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参考答案
参考答案
假期作业（一）
发酵工程
假期作业（二）
细胞工程
【有问必答·固双基】
【有问必答·固双基】
1.提示：异养厌氧型，C。H,O。·2C,H03十能量，广泛分
1.提示：细胞经分裂①分化后，仍然具有产生完整生物体
布于空气、上壤、植物体表、人或动物的肠道内，常见的
或分化成其他各种细胞的潜能。生物体的每个细胞都
乳酸菌有乳酸链球菌、乳酸杆菌，可用于乳制品的发酵
含有发育成该物种所需的全部基因
泡莱的腌制等
2.提示：物理法：电融合法、离心法等：化学法：聚乙二醇
2,提示：水、碳源、氨源、无机盐等营养物质。满足微生物
(PEG)融合法、高Ca+一高pH融合法等。
生长对PH、特殊营乔物质以及O2的需求。培东乳酸杆
3.提示：PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。灭
菌时，添加维生素：培养客茵时，调至酸性：培养细茵时，
活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力。
调至中性或弱碱性：培乔厌氧微生物时，捉供无氧条件。
4,提示：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上
3.提示：当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的
的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白
只有一个菌落，因此统计结果一般用茵落数而不是用活
质分子和脂质分子重斯排布，细胞膜打开，如胞发生
菌数表示。统计的菌落数往往比活菌的实际数目少
融合
4.提示：一般选用1×10、1×10、1×10°倍稀释的稀释液
5.提示：实际上是体外条件下，对动物自然受精和早期胚
进行平板培养；第一次实险可以将1×10~1×10倍稀
胎发育条件进行的模拟操作，前捉是了解哺乳动物受精
释的稀释液进行平板培养
和早期胚胎发育的规律。
5,提示：可以增加食品的营养，改善食品的口味、色译和品
【厚积薄发·勤演练】
质，有时还可以延长食品的保质期。
1.A 2.D 3.C 4.D 5.ABD 6.ABD
【厚积薄发·勤演练】
7,解析：(1)由克隆华南虎的过程可知，华南虎A提供细胞
1.A2.A3.C4.B5.AB6.AC
核，普道虎B提供细胞质，所以克隆虎D的遗传性状与
7.解析：(1)图中步骤①对牛奶的消毒方法是巴氏消毒，適
供核的A更接近，即相当于克隆了A。(2)老虎C只提
方法既可以杀灭牛奶中的微生物，又可以使牛奶中的营
供胚胎发育的场所，没有提供造传物质给D。(3)核移植
养成分不会被破坏。对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭
常用高压蒸汽灭菌法，蛋白胨含多种有机物，能为微生
过程没有经过两性生殖细胞的结合，属于无性生殖，没
有减数分裂方式的出现，不遵循孟德尔遗传定律。
4
物提供碳源、氨源、雏生素等。(2)步骤②将牛奶进行梯
度稀释的目的是使聚集在一起的微生物分散，便于能在
高度分化的动物细胞全能性受到限制，因此无论是高度
培养基袁面形成单个菌落。
分化的动物体细胞，还是不同种动物体细胞融合后的杂
步骤③的接种方法是稀
释
涂布平板法，这种方法可以用来统计样品中活菌的
数
交细胞，经细胞培养只会发生细胞增殖，不会发生细胞
目，其原理是样品稀释度足够高时，稀释液中的
分化，形成不了个体，动物体细胞的全能性无法体现
个
蔺可在平板上长出一个单菌落，通过统计平板上的茵
答案：(1)A(2)老虎C(3)不遵循。克隆属于无性生
数就能推测出样品中大约含有多少活茵
殖，而孟德尔的遗传定律仅在有性生殖的诚数分裂过程
(3)由于来接
种的
平板上也有菌落，说明培乔基灭苗不合格，则其
他
中起作用(4)不能高度分化的动物细胞全能性受到
培养
基上的菌落数不能袁示牛奶中细菌数量，故不能由
限制，虎和牛体细胞杂交后得到的杂交细胞不能正常发
上述平板上菌落数判断消毒后的牛奶细菌是否超标
有成完整个体
(4)伊红美蓝可使大肠杆茵的菌落呈现黑色，所以要检
【个性飞扬·培素养】
测牛奶中是否含有大肠杆菌，需要在培养基中加入伊红
8,解析：(1)细胞培养肉是利用动物干细咆培养出的动物
关蓝，观察是否出现黑（蓝黑）色的菌落
组织，生产细胞培养肉采用的细胞工程技术是动物细胞
答案：(1)巴氏消毒
高压蒸汽灭菌法
提供碳源、氮源
培养，干细胞分裂能力强，经赫导能分化为特定的组织，
等(2)单个菊落稀释涂布平板法
当样品的稀释度
所以初始细胞来源选择干细胞。(2)启动子是RNA聚
足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀
合酶的结合位，点，可启动LG一Hs融合基因的转录
释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数就能推
pPIC9K载体上还需插入启动子。(3)大肠杆菌为原核
测出样品中大约含有多少活菌(3)不能因为未接种
细胞，酵母菌为真核细胞，相比大肠杆菌，酵母菌细胞具
的培养基上有菌落出现，说明培养基灭菌不彻底，则其
有内质网、高尔基体，能够对豆血红蛋白进行翻译后修
他培养基上的菌落数不能表示牛奶中细菌数量(4)伊
饰。极据题意可知，将ICG一Hs整合到分泌型载体
红美蓝
PIC9K上，说明目的基因产物会分泌到细胞外，对筛选
【个性飞扬·培素养】
的阳性酵母菌进行扩大培养，一段时间后进行离心，取
8.解析：(1)衣中培养基不含有琼脂等凝固剂，所以属于液
上清液以获得豆血红蛋白。(4)利用Hs标签的袁达产
体培乔基。为防止杂菌污来，需要将操作的双手清洗并
物与镍离子的亲和性分离出豆血红蛋白，所以Hs的标
消毒。(2》纤雏素分解菌鉴定的方法是刚果红染色法，
签作用是Hs标签表达产物易与镍离子结合，便于对豆
其原里是：刚果红与纤雏素反应形成红色复合物，纤雏
血红蛋白分离纯化。故远D。(5)来自大正液泡内的豆
素分解茵能够分解纤维素，园此纤雏素分解茵周国会形
血红蛋白在烹任过程中会释放血红素辅因子，为确定添
成透明圈，且分解能力越强透明图燧大，图中E菌落透
加了豆血红蛋白的植物蛋白肉是否能够产生丰富的血
明圈最大，所以分解纤雏素能力最强
,(3)图1的接种方
红素捕因子且具有动物肉相似的口惑，可分别检测并比
法菌落分布均匀，接种方法是稀释涂布平板法，而图2是
较添加豆血红蛋白的植物蛋白肉和动物肉所产生的血
平板划线法。每次划线前后都需要灼烧接种环，图2
红素辅因子的含量，并比较二者的口感。(6)生态学上
共划线4个区城，所以需要灼烧接种环5次。(4)5g
土
将维持人类生存所需的生产资源和吸纳废物的土地及
策溶于45mL无菌水，相当于1mL含有0.1g,所以稀
水域的面积称为生态足迹，与生产传统肉类相比，生户
释了10倍，根据菌落数目的计算公式每克土壤中活菌数
人造肉会消耗更少的土地等自然资源，生产人造肉比生
釣为(C÷V)×M=(158+156十160)÷3÷0.1×10×
产传统肉类减少釣87%的温室气体排放量，减少的温室
10=1.58×10°个！/g:如果统计的数目太少，可能的原因
气体来源包括图养动物的饲料来源
一植物的呼吸作
有涂布器灼烧后未冷却即涂布，高温下纤雏素分解菌被烫
用释放的CO(图养动物的呼吸作用释放的CO2,土城效
死：培养液来摇匀即取样，样品中纤雏素分解菌过少
生物分解作用释放的C)。)
答案：(1)液体（酒精）消毒(2)E果红与纤维素
答案：(1)动物细胞培养
干细胞具有较强的分裂、分化
反应形成红色复合物，纤维素分解菊能够分解纤维素
能力(2)转录RNA聚合酶(3)内质网和高尔基体
因此纤维素分解菌周围会形成透明圈，且分解能力越强
上清液，(4)D(5)分别检测并比较添加豆血红蛋白
透明圈越大(3)稀释涂布平板法平板划线法
的植物蛋白肉和动物肉所产生的血红素辅因子的含量
(4)1.58×10涂布器灼烧后未冷却即涂布，高温下纤
并比较二者的口感(6)生态足迹（生态占用）、圈养动物
维素分解菌被烫死：培养液未摇匀即取样，样品中纤维
的饲料来源一植物的呼吸作用释放的C),(圈养动物的
素分解菌过少（其他答案合理即可）
呼吸作用释放的CO,土壤微生物分解作用释放的CO,)
39假期作业（三）
相比传统畜牧业，生产人造肉能够节
A.His标签与LG融合，可以促进LG表达
省约75%的用水，减少约87%的温室气体
产生更多的豆血红蛋白
排放量，减少约95%的土地占用量。人造
B.Hs标签作为标记基因，便于筛选含有表
肉在满足日益增长的肉类需求的同时，也
达载体的阳性酵母菌
有望成为环境保护问题的一个解决方案。
C.His标签与LG融合，利于引导豆血红蛋
(1)生产细胞培养肉采用的细胞工程技术
白分泌到酵母菌细胞外
是
,初始细胞来源选择
D.His标签表达产物易与镍离子结合，便
干细胞的原因是
于对豆血红蛋白分离纯化
(5)为确定添加了豆血红蛋白的植物蛋白
(2)为确保LG一His融合基因
过
肉是否能够产生丰富的血红素辅因子且具
程的启动，pPIC9K载体上还需插人启动
有动物肉相似的口感，还需要进一步的实
子，它是
的结合位点。
验。请写出实验思路：
(3)相比大肠杆菌，酵母菌细胞具有
,能够对豆血红蛋白进行翻译
(6)与生产传统肉类相比，生产人造肉会消
后修饰。对筛选的阳性酵母菌进行扩大培
耗更少的土地等自然资源，生态学上将维
养，一段时间后进行离心，取
(填
持人类生存所需的生产资源和吸纳废物的
“上清液”或“菌体”)以获得豆血红蛋白。
土地及水域的面积称为
生产人
(4)在豆血红蛋白的制备过程中，His标签
造肉比生产传统肉类减少约87%的温室气
起到了重要作用，对Hs标签作用的理解，
体排放量，减少的温室气体来源包括
正确的叙述是
(请列举两点)。
假期作业（三）
基因工程
摘要
3.在凝胶中DNA分子的迁移速率与什么有
1.掌握基因工程的原理及技术。
关？怎样检测出来？
2.举例说出基因工程的应用。
3.简述蛋白质工程的原理及基本程序。
>》有问必答
·固双基
《(((
1.基因工程的基本操作程序？
4.科学家怎样对猪的器官进行改造，以解决
人类器官移植的来源问题？
5.蛋白质工程的基础、手段及目的？
2.花粉管通道法的操作方式？
高二生物
C.复性温度的高低会影响PCR扩增产物
>》典例精析·拓思维
<(
的纯度
【例】关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下
D.58℃是本实验中扩增该基因的最佳复
列说法错误的是
r
性温度
A.过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为
3.注射胰岛素是治疗Ⅱ型糖尿病的主要手
了防止DNA降解
段。下图是利用基因工程生产人胰岛素的
B.离心研磨液是为了加速DNA的沉淀
操作示意图，下列叙述错误的是
C.在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂呈现
重复进行位
蓝色
O巴Mgm.统A④风州大￥
快岛发
八入八八
风A的4
D.粗提取的DNA中可能含有蛋白质
细1
mRNA
解析：低温时DNA酶的活性较低，过滤液
段国人庞
④-@2Om'
巴国品森
沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止
人肠杆闲
D`出@·女映
岛紊
DNA降解，A正确；离心研磨液是为了使
A.通过过程⑤的重复进行，可以短时间内
细胞碎片沉淀，B错误；在沸水浴条件下，
获得大量的胰岛素基因
DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色，C正确；细胞
B.以细胞1中提取的mRNA为模板，也可
中的某些蛋白质可以溶解于酒精，可能有
扩增出胰高血糖素的基因
蛋白质不溶于酒精，在95%的冷酒精中与
C.过程⑦将目的基因与基因载体相连，这
DNA一块儿析出，故粗提取的DNA中可
是基因工程的核心步骤
能含有蛋白质，D正确。故选B。
D.C中往往含有标记基因，便于筛选含有
答案：B
胰岛素基因的受体细胞
4.影印培养法是工程菌筛选的一种常用方
>>》
厚积薄发
·勤演练
(((
法，基本过程是：把长有许多菌落的培养皿
一、单项选择题
倒置于包有灭菌丝绒布的木圆柱（直径略
1.下列有关基因工程中限制酶的描述，正确
小于培养皿)上，然后把“印章”上的细菌接
的是
种到不同的选择性培养基平板上培养，对
A.一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核
各皿相同位置上的菌落作对比，就可选出
苷酸
适当的工程菌。图1是将人生长激素基因
B.限制酶是某些原核生物的自我保护机制
导人细菌B制造工程菌示意图，影印培养
C.限制酶与DNA连接酶的作用部位不相同
法筛选结果如图2所示，其中数字表示不
D.限制酶只能从原核生物中提取
同的菌落。下列说法错误的是
2.为优化目的基因(700bp)的PCR条件，研
人生长激牵型因
抗四师茅拉
究者设计不同的复性温度进行实验，产物
结合
二抗数节青霉闪
的琼脂糖凝胶电泳结果如下图。据图分
纽
析，下列表述错误的是
质粒
培养工程
阴性
分子量
图1
对胝50℃52℃55"℃58℃进
些白哈养
4
2(XHp
1(NMbp
●
●
非将异条带
将异条带
75U
培养基叩
挤养基乙
500hp
图2
250bp
A.培养基甲中必须含有氨苄青霉素
100p
B.培养基乙中必须含有四环素
A,对照组可用无菌蒸馏水代替模板，其他
C.切割质粒A和人生长激素基因的限制酶
成分相同
必须是同种酶
B.电泳条带的宽度，亮度与扩增产物大小
D.继续培养筛选工程菌必须挑取培养基甲
呈正相关
中的菌落1和4
8

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