资源简介

课时跟踪检测（五十三）微生物的培养技术及应用
一、选择题
1.(2025·武汉模拟)平板接种是微生物培养的常用技术。下列叙述错误的是 (　 )
A.不含碳源的平板可以用于某些微生物的培养
B.进行平板划线时，接种环使用前必须进行灼烧灭菌
C.接种后未长出菌落，说明培养基未被污染，可以直接丢弃
D.以尿素为唯一氮源的培养基上长出的菌落不一定可以分泌脲酶
解析：选C　不含碳源的平板可用于自养型菌的培养，能利用光能或化学能将CO2和H2O转变为有机物，A正确；进行平板划线时，接种环使用前必须进行灼烧灭菌，冷却后用于接种，B正确；使用后的培养基即使未长出菌落也要在丢弃前进行灭菌处理，不能直接丢弃，以免污染环境，C错误；脲酶可以催化尿素分解，在以尿素为唯一氮源的平板上，能合成脲酶的微生物可以生长繁殖，但不能合成脲酶的微生物如固氮
菌可以利用空气中的N2进行生长,故以尿素为唯一氮源的培养基上长出的菌落不一定可以分泌脲酶，D正确。
2.为提高一株石油降解菌的净化能力，将该菌涂布于以石油为唯一碳源的固体培养基上，以致死率为90%的辐照剂量诱变处理。下列叙述不合理的是 (　 )
A.将培养基分装于培养皿中后灭菌，可降低培养基污染的概率
B.涂布用的菌浓度应控制在300~3000个/mL
C.需通过预实验考察辐射时间对存活率的影响，以确定最佳诱变时间
D.挑取培养基上长出的较大单菌落，纯化后进行降解效率分析
解析：选A　培养基应先灭菌再分装于培养皿中，A错误；涂布时所用菌液一般为0.1 mL，平板上的菌落数应为30~300，所以涂布用的菌浓度应控制在300~3 000个/mL，B正确；需通过预实验考察辐射时间对存活率的影响，再进行正式实验，以确定最佳诱变时间，C正确；石油降解菌能分解石油获得碳源，形成菌落，挑取培养基上长出的较大单菌落，纯化后进行降解效率分析，以获得能高效降解石油的菌种，D正确。
3.(2025·郑州二模)固氮微生物可将空气中的氮气(N2)还原为氨，并转化为细胞中的含氮物质，是土壤中氮素的主要来源。下表是一个用于分离培养固氮微生物的培养基配方，其中甘露醇的分子式为C6H14O6，下列叙述错误的是 (　 )
物质名称 C6H14O6 K2HPO4 MgSO4·7H2O NaCl CaSO4·2H2O CaCO3 H2O
含量 20 g 0.2 g 0.2 g 0.2 g 0.1 g 5 g 1 000 mL
A.甘露醇在培养基中的主要作用是调节渗透压
B.固氮菌合成的氨属于初生代谢物
C.对该培养基先调节pH再进行湿热灭菌
D.该培养基为选择培养基，不含凝固剂
解析：选A　甘露醇主要为该培养基提供碳源，A错误；固氮菌合成的氨是固氮菌生长所必需的，属于初生代谢物，B正确；为了防止调节pH过程中的杂菌污染，一般先调pH再进行湿热灭菌，C正确；分析培养基成分可知，培养基中没有氮源，不能固氮的微生物在该培养基上不能生长，因此该培养基为选择培养基，没有加入琼脂，不含凝固剂，D正确。
4.(2025·梅州二模)双层平板法是对T2噬菌体进行计数的常用方法。在培养皿中倒入琼脂含量为2%的培养基凝固成底层平板后，将琼脂含量为1%的培养基熔化并冷却至45~48 ℃，然后加入敏感指示菌和待测T2噬菌体稀释悬液的混合液，充分混匀后立即倒入底层平板上形成双层平板。培养一段时间后，根据噬菌斑的数目可计算原液中噬菌体的数量。下列叙述错误的是 (　 )
A.倒平板前需利用不同方法对培养基和培养皿进行灭菌
B.若利用双层平板法对T2噬菌体进行计数，可选用乳酸菌为敏感指示菌
C.上层平板中出现噬菌斑的原因是噬菌体侵染宿主细菌使其裂解死亡
D.若上层平板中琼脂浓度较低，可能形成的噬菌斑较大，有利于计数
解析：选B　对培养基进行灭菌，常用高压蒸汽灭菌法，而对培养皿进行灭菌，常用干热灭菌法，A正确；T2噬菌体是专门寄生在大肠杆菌中的病毒，所以可选用大肠杆菌为敏感指示菌，B错误；T2噬菌体寄生于宿主细菌内，二者混合培养一段时间后，在上层平板上出现一些噬菌斑，这是T2噬菌体侵染宿主细菌使其裂解死亡所致，C正确；与底层平板相比，上层平板中琼脂浓度较低的好处是形成的噬菌斑较大，有利于计数，D正确。
5.(2025·武汉模拟)某细菌的野生株能在基本培养基上生长，该细菌的亮氨酸缺陷型突变株因无法合成亮氨酸，只能在完全培养基上生长。如图是运用影印培养法(一种类似“盖章”的接种方法，使一系列培养皿的相同位置上能出现相应菌落)纯化亮氨酸缺陷型突变株的部分流程，数字1~5表示菌落。下列叙述正确的是 (　 )
A.培养基A是基本培养基，培养基B是完全培养基
B.培养基A、B均为固体培养基，倒平板操作后，进行高压蒸汽灭菌
C.培养基B“盖章”接种后，需要用涂布器将菌种在培养基表面涂布均匀
D.可从培养基A中挑取菌落3、4进行纯化培养以获得亮氨酸缺陷型突变株
解析：选D　由题干分析可知，亮氨酸缺陷型突变株无法合成亮氨酸，无法在基本培养基上生长，只能在完全培养基上生长，与培养基A相比，培养基B中缺少了3、4两个菌落，说明菌落3、4是由亮氨酸缺陷型突变株繁殖而来的，所以培养基A为完全培养基，培养基B为基本培养基，A错误；对培养基进行高压蒸汽灭菌后再进行倒平板操作，B错误；培养基B“盖章”接种后，要注意“盖章”的方向不能改变，防止菌落位置不一致，不能用涂布器涂布均匀，C错误；菌落3和4是亮氨酸缺陷型突变株生长繁殖形成的，因此从培养基A中挑取菌落3、4进行纯化培养即可获得亮氨酸缺陷型突变株，D正确。
6.(2025·黄冈模拟)测定水样是否符合饮用水的卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的总数。大肠杆菌在含有伊红 亚甲蓝的固体培养基上长出的菌落呈深紫色。滤膜法测定大肠杆菌数目的流程如下：用滤膜过滤待测水样或其稀释液→水样或稀释液中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到伊红 亚甲蓝琼脂平板上培养→统计滤膜上菌落数目。如图为将待测水样稀释10倍后取100 mL稀释液时的测定结果。相关叙述正确的是 (　 )
A.伊红 亚甲蓝琼脂培养基属于选择培养基
B.图中1 L待测水样中含大肠杆菌约1 700个
C.为减小误差，应对所有实验组平板进行计数并取平均值
D.为防止杂菌污染，过滤装置和培养基使用前需干热灭菌
解析：选B　伊红 亚甲蓝琼脂培养基属于鉴别培养基，A错误；由图分析可知，滤膜上菌落数目为17个，该图为将待测水样稀释10倍后取100 mL稀释液时的测定结果，因此1 L待测水样中含大肠杆菌约17÷0.1×10=1 700(个)，B正确；为减小误差，一般需对实验组菌落数为30~300的平板进行计数并取平均值，C错误；培养基应该用湿热灭菌法，D错误。
二、非选择题
7.(14分)(2025·长沙模拟)磷是维持生物体生长发育所必需的元素。由于动植物体内缺少水解植酸磷的植酸酶，所以不能很好地利用饲料及土壤中的植酸磷，造成了磷的浪费；同时，动物的高磷粪便排入环境，也造成土壤和水体污染。目前，产植酸酶的细菌种类有很多，如图表示科研人员从土壤中分离产植酸酶的菌株的操作过程(A~E表示菌株)。
(1)本实验用牛肉膏蛋白胨培养基，其中牛肉膏提供的主要营养是____________________________________
(答出2种即可)，培养细菌时需将pH调至　　　　　　　 　。(3分)
(2)常采用　　 　　　　　法对培养基进行灭菌，灭菌后的培养基需要倒过来放置的目的：一是　　 　　　　
　　　　　　　　　　　，二是避免培养基中的水分过快蒸发。(2分)
(3)图中采用的接种方法是_____________________________________________________________________，
为了保证结果准确，一般选择菌落数在　　 　　的平板进行计数，统计的菌落数往往比活菌的实际数目　　 　　　(填“高”或“低”)，原因是_______________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________。(4分)
(4)经20 ℃恒温培养箱培养后，培养基中出现透明圈(分解植酸磷产生的)，图中透明圈最大的是　　　
　 　，可挑取该菌落进行纯培养。在家畜饲料添加剂中使用植酸酶还需要考虑的因素有_______________
____________________________________________________________________________(答出2点即可)。
另外添加植酸酶在一定程度上起到改善环境的作用，原因是_________________________________。(5分)
解析：(1)牛肉膏蛋白胨培养基中，牛肉膏提供的主要营养是碳源、氮源、磷酸盐和维生素等。培养细菌时需将pH调至中性或弱碱性。(2)常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌，灭菌后的培养基需要倒过来放置的目的：一是防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成培养基污染，二是避免培养基中的水分过快蒸发。(3)图中采用的接种方法是稀释涂布平板法，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板进行计数，统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。(4)经20 ℃恒温培养箱培养后，培养基中出现透明圈(分解植酸磷产生的)，图中透明圈最大的是菌株E，可挑取该菌落进行纯培养。在家畜饲料添加剂中使用植酸酶还需要考虑的因素有温度、植酸酶的用量(最适浓度)、植酸酶的储存条件等。另外添加植酸酶在一定程度上起到改善环境的作用，原因是饲料中添加植酸酶可使磷被充分吸收，减少粪便中磷的排出量，降低对环境造成的污染。
答案：(1)碳源、氮源、磷酸盐和维生素等(答出2种即可)　中性或弱碱性　(2)高压蒸汽灭菌　防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成培养基污染　
(3)稀释涂布平板法　30~300　低　当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落　(4)菌株E　温度、植酸酶的用量(最适浓度)、植酸酶的储存条件等(答出2种即可)　饲料中添加植酸酶可使磷被充分吸收，减少粪便中磷的排出量，降低对环境造成的污染
3 / 4课时跟踪检测（五十三）微生物的培养技术及应用
一、选择题
1.(2025·武汉模拟)平板接种是微生物培养的常用技术。下列叙述错误的是 (　 )
A.不含碳源的平板可以用于某些微生物的培养
B.进行平板划线时，接种环使用前必须进行灼烧灭菌
C.接种后未长出菌落，说明培养基未被污染，可以直接丢弃
D.以尿素为唯一氮源的培养基上长出的菌落不一定可以分泌脲酶
菌可以利用空气中的N2进行生长,故以尿素为唯一氮源的培养基上长出的菌落不一定可以分泌脲酶，D正确。
2.为提高一株石油降解菌的净化能力，将该菌涂布于以石油为唯一碳源的固体培养基上，以致死率为90%的辐照剂量诱变处理。下列叙述不合理的是 (　 )
A.将培养基分装于培养皿中后灭菌，可降低培养基污染的概率
B.涂布用的菌浓度应控制在300~3000个/mL
C.需通过预实验考察辐射时间对存活率的影响，以确定最佳诱变时间
D.挑取培养基上长出的较大单菌落，纯化后进行降解效率分析
3.(2025·郑州二模)固氮微生物可将空气中的氮气(N2)还原为氨，并转化为细胞中的含氮物质，是土壤中氮素的主要来源。下表是一个用于分离培养固氮微生物的培养基配方，其中甘露醇的分子式为C6H14O6，下列叙述错误的是 (　 )
物质名称 C6H14O6 K2HPO4 MgSO4·7H2O NaCl CaSO4·2H2O CaCO3 H2O
含量 20 g 0.2 g 0.2 g 0.2 g 0.1 g 5 g 1 000 mL
A.甘露醇在培养基中的主要作用是调节渗透压
B.固氮菌合成的氨属于初生代谢物
C.对该培养基先调节pH再进行湿热灭菌
D.该培养基为选择培养基，不含凝固剂
4.(2025·梅州二模)双层平板法是对T2噬菌体进行计数的常用方法。在培养皿中倒入琼脂含量为2%的培养基凝固成底层平板后，将琼脂含量为1%的培养基熔化并冷却至45~48 ℃，然后加入敏感指示菌和待测T2噬菌体稀释悬液的混合液，充分混匀后立即倒入底层平板上形成双层平板。培养一段时间后，根据噬菌斑的数目可计算原液中噬菌体的数量。下列叙述错误的是 (　 )
A.倒平板前需利用不同方法对培养基和培养皿进行灭菌
B.若利用双层平板法对T2噬菌体进行计数，可选用乳酸菌为敏感指示菌
C.上层平板中出现噬菌斑的原因是噬菌体侵染宿主细菌使其裂解死亡
D.若上层平板中琼脂浓度较低，可能形成的噬菌斑较大，有利于计数
5.(2025·武汉模拟)某细菌的野生株能在基本培养基上生长，该细菌的亮氨酸缺陷型突变株因无法合成亮氨酸，只能在完全培养基上生长。如图是运用影印培养法(一种类似“盖章”的接种方法，使一系列培养皿的相同位置上能出现相应菌落)纯化亮氨酸缺陷型突变株的部分流程，数字1~5表示菌落。下列叙述正确的是 (　 )
A.培养基A是基本培养基，培养基B是完全培养基
B.培养基A、B均为固体培养基，倒平板操作后，进行高压蒸汽灭菌
C.培养基B“盖章”接种后，需要用涂布器将菌种在培养基表面涂布均匀
D.可从培养基A中挑取菌落3、4进行纯化培养以获得亮氨酸缺陷型突变株
6.(2025·黄冈模拟)测定水样是否符合饮用水的卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的总数。大肠杆菌在含有伊红 亚甲蓝的固体培养基上长出的菌落呈深紫色。滤膜法测定大肠杆菌数目的流程如下：用滤膜过滤待测水样或其稀释液→水样或稀释液中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到伊红 亚甲蓝琼脂平板上培养→统计滤膜上菌落数目。如图为将待测水样稀释10倍后取100 mL稀释液时的测定结果。相关叙述正确的是 (　 )
A.伊红 亚甲蓝琼脂培养基属于选择培养基
B.图中1 L待测水样中含大肠杆菌约1 700个
C.为减小误差，应对所有实验组平板进行计数并取平均值
D.为防止杂菌污染，过滤装置和培养基使用前需干热灭菌
二、非选择题
7.(14分)(2025·长沙模拟)磷是维持生物体生长发育所必需的元素。由于动植物体内缺少水解植酸磷的植酸酶，所以不能很好地利用饲料及土壤中的植酸磷，造成了磷的浪费；同时，动物的高磷粪便排入环境，也造成土壤和水体污染。目前，产植酸酶的细菌种类有很多，如图表示科研人员从土壤中分离产植酸酶的菌株的操作过程(A~E表示菌株)。
(1)本实验用牛肉膏蛋白胨培养基，其中牛肉膏提供的主要营养是____________________________________
(答出2种即可)，培养细菌时需将pH调至　　　　　　　 　。(3分)
(2)常采用　　 　　　　　法对培养基进行灭菌，灭菌后的培养基需要倒过来放置的目的：一是　　 　　　　
　　　　　　　　　　　，二是避免培养基中的水分过快蒸发。(2分)
(3)图中采用的接种方法是_____________________________________________________________________，
为了保证结果准确，一般选择菌落数在　　 　　的平板进行计数，统计的菌落数往往比活菌的实际数目　　 　　　(填“高”或“低”)，原因是_______________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________。(4分)
(4)经20 ℃恒温培养箱培养后，培养基中出现透明圈(分解植酸磷产生的)，图中透明圈最大的是　　　
　 　，可挑取该菌落进行纯培养。在家畜饲料添加剂中使用植酸酶还需要考虑的因素有_______________
____________________________________________________________________________(答出2点即可)。
另外添加植酸酶在一定程度上起到改善环境的作用，原因是_________________________________。(5分)
(3)稀释涂布平板法　30~300　低　当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落　(4)菌株E　温度、植酸酶的用量(最适浓度)、植酸酶的储存条件等(答出2种即可)　饲料中添加植酸酶可使磷被充分吸收，减少粪便中磷的排出量，降低对环境造成的污染
3 / 4

展开更多......

收起↑