资源简介

单元检测卷(十三)　基因工程及生物技术的安全性与伦理问题
(时间:75分钟　分值:100分)
一、选择题:每小题3分,16小题,共48分。在所给出的四个选项中,只有一个选项最符合题目要求。
1.(2025·山西吕梁开学考)DNA重组技术可以赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中需要使用多种工具酶。下列相关叙述正确的是(　　)
A.所有的限制酶都具有专一性,不同限制酶切割产生的黏性末端都不同
B.限制酶和DNA连接酶分别能催化磷酸二酯键的断裂和形成
C.限制酶识别序列越短,则相应酶切位点在DNA中出现的概率越小
D.DNA连接酶可以将游离的单个脱氧核苷酸连接成双链结构
2.(2025·山西长治质检)下图是利用基因工程技术培育转基因植物生产可食用疫苗的部分过程示意图,其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性内切核酸酶。下列说法错误的是(　　)
A.目的基因的检测与鉴定是基因工程的核心步骤
B.表达载体构建时需要用到限制酶PstⅠ、EcoRⅠ
C.抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来
D.除图示组成外,表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构
3.(2025·河北保定开学考)同一生物对决定相同氨基酸的不同密码子的使用频率有较大差异。密码子的优化是指利用基因工程技术,将使用频率较低的密码子替换。优化后的目的基因和优化前相比,下列说法正确的是(　　)
A.DNA分子中可能会出现尿嘧啶
B.转录形成的mRNA序列不变
C.翻译合成的蛋白质种类改变
D.翻译合成蛋白质的效率提高
4.(2025·辽宁联考)线粒体和叶绿体都是与能量转换有关的细胞器。在精细胞形成精子的过程中,细胞的很多结构退化消失,但仍保留了大量线粒体。为了避免基因通过花粉外溢造成污染,科学家将外源抗虫基因整合到烟草的叶绿体DNA中,获得了能产生抗虫蛋白的转基因烟草。下列有关叙述错误的是(　　)
A.精子中保留大量的线粒体,对动物通过有性生殖繁育后代具有积极的意义
B.外源基因需要穿过叶绿体的外膜和内膜才能与叶绿体DNA结合
C.将转基因烟草的花粉授给普通烟草,产生的后代也能抗虫
D.叶肉细胞中有多个叶绿体,有利于增加外源抗虫蛋白的含量
5.(2025·河北唐山开学考)不同生物编码同种氨基酸时,对简并密码子的使用频率存在差异。为在棉花植株中准确高效表达苏云金杆菌的Bt抗虫蛋白,科研人员通过对Bt基因改造,将部分密码子改变为棉花偏爱的密码子。将改造后的Bt基因通过农杆菌转化法导入棉花叶圆片,以获得抗虫棉花植株。下列叙述错误的是(　　)
A.苏云金杆菌、农杆菌及棉花共用一套遗传密码
B.改造后的Bt基因编码的蛋白质中氨基酸序列发生改变
C.将基因导入棉花叶圆片后需经组织培养以获得转基因抗虫棉
D.通过采摘抗虫棉的叶片饲喂棉铃虫来检测棉花抗虫特性以及抗性的程度
6.(2025·四川成都期末)生物技术的进步在给人类带来福祉的同时,会引起人们对它安全性的关注,也会与伦理道德发生碰撞,带来新的伦理困惑与挑战。下列观点正确的是(　　)
A.转基因生产的是自然界存在的物质,不需要进行安全检测
B.设计试管婴儿能使后代更优秀,应该大力提倡使用该技术
C.我国允许治疗性克隆,不需要对其作有效监管和严格审查
D.生物武器危害大,我国反对生物武器及其技术和设备扩散
7.(2025·云南文山联考)除草剂的有效成分草甘膦能够专一性抑制EPSP合成酶的作用,从而使植物多种代谢途径受影响而导致植物死亡,草甘膦没有选择性,除掉杂草的同时作物也会受损,培育抗草甘膦作物是解决办法之一,下列关于转入外源EPSP合成酶基因使矮牵牛抗草甘膦流程的叙述正确的是(　　)
A.可以通过mRNA在逆转录酶的作用下构建DNA,从而获取EPSP合成酶基因
B.用限制酶和DNA连接酶处理目的基因和 Ti质粒,仅涉及磷酸二酯键的断裂和形成
C.基因表达载体组件中的起始密码子是RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动基因转录
D.目的基因插入Ti质粒的T-DNA上,农杆菌的转化能使植物细胞都能培育出转基因植株
8.(2025·甘肃白银期末)利用乳腺生物反应器生产药用蛋白是动物基因工程的重要应用,目前科学家已在牛和山羊等动物乳腺生物反应器中获得了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素和α-抗胰蛋白酶等医药产品。下列有关乳腺生物反应器的叙述,错误的是(　　)
A.受体细胞应选用早期胚胎的桑葚胚细胞
B.获得转基因动物需利用胚胎移植技术
C.鉴别药用蛋白基因是否导入受体细胞可利用DNA分子杂交技术
D.转基因动物产生的生殖细胞可能含有药用蛋白基因
9.(2024·湖北模拟)上海长征医院联合中科院分子细胞研究中心,利用患者血液PBMC(如淋巴细胞、单核细胞等)重编程为自体iPS细胞,并使用国际首创技术使之转变为内胚层干细胞,国际上首次利用干细胞来源的自体再生胰岛移植,成功治愈胰岛功能严重受损的糖尿病的病例。下列说法错误的是(　　)
A.创造iPS细胞不需要人类胚胎可避免伦理问题
B.餐后患者再生胰岛B细胞的胰岛素分泌会增加
C.胰岛素与骨骼肌上受体结合后促进肌糖原合成
D.下丘脑分泌的激素经体液运输作用于胰岛细胞
10.(2025·四川成都开学考)DNA分子杂交时,常需要大量的单链DNA探针。不对称PCR是一种常见的单链DNA探针制备方法,其原理是反应体系中加入一对数量不相等的引物。假设在PCR反应的早期10个循环中,扩增产物是双链DNA,当较少的限制性引物耗尽后,数量较多的非限制性引物将引导合成大量目标DNA单链。下列说法正确的是(　　)
A.若A链为所需的DNA分子探针,则非限制性引物应选用引物Ⅲ
B.进行最初10个循环的目的是为了将限制性引物消耗完,以保证获得大量的单链DNA探针
C.设计较长的限制性引物与较短的非限制性引物,以便于后阶段通过提高温度来控制产物生成量
D.如果体系中原模板DNA的数量为a,共进行25次循环,则最终获得的单链探针数为15×210a
11.(2025·江苏南通质检)常规PCR只能扩增两引物间的DNA区段,要扩增已知DNA序列两侧的未知DNA序列,可用反向PCR技术。反向PCR技术扩增的原理如图所示。下列叙述错误的是(　　)
A.酶切阶段,L中不能含有酶切时所选限制酶的识别序列
B.PCR技术的操作步骤依次是高温变性、低温复性、中温延伸
C.图中引物,应选择引物1和引物4,且二者间不能互补配对
D.PCR扩增,每轮循环前应加入限制酶将环状DNA切割成线状
12.(2024·T8联考)天然玫瑰没有生成蓝色翠雀花素所需的相关基因,因此蓝玫瑰被认为是不可能培育成功的。科学家利用链霉菌的蓝色翠雀花素合成酶基因(idgS)及其激活基因(sfp)构建基因表达载体(如图,PmeⅠ、BamHⅠ、SpeⅠ、SacⅠ为不同限制酶),通过农杆菌转化法导入天然玫瑰从而成功培育出了蓝玫瑰。下列叙述正确的是(　　)
A.sfp和idgS基因表达时转录的模板链不是T-DNA的同一条
B.将sfp基因和idgS基因插入Ti质粒时使用的限制酶分别是PmeⅠ、BamHⅠ和SpeⅠ、BamHⅠ
C.可用抗原—抗体杂交法检测idgS基因是否成功表达出了蓝色翠雀花素
D.农杆菌在自然条件下可侵染单子叶植物和裸子植物,而对大多数双子叶植物没有侵染能力
13.(2025·山东青岛质检)草鱼是我国养殖产量最大的水产品种之一、近日武汉高泽霞教授团队找到并敲除控制草鱼肌间刺产生的关键基因B,成功培育出“无刺”草鱼,实验过程如下。下列说法错误的是(　　)
A.可从鱼刺中提取mRNA进行逆转录获得cDNA,从中找到与鱼刺发育有关的基因
B.PCR扩增时反应体系中需加入模板、原料、引物、耐高温的DNA聚合酶、Mg2+等
C.利用基因编辑技术获得一条敲除基因B的杂合体少刺草鱼,通过一代杂交可获得遗传性状稳定的无刺鱼
D.养殖遗传性状稳定的无刺鱼时,应避免与野生鱼杂交,否则可能会造成生态威胁
14.(2024·广东一模)水稻→褐飞虱→拟水狼蛛表示某农田生态系统的一条食物链,Bt毒蛋白转基因水稻中含有的Cry1Ab杀虫蛋白可以和目标昆虫肠道上的特异性受体结合发挥杀虫效应,Cry1Ab杀虫蛋白可通过食物链转移至褐飞虱和拟水狼蛛体内,并产生富集效应,但不会对其存活、行为带来影响,下列有关叙述错误的是(　　)
A.褐飞虱和拟水狼蛛肠道内缺乏Cry1Ab受体
B.营养级越高,生物体内Cry1Ab的含量就越少
C.富集效应的产生和生物体内不含Cry1Ab水解酶有关
D.Cry1Ab在褐飞虱体内积累可能带来一定的生态风险
15.(2024·河南周口开学考)研究人员通过PCR扩增质粒pDNR-LIB中的sacB基因,该基因的产物对蔗糖敏感,是一种常见的反选择标记基因。tetA是四环素抗性基因,利用基因工程将sacB基因插入到质粒pAH162上,构建含有tetA-sacB双重选择系统的重组质粒,即pAH162-sacB,具体过程如图所示。将pAH162-sacB导入大肠杆菌验证其双重选择作用。下列分析错误的是(　　)
A.将sacB基因插入pAH162上需要的限制酶是BamHⅠ、EcoRⅠ
B.需用Ca2+处理大肠杆菌细胞使其能主动吸收周围环境中的DNA分子
C.为保证正向连接,PCR时应在sacB基因上游引物的5'端添加BamHⅠ识别序列
D.大肠杆菌能在含四环素的培养基中生长说明双重选择系统的重组质粒构建成功
16.(2024·黑龙江大庆一模)双脱氧末端终止测序法(Sanger法)是第一代DNA测序方法。在4支试管中分别加入4种dNTP和1种ddNTP进行PCR,PCR产物变性后利用电泳进行分离,根据结果确定特定碱基的位置。通过该方法测定并比较某疾病患者与对照个体DNA模板链的一段碱基序列,结果如图所示。下列叙述错误的是(　　)
注:双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)有ddATP、ddGTP、ddTTP、ddCTP四种;脱氧核苷三磷酸(dNTP,PCR的原料)有dATP、dGTP、dTTP、dCTP四种。在DNA聚合酶作用下,ddNTP与dNTP竞争核苷酸链延长位点,若连接上的是ddNTP,子链延伸终止;若连接上的是dNTP,子链延伸继续。
A.PCR过程中遵循碱基互补配对原则
B.沿电泳方向,核苷酸链长度逐渐减小
C.对照个体DNA模板链序列为5'-CTACCCGTGAT-3'
D.患者该段序列中某位点的碱基G突变为A
二、非选择题:共4小题,52分。
17.(12分)(2024·黑龙江大庆一模)从健康人的血浆中分离提取的人血清白蛋白(HSA)在临床上需求量很大,具有重要的医用价值。研究人员将HSA基因转入水稻细胞中,培育转基因植物。下图1为HSA基因的部分片段,图2是获得转基因植物的流程图,其中报告基因表达的产物能催化无色物质K反应生成蓝色物质。据图回答下列问题:
注:外显子指基因中编码蛋白质的片段,内含子指基因中不编码蛋白质的片段。
(1)(5分)科研人员获取HSA基因后,可用PCR技术进行扩增,该技术的原理是　　　　　　　　,操作的每个循环都包括变性、复性和延伸三步,其中温度最高的步骤为　　　　　　　　。据图1分析,若要扩增出只含有内含子2和外显子3的DNA片段,应选择的引物是　　　　　　　　。
(2)(3分)构建重组Ti质粒过程中,为了保证连接的准确性,需要选择　　　　　　种限制酶对目的基因和Ti质粒进行切割。一个重组Ti质粒的组成,除图中所示外,还必须包含　　　　　　　　等。
(3)(2分)过程①中需将植物细胞与农杆菌混合培养,旨在使T-DNA进入植物细胞;除尽农杆菌后,需将植物细胞转接到含　　　　　　　　的培养基上筛选出转化成功的细胞。
(4)(2分)检测发现HSA基因成功导入植物受体细胞,但仍不能确定转基因水稻是否培育成功,理由是　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　 　　　　　　　 　　　　　　　 　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　。
18.(12分)(2024·九省联考河南卷)水稻胚乳可作为生物反应器用于开发功能性产品。从猪瘟病毒抗原蛋白的预期功能出发,研究小组设计其预期的结构,推测应有的氨基酸序列,合成新的基因X。利用PCR技术对其进行扩增并连接启动子1,形成Z片段。把Z片段插入Ti质粒的T-DNA中,将构建好的基因表达载体导入水稻细胞完成转化,在胚乳中获得相应蛋白,最终将蛋白进一步加工为植物源猪瘟疫苗。相关信息如图所示。
回答下列问题。
(1)(5分)研究小组通过PCR扩增Z片段,延伸过程中,4种脱氧核苷酸在　　　　　　　　催化作用下合成新的DNA链。酶切时,限制酶识别序列的重叠会降低切割效率。为构建基因表达载体,选择限制酶Hind Ⅲ和　　　　　　　　进行切割,可使Z片段插入T-DNA的效率最高。为使基因能够正常表达,质粒上的N和J应都为　　　　　　　　。
(2)(5分)为获得含蛋白X的水稻材料,首先诱导水稻种子脱分化形成　　　　　　　　,然后通过　　　　　　的侵染,使目的基因进入水稻细胞并完成转化,再将其转接到含特定激素的培养基上,诱导其　　　　　　形成具有根、茎、叶的完整植株。
(3)(2分)为验证水稻中目的基因X是否表达(转录和翻译),分子水平上的检测方法有　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　 　　　　　　　 　　　　　　　 　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　(答出2点即可)。
19.(14分)(2025·河北邢台开学考)蛋白A 是动物细胞分泌的一种优质蛋白,为使得大肠杆菌具备合成蛋白A的能力,研究人员进行了如图1所示的操作,图2表示3种限制酶的切割位点。回答下列问题:
(1)(2分)在利用PCR技术扩增基因A时,应在反应体系中添加　　　　酶。为使得扩增出的目的基因带有限制酶的切割序列,应选择的引物是　　　　　　　　　　　　　　　　。
A.5'……GGATCCATTACGGATCG……3'
B.5'……GTCGACTGCAATCGTGC……3'
C.5'……GTCGACACGTTAGCACG……3'
D.5'……GGATCCTAATGCETAGC……3'
(2)(4分)为了验证所选出的质粒是否符合要求,研究人员用少量限制酶EcoRⅠ和BamHⅠ处理P1~P3组质粒后,再进行电泳的结果如图3所示,图3中一定不符合要求的是　　　　　　　,依据是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
(3)(6分)制备含抗生素M的培养基时,应在调节pH　　　　(填“前”或“后”)进行灭菌处理。上述抗生素M是指　　　　,未获得外源DNA的大肠杆菌不能在该培养基上生长。为了增加符合要求的大肠杆菌的数量,通常使用液体培养基进行培养,理由是　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
(4)(2分)研究发现成功导入基因A的大肠杆菌中,基因A顺利完成了转录和翻译,但是最终未得到所需要的蛋白A,从细胞的结构角度分析,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
20.(14分)(2025·山西长治质检)养蚕业中,雄蚕比雌蚕的吐丝量高且蚕丝质量好,但大规模鉴别雌雄蚕是非常困难的。研究人员利用基因工程技术对桑蚕进行改造,以实现蚕农只饲养雄蚕的愿望。
(1)(4分)构建TT'杂合雄蚕品系
研究发现,位于常染色体上的T基因缺失后(基因型可表示为tt)会导致桑蚕胚胎停育。科研人员构建含有图1所示T'基因的载体,利用　　　　法将其导入雄蚕受精卵中,借助基因组编辑技术实现对T基因区段的替换;导入完成后通常采用　　　　　　技术检测目的基因是否插入了雄蚕的基因组。最终得到基因型为TT'的杂合雄蚕品系。
(2)(10分)构建特异性表达Cre酶的雌蚕品系
Cre酶可以特异性识别LoxP位点,从而将LoxP位点间的DNA片段进行切除。研究人员将胚胎发育后期特异性表达的基因的启动子与Cre酶基因定点整合到W染色体上,构建了基因型为TT且特异性表达Cre酶的雌蚕品系。
①将该品系与TT'杂合雄蚕杂交,当F1桑蚕胚胎发育至后期时,T'基因存在于　　　　　　(填“雄蚕”“雌蚕”或“雌蚕和雄蚕”)中,会表现出绿色荧光的桑蚕占比为　　　　　　。
②为对特异性表达Cre酶的雌蚕品系进行保持,科研人员在F1中筛选出Tt的雌蚕与TT'的雄蚕进行后续杂交,并利用图2中的引物对F2桑蚕的早期胚胎进行了PCR检测,结果如图3所示。结合以上结果,在1~6号桑蚕的早期胚胎中,可用于保持下一代品系的雄性个体是　　　　号, 　　　　号桑蚕胚胎可能发生停育。
③科研人员认为,F2桑蚕发育为幼虫后,能表现出绿色荧光的个体为　　　　　　(填“雄蚕”“雌蚕”“雌蚕和雄蚕”),判断依据是　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　
　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　。
单元检测卷(十二)　发酵工程与细胞工程
1.A　[如果米酒呈酸味,是由于醋酸菌利用酒精生成了醋酸,而这是在有氧的条件下进行的,与封闭的酿酒容器无关,A错误;酵母菌在密闭酿酒容器内初期由于空间和资源都比较充裕,所以种群呈“J”形增长,B正确;客家人用稻草为酿酒容器“保暖”,为酵母菌提供适宜的温度,促进酵母菌增殖,C正确;根霉、毛霉与酵母菌在同一空间中都利用有机物生存,构成竞争关系,因此应控制酒曲中各种微生物的比例,D正确。]
2.D　[中药基质作为药用真菌生长的培养基,为其生长提供水、无机盐、碳源和氮源等,A正确;优良药用真菌可以从自然界中筛选出,也可以通过诱变育种或基因工程育种获得,B正确;药用真菌在药性基质上的生长过程中,通过一系列复杂的代谢反应过程产生新的活性成分,故发酵产品中新的活性成分可能是真菌的某代谢产物,C正确;在发酵过程中,温度、pH和溶解氧等发酵条件不仅会影响微生物的生长繁殖,而且会影响微生物代谢物的形成,D错误。]
3.C　[该实验研究的是芽孢杆菌对尖镰孢菌的抑制作用,因此对照组设置与图中实验组的区别是平板上只接种尖镰孢菌或在接种芽孢杆菌处接种等量的蒸馏水,A错误;据图可知,这三组实验中,N1菌株组中平板中央的尖镰孢菌菌落最小,说明N1菌株抑制尖镰孢菌增殖的效果最强,B错误;为了确保所使用的菌株是纯净的,不含有其他杂菌,挑选出抑制效果最强的菌株后,需对其进行纯化培养,C正确;依题意,芽孢杆菌主要是通过产生几丁质酶等物质来抑制尖镰孢菌的增殖,因此可利用芽孢杆菌发酵生产几丁质酶等物质,利用这些物质防治枯萎病,D错误。]
4.C　[根据题意,谷氨酸棒状杆菌发酵的过程中,将小麦预处理以后,再用淀粉水解酶处理获得葡萄糖,与谷氨酸棒状杆菌混合进行发酵,因此谷氨酸棒状杆菌的主要碳源、氮源分别是葡萄糖、尿素,A错误;谷氨酸棒状杆菌的呼吸方式为有氧呼吸,与乳酸菌不同,乳酸菌进行的是无氧呼吸,B错误;谷氨酸的发酵生产在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸,在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺,C正确;味精是发酵产物谷氨酸和碳酸氢钠反应经过结晶得到的,而谷氨酸是谷氨酸棒状杆菌的代谢产物,可通过提取、分离和纯化获得,D错误。]
5.B　[嗜盐单胞菌是一类嗜盐好氧微生物,能够在高pH、高盐和高温等极端条件下生长,所以使用嗜盐单胞菌能够节约淡水资源,即便在没有灭菌的情况下也很难感染杂菌,使用嗜盐单胞菌发酵可建立抗杂菌污染的开放式发酵系统,A正确;嗜盐单胞菌是一类嗜盐好氧微生物,需要提供有氧发酵条件,B错误;PHA是嗜盐单胞菌的代谢产物,在发酵后应采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品,C正确;PHA具有类似于合成塑料的物化特性及合成塑料所不具备的生物可降解性等许多优良性能,利用嗜盐单胞菌生产PHA有利于对自然环境的保护,D正确。]
6.C　[利用动物细胞融合技术将免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,杂交瘤细胞既能无限增殖,又能产生特异性抗体,利用该细胞制备单克隆抗体,A正确;ADC中抗体的作用是特异性识别肿瘤细胞表面的抗原并与之结合,发挥靶向运输作用,药物发挥治疗效应,B正确;ADC与肿瘤细胞识别后,被肿瘤细胞以胞吞的方式吸收进入细胞,C错误;抑制细胞内信息传递或细胞分裂的药物可以抑制细胞增殖,选择它们作为“弹头”可选择性杀伤肿瘤细胞,D正确。]
7.B　[愈伤组织属于未分化状态,A错误;培养液中蔗糖可做碳源,能为植物细胞提供营养,并能维持一定的渗透压,B正确;脱分化形成愈伤组织过程中,不需要提供光照,C错误;利用悬浮培养技术生产次生代谢物不需要培育出胚状体,培养到愈伤组织即可,D错误。]
8.C　[根尖分生区细胞分裂能力强,易于诱导形成愈伤组织,A正确;①②未发育成完整植株或分化为各种细胞,故不能体现植物细胞具有全能性,B正确;愈伤组织无叶绿体,不能进行光合作用,应添加蔗糖等有机碳源,C错误;大规模培养高产细胞群时,应向培养液中通入无菌空气,保证细胞的有氧呼吸,D正确。]
9.B　[由题干可知,将豆腐渣烘干的主要目的是散失适量的水分,不一定能达到灭菌效果,A错误;流程图中的拌霉是将干净的稻草覆盖在豆腐渣上面,利用空气中和稻草上附带的毛霉进行发酵,家庭酿制葡萄酒时利用葡萄皮上自带的菌种进行发酵,都采用了自然接种的方法,B正确;毛霉为好氧微生物,霉豆腐渣制作的发酵阶段不需要密封,C错误;在发酵过程中,豆腐渣中的蛋白质被分解成小分子的肽和氨基酸,D错误。]
10.C　[图中可以看出甲、乙过程主要是梯度稀释,②是在Ⅰ号培养基用稀释涂布平板法进行的接种,A正确;图2中淀粉是唯一碳源,能产生淀粉酶分解淀粉的菌落周围不会出现蓝色,所以周围不显蓝色的菌落含有所需菌种,B正确;在Ⅱ号培养基用接种环挑菌划线时,第一次划线后,灼烧接种环,待其冷却后,从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作,作第三、四、五次划线,注意不要将最后一次的划线与第一次的划线相连,通过这样划线后培养可分离得到单菌落,C错误;丙是液体培养基,无琼脂,嗜热菌可以在高温环境中生存,因此接种后放入适宜的较高温度培养箱中扩大培养,D正确。]
11.D　[过程①用含血清的液体培养基,置于95%空气和5%CO2培养箱中培养,这是常见的动物细胞培养条件,A正确;过程②表示的卵母细胞去核,实际去除的是纺锤体—染色体复合物,这是核移植技术中去核的关键操作,B正确;可用Ca2+载体或乙醇激活重构胚,使其完成分裂和发育进程,这是激活重构胚的常见方法,C正确;提供去核的卵母细胞含有细胞质基因,也会遗传给食蟹猴,因此食蟹猴性状表现和提供卵母细胞的雌性食蟹猴有关,D错误。]
12.C　[克隆动物的生殖方式为无性生殖,试管动物的生殖方式为有性生殖,A错误;卵母细胞的去核方法有显微操作法、梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等,Ca2+载体是激活重构胚的方法,B错误;胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移,胚胎移植时,受体母牛需要和供体处于相同的生理状态,需进行同期发情处理,C正确;水牛克隆过程涉及的技术有核移植、细胞融合和激活、早期胚胎培养、胚胎移植等,没有体外受精,D错误。]
13.C　[由题干可知,乳腺癌细胞的HER2蛋白是正常组织中的100倍以上,因此HER2蛋白不是乳腺癌细胞特有的蛋白,A正确;动物细胞培养技术可用于培养B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,动物细胞融合技术可将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,从而制备抗HER2抗体,B正确;据图可知,ADC被溶酶体酶降解,释放出的是药物,药物使乳腺癌细胞裂解死亡,C错误;荧光标记的抗HER2单克隆抗体能特异性地与乳腺癌细胞表面的HER2蛋白结合,从而可用于乳腺癌的定位诊断,D正确。]
14.A　[植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性,即细胞经分裂分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能,A正确;第3、4组和第6、7组随6-BA/NAA浓度比值上升,不定芽的再生率也在升高,B错误;诱导生根和诱导生芽所需的培养基成分和比例通常是不同的,后续诱导生根的培养中,培养基中各成分的含量需要做出相应的变化,C错误;作为外植体的叶片诱导培养前需要用酒精消毒,然后用无菌水清洗2~3次,而不是立刻用清水清洗,D错误。]
15.A　[该项技术是将模型植入肋骨的软骨周围,诱导软骨再生,并不需要体外培养细胞,A错误;耳朵模型植入肋骨的软骨周围,这个特定的空间结构诱导了再生耳形软骨,可能影响细胞的分裂和分化,B正确;骨膜组织定向生成软骨组织,既没有形成完整的个体,也不是分化形成各种组织细胞,故并不能体现骨膜细胞的全能性,C正确;自体再生形成的耳形软骨,细胞全部来自自身,用于自体移植时,可以避免免疫排斥反应,D正确。]
16.A　[细胞分化的实质是基因的选择性表达,A错误;目前已采用多种方法来制备多能干细胞,包括借助载体将特定的基因导入细胞中,直接将特定的蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成多能干细胞,B正确;模型猪通常去除或敲除特定的肾脏发育相关基因,以确保其自身无法发育正常的肾脏,在这样肾脏缺陷模型的猪早期胚胎中注入人类干细胞或其他人源化细胞后,这些细胞可以在猪体内生长和发育,形成具有相似功能的人源化肾脏,D正确。]
17.(1)使相关分解酶失活　(2)形成相对缺氧的环境
C6H12O62C2H5OH(酒精)+2CO2　(3)停止微生物发酵、减少茶叶霉变　(4)释涂布平板　维持培养基pH至中性偏酸
解析　(1)高温使催化茶多酚等分解的酶失活,从而减少茶叶中茶多酚等营养成分的分解。(2)渥堆时将茶坯堆积并覆盖棕垫、麻袋的目的是形成相对缺氧的环境,从而有利于相关微生物进行无氧呼吸,因此会产生酒糟气,相关反应式为:C6H12O62C2H5OH(酒精)+2CO2。(3)烘焙干燥可进一步排出多余水分,水分降低,有利于停止微生物发酵,同时减少茶叶霉变。(4)筛选并计数风味物质相关菌种应选用稀释涂布平板法,平板划线法不能计数;在筛选相关菌种时在培养基中添加乳酸的目的是维持培养基pH至中性偏酸,起到抑制细菌生长,促进霉菌等真菌生长的作用。
18.(1)保持原生质体的完整性(正常形态)　灭活病毒诱导　生长素和细胞分裂素　(2)染色体　不同物种细胞融合的细胞亲缘关系、细胞所处的分裂时期　(3)黑腐病菌
解析　(1)原生质体无细胞壁,原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压,其作用是维持原生质体的形态和功能,从而保持原生质体的完整性。诱导动物细胞融合与诱导植物细胞融合的方法相同的是都可用化学法和物理法,此外动物细胞融合还可用灭活的病毒作为诱导剂,因此与诱导动物细胞融合相比,②过程不宜采用的诱导方法是灭活病毒诱导;③④过程分别表示脱分化和再分化,③④过程中需添加的两种关键性植物激素是生长素和细胞分裂素。(2)非对称细胞融合过程中,染色体丢失的程度在同一组合不同的杂种中是不一致的,导致融合后再生后代中的染色体数量变化很大。非对称细胞融合技术利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与另一原生质体融合,从而实现有限基因的转移,在保留亲本之一全部优良性状的同时,改良其某个不良性状,因此影响细胞融合染色体丢失程度的因素,还可能与不同物种细胞融合的细胞亲缘关系有关;由于紫外线使染色体发生变异,分裂的细胞更容易发生染色体变异,因此影响细胞融合染色体丢失程度的因素,还可能与细胞所处的分裂时期等有关。(3)对杂种植物进行鉴定最简单的方法是从个体水平上进行检测,即进行黑腐病菌接种实验,可筛选出对黑腐病具有高抗性的杂种植株。
19.(1)提供氮源　碳源和海水　(2)酵母粉相比于其他3种氮源更有利于菌体的生长,而大豆蛋白胨作为氮源有利于DHA的积累　(3)抑制　大豆蛋白胨是单独添加的,因为在大豆蛋白胨质量浓度为4 g/L时的菌体干重和DHA含量与图1是一样的,表明是大豆蛋白胨单独添加的实验　(4)确定哪种氮源及浓度最适合培养裂殖壶菌及DHA生产,从而优化氮源
解析　(1)酵母粉、大豆蛋白胨在微生物培养中主要是作为氮源,培养基中除了氮源还需要碳源和无机盐,由于本实验中培养的微生物来自海洋,所以需要加入海水,海水中就有相应的无机盐,即本实验的培养基中还需要加入碳源和海水。(2)从图1可以看出,酵母粉相比于其他3种氮源,菌体的生长是最快的,而大豆蛋白胨作为氮源,DHA的积累是最多的,故本实验选用酵母粉和大豆蛋白胨作为发酵生产DHA的培养基成分。(3)从图2可以看出酵母粉浓度在4 g/L时菌体干重最多,DHA产量也最高,浓度升高后两者反而都下降,表现出抑制作用。图2和图3都是单独检测两者不同浓度的培养效果,图3在大豆蛋白胨质量浓度为4 g/L时,菌体干重和DHA含量和图1中是一样的,表明都是单独培养的结果,可见图3的实验数据的培养条件是大豆蛋白胨单独添加的实验。(4)本实验都是围绕着氮源的优化展开的,探究选择哪一种氮源,需要什么浓度,即确定哪种氮源及浓度最适合培养裂殖壶菌及DHA生产,从而优化氮源。
20.(1)Ⅳ　其抗体相对浓度较高且IC50值最低　PEG　(2)①上清液　②抗PD-1抗体　③抗PD-1抗体含量越高　(3)腹水
解析　(1)IC50值低说明抗体与抗原的结合效率高,即灵敏度高,因此制备抗PD-1单克隆抗体时应选择Ⅳ号小鼠用作细胞融合的供体,依据是其抗体相对浓度较高且IC50值最低。诱导动物细胞融合应选择PEG(聚乙二醇)试剂。(2)①在检测时需要将PD-1蛋白固定于固相载体表面制成固相抗原,并加入多孔板培养槽中的上清液(其中含有相应的抗体),即待测样本。②加入酶标抗体后一段时间,需要用洗涤剂将未与抗PD-1抗体结合的酶标抗体洗去,在载体上留下的是带有酶标抗体的抗原-抗体复合物。③加入相应酶促反应底物显色后,颜色的深浅可代表抗PD-1抗体的量,颜色越深说明待测样液中抗体含量越多。(3)若将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔中,则应从腹水中提取、分离抗体。

展开更多......

收起↑