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江苏省仪征市仪征中学2023-2024学年高二下学期5月初月考生物试题
一、单选题
1．SREBP前体由S蛋白协助从内质网转运到高尔基体，经酶切后产生具有转录调节活性的结构域，随后转运到细胞核激活胆固醇合成相关基因的表达。白桦醋醇能特异性结合S蛋白并抑制其活化。下列相关叙述错误的是（ ）
A．胆固醇不溶于水，在人体内参与血液中脂质的运输
B．SREBP前体常以囊泡形式从内质网转运到高尔基体加工
C．S蛋白可以调节胆固醇合成酶基因在细胞核内的转录
D．白桦醋醇能抑制胆固醇合成并降低血液中胆固醇含量
2．下列关于组成细胞化合物的叙述正确的是（ ）
A．tRNA和rRNA都属于核酸，都参与蛋白质的合成
B．纤维素和几丁质都属于多糖，都是细胞内的能源物质
C．醛固酮和抗利尿激素都属于脂质，都能调节水盐平衡
D．血红蛋白、呼吸酶都属于蛋白质，都直接参与O2的运输
3．如图表示高等植物分泌蛋白质的几种途径，其中途径1是经典分泌途径，其余是非经典分泌途径。相关叙述错误的是（ ）
A．参与途径1的细胞结构有内质网、高尔基体等
B．途径2、3分泌的蛋白质包含内源蛋白质和外源蛋白质
C．途径4中双层膜分泌泡的两层膜都来自内质网
D．途径5通过胞吐分泌蛋白质，体现了膜的流动性
4．下列关于胚胎工程和细胞工程的叙述，错误的是（ ）
A．动物细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常需要添加血清等物质
B．植物细胞培养的目的主要是获得植物生长和生存所必需的次生代谢产物
C．胚胎工程可用于稀有动物的种族延续和培育生物制药的反应器
D．诱导人成纤维细胞重编程为肝细胞的成果表明，已分化细胞的状态是可以改变的
5．图1表示神经纤维在静息和兴奋状态下K+跨膜运输过程，甲、乙为细胞膜上的转运蛋白。图2表示兴奋在神经纤维上传导过程。下列相关叙述正确的是（ ）
A．图1中M侧为神经细胞膜的内侧，N侧为神经细胞膜的外侧
B．图2中②处Na+通道开放以形成动作电位，④处K+通道开放以恢复静息电位
C．若将神经纤维放于较高浓度海水中进行实验，图2中③处值将会变大
D．图2中⑤代表静息电位重新恢复，此时对应图1中K+浓度 M侧高于N侧
6．原发性醛固酮增多症（PA）是继发性高血压的常见原因。PA患者糖尿病发病风险较原发性高血压患者增加。下列相关叙述错误的是（ ）
A．采用醛固酮拮抗剂治疗可适度缓解PA病情
B．PA病因可能是基因突变使醛固酮合成酶表达增加
C．PA患者出现醛固酮分泌增多的原因是细胞外液渗透压增加
D．高醛固酮水平会影响胰岛B细胞功能和组织细胞对胰岛素的敏感性
7．生命系统的不同层次都存在着“抑制”现象。下列有关抑制的叙述正确的是（　　）
A．低温抑制纺锤体的形成可使细胞停留在分裂前期
B．资源有限条件下，种内竞争加剧会抑制种群增长
C．生长素在超过最适浓度后，其抑制生长作用增强
D．鉴别培养基可抑制或阻止其他种类微生物的生长
8．寒冷、紧张时机体会出现如下图所示的一系列神经内分泌反应，相关叙述正确的是（ ）
A．神经冲动以局部电流的形式直接作用于下丘脑中的调节中枢
B．激素①②③的效应只有及时终止才能产生精确的调节功能
C．作为免疫活性物质的细胞因子和抗体均能与抗原特异性结合
D．长期过度紧张会强化机体的反馈调节能力进而使免疫力提升
9．下面为四种中枢神经元的连接方式示意图，有关连接方式的叙述，错误的是（ ）
A．单线式保证了反射活动的高度精确性
B．环路式实现了机体中兴奋的延长传递
C．会聚式实现了神经系统内冲动的整合
D．分散式利于扩大神经系统的活动范围
10．曲妥珠单抗是抗人表皮生长因子受体（HER2）的单克隆抗体，能竞争性阻止人表皮生长因子与HER2结合，进而抑制乳腺癌细胞生长。下列相关叙述正确的是（ ）
A．乳腺癌细胞具有无限增殖的能力，因此体外培养癌细胞时只需提供血清
B．曲妥珠单抗制备时至少需要2次筛选，第2次筛选常用选择培养基进行
C．曲妥珠单抗本身不具备治疗乳腺癌的作用，只有携带抗癌药物才起作用
D．乳腺癌细胞中人表皮生长因子受体基因的表达量一般比正常乳腺细胞高
11．科研人员试图从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株，通过微生物培养获得几丁质酶，用于生物防治。下列相关叙述错误的是（ ）
A．土壤样品应加到以几丁质为唯一碳源的选择培养基中培养
B．目的菌的纯化和计数可以使用平板划线法或稀释涂布平板法
C．可依据单菌落周围“水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株
D．获得的几丁质酶可用于防治某些有害的甲壳类动物、昆虫等生物
12．某同学制作果酒果醋的步骤如下：①将发酵瓶等清洗干净后用酒精消毒；②清洗葡萄并榨汁装入发酵瓶；③将温度控制在18~30℃发酵12d；④打开瓶盖，盖上一层纱布再发酵8d。下列说法错误的是（ ）
A．①可杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子
B．②葡萄需先用清水冲洗后去枝梗，避免杂菌污染
C．③每隔一段时间拧松瓶盖一次，及时放气
D．④需要调高温度至30~35℃，该过程几乎不产生气体
13．6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G-6PD）有F和S两种类型，分别由一对等位基因XF和XS编码。基因型为XFXS的女性体细胞中的两个X染色体，会有一个随机失活，且这个细胞的后代相应的X染色体均会发生同样的变化。将基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理后先进行细胞的原代培养，再对不同的单细胞分别进行单克隆培养。分别对原代培养和单克隆培养的细胞进行G-6PD蛋白电泳检测，结果如图。有关叙述错误的是（ ）
A．该过程用到的细胞工程技术主要是动物细胞培养
B．用胰蛋白酶处理皮肤组织可使其分散成单个细胞
C．原代培养细胞电泳图有2个条带是因为同时检测了多个细胞
D．单克隆培养的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7所含基因不同
14．“标记”是生物技术与工程常用的技术手段，下列相关叙述错误的是（ ）
A．诱导植物原生质体融合时，通过红绿荧光蛋白标记检测细胞融合情况
B．分析工程酵母发酵产物的合成及分泌时，通过同位素标记监测产物转移路径
C．验证转基因抗虫棉是否成功时，通过RNA分子标记检测目的基因是否表达
D．对目的基因进行扩增时，通过荧光标记技术实时定量测定产物的量
二、多选题
15．下图为生物体内“泵”的3种类型，相关叙述错误的是（ ）

A．P型质子泵中的Ca2+泵磷酸化后运输Ca2+时构象不改变
B．神经细胞内高Na+低K+的环境依靠P型泵来维持
C．溶酶体膜上存在的V 型质子泵将H+运入溶酶体
D．F型质子泵广泛分布于线粒体内膜和类囊体薄膜上
16．重症肌无力是自身免疫病，致病机理如图所示。下列相关叙述正确的有（ ）
A．细胞a、b、c均起源于造血干细胞，细胞b发育成熟的主要场所是胸腺
B．细胞b、c、d、e表面形成了特异性抗原受体，识别相同抗原的受体相同
C．图中起抗原呈递作用的是细胞a，能分泌免疫活性物质的有细胞a、b、d等
D．引起重症肌无力自身免疫的抗原可能是乙酰胆碱受体或肌肉细胞膜蛋白
17．研究小组采用预加菌液法探究氮苄青霉素（Amp）和卡那霉素（Kan）对大肠杆菌的选择作用，即将菌液直接加入培养基中，摇匀倒平板，冷却后在相应区域放置圆形滤纸片，一段时间后测量抑菌圈直径，I、Ⅱ、Ⅲ代筛选实验结果如下图所示。下列相关叙述正确的有（ ）
A．为防止培养基凝固，加入菌液时培养基温度不得低于65℃
B．抑菌圈内有两个菌落，可能是具有抗药性的大肠杆菌或其他杂菌形成的
C．Kan较Amp对大肠杆菌的抑菌效果强，且随培养代数增多两者抑菌效果减弱
D．一定浓度的抗生素会诱导细菌产生耐药性的变异，故使用抗生素时需适量
18．下列关于哺乳动物胚胎工程和细胞工程的叙述，正确的是（ ）
A．细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常需要添加血清等物质
B．胚胎移植前细胞和囊胚的培养都要放在充满CO2的培养箱中进行
C．移植后胚胎的发育受母体激素影响，也影响母体激素分泌
D．胚胎干细胞和成纤维细胞功能不同，是因为表达的基因都不同
19．基因工程在农牧业、医药卫生和食品工业等多方面的应用发展迅速，如图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径。下列叙述错误的是（ ）
A．若某基因是从人的细胞内提取 mRNA 经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列
B．扩增目的基因时，利用耐高温的DNA连接酶从引物a、b的3'-端进行子链合成
C．导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞是乳腺细胞
D．利用农杆菌转化法可将含有目的基因的重组质粒整合到植物受体细胞的染色体DNA上
三、解答题
20．过量饮食等不健康生活习惯往往会引起肥胖。在哺乳类动物下丘脑的结节区存在着与摄食活动反应有关的食欲中枢，其中LHA为摄食中枢，起着决定发动摄食活动的作用，VMH为饱食中枢，起着决定停止进食活动的作用。
(1)图1为下丘脑结节区横切面，若内侧（Ⅰ OP）损伤，会引起动物多食肥胖，若外侧（Ⅱ OP）损伤，会引起动物厌食，则可以判断内侧（Ⅰ OP）为 中枢，若动物血糖较高，会抑制 中枢兴奋。
(2)嗅觉传入重要的食物信号，会引起 中枢兴奋，并刺激胃壁分泌腺分泌胃酸。电刺激下丘脑前部，引起胃酸分泌的迅速增加，切断迷走神经以后，这种反应消失（图2）；电刺激下丘脑后部，引起胃酸分泌缓慢地增加，摘除双侧肾上腺皮质而消失（图3）。据上述分析可知图2路径引起胃酸分泌可能为神经调节，理由 ，图中迷走神经为 （传入/传出）神经。图3路径调节方式为 调节。具体路径为：刺激—下丘脑— —胃壁分泌腺（用“—”“器官或组织”填写）。
(3)某团队研究针刺穴位对肥胖者下丘脑食欲中枢的影响。选取大鼠50只，用高脂饲料喂养3个月，养成肥胖鼠，然后将肥胖鼠随机分为针刺治疗组、肥胖对照组，另设一组以普通饲料喂养的大鼠作为正常对照组。分组后实验过程中，三组大鼠转喂普通饲料，正常饮食。针刺组针刺大鼠“后三里” “内庭”两穴，然后连续电刺激5min，12天为一疗程，肥胖对照组和正常对照组不做针刺处理。相关数据见下表：
三组大鼠针刺前后体重变化（g）和摄食中枢（LHA）、饱食中枢（VMH）放电频率（Hz）
分组 数量 针刺前（g） 针刺后（g） LHA（Hz） VMH（Hz）
针刺组 13只 469.7±11.1 411.0±18.2 9.4±3.7 21.1±4.3
肥胖组 13只 470.1±8.8 481.8±18.0 21.4±6.8 5.0±1.3
正常组 11只 398.0±15.7 410.4±16.2 9.1±5.2 14.5±2.2
分析上表数据，针刺治疗 （能/否）降低体重，试着分析具体原因 。
(4)从上表中可以看出，肥胖组在实验过程中改喂食普通饲料，大鼠体重仍然继续增加，说明高脂饲料激起强烈食欲， 中枢兴奋性占优势，即使非饥饿状态仍有过量取食行为，由此可以判断出摄食中枢和饱食中枢兴奋性往往呈 （正/负）相关。
21．胆固醇O酰基转移酶1(SOAT1)与肝癌的发生密切相关，可作为潜在的肝癌生物标志物。科研人员从肝癌细胞Huh7中获取SOAT1基因，经原核表达、蛋白质纯化后免疫小鼠制备单克隆抗体。请回答下列相关问题：
(1)从肝癌细胞Huh7中提取 ，通过 获得SOAT1的cDNA。
(2)根据SOAT 1的编码序列设计的两个引物如下图1。引物F加入的EcoR Ⅰ酶切位点位于 端，引物R上添加的XhoⅠ酶识别的回文序列的6个碱基是 。
(3)利用上述引物对SOAT1基因进行PCR扩增，该实验设计的扩增程序中热循环次数为30次，一般PCR反应中设计的热循环次数不超过40次，原因是 。PCR反应结束后，将产物经1%琼脂糖凝胶 后，对PCR产物进行胶回收。
(4)将胶回收后的PCR产物和载体pET32a分别用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切，加入DNA连接酶后在冰面上过夜。在冰面上操作的目的是 。在将重组质粒转化至大肠杆菌前用CaCl2处理大肠杆菌，使其处于 的生理状态，以提高转化效率。
(5)将测序正确的重组载体诱导表达并进行电泳，实验部分结果见下图2，SOAT 1重组蛋白的相对分子质量为50 kD左右，下图中基本符合要求的条带包括 。
(6)用纯化的SOAT1重组蛋白免疫小鼠，利用 技术获得SOAT1单克隆抗体细胞株以制备单克隆抗体。
22．叶用莴苣（如生菜）是大众喜爱蔬菜，夏季高温极易引起先期抽苔造成减产，泛素连接酶（LsE3）是研究人员在莴苣高温抽苔植株中筛选得到的。LsE3基因受温度调控，影响莴苣抽苔，但是LsE3基因作用机制尚不清楚。研究人员用无缝克隆技术构建莴苣LsE3基因的表达载体用于研究其分子机理。无缝克隆技术是构建表达载体的一种技术如图2。

(1)目的基因获取，在 条件下，提取先期抽苔莴苣细胞中 ，经 获得cDNA，再以cDNA为模板，利用PCR技术扩增LsE3基因。PCR扩增除了图1标出的物质以外，还需加入 （至少写两种）。LsE3基因两端序列如图1所示，PCR中需要两种引物F（左侧）、R（右侧）选用 （选项中为引物部分序列，方向为5'→3'）。
A．GATTAG------TGTTGGB．CCAACA------CTAATCC． TAGGTG------AGACCT D．AGGTCT------CACCTA
(2)表达载体构建，近年来新一代无缝克隆技术发展迅猛，基于T4 DNA聚合酶和T5核酸外切酶成为目前研究的热点。早在1990年，Aslanidis等便提出基于T4 DNA聚合酶( LIC)技术（如图2）。 T4 DNA 聚合酶在反应体系中没有添加dNTP情况下具有 3'→5'外切酶活性；在反应体系中添加dNTP情况下具有5'→3'聚合酶活性；在反应体系中仅添加某种特定的dNTP原料（如dATP），T4 DNA聚合酶也具有 3'→5'外切酶活性，且外切到dATP时，外切酶活性和聚合酶活性同时发挥作用，从而竞争性终止反应，产生指定长度的单链黏性末端。请结合图1和图2回答下列问题：
①LIC技术构建表达载体，图1中利用PCR扩增LsE3基因，反应液中加入T4 DNA聚合酶和 处理。用EcoRⅤ酶（GAT↓ATC）切割图1所示质粒获得 末端，后加T4 DNA聚合酶和 处理质粒。处理后将两者混合、退火并导入细胞内完成重组克隆。
②LIC技术依赖特定同源序列，2007年Li等建立了不依赖特定序列的克隆( SLIC) 技术，后经过多次改进，Qi等建立了RQ-SLIC技术，用EcoRⅤ酶切割质粒后与LsE3基因混合，加入T4 DNA聚合酶处理适当时间，将混合物加热到72℃，目的是 ，缓慢降温（退火）后移入细胞内转化修复形成完整重组质粒，细胞内转化修复过程中用到 酶。
(3)导入受体细胞，取叶用莴苣幼芽经 （过程）形成愈伤组织备用，用 处理农杆菌后导入重组质粒，再感染叶用莴苣愈伤组织，将感染后的愈伤组织置于加入 植物组织培养基中培养，筛选出成功导入质粒的植物细胞。
23．全球每年约 200万人需要器官移植，而器官捐献数量远低于需求。 因此，来源于猪等动物的异种器官被视作人类供体器官短缺的希望。相比同种器官，异种器官移植面临受体对植入器官更严重的免疫排斥等难题。
通过基因敲除手段获得基因敲除猪，可获得消除或减弱排斥反应的适合人体移植的猪器官，如图1。基因敲除是指通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术，主要利用DNA 同源重组原理，用设计的同源片段(两端序列与靶基因相同或相近)替代靶基因片段，从而使目的基因功能丧失，如图2，该技术的缺点是重组载体也会随机插入基因组的其他序列，而达不到目的。
注：neo基因(新霉素磷酸转移酶基因)，能催化将ATP 的磷酸基团转移到新霉素的特定羟基，从而抑制新霉素与核糖体结合，保持核糖体的活性；HSV-tk基因(单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶基因)，表达产生的胸苷激酶蛋白(TK)可使无毒的丙氧鸟苷转变为有毒性核苷酸而杀死细胞。
(1)运用基因同源重组进行基因敲除：
①胚胎干细胞(ES 细胞)的获得：基因敲除细胞一般采用ES细胞， ES 细胞培养在 中，该仪器内部提供恒定的5%的CO 浓度，调节pH的相对稳定。培养过程中 ES细胞 (填“会”或“不会”)出现接触抑制。
②重组载体的构建：把具有与细胞内靶基因同源序列的DNA分子重组到带有标记基因的载体上，使之成为重组载体，该过程需要利用 酶。常用的标记基因有 neo基因和 HSV tk 基因，前者位于同源序列内部，后者位于同源序列外部。重组载体可通过 PCR 技术进行扩增，将加入反应成分的离心管放入 PCR仪前，需进行 操作，使反应液集中于离心管底部。
③同源重组：常采用 法将重组载体导入ES细胞，使重组载体与 ES细胞基因组中相应部分发生同源重组，从而敲除靶基因。
④筛选已表达的细胞：由于同源重组的概率极低，常利用正负筛选法(PNS法，即利用neo基因和HSV-tk基因)，需要在培养基中加入 ，存活的细胞就是基因敲除的 ES 细胞。基因敲除的 ES 细胞可通过 法进一步判断目的基因是否表达出相应蛋白质，若结果为阴性，说明ES细胞基因敲除成功。
(2)通过核移植获得基因敲除猪：
①核移植需要借助精密的 和高效的细胞融合法，核移植前，基因敲除的 ES 细胞需要进行 培养，以提高核移植的成功率。选择胚胎细胞而不是体细胞进行核移植的原因是 。
②图1过程五利用胚胎工程中的 技术，这一期间必须配制一系列含有不同成分的培养液，以满足不同发育时期生理代谢的需求；过程六需对代孕猪进行 处理，使胚胎能正常着床并发育。
(3)异种器官移植除了严重的免疫排斥外，可能还有 (写出1点)等难题需要解决。
四、实验题
24．恶性肿瘤往往先向淋巴结初始转移形成淋巴结转移瘤，再经淋巴结实现远端转移。科学家开展实验探索肿瘤初始转移的机制以及淋巴结转移对远端转移的影响。
(1)正常情况下，原位瘤细胞转移至淋巴结会激活NK细胞和细胞毒性T细胞，前者非特异性杀伤瘤细胞，后者则在辅助T细胞分泌的 的作用下，经 过程产生新的细胞毒性T细胞裂解瘤细胞。
(2)将原位瘤细胞FO和淋巴结转移的瘤细胞LN6等量接种于同一健康小鼠体内进行研究，过程如图1。
①已知FO和LN6的增殖能力无显著差异，图1结果说明 向淋巴结转移的能力更强。
②为排除红绿荧光蛋白可能存在的检测差异干扰实验结果，需增设一组实验，大致思路为 。
(3)为探究原位瘤细胞初始转移的机制，科研人员又开展了如下实验：
①将FO中编码MHC-1分子关键蛋白的基因敲除，再将其接种于小鼠体内，发现其向淋巴结转移的能力降低，但去除该小鼠的NK细胞后其转移能力恢复。说明NK细胞通过识别 （高表达/低表达）的MHC-1杀伤瘤细胞。
②PD-L1可与T细胞表面的特定蛋白结合，抑制其杀伤作用。进一步研究表明原位瘤细胞通过调节MHC-1分子和PD-L1的表达量，抑制NK和T细胞的杀伤作用，以增强转移能力。请在表格中填写“高”或“低”，将支持上述结论的实验结果补充完整。
肿瘤细胞的类型 MHC-1分子表达量 PD-L1分子表达量
来自于正常小鼠的淋巴结转移瘤
来自于T细胞缺失小鼠的淋巴结转移瘤 低
来自于T和NK细胞缺失小鼠的淋巴结转移瘤 低
参考答案
1．C
2．A
3．D
4．B
5．C
6．C
7．B
8．B
9．B
10．D
11．B
12．A
13．D
14．C
15．AB
16．ACD
17．BC
18．AC
19．BCD
20．(1) 饱食中枢/VMH 摄食中枢/LHA
(2) 摄食中枢/LHA 反应迅速 传出 神经—体液 垂体—肾上腺皮质
(3) 能 针刺可以提高VMH的兴奋性，抑制LHA兴奋性
(4) 摄食/LHA 负
21．(1) 总RNA 逆转录
(2) 5′ CTCGAG(或5′—CTCGAG—3′)
(3) 40次循环后可能出现大量非特异性产物(或40次循环是PCR反应的有效极限) 电泳
(4) 降低连接反应的速率，减少多联体(非目标重组DNA)的形成(或低温使氢键稳定，减少错配等) 感受态(或易吸收外源DNA状态)
(5)2、3、5
(6)杂交瘤(动物细胞培养和动物细胞融合)
22．(1) 高温 总RNA（或“总mRNA”或“RNA”） 逆转录 Taq酶、缓冲液、dNTP、Mg2+ AC
(2) dGTP 平 dCTP 终止T4 DNA聚合酶活性 DNA聚合酶和DNA连接
(3) 脱分化 氯化钙（或Ca2+） 潮霉素
23．(1) CO2培养箱 会 限制性内切核酸酶和DNA连接 离心 显微注射 新霉素和丙氧鸟苷 抗原-抗体杂交
(2) 显微操作仪 营养限制性 胚胎细胞核移植成功率远高于成体细胞 胚胎体外培养 （同期）发情
(3)异种病毒传播、植入器官功能兼容性等
24．(1) 细胞因子 分裂（增殖）分化
(2) LN6 对FO转入红色荧光蛋白基因，对LN6转入绿色荧光蛋白基因，重复上述实验
(3) 低表达 高 高 高 低

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