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通用版高考生物学一轮复习
课时突破练50　微生物的培养技术及应用
必备知识基础练
一、单项选择题
考点1　微生物的基本培养技术
1.(2025山东济宁一模)在微生物的培养过程中,下列实验操作规范的是(　　)
A.制作培养基的过程中先灭菌再调整pH
B.微生物培养过程中可以使用平板划线法进行计数
C.使用刚果红培养基选择性培养土壤中分解纤维素的微生物
D.待培养基冷却至50 ℃左右时在酒精灯火焰附近倒平板制备培养基
2.(2024安徽合肥三模)滥用抗生素会导致“超级细菌”(对多种抗生素有高耐药性)的产生。某实验小组研究细菌产生青霉素抗性与青霉素之间的关系,过程及结果如下图。下列叙述正确的是(　　)
A.可通过提高抗生素浓度避免超级细菌的产生
B.用接种环在培养基上连续划线获得实验菌落
C.图中含青霉素的培养基的菌落周围会出现抑菌圈
D.细菌培养基在使用前、后均需经过灭菌处理
3.(2024山东青岛三模)稀释涂布平板法和稀释倒平板法是分离微生物的两种方法。稀释倒平板法是指将稀释的菌液和琼脂混合,然后将其倒入无菌培养皿中进行培养。下列说法正确的是(　　)
A.培养过程中所用的培养基和培养皿均可采用湿热灭菌法
B.两种方法均可通过统计菌落数实现对活菌的准确计数
C.稀释倒平板法对好氧菌、热敏感菌的分离效果优于稀释涂布平板法
D.为了防止培养基温度过高杀死微生物,应将琼脂冷却至室温后再倒平板
4.(2024山东泰安二模)我国科技工作者发明“二步发酵法”生产维生素C的工艺是世界首创。第一步发酵用醋酸杆菌合成分泌维生素C前体,第二步发酵用氧化葡萄糖酸杆菌(“小菌”)和假单胞杆菌(“大菌”)混合菌种作为伴生菌,能促进产酸菌生长和产酸。如图为二步发酵法的生产流程。下列说法正确的是(　　)
A.可以利用平板划线法纯化混菌发酵法所需的目的菌
B.单独筛选高效的产酸菌和伴生菌即可用于混菌发酵
C.伴生菌与产酸菌二者互利共生,不存在种间竞争
D.生产过程采用混菌发酵法不需要严格的无菌操作
考点2　微生物的选择培养和计数
5.(2024河北承德二模)某生物活动小组为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量,进行了取样、系列梯度稀释、涂布平板、培养、计数等步骤,实验操作过程如下,下列说法正确的是(　　)
A.图中接种的培养基是以尿素为唯一氮源的固体培养基,能生长的微生物都能合成脲酶
B.若每支试管稀释10倍,则图中a的数值应为2.7,5号试管共稀释了106倍
C.图中左上角培养基菌落连成一片,可能是稀释倍数不够造成的
D.若仅以4号试管接种培养基计数,5 g该土壤中含分解尿素菌的估算数目是1.4×108个
6.(2025山东聊城一模)纤维素是地球上数量较多的可再生资源之一,可利用微生物发酵技术对其加以有效地利用。产黄纤维单胞菌可以合成纤维素酶,常用于纤维素的分解。某实验室利用培养基对产黄纤维单胞菌进行培养、计数和鉴定,欲筛选出优良菌种,鉴定结果如图所示。下列说法错误的是(　　)
A.上述培养基含有琼脂,接种时需要使用涂布器
B.筛选上述目的菌的培养基以纤维素为唯一碳源
C.可选择菌落3中的目的菌作为优良菌种进一步培养
D.若培养时培养基受到污染,则杂菌也一定能合成纤维素酶
关键能力提升练
二、不定项选择题
7.(2025山东潍坊2月诊断)根据抗菌特性可将抗菌剂分为抑菌剂和杀菌剂,其中抑菌剂可抑制细菌生长,杀菌剂能杀死细菌。为分析抗菌剂的抗菌特性,有人将不同抗菌剂分别添加到培养的细菌悬液中,用稀释涂布平板法或显微镜直接计数法测定细菌数量,评估细菌的生长情况,变化趋势曲线如图所示(不考虑抗菌剂残留对计数的影响),其中曲线1为仅添加无菌水的实验结果。下列说法正确的是 (　　)
A.用稀释涂布平板法进行计数时,若平板上的菌落数大于200,应提高稀释倍数
B.曲线2代表添加抑菌剂后的细菌数量,曲线3代表添加杀菌剂后的细菌数量
C.若曲线2和3为添加某抗菌剂后两种方法的计数结果,则曲线2采用的是显微镜直接计数法
D.若添加某抗菌剂后两种方法统计的细菌数量均下降,推测细菌出现裂解而死亡
8.研究人员为分离出产酒精能力强的酵母菌菌株,进行了如图所示实验,甲、乙、丙、丁锥形瓶内分别加入100 mL完全培养基。相关叙述错误的是(　　)
A.过程②涂布器蘸取酒精后立即置于酒精灯火焰上灼烧,以防酒精挥发
B.根据涂布后菌落的数目计算出葡萄酒过滤液的酵母菌密度约为6.8×109个/L　
C.后续还需对甲、乙、丙、丁瓶中的酒精浓度和活菌数量进行检测
D.分离出的优质酵母菌菌株可用于白酒酿造,能耐受酒精度40%vol以上的发酵液
三、非选择题
9.(2025八省联考云南卷)普洱茶的主要活性成分——茶褐素,具有降脂减肥、抗氧化和提高免疫力等功能,在功能食品领域具有广阔的应用前景。研究人员在制作普洱熟茶的固体发酵过程中分离得到优势菌塔宾曲霉,其可在绿茶浸提液(富含茶多酚、可溶性糖、氨基酸、蛋白质和咖啡碱等)中生长繁殖,之后分泌胞外氧化酶催化茶多酚生成茶褐素。不同发酵温度下塔宾曲霉生成茶褐素的浓度如图。
回答下列问题。
(1)绿茶浸提液中的氨基酸和蛋白质可为塔宾曲霉生长提供的营养物质为　　　　　　　　。
(2)塔宾曲霉为好氧微生物,用绿茶浸提液进行液体培养时应采用　　　　(填“静置”或“摇床”)培养。培养过程中茶褐素在发酵前两天均无显著增加的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
(3)为检测发酵1 d时塔宾曲霉的数量,将发酵液稀释1×103倍后,分别取0.1 mL稀释液均匀涂布于3个培养基平板上,培养后菌落数量分别为48个、45个和42个,则每毫升发酵液中活菌数量为　　　　　　　　个。
(4)从实际生产角度出发,由图可知,在第　　　天结束发酵即可获得较高浓度的茶褐素。为探索生产茶褐素的最适温度,需设计下一步实验,请写出实验思路:　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
参考答案
1.D　2.D　3.A　4.A　5.B　6.D　7.BCD　8.ABD　
9.答案 (1)碳源和氮源
(2)摇床　塔宾曲霉先进行生长繁殖,然后分泌胞外氧化酶催化茶多酚生成茶褐素
(3)4.5×105
(4)6　在30~42 ℃之间设置一系列温度梯度,用同样的方式培养塔宾曲霉,并检测不同发酵温度下塔宾曲霉生成茶褐素的浓度,生成茶褐素浓度最高的温度即为生产茶褐素的最适温度
解析 (1)氨基酸和蛋白质可以为塔宾曲霉生长提供碳源和氮源。
(2)塔宾曲霉为好氧微生物,用绿茶浸提液进行液体培养时应采用摇床培养,可以增加培养液中的溶氧量,有利于塔宾曲霉的繁殖。培养过程中前两天塔宾曲霉进行生长繁殖,然后分泌胞外氧化酶催化茶多酚生成茶褐素。
(3)培养后菌落数量分别为48个、45个和42个,平均值为(48+45+42)÷3=45(个),发酵液稀释1×103倍后,取0.1 mL,因此每毫升发酵液中活菌数量为45÷0.1×103=4.5×105(个)。
(4)分析题图可知,温度为37 ℃和42 ℃时发酵效率较高,发酵至第6天,结束发酵即可获得较高浓度的茶褐素。生产茶褐素的最适温度在30~42 ℃范围内,进一步探究的思路为在30~42 ℃之间设置一系列温度梯度,用同样的方式培养塔宾曲霉,并检测不同发酵温度下塔宾曲霉生成茶褐素的浓度,生成茶褐素浓度最高的温度即为生产茶褐素的最适温度。
21世纪教育网 www.21cnjy.com 精品试卷·第 2 页 （共 2 页）
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