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章末质量检测（一）　发酵工程
（时间：90分钟　满分：100分）
一、选择题（本题共20小题，每小题2分，共40分，在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的）
1.（2024·浙江台州高二期中）下列关于无菌操作的叙述，正确的是（　　）
A.煮沸消毒不能杀死微生物的细胞
B.应尽量选择脱脂棉塞住试管口，否则容易造成吸水污染
C.配置培养基时应该先灭菌再调节pH
D.对于接种间应采用紫外线或药物熏蒸的方法进行杀菌或消毒
2.（2024·浙江高二期中）进行土壤中尿素分解菌的选择培养时，利用的培养基组分及含量如表所示。下列分析错误的是（　　）
组分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂糖 H2O
含量 1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g 定容至1 000 mL
A.KH2PO4和Na2HPO4既可为菌体提供无机盐，又可调节培养基的pH
B.尿素既可为尿素分解菌提供氮源，又可对培养基中的微生物起选择作用
C.琼脂糖一般不可以为尿素分解菌提供碳源，只起到凝固剂的作用
D.蒸馏水既可用于定容，又可用于稀释培养液
3.（2024·浙江绍兴高二期末）下列关于培养基种类、配制、灭菌等叙述，正确的是（　　）
A.尿素固体培养基从功能上看属于选择和鉴别培养基
B.在固体培养基中加入无菌水稀释，可直接用于细菌的扩大培养
C.纯化微生物、植物组织培养和动物细胞培养时所用的都是固体培养基
D.用高压蒸汽灭菌法对培养基灭菌时，初期需排气1～2次，否则温度达到压力达不到
4.（2024·金华高二检测）下列有关微生物筛选的叙述，不正确的是（　　）
A.用全营养LB培养基筛选大肠杆菌
B.用高NaCl的培养基筛选抗盐突变菌株
C.用含酚红的尿素培养基筛选鉴别出分解尿素的菌株
D.利用高温条件筛选耐高温的细菌
5.（2024·金华高二质检）如图为实验室培养微生物的有关操作，下列相关叙述错误的是（　　）
A.步骤①中，需将接种工具灼烧至变红，以杀灭杂菌
B.步骤②中，将接种工具冷却时不宜距酒精灯火焰太远
C.图中接种方法的目的是使菌种逐渐稀释，经培养后获得单个菌落
D.接种后应将培养皿倒置培养，培养后可以根据结果进行微生物计数
6.（2024·温州高二月考）下列关于“能分解尿素的微生物的分离与计数”实验的叙述，错误的是（　　）
A.从有哺乳动物排泄物的地方取土样，分离到目的微生物的概率高
B.配制LB固体培养基的目的是做对照
C.对尿素固体培养基灭菌的方法是G6玻璃砂漏斗过滤
D.在尿素固体培养基生长的微生物不一定都能分泌脲酶
7.DMF（一种含碳有机物）是一种优良的工业溶剂和有机合成材料，它广泛应用于制革、化工、医药、农药等各个生产行业。含DMF的废水毒性大，对环境造成严重的危害，某实验小组筛选分离得到能够高效降解DMF的菌株，用于DMF的降解，下列有关叙述错误的是（　　）
A.可从某化工厂排污口附近的污水中取样来筛选DMF降解菌
B.不能利用平板划线法对DMF降解菌进行计数
C.筛选DMF降解菌的过程中需要在培养基中添加葡萄糖
D.可根据平板上菌落的形状、大小、颜色等特征来区分微生物的类型
8.（2024·浙江金华高二期中）瘤胃中的微生物多为厌氧菌，某实验小组欲从牛的瘤胃中分离出能分解尿素的微生物，下图表示筛选流程，甲、乙、丙均为培养基。下列说法错误的是（　　）
A.培养基上加石蜡的目的是隔绝外界的氧气
B.只有乙培养基上能形成肉眼可见的菌落
C.甲和丙培养基可以增加目的菌株的浓度
D.乙培养基是以尿素为唯一碳源的鉴别培养基
9.如图是将酵母菌培养液稀释100倍后通过显微镜观察到的结果图像。下列相关叙述正确的是（　　）
A.制片时，先用吸管滴加样液再将盖玻片放在计数板上
B.利用血细胞计数板计数的方法属于显微镜计数法
C.需用吸水纸在盖玻片一侧吸引以加速酵母菌沉降到计数区底部
D.依据上图可估算出培养液中酵母菌密度约为6×107个·mL－1
10.嗜热菌又称高温细菌，是一类生活在高温环境中的微生物。研究者从温泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图1所示。将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，结果如图2所示。下列说法正确的是（　　）
A.甲、乙试管为液体培养基，液体培养基能分离获得嗜热菌单菌落
B.只有能产生淀粉酶的微生物才能在Ⅰ、Ⅱ号培养基上生长
C.丙试管中嗜热菌数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和室温条件
D.图2中周围不显蓝色的菌落含有所需的嗜热菌
11.（2024·台州高二期末）某同学用矿泉水瓶、葡萄、白砂糖、酵母菌酿制葡萄酒，将葡萄洗净后添加白砂糖、酵母菌，装瓶密封后置于窗台处，5天后检测发酵效果。下列相关叙述正确的是（　　）
A.葡萄中的糖类和白砂糖可直接作为酵母菌细胞呼吸的底物
B.矿泉水瓶可能膨胀，光照条件会影响发酵液气泡的产生速率
C.取发酵液加入溴麝香草酚蓝溶液，反应后溶液变为灰绿色
D.发酵期间，酒精、CO2和水都在酵母菌的细胞溶胶中产生
12.（2024·浙江绍兴统考）关于果酒、果醋和泡菜等传统发酵食品的制作，下列叙述正确的是（　　）
A.果酒制作过程中，随着发酵的进行发酵液中糖含量增加
B.果醋制作过程中，用酸性重铬酸钾测定醋酸含量变化，溶液灰绿色逐日加深
C.泡菜制作时，盐水要没过全部菜料2/3体积
D.果酒、果醋和泡菜发酵后形成的溶液都呈酸性
13.（2024·浙江校联考期中）泡菜是我国的传统美食，早在《诗经》中就有“中田有庐，疆场有瓜，是剥是菹，献之皇祖”的诗句，其中“庐”和“瓜”是蔬菜，“剥”和“菹”是腌制加工的意思。关于泡菜，下列叙述错误的是（　　）
A.发酵后期，乳酸产生过多，会使乳酸菌受到抑制
B.用热水短时间处理“庐”“瓜”，可使泡菜口感更脆
C.若从泡菜汁中筛选耐盐乳酸菌，培养基pH需偏碱性
D.泡菜坛边水槽中应随时加满水，以防止外界空气进入
14.关于黄酒的酿造过程，下列叙述错误的是（　　）
A.酒精发酵时，酵母菌生命活动所需的能量主要来自丙酮酸氧化时所释放的化学能
B.开放环境有利于酵母菌快速繁殖的原因是需氧呼吸能量利用效率高
C.主发酵阶段开耙降低温度可以防止温度过高影响发酵
D.通过煎酒杀死微生物并破坏残存酶的活力可提高黄酒的稳定性
15.（2024·浙江台州高二期末）某同学利用新鲜青菜头进行榨菜制作，取新鲜青菜头洗净、晾干后浸泡在5％的盐水中，然后进行混合接种、单接种和不接种，在室温（25 ℃）发酵，结果如下表。
组别 主要风味特点 发酵成熟时间（d）
自然发酵 有明显发酵香味，较脆 25
明串珠菌 香味较淡，脆度一般 22
乳杆菌 香味明显，偏酸，较脆 20
混菌发酵 发酵香味浓郁，脆嫩 20
注：混菌发酵表示明串珠菌和乳杆菌配比为1∶1。
据上述实验结果分析错误的是（　　）
A.5％的盐水既能调味又能抑制杂菌生长
B.混菌发酵中菌种比例1∶1为最优配比
C.单菌种发酵风味不及混合菌种发酵
D.混合接种比不接种发酵效果更好
16.发酵工程在食品工业、医药工业和农牧业等许多领域得到了广泛的应用，在发酵过程中，发酵条件的控制至关重要。下列关于发酵条件的控制的叙述，不正确的是（　　）
A.环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成，因此发酵过程要严格控制发酵条件
B.发酵过程中微生物代谢产热和机械搅拌产热，会使发酵罐温度升高，因此要及时调节发酵罐温度
C.培养基中营养物质的利用和代谢物的积累，可能会导致发酵液pH发生改变，如工业酿酒会导致pH上升
D.现代工业发酵对发酵条件的监测和控制是通过计算机系统实现的，可以使发酵过程处于最佳状态
17.下列对发酵产品的分离、提纯和加工的说法，错误的是（　　）
A.为了获得大量酵母菌，可采用离心等方法
B.酿制白酒时，常用蒸馏的方法提取发酵产品
C.吸附发酵需要用到吸附剂
D.发酵过程中的环境条件只影响微生物的生长繁殖，不影响微生物代谢产物的形成
　　（2023·浙江嘉兴高二联考期中）阅读下列材料，完成18～19小题。
　　某学者利用“影印培养法”研究大肠杆菌抗链霉素性状产生的原因，先将原始菌种涂布在1号培养基上，培养出菌落后，将灭菌绒布在1号上印模，绒布沾上菌落并进行转印，使绒布上的菌落按照原位接种到2号和3号培养基上。待3号上长出菌落后，在2号上找到对应的菌落，然后接种到不含链霉素的4号培养液中，培养后再涂布到5号培养基上，并重复以上步骤。实验过程如图所示。
18.下列关于实验操作的叙述正确的是（　　）
A.本实验的培养基采用MS培养基
B.3号培养基上不可能生长出酵母菌的菌落
C.要检测培养基是否灭菌彻底，可设置一块不接种菌液的平板在相同条件下培养作为对照
D.涂布操作前接种环要进行灼烧灭菌
19.下列相关叙述错误的（　　）
A.大肠杆菌抗链霉素的性状是由基因突变引起的
B.7中观察到的菌落数一定等于初始时接种到该培养基上的菌体数
C.4号与8号培养液中，抗链霉素菌株的比例逐渐增大
D.在一定时间内4号培养液中大肠杆菌的数量逐渐增多
20.有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。下列说法正确的是（　　）
A.该实验所用的选择培养基可以用苯磺隆、蔗糖等作为碳源
B.本实验的目的是探究能降解苯磺隆的物质是否为该菌种所产生的蛋白质
C.在微生物的接种实验中，用95％的酒精对实验者的双手和超净工作台进行消毒
D.该实验中，采集的土壤样品经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液
二、非选择题（本题共5小题，共60分）
21.（12分）（2024·浙江嘉兴高二联考期中）泡菜口感爽脆，有独特的风味，是广受喜爱的开胃食品。请回答下列与泡菜制作有关的问题：
（1）新鲜的蔬菜洗净，切块。将泡菜坛洗净，用开水清洗内壁，将蔬菜、调料、白酒等放入坛内，其中白酒有　　　　　的作用。若蔬菜用热水短时处理，再放入坛中，会使泡菜发酵时间缩短，其原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。对于新配制的泡菜原料，加入一些陈泡菜汁，也可以缩短腌制时间，这是因为　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　。
（2）泡菜发酵初期，由于泡菜罐加盖并用水封住坛口，会使　　　　菌被逐渐抑制。发酵中期，乳酸菌大量繁殖，会使　　　　 　菌受到抑制。发酵后期，乳酸产生过多，会使乳酸菌受到抑制。此时，发酵工程上通常可利用　　　　（填“真空”“吸附”或“萃取”）发酵方法将乳酸及时脱离发酵液，起到及时调节发酵液pH的作用。
（3）从泡菜汁中可分离制作酸奶的乳酸菌，在某种含牛乳的专用的培养基中进行初步筛选。该培养基必须含有　　　　，以便于观察是否产酸。
①龙胆紫　②酸碱指示剂　③双缩脲试剂
（4）自然界中醋酸菌常与乳酸菌共同生长，若要筛选出醋酸菌，则其专用的培养基中应添加　　　　　　　　。
22.（12分）（2024·浙江台州检测）随着社会的发展，石油产品的使用越来越多，石油烃污染也越来越严重。为了筛选出分解石油烃能力更强的微生物，人们不断地进行研究。请回答与此筛选过程有关的问题：
（1）一般来说，微生物生长过程中需要的营养物质包括　　　　　　源、　　　　　　源、水、无机盐等。
（2）分解石油烃的微生物一般要从土壤中分离，获取土壤样品的取样地点最好选在　　　　　　　　 　。下图为获取土壤样品后的培养研究过程：
a.为了能有效地分离出分解石油烃的微生物，过程①～④所用培养基，其成分的特点是　　　　　　　　　，从而有利于　　　　　　　　　的生长，抑制其他微生物的生长。
b.过程④中的培养基从物理特征看属于　　 　培养基，这可以通过往培养基中加入一定量的　　　　　　来实现，对④常采用　　　　　　　　　法接种以用于活菌计数。该计数方法得到的值通常比实际的结果　　　 　（填“高”“低”或“一样”）。若研究人员用另一种接种方法在培养基表面划线4个区域，则需要蘸取菌液　　　　次，接种环共需要灼烧　　　　次。
c.若发现在⑤中无法区分菌落，可以将③中取出的菌液　　　　　　　　　　　　　　　　。
（3）在实验室应采用　　　　　　　　法对培养基进行灭菌，处理时间通常为高压灭菌锅　　　　　　　　　　　　　　　 　时开始计时15～20分钟。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在　　　 　条件下进行。
23.（12分）（2024·浙江杭州高二联考）我国餐厨垃圾占城市生活垃圾比重的37％～62％，餐厨垃圾具有高含水率（约68％～75％）、高有机物（10％～15％）、高盐分的“三高”特性，丢弃处理是一种资源的浪费，而且处理不当还会滋生病原菌，污染环境。研究人员采集废弃垃圾液通过生物工程技术分离出了能高效降解淀粉、蛋白质、脂肪等成分的菌种制成复合微生物菌剂，实现垃圾无害化处理和资源化的高效利用。回答下列问题：
（1）菌种的选育：按照下面的流程分别分离获得高效分解淀粉、蛋白质、脂肪的菌种；①采集废弃垃圾液作为分离样本，给我们提供的取样思路是　　　　　　　　　 　，土样采集后进行富集培养，目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
②完成梯度稀释后，菌种接种到平板上的过程需要使用的工具为　　　　　　　　　　　 　，与普通营养物质不同，餐厨垃圾多来自烹饪余留，因此在分离培养基中宜提高　　　 　含量配置成选择培养基，更能实现菌株的分离。
（2）餐厨垃圾处理的混菌发酵：用上述方法分别选育出高效分解淀粉、蛋白质和脂肪的菌种后，将三类菌按照一定的比例制成复合微生物菌剂，再将菌剂与经过预处理的厨余垃圾混合发酵。
①发酵过程中影响垃圾分解效率的因素除温度、pH、溶解氧等环境因素外，还有　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
②发酵过程不仅能将垃圾无害化，同时还能通过　　　 　　　　　　　技术从发酵液分离获得丰富的单细胞蛋白，实现垃圾的资源化。
③除去单细胞蛋白的废液中的油脂经脂肪酶作用可转化为生物柴油。为了从废油脂中筛选出高产脂肪酶菌株，需配制　　　　　　　　　　　　　　　　的选择培养基，然后在平板上接种废油脂稀释液，倒置在恒温培养箱中培养一段时间，在平板上挑选　　　 　　　　　　　　　的菌落即可。得到的菌种应减少其传代次数从而降低菌种的　　　　　　　。
24.（12分）（2024·金华高二检测）某生物兴趣小组进行土壤中尿素分解菌的分离和计数实验。请回答下列问题：
（1）实验原理：尿素是一种重要的农业氮肥，并不能直接被农作物吸收，需要转变成氨，才能被吸收，这个转变依赖于土壤中能产生　　　　的微生物的作用。
（2）实验步骤：
①配制培养基（成分：葡萄糖、NaCl、K2HPO4、尿素、Y、H2O、琼脂糖），并制作无菌平板。
②设置　　　　　组和若干实验组，进行相关操作。
③将各组平板置于恒温培养箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。
a.为了更好地鉴别出此类微生物，在培养基配方中加入了Y，Y是　　　　　　　。
b.为了对实验的结果进行进一步统计，需要用　　　　　　　　法进行接种。
c.恒温培养48小时后，在稀释倍数为105下，平板上的菌落数目在30～300之间，小组成员进行统计，应注意统计周围为　　　　　　（填颜色）的菌落进行计数。
（3）实验结果分析：
兴趣小组的同学在统计菌落数目时，除了上述统计的菌落外，还发现有些菌落周围的培养基没有变化，试分析这些菌落产生的可能原因：　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　（答出一点即可）。
25.（12分）（2024·浙江平湖市联考期中）黄曲霉毒素是黄曲霉和寄生曲霉等的代谢产物，具有极强的毒性和致癌性，在污染的粮油及其制品中含量较高。科研人员用黄曲霉毒素B1（AFB1）的结构类似物——香豆素（C9H6O2）筛选能高效降解AFB1的菌株，请回答下列问题：
（1）为了筛选出AFB1降解菌，常从霉烂的花生、玉米和棉花中采样，原因可能是霉烂的花生、玉米和棉花中含有　　　　　　　　　　　　　　　　　。香豆素不耐高温，一般采用　　　　灭菌方法，为了提高灭菌速度还可以进行　　　　　　操作。
（2）筛选AFB1降解菌时，培养基中唯一的碳源物质是　　　　　，在香豆素浓度较高的培养基上，利用稀释涂布平板法接种，所有培养基中菌落数极少的原因有可能是　　　　　　　　　　　　　　　。
（3）菌体对有机物的降解途径有胞外分泌物降解和菌体吸附降解两种。实验小组对降解菌的发酵液进行离心，发现上清液中AFB1的残留率明显低于菌悬液中AFB1的残留率。
①分析以上信息可知，菌体降解AFB1的途径主要是　　　　　　　　。
②经检测发现上清液中存在多种蛋白质，请设计实验验证蛋白质K是降解AFB1的有效成分，要求简要写出实验思路和预期结果。（实验材料：若干试管、培养过降解菌的上清液、蛋白质K水解酶、含AFB1的液体培养基）
实验思路：取若干试管均分为甲、乙两组，在各试管中分别加入等量的培养过降解菌的上清液，然后在甲组各试管中加入　　　　　　　　　　　　　　　　　　　，乙组不作处理，一段时间后将甲、乙两组试管中的培养液分别加入到含　　　　　　　　　的液体培养基中，在适宜条件下反应一段时间，检测培养基中AFB1是否被降解。
预期结果：　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
章末质量检测（一）　发酵工程
1.D　煮沸消毒法100 ℃煮沸5～6分钟只能杀死部分生活状态的微生物细胞，不能杀死芽孢、孢子，A错误；由于脱脂棉吸水后容易引起污染，所以制作棉塞应该使用普通棉花，而不能使用医用的脱脂棉，B错误；为避免杂菌污染，应先调节pH再灭菌，C错误；紫外线能破坏DNA结构，对于接种间应采用紫外线或药物熏蒸的方法进行杀菌或消毒，以营造无菌环境，D正确。
2.D　KH2PO4和Na2HPO4这两种无机盐既可以为细菌生长提供无机营养，又可作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH相对稳定，A正确；培养基中除了尿素无其他含氮物质，只有尿素分解菌通过分解尿素进行生长繁殖，故尿素既能为尿素分解菌提供氮源，又可对培养基中的微生物起选择作用，B正确；琼脂糖不能被微生物利用，只能充当凝固剂，C正确；蒸馏水起定容作用，蒸馏水不能对培养液进行稀释，稀释所用的溶剂应为无菌水，D错误。
3.A　分离能分解尿素的细菌的培养基，加入了琼脂，属于固体培养基，该培养基加入以尿素并以此为唯一氮源，这种培养基在功能上属于选择培养基，该培养基中加入酚红指示剂，可以构成鉴别培养基，A正确；扩大培养应该用液体培养基，固体培养基中加入了琼脂，即便加入无菌水稀释，仍然是固体培养基，B错误；动物细胞培养所用的是液体培养基，纯化微生物、植物组织培养所用的是固体培养基，C错误；用高压蒸汽灭菌法对培养基灭菌时，初期需排气1～2次，排出灭菌锅内的冷空气，否则压力达到，温度达不到，D错误。
4.A　大多数微生物在全营养的LB培养基上都可以生长，所以不能用全营养LB培养基筛选大肠杆菌，A错误；可以在高NaCl的培养基中生活的微生物能抗盐，因此可实现筛选抗盐突变菌株的目的，B正确；分解尿素的菌株可将培养基中的尿素分解为氨，使培养基的pH升高，使酚红变红，C正确。
5.D　图中所示的接种方法是平板划线法，目的是使接种的菌种逐渐稀释，经培养后获得由单个细胞繁殖而来的菌落，C正确；图示的平板划线法不能用于微生物的计数，D错误。
6.C　在该实验中，配制好的尿素固体培养基加上封口膜后用高压蒸汽灭菌法灭菌，冷却后再在超净工作台内加入用G6玻璃砂漏斗过滤的尿素溶液，C错误。
7.C　筛选DMF降解菌应该到富含DMF的制革、化工、医药、农药等各个生产厂家的排污口附近取样，A正确；稀释涂布平板法可用于微生物计数，而平板划线法不能用于计数，B正确；筛选DMF降解菌时要以DMF为唯一碳源，故不应在培养基中添加葡萄糖，C错误；不同菌体形成的菌落特征不同，因此可根据菌落的形状、大小、颜色等特征初步判断微生物类型，D正确。
8.D　分析题意可知，本实验目的是从牛的瘤胃中分离出能分解尿素的微生物，瘤胃中的微生物多为厌氧菌，故培养基上加石蜡的目的是隔绝外界氧气，营造无氧条件，A正确；乙培养基是固体培养基，而甲和丙是液体培养基，只有乙培养基上能形成肉眼可见的菌落，B正确；甲和丙培养基是扩大培养，可以增加目的菌株的浓度，C正确；乙培养基是以尿素为唯一碳源的选择培养基，在该培养基上只有能分解尿素的微生物能够生存，D错误。
9.B　制片时，应先将专用的盖玻片盖在计数板上，再用吸管滴加样液，A错误；显微镜计数法是测定细菌数量的常用方法，利用血细胞计数板计数的方法属于显微镜计数法，B正确；将盖玻片放在计数板上，用滴管在盖玻片边缘滴加菌液后，让菌液自行渗入，多余的菌液再用滤纸吸去，C错误；此血细胞计数板的计数区是25×16型，即大方格内分为25中方格，每一中方格又分为16小格，计数区的规格为1 mm×1 mm×0.1 mm，图中每个中方格的平均酵母菌数为24，酵母菌培养液稀释100倍，则1 mL培养液中酵母菌数约为24×25×100÷0.1×1 000＝6×108（个），D错误。
10.D　甲、乙试管为液体培养基，液体培养基不能分离出单菌落，A错误；结合题干可知，只有能产生高温淀粉酶的微生物才能在Ⅰ、Ⅱ号培养基上生长，B错误；结合题干可知，丙中噬热菌数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和高温条件，C错误；图2中周围不显蓝色的菌落，说明其产生的淀粉酶可以在高温下分解淀粉，所以周围不显蓝色的菌落含有所需的嗜热菌，D正确。
11.B　酵母菌细胞呼吸的直接底物是葡萄糖，白砂糖的成分为蔗糖，A错误；发酵期间会产生大量CO2，可能使矿泉水瓶膨胀，窗台的光照条件会导致发酵瓶内温度变化，影响发酵液气泡的产生速率，B正确；发酵液中的酒精与酸性重铬酸钾溶液反应呈灰绿色，C错误；发酵期间，酒精在酵母菌的细胞溶胶中产生；CO2一部分由初期酵母菌需氧呼吸产生，场所在线粒体基质，一部分由厌氧呼吸产生，场所在细胞溶胶；水由需氧呼吸产生或其他代谢反应产生，需氧呼吸产生水的场所在线粒体内膜，D错误。
12.D　果酒制作时，利用的是酵母菌，酵母菌是异养微生物，发酵过程中需要消耗糖，将糖分解为二氧化碳和水，故随着发酵的进行发酵液中糖含量减少，A错误；酸性重铬酸钾可用于检测酒精，果醋发酵时，由于乙醇（酒精）逐渐转变为乙酸，因此溶液灰绿色逐渐变浅，B错误；腌制泡菜时泡菜坛要装至八成满，盐水没过全部菜料，盖上坛盖再用水密封泡菜坛，可利用水隔绝空气，从而创造无氧条件，C错误；果酒制作过程中会产生二氧化碳，导致溶液呈酸性，果醋制作过程中产生的醋酸和泡菜制作过程中产生的乳酸都会使溶液呈酸性，D正确。
13.C　发酵后期，乳酸产生过多，pH降低，会使乳酸菌的繁殖受到抑制，A正确；用热水短时间处理“庐”“瓜”，高温可破坏微生物产生的果胶酶，保证植物细胞壁的结构，可使泡菜口感更脆，B正确；乳酸菌需要在pH偏酸的条件下培养，培养基不宜偏碱性，C错误；乳酸菌为厌氧菌，泡菜坛边水槽中应随时加满水，以防止外界空气进入，保证无氧环境，D正确。
14.A　酒精发酵时，酵母菌进行厌氧呼吸，厌氧呼吸第一阶段产生ATP，酵母菌生命活动所需的能量来源于厌氧呼吸第一阶段产生的ATP，A错误；开放环境下，氧气充足，酵母菌进行需氧呼吸并大量繁殖，B正确；发酵过程酵母菌进行呼吸作用释放热能，发酵温度上升，开耙有利于热量散失，降低发酵温度，防止温度过高影响酵母菌活性而影响发酵进程，C正确；煎酒是利用高温杀死发酵液中的微生物，同时高温使酶失活，提高黄酒的稳定性，D正确。
15.B　5％的盐水不仅起到调味的作用，而且还能抑制杂菌生长，A正确；结合表格可知，混菌发酵中菌种比例1∶1制作榨菜效果较好，但没有其他比例的混菌发酵作对比，因而不能说该比例的混菌发酵效果最好，B错误；根据表格信息可知，单菌种发酵风味不及混合菌种发酵，C正确；混合接种发酵表现为发酵香味浓郁，脆嫩，较不接种发酵效果更好，D正确。
16.C　酿酒过程中不仅会产生酒精，还会产生大量的二氧化碳，发酵液的pH会下降，C错误。
17.D　生物代谢产物是经化学反应生成的，生物体内的化学反应几乎都需要酶的催化，与温度、pH、氧气等环境条件都有关系，D错误。
18.C　MS培养基是一种植物生长培养基，用于实验室培养植物细胞培养物，故本实验的培养基并不是MS培养基，A错误；某些酵母菌发生突变，具有抗链霉素性状，因此3号培养基上可能生长出酵母菌的菌落，B错误；若要检测培养基是否灭菌彻底，最有效的方法是将未接种的培养基作为对照组放在相同条件下培养，若出现菌落，则说明培养基没有灭菌彻底，C正确；进行稀释涂布操作时，将需要用到的涂布器进行灼烧灭菌，D错误。
19.B　大肠杆菌是原核生物，其可遗传变异只有基因突变，故大肠杆菌抗链霉素的性状是由基因突变引起的，A正确；当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故7中观察到的菌落数可能少于初始时接种到该培养基上的菌体数，B错误；3号与2号、7号与6号培养基中的菌落数的比例，是抗性菌落占全部菌落的比例，观察实验结果可知，4号与8号培养液中，抗链霉素菌株的比例在逐渐增大，C正确；在接种大肠杆菌后，因4号培养液中的营养充足、条件适宜，故在一定时间内大肠杆菌的数量会随着自身的分裂增殖而逐渐增多，D正确。
20.B　选择培养基只允许特定种类的微生物生长，同时要抑制或阻止其他种类的微生物生长，因而必须以苯磺隆为唯一碳源，只让目的菌生存繁殖，A错误；图乙上清液中加入的蛋白酶溶液是用于水解上清液中的某蛋白质的，由此可判定实验目的是探究目的菌是否通过分泌某种蛋白质来降解苯磺隆，B正确；在微生物接种时，需用50％的酒精对实验者的双手和超净工作台进行消毒，C错误；在分离土壤中目的菌的实验中，采集的土样经高温灭菌后，土样中的微生物被杀死，再制取土壤稀释液接种并培养，不会得到菌落，D错误。
21.（1）杀菌、调味　细胞（膜）破裂，营养物质外流，使乳酸菌快速地获得营养物质　陈泡菜汁中有较多的乳酸菌　（2）好氧　不耐酸　吸附　（3）②　（4）乙醇
解析：（1）在制作泡菜时，白酒具有杀菌、调味的作用。若蔬菜用热水短时处理，再将白菜放入坛中，这时细胞膜破裂，营养物质外流，使乳酸菌快速地获得营养物质，会使泡菜发酵时间缩短。陈泡菜汁中有较多的乳酸菌，新配制的泡菜原料，加入一些陈泡菜汁，也可以缩短腌制时间。（2）泡菜的制作离不开乳酸菌，在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。在发酵初期水密封后，泡菜罐内缺乏氧气，好氧菌被逐渐抑制；发酵中期乳酸菌产生乳酸，不耐酸细菌被抑制。发酵过程中，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件，发酵工程上通常可利用吸附发酵的方法将乳酸及时脱离发酵液，起到及时调节发酵液pH的作用。（3）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸，乳酸为酸性，在某种含牛乳的专用的培养基中进行初步筛选，该培养基必须含有②酸碱指示剂，以便于观察是否产酸。（4）当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。自然界中醋酸菌常与乳酸菌共同生长，若要筛选出醋酸菌，则其专用的培养基中应添加乙醇，醋酸菌可以利用乙醇，但乳酸菌不能利用乙醇，以此达到分离的目的。
22.（1）碳　氮　（2）石油污染明显处　a.只含石油烃一种碳源
目的菌（或分解石油烃的微生物）　b.固体　琼脂　稀释涂布平板　低　一　五　c.进行梯度稀释　（3）高压蒸汽灭菌（或湿热灭菌）　压力为1 kg/cm2、温度为121 ℃　无菌
解析：（1）各种培养基一般含有水、碳源、氮源和无机盐等，有些培养基还需要满足微生物生长时对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。（2）结合题干“为了筛选出分解石油烃能力更强的微生物”，意味着获取土壤样品的取样地点最好选在石油污染明显处。a.为了能有效地分离出分解石油烃的微生物，过程①～④所用培养基为选择培养基，能够让分解石油烃的微生物生存，故其成分的特点是只含石油烃一种碳源，从而有利于目的菌（或分解石油烃的微生物）的生长，抑制其他微生物的生长；b.过程④中的培养基可以使得菌落在其上生长，故从物理特征看属于固体培养基，这可以通过往培养基中加入一定量的琼脂来实现；若要对培养的活菌进行计数，则需要对④常采用稀释涂布平板的方法接种以用于活菌计数；但是该方法得到的值通常比实际的结果低，因为显微镜计数法通常将死菌、活菌一起计数，而且利用稀释涂布平板的方法接种得到的菌落，有时候两个菌落连在一起，导致计数时也算为一个菌落；若研究人员用另一种接种方法在培养基表面划线4个区域，则需要蘸取菌液一次，后续通过
划线将其分离培养，接种环共需要灼烧五次（每次划线前需要灼烧一次，划线结束后需要灼烧一次，避免污染）；c.若发现在⑤中无法区分菌落，说明菌落还是太密集，稀释度不够，可以将③中取出的菌液重新进行梯度稀释。（3）对于配制好的培养基，在实验室应采用高压蒸汽灭菌（或湿热灭菌）法对其进行较为彻底的灭菌，处理时间通常为高压灭菌锅压力为1 kg/cm2、温度为121 ℃时开始计时15～20分钟。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。
23.（1）从菌种生存环境中取样　对目标菌种扩增，提高其所占比例，有利于分离获得菌种　移液器和玻璃刮刀　氯化钠（高盐）　（2）①菌种类型、菌种的配比、菌液浓度、垃圾种类、垃圾浓度等　②沉淀、过滤、离心　③以脂肪为唯一碳源　透明圈直径与菌落直径比值较大　自发突变概率
解析：（1）微生物需要特定的条件才能生长繁殖，获取我们所需要的菌种，需要从菌种生存环境中取样获取；取样的土壤中含有的目标菌种一般较少，需要对目标菌种扩增，提高其所占比例，有利于分离获得菌种，即是富集培养的过程。将稀释后的菌种接种到平板上，需要使用移液器和玻璃刮刀，这样接种的量是固定的，培养出的菌落可以是纯培养的结果，便于计数。餐厨垃圾具有高含水率（约68％～75％）、高有机物（10％～15％）、高盐分的“三高”特性，能分解餐厨垃圾的微生物具有耐盐的特点，故在分离培养基中宜提高氯化钠的浓度，配置成选择培养基，更能实现菌株的分离。（2）垃圾分解效率与微生物的数量和生活状态密切相关，除温度、pH、溶解氧等环境因素外，还有菌种类型、菌种的配比、菌液浓度、垃圾种类、垃圾浓度等会影响分解效率。单细胞蛋白即是菌体本身，可通过沉淀、过滤、离心技术从发酵液分离，从而实现垃圾的资源化。为了从废油脂中筛选出高产脂肪酶菌株，需要配置选择培养基，即以脂肪为唯一碳源的选择培养基，然后在平板上接种废油脂稀释液，倒置在恒温培养箱中培养一段时间，若菌落周围透明圈直径与菌落直径比值较大，说明该菌种具有较强分解油脂的能力，可挑选菌落进行保存或再培养。微生物传代培养的次数多可能会发生基因突变，为了降低菌种的自发突变概率，应减少其传代次数。
24.（1）脲酶　（2）②空白对照　a.酚红指示剂　b.稀释涂布平板　c.红色　（3）存在固氮微生物，它们能利用空气中的氮气作为氮源，而不利用培养基中的尿素，不能将尿素分解成氨（不与指示剂作用）
解析：（1）尿素分解菌能产生脲酶将尿素分解成氨，因此由尿素转变成氨的过程依赖于土壤中能产生脲酶的微生物的作用。（2）②为检验培养基是否受到杂菌污染，需要设置空白对照组。③a.细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，因此可以通过检查培养基的pH变化来鉴别尿素分解菌的存在，在培养基配方中加入的Y可以是酚红指示剂。c.当尿素分解菌产生的脲酶将尿素分解为氨后，使pH升高，酚红指示剂会变红，因此应注意统计周围为红色的菌落进行计数。（3）有些菌落周围的培养基没有变化，说明这些细菌不能产生脲酶进而利用尿素作为氮源，而氮源为微生物生长所必需的，因此推测可能存在固氮微生物，它们能利用空气中的氮气作为氮源。
25.（1）较多的高效降解AFB1的菌株　过滤　抽滤　（2）香豆素　高浓度香豆素使细胞失水死亡　（3）①胞外分泌物降解　②适量且等量的蛋白质K水解酶　AFB1　甲组液体培养基中的AFB1未被降解，乙组液体培养基中的AFB1被降解
解析：（2）香豆素（C9H6O2）含有碳元素，为了筛选AFB1降解菌，培养基中唯一的碳源物质是香豆素，在香豆素浓度较高的培养基上，高浓度香豆素使细胞失水死亡，使培养基中菌落数较少。（3）①根据题意可知，上清液主要含有胞外分泌物，沉淀物中含有降解菌，由于上清液中AFB1的残留率明显小于菌悬液的，因此降解菌对AFB1降解的主要途径是胞外分泌物降解。②为了验证上清液中的蛋白质K是降解AFB1的有效成分，可以用蛋白质K水解酶处理上清液以去除蛋白质K，若上清液不再具有降解作用，则可以说明蛋白质K是降解AFB1的有效成分。实验思路：取两试管编号甲、乙分别加入等量的培养过降解菌的上清液，甲组加入适量的蛋白质K水解酶，乙组不作处理，一段时间后将甲、乙组培养液分别加入含AFB1的培养基。预期结果：甲组液体培养基中的AFB1未被降解，乙组液体培养基中的AFB1被降解，同时甲组AFB1的降解率小于乙组的。
7 / 8(共75张PPT)
章末质量检测（一）发酵工程
（时间：90分钟　满分：100分）
一、选择题（本题共20小题，每小题2分，共40分，在每小题给出的
四个选项中，只有一项是符合题目要求的）
1. （2024·浙江台州高二期中）下列关于无菌操作的叙述，正确的是
（　　）
A. 煮沸消毒不能杀死微生物的细胞
B. 应尽量选择脱脂棉塞住试管口，否则容易造成吸水污染
C. 配置培养基时应该先灭菌再调节pH
D. 对于接种间应采用紫外线或药物熏蒸的方法进行杀菌或消毒
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解析：　煮沸消毒法100 ℃煮沸5～6分钟只能杀死部分生活状态
的微生物细胞，不能杀死芽孢、孢子，A错误；由于脱脂棉吸水后
容易引起污染，所以制作棉塞应该使用普通棉花，而不能使用医用
的脱脂棉，B错误；为避免杂菌污染，应先调节pH再灭菌，C错
误；紫外线能破坏DNA结构，对于接种间应采用紫外线或药物熏
蒸的方法进行杀菌或消毒，以营造无菌环境，D正确。
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2. （2024·浙江高二期中）进行土壤中尿素分解菌的选择培养时，利
用的培养基组分及含量如表所示。下列分析错误的是（　　）
组分 KH2PO
4 Na2HP
O4 MgSO4
·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂
糖 H2O
含量 1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15.0
g 定容至1
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A. KH2PO4和Na2HPO4既可为菌体提供无机盐，又可调节培养基的pH
B. 尿素既可为尿素分解菌提供氮源，又可对培养基中的微生物起选
择作用
C. 琼脂糖一般不可以为尿素分解菌提供碳源，只起到凝固剂的作用
D. 蒸馏水既可用于定容，又可用于稀释培养液
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解析：　KH2PO4和Na2HPO4这两种无机盐既可以为细菌生长提供
无机营养，又可作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH相对稳定，A正
确；培养基中除了尿素无其他含氮物质，只有尿素分解菌通过分解
尿素进行生长繁殖，故尿素既能为尿素分解菌提供氮源，又可对培
养基中的微生物起选择作用，B正确；琼脂糖不能被微生物利用，
只能充当凝固剂，C正确；蒸馏水起定容作用，蒸馏水不能对培养
液进行稀释，稀释所用的溶剂应为无菌水，D错误。
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3. （2024·浙江绍兴高二期末）下列关于培养基种类、配制、灭菌等
叙述，正确的是（　　）
A. 尿素固体培养基从功能上看属于选择和鉴别培养基
B. 在固体培养基中加入无菌水稀释，可直接用于细菌的扩大培养
C. 纯化微生物、植物组织培养和动物细胞培养时所用的都是固体培
养基
D. 用高压蒸汽灭菌法对培养基灭菌时，初期需排气1～2次，否则温
度达到压力达不到
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解析：　分离能分解尿素的细菌的培养基，加入了琼脂，属于固
体培养基，该培养基加入以尿素并以此为唯一氮源，这种培养基在
功能上属于选择培养基，该培养基中加入酚红指示剂，可以构成鉴
别培养基，A正确；扩大培养应该用液体培养基，固体培养基中加
入了琼脂，即便加入无菌水稀释，仍然是固体培养基，B错误；动
物细胞培养所用的是液体培养基，纯化微生物、植物组织培养所用
的是固体培养基，C错误；用高压蒸汽灭菌法对培养基灭菌时，初
期需排气1～2次，排出灭菌锅内的冷空气，否则压力达到，温度达
不到，D错误。
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4. （2024·金华高二检测）下列有关微生物筛选的叙述，不正确的是
（　　）
A. 用全营养LB培养基筛选大肠杆菌
B. 用高NaCl的培养基筛选抗盐突变菌株
C. 用含酚红的尿素培养基筛选鉴别出分解尿素的菌株
D. 利用高温条件筛选耐高温的细菌
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解析：　大多数微生物在全营养的LB培养基上都可以生长，所以
不能用全营养LB培养基筛选大肠杆菌，A错误；可以在高NaCl的
培养基中生活的微生物能抗盐，因此可实现筛选抗盐突变菌株的目
的，B正确；分解尿素的菌株可将培养基中的尿素分解为氨，使培
养基的pH升高，使酚红变红，C正确。
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5. （2024·金华高二质检）如图为实验室培养微生物的有关操作，下列相关叙述错误的是（　　）
A. 步骤①中，需将接种工具灼烧至变红，以杀灭杂菌
B. 步骤②中，将接种工具冷却时不宜距酒精灯火焰太远
C. 图中接种方法的目的是使菌种逐渐稀释，经培养后获得单个菌落
D. 接种后应将培养皿倒置培养，培养后可以根据结果进行微生物 计数
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解析：　图中所示的接种方法是平板划线法，目的是使接种的菌
种逐渐稀释，经培养后获得由单个细胞繁殖而来的菌落，C正确；
图示的平板划线法不能用于微生物的计数，D错误。
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6. （2024·温州高二月考）下列关于“能分解尿素的微生物的分离与
计数”实验的叙述，错误的是（　　）
A. 从有哺乳动物排泄物的地方取土样，分离到目的微生物的概率高
B. 配制LB固体培养基的目的是做对照
C. 对尿素固体培养基灭菌的方法是G6玻璃砂漏斗过滤
D. 在尿素固体培养基生长的微生物不一定都能分泌脲酶
解析：　在该实验中，配制好的尿素固体培养基加上封口膜后用
高压蒸汽灭菌法灭菌，冷却后再在超净工作台内加入用G6玻璃砂
漏斗过滤的尿素溶液，C错误。
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7. DMF（一种含碳有机物）是一种优良的工业溶剂和有机合成材料，它广泛应用于制革、化工、医药、农药等各个生产行业。含DMF的废水毒性大，对环境造成严重的危害，某实验小组筛选分离得到能够高效降解DMF的菌株，用于DMF的降解，下列有关叙述错误的是（　　）
A. 可从某化工厂排污口附近的污水中取样来筛选DMF降解菌
B. 不能利用平板划线法对DMF降解菌进行计数
C. 筛选DMF降解菌的过程中需要在培养基中添加葡萄糖
D. 可根据平板上菌落的形状、大小、颜色等特征来区分微生物的类型
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解析：　筛选DMF降解菌应该到富含DMF的制革、化工、医药、
农药等各个生产厂家的排污口附近取样，A正确；稀释涂布平板法
可用于微生物计数，而平板划线法不能用于计数，B正确；筛选
DMF降解菌时要以DMF为唯一碳源，故不应在培养基中添加葡萄
糖，C错误；不同菌体形成的菌落特征不同，因此可根据菌落的形
状、大小、颜色等特征初步判断微生物类型，D正确。
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8. （2024·浙江金华高二期中）瘤胃中的微生物多为厌氧菌，某实验
小组欲从牛的瘤胃中分离出能分解尿素的微生物，下图表示筛选流
程，甲、乙、丙均为培养基。下列说法错误的是（　　）
A. 培养基上加石蜡的目的是隔绝外界的氧气
B. 只有乙培养基上能形成肉眼可见的菌落
C. 甲和丙培养基可以增加目的菌株的浓度
D. 乙培养基是以尿素为唯一碳源的鉴别培养基
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解析：　分析题意可知，本实验目的是从牛的瘤胃中分离出能分
解尿素的微生物，瘤胃中的微生物多为厌氧菌，故培养基上加石蜡
的目的是隔绝外界氧气，营造无氧条件，A正确；乙培养基是固体
培养基，而甲和丙是液体培养基，只有乙培养基上能形成肉眼可见
的菌落，B正确；甲和丙培养基是扩大培养，可以增加目的菌株的
浓度，C正确；乙培养基是以尿素为唯一碳源的选择培养基，在该
培养基上只有能分解尿素的微生物能够生存，D错误。
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A. 制片时，先用吸管滴加样液再将盖玻片放在计数板上
B. 利用血细胞计数板计数的方法属于显微镜计数法
C. 需用吸水纸在盖玻片一侧吸引以加速酵母菌沉降到计数区底部
D. 依据上图可估算出培养液中酵母菌密度约为6×107个·mL－1
9 .如图是将酵母菌培养液稀释100倍后通过显微镜观察到的结果图
像。下列相关叙述正确的是（　　）
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解析：　制片时，应先将专用的盖玻片盖在计数板上，再用吸管
滴加样液，A错误；显微镜计数法是测定细菌数量的常用方法，利
用血细胞计数板计数的方法属于显微镜计数法，B正确；将盖玻片
放在计数板上，用滴管在盖玻片边缘滴加菌液后，让菌液自行渗
入，多余的菌液再用滤纸吸去，C错误；此血细胞计数板的计数区
是25×16型，即大方格内分为25中方格，每一中方格又分为16小
格，计数区的规格为1 mm×1 mm×0.1 mm，图中每个中方格的平
均酵母菌数为24，酵母菌培养液稀释100倍，则1 mL培养液中酵母
菌数约为24×25×100÷0.1×1 000＝6×108（个），D错误。
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10. 嗜热菌又称高温细菌，是一类生活在高温环境中的微生物。研究
者从温泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图1
所示。将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固
体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，结果如图2
所示。下列说法正确的是（　　）
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A. 甲、乙试管为液体培养基，液体培养基能分离获得嗜热菌单菌落
B. 只有能产生淀粉酶的微生物才能在Ⅰ、Ⅱ号培养基上生长
C. 丙试管中嗜热菌数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和
室温条件
D. 图2中周围不显蓝色的菌落含有所需的嗜热菌
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解析：　甲、乙试管为液体培养基，液体培养基不能分离出单
菌落，A错误；结合题干可知，只有能产生高温淀粉酶的微生物
才能在Ⅰ、Ⅱ号培养基上生长，B错误；结合题干可知，丙中噬热
菌数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和高温条件，C
错误；图2中周围不显蓝色的菌落，说明其产生的淀粉酶可以在高
温下分解淀粉，所以周围不显蓝色的菌落含有所需的嗜热菌，D
正确。
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11. （2024·台州高二期末）某同学用矿泉水瓶、葡萄、白砂糖、酵母
菌酿制葡萄酒，将葡萄洗净后添加白砂糖、酵母菌，装瓶密封后
置于窗台处，5天后检测发酵效果。下列相关叙述正确的是（　　）
A. 葡萄中的糖类和白砂糖可直接作为酵母菌细胞呼吸的底物
B. 矿泉水瓶可能膨胀，光照条件会影响发酵液气泡的产生速率
C. 取发酵液加入溴麝香草酚蓝溶液，反应后溶液变为灰绿色
D. 发酵期间，酒精、CO2和水都在酵母菌的细胞溶胶中产生
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解析：　酵母菌细胞呼吸的直接底物是葡萄糖，白砂糖的成分
为蔗糖，A错误；发酵期间会产生大量CO2，可能使矿泉水瓶膨
胀，窗台的光照条件会导致发酵瓶内温度变化，影响发酵液气泡
的产生速率，B正确；发酵液中的酒精与酸性重铬酸钾溶液反应
呈灰绿色，C错误；发酵期间，酒精在酵母菌的细胞溶胶中产
生；CO2一部分由初期酵母菌需氧呼吸产生，场所在线粒体基
质，一部分由厌氧呼吸产生，场所在细胞溶胶；水由需氧呼吸产
生或其他代谢反应产生，需氧呼吸产生水的场所在线粒体内膜，
D错误。
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12. （2024·浙江绍兴统考）关于果酒、果醋和泡菜等传统发酵食品的
制作，下列叙述正确的是（　　）
A. 果酒制作过程中，随着发酵的进行发酵液中糖含量增加
B. 果醋制作过程中，用酸性重铬酸钾测定醋酸含量变化，溶液灰绿
色逐日加深
C. 泡菜制作时，盐水要没过全部菜料2/3体积
D. 果酒、果醋和泡菜发酵后形成的溶液都呈酸性
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解析：　果酒制作时，利用的是酵母菌，酵母菌是异养微生
物，发酵过程中需要消耗糖，将糖分解为二氧化碳和水，故随着
发酵的进行发酵液中糖含量减少，A错误；酸性重铬酸钾可用于
检测酒精，果醋发酵时，由于乙醇（酒精）逐渐转变为乙酸，因
此溶液灰绿色逐渐变浅，B错误；腌制泡菜时泡菜坛要装至八成
满，盐水没过全部菜料，盖上坛盖再用水密封泡菜坛，可利用水
隔绝空气，从而创造无氧条件，C错误；果酒制作过程中会产生
二氧化碳，导致溶液呈酸性，果醋制作过程中产生的醋酸和泡菜
制作过程中产生的乳酸都会使溶液呈酸性，D正确。
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13. （2024·浙江校联考期中）泡菜是我国的传统美食，早在《诗经》
中就有“中田有庐，疆场有瓜，是剥是菹，献之皇祖”的诗句，
其中“庐”和“瓜”是蔬菜，“剥”和“菹”是腌制加工的意
思。关于泡菜，下列叙述错误的是（　　）
A. 发酵后期，乳酸产生过多，会使乳酸菌受到抑制
B. 用热水短时间处理“庐”“瓜”，可使泡菜口感更脆
C. 若从泡菜汁中筛选耐盐乳酸菌，培养基pH需偏碱性
D. 泡菜坛边水槽中应随时加满水，以防止外界空气进入
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解析：　发酵后期，乳酸产生过多，pH降低，会使乳酸菌的繁
殖受到抑制，A正确；用热水短时间处理“庐”“瓜”，高温可
破坏微生物产生的果胶酶，保证植物细胞壁的结构，可使泡菜口
感更脆，B正确；乳酸菌需要在pH偏酸的条件下培养，培养基不
宜偏碱性，C错误；乳酸菌为厌氧菌，泡菜坛边水槽中应随时加
满水，以防止外界空气进入，保证无氧环境，D正确。
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14. 关于黄酒的酿造过程，下列叙述错误的是（　　）
A. 酒精发酵时，酵母菌生命活动所需的能量主要来自丙酮酸氧化时
所释放的化学能
B. 开放环境有利于酵母菌快速繁殖的原因是需氧呼吸能量利用效 率高
C. 主发酵阶段开耙降低温度可以防止温度过高影响发酵
D. 通过煎酒杀死微生物并破坏残存酶的活力可提高黄酒的稳定性
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解析：　酒精发酵时，酵母菌进行厌氧呼吸，厌氧呼吸第一阶
段产生ATP，酵母菌生命活动所需的能量来源于厌氧呼吸第一阶
段产生的ATP，A错误；开放环境下，氧气充足，酵母菌进行需氧
呼吸并大量繁殖，B正确；发酵过程酵母菌进行呼吸作用释放热
能，发酵温度上升，开耙有利于热量散失，降低发酵温度，防止
温度过高影响酵母菌活性而影响发酵进程，C正确；煎酒是利用
高温杀死发酵液中的微生物，同时高温使酶失活，提高黄酒的稳
定性，D正确。
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15. （2024·浙江台州高二期末）某同学利用新鲜青菜头进行榨菜制
作，取新鲜青菜头洗净、晾干后浸泡在5％的盐水中，然后进行混
合接种、单接种和不接种，在室温（25 ℃）发酵，结果如下表。
组别 主要风味特点 发酵成熟时间（d）
自然发酵 有明显发酵香味，较脆 25
明串珠菌 香味较淡，脆度一般 22
乳杆菌 香味明显，偏酸，较脆 20
混菌发酵 发酵香味浓郁，脆嫩 20
注：混菌发酵表示明串珠菌和乳杆菌配比为1∶1。
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据上述实验结果分析错误的是（　　）
A. 5％的盐水既能调味又能抑制杂菌生长
B. 混菌发酵中菌种比例1∶1为最优配比
C. 单菌种发酵风味不及混合菌种发酵
D. 混合接种比不接种发酵效果更好
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解析：　5％的盐水不仅起到调味的作用，而且还能抑制杂菌生
长，A正确；结合表格可知，混菌发酵中菌种比例1∶1制作榨菜
效果较好，但没有其他比例的混菌发酵作对比，因而不能说该比
例的混菌发酵效果最好，B错误；根据表格信息可知，单菌种发
酵风味不及混合菌种发酵，C正确；混合接种发酵表现为发酵香
味浓郁，脆嫩，较不接种发酵效果更好，D正确。
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16. 发酵工程在食品工业、医药工业和农牧业等许多领域得到了广泛
的应用，在发酵过程中，发酵条件的控制至关重要。下列关于发
酵条件的控制的叙述，不正确的是（　　）
A. 环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢
物的形成，因此发酵过程要严格控制发酵条件
B. 发酵过程中微生物代谢产热和机械搅拌产热，会使发酵罐温度升
高，因此要及时调节发酵罐温度
C. 培养基中营养物质的利用和代谢物的积累，可能会导致发酵液pH
发生改变，如工业酿酒会导致pH上升
D. 现代工业发酵对发酵条件的监测和控制是通过计算机系统实现
的，可以使发酵过程处于最佳状态
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解析：　酿酒过程中不仅会产生酒精，还会产生大量的二氧化碳，发酵液的pH会下降，C错误。
17. 下列对发酵产品的分离、提纯和加工的说法，错误的是（　　）
A. 为了获得大量酵母菌，可采用离心等方法
B. 酿制白酒时，常用蒸馏的方法提取发酵产品
C. 吸附发酵需要用到吸附剂
D. 发酵过程中的环境条件只影响微生物的生长繁殖，不影响微生物
代谢产物的形成
解析：　生物代谢产物是经化学反应生成的，生物体内的化学
反应几乎都需要酶的催化，与温度、pH、氧气等环境条件都有关
系，D错误。
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　　（2023·浙江嘉兴高二联考期中）阅读下列材料，完成18～19
小题。
　　某学者利用“影印培养法”研究大肠杆菌抗链霉素性状产生的原
因，先将原始菌种涂布在1号培养基上，培养出菌落后，将灭菌绒布
在1号上印模，绒布沾上菌落并进行转印，
使绒布上的菌落按照原位接种到2号和3号
培养基上。待3号上长出菌落后，在2号上
找到对应的菌落，然后接种到不含链霉素
的4号培养液中，培养后再涂布到5号培养
基上，并重复以上步骤。实验过程如图所示。
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18. 下列关于实验操作的叙述正确的是（　　）
A. 本实验的培养基采用MS培养基
B. 3号培养基上不可能生长出酵母菌的菌落
C. 要检测培养基是否灭菌彻底，可设置一块不接种菌液的平板在相
同条件下培养作为对照
D. 涂布操作前接种环要进行灼烧灭菌
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解析：　MS培养基是一种植物生长培养基，用于实验室培养植
物细胞培养物，故本实验的培养基并不是MS培养基，A错误；某
些酵母菌发生突变，具有抗链霉素性状，因此3号培养基上可能生
长出酵母菌的菌落，B错误；若要检测培养基是否灭菌彻底，最
有效的方法是将未接种的培养基作为对照组放在相同条件下培
养，若出现菌落，则说明培养基没有灭菌彻底，C正确；进行稀
释涂布操作时，将需要用到的涂布器进行灼烧灭菌，D错误。
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19. 下列相关叙述错误的（　　）
A. 大肠杆菌抗链霉素的性状是由基因突变引起的
B. 7中观察到的菌落数一定等于初始时接种到该培养基上的菌体数
C. 4号与8号培养液中，抗链霉素菌株的比例逐渐增大
D. 在一定时间内4号培养液中大肠杆菌的数量逐渐增多
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解析：　大肠杆菌是原核生物，其可遗传变异只有基因突变，
故大肠杆菌抗链霉素的性状是由基因突变引起的，A正确；当两
个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故7中
观察到的菌落数可能少于初始时接种到该培养基上的菌体数，B
错误；3号与2号、7号与6号培养基中的菌落数的比例，是抗性菌
落占全部菌落的比例，观察实验结果可知，4号与8号培养液中，
抗链霉素菌株的比例在逐渐增大，C正确；在接种大肠杆菌后，
因4号培养液中的营养充足、条件适宜，故在一定时间内大肠杆菌
的数量会随着自身的分裂增殖而逐渐增多，D正确。
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20. 有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发
现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株
和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。下列说法正确的
是（　　）
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A. 该实验所用的选择培养基可以用苯磺隆、蔗糖等作为碳源
B. 本实验的目的是探究能降解苯磺隆的物质是否为该菌种所产生的
蛋白质
C. 在微生物的接种实验中，用95％的酒精对实验者的双手和超净工
作台进行消毒
D. 该实验中，采集的土壤样品经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀
释液
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解析：　选择培养基只允许特定种类的微生物生长，同时要抑
制或阻止其他种类的微生物生长，因而必须以苯磺隆为唯一碳
源，只让目的菌生存繁殖，A错误；图乙上清液中加入的蛋白酶
溶液是用于水解上清液中的某蛋白质的，由此可判定实验目的是
探究目的菌是否通过分泌某种蛋白质来降解苯磺隆，B正确；在
微生物接种时，需用50％的酒精对实验者的双手和超净工作台进
行消毒，C错误；在分离土壤中目的菌的实验中，采集的土样经
高温灭菌后，土样中的微生物被杀死，再制取土壤稀释液接种并
培养，不会得到菌落，D错误。
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二、非选择题（本题共5小题，共60分）
21. （12分）（2024·浙江嘉兴高二联考期中）泡菜口感爽脆，有独特
的风味，是广受喜爱的开胃食品。请回答下列与泡菜制作有关的
问题：
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（1）新鲜的蔬菜洗净，切块。将泡菜坛洗净，用开水清洗内壁，
将蔬菜、调料、白酒等放入坛内，其中白酒有
的作用。若蔬菜用热水短时处理，再放入坛中，会使泡菜发
酵时间缩短，其原因是
。对于新配制的泡菜原料，
加入一些陈泡菜汁，也可以缩短腌制时间，这是因为
。
杀菌、调味　
细胞（膜）破裂，营养物质外流，
使乳酸菌快速地获得营养物质　
陈泡
菜汁中有较多的乳酸菌　
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解析：在制作泡菜时，白酒具有杀菌、调味的作用。若蔬菜用热水短时处理，再将白菜放入坛中，这时细胞膜破裂，营养物质外流，使乳酸菌快速地获得营养物质，会使泡菜发酵时间缩短。陈泡菜汁中有较多的乳酸菌，新配制的泡菜原料，加入一些陈泡菜汁，也可以缩短腌制时间。
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（2）泡菜发酵初期，由于泡菜罐加盖并用水封住坛口，会使
菌被逐渐抑制。发酵中期，乳酸菌大量繁殖，会使
菌受到抑制。发酵后期，乳酸产生过多，会使乳酸菌受
到抑制。此时，发酵工程上通常可利用 （填“真
空”“吸附”或“萃取”）发酵方法将乳酸及时脱离发酵
液，起到及时调节发酵液pH的作用。
好
氧　
不耐
酸　
吸附　
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解析：泡菜的制作离不开乳酸菌，在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。在发酵初期水密封后，泡菜罐内缺乏氧气，好氧菌被逐渐抑制；发酵中期乳酸菌产生乳酸，不耐酸细菌被抑制。发酵过程中，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件，发酵工程上通常可利用吸附发酵的方法将乳酸及时脱离发酵液，起到及时调节发酵液pH的作用。
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（3）从泡菜汁中可分离制作酸奶的乳酸菌，在某种含牛乳的专用
的培养基中进行初步筛选。该培养基必须含有 ，以便于
观察是否产酸。
①龙胆紫　②酸碱指示剂　③双缩脲试剂
解析：乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸，乳酸为酸性，在某种含牛乳的专用的培养基中进行初步筛选，该培养基必须含有②酸碱指示剂，以便于观察是否产酸。
②　
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（4）自然界中醋酸菌常与乳酸菌共同生长，若要筛选出醋酸菌，
则其专用的培养基中应添加 。
解析：当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。自然界中醋酸菌常与乳酸菌共同生长，若要筛选出醋酸菌，则其专用的培养基中应添加乙醇，醋酸菌可以利用乙醇，但乳酸菌不能利用乙醇，以此达到分离的目的。
乙醇　
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22. （12分）（2024·浙江台州检测）随着社会的发展，石油产品的使
用越来越多，石油烃污染也越来越严重。为了筛选出分解石油烃
能力更强的微生物，人们不断地进行研究。请回答与此筛选过程
有关的问题：
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碳　
氮　
（1）一般来说，微生物生长过程中需要的营养物质包括
源、 源、水、无机盐等。
解析：各种培养基一般含有水、碳源、氮源和无机盐
等，有些培养基还需要满足微生物生长时对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。
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（2）分解石油烃的微生物一般要从土壤中分离，获取土壤样品的
取样地点最好选在 。下图为获取土壤样品
后的培养研究过程：
a.为了能有效地分离出分解石油烃的微生物，过程①～④所
用培养基，其成分的特点是 ，从而有
利于 的生长，抑制其他
微生物的生长。
石油污染明显处　
只含石油烃一种碳源　
目的菌（或分解石油烃的微生物）　
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b.过程④中的培养基从物理特征看属于 培养基，
这可以通过往培养基中加入一定量的 来实现，对
④常采用 法接种以用于活菌计数。该计
数方法得到的值通常比实际的结果 （填
“高”“低”或“一样”）。若研究人员用另一种接种
方法在培养基表面划线4个区域，则需要蘸取菌液
次，接种环共需要灼烧 次。
c.若发现在⑤中无法区分菌落，可以将③中取出的菌液
。
固体　
琼脂　
稀释涂布平板　
低　
一　
五　
进
行梯度稀释　
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解析：结合题干“为了筛选出分解石油烃能力更强的微生物”，意味着获取土壤样品的取样地点最好选在石油污染明显处。a.为了能有效地分离出分解石油烃的微生物，过程①～④所用培养
基为选择培养基，能够让分解石油烃的微生物生存，故其成分的
特点是只含石油烃一种碳源，从而有利于目的菌（或分解石油烃
的微生物）的生长，抑制其他微生物的生长；b.过程④中的培养基可以使得菌落在其上生长，故从物理特征看属于固体培养基，这可以通过往培养基中加入一定量的琼脂来实现；若要对培养的活菌进行计数，则需要对④常采用稀释涂布平板的方法接种
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以用于活菌计数；但是该方法得到的值通常比实际的结果低，因为显微镜计数法通常将死菌、活菌一起计数，而且利用稀释涂布平板的方法接种得到的菌落，有时候两个菌落连在一起，导致计数时也算为一个菌落；若研究人员用另一种接种方法在培养基表面划线4个区域，则需要蘸取菌液一次，后续通过划线将其分离培养，接种环共需要灼烧五次（每次划线前需要灼烧一次，划线结束后需要灼烧一次，避免污染）；c.若发现在⑤中无法区分菌落，说明菌落还是太密集，稀释度不够，可以将③中取出的菌液重新进行梯度稀释。
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（3）在实验室应采用 法对培养基
进行灭菌，处理时间通常为高压灭菌锅
时开始计时15～20分钟。在整个微生物的分离
和培养中，一定要注意在 条件下进行。
高压蒸汽灭菌（或湿热灭菌）　
压力为1 kg/cm2、温
度为121 ℃　
无菌　
解析：对于配制好的培养基，在实验室应采用高压蒸汽灭菌（或湿热灭菌）法对其进行较为彻底的灭菌，处理时间通常为高压灭菌锅压力为1 kg/cm2、温度为121 ℃时开始计时15～20分钟。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。
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23. （12分）（2024·浙江杭州高二联考）我国餐厨垃圾占城市生活垃
圾比重的37％～62％，餐厨垃圾具有高含水率（约68％～75
％）、高有机物（10％～15％）、高盐分的“三高”特性，丢弃
处理是一种资源的浪费，而且处理不当还会滋生病原菌，污染环
境。研究人员采集废弃垃圾液通过生物工程技术分离出了能高效
降解淀粉、蛋白质、脂肪等成分的菌种制成复合微生物菌剂，实
现垃圾无害化处理和资源化的高效利用。回答下列问题：
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（1）菌种的选育：按照下面的流程分别分离获得高效分解淀粉、
蛋白质、脂肪的菌种；①采集废弃垃圾液作为分离样本，给
我们提供的取样思路是 ，土样采集
后进行富集培养，目的是
。
②完成梯度稀释后，菌种接种到平板上的过程需要使用的工
具为 ，与普通营养物质不同，餐厨垃圾
多来自烹饪余留，因此在分离培养基中宜提高
含量配置成选择培养基，更能实现菌株的分离。
从菌种生存环境中取样　
对目标菌种扩增，提高其所占比
例，有利于分离获得菌种　
移液器和玻璃刮刀　
氯化钠（高
盐）　
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解析：微生物需要特定的条件才能生长繁殖，获取我们所需要的菌种，需要从菌种生存环境中取样获取；取样的土壤中含有的目标菌种一般较少，需要对目标菌种扩增，提高其所占比例，有利于分离获得菌种，即是富集培养的过程。将稀释后的菌种接种到平板上，需要使用移液器和玻璃刮刀，这样接种的量是固定的，培养出的菌落可以是纯培养的结果，便于计数。餐厨垃圾具有高含水率（约68％～75％）、高有机物（10％～15％）、高盐分的“三高”特性，能分解餐厨垃圾的微生物具有耐盐的特点，故在分离培养基中宜提高氯化钠的浓度，配置成选择培养基，更能实现菌株的分离。
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（2）餐厨垃圾处理的混菌发酵：用上述方法分别选育出高效分解
淀粉、蛋白质和脂肪的菌种后，将三类菌按照一定的比例制
成复合微生物菌剂，再将菌剂与经过预处理的厨余垃圾混合
发酵。
①发酵过程中影响垃圾分解效率的因素除温度、pH、溶解
氧等环境因素外，还有
。
菌种类型、菌种的配比、菌液浓
度、垃圾种类、垃圾浓度等　
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②发酵过程不仅能将垃圾无害化，同时还能通过
技术从发酵液分离获得丰富的单细胞蛋白，实现
垃圾的资源化。
③除去单细胞蛋白的废液中的油脂经脂肪酶作用可转化为生
物柴油。为了从废油脂中筛选出高产脂肪酶菌株，需配
制 的选择培养基，然后在平板上接种废
油脂稀释液，倒置在恒温培养箱中培养一段时间，在平板上
挑选 的菌落即可。得到的
菌种应减少其传代次数从而降低菌种的 。
沉淀、过
滤、离心　
以脂肪为唯一碳源　
透明圈直径与菌落直径比值较大　
自发突变概率　
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解析：垃圾分解效率与微生物的数量和生活状态密切相关，除温度、pH、溶解氧等环境因素外，还有菌种类型、菌种的配比、菌液浓度、垃圾种类、垃圾浓度等会影响分解效率。单细胞蛋白即是菌体本身，可通过沉淀、过滤、离心技术从发酵液分离，从而实现垃圾的资源化。为了从废油脂中筛选出高产脂肪酶菌株，需要配置选择培养基，即以脂肪为唯一碳源的选择培养基，然后在平板上接种废油脂稀释液，倒置在恒温培养箱中培养一段时间，若菌落周围透明圈直径与菌落直径比值较大，说明该菌种具有较强分解油脂的能力，可挑选菌落进行保存或再培养。微生物传代培养的次数多可能会发生基因突变，为了降低菌种的自发突变概率，应减少其传代次数。
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24. （12分）（2024·金华高二检测）某生物兴趣小组进行土壤中尿素
分解菌的分离和计数实验。请回答下列问题：
（1）实验原理：尿素是一种重要的农业氮肥，并不能直接被农作
物吸收，需要转变成氨，才能被吸收，这个转变依赖于土壤
中能产生 的微生物的作用。
解析：尿素分解菌能产生脲酶将尿素分解成氨，因此由尿素转变成氨的过程依赖于土壤中能产生脲酶的微生物的作用。
脲酶　
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①配制培养基（成分：葡萄糖、NaCl、K2HPO4、尿素、
Y、H2O、琼脂糖），并制作无菌平板。
②设置 组和若干实验组，进行相关操作。
空白对照　
（2）实验步骤：
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a.为了更好地鉴别出此类微生物，在培养基配方中加入了
Y，Y是 。
b.为了对实验的结果进行进一步统计，需要用
法进行接种。
c.恒温培养48小时后，在稀释倍数为105下，平板上的菌落
数目在30～300之间，小组成员进行统计，应注意统计周围
为 （填颜色）的菌落进行计数。
酚红指示剂　
稀释涂布平
板　
红色　
③将各组平板置于恒温培养箱中培养一段时间，统计各组平
板上菌落的平均数。
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解析：②为检验培养基是否受到杂菌污染，需要设置空白对照组。③a.细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，因此可以通过检查培养基的pH变化来鉴别尿素分解菌的存在，在培养基配方中加入的Y可以是酚红指示剂。c.当尿素分解菌产生的脲酶将尿素分解为氨后，使pH升高，酚红指示剂会变红，因此应注意统计周围为红色的菌落进行计数。
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（3）实验结果分析：
兴趣小组的同学在统计菌落数目时，除了上述统计的菌落
外，还发现有些菌落周围的培养基没有变化，试分析这些菌
落产生的可能原因：

（答出一点即可）。
存在固氮微生物，它们能利用空气中
的氮气作为氮源，而不利用培养基中的尿素，不能将尿素分
解成氨（不与指示剂作用）　
解析：有些菌落周围的培养基没有变化，说明这些细菌不能产生脲酶进而利用尿素作为氮源，而氮源为微生物生长所必需的，因此推测可能存在固氮微生物，它们能利用空气中的氮气作为氮源。
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25. （12分）（2024·浙江平湖市联考期中）黄曲霉毒素是黄曲霉和寄
生曲霉等的代谢产物，具有极强的毒性和致癌性，在污染的粮油
及其制品中含量较高。科研人员用黄曲霉毒素B1（AFB1）的结构
类似物——香豆素（C9H6O2）筛选能高效降解AFB1的菌株，请回
答下列问题：
（1）为了筛选出AFB1降解菌，常从霉烂的花生、玉米和棉花中
采样，原因可能是霉烂的花生、玉米和棉花中含有
。香豆素不耐高温，一般采用
灭菌方法，为了提高灭菌速度还可以进行 操作。
较多的
高效降解AFB1的菌株　
过滤　
抽滤　
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（2）筛选AFB1降解菌时，培养基中唯一的碳源物质是 ，
在香豆素浓度较高的培养基上，利用稀释涂布平板法接种，
所有培养基中菌落数极少的原因有可能是
。
香豆素　
高浓度香豆素使
细胞失水死亡　
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（3）菌体对有机物的降解途径有胞外分泌物降解和菌体吸附降解
两种。实验小组对降解菌的发酵液进行离心，发现上清液中
AFB1的残留率明显低于菌悬液中AFB1的残留率。
①分析以上信息可知，菌体降解AFB1的途径主要是
。
②经检测发现上清液中存在多种蛋白质，请设计实验验证蛋
白质K是降解AFB1的有效成分，要求简要写出实验思路和预
期结果。（实验材料：若干试管、培养过降解菌的上清液、
蛋白质K水解酶、含AFB1的液体培养基）
胞外分
泌物降解　
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实验思路：取若干试管均分为甲、乙两组，在各试管中分别
加入等量的培养过降解菌的上清液，然后在甲组各试管中加
入 ，乙组不作处理，一段时
间后将甲、乙两组试管中的培养液分别加入到含 的液
体培养基中，在适宜条件下反应一段时间，检测培养基中
AFB1是否被降解。
预期结果：
。
适量且等量的蛋白质K水解酶　
AFB1　
甲组液体培养基中的AFB1未被降解，乙组液体
培养基中的AFB1被降解　
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解析：香豆素（C9H6O2）含有碳元素，为了筛选AFB1降解菌，培养基中唯一的碳源物质是香豆素，在香豆素浓度较高的培养基上，高浓度香豆素使细胞失水死亡，使培养基中菌落数较少。（3）①根据题意可知，上清液主要含有胞外分泌物，沉淀物中含有降解菌，由于上清液中AFB1的残留率明显小于菌悬液的，因此降解菌对AFB1降解的主要途径是胞外分泌物降解。
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②为了验证上清液中的蛋白质K是降解AFB1的有效成分，可以用蛋白
质K水解酶处理上清液以去除蛋白质K，若上清液不再具有降解作用，
则可以说明蛋白质K是降解AFB1的有效成分。实验思路：取两试管编
号甲、乙分别加入等量的培养过降解菌的上清液，甲组加入适量的蛋
白质K水解酶，乙组不作处理，一段时间后将甲、乙组培养液分别加
入含AFB1的培养基。预期结果：甲组液体培养基中的AFB1未被降解，
乙组液体培养基中的AFB1被降解，同时甲组AFB1的降解率小于乙组的。
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