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黑龙江省双鸭山市第一中学2024-2025学年高二下学期6月月考生物试题
一、单选题
1．柿子具有较高的营养价值和药用价值，采用液体发酵法可酿制出醋香浓郁、酸味纯正的柿子醋，提高了柿子的经济价值。柿子醋的酿造工艺流程如图所示。

下列关于柿子醋酿造过程的叙述，错误的是（　　）
A．酒精发酵在无氧条件下进行，醋酸发酵在有氧条件下进行
B．为防止杂菌污染，柿子醋制作时温度应控制在30℃以下
C．用不同品种和成熟度的柿子酿造的柿子醋风味不同
D．醋酸发酵阶段中产生的气泡量少于酒精发酵阶段
2．获得纯净的微生物培养物的关键是防止外来杂菌污染。无菌技术在生产、生活和科研实践中有着广泛应用。下列有关无菌技术的叙述，错误的是（ ）
A．喷洒煤酚皂溶液同时配合紫外线照射可提高对超净工作台的消毒效果
B．试管口、瓶口等易被污染的部位，接种时可通过火焰灼烧来灭菌
C．在培养基冷却至50℃左右时倒平板，待平板冷凝后倒过来放置
D．培养细菌、动物细胞的培养基中，均需添加一定量的抗生素以防止杂菌污染
3．利用杨木生产燃料乙醇的基本流程主要包括原料粉碎、提高纤维素浓度的预处理、释放单糖的酶解糖化、产生乙醇的微生物发酵、乙醇脱水的蒸馏工艺等步骤（预处理过程所需的果胶酶常来自于黑曲霉等微生物）。下图为发酵阶段菌种接种量对发酵结果的影响。下列说法正确的是（ ）
A．培养黑曲霉时一般需将培养基调至酸性，果胶酶是黑曲霉分泌的一种单细胞蛋白
B．在伊红—亚甲蓝培养基上可筛选出高产纤维素酶的菌株用于酶解糖化过程
C．接种的菌种为酵母菌，当接种量为12%左右时，发酵后的酒精含量与残糖含量相等
D．接种量超过15%时酒精产量反而有所降低的原因可能是菌种生长消耗大量的糖分
4．下列关于发酵工程及其应用的叙述，正确的是（ ）
A．在青贮饲料中添加酵母菌，可以提高饲料的品质，使饲料保鲜，动物食用后还能提高免疫力
B．利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物农药可以促进植物生长
C．利用放线菌产生的井岗霉素防止水稻纹枯病是一种重要的化学防治手段
D．谷氨酸发酵生产，在中性或弱碱性条件下会积累谷氨酸
5．红豆杉是濒危植物，其树皮产生的紫杉醇对抗癌有一定的效果。红豆杉植株组织培养和细胞培养的流程如图所示，②为愈伤组织，通过b过程可最终产生新的植株，通过c过程可产生大量细胞。下列相关叙述正确的是（ ）

A．a过程是脱分化，该过程中细胞增殖的方式是无丝分裂
B．b过程的实质是基因的选择性表达，该过程和a过程的光照条件相同
C．通过a、b过程进行紫杉醇的工厂化生产
D．培养⑤一般采用液体培养基
6．百合栽培过程中易受病毒侵染，造成品质退化。某研究小组尝试通过组织培养技术获得脱毒苗操作流程如图。下列叙述错误的是（ ）
A．1号培养基中的愈伤组织是排列不规则的薄壁组织团块
B．②为再分化过程，愈伤组织分化时可能会发生突变或基因重组
C．外植体切成小块前需要用体积分数70%的酒精和质量分数为5%的次氯酸钠进行消毒处理
D．百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，可以作为该研究中的外植体
7．人造皮肤的构建、动物分泌蛋白的规模化生产等都离不开动物细胞培养。下列有关动物细胞培养的叙述，错误的是（ ）
A．培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等
B．一般用机械法或蛋白酶处理的方法使动物组织分散成单个细胞后进行培养
C．培养过程中需要定期更换培养液，以便添加营养物质和清除代谢物
D．培养瓶中的细胞都需要定期用胰蛋白酶处理后才能分瓶培养
8．用农杆菌转化法将固氮相关基因导入植物细胞，下列叙述正确的是（ ）
A．将构建好的目的基因表达载体导入农杆菌，一般先用PEG处理农杆菌细胞
B．Ti质粒能携带外源基因进入植物细胞，并与植物细胞的染色体DNA整合到一起
C．取自同一株转基因植物的细胞经组织培养获得的植株基因型可能不相同
D．过程④→⑤包括脱分化和再分化，培养基中植物激素的种类、浓度和比例不同
9．线粒体置换技术是一种预防人类线粒体遗传病的技术手段。极体中主要内容物为排出的核基因组，所含线粒体数量较少，因此可以将其作为良好的核供体用于线粒体置换，其过程如下图所示。下列说法正确的是（ ）
A．可通过显微操作去除纺锤体和极体
B．图中“？”处指受精作用，精子需进行获能处理，为受精提供能量
C．图中极体2的遗传物质来自于供卵卵母细胞
D．该过程也可直接用患者的体细胞作为核供体
10．人血清白蛋白（）是血浆蛋白的主要成分，具有维持血浆渗透压和进行物质运输的功能。科学家利用转基因技术获得转基因的大肠杆菌，通过发酵工程，实现的大量生产，下图表示基因。下列叙述错误的（ ）
A．过程每次循环分为3步，其中温度最低的一步是第二步
B．扩增出基因并用于表达载体的构建，应选择引物Ⅱ和引物Ⅲ
C．在反应缓冲液中加入的作用是激活耐高温的聚合酶
D．用方法检测大肠杆菌是否导入基因，预变性过程可促进模板边解旋边复制
11．下列有关“DNA的粗提取与鉴定”“PCR扩增”“琼脂糖凝胶电泳”实验的叙述，正确的是（ ）
A．在50～65℃条件下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色
B．滤液中加入冷酒精，用玻璃棒快速搅拌会使DNA的提取量增加
C．PCR扩增后，琼脂糖凝胶电泳鉴定结果不止一条条带，可能是引物特异性不强导致的
D．琼脂糖凝胶电泳时，凝胶中的DNA被染色，可在蓝紫光下被检测出来
12．苏云金芽孢杆菌中的杀虫晶体蛋白Cry具有杀虫毒性，但Cry蛋白存在杀虫谱窄、毒力有限等问题，制约了其在农业生产中的进一步应用。科学家通过定点突变，将Cry蛋白第168位的组氨酸替换为精氨酸后，Cry蛋白对烟草天蛾的毒性提高了3倍；将Cry蛋白第282位、第283位的丙氨酸和亮氨酸分别替换成甘氨酸和丝氨酸后，Cry蛋白对舞毒蛾的毒性提高了7倍。下列相关叙述不正确的是（ ）
A．对Cry蛋白的改造是通过改造编码Cry蛋白的基因来实现的
B．与基因工程相比，蛋白质工程的实现也需要构建基因表达载体
C．蛋白质工程难度较大，主要是蛋白质发挥功能所依赖的高级结构十分复杂
D．如果将第168、282、283位的氨基酸全部替换，Cry蛋白对舞毒蛾的毒性将增加21倍
13．生物技术的进步，会引起人们对它安全性的关注，也会与伦理道德发生碰撞，带来新的伦理困惑和挑战。下列叙述正确的是（ ）
A．干细胞的研究可用于治疗很多疾病，有不涉及伦理问题等优点
B．生物武器是用微生物、毒素、干扰素及抗生素等来形成杀伤力的
C．试管婴儿技术和“设计试管婴儿”都需要对胚胎进行遗传学诊断
D．转入叶绿体中的基因不会随花粉传递给子代，避免造成基因污染
14．使用相同的目镜，但在两种不同的放大倍数下，所呈现的视野分别为甲和乙（如下图所示）。下列相关叙述有几项正确（ ）
①若使用相同的光圈，则甲比乙亮
②图甲显示的是显微结构，图乙显示的是亚显微结构
③若玻片右移，则甲的物像会右移而乙的物像左移
④若在甲中看到的物像模糊，则改换成乙就可以看到清晰的物像
⑤在乙中观察应使用细准焦螺旋，并调整光圈
A．5项 B．2项 C．4项 D．3项
15．甲型H1N1流感病毒是一种RNA病毒，药物“达菲”通过抑制该病毒中神经氨酸酶（NA）的作用，使病毒不能从宿主细胞中释放出来，从而减少病毒的传播，下列推测或叙述合理的是（ ）
A．NA能够破坏细胞膜
B．H1N1病毒能够在宿主细胞外自行增殖
C．NA是由宿主细胞的DNA控制合成的
D．新型甲型H1N1流感病毒的产生可能是染色体变异导致的
16．肺炎支原体是一种单细胞生物，能在宿主细胞内寄生增殖。下列叙述正确的是（ ）
A．肺炎支原体的核仁结构与核糖体形成有关
B．肺炎支原体的蛋白质加工不需要内质网、高尔基体参与
C．肺炎支原体合成蛋白质需借助宿主细胞的核糖体
D．青霉素可以破坏细菌的细胞壁，是治疗支原体肺炎的有效药物
二、多选题
17．下列关于传统发酵食品生产过程或特点的叙述错误的是（ ）
A．制作泡菜时将新鲜蔬菜洗净,切成块状或条状,混合均匀,晾干后与蒜瓣、生姜等香辛料混合装满泡菜坛
B．酿制果酒时,取新鲜葡萄,去除枝梗和腐烂的籽粒,再用清水冲洗１-２次,沥干然后榨汁装入发酵瓶中
C．制作果醋时,可以先在碗中倒入少量醋,一段时间后用其表面产生的一层薄膜进行接种可以明显缩短制作果醋的时间
D．传统发酵食品生产利用了天然存在的菌种,品质稳定,风味独特,是我国传统饮食文化的重要组成部分
18．不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．培养基中应添加一定浓度的蔗糖，目的是提供碳源和能源。
B．融合前对原生质体在显微镜下用血细胞计数板计数，以确定原生质体密度。
C．酶解法制备原生质体时，应在等渗或低渗溶液中进行
D．异源融合的原生质体含有36条染色体
19．科学家运用基因工程技术，将人凝血因子基因导入山羊的受精卵中，培育出山羊乳腺生物反应器，使山羊乳汁中含有人凝血因子。以下有关叙述错误的是（ ）
A．可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入山羊的受精卵
B．在该转基因羊中，人凝血因子既存在于乳腺细胞，也存在于口腔上皮细胞中
C．该过程需要在胚胎时期进行性别鉴定
D．科学家将人凝血因子基因与乳腺中特异表达的基因重组在一起，从而使人凝血因子基因只在乳腺细胞中特异表达
20．科学家将某病毒抗原蛋白的部分编码序列（RBD）拼接成融合基因2RBD和3RBD，探究RBD的二聚体蛋白和三聚体蛋白能否模拟RBD的天然构象并获得高效免疫原性。为鉴定重组质粒是否构建成功，将重组质粒用Nco Ⅰ和Sac Ⅰ双酶切处理后电泳，结果如图，其中泳道1为双酶切pNZ8149-2RBD，两个条带大小分别为2507bp和2020bp。将构建好的重组质粒分别导入工程菌中进行表达产物的检测。下列说法正确的是（ ）
注：U-M为信号肽-细胞壁锚定蛋白序列
A．融合基因3RBD含两个游离的磷酸基团
B．据图可知，融合基因3RBD的长度为2686bp
C．泳道2呈现一个条带的原因是酶切pNZ8149-3RBD后产生的两个片段大小相近
D．从工程菌细胞表面提取蛋白质进行检测，从而进一步比较两者的免疫原性
三、实验题
21．吃腐烂的水果可能会出现头晕、恶心、呕吐或者更严重的症状，这和微生物产生的毒素有关。某学习小组为了寻找腐烂的苹果中可安全食用的区域，特开展以下实验。用苹果的腐烂部位、距离腐烂部位1cm和2cm的组织做实验材料，检测不同区域中微生物的种类和数量。已知苹果的pH在3.5～4之间，下面是操作流程：
(1)步骤②是 ，根据题意，本实验选用的接种方法是 。
(2)步骤③中，为了防止出现微生物之间抑制生长的现象，学习小组配制了不同的细菌和真菌的培养基。这些培养基是 （填“选择培养基”或“鉴定培养基”）。
(3)在步骤③中，可根据 对不同菌种进行初步鉴定。每隔24h统计一次菌落数目，选 时的记录作为结果，此方法统计的菌数量可能比实际的少，原因是 。统计腐烂部位的菌落数目发现，青霉菌、曲霉菌等真菌的数量较多，细菌数目很少。细菌数目很少可能的原因是 （答2点）。
(4)分析数据发现，距离腐烂部位越远，微生物的数量越少；距离腐烂部位2cm的样品中微生物数量极少。有人认为，不能仅凭这个实验就得出距离腐烂部位2cm的部分可安全食用的结论，还需要补充实验操作 。
四、解答题
22．北极狼是起源于30万年前的冰河时期幸存者，有着驰骋于极寒雪域的生存能力，野性十足，更是身披“银光战袍”的闪电捕猎者。2022年6月10日，世界首例体细胞克隆北极狼在北京呱呱坠地。克隆北极狼的供体细胞来自哈尔滨极地公园引进的一只野生北极狼的皮肤样本，其培育过程如图所示。回答下列问题：
(1)欲获得多个卵母细胞，可对比格犬进行的处理是 （具体操作）。
(2)选用去核卵母细胞与细胞核融合的原因是 。野生北极狼皮肤细胞可用于克隆的关键在于 。
(3)过程②激活重构胚的方法是 （填一种方法）；目的是 ；早期胚胎中，将来发育成胎盘和胎膜的是 （填图中字母和名称）。
(4)过程③中是否需要对代孕动物使用抗免疫排斥反应的药物，并说明理由
23．工程菌是指用基因工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系。下图是利用大肠杆菌生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。

(1)启动子是 的识别和结合部位。图中胰岛素基因以 链作为模板进行转录。构建基因表达载体时一般至少需要两种限制酶，以防止 和 。
(2)为了使目的基因与载体能正确连接，需要在引物的 端添加限制酶 的识别序列。
(3)β-半乳糖苷酶可以分解无色的X-gal产生蓝色物质使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。将转化后的大肠杆菌接种到添加了 的培养基上，若出现 （白色/蓝色）菌落，则该菌落即为含有重组质粒的大肠杆菌菌落。
24．在肿瘤微环境中，肿瘤细胞PD-L1表达量增加，与T细胞上的PD-1结合，抑制了T细胞的活化增殖，导致肿瘤细胞逃脱免疫监视。某研究小组制备抗人PD-L1的单克隆抗体用于肿瘤临床诊断和治疗，请回答下列问题：
(1)为制备抗人PD-L1的单克隆抗体，研究小组以小鼠甲为实验材料进行了如上图1实验。给小鼠甲多次注射 ，以期获得更多 的B淋巴细胞。
(2)图1中可运用 诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，此法不适用于植物原生质体融合。
(3)根据以上分析，抗人PD-Ll的单克隆抗体选择性杀伤肿瘤细胞的机制是 以提高T细胞对肿瘤细胞的杀伤能力。
(4)治疗前需对患者进行PD-L1表达强度分析，因为PD-L1抗体对于PD-L1表达量低的肿瘤细胞杀伤效果不佳。研究小组检测不同肿瘤细胞（OV2008、C13、K562、H1299、MCF-7）裂解液中的PD-L1含量。（抗体与待测蛋白结合后显示条带，条带粗细体现目标蛋白的量）由图2可知，PD-L1的抗体对 肿瘤细胞杀伤效果较低，其原因是 。β-action基因在上述所有细胞中表达量稳定，检测β-action基因表达量的目的是 。
25．如图所示是显微镜下观察到的不同生物体或细胞的图像（D为哺乳动物的平滑肌细胞），请据图回答问题：
(1)科学家依据 将细胞分为原核细胞和真核细胞，图中属于原核细胞的是 （填字母）。
(2)图中能进行光合作用的是 （填字母）其能进行光合作用的主要原因是 。
(3)基本的生命系统是 ，图中能表示生命系统个体层次的是 （填字母）。
(4)从生命系统的结构层次来看，湖中所有的细菌 （填“能”或“不能”）构成种群，理由是 。
参考答案
1．B
2．D
3．D
4．D
5．D
6．B
7．D
8．C
9．A
10．D
11．C
12．D
13．D
14．B
15．A
16．B
17．ABD
18．CD
19．BD
20．ABCD
21．(1) 梯度稀释（等比稀释） 稀释涂布平板法
(2)选择培养基
(3) 菌落特征（或者写成菌落的颜色、大小、形状等） 菌落数目稳定 当两个或多个同种细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 细菌适宜在中性或弱碱性的环境中生长，苹果呈酸性，不适合细菌生长；青霉菌产生的青霉素等抗生素抑制细菌的生长
(4)检测上述区域中微生物产生的毒素含量
22．(1)注射一定量的促性腺激素
(2) 卵母细胞体积大、营养丰富、更容易激活细胞核的全能性 北极狼皮肤细胞的细胞核中含有该物种一整套遗传信息
(3) 电刺激、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂 使其完成细胞分裂和发育进程 a滋养层
(4)不需要，代孕动物对移植入子宫的外来胚胎基本不会发生免疫排斥反应
23．(1) RNA聚合酶 A 质粒或目的基因自身环化 目的基因与质粒反向连接
(2) 5' EcoR I和Xho I
(3) X-gal、氨苄青霉素 白色
24．(1) 人PD-L1抗原 能够分泌抗人PD-L1抗体
(2)灭活的病毒
(3)针对PD-L1的单克隆抗体与肿瘤细胞表面的PD-L1结合，使得癌细胞表面PD-L1不能与T细胞表面的PD-1结合，从而不能抑制T细胞活化，使肿瘤细胞不能逃避T细胞的攻击
(4) C13 C13肿瘤细胞PD-L1表达量最低，而PD-L1抗体对于PD-L1表达量低的肿瘤细胞杀伤效果不佳 证明细胞的翻译功能是正常的
25．(1) 有无以核膜为界限的细胞核 A和B
(2) B 蓝细菌细胞中含有叶绿素和藻蓝素
(3) 细胞 A和B
(4) 不能 种群是指在一定的空间范围内同种生物的所有个体形成的整体，细菌不是一种生物，而是一类生物的总称

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