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广东省韶关市2024-2025学年高二下学期6月期末生物试题
一、单选题
1．南岭国家森林公园是广东省最大的自然保护区，也是国家4A级景区。园内有苔藓植物206种、蕨类植物188种、裸子植物29种、被子植物2109种，动物有蝶类340多种及多种鸟类、哺乳动物等。下列叙述错误的是（　　）
A．设立南岭国家森林公园属于就地保护
B．公园可供游览观光体现了生物多样性的直接价值
C．园内丰富的动植物体现了生物多样性中的种群多样性
D．南岭国家森林公园生物多样性的间接价值大于直接价值
2．利用光学显微镜可观察多种多样的细胞和实验现象。下列叙述正确的是（　　）
A．观察细胞中的脂肪时，脂肪颗粒被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色
B．观察鱼的红细胞时，细胞核、线粒体和核糖体清晰可见
C．观察细胞质流动时，黑藻叶肉细胞呈正方形，叶绿体围绕细胞核运动
D．观察洋葱细胞质壁分离时，在低倍镜下无法观察到质壁分离现象
3．生物技术的进步在给人类带来福祉的同时，也会引起人们对它安全性的关注。下列生物技术需要严格禁止的是（　　）
A．农作物转基因技术 B．生殖性克隆人技术
C．设计试管婴儿技术 D．蛋白质工程技术
4．1965年我国科学家完成了结晶牛胰岛素的合成，摘取了人工合成蛋白质的桂冠。人工合成蛋白质很困难，其原因有很多。关于其原因的叙述，错误的是（　　）
A．组成蛋白质的元素种类很多 B．蛋白质的空间结构十分复杂
C．氨基酸的排列顺序千变万化 D．肽链盘曲、折叠的方式多样
5．我国卫生部门规定1mL自来水检出的菌落总数不得超过100个（37℃培养48h）。研究人员拟对自来水中的大肠杆菌进行检测与培养，培养基配方如下表所示。下列叙述正确的是（　　）
成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示剂 琼脂
含量（g） 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL
A．须将待测水样进行梯度稀释后再涂布于平板上
B．检测时不需要设一个不接种的平板作为对照
C．指示剂的作用是与培养基上各种菌落发生显色反应
D．在配制上述培养基时，需要先调pH再灭菌
6．咸菜是潮汕饮食文化中极具代表性的传统食品之一。其制作方法是：将芥菜洗净后晒干，一层芥菜一层粗盐铺于陶瓷瓮中，再用干净石块压实，初腌两三天后菜叶便会渗出水分，继续加入盐水，密封容器口，发酵15天左右即可食用。下列叙述正确的是（　　）
A．初腌加入大量粗盐是为了抑制杂菌的生长和促进植物细胞主动吸收盐分
B．密封容器口的目的是为乳酸菌创造无氧环境，从而产生乳酸和二氧化碳
C．利用干净石块压实既促进菜叶渗出水分又能保证菜叶完全浸没在盐水中
D．整个发酵过程乳酸和亚硝酸盐的含量都会呈现先增加后减少的变化趋势
7．3D细胞培养是一种通过物理或化学手段使动物细胞在三维空间中生长、分化和相互作用，从而更好地模拟细胞在体内环境生长的技术。类器官是一种在体外利用干细胞培养出的3D细胞培养物，类似于人体内器官的组织结构，但缺乏血管系统。下列叙述正确的是（　　）
A．3D细胞培养过程中需要定期更换培养液，从而营造无菌环境
B．传统细胞培养大多单层贴壁生长，无法模拟组织内的复杂环境
C．只有从胚胎中提取的干细胞才能诱导分化成类器官的各种细胞
D．类器官能够直接移植到患者体内，有效解决了器官短缺的问题
8．增强子是一段特殊的DNA序列，位于基因上游或下游，可与特定蛋白结合后激活基本启动子，驱动相应基因在特定组织中表达，机理如图所示。下列叙述正确的是（　　）
A．增强子编码氨基酸的序列
B．增强子在细胞周期中的各时期均可发挥作用
C．增强子的作用不受基因转录方向的限制
D．基本启动子是DNA聚合酶识别和结合的位点
9．下列对某目标DNA进行琼脂糖凝胶电泳鉴定实验的叙述，错误的是（　　）
A．PCR实验中使用的离心管、枪头等需经高压灭菌处理
B．应在凝胶完全凝固前小心拔出梳子，形成加样孔
C．待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时，停止电泳
D．若电泳鉴定结果出现不止一条带，可能是复性温度低导致的
10．生物技术是探索生命奥妙、推动科学发展的重要手段。下列所用的科学技术方法不能够达到对应研究目的的一项是（　　）
选项 科学技术方法 研究目的
A 荧光标记法 构建细胞膜的流动镶嵌模型
B 差速离心法 探究PCR扩增的DNA分子数
C 同位素标记法 分析分泌蛋白的形成与运输
D 抗原—抗体杂交技术 检测目的基因是否成功表达
A．A B．B C．C D．D
11．变形虫的移动和摄食是通过细胞表面的伪足完成的。变形虫通过改变伪足的形状和方向从而移动；通过伪足包裹食物，然后进行胞内消化。这一事实不能说明（　　）
A．变形虫的细胞膜具有流动性
B．摄食后形成的囊泡与高尔基体结合
C．变形虫细胞内能合成相应的消化酶
D．伪足是变形虫生存和繁衍的重要机制
12．紫花苜蓿因其适应性强、产量高、营养丰富等优点，成为使用最广泛的豆科牧草，但紫花苜蓿容易造成家畜臌胀病。百脉根因其植株富含缩合单宁，能防止反刍动物臌胀病的发生。研究人员利用植物体细胞杂交技术获得抗臌胀病的新型苜蓿，培育过程如图所示。下列叙述正确的是（　　）

A．两种植物细胞酶解前应分别置于略低于细胞液渗透压的溶液中
B．可用高Ca2+-高pH诱导融合，融合成功的标志是细胞核的融合
C．同种融合或未融合的原生质体因无法进行细胞呼吸而不能存活
D．培养至愈伤组织后还需要进行植物细胞培养才能达到实验目的
13．基因编辑的困难在于精准地将DNA片段插入基因组的特定位置。近期，我国科学家发现R2逆转座子可将DNA片段特异性插入目的DNA区域，但插入效率较低。科学家利用蛋白质工程等技术将R2逆转座子改造后，实现了在哺乳动物细胞中高效插入。R2逆转座子和DNA片段插入过程如图所示。下列叙述错误的是（　　）

A．R2逆转座子也有DNA连接酶的活性
B．合成第二条DNA链的模板是R2 RNA
C．插入的目的序列应设计在R2 RNA中
D．可通过改造R2蛋白结构提高插入效率
14．线粒体中绝大多数蛋白质是由核基因编码，在细胞质中合成后定向转运至线粒体内才能执行生理功能，此类蛋白质的运输需要有定位信号（即由20-50个氨基酸组成的导肽）。如图示前体蛋白从细胞质基质输入到线粒体基质的过程，内膜两侧的电位差是前体蛋白进入线粒体基质的关键驱动力之一。下列叙述正确的是（　　）
A．前体蛋白和导肽都在细胞质基质中的游离的核糖体上合成
B．Hsp70能够与前体蛋白结合使其保持折叠状态以利于跨膜
C．前体蛋白输入到线粒体基质过程中消耗的能量只来自ATP
D．前体蛋白进入线粒体基质后被Hsp60切除导肽并重新加工
15．实时荧光定量PCR（qPCR）是在传统PCR基础上引入荧光信号检测系统，通过实时监测荧光信号累积量来定量分析扩增产物数量的技术。qPCR使用的DNA探针的5'端和3'端分别带有一个荧光报告基团（FAM）和一个淬灭基团（TAMRA），探针完整时FAM的荧光被TAMRA吸收，检测不出荧光信号；探针被切割时FAM和TAMRA分离，释放荧光信号，检测过程如图所示。下列叙述正确的是（　　）
A．反应体系中需加入Mg2+以激活Taq酶，帮助其催化复性过程
B．引物能使Taq酶从引物的5'端开始连接脱氧核苷酸以形成新链
C．Taq酶能水解探针的5'端脱氧核苷酸，使FAM和TAMRA分离
D．随着循环次数的增加，PCR产物量快速增长，荧光信号逐渐减弱
16．木栓酮是药用植物雷公藤的次生代谢产物，具有抗肿瘤、消炎抗菌等多种功效。从雷公藤体内提取木栓酮的效率低。研究人员将雷公藤的木栓酮合酶基因引入酵母细胞中构建了酵母工程菌使木栓酮产量有所提升，但产量达不到工业生产要求且有副产物香树脂醇产生。为此研究人员通过分析木栓酮合酶的氨基酸序列并改造其关键氨基酸位点，以期提高木栓酮的产量，结果如下表所示。下列分析正确的是（　　）
改造的氨基酸位点 木栓酮（mg/L） 香树脂醇（mg/L）
野生型 21.1 12.7
11 18.5 18.9
259 0 28.3
280 27.8 11.7
548 14.2 17.6
552 24.8 22.3
A．木栓酮是雷公藤生长和生存所必需的物质
B．利用蛋白质工程和发酵工程构建酵母工程菌
C．改造280位点可以提高木栓酮合酶的催化活性
D．同时改造多个位点可进一步提高木栓酮合酶性质
二、解答题
17．基塘是三角洲地区特有的一种土地利用类型。三角洲内地形低洼，人们将洼地深挖成塘、淤泥堆积为基，塘中养鱼，基上种桑、蔗、花、草、果等，从而形成基塘。基塘是典型的生态农业用地，可为人类提供多项服务功能。研究发现，随着城镇化和工业化的发展，某地基塘土地总面积呈下降趋势。对该地2000年、2017年的基塘生态系统服务价值进行估算，结果如下表所示。
价值类别 具体的价值组分 2000年 2017年
价值量/亿元 占比/% 价值量/亿元 占比/%
供给类 塘鱼生产 34.17 2.06 72.22
6.19
调节类 调节气候 1594.27 95.93
1004.90 86.16
供水蓄水 23.70 1.43 14.58 1.25
支持类 维持生物多样性 2.22 0.13
1.41 0.12
保持土壤 4.09 0.25
3.20 0.27
文化类 旅游休闲 3.46 0.21 70.06 6.01
合计 1661.91 100.00 1166.37 100.00
回答下列问题：
(1)三角洲内基塘常用“蚕沙喂鱼、塘泥培桑”，这体现了生态工程的 原理。
(2)基塘的间接价值体现在价值类别中的 。从生态足迹角度分析，基塘土地总面积减少可能是增加了 （填“建设用地”、“草地”、“林地”或“耕地”）。
(3)据表分析，基塘各价值组分中，对总价值的贡献最大和最小的分别是 。与2000年相比，2017年基塘生态系统服务价值的主要变化是 。
(4)基于基塘生态系统服务价值的变化特点，为基塘的可持续发展提一条建议 。
18．乳酸菌发酵后离心得到的上清液（CFS）中含有多种天然抑菌物质，如乳酸、H2O2和细菌素。其中，细菌素是一种小分子多肽，易被人体吸收且不易产生耐药性，具有成为天然防腐剂的潜力。研究人员从藏区牦牛发酵乳中分离出多株乳酸菌，采用双层琼脂平板法鉴定其产生的抑菌物质分别对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌能力，过程如图所示，加入不同CFS后上层平板出现的抑菌圈直径如下表所示。
金黄色葡萄球菌a 大肠杆菌a 金黄色葡萄球菌b 大肠杆菌b
20.45 19.18 18.43 17.18
E12 13.14 12.91 14.25 11.12
ED1 18.86 16.52 16.33 0
ED3 18.15 15.22 0 14.59
注：a指的是未经处理的CFS；b指的是去除乳酸和H2O2的CFS。
回答下列问题：
(1)MRS培养基可用 法灭菌，步骤③中继续接种乳酸菌的目的是 。
(2)利用双层琼脂平板法开展实验时，上层培养基需熔化并冷却至一定温度后再分别加入大肠杆菌和金黄色葡萄球菌混匀，原因是 。推测上层培养基的琼脂浓度 （填“大于”、“小于”或“等于”）下层培养基琼脂浓度，以利于CFS的扩散。步骤⑥在CFS中加入H2O2酶和NaOH的目的是 。
(3)据表分析，应选择 作为后续研究的菌株。为探究细菌素的抑菌机制，研究人员提纯该菌株的细菌素，并与大肠杆菌菌液混合，测定溶液中的蛋白质和核酸的OD值（OD值大小一般与溶液浓度成正比），结果如下图所示。
结果表明，细菌素的抑菌机制可能是 。
(4)有人提出将上述所选菌株产生的细菌素用作食品防腐剂。为判断这一提议的合理性，你认为还需要进一步研究的问题是 （答出一点即可）。
19．双特异性抗体（双抗）可同时识别两种抗原，在癌症、免疫疾病等治疗中有很好的应用前景。二源杂交瘤细胞常使用HAT培养基筛选，其原理是HAT培养基可阻断DNA合成的主要途径，迫使细胞启动补救途径（需HGPRT酶和TK酶共同作用）合成DNA。研究人员将改造后的A、B两种二源杂交瘤细胞和未改造的B细胞（体外无法长期存活）和骨髓瘤细胞（代谢缺陷导致死亡）。相关细胞的DNA合成途径如下表所示。
DNA合成途径 主要途径 补救途径
HGPRT TK酶
B淋巴细胞 + + +
骨髓瘤细胞 + - +
二源杂交瘤细胞 + + +
改造后的A杂交瘤细胞 + a +
改造后的B杂交瘤细胞 b c d
注：“+”表示该代谢过程正常，“-”表示该代谢过程缺失，“a-d”表示该代谢过程未知。
回答下列问题：
(1)诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合的常用方法是 。在两两融合的细胞中，HAT培养基能够筛选出二源杂交瘤细胞，原因是 。
(2)无法使用两种抗原同时刺激一个B细胞的方式来产生双抗，原因是 。因此研究人员制备了A、B两种杂交瘤细胞。再改造A、B两种杂交瘤细胞，最后利用HAT培养基筛选出能产双抗的杂交瘤细胞。据表推测，改造后两种杂交瘤细胞a、b、c、d的代谢情况分别是 （用“+”或“-”表示）。
(3)抗体由两条相同的较大的肽链（重链）和两条相同的较小的肽链（轻链）组成。由两种杂交瘤细胞融合而来的双杂交瘤细胞会产生 种肽链，而这些重、轻链在细胞中会随机组合，因而还需对抗体进行筛选。
20．我国研究者首次在猪的体内成功培养出了含有人体细胞的中期肾脏（中肾），为解决供体器官短缺这一世界难题提供了新的方向。他们通过基因编辑技术敲除猪成纤维细胞中的肾脏发育关键基因SIX1和SALL1，再采用体细胞核移植技术获得猪早期胚胎，并将患者自身改造后的iPS细胞注射到猪早期胚胎中，形成嵌合胚胎，进而在代孕母猪体内培育出人源化中肾，操作流程如图所示。
回答下列问题：
(1)图中步骤①可以采用 技术对卵母细胞去核，步骤⑥中嵌合胚胎通常培养到 阶段再移植入代孕母猪体内，所得人源化中肾细胞的基因型是 （填“相同”或“不同”）的。
(2)利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对猪成纤维细胞DNA进行处理，由向导RNA定向引导Cas9蛋白与目的基因结合，Cas9蛋白对目的基因进行精准切割，使 键断裂，从而敲除猪成纤维细胞中SIX1和SALL1基因，该操作的目的是 。
(3)该项技术经临床试验后，猪体内可能无法形成完整中肾或者出现中肾在猪体内无法存活，推测原因分别是 。
(4)上述研究是通过在动物身上“种植”出可供移植的人体器官，以期解决供体器官短缺的问题。你是否认同这种解决方案，并说出理由 （理由答出一点即可）。
三、实验题
21．由新城疫病毒（NDV）引起的新城疫是严重威胁家禽养殖业的重大疫病。疫苗免疫是预防NDV的重要手段。血凝素-神经氨酸酶（HN）是NDV的主要抗原。研究人员利用HN基因开展针对NDV的mRNA疫苗的开发，研究流程如图所示。
回答下列问题：
(1)常用 技术获取HN基因，为确保HN基因与载体正确连接，在设计引物时，需在原有引物的 端加上 的酶切位点。
(2)HEK293细胞培养时表现为贴壁生长。当HEK293细胞出现接触抑制的现象时，用 处理细胞，然后离心收集细胞并传代培养，整个培养过程中需提供 的气体环境。
(3)步骤③中，研究人员用EcoRⅠ和XbaⅠ同时酶切提取质粒，若EcoRⅠ和XbaⅠ识别位点之间相距600bp，在答题卡中将重组载体酶切后的电泳结果在对应位置的条带涂黑 。
(4)真核细胞基因转录后的mRNA需进一步加工才能成熟，如在5'端添加甲基鸟苷帽子（加帽），是核糖体与mRNA结合所必需的，并使得mRNA不会被核酸酶识别。步骤④体外转录的mRNA进行加帽的原因是 。
(5)本研究采用体外转录系统构建了表达HN蛋白的mRNA疫苗。在该mRNA疫苗投入使用前，还应开展的研究是 。
参考答案
1．C
2．A
3．B
4．A
5．D
6．C
7．B
8．C
9．B
10．B
11．B
12．C
13．B
14．A
15．C
16．C
17．(1)循环
(2) 调节类和支持类 建设用地
(3) 调节气候、维持生物多样性 调节价值减少，供给和文化价值增加
(4)合理规划建设用地，减少对基塘的侵占
18．(1) 高压蒸汽灭菌 扩大培养乳酸菌
(2) 防止温度过高杀死指示菌 小于 排除乳酸和 H O 对抑菌结果的干扰
(3) ED12 破坏大肠杆菌的细胞膜
(4)细菌素在食品中的稳定性如何（答案合理即可）
19．(1) 聚乙二醇（PEG）融合法、灭活病毒诱导法、电融合法 B-B融合细胞无法长期存活，骨髓瘤-骨髓瘤融合细胞代谢缺陷导致死亡，二源杂交瘤细胞可通过补救途径合成DNA从而在HAT培养基中存活
(2) 一个B细胞只能产生一种特异性抗体 +、+、-、-
(3)4/四
20．(1) 显微去核 桑葚胚或囊胚 不同
(2) 磷酸二酯 避免发育成猪肾脏
(3)由于敲除了猪肾脏发育关键基因SIX1和SALL1；由于有人的细胞，出现排斥反应
(4)认同，这种解决方案培育出含有人类细胞的器官，能解决供体器官短缺的问题
21．(1) PCR/聚合酶链式反应 5， KpnⅠ、BamHⅠ
(2) 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 95%空气和5%的CO2
(3)
(4)保护mRNA免受降解 ；可以作为识别标志，帮助核糖体小亚基通过翻译起始因子结合mRNA，启动蛋白质合成
(5)体外活性表达和免疫原性研究

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