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陕西省韩城市象山中学2024-2025学年高二下学期期中生物试题
一、单选题
1．我国利用不同微生物的发酵作用制作食品，历史悠久，在多种文献中均有记载：
①《齐民要术》中记载：“作盐水，令极咸，于盐水中洗菜，即内雍中。”
②《本草纲目拾遗》中记述：“豆腐又名菽乳，豆腐腌过酒糟或酱制者，味咸甘心。”
下列叙述错误的是（ ）
A．制作泡菜时配制的盐水要煮沸冷却后使用
B．泡菜制作过程中要隔绝空气
C．发酵产腐乳用的豆腐坯属固体培养基，需要对其进行严格灭菌
D．腌制腐乳时加入酒精既可以调味也可以抑制细菌生长
2．《贵州民间药草》称刺梨酒能“健胃止痛，消食去胀，治久咳、久痢”。如图，以下关于果酒和果醋制作过程的说法，正确的是（ ）

A．发酵Ⅱ直接将发酵Ⅰ产生的乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为乙酸
B．酵母菌和醋酸菌呼吸作用的主要场所都是线粒体
C．果酒发酵温度控制在30～35℃，果醋发酵温度控制在18～30℃
D．果醋制作过程中酸性环境对醋酸菌的生长没有影响，任何pH条件均可发酵
3．橙汁生产过程中感染需氧的脂环酸芽孢杆菌，品质会受到影响。为优化橙汁生产的质量监控工艺，技术人员设计了如下流程，开展脂环酸芽孢杆菌的筛选和鉴定。下列相关说法正确的是（ ）
A．步骤①应取自果园的深层土壤来制备土壤稀释液
B．步骤②制备土壤稀释液振荡20min的最主要目的是让培养液与微生物充分接触
C．步骤①-③将土壤稀释了10000倍
D．步骤④所示菌落数16作为平均数可知每克果园土壤的目的菌数约为1.6×106个
4．下列对发酵工程及其应用的叙述，正确的有几项（ ）
①生产谷氨酸需将pH调至中性或弱碱性
②果酒发酵的最适温度为30~35℃，果醋发酵的最适温度为18~30℃
③泡菜制过程中，通常用加入抗生素的方法来抑制杂菌
④利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物农药可以促进植物生长
⑤啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在后发酵阶段完成
⑥用单细胞蛋白制成的微生物饲料，可通过发酵工程从微生物细胞中提取
A．0项 B．1项 C．2项 D．3项
5．如图表示矮牵牛的植物组织培养过程，相关叙述正确的是（ ）
A．矮牵牛是自养生物，培养基中无需添加有机碳源
B．①、②、③过程均需给予适当时间和强度的光照
C．培养过程需依次用到三种培养基
D．该矮牵牛植株不同部位通过离体培养得到的植株基因型相同
6．花椰菜(2n=18)种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰(2n=14)具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种。下列叙述错误的是（ ）
A．植物体细胞杂交是将不同来源的植物体细胞融合成杂种细胞的技术
B．可采用电融合法、离心法诱导花椰菜和紫罗兰体细胞原生质体融合
C．新品种花椰菜打破了生殖隔离，实现了远缘杂交
D．该抗病性状花椰菜植株体细胞中最多含有64条染色体，与花椰菜属于不同物种
7．某科研人员以小鼠皮肤组织为材料进行动物细胞培养。下列有关叙述正确的是（ ）
A．应选择成熟的老龄小鼠的皮肤组织进行细胞培养
B．传代培养时，悬浮培养的细胞可用离心法收集，而后再用酶处理
C．体外培养动物细胞时，细胞要经过脱分化形成愈伤组织
D．动物细胞体外培养时，应保证环境是无菌、无毒的
8．“生物导弹”是免疫导向药物的形象称呼，由单克隆抗体与药物结合而成单克隆抗体能自动导向，在生物体内与特定细胞或组织结合，并由其携带的药物产生治疗作用。单克隆抗体的制备过程如图所示，下列叙述错误的是（ ）
A．A过程是从小鼠脾脏中取得T淋巴细胞，给小鼠注射的特定物质相当于抗原
B．B过程最终得到的杂交瘤细胞的特点是既能产生专一抗体，又能无限增殖
C．体外培养杂交瘤细胞的培养基与用于植物组织培养的培养基在物理性质上的主要区别是前者要用液体培养基
D．特异性抗体可以通过注射抗原产生并分离抗体的方法来制备，与这种常规方法相比，单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高等优点
9．优良奶牛的产奶量高，奶的品质好，下图为通过胚胎移植技术繁殖优良奶牛的示意图。下列有关叙述正确的是（ ）

A．给牛A、B注射促性腺激素可使其排出更多的卵母细胞或精子
B．若对胚胎进行分割，应选桑椹胚或囊胚
C．胚胎移植前要对牛C进行免疫检查，防止其排斥移入的胚胎
D．子代牛D遗传特性与受体牛C保持一致
10．如图为受精作用及胚胎发育示意图，a、b代表两个发育时期，下列叙述正确的是（　　）
A．a、b分别表示原肠胚和囊胚
B．受精卵的遗传物质一半来自精子，一半来自卵子
C．在桑葚胚阶段胚胎的内部开始出现含有液体的腔
D．受精卵早期分裂时，胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加
11．下图为不同限制酶的识别序列及切割位点（↓表示切割位点），下列叙述错误的是（ ）

A．图示4种限制酶均不能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列
B．用BglⅡ切出的目的基因与BamHⅠ切割的质粒重组后，则不能再被这两种酶切开
C．酶切时需要控制好温度、酶浓度、pH等因素
D．用EcoRⅠ切割DNA分子中部获得一个目的基因时，需断开的磷酸二酯键有2个
12．大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如图所示。下列叙述正确的是（　　）
A．可利用DNA在酒精中溶解度较大的特点来提取质粒DNA
B．将提取的DNA溶于0.2 mol/L NaCl溶液后，可用二苯胺试剂进行鉴定
C．凝胶中的DNA分子通过染色，可在紫外灯下被检测出来
D．根据电泳结果，质粒上没有限制酶Ⅰ和Ⅱ的切割位点，有限制酶Ⅲ的切割位点
13．蛛丝有超强韧性，其主要成分蛛丝蛋白是一种特殊的纤维蛋白，具有独特的结构与性质。科学家将蛛丝蛋白基因转入羊的乳腺中以生产蛛丝蛋白，下图是蛛丝蛋白基因的DNA片段。在基因工程中可通过PCR技术和琼脂糖凝胶电泳技术检测目的基因是否导入受体细胞。下列说法错误的是（ ）
A．用PCR技术扩增图中的蛛丝蛋白基因，可选择图中的引物①和④
B．科学家将蛛丝蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起
C．在凝胶中DNA分子的迁移速率不只与DNA分子的大小有关
D．若电泳结果显示羊体细胞中含有蛛丝蛋白基因，则用抗原-抗体结合法可能在其乳汁检测到蛛丝蛋白
14．图1为某种质粒结构简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述错误的是（　　）

A．在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoRI
B．如果将一个外源DNA 分子和一个质粒分别用 EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA 中 EcoRI酶切点有1个
C．为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和 Hind Ⅲ两种限制酶同时处理
D．质粒是一种结构简单的、能自主复制的环状DNA，是基因工程中最常用的载体
15．利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂，用于降解某种农药的残留，基本流程如图。下列叙述正确的是
A．过程①的反应体系中需要加入逆转录酶和核糖核苷酸
B．过程②需使用限制酶和DNA聚合酶，是基因工程的核心步骤
C．过程③需要使用NaCl溶液制备感受态的大肠杆菌细胞
D．过程④可利用PCR技术鉴定CarE基因是否成功导入受体细胞
16．水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓。研究人员发现，用赖氨酸替换水蛭素第47位的天冬酰胺可以提高它的抗凝血活性。这项替换研究工作（ ）
A．原理是中心法则
B．可行的直接操作对象是水蛭素
C．可通过改造或修饰基因来实现
D．改变了蛋白质的活性而不改变蛋白质的结构
二、实验题
17．多环芳烃（PAHs）是一种不溶于水的有机物，在培养基中以微小的颗粒状存在，PAHs在土壤中的降解速率很慢，并具有致癌和致畸作用。科研人员欲从被PAHs污染的土壤中分离出高效降解PAHs的菌株，进行如图所示的实验（培养基乙中PAHs被降解后会形成透明圈）。回答下列问题：
(1)从培养功能角度分析，培养基甲属于 ；培养基通常需要提前在121℃下进行 。
(2)将培养基甲中的目的菌接种到培养基乙中的方法是 ，该方法不仅适用于筛选某种菌株，还可用于 。
(3)过程④挑选的单菌落应该是透明圈直径与菌落直径比值 （填“最小”或“最大”）的。
(4)微生物驯化是指在微生物培养过程中，逐步加入某种物质，让其逐渐适应，从而得到对此物质高耐受或能降解该物质的微生物。科研人员现采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选能高效降解有机磷农药——敌敌畏的微生物，并设计了如下实验流程。
请据此回答以下问题：
a.驯化培养基中的蛋白胨提供的主要营养有 。（至少答两点）。
b.为统计培养基C中的微生物数量，在如图所示的稀释度下涂布了3个平板培养基D，统计菌落数分别为250、247、253，测得培养基Ｃ中菌落数为1.25×107个/mL，则涂布的菌液Y为 mL。该统计数据往往比活菌的实际数目 （填“多”或“少”），理由是 。
18．某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请，所谓的“三亲婴儿”，为了避免母亲把生理缺陷遗传给孩子，医生去除女性捐赠者的卵子中的细胞核，接着用母亲卵细胞中对应的遗传基因取而代之，最后再按照标准的试管婴儿技术进行培育，这样诞生的孩子将会继承一位父亲和两位母亲的遗传基因。回答以下问题：
(1)图中“去核”是指去除 。
(2)在体外受精前，需要将卵母细胞培养到 期。采集到的精子需要进行 处理，体外受精后还需将受精卵放入培养液中培养到一定阶段才能移植，培养液的成分一般比较复杂，除一些维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及 等天然成分。
(3)胚胎发育到 时，细胞开始出现分化。早期胚胎的 细胞将发育成胎儿的各种组织。
(4)从遗传角度分析，“三亲婴儿”技术还可以避免“母亲”的 （填细胞结构）中的缺陷基因传递给孩子。
三、解答题
19．近年来，随着技术更新速度的加快，植物细胞育种也在快速发展。下图1是培养耐盐植株的实验流程，图2是马铃薯脱毒苗的成功率和脱毒率与外植体大小的关系，图3是获得马铃薯—番茄的流程图。请回答下列有关问题：
(1)图1用射线处理愈伤组织而不直接处理茎段的原因是 ，处理2中添加的物质X为 。
(2)无菌技术也是成功诱导出耐盐植株的重要因素，下列各项中用化学药剂进行消毒的是 （填序号）。
①培养皿 ②培养基 ③实验操作者的双手 ④三角锥形瓶 ⑤接种环 ⑥茎段（外植体）
(3)通过植物组织培养技术进行快速繁殖，属于 生殖。图2表明，马铃薯脱毒苗培育过程中，适宜的茎尖大小为 ，选择茎尖培育脱毒苗的理由是 。
(4)图3是 技术，该技术的原理是 ，图3诱导原生质体融合常用的化学诱导剂是 。获得的X细胞中 （填“含有”或“不含”）同源染色体，由X到出芽生根需要经历的过程是 。
20．双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题：
(1)与植物体细胞杂交相比，图1中过程②特有的诱导融合的方法是 ，过程②选用的骨髓瘤细胞 （ 选填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。
(2)对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行 和 ，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是 。
(3)图1中①步骤注射癌胚抗原的目的是 。
(4)假设图2中双特异性抗体分子是由若干个氨基酸形成的，下列叙述不正确的是_____。
A．该特异性抗体能与人体内各类肿瘤细胞结合
B．双特异性抗体可以在人体内持续发挥作用
C．该双特异性抗体的制备过程中只用到了动物细胞融合技术
D．双特异性抗体能与药物和肿瘤细胞结合，因而不具有特异性
21．烟草作为一种重要的经济作物，其品质改良一直是研究的热点，超甜基因的发现为烟草甜度的提升带来了机遇。现从具有高甜度特性的植物甜叶菊中得到的甜蛋白基因如图1，选用的植物表达载体pBI121如图2，其含有CaMV35S强启动子、多克隆位点（含有多个限制酶识别序列）和筛选标记基因（如卡那霉素抗性基因）等，构建基因表达载体后再转化至农杆菌菌株中，用于后续的烟草转化。回答下列问题：
(1)通常可先从甜叶菊叶片组织中提取 ，再利用 酶得到cDNA，进而通过PCR技术扩增获得目的基因，在扩增目的基因时还需要在设计的引物 （填“5′”或“3′”）端添加限制酶的识别序列。
(2)构建基因表达载体时，首先选用图中的限制酶 同时切割pBI121质粒和含有目的基因的DNA片段，然后用DNA连接酶拼接。DNA连接酶与DNA聚合酶在作用上的区别是 。
(3)将构建的基因表达载体导入农杆菌前，需先用 处理农杆菌，接着用含有 的培养基培养农杆菌来筛选目的菌。
(4)用农杆菌转化法获得转甜蛋白基因的烟草细胞后，先经 形成愈伤组织，即失去其特有的 ，再诱导其形成新植株。
(5)现科研人员发现转基因烟草细胞中没有表达出甜蛋白，请分析可能的原因： （答出2点）。
参考答案
1．C
2．A
3．C
4．B
5．C
6．A
7．D
8．A
9．B
10．D
11．D
12．C
13．A
14．B
15．D
16．C
17．(1) 选择培养基 高压蒸汽灭菌
(2) 稀释涂布平板法 微生物的计数（或统计样品中活菌的数目）
(3)最大
(4) 氮源、碳源、维生素 0.2 少 两个或多个细胞连在一起时，观察到的是一个菌落
18．(1)捐献者卵母细胞的细胞核（或捐献者卵母细胞的纺锤体—染色体复合物）
(2) 减数第二次分裂中（MⅡ中） 获能 血清
(3) 囊胚期 内细胞团
(4) 线粒体（细胞质）
19．(1) 愈伤组织分裂能力强，突变频率高 氯化钠 /NaCl
(2)③ ⑥
(3) 无性 0.27mm 茎尖分生组织代谢旺盛，分裂速度快，且病毒在该区域分布少甚至无病毒
(4) 植物体细胞杂交 细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 PEG（聚乙二醇或高Ca2+-高pH） 含有 脱分化和再分化
20．(1) 灭活病毒诱导法 不能
(2) 克隆化培养 抗体检测 单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备（特异性强、灵敏度高、可大量制备）
(3)刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞/浆细胞
(4)ABCD
21．(1) 总RNA 逆转录 5'
(2) XbaⅠ和HindⅢ DNA连接酶是连接两个DNA片段，而DNA聚合酶是将单个脱氧核苷酸连接到已有的脱氧核苷酸链末端
(3) Ca2+ 卡那霉素
(4) 脱分化 结构和功能
(5)甜蛋白基因的转录过程受阻；甜蛋白基因的翻译过程受阻

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