲、乙、丙表示生物个体或结构，①～③表示相应过程，下列叙述与图示不符的是（ ）
A. 若甲为二倍体植株，乙为花粉粒，丙为单倍体，则③过程可以用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗
B. 若甲为植物体一部分，乙为愈伤组织，丙为胚状体，则①过程通常在避光适宜温度的条件下进行
C. 若甲为阿尔茨海默症患者，乙为iPS细胞，丙为神经干细胞，则②过程本质是基因选择性表达
D. 若甲为成年母羊，乙为去核的卵母细胞，丙为重组细胞（胚胎），则③过程的核心技术是胚胎移植
12. 大量悬浮培养产流感病毒的单克隆动物细胞，可用于流感疫苗的生产。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 培养前，可用机械的方法处理某些组织使其分散成单个细胞
B. 用合成培养基培养动物细胞时一般要加入血清等天然成分
C. 悬浮培养单克隆动物细胞一定程度上能避免接触抑制
D. 传代培养时，悬浮培养的细胞用胰蛋白酶等处理后再离心收集
13. 下列有关生物技术与工程的实验叙述，错误的是（ ）
A. iPS细胞可以分化成血细胞、神经元、心肌细胞等多种细胞
B. 将PCR产物与核酸染料混合后缓慢注入加样孔在接通电源
C. DNA的粗提取，采用“DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精”的原理
D. DNA分子在琼脂糖凝胶中的迁移速率与凝胶的浓度、DNA的大小和构象等有关
14. CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6-5倍，导致吞噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如下流程进行了实验。下列说法不正确的是（　　）
A. 进行步骤①的处理目的是使小鼠能产生抗CD47抗体的B细胞
B. 对照组应设置为：巨噬细胞+正常细胞共培养体系+单克隆抗体
C. 利用该单克隆抗体可以诊断包括肺癌、结肠癌在内的多种癌症
D. 实验组中吞噬细胞的吞噬指数显著高于对照组可验证上述推测
15. 图甲为受精作用的过程以及早期胚胎发育示意图，图乙表示早期胚胎发育的某个时期。下列叙述正确的是（ ）
A. 图甲中过程②细胞数量增加，胚胎的总体积和细胞的全能性几乎不变
B. 受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，孵化后进入囊胚期
C. 图乙处于图甲中的a时期，细胞⑦将来发育成胎儿的胎膜和胎盘
D. 胚胎发育至b时期才开始了细胞分化，随后发育形成三个胚层
16. 荷斯坦奶牛的产奶量高，科研人员采用体外受精、胚胎分割和胚胎移植等技术提高良种荷斯坦奶牛的繁殖率。下列叙述不合理的是（ ）
A. 进行体外受精时需对卵母细胞和精子分别进行成熟培养和获能处理
B. 体外培养早期胚胎细胞时，需定期更换培养液以便清除细胞代谢物
C. 胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
D. 胚胎移植前，取内细胞团细胞做DNA分析鉴定性别以获得雌性胚胎
17. 研究发现，小鼠四倍体胚胎（4n）具有发育缺陷，只能发育成胎盘等胚胎以外的结构。从正常小鼠获得的ES细胞（2n）能够诱导分化形成所有的细胞类型，但很难分化形成胎盘。由四倍体胚胎与ES细胞组成的嵌合体则会使二者的发育潜能相互补偿，可培育出ES小鼠。下列叙述正确的是（　　）
A. 嵌合体发育形成的ES小鼠基因型与供体ES细胞的基因型不同
B. 嵌合体中的ES具有自我更新能力并只能分化为胎盘等胚外组织
C. 将正常小鼠2细胞期胚胎用灭活病毒诱导法使2个细胞融合可得到四倍体胚胎
D. 嵌合体胚胎发育至原肠胚时需移植入与之生理状态相同的小鼠子宫内才可发育
18. 下列关于基因工程技术的叙述，正确的是（ ）
A. 质粒上常有抗生素合成基因作为标记基因以便筛选重组DNA分子
B. PCR反应中温度的周期性改变是为了耐高温DNA聚合酶催化不同的反应
C. 切割质粒的限制酶能特异性识别4个、6个、8个或其他数量的核苷酸序列
D. 利用PCR等技术检测出棉花细胞中含有抗虫基因代表抗虫棉培育成功
19. 常见的启动子可分为三类:组成型启动子（驱动基因在所有细胞、组织和器官中持续表达）；组织特异性启动子（调控基因只在某些特定的部位中表达）；诱导型启动子（通常在光、盐等信号作用下，使目的基因的转录水平有所提高）。下列叙述错误的是（ ）
A.启动子是一段有特殊序列的DNA片段，位于基因的上游
B.细胞分化与组织特异性启动子的调控有关，与组成型启动子无关
C.乳腺生物反应器的构建需要将组织特异性启动子与目的基因连接
D.盐诱导型启动子在高盐环境中被激活，可增加农作物的抗逆性
20.利用蛋白质工程对干扰素进行改造，可在一定条件下延长其保存时间。下列叙述错误的是( )
A.蛋白质工程与中心法则的信息流动方向是一致的
B.可用PCR技术检测改造后的干扰素基因是否转录
C.经改造后的干扰素基因能通过工程菌的繁殖实现遗传
D.蛋白质工程对干扰素的改造遇到的最大难题是设计其高级结构
21.用限制酶EcoRⅠ、KpnⅠ和二者的混合物分别降解一个1 000 bp(1 bp即1个碱基对)的DNA分子，降解产物分别进行凝胶电泳，在电场的作用下，降解产物分开，凝胶电泳结果如下图所示。该DNA分子的酶切图谱(单位：bp)正确的是（ ）
22. THP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将THP9基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种（已知图中THP9基因转录的方向为从左往右）。下列相关叙述正确的是（ ）
EcoRⅠ BamHⅠ KpnⅠ MfeⅠ HindⅢ
A. 若采用PCR技术对一个THP9基因进行扩增，则第n代复制共需要引物2n-1个
B. 构建基因表达载体时，用MfeⅠ、HindⅢ切割质粒，用EcoRⅠ、HindⅢ切割目的基因
C. 利用PCR技术获取THP9基因时应选择引物1和引物4
D. PCR过程中用到了缓冲液，缓冲液中一般要添加Mg2+用于激活RNA聚合酶
23. 幽门螺杆菌（Hp）感染会引发胃炎、消化性溃疡等多种疾病。研究人员将Hp的Ipp20基因作为目的基因，用限制酶Xho I和Xba I切割，通过基因工程制备相应的疫苗，质粒及操作步骤如图所示。下列相关叙述错误的是（　　）
A. Ipp20基因整合到大肠杆菌的DNA中属于基因重组
B. 基因表达载体导入之前，可用Ca2+处理大肠杆菌
C. 培养基A中添加了氯霉素，培养基B中添加了潮霉素
D. 能用来生产Hp疫苗的大肠杆菌在菌落3和5中
24．下图为利用大肠杆菌重组表达系统生产HPV疫苗的过程，质粒中lacZ基因可以编码产生β-半乳糖苷酶，可以分解物质X-gal产生蓝色物质，从而使菌落呈蓝色，否则呈白色。下列有关叙述错误的是（　　）
A．构建重组质粒时不选EcoR Ⅰ 以免破坏目的基因
B．作为受体的大肠杆菌不应含青霉素抗性基因，以便于筛选
C．筛选含重组质粒的大肠杆菌，应在培养基中加入X-gal和青霉素
D．在选择培养基上筛选出含重组质粒的大肠杆菌，应挑选蓝色菌落
25．重叠延伸PCR 技术是采用具有互补末端的引物，使 PCR 产物形成了重叠链，从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸，将不同来源的扩增片段重叠拼接起来的技术。某实验小组从猪源大肠杆菌中扩增得到了LTB 基因和ST1基因片段，并用重叠延伸PCR 技术构建了LTB -ST1 融合基因（如图）。下列有关叙述正确的是（　　）
A．可在同一个反应体系中进行LTB基因和ST1基因的扩增
B．PCR过程中，第2次循环获得目的链L时所用的引物为P1
C．图中的引物P2与引物P3的碱基序列均不能互补配对
D．杂交链延伸生成LTB-ST1融合基因时需要加入引物P1和P4
二、非选择题（共4 题，共50分）
26．（13分）生姜既是一种重要的调味蔬菜，又具有较高的药用价值。科研人员对生姜的繁殖以及药用价值开展了一系列研究。
(1)生姜通常采用无性繁殖方式进行生产。可取生姜茎尖作为组织培养的外植体，经 形成愈伤组织，再进一步培养成幼苗。茎尖作为组织培养的材料，其优点是 （写出两点）。若利用愈伤组织进一步获得生姜植株的过程中，发现愈伤组织只分裂而不能分化出芽和根，则从培养基的成分分析，最可能的原因是 。
(2)生姜块茎可以提取生姜精油，为进一步研究生姜精油的药用价值，进行了如下实验。
实验一：分别取0.1mL的表皮葡萄球菌（A）、金黄色葡萄球菌（B）、枯草芽孢杆菌（C）悬液，与20mL熔化的培养基混匀。在培养基中制备4个直径为8mm的小孔，向培养基的4个小孔中分别加入不同添加物，添加情况及实验结果如下表所示。
小孔编号 小孔添加物 （总体积都是150μL） 对不同菌种的抑菌圈直径（mm）
A B C
1 缓冲液和纯生姜精油（体积比1∶1） 13.4 13.3 13.9
2 吐温溶液和纯生姜精油（体积比1∶1） 15.8 15.6 15.6
3 吐温溶液和缓冲液（体积比1：1） 8 8 8
4 缓冲液（空白对照） 8 8 8
①该实验结果表明吐温溶液和纯生姜精油的作用是 。
实验二：实验研究发现生姜精油还有抗衰老的作用，向果蝇饲料中添加不同浓度的生姜精油后，测定衰老相关基因的表达量结果如下图。
②由图可推测SODI基因、TOR基因和MTH基因与细胞衰老的关系是
(3)若要将生姜精油应用于相关产品的开发，除了安全性以外，还可以研究哪些问题：
（至少写两点）。
27.（12分）
请根据下列两个资料回答相关问题：
资料1：用化学方法激活小鼠成熟的卵母细胞得到 phESC （孤雌单倍体干细胞），然后利用基因编辑技术沉默 phESC 中的相关基因，使 phESC 的细胞核状态接近精子细胞核的状态，再让其与卵细胞发生受精作用。如图1。
资料2：用化学方法激活小鼠的精子得到 ahESC （孤雄单倍体干细胞），然后对 ahESC中的相关基因进行编辑，使 ahESC 的细胞核具有卵细胞核的特点，再让其与精子发生受精作用并导入去核卵细胞。如图2。
（1）体内受精时，在精子触及卵细胞膜的瞬间，______会迅速产生生理反应阻止后来的精子进入；精子入卵后，______也会立即发生生理反应拒绝其他精子再进入。
（2）用______激素对雌性小鼠进行______处理可得到较多卵母细胞。
（3）ahESC与精子和去核卵细胞融合后，得到的融合细胞的性染色体组成可能是_______。
（4）据资料分析，只依赖雄性小鼠_____（填“能”或“不能”）用上图方法得到孤雄小鼠，请写出两个理由支持你的判断：
理由1：_______；
理由2：_____。
28.（11分）
脂多糖（LPS）是革兰氏阴性细菌细胞壁的一种特有成分，能诱发炎症反应。CD14蛋白是LPS的受体，能识别并结合LPS，在LPS诱发的炎症反应、内毒素休克等病理反应中起重要作用。为制备抗CD14蛋白的单克隆抗体，研究人员通过基因工程构建了含有CD14蛋白基因的重组表达载体，如图1所示。制备抗CD14蛋白的单克隆抗体的过程如图2所示。回答下列问题：
（注：SP2/0细胞是小鼠骨髓瘤细胞系）
（1）限制酶XhoI和SalI切割DNA产生的黏性末端_________（填“相同”或“不相同”）。
（2）CD14蛋白基因插入载体时，会形成正向连接和反向连接的两种重组载体。可用XhoI和SalI进行酶切，对CD14蛋白基因插入后的连接方向进行鉴定。若重组载体 （填“能”或“不能”）被再次切开，则说明CD14正向接入载体；若重组载体 （填“能”或“不能”）被再次切开，则说明CD14反向接入载体。该方法具有可行性的理由是__________。
（3）从培养液中收集CD14蛋白并对小鼠进行免疫接种。图2中，过程②用灭活的病毒处理，其目的是_________。过程④常用_______对抗体进行专一性检测。
（4）图2中，过程⑥是从小鼠的_________中提取抗CD14蛋白的单克隆抗体，这些抗体可减轻革兰氏阴性细菌入侵导致的炎症反应，其原理是___________。
29.（14分）
血栓调节蛋白（TM）只能在血管内皮细胞中合成，具有调节凝血的功能。为了解决异种器官移植时引起凝血紊乱的问题，科研人员研究制备了猪血管内皮特异性表达人血栓调节蛋白（hTM）的转基因猪。（下图1表示部分研究过程，下表是相关限制酶识别序列及切割位点。）
注：ori是复制原点，T为终止子，Puro为嘌呤霉素抗性基因，pTM为猪血栓调节蛋白。
限制酶 XhoI claI EcoRV
识别序列及切割位点 C↓TCGAG AT↓CGAT GAT↓ATC
（1）步骤①将pTM启动子插入到质粒1中，其中pTM启动子的作用是： 。
（2）步骤②设计引物时，应该在引物____（填“5’”或“3’”）端加入claI和EcoRV两种限制酶的识别序列。
（3）步骤③将hTM编码区插入质粒2中，该过程中至少需要3种酶，分别是：____。
（4）步骤③获得的质粒3经XhoI、EcoRV酶切后电泳，结果如下图2，据结果可初步判断目的基因____ （填“成功插入”或“未插入”）质粒。（M为标准参照物，I为待测样本）
（5）将质粒3导入猪胎儿成纤维细胞常用的方法是____。将处理后的成纤维细胞接种至培养皿中培养48h后经____处理分散成单个细胞，再按每孔一个细胞接种至96孔板（如上图）中，加入____筛选获得抗性细胞，再提取抗性细胞的DNA进行PCR鉴定，将呈阳性的细胞留存待用。
（6）取留存细胞的细胞核，显微注射到____中，再经过____等技术（至少两种）获得表达人血栓调节蛋白的转基因猪。
侨光中学2025年春季高二年第2次阶段考生物试卷
参考答案
DBBCD CADDA ADBBA DCCBA CBCDB
26．（13分）(1)脱分化（1分）
细胞分化程度低，容易诱导形成愈伤组织；茎尖中含病毒极少，甚至无病毒（2分）
细胞分裂素和生长素的用量比例不合适（或植物激素比例不合适）（2分）
（2）①纯生姜精油具有抑菌的作用，且吐温溶液可以增加纯生姜精油的抑菌作用（2分）
②SODI基因表达的产物能延缓细胞衰老，TOR基因和MTH基因表达产物能促进细胞衰老，且随着生姜精油浓度增加，SODI基因的相对表达量越大，TOR基因和MTH基因的相对表达量无明显变化（4分）
(3)使用方法、使用剂量、提取方法（2分）
27.（12分）（1）透明带（1分） 卵细胞膜（1分）
（2）促性腺激素（1分） 超数排卵（1分）
（3）XX、XY或YY （3分）
（4）不能（1分）
理由1：需要将ahESC和另一个精子一起注入到一个去核卵细胞中（2分）
理由2：体外培养发育成的胚胎必须移植到雌性小鼠的体内才能发育为个体（2分）
28、（11分）（1）相同（2分）
（2）能（1分） 不能（1分）
正向连接的重组质粒有这两种酶的识别序列和切割位点（1分），反向连接的重组质粒没有这两种酶的识别序列和切割位点（1分）
（3）诱导B淋巴细胞和SP2/0细胞融合，产生杂交瘤细胞（1分） CD14蛋白（1分）
（4）腹水（或腹腔）（1分）
抗体与CD14蛋白结合后阻止其与LPS结合，从而减轻LPS诱发的炎症反应（2分）
（14分）
（1）RNA聚合酶识别和结合的部位，可以驱动基因转录，最终表达出蛋白质（2分）
（2）5’ （1分）
（3）claI、EcoRV、DNA连接酶（3分）
成功插入（1分）
（5）显微注射法（1分） 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）（1分） 嘌呤霉素（1分）
（6）去核的MII期卵母细胞（2分） 动物细胞培养、胚胎移植（2分）

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