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湖北省武汉市新洲一中阳逻校区高二（下）期末生物试卷
一、单选题：本大题共18小题，共36分。
1.科研人员在小鼠肠道中分离出了一种细菌——溶木聚糖拟杆菌，该菌生活在肠道内，进行无氧呼吸，可产生分解尼古丁的酶，降低脂肪肝的发病率。下列叙述正确的是（　　）
A. 该菌的遗传物质和小鼠一样主要是DNA，体现了生物的统一性
B. 该菌的生物膜系统比小鼠简单，但是组成生物膜的成分相似
C. 该菌需要利用小鼠细胞内的核糖体才能合成分解尼古丁的酶
D. 该菌进行酶的合成时所消耗的能量只能来自该菌的细胞质基质
2.已知①酶、②抗体、③激素、④糖原、⑤脂肪、⑥核酸都是人体内有重要作用的物质。下列说法错误的是（　　）
A. ①②⑥都是由含氮的单体连接成的多聚体
B. ②中的N主要分布在氨基中
C. 同等质量的⑤比④氧化分解释放的能量更多
D. 人体细胞中的⑥彻底水解后可得到8种产物
3.胆固醇等脂质被单层磷脂包裹形成球形复合物，通过血液运输到细胞并被胞吞，形成的囊泡与溶酶体融合后，释放胆固醇。下列推测不合理的是（　　）
A. 磷脂分子头部亲水，因而头部位于球形复合物表面
B. 球形复合物被胞吞的过程，需要某种膜蛋白的参与
C. 胞吞形成的囊泡与溶酶体融合，依赖于膜的流动性
D. 胆固醇通过胞吞进入细胞，因而属于生物大分子
4.细胞中存在多种蛋白质的复合物，如核酸—蛋白质复合物、糖—蛋白质复合物等。下列叙述不合理的是（　　）
A. 真核细胞的染色质或染色体中都存在核酸—蛋白质复合物
B. 原核细胞中没有核酸—蛋白质复合物，但有糖—蛋白复合物
C. 细胞膜上的糖—蛋白质复合物与细胞表面的识别和信息交流有关
D. 细胞膜上还可能存在离子—蛋白质复合物等其他形式的复合物
5.定位在内质网腔的可溶性蛋白（如蛋白二硫键异构酶）均具有一段典型的KDEL信号序列，高尔基体膜上的KDEL受体可识别并结合该信号序列，介导这些逃逸到高尔基体的蛋白质再次回到内质网的过程。下列说法错误的是（　　）
A. 抗体、葡萄糖转运蛋白不含有KDEL信号序列
B. 蛋白二硫键异构酶可能参与内质网中多肽链的初步加工
C. 逃逸的蛋白质在高尔基体中通过出芽产生囊泡，被运回内质网
D. 形成溶酶体的囊泡中可以检测到含有KDEL信号序列的蛋白质
6.施一公团队解析了来自非洲爪蟾核孔复合物（NPC）的近原子分辨率结构，取得了突破性进展。通过电镜观察到NPC附着并稳定融合在与细胞核核膜高度弯曲的部分上。下列叙述正确的是（　　）
A. 细胞核是细胞遗传和代谢的中心，是遗传信息库
B. 核膜的外膜常附着核糖体且与内质网连在一起
C. 核仁与rRNA的合成有关，所有生物核糖体的形成都离不开核仁
D. NPC保证了细胞核与细胞质间的蛋白质、DNA、RNA等大分子物质的进出
7.下列关于“观察洋葱表皮细胞质壁分离及质壁分离复原”的实验叙述正确的是（　　）
A. 在质壁分离过程中，水分子只能从液泡内移动到细胞膜外
B. 若改用内表皮细胞进行实验，应将显微镜视野的亮度调亮
C. 质壁分离复原后，细胞液渗透压和外界溶液渗透压相等
D. 当外界溶液的溶质能通过原生质层时，质壁分离后的细胞可能自动复原
8.如图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是（　　）
A. 对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行消毒处理
B. 步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置
C. 步骤②应多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后各划线区均出现单个菌落
D. 步骤③划线结束后在培养皿盖上做好标注
9.我们的祖先们用一些坛坛罐罐，与微生物携手让食物转化出了新风味并对营养进行了升华。下列与发酵相关的叙述，错误的是（　　）
A. 利用酵母菌的发酵可以用来酿制红酒、白酒、黄酒等产品
B. 制作泡菜时加入的“老汤”中含有纯度较高的乳酸菌可加速发酵进程
C. 制作腐乳时，原料豆腐的发酵不是纯种发酵，主要菌种毛霉属于真核生物
D. 发酵用的坛坛罐罐都应有盖且密封性强，可避免O2进入坛内影响发酵过程
10.丙草胺（C17H26ClNO2）是一种广泛应用的除草剂。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数，如图所示，以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列有关叙述错误的是（　　）
A. 实验过程中应避免已灭菌处理的土壤与周围物品接触
B. 以丙草胺为唯一氮源配制的培养基属于选择培养基
C. 依据实验结果计算出每克土壤中的菌株数约为1.7×109个
D. 利用稀释涂布平板法得到的结果往往比实际活菌数要低
11.研究发现，雪莲次生代谢物对急性酒精肝损伤具有较好的防治作用。研究人员利用雪莲茎尖作为外植体，诱导其形成愈伤组织，然后对愈伤组织进行处理以形成单细胞或小细胞团，并进行悬浮培养，从细胞培养物中收集提取出相关次生代谢物。下列相关叙述错误的是（　　）
A. 悬浮培养时一般使用液体培养基，所用到的技术是植物细胞培养
B. 从雪莲中提取的次生代谢物可能是雪莲生长所必需的一类小分子有机物
C. 上述愈伤组织也可以被诱导形成脱毒苗
D. 经射线或化学物质处理愈伤组织后可能获得雪莲培养物高产的细胞
12.某动物细胞培养过程中，细胞贴壁生长至接触抑制时，需分装培养，实验操作过程如图。下列叙述错误的是（　　）
A. ①加入的消化液中的胃蛋白酶，能使细胞与瓶壁分离
B. ②培养液中通常含有糖类、维生素、激素等多种物质和血清等天然成分
C. ②吸除消化液，加培养液的目的是终止消化作用并对细胞进行稀释
D. 图中所示过程为传代培养，需要提供提供95%空气和5%CO2的混合气体环境
13.人RecQ解旋酶可作为新的白血病和乳腺癌肿瘤干细胞标志物。利用杂交瘤细胞制备抗RecQ解旋酶单克隆抗体，流程如图所示。下列叙述错误的是（　　）
A. ①过程应向实验小鼠注射RecQ解旋酶使小鼠产生免疫反应
B. ②过程应从该小鼠的脾脏中获取B淋巴细胞
C. ⑤过程在利用96孔板筛选杂交瘤细胞时，需要稀释至每孔最多1个细胞
D. 将能产生抗体的杂交瘤细胞Ⅱ注入小鼠体内，从血浆中大量分离抗体
14.杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，已成为受广大消费者喜欢的绵羊品种。科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊。下列叙述正确的是（　　）
A. 生产中对提供卵母细胞的雌性杜泊羊不需要筛选
B. 采集来的优良雄性杜泊羊精子可直接用于体外受精
C. 当地普通品质的健康波尔母山羊不适合作为胚胎受体
D. 胚胎移植前要对供、受体进行免疫检查，以免发生免疫排斥反应
15.关于“DNA的粗提取与鉴定”实验和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验，下列叙述正确的是（　　）
A. DNA粗提取时，离心研磨液是为了加速DNA的沉淀
B. 提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后即可变为蓝色
C. 凝胶电泳时，DNA分子越大，迁移速率越快
D. 电泳鉴定时，如果扩增结果不止一条条带可能是因为引物设计过短、退火温度过低等原因
16.质粒K中含有β-半乳糖苷酶基因，将该质粒导入大肠杆菌细胞后，其编码的酶可分解X-gal,产生蓝色物质，进而形成蓝色菌落，如图所示。科研小组以该质粒作为载体。采用基因工程技术实现人源干扰素基因在大肠杆菌中的高效表达。下列叙述错误的是（　　）
A. 使用氯化钙处理大肠杆菌以提高转化效率，可增加筛选平板上白色和蓝色菌落数
B. 如果筛选平板中仅含卡那霉素，生长出的白色菌落不可判定为含目的基因的菌株
C. 因质粒K中含两个标记基因，筛选平板中长出的白色菌落即为表达目标蛋白的菌株
D. 若筛选平板中蓝色菌落偏多，原因可能是质粒K经酶切后自身环化并导入了大肠杆菌
17.促红细胞生成素能有效促进红细胞的产生、提升血液携氧能力。第一代重组人促红细胞生成素（rhEPO）的部分流程如图所示。第二代rhEPO的生产通过改造第一代rhEPO的5个氨基酸位点，增加2个糖基化位点，使其稳定性大大提升。下列叙述错误的是（　　）
A. ①需设计一对特异性引物，③利用显微注射技术
B. ②是基因工程的核心，原理是基因重组
C. 用大肠杆菌代替CHO，经筛选后可更高效的量产高活性rhEPO
D. 第二代rhEPO的生产运用了蛋白质工程技术，本质是改造基因
18.如图是培育“试管婴儿”的主要过程。2012年中国首例“设计试管婴儿”诞生，该女婴出生的目的是挽救患有重度致命贫血病的14岁姐姐。下列叙述错误的是（　　）
A. “设计试管婴儿”与“试管婴儿”不同的是需在③时进行遗传学诊断
B. “试管婴儿”与“设计试管婴儿”均需要符合国家相关规定
C. 若该女婴健康长大，她的造血干细胞也可能挽救其他贫血病患者
D. “设计试管婴儿”的技术不属于“治疗性克隆”，“试管婴儿”与“设计试管婴儿”均属有性生殖
二、识图作答题：本大题共4小题，共64分。
19.柽柳根部通过“排盐—隔离—耐受”多策略协同，成为盐碱环境中的先锋植物，对全球盐渍化治理具有重要意义。如图是柽柳根部细胞参与抗盐胁迫过程图（SOS1和NHX均为膜上的反向转运蛋白），回答下列问题：
（1）据图分析，图示各结构中H+浓度分布存在差异，该差异主要由位于 ______上的H+-ATP泵转运H+来维持。H+-ATP泵在转运H+时，其构象 ______（填“发生”或“不发生”）改变。
（2）柽柳“排盐”主要依赖逆向转运蛋白SOS1，它对H+和Na+的运输方式分别是 ______、______。“隔离”是指通过NHX将Na+储存在液泡中，若使用ATP抑制剂处理细胞，Na+的储存量 ______（填“增加”、“不变”或“减少”），原因是 ______。
（3）脯氨酸是植物细胞内水溶性最大的氨基酸。研究表明，盐胁迫会使柽柳细胞内脯氨酸的含量升高，其意义是 ______，增强细胞在盐胁迫下的吸水能力。
20.不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。已知X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如图所示。请回答下列问题：
（1）过程①科研人员剥离红豆杉和柴胡种子的胚作为外植体经 ______后接种于MS培养基上，诱导形成愈伤组织。
（2）过程②常用 ______酶去除细胞壁，获得原生质体。对红豆杉和柴胡的原生质体进行的A、B处理分别为 ______、______。
（3）与诱导动物细胞融合相比，③过程不宜采用的诱导方法是 ______。经诱导融合后，只有异源融合细胞可持续分裂形成再生细胞团，原因是异源融合细胞 ______。
（4）与过程①相比，过程④需在 ______条件下进行。
21.异体器官移植是替代器官功能的有效途径，因器官严重短缺而受到限制，科学家试图通过异种体内培育人源化器官来解决器官供体短缺难题，但此前从未成功。我国科学家综合利用多种现代生物技术，首次在猪胚胎内培育出主要由人体细胞构成的“人—猪嵌合中期肾”，且维持到胚胎第28天（实验过程如图1），成功实现了首例人源化中肾的异种体内再生壮举。请回答下列问题：
（1）图1过程①通常选用卵母细胞作为受体细胞，除了卵母细胞体积大、易操作、营养物质含量高外，还因为它含有 ______。过程②前需将采集到的卵母细胞培养至 ______期。
（2）图1过程④采用CRISPR-Cas9基因编辑技术（见图2，Cas9蛋白在向导RNA引导下，切割目标DNA双链），敲除掉与猪肾脏发育密切相关的关键基因SLX1，为后续人iPS细胞的生长和分化提供更合适的生存环境。下列对于该过程的分析，正确的有 ______。
A.向导RNA的部分序列是根据SIX1基因设计的，其双链区遵循碱基互补配对原则
B.有时向导RNA会因错误结合而出现“脱靶”现象，一般向导RNA序列越短，脱靶率越低
C.Cas9蛋白识别并切割SIX1基因特定位点的磷酸二酯键，作用方式与限制酶相同
D.敲除SIX1基因的猪胚胎可避免猪细胞与人iPS细胞竞争肾脏发育的环境
（3）图1过程⑥需要采用物理或化学方法 ______重构胚，使其完成细胞分裂和发育过程。过程⑧中，选用iPS细胞作为肾脏供体细胞的原因是 ______。在早期胚胎阶段，猪胚胎的细胞尚未分化，细胞之间的连接较松散，这使得导入的人iPS细胞较容易在猪胚胎中整合，胚胎的可塑性也较强，据此判断在构建嵌合胚胎过程中，可在猪胚胎发育至 ______（填“桑葚胚”或“囊胚”）期注射人源供体细胞。
22.马铃薯作为重要农作物，提高其冷耐受性可拓展优质马铃薯的种植区域。我国科研人员发现，野生马铃薯中S基因的表达与其冷耐受性调控有关，将该基因导入栽培马铃薯中可显著增强其抗寒能力。回答下列问题。
限制酶 识别序列及切割位点
BglⅡ 5′-A↓GATCT-3′
3′-TCTAG↑A-5′
NdeⅠ 5′-CA↓TATG-3′
3′-GTAT↑AC-5′
XhoⅠ 5′-C↓TCGAG-3′
3′-GAGCT↑C-5′
EcoRⅠ 5′-G↓AATTC-3′
3′-CTTAA↑G-5′
BamHⅠ 5′-G↓GATCC-3′
3′-CCTAG↑G-5′
SalⅠ 5′-G↓TCGAC-3′
3′-CAGCT↑G-5′
XbaⅠ 5′-T↓CTAGA-3′
3′AGATC↑T-5′
（1）PCR扩增目的基因时，需要模板DNA、引物、______、含Mg2+的缓冲液和耐高温的DNA聚合酶。DNA聚合酶在PCR的 ______步骤中起作用。
（2）图中标识了载体和S基因中限制酶的切割位点。为将S基因正确插入载体，PCR扩增S基因时需在引物的 ______（填“5′端”或“3′端”）添加限制酶识别序列，结合上表分析，上游引物应添加的碱基序列是5′-______-3′，切割载体时应选用的两种限制酶是 ______。PCR扩增产物和载体分别被限制酶切割后，经纯化和连接，获得含S基因的表达载体并导入农杆菌。
（3）用携带S基因的农杆菌侵染栽培马铃薯愈伤组织时，基因表达载体中T-DNA进入愈伤组织细胞，将S基因整合到 ______，抗性基因 ______可用于筛选成功转化的愈伤组织。该愈伤组织经 ______形成芽、根，继续培育可获得抗寒能力显著增强的马铃薯植株。
答案和解析
1.【答案】D
【解析】解：A、溶木聚糖拟杆菌属于原核生物，其遗传物质是DNA，小鼠的遗传物质也是DNA，体现了生物的统一性，A错误；
B、原核生物不具有生物膜系统，B错误；
C、溶木聚糖拟杆菌有核糖体，可自主合成蛋白质，不需要利用小鼠细胞内的核糖体，C错误；
D、该菌生活在肠道中，进行无氧呼吸，合成酶时需要的能量只能来自细胞质基质，D正确。
故选：D。
溶木聚糖拟杆菌属于原核生物，其遗传物质都是DNA，没有以核膜为界限的细胞核。
本题考查真核生物和原核生物的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点、把握知识间内在联系、形成知识网络的能力。
2.【答案】B
【解析】解：A、酶的化学本质是蛋白质或RNA，抗体的化学本质是蛋白质，核酸包括DNA和RNA，所以①②⑥都是由含氮的单体连接成的多聚体，A正确；
B、抗体的化学本质是蛋白质，蛋白质中的N主要分布在-CO-NH-中，不是氨基中，B错误；
C、与糖类相比，脂肪分子中C、H的含量比糖原更多（氧含量更少），故相同质量的脂肪比糖原氧化分解释放的能量更多，C正确；
D、核酸有DNA和RNA两大类，彻底水解可得到A、C、G、T、U五种碱基，2种五碳糖（核糖和脱氧核糖），还有磷酸，共8种产物，D正确。
故选：B。
1、酶是活细胞合成的具有催化作用的有机物，大多数酶是蛋白质，少数酶是RNA。
2、核酸是一切生物的遗传物质。有细胞结构的生物含有DNA和RNA两种核酸，但其细胞核遗传物质和细胞质遗传物质都是DNA。
3、动物体内激素的化学成分不完全相同，有的属于蛋白质类，有的属于脂质，有的属于氨基酸衍生物。
本题考查细胞中化合物的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
3.【答案】D
【解析】解：A、磷脂分子头部亲水，尾部疏水，所以头部位于复合物表面，A正确；
B、球形复合物被胞吞的过程，依赖于细胞膜的流动性，故需要某种膜蛋白的参与，B正确；
C、胞吞形成的囊泡（单层膜）能与溶酶体融合，依赖于膜具有一定的流动性，C正确；
D、胆固醇属于固醇类物质，是小分子物质，D错误。
故选：D。
溶酶体中含有多种水解酶（水解酶的本质是蛋白质），能够分解很多物质以及衰老、损伤的细胞器，清除侵入细胞的病毒或病菌，被比喻为细胞内的“酶仓库”“消化车间”。
本题考查了细胞器的结构和功能，考查考生对题干信息的提取和利用能力，难度适中。
4.【答案】B
【解析】解：A、染色体主要成分是DNA和蛋白质，故真核细胞的染色质或染色体中都存在核酸—蛋白质复合物，A正确；
B、原核细胞中有核酸-蛋白质复合物，如DNA复制时DNA聚合酶与DNA的结合，如核糖体是由rRNA和蛋白质组成的，B错误；
C、细胞膜外表面上存在糖—蛋白质复合物，可通过该特征判断细胞膜的内外侧，该物质与细胞表面的识别和信息交流有关，C正确；
D、细胞膜上可能存在离子-蛋白质复合物等其他形式的蛋白质复合物，形成物质运输的载体蛋白，D正确。
故选：B。
蛋白质结构具有多样性，功能也具有多样性，蛋白质可与DNA结合形成染色体，DNA聚合酶和RNA聚合酶的本质是蛋白质，可以与DNA结合分别催化DNA的复制和转录过程。细胞膜上的蛋白质可与糖类结合形成糖蛋白，糖蛋白具有识别、保护和润滑的作用。
本题考查细胞膜、真核细胞和原核细胞的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，学生具备运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
5.【答案】D
【解析】解：A、抗体和葡萄糖转运蛋白是两种典型的膜蛋白，它们主要位于细胞膜上，而不是定位在内质网腔内。A正确；
B、蛋白二硫键异构酶是定位在内质网腔的可溶性蛋白，内质网的功能是对多肽链进行初步加工，B正确；
C、高尔基体膜上的KDEL受体可识别并结合该信号序列，介导这些逃逸到高尔基体的蛋白质再次回到内质网的过程。C正确；
D、定位在内质网腔的可溶性蛋白均具有KDEL信号序列，而溶酶体起源于高尔基体，不含有KDEL信号序列，D错误。
故选：D。
分泌蛋白的合成和运输依次经过核糖体、内质网、高尔基体和细胞膜，整个过程需要线粒体提供能量。
本题考查细胞器的相关知识，要求考生识记细胞中各种细胞器的结构、分布和功能，掌握分泌蛋白合成与分泌过程，能结合所学的知识准确答题。
6.【答案】B
【解析】解：A、细胞核是细胞遗传和代谢的控制中心，是遗传信息库，A错误；
B、核膜为双层膜结构，核膜的外膜常附着核糖体且与内质网连在一起，B正确；
C、核仁与某些RNA的合成以及核糖体的形成有关，但原核生物无核仁也可以合成核糖体，说明核糖体的形成不是离不开核仁，C错误；
D、NPC（是蛋白质）、RNA等大分子进出细胞核的通道，而DNA不能通过，D错误。
故选：B。
细胞核包括：核膜（双层膜，上面有孔是蛋白质和RNA通过的地方）、核仁（与某些RNA的合成以及核糖体的形成有关）、染色质；功能：细胞核是遗传物质贮存和复制的场所，是细胞遗传和代谢的控制中心。
本题主要考查细胞核的结构和功能，要求考生能够结合所学知识准确判断各选项，属于识记和理解层次的考查。
7.【答案】D
【解析】解：A、质壁分离过程中，水分子通过自由扩散进出细胞，是双向的，但此时细胞失水占主导，导致液泡体积减小，A错误；
B、内表皮细胞颜色较浅，观察质壁分离时需调暗视野，以增强对比度。若调亮视野，反而会降低观察效果，B错误；
C、质壁分离复原后，由于细胞壁的支持和保护作用，细胞液渗透压与外界溶液渗透压不一定相等，C错误；
D、当外界溶液的溶质能通过原生质层时，在质壁分离过程中，溶质进入细胞，导致细胞液浓度逐渐增大，当细胞液浓度大于外界溶液浓度时，细胞就会吸水，从而使质壁分离后的细胞可能发生自动复原，D正确。
故选：D。
1、质壁分离的条件是具有半透膜和半透膜两侧具有浓度差，原生质层相当于半透膜。
2、细胞壁具有全透性，具有支持和保护细胞的作用。
本题考查了质壁分离及质壁分离复原实验，重点在学生理解水分子的运动方向，显微镜的使用，渗透压的动态变化以及实验现象的判断。
8.【答案】A
【解析】解：A、对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒处理，A正确；
B、步骤①倒平板操作后应等待平板冷却至凝固（大约需5至10分钟）后，再将其倒过来放置，防止水蒸气落在培养基上造成污染，B错误；
C、步骤②应多个方向划线，使接种物逐渐稀释，最终培养后出现单个菌落，C错误；
D、步骤③划线结束后应在皿底上做好标注，D错误。
故选：A。
分析题图：①是倒平板，②是进行平板划线，③是培养。
本题考查微生物的培养和纯化，解题的关键是能识别图示所代表的过程，仔细分析答题。
9.【答案】D
【解析】解：A、酵母菌在无氧条件下可以将葡萄糖分解为酒精和二氧化碳，所以利用酵母菌的发酵可以用来酿制红酒、白酒、黄酒等产品，A正确；
B、“老汤”中含有纯度较高的乳酸菌，加入“老汤”相当于接种了乳酸菌，可加速泡菜发酵进程，B 正确；
C、制作腐乳时，参与发酵的微生物有多种，如毛霉、曲霉、酵母菌等，不是纯种发酵，毛霉属于真核生物，C正确；
D、并非所有的发酵过程都需要严格密封避免O2进入。例如醋酸菌是好氧菌，在制作醋酸时需要有氧气参与发酵过程，D错误。
故选：D。
1、酵母菌是一种单细胞真菌，在无氧环境下，它能通过细胞内特定的酶，将葡萄糖逐步分解，最终生成酒精和二氧化碳，同时释放出少量能量用于自身生命活动，这个过程即无氧发酵产酒精。
2、醋酸菌属于细菌，是好氧性微生物。在氧气充足的条件下，醋酸菌可将酒精进一步氧化，先转变为乙醛，再最终生成醋酸，这就是醋酸菌需氧发酵产醋酸的过程。
本题聚焦发酵相关知识，通过列举不同发酵实例，考查对发酵原理、参与微生物及发酵条件的理解，涵盖酿酒、泡菜制作、腐乳制作等常见发酵场景，知识覆盖面较广且贴近生活实际。学生要牢记不同微生物发酵所需的条件，像酵母菌无氧发酵产酒精，醋酸菌需氧发酵产醋酸；对于生活中常见发酵食品制作所涉及的微生物要清晰辨别；同时，要准确区分纯种发酵和多种微生物参与的发酵类型。
10.【答案】A
【解析】解：A、从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，故土壤不需要灭菌，A错误；
B、丙草胺可提供碳源、氮源，配制以乙草胺为唯一氮源的选择培养基进行培养，可提高降解菌的浓度，属于选择培养基，B正确；
C、据图可知，每克样品中的菌株数=（168+175+167）÷3÷0.1×106=1.7×109个，C正确；
D、图示采用的计数方法是稀释涂布平板法，由于两个或多个细胞连在一起时，在平板上观察到一个菌落，因此用该方法计数结果往往比实际活菌数要低，D正确。
故选：A。
1、微生物常见的接种的方法：
（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
2、间接计数法（活菌计数法）
（1）原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
（2）操作：①设置重复组，增强实验的说服力与准确性；②为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。
（3）计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。
本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记相关知识，意在考查学生的识图能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题和解决问题的能力。
11.【答案】B
【解析】解：A、悬浮培养是对愈伤组织进行处理形成的单细胞或小细胞团的培养，一般使用液体培养基，所用到的技术是植物细胞培养，A正确；
B、从雪莲中提取的次生代谢物不是雪莲生长所必需的物质，B错误；
C、茎尖含病毒很少或不含病毒，利用雪莲茎尖作为外植体，诱导其形成愈伤组织，然后通过再分化可得到脱毒苗，C正确；
D、可用射线或化学物质处理愈伤组织，促使其发生突变，从中筛选可能有雪莲培养物高产的细胞，D正确。
故选：B。
植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，其过程是：离体的植物组织、器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化进一步发育植株（新植体）。
本题主要考查的是植物组织培养的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握的能力，难度适中。
12.【答案】A
【解析】解：A、①加消化液的目的是使细胞与瓶壁分离，使细胞分散开来，其中消化液中应含有的胰蛋白酶或胶原蛋白酶，A错误；
B、②加培养液，为满足细胞生命活动需要，培养液中一般含有糖类、维生素、激素等多种物质和血清等天然成分，B正确；
C、吸除消化液，加培养液的目洗去多余消化液和稀释细胞，C正确；
D、动物细胞培养需要的气体环境为95%空气和5%CO2的混合气体环境，D正确。
故选：A。
动物细胞培养条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。
（3）温度和pH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。
本题主要考查动物细胞培养的条件与过程的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。
13.【答案】D
【解析】解：A、本实验需要制备抗RecQ解旋酶单克隆抗体，故①过程应向实验小鼠注射RecQ解旋酶使小鼠产生免疫反应，A正确；
B、脾脏是重要的免疫器官，故②过程应从该小鼠的脾脏中获取B淋巴细胞，B正确；
C、在利用96孔板筛选杂交瘤细胞时，需要进行有限稀释，使每孔最多1个细胞，这样可以保证每孔中的细胞是由单个细胞增殖而来，从而筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，C正确；
D、将能产生抗体的杂交瘤细胞Ⅱ注入小鼠体内，是从小鼠的腹水中大量分离抗体，而不是从血浆中，D错误。
故选：D。
单克隆抗体的制备：
（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞；
（2）获得杂交瘤细胞；
①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；
②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体；
（3）克隆化培养和抗体检测；
（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖；
（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
本题考查单克隆抗体的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
14.【答案】C
【解析】解：A、为保证供体胚胎的优良特性，生产中需选择品质良好的雄、雌性杜泊羊提供精子和卵母细胞，A错误；
B、采集来的精子不可直接用于体外受精，要先获能处理，B错误；
C、受体母羊需具备健康的体质和正常繁殖能力，必须保证供体和受体是同一物种，当地普通品质的健康波尔母山羊不适合作为胚胎受体，C正确；
D、由于胎盘屏障阻止了免疫细胞与胚胎的接触，受体基本上不会对来自供体的胚胎发生免疫排斥反应，所以胚胎移植前不需要对供、受体进行免疫检查，D错误。
故选：C。
胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。②配种或人工授精。③对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来（也叫冲卵）。对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑葚胚或囊胚阶段。直接向受体移植或放入-196℃的液氮中保存。④对胚胎进行移植。⑤移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。
本题考查胚胎移植的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力、运用所学知识综合分析问题的能力。
15.【答案】D
【解析】解：A、DNA粗提取时，离心研磨液是为了使蛋白质等杂质沉淀，DNA溶解在上清液中，不是加速DNA沉淀，A错误；
B、提取到的丝状物（DNA）与二苯胺溶液混匀后，需沸水浴加热才会变为蓝色，B错误；
C、凝胶电泳时，DNA分子越大，迁移速率越慢，C错误；
D、电泳鉴定时，扩增结果不止一条条带，可能因引物设计过短、退火温度过低，导致非特异性扩增，D正确。
故选：D。
DNA粗提取和鉴定的原理：
（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。
（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会呈现蓝色。
本题考查DNA粗提取与鉴定、PCR扩增及电泳鉴定的知识，意在考查对实验原理、操作及结果分析的掌握，提升实验探究与分析能力。
16.【答案】C
【解析】解：A、使用氯化钙处理大肠杆菌可使大肠杆菌处于易于吸收周围DNA分子的感受态，提高转化效率，更多质粒K进入大肠杆菌，可增加筛选平板上蓝色菌落数，A正确；
B、如果筛选平板中仅含卡那霉素，生长出的白色菌落是含有质粒的菌株，但不一定含有目的基因，B正确；
C、因质粒K中含两个标记基因，目的基因的插入破坏了β-半乳糖苷酶基因，使其无法表达β-半乳糖苷酶，筛选平板中长出的白色菌落即为导入了重组质粒的菌株，但是否表达目标蛋白，还需要用抗原-抗体杂交技术检测，C错误；
D、若筛选平板中蓝色菌落偏多，说明质粒上的β-半乳糖苷酶基因仍然保持完整并且成功表达出β-半乳糖苷酶，可能是质粒K经酶切后自身环化并导入了大肠杆菌，D正确。
故选：C。
基因表达载体要包含启动子、终止子、标记基因、目的基因和复制原点。标记基因的作用是便于筛选重组DNA。
本题主要考查基因表达载体的构建，考查考生对标记基因、双标记法的理解能力及分析、解决问题的能力。
17.【答案】C
【解析】解：A、①是利用PCR技术短时间内扩增目的基因，PCR过程需要一对引物；③是将目的基因导入受体细胞，利用显微注射技术将目的基因导入动物细胞，A正确；
B、②是构建人EPO基因的表达载体，是基因工程的核心，其原理是基因重组，B正确；
C、大肠杆菌是原核生物，没有内质网和高尔基体，不能加工促红细胞生成素，用大肠杆菌代替CHO，不能得到高活性rhEPO，C错误；
D、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能关系作为基础，通过改造或合成基因，来改造现有的蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。第二代rhEPO的生产运用了蛋白质工程技术，本质是改造基因，D正确。
故选：C。
①是利用PCR技术短时间内扩增目的基因，②是构建人EPO基因的表达载体，③是将目的基因导入受体细胞。
本题结合利用基因工程技术生产人红细胞生成素的过程图，考查基因工程的原理及技术等知识，要求考生识记基因工程的操作步骤，能准确判断图中各过程或物质的名称。
18.【答案】A
【解析】解：A、“设计试管婴儿”的目的是用于治疗某些疾病，需在②胚胎移植前进行遗传学诊断，A错误；
B、为避免现代生物技术的滥用，“试管婴儿”与“设计试管婴儿”均需要符合国家相关规定，B正确；
C、只要供者和受者的主要HLA有一半以上相同，即可进行器官移植，因此该女婴造血干细胞也能挽救其他贫血病患者，C正确；
D、“试管婴儿”与“设计试管婴儿”都是利用体外授精和胚胎移植的方法，培育新生命，属于有性生殖，不属于克隆，D正确。
故选：A。
试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎，然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。
本题考查试管婴儿的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。
19.【答案】细胞膜和液泡膜 发生
协助扩散 主动运输 减少 使用ATP抑制剂处理细胞，通过H+-ATP泵运入液泡的H减少，液泡膜内外的H+浓度梯度降低，为Na+通过NHX运入液泡提供的能量减少，运入液泡Na+减少
提高细胞渗透压
【解析】（1）由图可知，H+-ATP泵存在于细胞膜和液泡膜上，由细胞膜外、细胞质基质和液泡内的pH可知，H+-ATP泵在转运H+时，是逆浓度梯度的主动运输，H+-ATP泵作为转运H+的载体蛋白，其构象会发生改变。
（2）由细胞膜外和细胞质基质的pH可知，H+经SOS1运进细胞内是顺浓度梯度的，其运输方式为协助扩散，则SOS1运输Na+为主动运输，所需能量来自膜两侧H+的浓度差产生的电化学势能。同理可知NHX将Na+运进液泡的方式是主动运输，所需能量来自液泡膜两侧H+的浓度差产生的电化学势能，若使用ATP抑制剂处理细胞，会影响由液泡向细胞质基质的运输，进而影响液泡膜两侧H+的浓度差，影响Na+的运输，使Na+的储存量减少，即若用ATP抑制剂处理细胞，通过H+-ATP泵运入液泡的H减少，液泡膜内外的H+浓度梯度降低，为Na+通过NHX运入液泡提供的能量减少，运入液泡Na+减少。
（3）柽柳细胞内脯氨酸的含量升高，会提高细胞渗透压，从而增强细胞在盐胁迫下的吸水能力。
故答案为：
（1）细胞膜和液泡膜 发生
（2）协助扩散 主动运输 减少 使用ATP抑制剂处理细胞，通过H+-ATP泵运入液泡的H减少，液泡膜内外的H+浓度梯度降低，为Na+通过NHX运入液泡提供的能量减少，运入液泡Na+减少
（3）提高细胞渗透压
物质跨膜运输主要包括两种方式：被动运输和主动运输，被动运输又包括自由扩散和协助扩散。被动运输是由高浓度向低浓度一侧扩散，而主动运输是由低浓度向高浓度一侧运输。其中协助扩散需要转运蛋白的协助，但不需要消耗能量；而主动运输既需要消耗能量，也需要载体蛋白的协助。
本题考查物质跨膜运输的相关知识，意在考查考生理解所学知识点和分析题图的能力，难度适中。
20.【答案】消毒
纤维素酶和果胶 X射线 碘乙酰胺
灭活病毒诱导法 在细胞核和细胞质的功能上实现互补，使细胞恢复正常分裂
有光
【解析】（1）植物组织培养应注意无菌操作，故过程①操作之前需要用无菌水和次氯酸钠对外植体进行消毒，之后诱导脱分化形成愈伤组织。
（2）过程②为获得原生质体，由于植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性，可用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。根据题意可知，要培育能产生紫杉醇的柴胡，红豆杉是供体需要X射线照射，柴胡是受体需要碘乙酰胺处理。
（3）③过程为诱导原生质体融合，与诱导动物细胞融合相比，不宜采用灭活病毒诱导法。由于杂种细胞由于融合后在细胞核和细胞质的功能上实现互补，使细胞恢复正常分裂，故只有异源融合的原生质体可持续分裂形成再生细胞团。
（4）过程④为再生细胞团形成杂种植株，细胞需要合成叶绿素，因此需要提供有光条件。
故答案为：
（1）消毒
（2）纤维素酶和果胶 X射线 碘乙酰胺
（3）灭活病毒诱导法 在细胞核和细胞质的功能上实现互补，使细胞恢复正常分裂
（4）有光
植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
本题主要考查植物体细胞杂交技术等相关知识点，意在考查学生对相关知识点的理解和掌握。
21.【答案】促进细胞核全能性表达的物质；MⅡ
AD
激活 iPS细胞具有与胚胎干细胞类似的分裂能力和分化能力，在特定条件诱导下能定向分化为特定的组织器官 桑葚胚
【解析】（1）通常选用卵母细胞作为受体细胞，这是因为卵母细胞具有体积大、易操作、营养物质含量高、含有促进细胞核全能性表达的物质等优点。核移植前需将采集到的卵母细胞培养至MⅡ期。
根据图示，我国科学家研究获得人源化中肾的过程，除了基因编辑技术外，还使用了动物细胞培养技术、细胞核移植技术、胚胎移植技术。
（2）A、向导RNA类似于引物，其部分序列是根据SIX1基因设计的，其双链区遵循碱基互补配对原则，A正确；
B、限制酶具有识别并切割特定的脱氧核糖核苷酸序列的作用，打开磷酸二酯键，Cas9蛋白在向导RNA引导下，切割目标DNA双链，说明不具有识别作用，打开的是磷酸二酯键，B错误；
C、限制酶具有识别并切割特定的脱氧核糖核苷酸序列的作用，打开磷酸二酯键，Cas9蛋白在向导RNA引导下，切割目标DNA双链，说明不具有识别作用，打开的是磷酸二酯键，C错误；
D、SIX1基因是控制猪肾发育的关键基因，若不敲除，则会与人iPS细胞竞争肾脏发育的环境，D正确。
故选：AD。
（3）过程⑥是将成纤维细胞核移植到去核的卵母细胞形成重构胚，需要采用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育过程。最终是获得主要由人体细胞构成的“人一猪嵌合中期肾”，因此图中过程⑧所用诱导多能干细胞（iPS）来自人，选择iPS作为肾脏供体细胞的原因是iPS具有与胚胎干细胞类似的分裂和分化能力，在特定条件诱导下能定向分化为特定的组织器官。依据题干信息，猪胚胎的细胞尚未完全分化成各种类型的细胞和组织，细胞之间的连接较松散，这使得导入的人iPS细胞较容易在猪胚胎中整合，所以在构建嵌合胚胎过程中，可在猪胚胎发育至桑葚胚（分化程度较囊胚低）期注射人源供体细胞。
故答案为：
（1）促进细胞核全能性表达的物质；MⅡ
（2）AD
（3）激活 iPS细胞具有与胚胎干细胞类似的分裂能力和分化能力，在特定条件诱导下能定向分化为特定的组织器官 桑葚胚
细胞全能性是指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整生物体的潜能。在多细胞生物中，每个体细胞的细胞核都含有个体发育的全部基因，只要条件许可，都可发育成完整的个体。诱导多能干细胞技术是指通过导入特定的转录因子将终末分化的体细胞重编程为多能性干细胞。分化的细胞在特定条件下被逆转后，恢复到类似胚胎干细胞。
本题考查胚胎工程和基因工程的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，学生具备运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。
22.【答案】4种脱氧核苷酸 延伸
5'端 AGATCT BamHⅠ、EcoRⅠ
栽培马铃薯愈伤组织细胞的染色体上 2 再分化
【解析】（1）PCR扩增目的基因时，需要模板DNA、引物、4种脱氧核苷酸、含Mg2+的缓冲液和耐高温的DNA聚合酶。PCR一般分为变性、复性和延伸三步，其中DNA聚合酶在PCR的延伸步骤中起作用。
（2）扩增目的基因时，需要在引物的5'端添加限制酶的识别序列。在载体的启动子和终止子之间有BamHI、EcoRI和XbaI的识别序列，而S基因内部含有XbaI、NdeI和BamHI的识别序列，使用上述限制酶会切割基因，结合各种限制酶的识别序列及切割位点，需要用BamHI、EcoRI切割载体，用BamHI的同尾酶BglⅡ和EcoRI切割S基因，故PCR扩增S基因时需在上游引物添加的碱基序列是5'-AGATCT-3'。
（3）T-DNA属于可转移DNA，用携带S基因的农杆菌侵染栽培马铃薯愈伤组织时，基因表达载体中T-DNA进入愈伤组织细胞，将S基因整合到栽培马铃薯愈伤组织细胞的染色体上，抗性基因1位于T-DNA外部，用于筛选含有重组载体的农杆菌，而抗性基因2位于T-DNA内部，可用于筛选成功转化的愈伤组织。该愈伤组织经再分化形成芽、根，继续培育可获得抗寒能力显著增强的马铃薯植株。
故答案为：
（1）4种脱氧核苷酸 延伸
（2）5'端 AGATCT BamHⅠ、EcoRⅠ
（3）栽培马铃薯愈伤组织细胞的染色体上 2 再分化
1、基因工程的步骤：目的基因的提取、目的基因与运载体结合、目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
2、对限制酶选择条件：不能破坏目的基因和启动子、终止子，以便于目的基因和载体正确连接。
本题考查基因工程的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力、运用所学知识综合分析问题的能力。

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