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2024-2025学年高二下学期期末考试
生物试卷
时间：75分钟 满分：100分
注意事项：
1.答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上，并将自己的姓名、准考证号、座位号填写在本试卷上。
2.考试结束后，将答题卡交回。
一．选择题（共15小题，每题2分）
1.某村庄在插秧不久的稻田中放养了一定数量的草鱼和青蛙，实现了“稻-鱼-蛙”立体种养。不需要投放饲料，鱼和蛙以稻田中的害虫、其他浮游动物、田间杂草等为食，其粪便为水稻供肥；鱼和蛙呼吸释放的二氧化碳可供水稻进行光合作用，水稻、鱼等输出的生物量明显提高。与普通稻田相比，下列关于该稻田的说法错误的是（　　）
A. 群落的垂直结构和水平结构变得复杂 B. 促进了该稻田的物质循环和能量流动
C. 肥料的施用量可逐年减少 D. 对害虫的生态位产生影响
2.当一个国家65岁及以上人口占总人口比例超过7%时，则意味着这个国家进入老龄化。我国第七次人口普查数据显示65岁及以上人口占13.50%，老龄化程度进一步加深。下列叙述错误的是（　　）
A. 人口老龄化会导致出生率降低、死亡率升高，即自然增长率变负
B. 全面实施二孩、三孩政策可以缓解人口老龄化进程
C. 人口老龄化会导致人口的年龄结构成为衰退型
D. 人口老龄化一般不会影响男女的性别比例
3.研究人员将一种抗逆基因整合到土壤农杆菌的Ti质粒上，然后用它侵染拟南芥细胞，获得了不同株系的拟南芥。下列相关表述正确的是（　　）
A. 构建含有抗逆基因的Ti质粒需要限制酶、DNA聚合酶
B. 将抗逆蛋白基因整合到Ti质粒上就是构建基因表达载体
C. Ti质粒标记基因中腺嘌呤和尿嘧啶的含量相等
D. 只要检测出拟南芥细胞中含有抗逆基因，就代表抗逆拟南芥培育成功
4.现有草原上的一条食物链：草→兔→狼，已知如图中的a代表狼摄入的能量，则下列相关叙述中，错误的是(　　)
A. a中的能量代表光合作用制造的有机物中含有的总能量
B. b代表狼粪便中的能量，c代表狼同化的能量
C. e中的能量可用于狼的生长、发育、繁殖
D. 若狼被人为大量捕杀，则兔的数量先增加后减少最后趋于稳定
5.研究人员调查某岛屿猕猴种群近40年，发现猕猴最初集中分布于岛屿西南侧，后来分布于各区域，并呈镶嵌分布。根据已有数据利用模型模拟理想环境中未来60年内猕猴种群的数量变化，结果如图所示。下列叙述正确的是（　　）
A. 近40年该岛屿猕猴种群增长速率一直呈上升趋势
B. 地理环境封闭是限制猕猴种群数量持续增加的重要因素
C. 该岛屿猕猴在各区域上呈镶嵌分布体现了群落的水平结构
D. 若该岛屿生境遭到破坏，猕猴的遗传多样性也会维持不变
6.科学家将大鼠的多能干细胞经体外诱导产生的原始生殖细胞样细胞（PGCLCs）移植到无生殖细胞的大鼠体内，可使其产生精子，并得到健康的后代。下列叙述正确的是（　　）
A. 多能干细胞分化程度高于PGCLCs B. 多能干细胞经诱导可发生定向分化
C. PGCLCs分化为精子体现了细胞的全能性 D. 多能干细胞内的所有基因都在活跃表达
7.犬细小病毒（CPV）主要感染幼犬，传染性极强，被感染个体死亡率也高。利用小鼠制备抗CPV单克隆抗体的基本流程如图所示。下列叙述正确的是（　　）
A. 用抗CPV抗体对疑似感染CPV的幼犬进行检测依据的是DNA复制的原理
B. 注射CPV后，从小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞均可以产生抗CPV抗体
C. 过程②可以利用一定方法诱导细胞融合，得到的一定是杂交瘤细胞
D. 体外培养能产生抗CPV抗体的杂交瘤细胞，可获取大量抗CPV单克隆抗体
8.群落中，优势物种可以利用较低资源生存。某群落中，物种A和物种B的生存空间和食物类别都较为相似。生存所需资源指某种群生存所需的最少资源量。下列关于物种A和物种B的说法，错误的是（　　）
A. 物种A和物种B均可能属于消费者
B. 物种A和物种B的生态位可能存在大幅度的重叠
C. 物种A和物种B存在种间竞争，两者之间可能出现此消彼长的情况
D. 若物种A的生存所需资源小于物种B的，则物种B为优势竞争者
9.三趾树懒是一种移动缓慢、代谢率极低的植食性动物，这种动物不直接从树冠“空投”粪便，而是每隔一段时间爬下树排便。研究发现，这种树懒到地面排便时，躲在皮毛里的树懒蛾就伺机在大便中产卵，卵孵化后的幼虫专食树懒大便，而羽化后的树懒蛾又会寻找树懒钻进其皮毛中。蛾死掉后被分解者分解，产生的无机氮促进树懒皮毛中绿藻的生长，绿藻能帮助树懒躲避天敌，也可供树懒食用。下列相关叙述，正确的是（　　）
A. 三趾树懒和绿藻之间只有捕食关系
B. 三趾树懒爬下树排便耗能较多且易被天敌捕食
C. 树懒蛾幼虫呼吸作用消耗的能量来自三趾树懒的同化能
D. 三趾树懒、树懒蛾和绿藻构成的生物群落相对稳定
10.下列关于治疗性克隆和生殖性克隆的说法，错误的是（　　）
A. 将一个克隆的胚胎植入一个女性子宫发育成婴儿的过程属于生殖性克隆
B. 生殖性克隆人冲击了现有的一些有关婚姻、家庭和两性关系的伦理道德观念
C. 将基因编辑技术应用于治疗性克隆，不符合人类伦理道德
D. 中国政府不允许进行任何生殖性克隆人实验
11.如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析错误的是（　　）
A. 某一稀释度下至少涂3个平板，以减小实验误差
B. 3号试管中的样品溶液稀释倍数为104倍
C. 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1．7×103个
D. 该实验需设置牛肉膏蛋白胨培养基作对照，用以判断选择培养基是否有选择作用
12.如图为某同学绘制的能量流经第二营养级的示意图，图中数字为能量值。下列说法错误的是(　　)
A. 第二营养级同化的能量为75
B. 图中C表示第二营养级用于生长、发育和繁殖的能量
C. “？”代表的数值为20
D. A表示第二营养级的同化量
13. 工业上常利用发酵工程生产微生物饲料，其主要生产流程如下图。下列叙述错误的是（　　）
A. 优良菌种不一定是直接从自然界中筛选得到
B. 发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵
C. 生产乳酸菌时，不仅要关注培养基中的营养成分，还要注意隔绝空气
D. 微生物蛋白质含量高，可以从发酵得到的菌体中提取出大量的单细胞蛋白
14.基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤，下列相关说法不正确的是（　　）
A. 构建基因表达载体的目的包括使目的基因在受体细胞中能稳定存在且遗传给下一代
B. 基因工程中标记基因的作用是便于重组DNA分子的筛选
C. 一个基因表达载体一般包括目的基因、标记基因、起始密码和终止密码等结构
D. 基因表达载体中的复制原点是质粒DNA的复制起点
15.基因疫苗是将病原微生物的一段基因插入质粒中，然后将重组质粒导入人或动物体内，这段基因编码的产物可以引起机体产生特异性免疫反应。下列叙述正确的是(　　)
A. 基因疫苗导入人体可以表达出抗体，引起免疫反应
B. 基因疫苗引起免疫反应前必须经过转录和翻译的过程
C. 基因疫苗内含抗原，所以能引起机体特异性免疫反应
D. 接种后若感染该病原微生物，则体内记忆细胞会产生大量抗体
二．不定项选择题（共5小题，每题3分）
16.单克隆抗体制备过程中所用的骨髓瘤细胞是一种基因缺陷型细胞，其合成核酸的途径能被氨基蝶呤阻断。现将从预先注射了某种抗原的小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞与上述骨髓瘤细胞融合后，再加入含氨基蝶呤的培养液。将这些混合物分装于如图所示的细胞培养板的小孔中培养。下列相关叙述错误的是(　　)
A. 制备单克隆抗体运用了动物细胞具有全能性的原理和动物细胞培养技术
B. 融合B淋巴细胞与骨髓瘤细胞时，培养液中可以加入PEG作为诱导剂
C. 培养液中加入氨基蝶呤的目的是筛选杂交瘤细胞
D. 小孔中的细胞经过增殖后，均会产生所需特异性抗体
17.某地因地制宜实施了“养鱼不换水，种菜不施肥”的鱼菜共生循环生态农业，模式图如下。下列说法正确的是（　　）
　
A. 流入该生态系统的总能量为生产者固定的太阳能和饲料 B. 该循环农业实现了能量的多级利用，提高了能量传递效率
C. 该生态系统中鱼粪中的氮、磷等元素最终可供蔬菜吸收利用 D. 该生态系统能够实现自组织、自我优化、自我更新和维持
18.如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析错误的是(　　)
A. 4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数可能是5号试管中的10倍
B. 5号试管中稀释液进行平板培养的结果表明每克该土壤中的菌株数目为1.7×106个
C. 当样品稀释度足够高时，一般平板上一个单菌落来源于一个活菌
D. 某一稀释度下至少涂3个平板，该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目高
19.下列关于生物武器的叙述，正确的是(　　)
A. 炭疽杆菌、天花病毒、酵母菌都可作为生物武器
B. 在战争中，为预防敌方使用生物武器，参战部队采取的最有效措施是接种病原体的疫苗
C. 若被经过基因改造的生物武器伤害，治疗难度更大
D. 真正爱好和平的人不会使用生物武器，但可以研制、开发、保存
20.下列有关科研人员建立人乳铁蛋白乳腺生物反应器过程的叙述，正确的是(　　)
A. 从细胞中分离目的基因时必须使用限制酶和DNA连接酶
B. 借助标记基因可检测目的基因是否整合到受体细胞染色体上
C. 常用显微注射法将目的基因导入人的乳腺细胞中
D. 应该将目的基因与在乳腺中特异表达的基因的启动子结合
三．非选择题（共5小题，共55分）
21.在未断奶的小牛胃中存在一种凝乳酶，被广泛应用于奶酪和酸奶的生产。科学家将编码牛凝乳酶的基因（长度1.5kb）导入大肠杆菌获得工程菌，再通过工业发酵批量生产凝乳酶。
（1）提取小牛胃黏膜组织中的mRNA，经逆转录得到cDNA，选择合适的引物进行PCR扩增，PCR引物碱基数一般在20～30个之间，过短则导致____。
（2）如表为操作过程中可能用到的限制酶，图1为获得的目的基因及末端（除黏性末端序列外，其他碱基序列省略），图2为要使用的质粒，其中的Tetr、Ampr分别为四环素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因。对质粒进行切割时，选用的两种限制酶为____。目的基因和质粒能连接成重组质粒的原因是____，导入的目的基因在受体细胞中能成功表达的理论基础是____。
（3）将转化后的大肠杆菌接种在含____的培养基上进行培养，随机挑取菌落（分别编号为1、2、3、4）培养并提取质粒，用（2）中选用的两种限制酶进行酶切，酶切产物经电泳分离，结果如下图，____号菌落的质粒很可能是含目的基因的重组质粒。
注：M为指示分子大小的标准参照物；小于0.2kb的DNA分子条带未出现在图中
（4）已知凝乳酶第20、24位氨基酸变成半胱氨酸，其活性可显著提高。科研人员希望运用蛋白质工程技术获得活性更强的凝乳酶，请选用合适的措施编号并排序：____。（用箭头表示）
①重组DNA分子导入大肠杆菌
②随机改变凝乳酶基因的序列
③分析突变蛋白功能，设计结构
④改变凝乳酶基因的特定序列
⑤培养细胞后提纯突变蛋白
⑥将改变后的凝乳酶基因与质粒重组
22.某喀斯特地区石漠化严重，土层浅薄，生态环境极为脆弱。该地区的植被恢复过程中，凋落叶的分解对土壤有机碳（SOC）的含量及碳排放均有影响。研究人员选择6种耐干旱贫瘠的优良树种进行了研究。
（1）植物凋落物进入土壤后，可被分解为可溶性有机碳和微小植物残片，并在土壤中稳定储存。因此，凋落物是SOC的重要来源。通过　　作用，可将部分SOC转变为　　等无机物，此过程称为SOC的输出。
（2）为了解不同树种凋落物分解速率，取每种树的0.5g凋落叶添加至土壤表层，180天后检测各组的质量损失率，结果见下表。表明　　。
（3）研究人员还进行了凋落物对SOC输出影响的研究，检测结果如下图。对照组的处理是　　，且与各组的温度、水分等条件均一致。据图可知，除海南椴和任豆外，其余树种的凋落叶都促进了SOC的分解。得出此结论的依据是　　。
（4）综合上述研究，从生态系统物质循环与能量流动角度出发，在处于植被恢复初期的地区，可以选择凋落叶分解速率较　　的几种树，以促进土壤养分的循环与利用；在处于植被恢复中后期的地区，可选择的树种及理由是　　。此生态修复工程中遵循了　　的原理。
23.2019年1月24日，5只生物钟紊乱体细胞克隆猴登上中国期刊《国家科学评论》封面，标志着中国体细胞克隆技术走向成熟。利用这项技术可批量生产实验用疾病模型猴。如图是体细胞克隆猴的培育过程。请回答下列问题：
（1）研究者选择出生夭折的猕猴作为供核个体，先取相应组织，剪碎，用______酶处理后，置于含有______的混合气体的CO2培养箱中进行培养。
（2）克隆猴的获得属于______繁殖，该过程需要先获得卵母细胞，为获得更多的卵母细胞，需要对母猴进行______处理，然后对卵母细胞去核。实际上去掉的是______________________________
（3）核移植过程中用去核卵母细胞作为受体细胞的原因是①卵母细胞比较大，容易操作；②_____。
（4）非人灵长类的体细胞核移植非常困难，研究发现体细胞克隆猴胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。据此提出攻克技术难点的思路是________。
24.为确定某致病细菌对不同抗生素的敏感性，研究人员设置了四组实验：分别将含有A、B、C、D四种抗生素（含量相同）的滤纸片均匀置于同一平板上的不同位置，放在培养箱中培养一定时间后，观察其透明圈的大小，实验结果如下表。回答下列问题：
（1）在微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染，用平板培养细菌时一般需要将平板倒置，其原因是___________。
（2）实验需使用涂布器接种，接种前涂布器的灭菌方法为_______。
（3）根据实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素种类为_______；在排除杂菌污染的情况下，第4组实验说明细菌对抗生素D产生了________。
（4）该实验还缺少一组空白对照，请尝试补充：_________。
25.大肠杆菌β-半乳糖苷酶(Z酶)可催化底物(X-gal)水解产生蓝色物质。在PUC18质粒中，lacZ′编码Z酶氨基端的一个片段(称为α-肽),该质粒结构及限制酶识别位点如图甲所示。已知α-肽、缺失α-肽的Z酶片段单独存在时均无Z酶活性，共同存在时就会表现出Z酶活性。利用图乙中的DNA片段与PUC18质粒进行基因工程操作。
(1)限制酶能催化双链DNA分子中的___________________断裂。本实验可使用限制酶_________________处理pUC18质粒和图乙中的DNA片段，再通过DNA连接酶连接，获得含目的基因的重组质粒。
(2)用重组质粒转化大肠杆菌，然后将大肠杆菌接种到含氨苄青霉素的固体培养基上进行培养，由于未发生转化的大肠杆菌没有该质粒，因而不具有__________________________,在该培养基上不能生长。从功能上划分，该培养基属于________培养基。
(3)当上述培养基中含有X-gal时，生长出的菌落有蓝色和白色两种类型，其中含有重组质粒的大肠杆菌的菌落颜色为_______________,这是因为____________________。为保证能通过菌落颜色辨别出含有重组质粒的大肠杆菌，本实验作为受体细胞的大肠杆菌中，Z酶基因应满足的条件是______________________________________________。解析
一、单选题
1.【答案】C
【解析】由题意可知，该稻田中生物种类增多，群落的垂直结构和水平结构变得复杂，A正确；该稻田中生物种类增多，促进了该稻田的物质循环和能量流动，B正确；由于该人工生态系统的农产品被不断输出，物质不能循环利用，因此需要不断施加肥料，用量根据输出的量而定，C错误；该稻田中生物种类增多，对害虫的生态位产生影响，D正确。
2.【答案】A
【解析】人口老龄化会导致人口出生率小于死亡率（但出生率不一定降低）、年龄结构成为衰退型，导致自然增长率变负，A错误，C正确；全面实施二孩、三孩政策可以提高人群的出生率，有利缓解人口老龄化进程，B正确；由于我国禁止非医学需要的性别鉴定，婴儿的出生比率理论上为男性：女性=1：1，故人口老龄化一般不会影响男女的性别比例，D正确。
3.【答案】B
【解析】构建含有抗逆基因的Ti质粒需要限制酶和DNA连接酶，不需要DNA聚合酶，A错误；利用土壤的Ti质粒构建基因表达载体，即将目的基因整合到土壤农杆菌的Ti质粒上，故将抗逆蛋白基因整合到Ti质粒上就是构建基因表达载体，B正确；Ti质粒标记基因是DNA片段，不含尿嘧啶，C错误；只有拟南芥具有抗逆性才能代表抗逆拟南芥培育成功，含有抗逆基因若不表达，也不会形成抗逆植株，D错误。
4.【答案】A
【解析】图中的a代表狼摄入的能量，A错误；b代表狼粪便中的能量，c代表狼同化的能量，B正确；e中的能量可用于狼的生长、发育、繁殖，C正确；在“草→兔→狼”这条相对独立的食物链中，若狼被人为大量捕杀，则兔子因为天敌的消失很快增加，当达到一定的数量后，草不能满足所有兔子的需要时，兔子会因没有充足的食物而死亡减少，所以兔子的数量先增加后减少最后趋于稳定，D正确。
5.【答案】B
【解析】目前猕猴数量约1200只，未来60年的猕猴数量增长幅度不大，由此可判断该岛屿猕猴种群增长速率并不是一直呈上升趋势，A错误；题干显示，前40年猕猴集中分布于岛屿西南侧，随后尽管分布在整个岛屿，在理想环境中，其种群数量依然不能表现为J形增长，显然地理环境封闭是限制猕猴种群数量持续增加的重要因素，B正确；该岛屿猕猴在各个区域上呈镶嵌分布，但猕猴只是种群，不是群落，故不能体现群落的水平结构，C错误；若该岛屿生境遭到破坏，其环境容纳量降低，因此猕猴种群的基因库减小，即遗传多样性将下降，D错误。
6.【答案】B
【解析】多能干细胞经体外诱导可分化为PGCLCs细胞，因此多能干细胞分化程度低于PGCLCs，A错误；多能干细胞经体外诱导可产生原始生殖细胞样细胞（PGCLCs），说明多能干细胞经诱导可发生定向分化，B正确；PGCLCs分化为精子的过程没有形成个体，不能体现细胞的全能性，C错误；多能干细胞含有和受精卵相同的基因，但由于基因表达具有选择性，因此并非多能干细胞内的所有基因都在活跃表达，D错误。
7.【答案】D
【解析】用抗CPV抗体对疑似感染CPV的幼犬进行检测依据的是抗原-抗体杂交，A错误；注射CPV后，从小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞不一定都可以产生CPV抗体，如脾脏中还有接受其他抗原刺激的B淋巴细胞就不能产生CPV抗体，B错误；过程②可以利用一定方法诱导细胞融合，得到的可以有没有融合的细胞和同种细胞融合的细胞，不一定都是杂交瘤细胞，C错误；体外培养能产生CPV抗体的杂交瘤细胞，其特点是既可以无限增殖，又能产生专一性抗体，所以可获取大量CPV单克隆抗体，D正确。
8.【答案】D
9.【答案】B
【解析】根据“三趾树懒上的树懒蛾死掉后被分解者分解，产生的无机氮促进树懒皮毛中绿藻的生长，绿藻能帮助树懒躲避天敌，也可供树懒食用”可知，三趾树懒和绿藻之间存在互利共生和捕食关系，A错误；三趾树懒是一种移动缓慢、代谢率极低的植食性动物，三趾树懒爬下树排便耗能较多且易被天敌捕食，B正确；树懒蛾幼虫呼吸作用消耗的能量来自三趾树懒的粪便中的能量，即生产者同化的能量，C错误；三趾树懒、树懒蛾和绿藻不能构成一个生物群落，D错误。故选B。
10.【答案】C
【解析】将一个克隆的胚胎植入一个女性子宫发育成的婴儿的过程属于生殖性克隆，该过程的目的是通过克隆技术获得完整的个体，因而属于生殖性克隆，A正确；生殖性克隆目的是产生一个完整的人，生殖性克隆会对人类现有的有关婚姻、家庭和两性关系的伦理道德观念产生冲击，B正确；生殖性克隆不符合人类伦理道德，治疗性克隆符合人类伦理道德，将基因编辑技术应用于治疗性克隆，符合人类伦理道德，C错误；我国禁止生殖性克隆，不允许进行任何生殖性克隆人实验，D正确。
11.【答案】C
【解析】在同一稀释度下、应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值，减少实验误差，A正确；据图可知，将10g土样加入到90mL无菌水中定容至100mL后，此时锥形瓶中的稀释倍数为10倍，再经3次10倍稀释得到3号试管中的样品，故3号试管中样品的稀释倍数是104倍，B正确；5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为(168+175+167) ÷3÷0.1×106=1.7×109个，C错误；要判断选择培养基是否起到选择作用，需设置接种了的牛肉膏蛋白胨培养基作对照，若牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落种类数目多于选择培养基上的菌落，说明选择培养基有选择作用，D正确。
12.【答案】D
【解析】据题意和题图分析可知，图中A为第二营养级的摄入量，B为第二营养级的同化量，C为第二营养级用于生长、发育和繁殖的能量，D为第三营养级的摄入量。图中“25”是第二营养级粪便中的能量，结合摄入的能量＝同化的能量＋粪便中的能量可知，第二营养级同化的能量为100－25＝75，A正确；同化的能量一方面通过呼吸作用散失，另一方面用于生长、发育和繁殖，所以图中C表示第二营养级用于生长、发育和繁殖的能量，B正确；B是第二营养级的同化量，第二营养级同化的能量为100－25＝75，其中40经呼吸作用散失，余下的35用于生长、发育和繁殖，生长、发育和繁殖的能量(值为35)中有15被下一营养级摄入，余下35－15＝20流向分解者，即“？”代表的数值为20，C正确；图中A为第二营养级的摄入量，D错误。
13.【答案】D
【解析】优良菌种不一定是直接从自然界中筛选得到，也可以来自诱变育种或基因工程育种等方式，A正确；发酵工程中，发酵罐内的发酵是整个流程的核心阶段，在这个环节中，微生物在合适的条件下大量生长繁殖并产生目标产物，它涉及到对温度、pH、溶解氧等多种条件的精准控制，直接关系到产物的产量和质量，是发酵工程的中心环节，B正确；乳酸菌是厌氧菌，发酵过程中要注意隔绝空气，C正确。微生物蛋白质含量高，通过发酵获得的大量微生物菌体，即为单细胞蛋白。D错误。
14.【答案】C
【解析】基因表达载体的构建的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用，A正确；基因工程中载体上有特殊的标记基因，如四环素抗性基因，标记基因的作用是便于重组DNA分子的筛选，B正确；一个基因表达载体一般包括目的基因、标记基因、启动子和终止子等结构，起始密码和终止密码位于mRNA上，C错误；因表达载体中的复制原点是质粒DNA的复制的起点，没有复制原点，质粒DNA就不能复制，D正确。
15.【答案】B
【解析】基因疫苗导入人体可以表达出抗原，在抗原的刺激下机体产生免疫反应。因此基因疫苗引起免疫反应前，目的基因必须经过转录和翻译过程，表达出抗原。接种后若感染该病原微生物，则体内记忆细胞会迅速增殖、分化产生大量的浆细胞，浆细胞产生大量的抗体。
二、不定项选择题
16.【答案】AD
【解析】制备杂交瘤细胞运用了动物细胞融合技术，杂交瘤细胞培养需应用动物细胞培养技术，但制备单克隆抗体过程中没有利用细胞的全能性，A错误；融合B淋巴细胞与骨髓瘤细胞时，培养液中可以加入PEG作为诱导剂，诱导细胞融合，B正确；由题意知，骨髓瘤细胞中核酸的合成能被氨基蝶呤阻断，培养液中加入氨基蝶呤，骨髓瘤细胞不能增殖，杂交瘤细胞能增殖，从而可筛选出杂交瘤细胞，C正确；小孔中增殖的杂交瘤细胞不一定都能产生所需要的特异性抗体，需要进一步筛选才能获得产生特异性抗体的杂交瘤细胞，D错误。
17.【答案】C
【解析】该生态系统是人工生态系统，流入该生态系统的总能量为生产者固定的太阳能以及人工投入的饲料中的化学能，A错误；该循环农业实现了能量的多级利用，提高了能量的利用率，B错误；鱼粪中的有机物经土壤微生物分解，氮、磷等元素可被植物根部吸收利用，C正确；该生态系统菜和鱼分隔开，需要人工添加饲料，不能实现由生物组分产生的自组织、自我优化、自我调节、自我更新和维持，D错误。
18.【答案】BD
【解析】4号试管中稀释液的稀释倍数比5号试管的低10倍，如果稀释倍数适当，平板培养得到的菌落平均数可能是5号试管的10倍，A项正确；5号试管进行稀释涂布平板计数的结果表明，每克土壤中的菌株数为(168＋175＋167)÷3×106÷0.1＝1.7×109(个)，B项错误；当样品稀释度足够高时，一般平板上一个单菌落来源于一个活菌，C项正确；稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞连在一起长成一个菌落的情况，所以该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低，D项错误。
19.【答案】BC
【解析】酵母菌不属于致病微生物，不能作为生物武器致病菌，A项错误；常见的生物武器有致病菌和病毒等，因此预防生物武器的有效措施是接种疫苗，使机体产生相应的免疫，B项正确；经过基因改造的生物武器都是人类没接触过的，没有相应的有效药物，治疗难度较大，C项正确；彻底销毁生物武器是全世界爱好和平的人民的共同期望，D项错误。
20.【答案】BD
【解析】从细胞中分离目的基因时需要使用限制酶，不需要DNA连接酶，A项错误；标记基因的作用是鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来，B项正确；常用显微注射法将目的基因导入动物的受精卵中，C项错误；目的基因需要与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，使目的基因只在乳腺细胞中表达，D项正确。
三、非选择题
21.【答案】（1）特异性降低
（2）BclⅠ和SmaⅠ　　有相同的黏性末端可发生碱基互补配对　　遗传信息的传递都遵循中心法则或生物界共用一套遗传密码
（3）四环素　　2
（4）③→④→⑥→①→⑤
【解析】（1）引物与模板之间遵循碱基互补配对原则，若引物太短则特异性降低。
（2）基因表达载体构建时，需要将目的基因和运载体切出相同的黏性末端，图示BamHⅠ会破坏目的基因，故对质粒进行切割时，选用的两种酶为BclⅠ和SmaⅠ。目的基因和质粒能连接成重组质粒的原因是有相同的黏性末端可发生碱基互补配对，导入的目的基因在受体细胞中能成功表达的理论基础是遗传信息的传递都遵循中心法则或生物界共用一套遗传密码。
（3）图中构建目的基因表达载体时，氨苄青霉素抗性基因被限制酶破坏，故将转化后的大肠杆菌接种在四环素的培养基上进行培养及筛选；如果用BclⅠ和SmaⅠ两种酶切割重组质粒，电泳后将获得分别含有质粒和目的基因的两条条带，2、3含有两条条带，2中其中一条条带为1.5kb，3中其中一条条带为1kb，由于牛凝乳酶的基因大小为1.5kb，所以对应电泳图是菌落2很可能是含目的基因的重组质粒。
（4）蛋白质工程的过程为：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因），其前提是基因工程，故运用蛋白质工程技术从大肠杆菌中获得活性更强的凝乳酶，具体过程为：③分析突变蛋白功能，设计结构→④改变凝乳酶基因的特定序列→⑥将改变后的凝乳酶基因与质粒重组→①重组DNA分子导入大肠杆菌→⑤培养细胞后提纯突变蛋白。
22.【答案】（1）微生物的分解　　CO
（2）不同植物凋落叶的分解速率有差异
（3）不加凋落叶　　海南椴组、任豆组的土壤来源CO 的释放量略低于对照组，其他组土壤来源CO 的释放量显著高于对照组
（4）快　　海南椴和任豆理由是这2种树能抑制SOC分解，减少SOC的输出　　自生、协调、循环、整体
【解析】（1）由题可知，凋落叶的分解对土壤有机碳（SOC）的含量及碳排放均有影响，通过微生物的分解作用，可将分SOC转变为CO2等无机物，进入到大气中。
（2）凋落叶的质量损失率越高，分解速率越快，由表可知，不同植物凋落叶质量损失率不同，说明不同植物凋落叶的分解速率有差异。
（3）该实验是研究不同凋落物对SOC输出的影响，自变量为不同的凋落物，因变量为土壤CO2释放量。该实验需要空白对照，即对照组的处理方式为不加凋落叶，无关变量与其他实验组保持一致。土壤CO2释放量包括土壤来源CO2和凋落物来源CO2，据图可知，除海南椴和任豆外，其余树种的凋落叶都促进了SOC的分解，得出此结论的依据是海南椴组、任豆组的土壤来源CO2的释放量略低于对照组，其他组土壤来源CO2的释放量显著高于对照组。
（4）为了促进土壤养分的循环与利用，在处于植被恢复初期的地区，可以选择凋落叶分解速率较快的几种树。由（3）可知，海南椴和任豆能抑制SOC的分解，因此，在处于植被恢复中后期的地区，可选择的树种为海南椴和任豆，理由是这2种树能抑制SOC分解，减少SOC的输出。此生态修复工程中遵循了自生、协调、循环、整体原理。
23.【答案】（1）胰蛋白（胶原蛋白）95％的空气和5％的CO2
（2）无性　　超数排卵　　纺锤体-染色体复合物
（3）卵细胞细胞质可使体细胞核全能性得到表达，同时卵细胞的细胞质营养物质丰富
（4）利用去甲基化酶除去克隆胚胎基因组中组蛋白的甲基化，进而降低组蛋白甲基化水平，促进胚胎发育
【解析】（1）研究者选择出生夭折的猕猴作为供核个体，先用酒精对其腹部进行消毒，取相应组织，剪碎用胰蛋白（胶原蛋白）酶处理后，置于含有95％的空气和5％的CO2混合气体的CO2培养箱中进行培养，其中的二氧化碳能维持培养液的pH。
（2）克隆猴的获得属于无性繁殖，该过程需要先获得卵母细胞，为获得更多的卵母细胞，需要对母猴进行超数排卵处理，然后对卵母细胞去核，实际上去掉的是纺锤体-染色体复合物。
（3）核移植过程中用去核卵母细胞作为受体细胞的原因是①卵细胞细胞质可使体细胞核全能性得到表达，同时卵细胞的细胞质营养物质丰富；②卵母细胞大，便于操作，更易成功。
（4）非人灵长类的体细胞核移植非常困难，研究发现体细胞克隆猴胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。该信息给我们的思路是，为了促进非人灵长类的体细胞核移植的成功合适的做法是设法利用去甲基化酶除去克隆胚胎基因组中组蛋白的甲基化，进而降低组蛋白甲基化水平，促进胚胎发育。
24.【答案】（1）防止冷凝水落入培养基造成污染、避免培养基中的水分过快蒸发
（2）灼烧灭菌
（3）抗生素A　　耐药性（抗药性）
（4）增加一组不含抗生素的滤纸片进行的实验
【解析】题意分析，根据表格内容可知，使用抗生素A时，滤纸片周围出现了透明圈，且透明圈最大，故抗生素A的抗菌效果最好。为了增强本实验的说服力，本实验应增加一组不含抗生素的滤纸片进行的实验作为空白对照组，以排除滤纸片本身对实验结果的影响。
（1）为了防止培养皿盖上的冷凝水滴落到培养基上污染培养基以及避免培养基中的水分过快蒸发，用平板培养细菌时一般需要将平板倒置。
（2）接种工具常用的灭菌方法为灼烧灭菌。
（3）根据表格可知，使用抗生素A时，滤纸片周围出现了透明圈，且透明圈最大，故为了达到良好的抗菌效果，最好应选用抗生素A；在排除杂菌污染的情况下，第4组的透明圈中出现了一个菌落，说明细菌对抗生素D产生了耐药性（抗药性）。
（4）该实验还缺少一组空白对照实验，应增加一组不含抗生素的滤纸片进行的实验，以排除滤纸片本身对实验结果的影响，这样可以增强实验的说服力。
25.【答案】(1)磷酸二酯键　SalⅠ
(2)氨苄青霉素抗性　选择
(3)白色　目的基因与质粒连接后使lacZ′被破坏，不能合成α-肽　编码α-肽的DNA序列缺失，其他序列正常
【解析】(1)由图乙可知，获取完整的目的基因需要用SalⅠ酶切割，而质粒上也有SalⅠ酶，所以可用SalⅠ酶处理pUC18质粒和图乙中的DNA片段。(2)图甲中质粒上含有氨苄青霉素抗性基因，未发生转化的大肠杆菌因没有该质粒而不能抗氨苄青霉素，故不能在含有氨苄青霉素的培养基上生长，从而能筛选出含有(重组)质粒的大肠杆菌。(3)重组质粒中的lacZ′基因中因插入目的基因而失去原有功能，无法编码α-肽形成Z酶，不能催化底物(X-gal)水解产生蓝色物质，故含有重组质粒的大肠杆菌在含有X-gal的培养基上形成的菌落颜色为白色。将目的基因导入大肠杆菌的操作步骤中，可能会产生以下四种大肠杆菌：①含有质粒，②含有重组质粒，③只含有目的基因，④不含质粒或目的基因。若将以上四种大肠杆菌接种到含有氨苄青霉素的培养基中，则只有①②两种大肠杆菌中因含有氨苄青霉素抗性基因而可以存活。若大肠杆菌中的Z酶基因完整，则两种大肠杆菌在含X-gal的培养基上都生成蓝色菌落，无法区分；根据题干信息“已知α-肽、缺失α-肽的Z酶片段单独存在时均无Z酶活性，共同存在时就会表现出Z酶活性”分析可知，若大肠杆菌中的Z酶基因编码α-肽的DNA序列缺失，其他序列正常,则大肠杆菌①中含有质粒(含有lacZ′基因，能编码α-肽)和不完整的Z酶基因(能编码缺失α-肽的Z酶)，会表现出Z酶活性而形成蓝色菌落；大肠杆菌②中含有重组质粒(lacZ′基因被目的基因破坏，不能编码α-肽)和不完整的Z酶基因(能编码缺失α-肽的Z酶)，不会表现出Z酶活性而形成白色菌落，从而可根据菌落颜色将大肠杆菌①②区分开来。

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