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【高考真题】山东省2025年高考真题 生物试卷
1．（2025·山东）在细胞的生命活动中，下列细胞器或结构不会出现核酸分子的是（　　）
A．高尔基体 B．溶酶体 C．核糖体 D．端粒
【答案】A
【知识点】核酸的种类及主要存在的部位；其它细胞器及分离方法
【解析】【解答】A、高尔基体的主要功能是对来自内质网的蛋白质进行加工、分类和包装，形成囊泡并运输到细胞内或细胞外，不会进行DNA复制、转录和翻译过程，因此其不会出现核酸分子，A符合题意；
B、溶酶体的功能是分解衰老、损伤的细胞器，吞噬并杀死侵入细胞的病毒或细菌，当其吞噬病毒或细菌时，会出现核酸分子，B不符合题意；
C、核糖体的组成成分由rRNA和蛋白质构成，rRNA是RNA的一种，C不符合题意；
D、端粒是真核细胞染色体末端的结构，由DNA和蛋白质组成，D不符合题意。
故选A。
【分析】真核细胞内几种细胞器的结构、功能与分布：
　 溶酶体 高尔基体 核糖体
结构 高尔基体断裂形成，单层膜包被的囊状小泡 内含60种以上水解酶 单层膜围成的囊状结构。 游离在细胞质或附着在内质网上，主要由rRNA和蛋白质组成。
功能 是细胞的“消化车间”，吞噬衰老、损伤的细胞器并杀死入侵的病菌。 蛋白质加工、分类和包装的“车间”及“发送站” 是蛋白质合成的场所
分布 几乎存在于所有动物细胞 所有细胞中 所有细胞
2．（2025·山东）生长于NaCl浓度稳定在100 mmol/L的液体培养基中的酵母菌，可通过离子通道吸收Na+，但细胞质基质中Na+浓度超过30 mmol/L时会导致酵母菌死亡。为避免细胞质基质Na+浓度过高，液泡膜上的蛋白N可将Na+以主动运输的方式转运到液泡中，细胞膜上的蛋白W也可将Na+排出细胞。下列说法错误的是（　　）
A．Na+在液泡中的积累有利于酵母细胞吸水
B．蛋白N转运Na+过程中自身构象会发生改变
C．通过蛋白W外排Na+的过程不需要细胞提供能量
D．Na+通过离子通道进入细胞时不需要与通道蛋白结合
【答案】C
【知识点】被动运输；主动运输
【解析】【解答】A、液泡积累Na+会提高液泡渗透压，促使水从细胞质进入液泡，从而降低细胞质水势，有利于细胞从外界吸水，A正确；
B、蛋白N作为主动运输的载体蛋白，转运Na+时自身构象会发生变化，这一过程需要消耗能量，B正确；
C、由于外界Na+浓度（100 mmol/L）高于细胞内（需<30 mmol/L），蛋白W外排Na+属于逆浓度梯度的主动运输，需要细胞提供能量，C错误；
D、Na+通过离子通道时是顺浓度梯度的被动运输，离子通道仅提供通路，Na+无需与蛋白结合即可快速通过，D正确。
故选C。
【分析】1、物质以扩散方式进出细胞，不需要消耗细胞内化学反应所释放的能量，这种物质跨膜运输方式称为被动运输。被动运输又分为自由扩散和协助扩散两类。物质通过简单的扩散作用进出细胞的方式，叫作自由扩散，也叫简单扩散。需要借助膜上的转运蛋白进出细胞的物质扩散方式，叫作协助扩散，也叫易化扩散。
2、物质逆浓度梯度进行跨膜运输，需要载体蛋白的协助，同时还需要消耗细胞内化学反应所释放的能量，这种方式叫作主动运输。
3．（2025·山东）利用病毒样颗粒递送调控细胞死亡的执行蛋白可控制细胞的死亡方式。细胞接收执行蛋白后，若激活蛋白P，则诱导细胞发生凋亡，细胞膜突起形成小泡，染色质固缩；若激活蛋白Q，则诱导细胞发生焦亡，细胞肿胀破裂，释放大量细胞因子。下列说法错误的是（　　）
A．细胞焦亡可能引发机体的免疫反应
B．细胞凋亡是由基因所决定的程序性细胞死亡
C．细胞凋亡和细胞焦亡受不同蛋白活性变化的影响
D．通过细胞自噬清除衰老线粒体的过程属于细胞凋亡
【答案】D
【知识点】细胞的凋亡；细胞凋亡与细胞坏死的区别；细胞自噬
【解析】 【解答】A、细胞焦亡会释放大量细胞因子，这些物质确实可能引发机体免疫反应，A正确；
B、 细胞凋亡作为程序性细胞死亡方式，受特定基因的精确调控，B正确；
C、题干明确指出，凋亡和焦亡分别由不同蛋白（P和Q）介导，二者的分子机制和生物学效应存在本质差异，C正确；
D、细胞自噬是溶酶体介导的细胞内组分降解过程，主要功能是清除受损细胞器（如衰老线粒体），属于细胞自我更新机制，与凋亡/焦亡这类细胞清除过程具有本质区别，D错误。
故选D。
【分析】由基因所决定的细胞自动结束生命的过程，就叫细胞凋亡。由于细胞凋亡受到严格的由遗传机制决定的程序性调控，所以它是一种程序性死亡。在成熟的生物体中，细胞的自然更新，某些被病原体感染的细胞的清除，也是通过细胞凋亡完成的。细胞凋亡对于多细胞生物体完成正常发育，维持内部环境的稳定，以及抵御外界各种因素的干扰都起着非常关键的作用。
4．（2025·山东）关于细胞以葡萄糖为原料进行有氧呼吸和无氧呼吸的过程，下列说法正确的是（　　）
A．有氧呼吸的前两个阶段均需要O2作为原料
B．有氧呼吸的第二阶段需要H2O作为原料
C．无氧呼吸的两个阶段均不产生NADH
D．经过无氧呼吸，葡萄糖分子中的大部分能量以热能的形式散失
【答案】B
【知识点】有氧呼吸的过程和意义；无氧呼吸的过程和意义；有氧呼吸和无氧呼吸的比较
【解析】【解答】AB、有氧呼吸第一个阶段是一分子的葡萄糖分解成2分子的丙酮酸，产生少量的[H]，并且释放出少量的能量，这一阶段不需要氧的参与，是在细胞质基质中进行的；第二个阶段是丙酮酸和H2O彻底分解成二氧化碳和[H]，并释放出少量的能量，这一阶段不需要氧直接参与，是在线粒体基质中进行的，A错误，B正确；
CD、无氧呼吸第一个阶段是一分子的葡萄糖分解成2分子的丙酮酸，产生少量的NADH，并且释放出少量的能量的过程；第二个阶段是丙酮酸在酶的催化作用下，分解成酒精和二氧化碳，或者转化成乳酸，无论是分解成酒精和二氧化碳或者是转化成乳酸，无氧呼吸第二阶段都没有产生NADH和能量，无氧呼吸葡萄糖分子中的大部分能量是储存在乳酸或者酒精中，只是第一阶段释放的少量能量中大部分以热能的形式散失，CD错误。
故选B。
【分析】1、有氧呼吸的全过程可以概括地分为三个阶段，每个阶段的化学反应都有相应的酶催化。第一个阶段是，一分子的葡萄糖分解成2分子的丙酮酸，产生少量的[H]，并且释放出少量的能量。这一阶段不需要氧的参与，是在细胞质基质中进行的。第二个阶段是，丙酮酸和水彻底分解成二氧化碳和[H]，并释放出少量的能量。这一阶段不需要氧直接参与，是在线粒体基质中进行的。第三个阶段是，上述两个阶段产生的[H]，经过一系列的化学反应，与氧结合形成水，同时释放出大量的能量。这一阶段需要氧的参与，是在线粒体内膜上进行的。
2、无氧呼吸的全过程，可以概括地分为两个阶段，这两个阶段需要不同酶的催化，但都是在细胞质基质中进行的。第一个阶段与有氧呼吸的第一个阶段完全相同。第二个阶段是，丙酮酸在酶(与催化有氧呼吸的酶不同)的催化作用下，分解成酒精和二氧化碳，或者转化成乳酸。无论是分解成酒精和二氧化碳或者是转化成乳酸，无氧呼吸都只在第一阶段释放出少量的能量，生成少量ATP。葡萄糖分子中的大部分能量则存留在酒精或乳酸中。
5．（2025·山东）关于豌豆胞核中淀粉酶基因遗传信息传递的复制、转录和翻译三个过程，下例说法错误的是（　　）
A．三个过程均存在碱基互补配对现象
B．三个过程中只有复制和转录发生在细胞核内
C．根据三个过程的产物序列均可确定其模板序列
D．RNA聚合酶与核糖体沿模板链的移动方向不同
【答案】C
【知识点】DNA分子的复制；遗传信息的转录；遗传信息的翻译
【解析】【解答】A、DNA复制、转录和翻译过程均遵循碱基互补配对原则，DNA复制以双链为模板通过碱基配对合成子代DNA；转录以单链DNA为模板按A-U/T-A/G-C配对生成mRNA；翻译时tRNA反密码子与mRNA密码子通过碱基互补识别，A正确；
B、在真核细胞豌豆中，淀粉酶基因存在于细胞核中，DNA复制和转录都以DNA为模板，发生在细胞核内，B正确；
C、虽然复制和转录产物与模板严格互补可以反向推导，但翻译产物（蛋白质）因密码子简并性（如亮氨酸6种密码子）无法唯一确定mRNA序列，C错误；
D、转录时RNA聚合酶沿DNA模板链由3'→5'方向移动，而翻译时核糖体沿mRNA模板由5'→3'方向移动，因此RNA聚合酶与核糖体沿模板链的移动方向不同，D正确。
故选C。
【分析】1、遗传信息的的复制、转录和翻译三个过程关系如下：
6．（2025·山东）镰状细胞贫血是由等位基因H、h控制的遗传病。患者（hh）的红细胞只含异常血红蛋白，仅少数患者可存活到成年；正常人（HH）的红细胞只含正常血红蛋白；携带者（Hh）的红细胞含有正常和异常血红蛋白，并对疟疾有较强的抵抗力。下列说法错误的是（　　）
A．引起镰状细胞贫血的基因突变为中性突变
B．疟疾流行区，基因h不会在进化历程中消失
C．基因h通过控制血红蛋白的结构影响红细胞的形态
D．基因h可影响多个性状，不能体现基因突变的不定向性
【答案】A
【知识点】基因、蛋白质、环境与性状的关系；基因突变的特点及意义；基因突变的类型
【解析】【解答】A、中性突变是指对生物适应度没有显著影响的基因突变。然而镰状细胞贫血突变基因（h）在杂合状态（Hh）能提高疟疾抵抗力，在纯合状态（hh）却会导致严重贫血，这表明该突变对生存适应性具有显著影响，不符合中性突变的定义，A错误；
B、在疟疾流行地区，由于杂合子（Hh）具有抗疟疾的选择优势，h基因频率会维持在较高水平，即基因h不会在进化历程中消失，B正确；
C、该疾病的发生机制是h基因编码异常的血红蛋白分子，导致红细胞形态改变为镰刀状，这直接证明了基因通过控制蛋白质结构来影响细胞形态，C正确；
D、虽然h基因表现出影响多个性状，即红细胞形态和疟疾抗性，但与基因突变的不定向性（一个基因可能产生多种等位突变）是不同概念，突变不定向性强调的是突变方向的随机性，而非单个突变基因影响多个性状，D正确。
故选A。
【分析】1、基因突变是生物变异的根本来源，具有以下核心特点：首先，突变具有普遍性，可发生于所有生物的任何基因中，如人类的白化病和果蝇的残翅突变；其次，突变表现出随机性（不定向性），其发生时间和方向均无法预测，但会通过自然选择被定向筛选，例如抗药性细菌的产生就是随机突变后经药物选择的结果。突变通常具有低频性，自然状态下发生率较低（约10-6~10-5/代），但辐射等诱变因素可显著提高突变率。从效应来看，突变具有多害少利性，多数对生物有害（如镰状细胞贫血），少数中性或有利（如Hh基因型对疟疾的抗性）。此外，突变具有可逆性，可能发生回复突变；也具有多向性，可产生复等位基因（如人类ABO血型系统）。值得注意的是，基因突变常表现出多效性，一个基因突变可能影响多个性状（如h基因同时影响血红蛋白结构和抗疟能力）。最后，部分突变属于中性突变，对表型无显著影响，但其"中性"是相对的，可能在某些环境中显现效应。
7．（2025·山东）某动物家系的系谱图如图所示。a1、a2、a3、a4是位于X染色体上的等位基因，Ⅰ-1基因型为Xa1Xa2，Ⅰ-2基因型为Xa3Y，Ⅱ-1和Ⅱ-4基因型均为Xa4Y，Ⅳ-1为纯合子的概率为（　　）
A．3/64 B．3/32 C．1/8 D．3/16
【答案】D
【知识点】基因的分离规律的实质及应用；伴性遗传；遗传系谱图
【解析】【解答】根据遗传系谱和基因的分离定律分析可知，第一代I-1基因型为Xa1Xa2，I-2为Xa3Y；第二代II-2和II-3基因型均为1/2Xa1Xa3和1/2Xa2Xa2，II-1和II-4均为Xa4Y；第三代III-1基因型为1/4Xa1Xa4、1/4Xa2Xa4和1/2Xa3Xa4，III-2为1/4Xa1Y、1/4Xa2Y和1/2Xa3Y；由此计算第四代IV-1的纯合子概率为1/32（Xa1Xa1）+1/32（Xa2Xa2）+1/8（Xa3Xa3）=3/16，故选D。
【分析】1、基因分离定律的实质是：在杂合子的细胞中，位于一对同源染色体上的等位基因，具有一定的独立性；在减数分裂形成配子的过程中，等位基因会随同源染色体的分开而分开，分别进入两个配子中，独立地随配子遗传给后代。
2、位于性染色体上的基因控制的性状在遗传上总是和性别相关联，这种现象叫作伴性遗传。
8．（2025·山东）神经细胞动作电位产生后，K+外流使膜电位恢复为静息状态的过程中，膜上的钠钾泵转运K+、Na+的活动增强，促使膜内外的K+、Na+分布也恢复到静息状态。已知胞内K+浓度总是高于胞外，胞外Na+浓度总是高于胞内。下列说法错误的是（　　）
A．若增加神经细胞外的Na+浓度，动作电位的幅度增大
B．若静息状态下Na+通道的通透性增加，静息电位的幅度不变
C．若抑制钠钾泵活动，静息电位和动作电位的幅度都减小
D．神经细胞的K+、Na+跨膜运输方式均包含主动运输和被动运输
【答案】B
【知识点】神经冲动的产生和传导
【解析】【解答】A、动作电位幅度与Na+内流量直接相关，当细胞外Na+浓度升高时，增大的浓度梯度会促进更多Na+内流，从而增强去极化程度，使动作电位幅度增大，A正确；
B、静息电位主要由K+外流形成，若静息时Na+通道通透性增加，Na+内流会部分抵消K+外流效应，导致静息电位绝对值减小，并不是不变，B错误；
C、钠钾泵抑制会导致K+浓度梯度减小（减少K+外流）和Na+浓度梯度减小（减少Na+内流），这将同时降低静息电位绝对值和动作电位幅度，C正确；
D、K+外流和Na+内流都是属于顺浓度梯度的被动运输，而钠钾泵进行的离子转运是逆浓度梯度的，属于主动运输，D正确。
故选B。
【分析】神经冲动在神经纤维上的产生和传导：
①在未受到刺激时，神经纤维处于静息状态。此时，神经细胞外的钠离子浓度比膜内要高，钾离子浓度比膜内低，而神经细胞膜对不同离子的通透性各不相同：静息时，膜主要对钾离子有通透性，造成钾离子外流，使膜外阳离子浓度高于膜内。由于细胞膜内外这种特异的离子分布特点，细胞膜两侧的电位表现为内负外正，这称为静息电位。
②当神经纤维某一部位受到刺激时，细胞膜对钠离子的通透性增加，钠离子内流，这个部位的膜两侧出现暂时性的电位变化，表现为内正外负的兴奋状态。此时的膜电位称为动作电位。而邻近的未兴奋部位仍然是内负外正。在兴奋部位和未兴奋部位之间由于电位差的存在而发生电荷移动，这样就形成了局部电流。
③这种局部电流又刺激相近的未兴奋部位发生同样的电位变化，如此进行下去，将兴奋向前传导，后方又恢复为静息电位。
9．（2025·山东）机体长期感染某病毒可导致细胞癌变。交感神经释放的神经递质作用于癌细胞表面β受体，上调癌细胞某蛋白的表达，破坏癌细地的连接，从而促进癌细胞转移。下列说法错误的是（　　）
A．机体清除该的过程属于免疫自稳
B．使用β受体阻断剂可降低癌细胞转移率
C．可通过接种该病毒疫苗降低患相关癌症的风险
D．辅助性T细胞可能参与机体清除癌细胞的过程
【答案】A
【知识点】细胞癌变的原因；免疫系统的结构与功能；体液免疫
【解析】【解答】A、机体清除病毒明显属于免疫防御功能，这里需要区分免疫系统的三大功能：免疫防御（清除病原体）、免疫自稳（清除衰老损伤细胞）和免疫监视（清除癌变细胞），A错误；
B、题目明确指出交感神经通过β受体促进癌细胞转移，所以使用β受体阻断剂可降低癌细胞转移率，B正确；
C、题目明确指出机体长期感染某病毒可导致细胞癌变，那么接种病毒疫苗可降低相关癌症风险，例如HPV疫苗预防宫颈癌、HBV疫苗预防肝癌等，都是通过阻断致癌病毒感染来实现防癌效果，C正确；
D、辅助性T细胞通过抗原识别、免疫激活、效应调控等多环节参与抗肿瘤免疫应答，是清除癌细胞过程中不可或缺的调控枢纽，D正确。
故选A。
【分析】 免疫系统通过三大核心功能共同维护机体健康：首先是免疫防御功能，专门识别和清除外来病原体如病毒、细菌等，例如抗体中和病毒或巨噬细胞吞噬细菌的过程；其次是免疫自稳功能，主要负责清理衰老、损伤的自身细胞以维持内环境稳定，比如清除衰老红细胞的过程；最后是免疫监视功能，其核心作用是识别并清除癌变细胞，像细胞毒性T细胞杀伤肿瘤细胞就是典型例证。
10．（2025·山东）果头脱落受多种激素调控。某植物果实脱落的调控过程如图所示。下列说法错误的是（　　）
A．脱落酸通过促进乙烯的合成促进该植物果实脱落
B．脱落酸与生长素含量的比值影响该植物果实脱落
C．喷施适宜浓度的生长素类调节剂有利于防止该植物果实脱落
D．该植物果实脱落过程中产生的乙烯对自身合成的调节属于负反馈
【答案】D
【知识点】生长素的作用及其作用的两重性；其他植物激素的种类和作用；植物激素间的相互关系
【解析】【解答】A、根据图示信息可以得出，脱落酸能够激活乙烯合成酶的功能，而乙烯合成酶又催化乙烯的生成，最终促使果实脱落，A正确；
B、图示表明，当脱落酸含量较高时会加速果实脱落，而生长素含量较高时则会延缓果实脱落，由此可见，果实脱落受脱落酸与生长素相对含量的调控，B正确；
C、施用合适浓度的生长素类调节剂，能够拮抗脱落酸的效应，阻碍乙烯合成酶的活性，减少乙烯的产生，从而达到延缓果实脱落的效果，C正确；
D、在果实脱落过程中，植物自身产生的乙烯会削弱生长素的作用，间接减轻生长素对脱落酸的抑制效果，同时增强乙烯合成酶的活性，促进更多乙烯的合成，这一过程形成自我强化的循环，属于正反馈调节机制，D错误。
故选D。
【分析】1、物体内多种激素之间具有复杂的相互关系。植物的生长发育往往取决于激素之间的比例关系，而不是某种激素的绝对含量。
2、植物激素主要有生长素、赤霉素、细胞分裂素、乙烯和脱落酸等，它们对植物生命活动起着不同的调节作用。
11．（2025·山东）某湿地公园出现大量由北方前来越冬的候鸟，下列说法正确的是（　　）
A．候鸟前来该湿地公园越冬的信息传递只发生在鸟类与鸟类之间
B．鸟类的到来改变了该湿地群落冬季的物种数目，属于群落演替
C．来自不同地区鸟类的交配机会增加，体现了生物多样性的间接价值
D．湿地水位深浅不同的区域分布着不同的鸟类种样，体现了群落的垂直结构
【答案】C
【知识点】群落的结构；群落的演替；生态系统中的信息传递；生物多样性的价值
【解析】【解答】A、候鸟迁徙的信息传递不仅限于鸟类之间，还可能包括环境因素（如气候、食物）或其他生物（如植物、昆虫）的影响，因此“只发生在鸟类与鸟类之间”是不对的，A错误；
B、群落演替是指群落结构和物种组成随时间发生定向、连续的变化过程。候鸟季节性迁徙虽然增加了物种数目，但这是周期性、临时性的变化，不属于群落演替，B错误；
C、生物多样性的间接价值通常指生态功能（如调节气候、净化水源等），而直接价值包括对人类有直接用途的方面（如观赏、科研等）。鸟类交配机会增加可能有助于基因交流或物种延续，这属于间接价值，C正确；
D、垂直结构是指群落在垂直方向上的分层现象（如乔木、灌木、草本层）。水位深浅导致的鸟类分布差异是水平方向上的变化，属于水平结构而非垂直结构，D错误。
故选C。
【分析】1、关于生物多样性的价值，科学家一般概括为以下几个方面：直接价值、间接价值以及目前人类尚不清楚的潜在价值。
①直接价值是对人类有食用、药用和作为工业原料等实用意义的，以及有旅游观赏、科学研究和文学艺术创作等非实用意义的价值。
②生物多样性的间接价值主要体现在调节生态系统的功能等方面。例如，植物能进行光合作用，具有制造有机物、固碳、供氧等功能；森林和草地具有防风固沙、水土保持作用，湿地可以蓄洪防旱、净化水质、调节气候，等等。
③物多样性还具有许多目前人们尚不太清楚的潜在价值。
12．（2025·山东）某时刻某动物种群所有个体的有机物中的总能量为①，一段时后．此种群所有存活个体的有机物中的总能量为②，此种群在这段时间内通过呼吸作用散失的总能量为③，这段时间内死亡个体的有机物中的总能量为④。此种群在此期间无迁入迁出，无个体被捕食，估算这段时间内用于此种群生长、发育和繁殖的总能量时，应使用的表达式为（　　）
A．②-①+④ B．②-①+③ C．②-①-③+④ D．②-①+③+①
【答案】A
【知识点】生态系统的能量流动
【解析】【解答】题目要求计算一段时间内用于此种群生长、发育和繁殖的总能量（即净生产量 NP）。根据能量流动相关知识，初始种群总能量 ① 的去向包括存活个体能量 ②、呼吸消耗 ③ 和死亡个体能量 ④，因此有 ① = ② + ③ + ④，重新整理可得 ② = ① - ③ - ④，而净生产量 NP 应等于种群实际增加的有机物能量，即存活个体能量变化（② - ①）加上死亡个体能量 ④，这段时间的同化量，应是①+同化量-③-④=②，即用于此种群生长、发育和繁殖的总能量=同化量= ② - ① + ④，对应选项 A，故选A。
【分析】1、生态系统中能量的输入、传递、转化和散失的过程，称为生态系统的能量流动。
2、流入第二营养级的能量，一部分在初级消费者的呼吸作用中以热能的形式散失；另一部分用于初级消费者的生长、发育和繁殖等生命活动，其中一些以遗体残骸的形式被分解者利用。如果初级消费者被次级消费者捕食，能量就流入了第三营养级。能量在第三、第四营养级的变化，与第二营养级的情况大致相同。
13．（2025·山东）“绿叶中色素的提取和分离”实验操作中要注意“干燥”，下列说法错误的是（　　）
A．应使用于燥的定性滤纸
B．绿叶需烘干后再提取色素
C．重复画线前需等待滤液细线干燥
D．无水乙醇可用入适量无水碳酸钠的95%乙醇替代
【答案】B
【知识点】叶绿体色素的提取和分离实验
【解析】【解答】A、色素的分离（纸层析法）需要干燥的滤纸，否则水分会影响色素的扩散速度，导致分离效果不佳，A正确；
B、烘干绿叶会导致色素（如叶绿素）受热分解，降低提取效率，实验过程中，通常使用新鲜绿叶（或冷冻保存的绿叶），加入无水乙醇或丙酮研磨提取色素，无需烘干，B错误；
C、重复画线是为了增加色素量，使层析结果更清晰，若前一次滤液未干就重复画线，会导致色素扩散过宽，影响分离效果，因此重复画线前需等待滤液细线干燥，C正确；
D、95%乙醇含有水分，会影响色素提取效率，但加入无水碳酸钠可吸收水分，提高乙醇纯度，使其接近无水乙醇的效果，D正确。
故选B。
【分析】“绿叶中色素的提取和分离”实验的原理：
1、绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中，所以，可以用无水乙醇提取绿叶中的色素。
2、绿叶中的色素不只有一种，它们都能溶解在层析液中，但不同的色素溶解度不同。溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，反之则慢。这样，绿叶中的色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而分开。
14．（2025·山东）利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过程如图所示，下列说法错误的是（　　）
A．对牛乙注射促性腺激素是为了收集更多的卵母细胞
B．卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅰ中期进行
C．培养牛甲的体细胞时应定期更换培养液
D．可用PCR技术鉴定犊牛丁是否为转基因牛
【答案】B
【知识点】PCR技术的基本操作和应用；基因工程的应用；动物细胞培养技术；动物细胞核移植技术；动物体细胞克隆
【解析】【解答】A、对牛乙注射外源促性腺激素，目的是诱发牛乙卵巢排出比自然情况下更多的成熟卵细胞，以便于收集更多的卵母细胞用于操作，A正确；
B、雌性动物正常排出的卵细胞即处于MⅡ期，此时卵母细胞已发育成熟，细胞质中具有激活重构胚以及早期胚胎发育的必需因子，因此卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅱ中期进行，B错误；
C、培养牛甲的体细胞时应定期更换培养液，目的是清除代谢废物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，C正确；
D、PCR通过特异性引物、DNA聚合酶和热循环反应，能够指数级扩增目标DNA片段。在转基因牛检测中，只需设计针对目的基因的特异性引物，即可通过扩增判断该基因是否存在，进而确定犊牛丁是否为转基因牛，D正确。
故选B。
【分析】动物体细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核，移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。
15．（2025·山东）深海淤泥中含有某种能降解纤维素的细菌。探究不同压强下，该细菌在以纤维素或淀粉为唯一碳源的培养基上的生长情况。其他条件相同且适宜，实验处理及结果如表所示。下列说法正确的是（　　）
组别 压强 纤维素 淀粉 菌落
① 常压 - + -
② 常压 + - -
③ 高压 - + -
④ 高压 + - +
注： “+”表示有；“一”表示无
A．可用平板划线法对该菌计数
B．制备培养基的过程中，应先倒平板再进行高压蒸汽灭菌
C．由②④组可知，在以纤维素为唯一碳源的培养基上，该菌可在常压下生长
D．由③④组可知，高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长
【答案】D
【知识点】微生物的分离和培养；灭菌技术；培养基的制备
【解析】【解答】A、平板划线法通过形成单菌落实现菌种分离纯化，但无法精确计数，需用稀释涂布平板法进行计数，A错误；
B、培养基制备过程必须先灭菌后倒平板，否则易污染或破坏成分，B错误；
C、组②（常压+纤维素）和组④（高压+纤维素）的结果对比，表明该菌仅在高压下能生长并利用纤维素，C错误；
D、组③（高压+淀粉）和组④（高压+纤维素）的结果对比，证明该菌只有在高压下条件下特异性利用纤维素，因此高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长，D正确。
故选D。
【分析】1、微生物常见的接种的方法：平板划线法和稀释涂布平板法。稀释涂布平板法除可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目。
2、选择培养基：在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长，用以分离菌种。
16．（2025·山东）在低氧条件下，某单细胞藻叶绿体基质中的蛋白F可利用H+利和光合作用产生的NADPH生成H2。为研究藻释放H2的培养条件，将大肠杆菌和藻按一定比例混合均匀后分成2等份，1份形成松散菌-藻体，另1份形成致密菌-藻体，在CO2充足的封闭体系中分别培养并测定体系中的气体含量，2种菌-藻体培养体系中的O2含量变化相同，结果如图所示。培养过程中，任意时刻2体系之间的光反应速率无差异。下列说法错误的是（　　）
A．菌-藻体不能同时产生O2和H2
B．菌-藻体的致密程度可影响H2生成量
C．H2的产生场所是该藻叶绿体的类囊体薄膜
D．培养至72h，致密菌-藻体暗反应产生的有机物多于松散菌-藻体
【答案】A,C,D
【知识点】光合作用综合
【解析】【解答】A、由图可知，随着时间的进行，氢气的含量是逐渐上升，此外氧气的相对含量逐渐降低最终趋于平缓，说明是由于光合作用产生的氧气与呼吸消耗的氧气趋于一致。最终使氧气的含量维持相对稳定的状态，且这是在二氧化碳充足的体系下，说明有光合作用的过程，存在氧气的释放，A错误；
B、致密菌-藻体组（产氢量高）与松散组（产氢量低）的结果对比，可以证实结构致密度影响产氢效率，B正确；
C、题干明确蛋白F在叶绿体基质而非类囊体膜催化H2生成，C错误；
D、根据图可知，培养至72h时，致密菌-藻体产生的氢气更多，且题干说任意时刻2体系之间的光反应速率无差异，说两个体系产生的NADPH含量相同，但致密菌-藻体更多的NADPH是用于氢气的产生，则用于合成有机物的就少，D错误。
故选ACD。
【分析】光合作用根据是否需要光能，可以概括地分为光反应和暗反应（碳反应）两个阶段：
1、光反应阶段是光合作用第一个阶段的化学反应，必须有光才能进行，这个阶段在类囊体的薄膜上进行的，发生水的光解、ATP和NADPH的生成。
2、暗反应阶段是光合作用第二个阶段中的化学反应，有没有光都能进行，这个阶段是在叶绿体的基质中进行的，发生CO2的固定和C3的还原，消耗ATP和NADPH ，最终生成糖类。
17．（2025·山东）果蝇体节发育与分别位于2对常染色体上的等位基因M、m和N、n有关，M对m、N对n均为显性。其中1对为母体效应基因，只要母本该基因为隐性纯合，子代就体节缺失，与自身该对基因的基因型无关；另1对基因无母体效应，该基因的隐性纯合子体节缺失。下列基因型的个体均体节缺失，能判断哪对等位基因为母体效应基因的是（　　）
A．MmNn B．MmNN C．mmNN D．Mmnn
【答案】B
【知识点】基因的自由组合规律的实质及应用
【解析】【解答】A、根据遗传分析，基因型为MmNn的个体其亲本组合可能为M-N- × -m-n（如父本MMNN与母本mmnn）或M--n × -mN-（如父本MMnn与母本mmNN，或反之）。已知两对基因中一对为母体效应基因（其隐性纯合导致体节缺失），另一对无此效应，由于MmNn表现为体节缺失，表明其母体效应基因来自母本的隐性纯合状态（mm或nn），但现有信息无法确定具体是哪对基因（M/m或N/n）具有母体效应特性，A错误；
B、基因型为MmNN的个体其亲本组合可能为M-N- × -mN-。已知两对基因中一对为母体效应基因（其隐性纯合导致体节缺失），另一对无此效应，且MmNN为体节缺失，因此该基因型个体的体节缺失属于母体效应，也就是说母本母体效应基因是mm，则说明MmNN中的母体效应基因为M/m，B正确；
C、在遗传分析中，基因型为mmNN的个体其亲本组合应为-mN-×-mN-（即双方均携带mN配子）。已知两对基因中一对为母体效应基因（其隐性纯合导致体节缺失），另一对无此效应，且mmNN为体节缺失，如果该基因型个体的体节缺失属于母体效应，也就是说母本母体效应基因是mm，则说明mmNN中的母体效应基因为M/m，但是该个体NN是隐性纯合，所以无法确定其体节缺失属于母体效应，还是隐性纯合导致，C错误；
D、基因型为Mmnn，若M/m是母体效应基因，母本需为mm才符合体节缺失表现；若N/n是母体效应基因，母本需为nn才符合体节缺失表现，同时自身nn纯合也会导致体节缺失，所以无法确定其体节缺失属于母体效应，还是隐性纯合导致，D错误；
故选B。
【分析】1、母体效应遗传：母体效应基因的特性：子代表型由母本基因型决定，与自身基因型无关。识别特征是只有母本隐性纯合时子代才表现特定性状，与经典孟德尔遗传的区别。
2、基因互作类型：两对独立遗传基因（位于不同染色体）的共同影响。
18．（2025·山东）低钠血症患者的血钠浓度和细胞外液渗透压均低于正常值。依据患者细胞外液量减少、不变和增加，依次称为低容量性、等容量性和高容量性低钠血症。下列说法正确的是（　　）
A．醛固酮分泌过多可能引起低容量性低钠血症
B．抗利尿激素分泌过多可能引起高容量性低钠血症
C．与患病前相比，等容量性低钠血症患者更易产生渴感
D．与患病前相比，低钠血症患者的细胞外液中总钠量可能增加
【答案】B,D
【知识点】水盐平衡调节
【解析】【解答】A、醛固酮分泌过多会导致钠滞留和血容量增加，通常引起高容量性高钠血症或等容量性改变，而非低容量性低钠血症，A错误；
B、抗利尿激素（ADH）分泌过多会导致肾小管集合管重吸收水增加和稀释性低钠血症，通常表现为高容量性低钠血症，B正确；
C、等容量性低钠血症患者由于细胞外液渗透压降低，会抑制下丘脑的渴觉中枢，导致渴感减弱甚至消失，因此，患者通常不会更易产生渴感，反而可能减少饮水，C错误；
D、与患病前相比，低钠血症患者的细胞外液中总钠量可能增加，因为低钠血症的分类取决于血钠浓度和细胞外液量的变化，D正确。
故选BD。
【分析】1. 低钠血症的分类及病理生理机制
①低容量性低钠血症（低渗性脱水）：钠丢失 > 水丢失（如腹泻、利尿剂、Addison病）。
②等容量性低钠血症：水潴留为主，总钠量正常或轻度增加（如SIADH）。
③高容量性低钠血症：钠潴留 + 水潴留更多（如心衰、肝硬化、肾病综合征）。
2. 体液调节相关激素的作用
醛固酮：促进钠重吸收（保钠排钾），通常导致血容量增加（高容量状态），而非低容量性低钠血症。
抗利尿激素（ADH）：促进水重吸收，过量分泌（如SIADH）会导致等容量性低钠血症，而非高容量性。
19．（2025·山东）种群延续所需要的最小种群密度为临界密度，只有大于临界密度，种群数量才能增加，最后会达到并维持在一个相对稳定的数量，即环境容纳量（K值）。不同环境条件下，同种动物种群的K值不同。图中曲线上的点表示在不同环境条件下某动物种群的K值和达到K值时的种群密度，其中m为该动物种群的临界密度，K0以下的环境表示该动物的灭绝环境。a、b、c、d四个点表示不同环境条件下该动物的4个种群的K值及当前的种群密度，且4个种群所在区域面积相等，各种群所处环境稳定。不考虑迁入迁出，下列说法错误的是（　　）
A．可通过提高K值对a点种群进行有效保护
B．b点种群发展到稳定期间，出生率大于死亡率
C．c点种群发展到稳定期间，种内竞争逐渐加剧
D．通过一次投放适量该动物可使d点种群得以延续
【答案】A,C,D
【知识点】种群的特征；种群数量的变化曲线
【解析】【解答】A、在a点状态下，该动物种群的密度低于其临界密度m，且环境容纳量K值高于K0。因此，采取一次性投放适量个体的方式即可实现对a点种群的有效保护，A错误；
B、当处于b点时，种群密度尚未达到其环境容纳量K值对应的水平。在种群向稳定状态发展的过程中，个体数量呈现增长趋势，此时出生率明显高于死亡率，B正确；
C、c点状态下种群密度已超过其K值对应的密度水平。在种群趋向稳定的过程中，个体数量会逐渐减少，导致种内竞争压力相应降低，C错误；
D、d点情况下，种群密度高于临界密度m，但环境容纳量K值却低于K0，即使一次投放动物使当前密度暂时升高，但由于环境能维持的K值过低，种群最终仍会因无法超过临界密度而灭绝，D错误。
故选ACD。
【分析】在理想条件下，种群数量会实现快速的增长，其数学模型为：Nt= N0 λt，呈“J”形曲线。然而，由于资源和空间的限制，种群数量不可能无限增长。一定的环境条件所能维持的种群最大数量称为环境容纳量（K 值）。有的种群在数量快速增长到 K 值后能保持相对稳定，使种群增长呈“S”形曲线。
20．（2025·山东）酿造某大曲白酒的过程中，微生物的主要来源有大曲和窖泥。大曲主要提供白酒酿造过程中糖化所需的微生物，制曲过程需经堆积培养，培养时温度可达60℃左右；将大曲和酿酒原料混合，初步发酵后放入窖池；窖池发酵是白酒酿造过程中微生物发酵的最后阶段。下列说法正确的是（　　）
A．堆积培养过程中的高温有利于筛选酿酒酵母
B．大曲中存在能分泌淀粉酶的微生物
C．窖池发酵过程中，酵母菌以无氧呼吸为主
D．窖池密封不严使酒变酸是因为乳酸含量增加
【答案】B,C
【知识点】细胞呼吸原理的应用；果酒果醋的制作；影响细胞呼吸的因素
【解析】【解答】A、酿酒酵母的最适生长温度一般在25~30℃，而堆积培养时温度可达60℃左右，这种高温环境更有利于筛选耐高温的微生物，而不是酿酒酵母，A错误；
B、大曲的主要功能是提供糖化所需的微生物，这些微生物（如霉菌、芽孢杆菌等）能分泌淀粉酶，将原料中的淀粉分解为可发酵性糖，B正确；
C、白酒窖池发酵属于厌氧发酵，酵母菌在缺氧条件下主要进行无氧呼吸（酒精发酵），产生乙醇和CO2，C正确；
D、酒变酸的主要原因是醋酸菌在有氧条件下将乙醇氧化为乙酸（醋酸），而非乳酸积累，D错误。
故选BC。
【分析】传统发酵工艺果酒、果醋、腐乳、泡菜的的制作比较
　 果酒 果醋 腐乳 泡菜
微生物 酵母菌 醋酸杆菌 主要是毛霉 乳酸杆菌
原理 酵母菌的无氧呼吸产生酒精 醋酸菌的有氧呼吸产生醋酸 豆腐中的蛋白质被分解成小分子的肽和氨基酸 乳酸菌无氧呼吸产生乳酸
反应条件 18~30 ℃，初期需氧，后期无氧 30~35℃，通入氧气 15～18℃接种，酒精含量控制在12％左右 常温，无氧条件

21．（2025·山东）高光强环境下，植物光合系统吸收的过剩光能会对光合系统造成损伤，引起光合作用强度下降。植物进化出的多种机制可在一定程度上减轻该损伤。某绿藻可在高光强下正常生长，其部分光合过程如图所示。
（1）叶绿体膜的基本支架是　 　；叶绿体中含有许多由类囊体组成的　 　，扩展了受光面积。
（2）据图分析，生成NADPH所需的电子源自于　 　。采用同位素示踪法可追踪物质的去向，用含3H2O的溶液培养该绿藻一段时间后，以其光合产物葡萄糖为原料进行有氧呼吸时，能进入线粒体基质被3H标记的物质有H2O、　 　.离心收集绿藻并重新放入含H218O的培养液中，在适宜光照条件下继续培养，绿藻产生的带18O标记的气体有　 　。
（3）据图分析，通过途径①和途径②消耗过剩的光能减轻光合系统损伤的机制分别为　 　。
【答案】（1）磷脂双分子层；基粒
（2）H2O；丙酮酸、[H]；CO2、O2
（3）途径①以电能的方式耗散光能；途径①以热能的方式耗散光能
【知识点】细胞膜的流动镶嵌模型；光合作用的过程和意义；有氧呼吸的过程和意义
【解析】【解答】（1）叶绿体膜是生物膜的一种，其基本支架是磷脂双分子层；叶绿体增大膜面积的方式是由许多类囊体堆叠形成基粒，从而扩展了受光面积。
（2）从图示信息可知，在电子传递链中，NADPH所需的电子来源H2O的光解。
若用含3H2O的培养液培养绿藻，绿藻会同时进行光合作用和呼吸作用。在光合作用中，3H会进入葡萄糖分子，使其被标记。有氧呼吸第一阶段（细胞质基质）：被3H标记的葡萄糖在酶的作用下分解，生成被3H标记的丙酮酸、NADH（ [H] ），并释放少量能量；第二阶段（线粒体基质）：被3H标记的丙酮酸与3H2O反应，在酶的作用下生成CO2、被3H标记的NADH，并释放少量能量；因此，能够进入线粒体基质并带有3H标记的物质包括：H2O、丙酮酸、NADH。
若将绿藻离心收集后重新放入含 H218O 的培养液中，在光合作用光反应阶段，水分子光解会产生氧气（O2）；在呼吸作用第二阶段 H218O和丙酮酸反应生产二氧化碳，因此带有18O标记的气体是氧气和 CO2 。
（3）从图中可以看出，途径①涉及两个消耗光能的过程：ATP合酶催化合成ATP，这一过程需要光能驱动；NADPH的生成同样消耗光能，过剩的光能则通过电子传递链以电能的方式耗散。而途径②则显示，部分光能被Y、Z色素吸收后，并未用于光合作用的光化学反应，而是以热能形式散失。
【分析】1、光合作用根据是否需要光能，可以概括地分为光反应和暗反应（碳反应）两个阶段：
①光反应阶段是光合作用第一个阶段的化学反应，必须有光才能进行，这个阶段在类囊体的薄膜上进行的，发生水的光解、ATP和NADPH的生成。
②暗反应阶段是光合作用第二个阶段中的化学反应，有没有光都能进行，这个阶段是在叶绿体的基质中进行的，发生CO2的固定和C3的还原，消耗ATP和NADPH ，最终生成糖类。
2、有氧呼吸的全过程可以概括地分为三个阶段，每个阶段的化学反应都有相应的酶催化。第一个阶段是，1分子的葡萄糖分解成2分子的丙酮酸，产生少量的[H]，并且释放出少量的能量。这一阶段不需要氧的参与，是在细胞质基质中进行的。第二个阶段是，丙酮酸和水彻底分解成二氧化碳和[H]，并释放出少量的能量。这一阶段不需要氧直接参与，是在线粒体基质中进行的。第三个阶段是，上述两个阶段产生的[H]，经过一系列的化学反应，与氧结合形成水，同时释放出大量的能量。这一阶段需要氧的参与，是在线粒体内膜上进行的。
22．（2025·山东）某二倍体两性花植物的花色由2对等位基因A、a和B、b控制，该植物有2条蓝色素合成途径。基因A和基因B分别编码途径①中由无色前体物质M合成蓝色素所必需的酶A和酶B；另外，贝要有酶A或酶B存在，就能完全抑制途径②的无色前体物质N合成蓝色素。已知基因a和基因b不编码蛋白质，无蓝色素时植物的花为白花。相关杂交实验及结果如表所示，不考虑其他突变和染色体互换；各配子和个体活力相同。
组别 亲本杂交组合 F1 F2
实验一 甲（白花植株）×乙（白花植株） 全为蓝花植株 蓝花植株：白花植株=10：6
实验二 AaBb（诱变）（♂）×aabb（♀） 发现1株三体蓝花植株，该三体仅基因A或a所在染色体多了1条 　
（1）据实验一分析，等位基因A、a和B、b的遗传　 　（填“符合”或“不符合”）自由组合定律。实验一的F2中，蓝花植株纯合体的占比为　 　。
（2）已知实验二中被诱变亲本在减数分裂时只发生了1次染色体不分离。实验二中的F1三体蓝花植株的3种可能的基因型为AAaBb、　 　。请通过1次杂交实验，探究被诱变亲本染色体不分离发生的时期。已知三体细胞减数分裂时，任意2条同源染色体可正常联会并分离，另1条同源染色体随机移向细胞任一极。
实验方案：　 　（填标号），统计子代表型及比例。
①三体蓝花植株自交 ②三体蓝花植株与基因型为aabb的植株测交
预期结果：若　 　，则染色体不分离发生在减数分裂Ⅰ；否则，发生在减数分裂Ⅱ。
（3）已知基因B→b只由1种染色体结构变异导致，且该结构变异发生时染色体只有2个断裂的位点。为探究该结构变异的类型，依据基因B所在染色体的DNA序列，设计了如图所示的引物，并以实验一中的甲、乙及F2中白花植株（丙）的叶片DNA为模板进行了PCR，同1对引物的扩增产物长度相同，结果如图所示，据图分析，该结构变异的类型是　 　。丙的基因型可能为　 　；若要通过PCR确定丙的基因型，还需选用的1对引物是　 　。
【答案】（1）符合；1/8
（2）AaaBb和aaabb；①；蓝花：白花=5：3
（3）染色体片段位置颠倒；aaBB 或 aaBb；F1/F2（或 R1/R2）
【知识点】基因的自由组合规律的实质及应用；PCR技术的基本操作和应用；减数分裂异常情况分析
【解析】【解答】（1）根据题目描述可知，基因型A_B_和aabb对应蓝花植株，基因型A_bb和aaB_对应白花植株。实验乙中F1自交产生的F2代呈现蓝花：白花=10：6的分离比，这一比例符合9：3：3：1的变式，说明等位基因A/a和B/b的遗传符合自由组合定律。
进一步分析表明，F1的基因型为AaBb，其自交后代F2的基因型分布为：1/16AABB（蓝）、2/16AaBB（蓝）、2/16AABb（蓝）、4/16AaBb（蓝）、1/16AAbb（白）、2/16Aabb（白）、1/16aaBB（白）、2/16aaBb（白）、1/16aabb（蓝）。由此可得，实验一F2代中蓝花植株纯合体（AABB和aabb）的总比例为2/16= 1/8 。
（2） 实验二中的F1三体蓝花植株的形成机制可能有以下几种情况：①减数第一次分裂异常：含A和a的同源染色体未正常分离，产生AaB型配子，与母本ab配子结合形成AaaBb三体蓝花植株。②减数第一次分裂正常，减数第二次分裂异常：含A的姐妹染色单体未正常分离，产生AAB型配子，与母本ab配子结合形成AAaBb三体蓝花植株。③减数第二次分裂异常：含a的姐妹染色单体未正常分离，产生aab型配子，与母本ab配子结合形成aaabb三体蓝花植株。综合以上情况均可能导致染色体数目变异，产生三体蓝花植株的3种可能的基因型为AAaBb、 AaaBb和aaabb。
三体蓝花植株基因型鉴定方法分析，1）若采用测交方法：AaaBb基因型测交，A/a基因分离，产生配子A：a：Aa：aa=1：2：2：1，测交后代含A个体与不含A个体比例为1：1，B/b基因测交结果为Bb：bb=1：1，最终蓝花：白花=1：1。AAaBb基因型测交，A/a基因分离产生配子A：a：AA：Aa=2：1：1：2，测交后代含A个体与不含A个体比例为5：1，B/b基因测交结果为Bb：bb=1：1，最终蓝花：白花=1：1，综上分析两种基因型测交结果相同，无法区分。2）自交方法分析：AaaBb基因型自交，A/a基因分离：配子A：a：Aa：aa=1：2：2：1，后代含A个体与不含A个体比例为3：1，B/b基因自交结果为BB：Bb：bb=1：2：1，最终蓝花：白花=5：3。AAaBb基因型自交，A/a基因分离配子A：a：AA：Aa=2：1：1：2
，后代含A个体与不含A个体比例为35：1，B/b基因自交结果为BB：Bb：bb=1：2：1，最终蓝花：白花=53：19；综上分析两种三体植株自交结果差异显著。最优鉴定方案应采用自交方案（即方案①）进行鉴定，则预期结果若蓝花：白花=5：3，则染色体不分离发生在减数分裂Ⅰ；若蓝花：白花≈53：19，则发生在减数分裂Ⅱ。
（3）染色体结构变异的类型主要包括缺失、重复、倒位和易位。通过分子检测分析，可以区分这些变异类型，变异类型鉴定原理是易位、缺失和重复会导致b基因和B基因的碱基序列长度发生变化，使用同一对引物扩增时，这些变异会产生不同长度的片段；若扩增产物长度相同，则可判定为倒位变异。甲植株（aaBB）使用任意一对针对B基因设计的引物都能成功扩增，电泳结果显示正常扩增条带，乙植株（AAbb）由于倒位变异导致B基因突变为b，使用F2R1引物对无法扩增出产物。F2代白花植株基因型可能为AAbb、Aabb、aaBB或aaBb；丙植株基因型使用F2R1引物扩增结果与甲相同，与乙不同，表明含有B基因，可能为aaBB或aaBb。倒位导致B基因突变为b基因，F2和R2对应的DNA片段发生倒位，F1R2引物对应同一条单链，F2R1引物对应同一条单链；因此丙植株基因型确认方法，可选引物对：F1F2引物：对应同一条单链或者R1R2引物：对应另一条单链。
【分析】根据题干信息分析，蓝色素的合成受两个独立代谢途径调控：途径①中，基因A和基因B分别编码将无色前体物质M转化为蓝色素所必需的酶A和酶B；途径②则涉及无色前体物质N合成蓝色素的过程。值得注意的是，只要存在酶A或酶B中的任意一种，就能完全抑制途径②的蓝色素合成。这种调控机制导致不同基因型表现出特定的表型：当基因型为双显性（A_B_）时，途径①正常运作产生蓝色素；当基因型为双隐性（aabb）时，虽然途径①无法进行，但由于缺乏酶A和酶B的抑制作用，途径②可以自发产生蓝色素，这两种情况均表现为蓝花。而当基因型为单显性（A_bb或aaB_）时，途径①因缺少一种关键酶而中断，同时存在的单一酶（A或B）又完全抑制了途径②，导致完全不能合成蓝色素，最终表现为白花。
23．（2025·山东）机体内环境发生变化时，心血管活动的部分反射调节如图所示。
（1）调节心血管活动的基本神经中枢位于　 　（填“大脑”“脑干”或“下丘脑”）。当血压突然升高时，机体可通过图示调节引起心率减慢、血管舒张，从而使血压下降并恢复正常，该调节过程中，　 　（填“交感神经”或“副交感神经”）的活动减弱。
（2）血压调节过程中，压力感受器和化学感受器产生的兴奋在传入神经上都以　 　信号的形式向前传导；兴奋只能由传出神经末梢向心肌细胞单向传递的原因是　 　。
（3）已知血C02浓度升高时，通过图示调节影响心率变化。化学感受器分为中枢和外周化学感受器2种类型，其中外周化学感受器位于头部以下，中枢化学感受器分布在脑内。注射药物X仅增加血CO2浓度，不影响其他生理功能。
实验目的：探究外周和中枢化学感受器是否均参与血C02浓度对心率的调节。
实验步骤：①麻醉大鼠A和B；
②将大鼠A的头部血管与大鼠B的相应血管连接，使大鼠A头部的血液只与大鼠B循环，大鼠A头部以下血液循环以及大鼠B血液循环不变，大鼠A、B的其他部位保持不变，术后生理状态均正常；
③测量注射药物X前后的心率。
结果及结论：向大鼠B尾部静脉注射药物X，大鼠A心率升高，可得出的结论是　 　（填“中枢”或“外周”）化学感受器参与了血CO2浓度对心率的调节。依据实验目的，还需要探究另1类化学感受器是否参与调节，在实验步骤①、②的基础上，需要继续进行的操作是　 　。
【答案】（1）脑干；交感神经
（2）电；三者之间形成突触，神经递质只能由突触前膜释放，作用于心肌细胞膜受体
（3）中枢；向大鼠A注射药物X，测量注射前后大鼠的心率
【知识点】神经元各部分的结构和功能；突触的结构；神经冲动的产生和传导；神经系统的基本结构
【解析】【解答】（1）脑干是控制多种生命活动的重要中枢区域，其中包含调节呼吸和心血管功能的关键神经中枢，因此心血管活动的初级调控中枢位于脑干。当交感神经兴奋时，会引起血管收缩和心率加快；相反，副交感神经兴奋时，则会使心率减缓。如果血压突然升高，机体会通过神经调节机制使心率下降、血管扩张，从而使血压回降至正常水平。即此时交感神经的活性降低，而副交感神经的活性增强。
（2）在神经纤维上，兴奋以电信号的形式进行传导。因此，在血压调节过程中，无论是压力感受器还是化学感受器产生的兴奋，在传入神经上均以电信号的形式向前传递。传出神经末梢与心肌细胞之间形成突触，由于神经递质储存在突触前膜的突触小泡内，只能由突触前膜释放并作用于突触后膜上的受体，因此兴奋的传递方向是单向的，即神经递质只能从传出神经末梢传递至心肌细胞膜上的受体，而不能反向进行。
（3）药物X具有特异性升高血CO2浓度的作用，且不影响其他生理指标。当向大鼠B尾静脉注射药物X后，其血液CO2浓度上升。由于两只大鼠通过血液循环相连，且中枢化学感受器位于脑部，因此大鼠A能够感知其头部血液中CO2浓度的变化。若观察到大鼠A心率加快，即可证明中枢化学感受器参与了血CO2浓度对心率的调节。
为验证外周化学感受器是否参与CO2浓度对心率的调节，需在原有实验（步骤①、②）基础上增加操作：向大鼠A尾静脉注射药物X，使其血CO2浓度升高。由于大鼠A头部血液仅与大鼠B循环，而大鼠B血CO2浓度维持不变，故其中枢化学感受器不受影响。预期结果若大鼠A心率加快，表明外周化学感受器参与调节；若心率无变化，则说明外周化学感受器不参与调节。因此实验操作补充应为：向大鼠A注射药物X， 测量注射前后大鼠的心率 。
【分析】自主神经系统由交感神经和副交感神经两部分组成，它们的作用通常是相反的。当人体处于兴奋状态时，交感神经活动占据优势，心跳加快，支气管扩张，但胃肠的蠕动和消化腺的分泌活动减弱；而当人处于安静状态时，副交感神经活动则占据优势，此时，心跳减慢，但胃肠的蠕动和消化液的分泌会加强，有利于食物的消化和营养物质的吸收。交感神经和副交感神经对同一器官的作用，犹如汽车的油门和刹车，可以使机体对外界刺激作出更精确的反应，使机体更好地适应环境的变化。
24．（2025·山东）某地区内，适宜生存于某群落生态环境的所有物种构成该群落的物种库，物种库大小指物种的总数目。存在于该群落物种库中，但未在该群落出现的物种称为缺失物种。群落完整性可用群落物种丰富度与物种库大小的比值表示。
（1）区别同一地区不同群落的重要特征是　 　，该特征也是决定群落性质最重要的因素。调查群落中植物的物种丰富度常用样方法，此法还可用于估算植物种群的　 　。
（2）两个群落的物种丰富度相同，缺失物种数也相同，这两个群落的物种库　 　（填“一定”或“不一定”）相同，原因是　 　。
（3）调查时发现某物种为某群落的缺失物种，在该群落所在地区建立保护区后此物种自然扩散到该群落，针对此物种的保护类型为　 　。缺失物种自然扩散到该群落，以该群落为唯一群落的生态系统的抵抗力稳定性　 　（填“提高”或“降低”）。
（4）分析受到破坏的荒漠和草原两个群落的生态恢复成功程度的差异时，最合适的指标为____（填标号）。
A．群落的物种丰富度 B．群落缺失的物种数目
C．群落完整性 D．群落物种库大小
【答案】（1）物种组成；密度
（2）不一定；两个群落的物种种类可能不同
（3）就地保护；提高
（4）C
【知识点】估算种群密度的方法；群落的结构；群落的主要类型；生物多样性的保护措施
【解析】【解答】（1）区分同一地域内不同生物群落的关键依据在于其物种组成，因为物种组成是决定群落特征的核心要素。在进行群落调查时，样方法不仅适用于统计植物物种丰富度，同样适用于测算植物种群的密度。
（2）群落物种丰富度是指该群落所包含的物种数量。当两个群落的物种数目相等时，我们称其物种丰富度相同；物种库指的是特定生态环境中能够生存的所有潜在物种。根据题目提供的信息，由于无法确定两个群落所处的生态环境是否一致，那么就无法确定两个群落的物种种类是否相同，所以这两个群落的物种库不一定相同。
（3）保护区的建立属于就地保护的重要措施。当原本缺失的物种自然迁入该群落，且该群落作为其唯一栖息地时，生态系统中的物种数量将会增加，这种物种丰富度的提升会导致营养结构趋于复杂化，从而提高该生态系统的抵抗力稳定性。
（4）评估群落完整性的一个重要指标是群落实际物种数与其潜在物种库的比值。因此，在比较荒漠和草原这两种受损生态系统的恢复成效时，群落完整性是最为适宜的评估标准，C正确，ABD错误，因此选C。
【分析】1、不同群落的物种组成不同， 物种的数目也有差别。一个群落中的物种数目，称为物种丰富度。
2、要认识一个群落，首先要分析该群落的物种组成。物种组成是区别不同群落的重要特征，也是决定群落性质最重要的因素。
25．（2025·山东）种子休眠是抵御穗发芽的一种机制。通过对Ti质粒的改造，利用农杆菌转化法将Ti质粒上的T-DNA随机整合到小麦基因组中，筛选到2个种子休眠相关基因的插入失活纯合突变体。与野生型相比，突变体种子的萌发率降低。小麦基因组序列信息已知。
（1）Ti质粒上与其在农杆菌中的复制能力相关的结构为　 　。选用图甲中的SmaI对抗除草剂基因X进行完全酶切，再选择SmaI和　 　对Ti质粒进行完全酶切，将产生的黏性末端补平，补平时使用的酶是　 　。利用DNA连接酶将酶切后的包含抗除草剂基因X的片段与酶切并补平的Ti质粒进行连接，构建重组载体，转化大肠杆菌；经卡那霉素筛选并提取质粒后再选用限制酶　 　进行完全酶切并电泳检测，若电泳结果呈现一长一短2条带，较短的条带长度近似为　 　bp，则一定为正向重组质粒。
（2）为证明这两个突变体是由于T-DNA插入到小麦基因组中同一基因导致的，提取基因组DNA，经酶切后产生含有T-DNA的基因组片段（图乙）。在此酶切过程中，限于后续PCR难以扩增大片段DNA，最好使用识别序列为　 　（填“4”“6”或“8”）个碱基对的限制酶，且T-DNA中应不含该酶的酶切位点。需首先将图乙的片段　 　，才能利用引物P1和P2成功扩增未知序列。PCR扩增出未知序列后，进行了一系列操作，其中可以判断出2条片段的未知序列是否属于同一个基因的操作为　 　（填“琼脂糖凝胶电泳”或“测序和序列比对”）。
（3）通过农杆菌转化法将构建的含有野生型基因的表达载体转入突变植株，如果检测到野生型基因，　 　（填“能”或“不能”）确定该植株的表型为野生型。
【答案】（1）复制原点；XbaⅠ；DNA聚合酶；SpeⅠ、SmaⅠ；550
（2）4；连接成环(或环化)；测序和序列比对
（3）不能
【知识点】PCR技术的基本操作和应用；基因工程的基本工具（详细）；基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】（1）Ti质粒上与其在农杆菌中的复制能力相关的结构为复制原点。
根据SmaI限制酶的识别位点特征，该酶切割后会形成平末端结构。当质粒仅使用SmaI单酶切时，抗除草剂基因既可以正向插入也可以反向插入质粒，这两种连接方式难以区分。为了确保基因的正确方向，在构建重组质粒时需引入第二种限制酶，另一限制酶的选择需满足以下条件：识别位点必须位于启动子和终止子之间，不能破坏启动子、标记基因和终止子的完整性，由于BamHI会破坏终止子，而DNA聚合酶只能从5端到3端进行合成DNA来补平黏性末端，则不能选PstⅠ，故只能选用XbaⅠ进行酶切。用DNA聚合酶对产生的黏性末端进行补平处理。
利用DNA连接酶将酶切后的包含抗除草剂基因X的片段与酶切并补平的丁质粒进行连接，构建重组载体，转化大肠杆菌。重组的T-DNA片段上含有一个Smal酶切位点和一个Spel酶切位点，可以选择用Smal和Spel进行酶切。目的基因已经和质粒连接在一起形成了环状，如果是正向连接，那么目的基因转录的方向是从模板的3’——5’，和质粒对应的方向相同，经过两种酶的酶切后并电泳呈现一长短2条带，较短的条带长度近似为550bp；若反向接，较短的条带长度近似为200bp。
（2）在限制性内切酶的选择上，识别序列为4个碱基对的限制酶更为适合产生小片段DNA，这是由于较短的识别序列在DNA链上出现的频率更高，从而产生更多切割位点，最终获得更小的酶切片段。进行PCR扩增前，这些酶切产物需要先连接成环(或环化)才能与引物P1和P2匹配。需要注意的是，仅通过琼脂糖凝胶电泳观察片段长度无法确认基因序列的同一性，必须通过DNA测序和序列比对分析才能准确判定不同片段是否源自同一基因。
（3）转化是指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。如果检测到野生型基因，还需要检测基因是否正常表达，即还需考虑转录、翻译及基因互作等因素。并且如果是显性突变，那么即使插入野生型(隐性基因)无法恢复成野生型；如果是隐性突变，即使插入野生型(显性基因)，也无法确定，因为T-DNA的插入是随机的，可能无法正常表达等。因此仅检测到野生型基因的存在，尚不能完全确定植株表现为野生型表型。
【分析】基因工程技术的基本操作流程：
1、目的基因的筛选与获取：从已知结构的基因中进行筛选，然后可以从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样；导入植物细胞一般选用农杆菌转化法，导入动物细胞采用显微注射技术，导入微生物细胞用钙离子处理使其处于感受态。
4、目的基因的检测与鉴定。
1 / 1【高考真题】山东省2025年高考真题 生物试卷
1．（2025·山东）在细胞的生命活动中，下列细胞器或结构不会出现核酸分子的是（　　）
A．高尔基体 B．溶酶体 C．核糖体 D．端粒
2．（2025·山东）生长于NaCl浓度稳定在100 mmol/L的液体培养基中的酵母菌，可通过离子通道吸收Na+，但细胞质基质中Na+浓度超过30 mmol/L时会导致酵母菌死亡。为避免细胞质基质Na+浓度过高，液泡膜上的蛋白N可将Na+以主动运输的方式转运到液泡中，细胞膜上的蛋白W也可将Na+排出细胞。下列说法错误的是（　　）
A．Na+在液泡中的积累有利于酵母细胞吸水
B．蛋白N转运Na+过程中自身构象会发生改变
C．通过蛋白W外排Na+的过程不需要细胞提供能量
D．Na+通过离子通道进入细胞时不需要与通道蛋白结合
3．（2025·山东）利用病毒样颗粒递送调控细胞死亡的执行蛋白可控制细胞的死亡方式。细胞接收执行蛋白后，若激活蛋白P，则诱导细胞发生凋亡，细胞膜突起形成小泡，染色质固缩；若激活蛋白Q，则诱导细胞发生焦亡，细胞肿胀破裂，释放大量细胞因子。下列说法错误的是（　　）
A．细胞焦亡可能引发机体的免疫反应
B．细胞凋亡是由基因所决定的程序性细胞死亡
C．细胞凋亡和细胞焦亡受不同蛋白活性变化的影响
D．通过细胞自噬清除衰老线粒体的过程属于细胞凋亡
4．（2025·山东）关于细胞以葡萄糖为原料进行有氧呼吸和无氧呼吸的过程，下列说法正确的是（　　）
A．有氧呼吸的前两个阶段均需要O2作为原料
B．有氧呼吸的第二阶段需要H2O作为原料
C．无氧呼吸的两个阶段均不产生NADH
D．经过无氧呼吸，葡萄糖分子中的大部分能量以热能的形式散失
5．（2025·山东）关于豌豆胞核中淀粉酶基因遗传信息传递的复制、转录和翻译三个过程，下例说法错误的是（　　）
A．三个过程均存在碱基互补配对现象
B．三个过程中只有复制和转录发生在细胞核内
C．根据三个过程的产物序列均可确定其模板序列
D．RNA聚合酶与核糖体沿模板链的移动方向不同
6．（2025·山东）镰状细胞贫血是由等位基因H、h控制的遗传病。患者（hh）的红细胞只含异常血红蛋白，仅少数患者可存活到成年；正常人（HH）的红细胞只含正常血红蛋白；携带者（Hh）的红细胞含有正常和异常血红蛋白，并对疟疾有较强的抵抗力。下列说法错误的是（　　）
A．引起镰状细胞贫血的基因突变为中性突变
B．疟疾流行区，基因h不会在进化历程中消失
C．基因h通过控制血红蛋白的结构影响红细胞的形态
D．基因h可影响多个性状，不能体现基因突变的不定向性
7．（2025·山东）某动物家系的系谱图如图所示。a1、a2、a3、a4是位于X染色体上的等位基因，Ⅰ-1基因型为Xa1Xa2，Ⅰ-2基因型为Xa3Y，Ⅱ-1和Ⅱ-4基因型均为Xa4Y，Ⅳ-1为纯合子的概率为（　　）
A．3/64 B．3/32 C．1/8 D．3/16
8．（2025·山东）神经细胞动作电位产生后，K+外流使膜电位恢复为静息状态的过程中，膜上的钠钾泵转运K+、Na+的活动增强，促使膜内外的K+、Na+分布也恢复到静息状态。已知胞内K+浓度总是高于胞外，胞外Na+浓度总是高于胞内。下列说法错误的是（　　）
A．若增加神经细胞外的Na+浓度，动作电位的幅度增大
B．若静息状态下Na+通道的通透性增加，静息电位的幅度不变
C．若抑制钠钾泵活动，静息电位和动作电位的幅度都减小
D．神经细胞的K+、Na+跨膜运输方式均包含主动运输和被动运输
9．（2025·山东）机体长期感染某病毒可导致细胞癌变。交感神经释放的神经递质作用于癌细胞表面β受体，上调癌细胞某蛋白的表达，破坏癌细地的连接，从而促进癌细胞转移。下列说法错误的是（　　）
A．机体清除该的过程属于免疫自稳
B．使用β受体阻断剂可降低癌细胞转移率
C．可通过接种该病毒疫苗降低患相关癌症的风险
D．辅助性T细胞可能参与机体清除癌细胞的过程
10．（2025·山东）果头脱落受多种激素调控。某植物果实脱落的调控过程如图所示。下列说法错误的是（　　）
A．脱落酸通过促进乙烯的合成促进该植物果实脱落
B．脱落酸与生长素含量的比值影响该植物果实脱落
C．喷施适宜浓度的生长素类调节剂有利于防止该植物果实脱落
D．该植物果实脱落过程中产生的乙烯对自身合成的调节属于负反馈
11．（2025·山东）某湿地公园出现大量由北方前来越冬的候鸟，下列说法正确的是（　　）
A．候鸟前来该湿地公园越冬的信息传递只发生在鸟类与鸟类之间
B．鸟类的到来改变了该湿地群落冬季的物种数目，属于群落演替
C．来自不同地区鸟类的交配机会增加，体现了生物多样性的间接价值
D．湿地水位深浅不同的区域分布着不同的鸟类种样，体现了群落的垂直结构
12．（2025·山东）某时刻某动物种群所有个体的有机物中的总能量为①，一段时后．此种群所有存活个体的有机物中的总能量为②，此种群在这段时间内通过呼吸作用散失的总能量为③，这段时间内死亡个体的有机物中的总能量为④。此种群在此期间无迁入迁出，无个体被捕食，估算这段时间内用于此种群生长、发育和繁殖的总能量时，应使用的表达式为（　　）
A．②-①+④ B．②-①+③ C．②-①-③+④ D．②-①+③+①
13．（2025·山东）“绿叶中色素的提取和分离”实验操作中要注意“干燥”，下列说法错误的是（　　）
A．应使用于燥的定性滤纸
B．绿叶需烘干后再提取色素
C．重复画线前需等待滤液细线干燥
D．无水乙醇可用入适量无水碳酸钠的95%乙醇替代
14．（2025·山东）利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过程如图所示，下列说法错误的是（　　）
A．对牛乙注射促性腺激素是为了收集更多的卵母细胞
B．卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅰ中期进行
C．培养牛甲的体细胞时应定期更换培养液
D．可用PCR技术鉴定犊牛丁是否为转基因牛
15．（2025·山东）深海淤泥中含有某种能降解纤维素的细菌。探究不同压强下，该细菌在以纤维素或淀粉为唯一碳源的培养基上的生长情况。其他条件相同且适宜，实验处理及结果如表所示。下列说法正确的是（　　）
组别 压强 纤维素 淀粉 菌落
① 常压 - + -
② 常压 + - -
③ 高压 - + -
④ 高压 + - +
注： “+”表示有；“一”表示无
A．可用平板划线法对该菌计数
B．制备培养基的过程中，应先倒平板再进行高压蒸汽灭菌
C．由②④组可知，在以纤维素为唯一碳源的培养基上，该菌可在常压下生长
D．由③④组可知，高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长
16．（2025·山东）在低氧条件下，某单细胞藻叶绿体基质中的蛋白F可利用H+利和光合作用产生的NADPH生成H2。为研究藻释放H2的培养条件，将大肠杆菌和藻按一定比例混合均匀后分成2等份，1份形成松散菌-藻体，另1份形成致密菌-藻体，在CO2充足的封闭体系中分别培养并测定体系中的气体含量，2种菌-藻体培养体系中的O2含量变化相同，结果如图所示。培养过程中，任意时刻2体系之间的光反应速率无差异。下列说法错误的是（　　）
A．菌-藻体不能同时产生O2和H2
B．菌-藻体的致密程度可影响H2生成量
C．H2的产生场所是该藻叶绿体的类囊体薄膜
D．培养至72h，致密菌-藻体暗反应产生的有机物多于松散菌-藻体
17．（2025·山东）果蝇体节发育与分别位于2对常染色体上的等位基因M、m和N、n有关，M对m、N对n均为显性。其中1对为母体效应基因，只要母本该基因为隐性纯合，子代就体节缺失，与自身该对基因的基因型无关；另1对基因无母体效应，该基因的隐性纯合子体节缺失。下列基因型的个体均体节缺失，能判断哪对等位基因为母体效应基因的是（　　）
A．MmNn B．MmNN C．mmNN D．Mmnn
18．（2025·山东）低钠血症患者的血钠浓度和细胞外液渗透压均低于正常值。依据患者细胞外液量减少、不变和增加，依次称为低容量性、等容量性和高容量性低钠血症。下列说法正确的是（　　）
A．醛固酮分泌过多可能引起低容量性低钠血症
B．抗利尿激素分泌过多可能引起高容量性低钠血症
C．与患病前相比，等容量性低钠血症患者更易产生渴感
D．与患病前相比，低钠血症患者的细胞外液中总钠量可能增加
19．（2025·山东）种群延续所需要的最小种群密度为临界密度，只有大于临界密度，种群数量才能增加，最后会达到并维持在一个相对稳定的数量，即环境容纳量（K值）。不同环境条件下，同种动物种群的K值不同。图中曲线上的点表示在不同环境条件下某动物种群的K值和达到K值时的种群密度，其中m为该动物种群的临界密度，K0以下的环境表示该动物的灭绝环境。a、b、c、d四个点表示不同环境条件下该动物的4个种群的K值及当前的种群密度，且4个种群所在区域面积相等，各种群所处环境稳定。不考虑迁入迁出，下列说法错误的是（　　）
A．可通过提高K值对a点种群进行有效保护
B．b点种群发展到稳定期间，出生率大于死亡率
C．c点种群发展到稳定期间，种内竞争逐渐加剧
D．通过一次投放适量该动物可使d点种群得以延续
20．（2025·山东）酿造某大曲白酒的过程中，微生物的主要来源有大曲和窖泥。大曲主要提供白酒酿造过程中糖化所需的微生物，制曲过程需经堆积培养，培养时温度可达60℃左右；将大曲和酿酒原料混合，初步发酵后放入窖池；窖池发酵是白酒酿造过程中微生物发酵的最后阶段。下列说法正确的是（　　）
A．堆积培养过程中的高温有利于筛选酿酒酵母
B．大曲中存在能分泌淀粉酶的微生物
C．窖池发酵过程中，酵母菌以无氧呼吸为主
D．窖池密封不严使酒变酸是因为乳酸含量增加
21．（2025·山东）高光强环境下，植物光合系统吸收的过剩光能会对光合系统造成损伤，引起光合作用强度下降。植物进化出的多种机制可在一定程度上减轻该损伤。某绿藻可在高光强下正常生长，其部分光合过程如图所示。
（1）叶绿体膜的基本支架是　 　；叶绿体中含有许多由类囊体组成的　 　，扩展了受光面积。
（2）据图分析，生成NADPH所需的电子源自于　 　。采用同位素示踪法可追踪物质的去向，用含3H2O的溶液培养该绿藻一段时间后，以其光合产物葡萄糖为原料进行有氧呼吸时，能进入线粒体基质被3H标记的物质有H2O、　 　.离心收集绿藻并重新放入含H218O的培养液中，在适宜光照条件下继续培养，绿藻产生的带18O标记的气体有　 　。
（3）据图分析，通过途径①和途径②消耗过剩的光能减轻光合系统损伤的机制分别为　 　。
22．（2025·山东）某二倍体两性花植物的花色由2对等位基因A、a和B、b控制，该植物有2条蓝色素合成途径。基因A和基因B分别编码途径①中由无色前体物质M合成蓝色素所必需的酶A和酶B；另外，贝要有酶A或酶B存在，就能完全抑制途径②的无色前体物质N合成蓝色素。已知基因a和基因b不编码蛋白质，无蓝色素时植物的花为白花。相关杂交实验及结果如表所示，不考虑其他突变和染色体互换；各配子和个体活力相同。
组别 亲本杂交组合 F1 F2
实验一 甲（白花植株）×乙（白花植株） 全为蓝花植株 蓝花植株：白花植株=10：6
实验二 AaBb（诱变）（♂）×aabb（♀） 发现1株三体蓝花植株，该三体仅基因A或a所在染色体多了1条 　
（1）据实验一分析，等位基因A、a和B、b的遗传　 　（填“符合”或“不符合”）自由组合定律。实验一的F2中，蓝花植株纯合体的占比为　 　。
（2）已知实验二中被诱变亲本在减数分裂时只发生了1次染色体不分离。实验二中的F1三体蓝花植株的3种可能的基因型为AAaBb、　 　。请通过1次杂交实验，探究被诱变亲本染色体不分离发生的时期。已知三体细胞减数分裂时，任意2条同源染色体可正常联会并分离，另1条同源染色体随机移向细胞任一极。
实验方案：　 　（填标号），统计子代表型及比例。
①三体蓝花植株自交 ②三体蓝花植株与基因型为aabb的植株测交
预期结果：若　 　，则染色体不分离发生在减数分裂Ⅰ；否则，发生在减数分裂Ⅱ。
（3）已知基因B→b只由1种染色体结构变异导致，且该结构变异发生时染色体只有2个断裂的位点。为探究该结构变异的类型，依据基因B所在染色体的DNA序列，设计了如图所示的引物，并以实验一中的甲、乙及F2中白花植株（丙）的叶片DNA为模板进行了PCR，同1对引物的扩增产物长度相同，结果如图所示，据图分析，该结构变异的类型是　 　。丙的基因型可能为　 　；若要通过PCR确定丙的基因型，还需选用的1对引物是　 　。
23．（2025·山东）机体内环境发生变化时，心血管活动的部分反射调节如图所示。
（1）调节心血管活动的基本神经中枢位于　 　（填“大脑”“脑干”或“下丘脑”）。当血压突然升高时，机体可通过图示调节引起心率减慢、血管舒张，从而使血压下降并恢复正常，该调节过程中，　 　（填“交感神经”或“副交感神经”）的活动减弱。
（2）血压调节过程中，压力感受器和化学感受器产生的兴奋在传入神经上都以　 　信号的形式向前传导；兴奋只能由传出神经末梢向心肌细胞单向传递的原因是　 　。
（3）已知血C02浓度升高时，通过图示调节影响心率变化。化学感受器分为中枢和外周化学感受器2种类型，其中外周化学感受器位于头部以下，中枢化学感受器分布在脑内。注射药物X仅增加血CO2浓度，不影响其他生理功能。
实验目的：探究外周和中枢化学感受器是否均参与血C02浓度对心率的调节。
实验步骤：①麻醉大鼠A和B；
②将大鼠A的头部血管与大鼠B的相应血管连接，使大鼠A头部的血液只与大鼠B循环，大鼠A头部以下血液循环以及大鼠B血液循环不变，大鼠A、B的其他部位保持不变，术后生理状态均正常；
③测量注射药物X前后的心率。
结果及结论：向大鼠B尾部静脉注射药物X，大鼠A心率升高，可得出的结论是　 　（填“中枢”或“外周”）化学感受器参与了血CO2浓度对心率的调节。依据实验目的，还需要探究另1类化学感受器是否参与调节，在实验步骤①、②的基础上，需要继续进行的操作是　 　。
24．（2025·山东）某地区内，适宜生存于某群落生态环境的所有物种构成该群落的物种库，物种库大小指物种的总数目。存在于该群落物种库中，但未在该群落出现的物种称为缺失物种。群落完整性可用群落物种丰富度与物种库大小的比值表示。
（1）区别同一地区不同群落的重要特征是　 　，该特征也是决定群落性质最重要的因素。调查群落中植物的物种丰富度常用样方法，此法还可用于估算植物种群的　 　。
（2）两个群落的物种丰富度相同，缺失物种数也相同，这两个群落的物种库　 　（填“一定”或“不一定”）相同，原因是　 　。
（3）调查时发现某物种为某群落的缺失物种，在该群落所在地区建立保护区后此物种自然扩散到该群落，针对此物种的保护类型为　 　。缺失物种自然扩散到该群落，以该群落为唯一群落的生态系统的抵抗力稳定性　 　（填“提高”或“降低”）。
（4）分析受到破坏的荒漠和草原两个群落的生态恢复成功程度的差异时，最合适的指标为____（填标号）。
A．群落的物种丰富度 B．群落缺失的物种数目
C．群落完整性 D．群落物种库大小
25．（2025·山东）种子休眠是抵御穗发芽的一种机制。通过对Ti质粒的改造，利用农杆菌转化法将Ti质粒上的T-DNA随机整合到小麦基因组中，筛选到2个种子休眠相关基因的插入失活纯合突变体。与野生型相比，突变体种子的萌发率降低。小麦基因组序列信息已知。
（1）Ti质粒上与其在农杆菌中的复制能力相关的结构为　 　。选用图甲中的SmaI对抗除草剂基因X进行完全酶切，再选择SmaI和　 　对Ti质粒进行完全酶切，将产生的黏性末端补平，补平时使用的酶是　 　。利用DNA连接酶将酶切后的包含抗除草剂基因X的片段与酶切并补平的Ti质粒进行连接，构建重组载体，转化大肠杆菌；经卡那霉素筛选并提取质粒后再选用限制酶　 　进行完全酶切并电泳检测，若电泳结果呈现一长一短2条带，较短的条带长度近似为　 　bp，则一定为正向重组质粒。
（2）为证明这两个突变体是由于T-DNA插入到小麦基因组中同一基因导致的，提取基因组DNA，经酶切后产生含有T-DNA的基因组片段（图乙）。在此酶切过程中，限于后续PCR难以扩增大片段DNA，最好使用识别序列为　 　（填“4”“6”或“8”）个碱基对的限制酶，且T-DNA中应不含该酶的酶切位点。需首先将图乙的片段　 　，才能利用引物P1和P2成功扩增未知序列。PCR扩增出未知序列后，进行了一系列操作，其中可以判断出2条片段的未知序列是否属于同一个基因的操作为　 　（填“琼脂糖凝胶电泳”或“测序和序列比对”）。
（3）通过农杆菌转化法将构建的含有野生型基因的表达载体转入突变植株，如果检测到野生型基因，　 　（填“能”或“不能”）确定该植株的表型为野生型。
答案解析部分
1．【答案】A
【知识点】核酸的种类及主要存在的部位；其它细胞器及分离方法
【解析】【解答】A、高尔基体的主要功能是对来自内质网的蛋白质进行加工、分类和包装，形成囊泡并运输到细胞内或细胞外，不会进行DNA复制、转录和翻译过程，因此其不会出现核酸分子，A符合题意；
B、溶酶体的功能是分解衰老、损伤的细胞器，吞噬并杀死侵入细胞的病毒或细菌，当其吞噬病毒或细菌时，会出现核酸分子，B不符合题意；
C、核糖体的组成成分由rRNA和蛋白质构成，rRNA是RNA的一种，C不符合题意；
D、端粒是真核细胞染色体末端的结构，由DNA和蛋白质组成，D不符合题意。
故选A。
【分析】真核细胞内几种细胞器的结构、功能与分布：
　 溶酶体 高尔基体 核糖体
结构 高尔基体断裂形成，单层膜包被的囊状小泡 内含60种以上水解酶 单层膜围成的囊状结构。 游离在细胞质或附着在内质网上，主要由rRNA和蛋白质组成。
功能 是细胞的“消化车间”，吞噬衰老、损伤的细胞器并杀死入侵的病菌。 蛋白质加工、分类和包装的“车间”及“发送站” 是蛋白质合成的场所
分布 几乎存在于所有动物细胞 所有细胞中 所有细胞
2．【答案】C
【知识点】被动运输；主动运输
【解析】【解答】A、液泡积累Na+会提高液泡渗透压，促使水从细胞质进入液泡，从而降低细胞质水势，有利于细胞从外界吸水，A正确；
B、蛋白N作为主动运输的载体蛋白，转运Na+时自身构象会发生变化，这一过程需要消耗能量，B正确；
C、由于外界Na+浓度（100 mmol/L）高于细胞内（需<30 mmol/L），蛋白W外排Na+属于逆浓度梯度的主动运输，需要细胞提供能量，C错误；
D、Na+通过离子通道时是顺浓度梯度的被动运输，离子通道仅提供通路，Na+无需与蛋白结合即可快速通过，D正确。
故选C。
【分析】1、物质以扩散方式进出细胞，不需要消耗细胞内化学反应所释放的能量，这种物质跨膜运输方式称为被动运输。被动运输又分为自由扩散和协助扩散两类。物质通过简单的扩散作用进出细胞的方式，叫作自由扩散，也叫简单扩散。需要借助膜上的转运蛋白进出细胞的物质扩散方式，叫作协助扩散，也叫易化扩散。
2、物质逆浓度梯度进行跨膜运输，需要载体蛋白的协助，同时还需要消耗细胞内化学反应所释放的能量，这种方式叫作主动运输。
3．【答案】D
【知识点】细胞的凋亡；细胞凋亡与细胞坏死的区别；细胞自噬
【解析】 【解答】A、细胞焦亡会释放大量细胞因子，这些物质确实可能引发机体免疫反应，A正确；
B、 细胞凋亡作为程序性细胞死亡方式，受特定基因的精确调控，B正确；
C、题干明确指出，凋亡和焦亡分别由不同蛋白（P和Q）介导，二者的分子机制和生物学效应存在本质差异，C正确；
D、细胞自噬是溶酶体介导的细胞内组分降解过程，主要功能是清除受损细胞器（如衰老线粒体），属于细胞自我更新机制，与凋亡/焦亡这类细胞清除过程具有本质区别，D错误。
故选D。
【分析】由基因所决定的细胞自动结束生命的过程，就叫细胞凋亡。由于细胞凋亡受到严格的由遗传机制决定的程序性调控，所以它是一种程序性死亡。在成熟的生物体中，细胞的自然更新，某些被病原体感染的细胞的清除，也是通过细胞凋亡完成的。细胞凋亡对于多细胞生物体完成正常发育，维持内部环境的稳定，以及抵御外界各种因素的干扰都起着非常关键的作用。
4．【答案】B
【知识点】有氧呼吸的过程和意义；无氧呼吸的过程和意义；有氧呼吸和无氧呼吸的比较
【解析】【解答】AB、有氧呼吸第一个阶段是一分子的葡萄糖分解成2分子的丙酮酸，产生少量的[H]，并且释放出少量的能量，这一阶段不需要氧的参与，是在细胞质基质中进行的；第二个阶段是丙酮酸和H2O彻底分解成二氧化碳和[H]，并释放出少量的能量，这一阶段不需要氧直接参与，是在线粒体基质中进行的，A错误，B正确；
CD、无氧呼吸第一个阶段是一分子的葡萄糖分解成2分子的丙酮酸，产生少量的NADH，并且释放出少量的能量的过程；第二个阶段是丙酮酸在酶的催化作用下，分解成酒精和二氧化碳，或者转化成乳酸，无论是分解成酒精和二氧化碳或者是转化成乳酸，无氧呼吸第二阶段都没有产生NADH和能量，无氧呼吸葡萄糖分子中的大部分能量是储存在乳酸或者酒精中，只是第一阶段释放的少量能量中大部分以热能的形式散失，CD错误。
故选B。
【分析】1、有氧呼吸的全过程可以概括地分为三个阶段，每个阶段的化学反应都有相应的酶催化。第一个阶段是，一分子的葡萄糖分解成2分子的丙酮酸，产生少量的[H]，并且释放出少量的能量。这一阶段不需要氧的参与，是在细胞质基质中进行的。第二个阶段是，丙酮酸和水彻底分解成二氧化碳和[H]，并释放出少量的能量。这一阶段不需要氧直接参与，是在线粒体基质中进行的。第三个阶段是，上述两个阶段产生的[H]，经过一系列的化学反应，与氧结合形成水，同时释放出大量的能量。这一阶段需要氧的参与，是在线粒体内膜上进行的。
2、无氧呼吸的全过程，可以概括地分为两个阶段，这两个阶段需要不同酶的催化，但都是在细胞质基质中进行的。第一个阶段与有氧呼吸的第一个阶段完全相同。第二个阶段是，丙酮酸在酶(与催化有氧呼吸的酶不同)的催化作用下，分解成酒精和二氧化碳，或者转化成乳酸。无论是分解成酒精和二氧化碳或者是转化成乳酸，无氧呼吸都只在第一阶段释放出少量的能量，生成少量ATP。葡萄糖分子中的大部分能量则存留在酒精或乳酸中。
5．【答案】C
【知识点】DNA分子的复制；遗传信息的转录；遗传信息的翻译
【解析】【解答】A、DNA复制、转录和翻译过程均遵循碱基互补配对原则，DNA复制以双链为模板通过碱基配对合成子代DNA；转录以单链DNA为模板按A-U/T-A/G-C配对生成mRNA；翻译时tRNA反密码子与mRNA密码子通过碱基互补识别，A正确；
B、在真核细胞豌豆中，淀粉酶基因存在于细胞核中，DNA复制和转录都以DNA为模板，发生在细胞核内，B正确；
C、虽然复制和转录产物与模板严格互补可以反向推导，但翻译产物（蛋白质）因密码子简并性（如亮氨酸6种密码子）无法唯一确定mRNA序列，C错误；
D、转录时RNA聚合酶沿DNA模板链由3'→5'方向移动，而翻译时核糖体沿mRNA模板由5'→3'方向移动，因此RNA聚合酶与核糖体沿模板链的移动方向不同，D正确。
故选C。
【分析】1、遗传信息的的复制、转录和翻译三个过程关系如下：
6．【答案】A
【知识点】基因、蛋白质、环境与性状的关系；基因突变的特点及意义；基因突变的类型
【解析】【解答】A、中性突变是指对生物适应度没有显著影响的基因突变。然而镰状细胞贫血突变基因（h）在杂合状态（Hh）能提高疟疾抵抗力，在纯合状态（hh）却会导致严重贫血，这表明该突变对生存适应性具有显著影响，不符合中性突变的定义，A错误；
B、在疟疾流行地区，由于杂合子（Hh）具有抗疟疾的选择优势，h基因频率会维持在较高水平，即基因h不会在进化历程中消失，B正确；
C、该疾病的发生机制是h基因编码异常的血红蛋白分子，导致红细胞形态改变为镰刀状，这直接证明了基因通过控制蛋白质结构来影响细胞形态，C正确；
D、虽然h基因表现出影响多个性状，即红细胞形态和疟疾抗性，但与基因突变的不定向性（一个基因可能产生多种等位突变）是不同概念，突变不定向性强调的是突变方向的随机性，而非单个突变基因影响多个性状，D正确。
故选A。
【分析】1、基因突变是生物变异的根本来源，具有以下核心特点：首先，突变具有普遍性，可发生于所有生物的任何基因中，如人类的白化病和果蝇的残翅突变；其次，突变表现出随机性（不定向性），其发生时间和方向均无法预测，但会通过自然选择被定向筛选，例如抗药性细菌的产生就是随机突变后经药物选择的结果。突变通常具有低频性，自然状态下发生率较低（约10-6~10-5/代），但辐射等诱变因素可显著提高突变率。从效应来看，突变具有多害少利性，多数对生物有害（如镰状细胞贫血），少数中性或有利（如Hh基因型对疟疾的抗性）。此外，突变具有可逆性，可能发生回复突变；也具有多向性，可产生复等位基因（如人类ABO血型系统）。值得注意的是，基因突变常表现出多效性，一个基因突变可能影响多个性状（如h基因同时影响血红蛋白结构和抗疟能力）。最后，部分突变属于中性突变，对表型无显著影响，但其"中性"是相对的，可能在某些环境中显现效应。
7．【答案】D
【知识点】基因的分离规律的实质及应用；伴性遗传；遗传系谱图
【解析】【解答】根据遗传系谱和基因的分离定律分析可知，第一代I-1基因型为Xa1Xa2，I-2为Xa3Y；第二代II-2和II-3基因型均为1/2Xa1Xa3和1/2Xa2Xa2，II-1和II-4均为Xa4Y；第三代III-1基因型为1/4Xa1Xa4、1/4Xa2Xa4和1/2Xa3Xa4，III-2为1/4Xa1Y、1/4Xa2Y和1/2Xa3Y；由此计算第四代IV-1的纯合子概率为1/32（Xa1Xa1）+1/32（Xa2Xa2）+1/8（Xa3Xa3）=3/16，故选D。
【分析】1、基因分离定律的实质是：在杂合子的细胞中，位于一对同源染色体上的等位基因，具有一定的独立性；在减数分裂形成配子的过程中，等位基因会随同源染色体的分开而分开，分别进入两个配子中，独立地随配子遗传给后代。
2、位于性染色体上的基因控制的性状在遗传上总是和性别相关联，这种现象叫作伴性遗传。
8．【答案】B
【知识点】神经冲动的产生和传导
【解析】【解答】A、动作电位幅度与Na+内流量直接相关，当细胞外Na+浓度升高时，增大的浓度梯度会促进更多Na+内流，从而增强去极化程度，使动作电位幅度增大，A正确；
B、静息电位主要由K+外流形成，若静息时Na+通道通透性增加，Na+内流会部分抵消K+外流效应，导致静息电位绝对值减小，并不是不变，B错误；
C、钠钾泵抑制会导致K+浓度梯度减小（减少K+外流）和Na+浓度梯度减小（减少Na+内流），这将同时降低静息电位绝对值和动作电位幅度，C正确；
D、K+外流和Na+内流都是属于顺浓度梯度的被动运输，而钠钾泵进行的离子转运是逆浓度梯度的，属于主动运输，D正确。
故选B。
【分析】神经冲动在神经纤维上的产生和传导：
①在未受到刺激时，神经纤维处于静息状态。此时，神经细胞外的钠离子浓度比膜内要高，钾离子浓度比膜内低，而神经细胞膜对不同离子的通透性各不相同：静息时，膜主要对钾离子有通透性，造成钾离子外流，使膜外阳离子浓度高于膜内。由于细胞膜内外这种特异的离子分布特点，细胞膜两侧的电位表现为内负外正，这称为静息电位。
②当神经纤维某一部位受到刺激时，细胞膜对钠离子的通透性增加，钠离子内流，这个部位的膜两侧出现暂时性的电位变化，表现为内正外负的兴奋状态。此时的膜电位称为动作电位。而邻近的未兴奋部位仍然是内负外正。在兴奋部位和未兴奋部位之间由于电位差的存在而发生电荷移动，这样就形成了局部电流。
③这种局部电流又刺激相近的未兴奋部位发生同样的电位变化，如此进行下去，将兴奋向前传导，后方又恢复为静息电位。
9．【答案】A
【知识点】细胞癌变的原因；免疫系统的结构与功能；体液免疫
【解析】【解答】A、机体清除病毒明显属于免疫防御功能，这里需要区分免疫系统的三大功能：免疫防御（清除病原体）、免疫自稳（清除衰老损伤细胞）和免疫监视（清除癌变细胞），A错误；
B、题目明确指出交感神经通过β受体促进癌细胞转移，所以使用β受体阻断剂可降低癌细胞转移率，B正确；
C、题目明确指出机体长期感染某病毒可导致细胞癌变，那么接种病毒疫苗可降低相关癌症风险，例如HPV疫苗预防宫颈癌、HBV疫苗预防肝癌等，都是通过阻断致癌病毒感染来实现防癌效果，C正确；
D、辅助性T细胞通过抗原识别、免疫激活、效应调控等多环节参与抗肿瘤免疫应答，是清除癌细胞过程中不可或缺的调控枢纽，D正确。
故选A。
【分析】 免疫系统通过三大核心功能共同维护机体健康：首先是免疫防御功能，专门识别和清除外来病原体如病毒、细菌等，例如抗体中和病毒或巨噬细胞吞噬细菌的过程；其次是免疫自稳功能，主要负责清理衰老、损伤的自身细胞以维持内环境稳定，比如清除衰老红细胞的过程；最后是免疫监视功能，其核心作用是识别并清除癌变细胞，像细胞毒性T细胞杀伤肿瘤细胞就是典型例证。
10．【答案】D
【知识点】生长素的作用及其作用的两重性；其他植物激素的种类和作用；植物激素间的相互关系
【解析】【解答】A、根据图示信息可以得出，脱落酸能够激活乙烯合成酶的功能，而乙烯合成酶又催化乙烯的生成，最终促使果实脱落，A正确；
B、图示表明，当脱落酸含量较高时会加速果实脱落，而生长素含量较高时则会延缓果实脱落，由此可见，果实脱落受脱落酸与生长素相对含量的调控，B正确；
C、施用合适浓度的生长素类调节剂，能够拮抗脱落酸的效应，阻碍乙烯合成酶的活性，减少乙烯的产生，从而达到延缓果实脱落的效果，C正确；
D、在果实脱落过程中，植物自身产生的乙烯会削弱生长素的作用，间接减轻生长素对脱落酸的抑制效果，同时增强乙烯合成酶的活性，促进更多乙烯的合成，这一过程形成自我强化的循环，属于正反馈调节机制，D错误。
故选D。
【分析】1、物体内多种激素之间具有复杂的相互关系。植物的生长发育往往取决于激素之间的比例关系，而不是某种激素的绝对含量。
2、植物激素主要有生长素、赤霉素、细胞分裂素、乙烯和脱落酸等，它们对植物生命活动起着不同的调节作用。
11．【答案】C
【知识点】群落的结构；群落的演替；生态系统中的信息传递；生物多样性的价值
【解析】【解答】A、候鸟迁徙的信息传递不仅限于鸟类之间，还可能包括环境因素（如气候、食物）或其他生物（如植物、昆虫）的影响，因此“只发生在鸟类与鸟类之间”是不对的，A错误；
B、群落演替是指群落结构和物种组成随时间发生定向、连续的变化过程。候鸟季节性迁徙虽然增加了物种数目，但这是周期性、临时性的变化，不属于群落演替，B错误；
C、生物多样性的间接价值通常指生态功能（如调节气候、净化水源等），而直接价值包括对人类有直接用途的方面（如观赏、科研等）。鸟类交配机会增加可能有助于基因交流或物种延续，这属于间接价值，C正确；
D、垂直结构是指群落在垂直方向上的分层现象（如乔木、灌木、草本层）。水位深浅导致的鸟类分布差异是水平方向上的变化，属于水平结构而非垂直结构，D错误。
故选C。
【分析】1、关于生物多样性的价值，科学家一般概括为以下几个方面：直接价值、间接价值以及目前人类尚不清楚的潜在价值。
①直接价值是对人类有食用、药用和作为工业原料等实用意义的，以及有旅游观赏、科学研究和文学艺术创作等非实用意义的价值。
②生物多样性的间接价值主要体现在调节生态系统的功能等方面。例如，植物能进行光合作用，具有制造有机物、固碳、供氧等功能；森林和草地具有防风固沙、水土保持作用，湿地可以蓄洪防旱、净化水质、调节气候，等等。
③物多样性还具有许多目前人们尚不太清楚的潜在价值。
12．【答案】A
【知识点】生态系统的能量流动
【解析】【解答】题目要求计算一段时间内用于此种群生长、发育和繁殖的总能量（即净生产量 NP）。根据能量流动相关知识，初始种群总能量 ① 的去向包括存活个体能量 ②、呼吸消耗 ③ 和死亡个体能量 ④，因此有 ① = ② + ③ + ④，重新整理可得 ② = ① - ③ - ④，而净生产量 NP 应等于种群实际增加的有机物能量，即存活个体能量变化（② - ①）加上死亡个体能量 ④，这段时间的同化量，应是①+同化量-③-④=②，即用于此种群生长、发育和繁殖的总能量=同化量= ② - ① + ④，对应选项 A，故选A。
【分析】1、生态系统中能量的输入、传递、转化和散失的过程，称为生态系统的能量流动。
2、流入第二营养级的能量，一部分在初级消费者的呼吸作用中以热能的形式散失；另一部分用于初级消费者的生长、发育和繁殖等生命活动，其中一些以遗体残骸的形式被分解者利用。如果初级消费者被次级消费者捕食，能量就流入了第三营养级。能量在第三、第四营养级的变化，与第二营养级的情况大致相同。
13．【答案】B
【知识点】叶绿体色素的提取和分离实验
【解析】【解答】A、色素的分离（纸层析法）需要干燥的滤纸，否则水分会影响色素的扩散速度，导致分离效果不佳，A正确；
B、烘干绿叶会导致色素（如叶绿素）受热分解，降低提取效率，实验过程中，通常使用新鲜绿叶（或冷冻保存的绿叶），加入无水乙醇或丙酮研磨提取色素，无需烘干，B错误；
C、重复画线是为了增加色素量，使层析结果更清晰，若前一次滤液未干就重复画线，会导致色素扩散过宽，影响分离效果，因此重复画线前需等待滤液细线干燥，C正确；
D、95%乙醇含有水分，会影响色素提取效率，但加入无水碳酸钠可吸收水分，提高乙醇纯度，使其接近无水乙醇的效果，D正确。
故选B。
【分析】“绿叶中色素的提取和分离”实验的原理：
1、绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中，所以，可以用无水乙醇提取绿叶中的色素。
2、绿叶中的色素不只有一种，它们都能溶解在层析液中，但不同的色素溶解度不同。溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，反之则慢。这样，绿叶中的色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而分开。
14．【答案】B
【知识点】PCR技术的基本操作和应用；基因工程的应用；动物细胞培养技术；动物细胞核移植技术；动物体细胞克隆
【解析】【解答】A、对牛乙注射外源促性腺激素，目的是诱发牛乙卵巢排出比自然情况下更多的成熟卵细胞，以便于收集更多的卵母细胞用于操作，A正确；
B、雌性动物正常排出的卵细胞即处于MⅡ期，此时卵母细胞已发育成熟，细胞质中具有激活重构胚以及早期胚胎发育的必需因子，因此卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅱ中期进行，B错误；
C、培养牛甲的体细胞时应定期更换培养液，目的是清除代谢废物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，C正确；
D、PCR通过特异性引物、DNA聚合酶和热循环反应，能够指数级扩增目标DNA片段。在转基因牛检测中，只需设计针对目的基因的特异性引物，即可通过扩增判断该基因是否存在，进而确定犊牛丁是否为转基因牛，D正确。
故选B。
【分析】动物体细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核，移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。
15．【答案】D
【知识点】微生物的分离和培养；灭菌技术；培养基的制备
【解析】【解答】A、平板划线法通过形成单菌落实现菌种分离纯化，但无法精确计数，需用稀释涂布平板法进行计数，A错误；
B、培养基制备过程必须先灭菌后倒平板，否则易污染或破坏成分，B错误；
C、组②（常压+纤维素）和组④（高压+纤维素）的结果对比，表明该菌仅在高压下能生长并利用纤维素，C错误；
D、组③（高压+淀粉）和组④（高压+纤维素）的结果对比，证明该菌只有在高压下条件下特异性利用纤维素，因此高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长，D正确。
故选D。
【分析】1、微生物常见的接种的方法：平板划线法和稀释涂布平板法。稀释涂布平板法除可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目。
2、选择培养基：在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长，用以分离菌种。
16．【答案】A,C,D
【知识点】光合作用综合
【解析】【解答】A、由图可知，随着时间的进行，氢气的含量是逐渐上升，此外氧气的相对含量逐渐降低最终趋于平缓，说明是由于光合作用产生的氧气与呼吸消耗的氧气趋于一致。最终使氧气的含量维持相对稳定的状态，且这是在二氧化碳充足的体系下，说明有光合作用的过程，存在氧气的释放，A错误；
B、致密菌-藻体组（产氢量高）与松散组（产氢量低）的结果对比，可以证实结构致密度影响产氢效率，B正确；
C、题干明确蛋白F在叶绿体基质而非类囊体膜催化H2生成，C错误；
D、根据图可知，培养至72h时，致密菌-藻体产生的氢气更多，且题干说任意时刻2体系之间的光反应速率无差异，说两个体系产生的NADPH含量相同，但致密菌-藻体更多的NADPH是用于氢气的产生，则用于合成有机物的就少，D错误。
故选ACD。
【分析】光合作用根据是否需要光能，可以概括地分为光反应和暗反应（碳反应）两个阶段：
1、光反应阶段是光合作用第一个阶段的化学反应，必须有光才能进行，这个阶段在类囊体的薄膜上进行的，发生水的光解、ATP和NADPH的生成。
2、暗反应阶段是光合作用第二个阶段中的化学反应，有没有光都能进行，这个阶段是在叶绿体的基质中进行的，发生CO2的固定和C3的还原，消耗ATP和NADPH ，最终生成糖类。
17．【答案】B
【知识点】基因的自由组合规律的实质及应用
【解析】【解答】A、根据遗传分析，基因型为MmNn的个体其亲本组合可能为M-N- × -m-n（如父本MMNN与母本mmnn）或M--n × -mN-（如父本MMnn与母本mmNN，或反之）。已知两对基因中一对为母体效应基因（其隐性纯合导致体节缺失），另一对无此效应，由于MmNn表现为体节缺失，表明其母体效应基因来自母本的隐性纯合状态（mm或nn），但现有信息无法确定具体是哪对基因（M/m或N/n）具有母体效应特性，A错误；
B、基因型为MmNN的个体其亲本组合可能为M-N- × -mN-。已知两对基因中一对为母体效应基因（其隐性纯合导致体节缺失），另一对无此效应，且MmNN为体节缺失，因此该基因型个体的体节缺失属于母体效应，也就是说母本母体效应基因是mm，则说明MmNN中的母体效应基因为M/m，B正确；
C、在遗传分析中，基因型为mmNN的个体其亲本组合应为-mN-×-mN-（即双方均携带mN配子）。已知两对基因中一对为母体效应基因（其隐性纯合导致体节缺失），另一对无此效应，且mmNN为体节缺失，如果该基因型个体的体节缺失属于母体效应，也就是说母本母体效应基因是mm，则说明mmNN中的母体效应基因为M/m，但是该个体NN是隐性纯合，所以无法确定其体节缺失属于母体效应，还是隐性纯合导致，C错误；
D、基因型为Mmnn，若M/m是母体效应基因，母本需为mm才符合体节缺失表现；若N/n是母体效应基因，母本需为nn才符合体节缺失表现，同时自身nn纯合也会导致体节缺失，所以无法确定其体节缺失属于母体效应，还是隐性纯合导致，D错误；
故选B。
【分析】1、母体效应遗传：母体效应基因的特性：子代表型由母本基因型决定，与自身基因型无关。识别特征是只有母本隐性纯合时子代才表现特定性状，与经典孟德尔遗传的区别。
2、基因互作类型：两对独立遗传基因（位于不同染色体）的共同影响。
18．【答案】B,D
【知识点】水盐平衡调节
【解析】【解答】A、醛固酮分泌过多会导致钠滞留和血容量增加，通常引起高容量性高钠血症或等容量性改变，而非低容量性低钠血症，A错误；
B、抗利尿激素（ADH）分泌过多会导致肾小管集合管重吸收水增加和稀释性低钠血症，通常表现为高容量性低钠血症，B正确；
C、等容量性低钠血症患者由于细胞外液渗透压降低，会抑制下丘脑的渴觉中枢，导致渴感减弱甚至消失，因此，患者通常不会更易产生渴感，反而可能减少饮水，C错误；
D、与患病前相比，低钠血症患者的细胞外液中总钠量可能增加，因为低钠血症的分类取决于血钠浓度和细胞外液量的变化，D正确。
故选BD。
【分析】1. 低钠血症的分类及病理生理机制
①低容量性低钠血症（低渗性脱水）：钠丢失 > 水丢失（如腹泻、利尿剂、Addison病）。
②等容量性低钠血症：水潴留为主，总钠量正常或轻度增加（如SIADH）。
③高容量性低钠血症：钠潴留 + 水潴留更多（如心衰、肝硬化、肾病综合征）。
2. 体液调节相关激素的作用
醛固酮：促进钠重吸收（保钠排钾），通常导致血容量增加（高容量状态），而非低容量性低钠血症。
抗利尿激素（ADH）：促进水重吸收，过量分泌（如SIADH）会导致等容量性低钠血症，而非高容量性。
19．【答案】A,C,D
【知识点】种群的特征；种群数量的变化曲线
【解析】【解答】A、在a点状态下，该动物种群的密度低于其临界密度m，且环境容纳量K值高于K0。因此，采取一次性投放适量个体的方式即可实现对a点种群的有效保护，A错误；
B、当处于b点时，种群密度尚未达到其环境容纳量K值对应的水平。在种群向稳定状态发展的过程中，个体数量呈现增长趋势，此时出生率明显高于死亡率，B正确；
C、c点状态下种群密度已超过其K值对应的密度水平。在种群趋向稳定的过程中，个体数量会逐渐减少，导致种内竞争压力相应降低，C错误；
D、d点情况下，种群密度高于临界密度m，但环境容纳量K值却低于K0，即使一次投放动物使当前密度暂时升高，但由于环境能维持的K值过低，种群最终仍会因无法超过临界密度而灭绝，D错误。
故选ACD。
【分析】在理想条件下，种群数量会实现快速的增长，其数学模型为：Nt= N0 λt，呈“J”形曲线。然而，由于资源和空间的限制，种群数量不可能无限增长。一定的环境条件所能维持的种群最大数量称为环境容纳量（K 值）。有的种群在数量快速增长到 K 值后能保持相对稳定，使种群增长呈“S”形曲线。
20．【答案】B,C
【知识点】细胞呼吸原理的应用；果酒果醋的制作；影响细胞呼吸的因素
【解析】【解答】A、酿酒酵母的最适生长温度一般在25~30℃，而堆积培养时温度可达60℃左右，这种高温环境更有利于筛选耐高温的微生物，而不是酿酒酵母，A错误；
B、大曲的主要功能是提供糖化所需的微生物，这些微生物（如霉菌、芽孢杆菌等）能分泌淀粉酶，将原料中的淀粉分解为可发酵性糖，B正确；
C、白酒窖池发酵属于厌氧发酵，酵母菌在缺氧条件下主要进行无氧呼吸（酒精发酵），产生乙醇和CO2，C正确；
D、酒变酸的主要原因是醋酸菌在有氧条件下将乙醇氧化为乙酸（醋酸），而非乳酸积累，D错误。
故选BC。
【分析】传统发酵工艺果酒、果醋、腐乳、泡菜的的制作比较
　 果酒 果醋 腐乳 泡菜
微生物 酵母菌 醋酸杆菌 主要是毛霉 乳酸杆菌
原理 酵母菌的无氧呼吸产生酒精 醋酸菌的有氧呼吸产生醋酸 豆腐中的蛋白质被分解成小分子的肽和氨基酸 乳酸菌无氧呼吸产生乳酸
反应条件 18~30 ℃，初期需氧，后期无氧 30~35℃，通入氧气 15～18℃接种，酒精含量控制在12％左右 常温，无氧条件

21．【答案】（1）磷脂双分子层；基粒
（2）H2O；丙酮酸、[H]；CO2、O2
（3）途径①以电能的方式耗散光能；途径①以热能的方式耗散光能
【知识点】细胞膜的流动镶嵌模型；光合作用的过程和意义；有氧呼吸的过程和意义
【解析】【解答】（1）叶绿体膜是生物膜的一种，其基本支架是磷脂双分子层；叶绿体增大膜面积的方式是由许多类囊体堆叠形成基粒，从而扩展了受光面积。
（2）从图示信息可知，在电子传递链中，NADPH所需的电子来源H2O的光解。
若用含3H2O的培养液培养绿藻，绿藻会同时进行光合作用和呼吸作用。在光合作用中，3H会进入葡萄糖分子，使其被标记。有氧呼吸第一阶段（细胞质基质）：被3H标记的葡萄糖在酶的作用下分解，生成被3H标记的丙酮酸、NADH（ [H] ），并释放少量能量；第二阶段（线粒体基质）：被3H标记的丙酮酸与3H2O反应，在酶的作用下生成CO2、被3H标记的NADH，并释放少量能量；因此，能够进入线粒体基质并带有3H标记的物质包括：H2O、丙酮酸、NADH。
若将绿藻离心收集后重新放入含 H218O 的培养液中，在光合作用光反应阶段，水分子光解会产生氧气（O2）；在呼吸作用第二阶段 H218O和丙酮酸反应生产二氧化碳，因此带有18O标记的气体是氧气和 CO2 。
（3）从图中可以看出，途径①涉及两个消耗光能的过程：ATP合酶催化合成ATP，这一过程需要光能驱动；NADPH的生成同样消耗光能，过剩的光能则通过电子传递链以电能的方式耗散。而途径②则显示，部分光能被Y、Z色素吸收后，并未用于光合作用的光化学反应，而是以热能形式散失。
【分析】1、光合作用根据是否需要光能，可以概括地分为光反应和暗反应（碳反应）两个阶段：
①光反应阶段是光合作用第一个阶段的化学反应，必须有光才能进行，这个阶段在类囊体的薄膜上进行的，发生水的光解、ATP和NADPH的生成。
②暗反应阶段是光合作用第二个阶段中的化学反应，有没有光都能进行，这个阶段是在叶绿体的基质中进行的，发生CO2的固定和C3的还原，消耗ATP和NADPH ，最终生成糖类。
2、有氧呼吸的全过程可以概括地分为三个阶段，每个阶段的化学反应都有相应的酶催化。第一个阶段是，1分子的葡萄糖分解成2分子的丙酮酸，产生少量的[H]，并且释放出少量的能量。这一阶段不需要氧的参与，是在细胞质基质中进行的。第二个阶段是，丙酮酸和水彻底分解成二氧化碳和[H]，并释放出少量的能量。这一阶段不需要氧直接参与，是在线粒体基质中进行的。第三个阶段是，上述两个阶段产生的[H]，经过一系列的化学反应，与氧结合形成水，同时释放出大量的能量。这一阶段需要氧的参与，是在线粒体内膜上进行的。
22．【答案】（1）符合；1/8
（2）AaaBb和aaabb；①；蓝花：白花=5：3
（3）染色体片段位置颠倒；aaBB 或 aaBb；F1/F2（或 R1/R2）
【知识点】基因的自由组合规律的实质及应用；PCR技术的基本操作和应用；减数分裂异常情况分析
【解析】【解答】（1）根据题目描述可知，基因型A_B_和aabb对应蓝花植株，基因型A_bb和aaB_对应白花植株。实验乙中F1自交产生的F2代呈现蓝花：白花=10：6的分离比，这一比例符合9：3：3：1的变式，说明等位基因A/a和B/b的遗传符合自由组合定律。
进一步分析表明，F1的基因型为AaBb，其自交后代F2的基因型分布为：1/16AABB（蓝）、2/16AaBB（蓝）、2/16AABb（蓝）、4/16AaBb（蓝）、1/16AAbb（白）、2/16Aabb（白）、1/16aaBB（白）、2/16aaBb（白）、1/16aabb（蓝）。由此可得，实验一F2代中蓝花植株纯合体（AABB和aabb）的总比例为2/16= 1/8 。
（2） 实验二中的F1三体蓝花植株的形成机制可能有以下几种情况：①减数第一次分裂异常：含A和a的同源染色体未正常分离，产生AaB型配子，与母本ab配子结合形成AaaBb三体蓝花植株。②减数第一次分裂正常，减数第二次分裂异常：含A的姐妹染色单体未正常分离，产生AAB型配子，与母本ab配子结合形成AAaBb三体蓝花植株。③减数第二次分裂异常：含a的姐妹染色单体未正常分离，产生aab型配子，与母本ab配子结合形成aaabb三体蓝花植株。综合以上情况均可能导致染色体数目变异，产生三体蓝花植株的3种可能的基因型为AAaBb、 AaaBb和aaabb。
三体蓝花植株基因型鉴定方法分析，1）若采用测交方法：AaaBb基因型测交，A/a基因分离，产生配子A：a：Aa：aa=1：2：2：1，测交后代含A个体与不含A个体比例为1：1，B/b基因测交结果为Bb：bb=1：1，最终蓝花：白花=1：1。AAaBb基因型测交，A/a基因分离产生配子A：a：AA：Aa=2：1：1：2，测交后代含A个体与不含A个体比例为5：1，B/b基因测交结果为Bb：bb=1：1，最终蓝花：白花=1：1，综上分析两种基因型测交结果相同，无法区分。2）自交方法分析：AaaBb基因型自交，A/a基因分离：配子A：a：Aa：aa=1：2：2：1，后代含A个体与不含A个体比例为3：1，B/b基因自交结果为BB：Bb：bb=1：2：1，最终蓝花：白花=5：3。AAaBb基因型自交，A/a基因分离配子A：a：AA：Aa=2：1：1：2
，后代含A个体与不含A个体比例为35：1，B/b基因自交结果为BB：Bb：bb=1：2：1，最终蓝花：白花=53：19；综上分析两种三体植株自交结果差异显著。最优鉴定方案应采用自交方案（即方案①）进行鉴定，则预期结果若蓝花：白花=5：3，则染色体不分离发生在减数分裂Ⅰ；若蓝花：白花≈53：19，则发生在减数分裂Ⅱ。
（3）染色体结构变异的类型主要包括缺失、重复、倒位和易位。通过分子检测分析，可以区分这些变异类型，变异类型鉴定原理是易位、缺失和重复会导致b基因和B基因的碱基序列长度发生变化，使用同一对引物扩增时，这些变异会产生不同长度的片段；若扩增产物长度相同，则可判定为倒位变异。甲植株（aaBB）使用任意一对针对B基因设计的引物都能成功扩增，电泳结果显示正常扩增条带，乙植株（AAbb）由于倒位变异导致B基因突变为b，使用F2R1引物对无法扩增出产物。F2代白花植株基因型可能为AAbb、Aabb、aaBB或aaBb；丙植株基因型使用F2R1引物扩增结果与甲相同，与乙不同，表明含有B基因，可能为aaBB或aaBb。倒位导致B基因突变为b基因，F2和R2对应的DNA片段发生倒位，F1R2引物对应同一条单链，F2R1引物对应同一条单链；因此丙植株基因型确认方法，可选引物对：F1F2引物：对应同一条单链或者R1R2引物：对应另一条单链。
【分析】根据题干信息分析，蓝色素的合成受两个独立代谢途径调控：途径①中，基因A和基因B分别编码将无色前体物质M转化为蓝色素所必需的酶A和酶B；途径②则涉及无色前体物质N合成蓝色素的过程。值得注意的是，只要存在酶A或酶B中的任意一种，就能完全抑制途径②的蓝色素合成。这种调控机制导致不同基因型表现出特定的表型：当基因型为双显性（A_B_）时，途径①正常运作产生蓝色素；当基因型为双隐性（aabb）时，虽然途径①无法进行，但由于缺乏酶A和酶B的抑制作用，途径②可以自发产生蓝色素，这两种情况均表现为蓝花。而当基因型为单显性（A_bb或aaB_）时，途径①因缺少一种关键酶而中断，同时存在的单一酶（A或B）又完全抑制了途径②，导致完全不能合成蓝色素，最终表现为白花。
23．【答案】（1）脑干；交感神经
（2）电；三者之间形成突触，神经递质只能由突触前膜释放，作用于心肌细胞膜受体
（3）中枢；向大鼠A注射药物X，测量注射前后大鼠的心率
【知识点】神经元各部分的结构和功能；突触的结构；神经冲动的产生和传导；神经系统的基本结构
【解析】【解答】（1）脑干是控制多种生命活动的重要中枢区域，其中包含调节呼吸和心血管功能的关键神经中枢，因此心血管活动的初级调控中枢位于脑干。当交感神经兴奋时，会引起血管收缩和心率加快；相反，副交感神经兴奋时，则会使心率减缓。如果血压突然升高，机体会通过神经调节机制使心率下降、血管扩张，从而使血压回降至正常水平。即此时交感神经的活性降低，而副交感神经的活性增强。
（2）在神经纤维上，兴奋以电信号的形式进行传导。因此，在血压调节过程中，无论是压力感受器还是化学感受器产生的兴奋，在传入神经上均以电信号的形式向前传递。传出神经末梢与心肌细胞之间形成突触，由于神经递质储存在突触前膜的突触小泡内，只能由突触前膜释放并作用于突触后膜上的受体，因此兴奋的传递方向是单向的，即神经递质只能从传出神经末梢传递至心肌细胞膜上的受体，而不能反向进行。
（3）药物X具有特异性升高血CO2浓度的作用，且不影响其他生理指标。当向大鼠B尾静脉注射药物X后，其血液CO2浓度上升。由于两只大鼠通过血液循环相连，且中枢化学感受器位于脑部，因此大鼠A能够感知其头部血液中CO2浓度的变化。若观察到大鼠A心率加快，即可证明中枢化学感受器参与了血CO2浓度对心率的调节。
为验证外周化学感受器是否参与CO2浓度对心率的调节，需在原有实验（步骤①、②）基础上增加操作：向大鼠A尾静脉注射药物X，使其血CO2浓度升高。由于大鼠A头部血液仅与大鼠B循环，而大鼠B血CO2浓度维持不变，故其中枢化学感受器不受影响。预期结果若大鼠A心率加快，表明外周化学感受器参与调节；若心率无变化，则说明外周化学感受器不参与调节。因此实验操作补充应为：向大鼠A注射药物X， 测量注射前后大鼠的心率 。
【分析】自主神经系统由交感神经和副交感神经两部分组成，它们的作用通常是相反的。当人体处于兴奋状态时，交感神经活动占据优势，心跳加快，支气管扩张，但胃肠的蠕动和消化腺的分泌活动减弱；而当人处于安静状态时，副交感神经活动则占据优势，此时，心跳减慢，但胃肠的蠕动和消化液的分泌会加强，有利于食物的消化和营养物质的吸收。交感神经和副交感神经对同一器官的作用，犹如汽车的油门和刹车，可以使机体对外界刺激作出更精确的反应，使机体更好地适应环境的变化。
24．【答案】（1）物种组成；密度
（2）不一定；两个群落的物种种类可能不同
（3）就地保护；提高
（4）C
【知识点】估算种群密度的方法；群落的结构；群落的主要类型；生物多样性的保护措施
【解析】【解答】（1）区分同一地域内不同生物群落的关键依据在于其物种组成，因为物种组成是决定群落特征的核心要素。在进行群落调查时，样方法不仅适用于统计植物物种丰富度，同样适用于测算植物种群的密度。
（2）群落物种丰富度是指该群落所包含的物种数量。当两个群落的物种数目相等时，我们称其物种丰富度相同；物种库指的是特定生态环境中能够生存的所有潜在物种。根据题目提供的信息，由于无法确定两个群落所处的生态环境是否一致，那么就无法确定两个群落的物种种类是否相同，所以这两个群落的物种库不一定相同。
（3）保护区的建立属于就地保护的重要措施。当原本缺失的物种自然迁入该群落，且该群落作为其唯一栖息地时，生态系统中的物种数量将会增加，这种物种丰富度的提升会导致营养结构趋于复杂化，从而提高该生态系统的抵抗力稳定性。
（4）评估群落完整性的一个重要指标是群落实际物种数与其潜在物种库的比值。因此，在比较荒漠和草原这两种受损生态系统的恢复成效时，群落完整性是最为适宜的评估标准，C正确，ABD错误，因此选C。
【分析】1、不同群落的物种组成不同， 物种的数目也有差别。一个群落中的物种数目，称为物种丰富度。
2、要认识一个群落，首先要分析该群落的物种组成。物种组成是区别不同群落的重要特征，也是决定群落性质最重要的因素。
25．【答案】（1）复制原点；XbaⅠ；DNA聚合酶；SpeⅠ、SmaⅠ；550
（2）4；连接成环(或环化)；测序和序列比对
（3）不能
【知识点】PCR技术的基本操作和应用；基因工程的基本工具（详细）；基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】（1）Ti质粒上与其在农杆菌中的复制能力相关的结构为复制原点。
根据SmaI限制酶的识别位点特征，该酶切割后会形成平末端结构。当质粒仅使用SmaI单酶切时，抗除草剂基因既可以正向插入也可以反向插入质粒，这两种连接方式难以区分。为了确保基因的正确方向，在构建重组质粒时需引入第二种限制酶，另一限制酶的选择需满足以下条件：识别位点必须位于启动子和终止子之间，不能破坏启动子、标记基因和终止子的完整性，由于BamHI会破坏终止子，而DNA聚合酶只能从5端到3端进行合成DNA来补平黏性末端，则不能选PstⅠ，故只能选用XbaⅠ进行酶切。用DNA聚合酶对产生的黏性末端进行补平处理。
利用DNA连接酶将酶切后的包含抗除草剂基因X的片段与酶切并补平的丁质粒进行连接，构建重组载体，转化大肠杆菌。重组的T-DNA片段上含有一个Smal酶切位点和一个Spel酶切位点，可以选择用Smal和Spel进行酶切。目的基因已经和质粒连接在一起形成了环状，如果是正向连接，那么目的基因转录的方向是从模板的3’——5’，和质粒对应的方向相同，经过两种酶的酶切后并电泳呈现一长短2条带，较短的条带长度近似为550bp；若反向接，较短的条带长度近似为200bp。
（2）在限制性内切酶的选择上，识别序列为4个碱基对的限制酶更为适合产生小片段DNA，这是由于较短的识别序列在DNA链上出现的频率更高，从而产生更多切割位点，最终获得更小的酶切片段。进行PCR扩增前，这些酶切产物需要先连接成环(或环化)才能与引物P1和P2匹配。需要注意的是，仅通过琼脂糖凝胶电泳观察片段长度无法确认基因序列的同一性，必须通过DNA测序和序列比对分析才能准确判定不同片段是否源自同一基因。
（3）转化是指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。如果检测到野生型基因，还需要检测基因是否正常表达，即还需考虑转录、翻译及基因互作等因素。并且如果是显性突变，那么即使插入野生型(隐性基因)无法恢复成野生型；如果是隐性突变，即使插入野生型(显性基因)，也无法确定，因为T-DNA的插入是随机的，可能无法正常表达等。因此仅检测到野生型基因的存在，尚不能完全确定植株表现为野生型表型。
【分析】基因工程技术的基本操作流程：
1、目的基因的筛选与获取：从已知结构的基因中进行筛选，然后可以从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样；导入植物细胞一般选用农杆菌转化法，导入动物细胞采用显微注射技术，导入微生物细胞用钙离子处理使其处于感受态。
4、目的基因的检测与鉴定。
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