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第二十四单元　基因工程　生物技术的安全性与伦理问题
(75分钟　100分)
考情分析
高考对接点 基因工程的原理、技术及应用为常考点，生物技术的安全性与伦理问题是高考的轮考点，在高考中以选择题或非选择题的形式考查
单元疑难点 基因工程的技术及应用、生物技术伦理问题的判断
滚动知识点 细胞工程
典型情境题 1、2、3、5、6、7、8、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21
一、选择题(本大题共12小题，每小题2分，共24分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。)
1.神经生长因子(NGF)的化学本质为蛋白质，其对神经细胞的生长、分化和再生都有重要作用。NGF对一些神经系统退行性疾病(如青光眼和阿尔茨海默病)有良好的治疗效果。我国科研团队在转基因猪生物反应器领域取得重要研究进展，在国际上首次利用转基因猪的唾液腺作为生物反应器，高效合成了人神经生长因子。在此之前，科研人员尝试过用转基因大肠杆菌获得NGF，也尝试过用鼠唾液腺作为生物反应器，效果均不太理想。下列叙述错误的是
A.常用显微注射法将含有NGF基因的重组质粒导入猪受精卵
B.大肠杆菌表达的NGF效果不理想，可能是大肠杆菌没有内质网和高尔基体
C.鼠的NGF(mNGF)与人的NGF(hNGF)的稳定性和生物活性相同
D.需要将NGF基因和唾液腺中特异性表达的基因的启动子等组合在一起
2.绿色荧光蛋白(GFP)是从水母体内发现的，是一条由238个氨基酸组成的多肽链，经紫光或蓝光照射会发出绿色荧光。GFP的独特之处在于其在有氧条件下不需要依赖任何辅助因子或特定的酶即可产生荧光，广泛应用于显像和追踪技术、筛选和纯化、抗体生产等方面。编码某种蛋白质的A基因来源于某种植物，为研究这种蛋白质在植物体内的分布，某研究小组利用GFP基因设计了相关实验，如图所示。下列叙述错误的是
A.构建GFP-A融合基因需要用到的工具酶有限制酶、DNA聚合酶
B.GFP-A融合基因的表达受诱导物的控制
C.转入GFP-A融合基因的植物原生质体，经植物组织培养技术培养得到植株
D.经紫光照射后，检测到绿色荧光的部位即为这种蛋白质在植物体内分布的部位
3.风肉一般是以鲜肉为原料，用食盐腌制后，经风干和微生物后发酵而成的。在后发酵期，风肉含有耐盐的微生物。某实验小组为研究耐盐微生物的耐盐基因，获得纯培养物A的耐盐基因X，该实验小组应用纯培养物A提取了DNA。下列叙述错误的是
A.实验小组为获得耐盐纯培养物A，使用的培养基应是选择培养基
B.在酸性条件下DNA与二苯胺试剂在沸水浴中会产生蓝色的化合物
C.DNA溶于酒精，但某些蛋白质不溶于酒精
D.DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同
4.科研工作者利用基因工程技术将马铃薯中已知序列的高赖氨酸蛋白基因(SBgLR)转入玉米细胞获得高赖氨酸玉米新品种。具体操作流程如图所示，其中强启动子能驱动基因的持续转录。下列叙述错误的是
A.从马铃薯叶片中提取目的基因时，研磨过程中在DNA提取液中加入DNA酶抑制剂
B.构建基因表达载体时，应选用的限制酶是BamHⅠ和HindⅢ
C.将重组质粒导入经过CaCl2处理的农杆菌
D.筛选转化的玉米细胞时，需在培养基中加入卡那霉素，不需要加入潮霉素
5.油菜中基因G和g控制菜籽的芥酸含量，而芥酸会降低菜籽油的品质。研究人员拟利用高芥酸油菜品种(gg)和水稻抗病基因R培育低芥酸抗病油菜新品种(GGRR)，育种过程如图所示。下列有关叙述错误的是
A.过程①发生基因突变，基因g中的碱基可能发生增添、缺失或替换
B.过程②需要用到限制酶、DNA连接酶和载体等基因工程的工具
C.过程③还可以利用单倍体育种，需用秋水仙素处理萌发的种子
D.过程③的原理是基因重组，一般需要较长时间的自交和筛选
6.重组PCR技术是一项新的PCR技术，可将原来两个不相关的DNA连接起来，组成一个新的分子。实验小组从猪源大肠杆菌中扩增得到LTB基因和ST1基因片段，用重组PCR技术构建了LTB-ST1融合基因，融合基因的制备过程如图所示。下列叙述错误的是
A.PCR实验中使用的微量离心管、蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌
B.引物P2与引物P3的碱基不能部分互补
C.耐高温的DNA聚合酶需要被Mg2+激活后才能发挥作用
D.杂交链延伸生成LTB-ST1融合基因的过程中，不需要加入引物
7.在国际蛋白质结构预测竞赛(CASP)上，新一代AlphaFold人工智能系统，基于氨基酸序列，精确地预测了蛋白质的空间结构。其准确性可以与使用冷冻电子显微镜、X射线晶体学等实验技术解析的空间结构相媲美。下列叙述正确的是
A.蛋白质结构的多样性与肽键有关
B.每一种蛋白质都有其独特的空间结构，与表现其生物学活性无关
C.此系统不能应用于蛋白质工程，以创造更符合人类需求的蛋白质
D.蛋白质工程可以制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求
8.天然的人白细胞介素-2(IL-2)是一种由133个氨基酸残基组成的多肽，该多肽含有3个半胱氨酸，其中一个半胱氨酸(Cys125)残基以游离的方式存在，另两个半胱氨酸(Cys58和Cys105)缩合成活性所必需的二硫键，人们利用定位诱变技术将基因中编码Cys125的碱基TGT转换成TCT或GCA，这不仅避免了错误配对发生，而且产生的新IL-2的生物活性不受影响，其热稳定性也得到了明显改善。下列叙述错误的是
A.天然的IL-2是由白细胞分泌的具有免疫能力的物质
B.人工改造合成新IL-2属于蛋白质工程
C.可通过直接改造IL-2的氨基酸来制造新IL-2从而改善其稳定性
D.利用定位诱变后的基因表达新IL-2的过程遵循中心法则
9.为增加玉米的抗旱性，研究者从某微生物中提取出抗旱基因，将其与载体重组，再借助农杆菌导入玉米细胞，下图表示该转基因玉米的培育过程，其中a、b表示具体的结构，①~④表示具体的过程。下列叙述正确的是
A.从微生物细胞中获取的基因一般需要加工后才能作为目的基因导入玉米细胞
B.a表示抗旱基因，抗旱基因有2个游离的磷酸基团，且游离的磷酸基团在3'端
C.b表示愈伤组织，③与④过程中所需植物激素的种类、含量和比例相同
D.采用抗原—抗体杂交法检测，若没有杂交带出现，说明目的基因导入不成功
10.我国科研人员经人工培育获得的四倍体鱼具有生长速度快、肉质好、抗病力强的优点。研究者将这种四倍体鱼与正常二倍体鱼杂交，所得后代具备与四倍体鱼相似的优点。选择将此种后代投入市场而非直接将四倍体鱼投入市场，主要目的是
A.有效保护知识产权 B.充分利用杂种优势
C.避免带来生物安全问题 D.人为控制生物进化的速度
11.治疗性克隆是把患者的体细胞移植到去核的卵母细胞中，经过一定的处理使其发育成囊胚，再利用囊胚建立胚胎干细胞(ES细胞)，然后在体外进行诱导，使其分化成特定的组织或器官(如皮肤、软骨、心脏、肝脏、肾脏等)，再将组织或器官移植到病人身上。下列相关叙述错误的是
A.治疗性克隆过程中用到了核移植技术
B.治疗性克隆的优点是避免了同种异体器官移植过程中的免疫排斥反应
C.ES细胞可来自早期胚胎，如囊胚中的滋养层细胞
D.“克隆”过程是建立在胚胎干细胞的增殖、分化的基础上的
12.试管婴儿技术日趋成熟和完善，帮助很多不孕夫妇圆了拥有自己儿女的梦想。随后，又出现了“设计试管婴儿”技术，其使出生的试管婴儿更符合父母的期望。下列相关叙述正确的是
A.试管婴儿技术应用了体外受精、早期胚胎培养两大技术
B.与“设计试管婴儿”相比，试管婴儿需要经过遗传学诊断
C.试管婴儿技术属于有性生殖，克隆技术属于无性生殖
D.鼓励发展基因编辑技术来“设计试管婴儿”，以解决不孕问题
二、选择题(本大题共4小题，每小题4分，共16分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对的得4分，选对但不全的得2分，有选错的得0分。)
13.害虫损伤番茄的叶片后，叶片细胞的细胞壁能释放出一种类激素物质，这种物质可以扩散到番茄的其他部位，诱导细胞内蛋白酶抑制剂基因表达，合成蛋白酶抑制剂，导致害虫因不能消化食物而死亡。科学家利用转基因技术把番茄的蛋白酶抑制剂基因转移到玉米中，使玉米获得了与番茄相似的抗虫性状，从而能有效抵御玉米螟的危害。下列叙述正确的是
A.玉米合成蛋白酶抑制剂的具体部位是核糖体
B.这种抗玉米螟玉米品种的培育技术属于转基因技术
C.蛋白酶抑制剂基因的获取是培育转基因玉米的核心步骤
D.杂草一般不会出现抗玉米螟性状
14.大肠杆菌β-半乳糖苷酶(Z酶)可催化底物X-gal水解产生蓝色物质。在pUC18质粒中，LacZ'编码Z酶氨基端的一个片段(称为α-肽)，该质粒结构及限制酶识别位点如图甲所示。已知α-肽、缺失α-肽的Z酶片段单独存在时均无Z酶活性，共同存在时就会表现出Z酶活性。利用图乙中的DNA片段与pUC18质粒进行基因工程操作。用重组质粒转化改造后的大肠杆菌，将其接种到含氨苄青霉素和X-gal的固体培养基上进行培养。下列叙述正确的是
A.限制酶使pUC18质粒和DNA片段的磷酸二酯键断裂
B.限制酶主要来源于原核生物，其不能切割原核生物自身DNA分子
C.T4 DNA连接酶的特点是连接平末端的效率相对较高
D.培养基中含重组质粒的大肠杆菌菌落不是蓝色的
15.核基因CCR5控制的CCR5蛋白质是HIV入侵人体细胞的主要受体之一。研究人员对受精卵进行基因编辑，将CCR5基因中的32个碱基去除，使之无法在细胞表面表达正常受体，以达到预防艾滋病的目的。下列相关分析正确的是
A.该变异类型属于染色体变异
B.编辑后的基因与原基因不能互为等位基因
C.编辑后的基因中(A+G)/(C+T)的值可能改变
D.基因编辑能改变人类基因库，要严防滥用
16.转基因食品已大量进入我们的日常生活，如转基因西红柿、转基因草莓等，涉及的问题甚至关系到国家之间的贸易竞争。下图为中国市场的转基因大豆油的部分包装图。下列关于转基因大豆的叙述，正确的是
A.转基因大豆培育过程中可能用到抗病、抗虫等抗性基因
B.目的基因的受体细胞只能是大豆受精卵，不能是体细胞
C.种植转基因大豆有可能因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性
D.固氮菌的固氮基因也是必需的目的基因之一
三、非选择题(本大题共5小题，共60分。)
17.(12分)光敏色素基因在调节作物生长发育中具有重要作用。为探讨玉米中光敏色素基因A(含大约256个碱基对)在棉花种质资源创制中的利用价值，研究人员将光敏色素基因A转入棉花中，对棉花受体细胞进行检测，并通过电泳技术分析结果。该过程所用质粒与含光敏色素基因A的DNA上相关限制酶的切割位点分别如图甲、图乙所示，电泳检测结果如图丙所示。请回答下列问题：
(1)基因工程技术基本步骤中的核心步骤是　　　　　　　　　　　　　　　　。该过程中，应选用　　　　　　　　　　　　这两种限制酶。
(2)PCR反应过程中每次循环都要经历目的各不相同的两次升温和一次降温，两次升温代表的过程分别是　　　　，一次降温代表的过程是　　　　。
(3)据图丙可知，1~4号棉花中，光敏色素基因A导入的情况是　　　　　。
18.(12分)自然界中很少出现蓝色的花，天然蓝色花产生的主要原因是花瓣细胞液泡中花青素在碱性条件下显蓝色。我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因(idgS)及其激活基因(sfp)构建基因表达载体(如下图所示，图中PmeⅠ、BamHⅠ、SpeⅠ、SacⅠ为不同的限制酶)，采用农杆菌转化法将基因表达载体导入白玫瑰细胞，在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝。请回答下列问题：
(1)农杆菌细胞内含有Ti质粒，当它侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的　　　　(可转移的DNA)转移至被侵染的细胞，并且将其整合到植物细胞的　　　　。根据农杆菌的这种特点，如果将目的基因插入Ti质粒某片段中，通过农杆菌的转化作用，就可以将目的基因导入植物细胞。
(2)根据受体植物的不同，所用的具体转化方法有所区别。请简述两种转化方法：　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
(3)将sfp基因插入Ti质粒时使用的限制酶是　　　　，sfp和idgS基因表达时　　　　(填“是”或“不是”)以T-DNA的同一条链为模板进行转录的。
(4)在目的基因的检测与鉴定过程中，通过PCR技术可检测　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　(答出两点)。
19.(12分)一种天然蛋白t-PA(组织型纤溶酶原激活物)能高效降解因血浆纤维蛋白凝聚而形成的血栓，是急性心肌梗死和脑血栓的急救药，但是急性心肌梗死患者注射大剂量的t-PA会诱发颅内出血。研究证实，将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低其诱发出血的副作用。据此，先对天然t-PA基因的碱基序列进行改造，然后采取传统的基因工程方法表达该改造后的基因，可制造出性能优异的改良t-PA。下图表示相关的目的基因、载体及限制酶，图中pCLY11为质粒。请回答下列问题：
(1)DNA重组技术中所选用的质粒应具有以下特征：质粒DNA分子上有　　　，可以保证质粒在受体细胞中能自我复制；质粒DNA分子上有　　　　，便于外源DNA插入；质粒DNA分子上有　　　　，便于筛选出含目的基因的宿主细胞。
(2)改造后的t-PA基因的黏性末端如上图所示，切割质粒pCLY11，使其与改良t-PA基因高效连接，需要选用限制酶　　　　(填序号)。
①XmaⅠ　　　②SmaⅠ　　　③NheⅠ　　　④BglⅡ
(3)成功转入重组质粒的受体细胞在培养基上会出现　　　　色菌落。改良t-PA基因的表达可在一定程度上降低颅内出血的概率，利用以上技术制造出性能优异的改良t-PA的过程被称为　　　　　　　　　　　　。
(4)以大肠杆菌作为受体细胞，在含新霉素的培养基中形成菌落的受体细胞并不都是目的菌株，原因是　。
20.(12分)生物武器作为战争武器，危害极大。阅读下列材料，回答问题：
　　材料1：联合国组织的一个专家小组的研究报告指出，许多国家虽然签订了《禁止生物武器公约》，但对这方面的研制工作并未停止，因此，对生物武器研究的防控也应得到加强。
　　材料2：战剂做成干粉或液体喷洒到空气中，形成有害的气雾云团，叫作“生物战剂气溶胶”。它的颗粒很小，肉眼很难看见，渗透力强，杀伤范围广，一些通常通过食物或昆虫传播的病原体也可以通过气溶胶由呼吸道感染。
(1)有可能成为“生物战剂气溶胶”病原体的生物应属于哪些类群 　　　　(请列举两例)。
(2)人体抵抗病原体的第一道防线是　　　　，最有效的防线是　　　　。
(3)生物武器包括　　　　及经过基因重组的致病菌等，有些国家对病毒的改造并非止步于医疗领域，而是利用重组基因技术创造全新的病毒，对此，中美在关于《禁止生物武器公约》议定书的联合声明中重申　　　　　　　　　　　　　　　　，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。
(4)生物武器是一种大规模的杀伤性武器，它与常规武器相比，具有　　　　　　　　　　　　　　　　(写出两点即可)的特点。
(5)你认为针对生物武器的防御研究，可能在哪些方面取得成功 请简要说明理论依据。　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　(至少写出一个方面)。
21.(12分)《诗经》中有“投我以木瓜，报之以琼琚”的诗句。番木瓜很容易感染番木瓜环斑病毒(PRSV，遗传物质为单链RNA)，该病毒是全球生产番木瓜的限制因素。我国华南农业大学的科研人员利用农杆菌转化法，将番木瓜环斑病毒株系Ys的复制酶基因导入番木瓜细胞，成功培育出转基因番木瓜“华农一号”，其大致流程如图所示。请回答下列问题：
(1)过程①称为　　　　；选用Ti质粒作为载体，是因为　　　 　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　。为让Ys的复制酶基因正向插入Ti质粒上，需在Ys的复制酶基因两端分别添加限制酶　　　　的酶切位点。
(2)为筛选出含重组质粒的农杆菌，应将转化的农杆菌培养在含　　　　的培养基上。过程⑤运用的生物技术利用的生物学原理是　　　　。
(3)若要从个体生物学水平鉴定培育的转基因番木瓜植株是否具有抗番木瓜环斑病毒的特性，应进行的操作是　　　　　　　　　　　　　　　　。
参考答案
1.C
【解析】常用显微注射法将重组质粒导入动物受体细胞，A项正确；大肠杆菌为原核生物，只有核糖体这一种细胞器，将人的相关基因导入大肠杆菌后，目的基因表达产生的蛋白质在核糖体上合成后缺乏内质网和高尔基体的加工，因此与人体自身合成的NGF相比，大肠杆菌表达的NGF往往生物活性较低，B项正确；控制鼠的NGF(mNGF)与人的NGF(hNGF)的基因的碱基序列不同，故两者表达出的NGF的稳定性和生物活性有差别，C项错误；利用猪唾液腺作为生物反应器，需要将NGF基因和唾液腺中特异性表达的基因的启动子等组合在一起，D项正确。
2.A
【解析】构建GFP-A融合基因时，需要用限制酶对GFP基因和A基因分别进行切割，然后用DNA连接酶将其缝合，A项错误；诱导型启动子的启动受诱导物的控制，当诱导物存在时，可以激活或抑制目的基因的表达，B项正确；将植物原生质体培养成完整植株需要利用植物组织培养技术，该技术的原理是植物细胞具有全能性，C项正确；因为导入受体细胞的是GFP-A融合基因，所以经紫光或蓝光照射后，检测到绿色荧光的部位即为这种蛋白质在植物体内分布的部位，D项正确。
3.C
【解析】实验小组为获得耐盐纯培养物A，需要使用选择培养基进行筛选，A项正确；在一定温度下，用二苯胺试剂对DNA进行检测，二苯胺检测DNA的原理是在酸性条件下DNA会与二苯胺试剂发生化学反应，产生蓝色的化合物，B项正确；DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理，可以初步分离DNA与蛋白质，C项错误；DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2 mol·L-1的NaCl溶液，D项正确。
4.D
【解析】从生物组织中提取DNA时，应加入DNA酶抑制剂，以防研磨时DNA接触到DNA酶被水解，A项正确。所选的Ti质粒含KpnⅠ、BamHⅠ和HindⅢ的切割位点，含目的基因的DNA也含KpnⅠ、BamHⅠ和HindⅢ的切割位点，若选择限制酶KpnⅠ，所切下的目的基因不含强启动子，所以不能选限制酶KpnⅠ；若选择限制酶BamHⅠ和HindⅢ，所切下的目的基因含有强启动子，虽不含终止子，但Ti质粒在限制酶HindⅢ切割位点后有终止子，故构建基因表达载体时，应选用的限制酶是BamHⅠ和HindⅢ，B项正确。在基因工程操作中，常用原核生物作为受体细胞，其中大肠杆菌应用最广泛，研究人员一般先用Ca2+处理大肠杆菌细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，然后再将重组的基因表达载体导入其中，C项正确。潮霉素抗性基因位于Ti质粒的T-DNA上，会随T-DNA进入玉米细胞，若目的基因进入玉米细胞，则潮霉素抗性基因也进入玉米细胞，则该细胞就有抗潮霉素的特性，故需要在培养基中加入潮霉素进行筛选，D项错误。
5.C
【解析】过程①诱发基因突变，基因g中的碱基可能发生增添、缺失或替换，导致基因g的碱基序列改变，进而导致性状发生改变，A项正确；过程②是将基因R导入油菜细胞中的过程，采用的是基因工程技术，需要用到限制酶、DNA连接酶和载体等基因工程的工具，B项正确；过程③可以利用单倍体育种，但该过程中需要用秋水仙素处理单倍体幼苗，单倍体一般高度不育，不形成种子，C项错误；过程③的原理是基因重组，为了选择所需要的纯合子，一般需要较长时间的自交和筛选，D项正确。
6.B
【解析】PCR实验中使用的微量离心管、蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌，A项正确。为防止引物的碱基配对影响扩增结果，引物P1与引物P2的碱基不能互补；LTB基因和ST1基因能融合的关键是引物P2和引物P3的部分碱基能互补配对，从而将两个基因融合在一起，B项错误。在PCR过程中，子链延伸时温度需上升到72 ℃左右，在耐高温的DNA聚合酶的催化下进行，且该耐高温的DNA聚合酶需要被Mg2+激活后才能发挥作用，C项正确。杂交链延伸生成LTB-ST1融合基因的过程中，不需要加入引物，两条母链的起始位置的碱基序列即为引物，可以作为子链合成的引物，为DNA聚合酶提供3'端，D项正确。
7.D
【解析】蛋白质结构的多样性与组成蛋白质的氨基酸的种类、数量、排列顺序及肽链的盘曲折叠方式有关，与肽键无关，A项错误；每一种蛋白质都有其独特的空间结构，特定的结构决定特定的功能，是表现其生物学活性所必需的，B项错误；此系统基于氨基酸序列，精确地预测了蛋白质的空间结构，此系统将应用于蛋白质工程，以创造更符合人类需求的蛋白质，C项错误；蛋白质工程能改造现有的蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求，D项正确。
8.C
【解析】天然的IL-2属于免疫活性物质，A项正确；蛋白质工程可以生产自然界中本不存在的蛋白质，所以人工改造合成新IL-2属于蛋白质工程，B项正确；蛋白质工程能通过改造或合成基因来间接改造蛋白质的结构，从而改变其稳定性，C项错误；基因表达蛋白质的过程遵循中心法则，D项正确。
9.A
【解析】从微生物细胞中获取的基因由于存在非编码序列，对基因的表达会造成影响，所以一般需要将目的基因与载体的启动子等调控组件结合在一起后，再导入玉米细胞，A项正确；游离的磷酸基团在5'端，B项错误；③与④过程分别表示脱分化、再分化，这两个过程中都需要生长素和细胞分裂素，但所需生长素和细胞分裂素的含量、比例不相同，C项错误；采用抗原—抗体杂交法检测，若没有杂交带出现，只能说明目的基因没有表达，但不能说明目的基因导入不成功，D项错误。
10.C
【解析】四倍体与二倍体杂交后得到的是三倍体，三倍体在减数分裂时染色体联会紊乱，不能形成可育的配子，故三倍体是高度不育的，将三倍体鱼投入市场可以防止该多倍体鱼与自然环境中的其他鱼类杂交，避免带来生物安全问题。综上所述，C项符合题意。
11.C
【解析】治疗性克隆是把患者的体细胞移植到去核的卵母细胞中，用到了核移植技术，A项正确；细胞核是患者提供的，故治疗性克隆能避免同种异体器官移植过程中的免疫排斥反应，B项正确；ES细胞可以从原始性腺中获取，也可以从早期胚胎中获取，如囊胚中的内细胞团，C项错误；利用胚胎干细胞形成了不同的组织、器官，因此，“克隆”是建立在胚胎干细胞的增殖、分化的基础上的，D项正确。
12.C
【解析】试管婴儿技术主要应用了体外受精和胚胎移植技术，另外还应用了早期胚胎培养等技术，A项错误；“设计试管婴儿”在早期胚胎植入受体子宫之前需对早期胚胎进行遗传学诊断，而试管婴儿不需要经过遗传学诊断(基因检测)这一步骤，B项错误；试管婴儿技术应用了体外受精和胚胎移植等技术，因而属于有性生殖，而克隆技术属于无性生殖，C项正确；基因编辑技术存在安全风险，有人滥用“设计试管婴儿”技术选择性设计婴儿，D项错误。
13.ABD
【解析】蛋白酶抑制剂的化学本质为蛋白质，其合成部位为核糖体，A项正确；结合题干信息可知，抗玉米螟玉米品种的培育运用的是转基因技术，B项正确；基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，C项错误；不同物种之间存在生殖隔离，玉米的花粉不能传递给杂草，D项正确。
14.ABD
【解析】限制酶能催化双链DNA分子中磷酸二酯键的断裂，A项正确；限制酶只能识别特定的序列并进行切割，原核生物DNA分子中可能并不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰而无法被识别，B项正确；T4 DNA连接酶既可以连接双链DNA互补的黏性末端，又可以连接双链DNA的平末端，但连接平末端的效率相对较低，C项错误；限制酶处理后，重组质粒的lacZ'基因被破坏，不能合成β-半乳糖苷酶(Z酶)，不能催化底物(X-gal)水解产生蓝色物质，D项正确。
15.D
【解析】基因编辑过程中CCR5基因发生了碱基的缺失，属于基因突变，A项错误；编辑后的基因与原基因互为等位基因，B项错误；编辑后的基因仍是双链DNA，由于碱基互补配对，碱基A的含量等于碱基T的含量，碱基G的含量等于碱基C的含量，(A+G)/(C+T)=1，不会改变，C项错误；针对人类生殖细胞及受精卵的基因编辑超出现有伦理框架，不可随意而为，要严防滥用，D项正确。
16.AC
【解析】转基因大豆培育过程中可能用到抗病、抗虫等抗性基因，A项正确；为培育成转基因大豆，受体细胞可以是大豆受精卵，也可以是体细胞，B项错误；转基因大豆可能与野生植物发生杂交而出现基因交流，影响野生植物的遗传多样性，C项正确；固氮菌与大豆共生，不需要将固氮基因导入大豆细胞中，D项错误。
17.(1)基因表达载体的构建(2分) BclⅠ和HindⅢ(2分)
(2)使目的基因变性和使目的基因延伸(3分) 使目的基因复性(2分)
(3)1~4号棉花中均导入了光敏色素基因A(3分)
18.(1)T-DNA(1分) 染色体DNA上(1分)
(2)①可以将新鲜的从叶片上取下的圆形小片与农杆菌共培养，然后筛选转化细胞，并再生成植株(2分)；②可以将花序直接浸没在含有农杆菌的溶液中一段时间，然后培养植株并获得种子，再进行筛选、鉴定等(3分)
(3)BamHⅠ(1分) 不是(1分)
(4)idgS基因和sfp基因是否插入白玫瑰细胞的染色体上；插入白玫瑰细胞染色体上的idgS基因和sfp基因是否转录形成mRNA(3分)
19.(1)复制原点(1分) 一至多个限制酶切割位点(2分) 标记基因(或某种抗生素抗性基因)(2分)
(2)①④(2分)
(3)白(1分) 蛋白质工程(1分)
(4)导入未连接目的基因的质粒(或pCLY11或空质粒或普通质粒)的大肠杆菌也可以在这种培养基上生长(3分)
20.(1)细菌、病毒、衣原体、立克次氏体等(1分)
(2)皮肤、黏膜等(1分) 特异性免疫(1分)
(3)致病菌类、病毒类、生化毒剂类(2分) 在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器(2分)
(4)传染性强、污染面广、难以防治(写出两点即可，2分)
(5)接种疫苗，使人产生免疫；使用防毒面具，活性炭对微粒有吸附性等(合理即可，3分)
21.(1)逆(反)转录(1分) Ti质粒可将目的基因转移到受体细胞中，并将其整合到受体细胞的染色体DNA上(2分) HindⅢ和BamHⅠ(2分)
(2)卡那霉素(1分) 植物细胞的全能性(2分)
(3)对转基因番木瓜植株进行接种PRSV实验(4分)
一轮单元素养练

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