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【高考真题】广西2025年高考真题生物试卷
1．（2025·广西） 在合成、加工及运输促性腺激素的过程中，需要垂体细胞内各种结构的协调配合。下列有关该过程的说法错误的是（　　）
A．合成场所位于核糖体 B．加工需要高尔基体
C．运输依赖于细胞骨架 D．不需要线粒体参与
2．（2025·广西） 利用微生物分解厨余垃圾可实现资源的再利用。下列说法错误的是（　　）
A．厨余垃圾分解过程产生的热量，会影响分解效率
B．对组成复杂的厨余垃圾再分类，可提高利用效率
C．厨余垃圾中的淀粉，可作为微生物的碳源和氮源
D．含盐量高的厨余垃圾，可选用耐高盐的微生物分解
3．（2025·广西） 甘薯是重要的农作物，为了改良甘薯品质，科学家利用甘薯（2N=90）与其近缘野生种（2N=30）进行体细胞杂交，选育得到杂种植株M1。下列说法正确的是（　　）
A．需用几丁质酶和果胶酶来降解甘薯细胞壁
B．为防止原生质体失水，需使用低渗缓冲液
C．M1具有两个物种的所有性状，且染色体数目为2N=120
D．在培育M1时，配制的各种培养基常以MS培养基为基础
4．（2025·广西） 线柱兰是华南地区草坪中常见的兰科植物，花朵小巧精美。兴趣小组分别采用逐个计数法和样方法，对校园草坪中的线柱兰种群数量进行调查。下列说法正确的是（　　）
A．样方数量会影响样方法的调查结果
B．这两种调查方法得到的结果通常相等
C．运用样方法调查时，样方内均需有线柱兰
D．若线柱兰个体数量较少，可缩小样方面积
5．（2025·广西） 切取虎尾兰的叶插入土壤，置于适宜条件下培养。一段时间后，切口处会长出新植株。下列有关该过程的说法错误的是（　　）
A．体现了细胞的全能性 B．受到植物激素的调节
C．属于有性生殖的范畴 D．包含脱分化及再分化
6．（2025·广西） 科学家利用携带猪源细胞表面蛋白基因（GT）的NDV病毒靶向感染人体内癌细胞，从而强烈激活免疫系统，起到了较好的肿瘤治疗效果。下列有关说法正确的是（　　）
A．培养体外实验使用的癌细胞时，通常需添加血清
B．感染NDV-GT的癌细胞会被巨噬细胞特异性吞噬
C．经NDV-GT方法治愈的患者，体内不存在能识别GT蛋白的免疫细胞
D．人体正常细胞若被感染并表达了GT，不会被免疫系统识别为“非己”成分
7．（2025·广西） 血钙水平受甲状旁腺激素（PTH）和降钙素（CT）共同调节，其机制见图。下列说法错误的是（　　）
A．高钙饮食可以适度缓解老年骨质疏松
B．甲状旁腺损伤严重会表现出肌无力病征
C．对血钙水平的调节，PTH和CT相互拮抗
D．抗维生素D佝偻病患者体内的PTH水平较高
8．（2025·广西） 研究发现，小鼠达到生殖年龄后，初级卵母细胞的细胞质基质内Ca2+浓度快速升高，激活PDE3A酶催化cAMP水解，最终促使停滞的初级卵母细胞恢复减数分裂。利用不同PDE3A基因型小鼠进行杂交，杂交情况及结果见表。下列分析正确的是（　　）
组别 1 2 3 4 5 6
♂ +/+ +/+ +/+ -/- -/- -/-
♀ +/+ +/- -/- +/+ +/- -/-
平均窝产仔数（只） 7.5 7.4 0 7.6 7.4 0
注：“+/+”表示野生型；“+/-”表示杂合突变：“-/-”表示纯合突变。
A．提高cAMP水平后，初级卵母细胞成熟速度加快
B．初级卵母细胞恢复减数分裂时，染色体开始复制
C．杂合突变个体相互杂交后，平均窝产仔数约为7.4只
D．给第3组的母鼠注射PDE3A酶激活剂，可提高其窝产仔数
9．（2025·广西） 某植物根细胞吸收存在两种跨膜运输方式，见图。下列有关分析正确的是（　　）
A．低钾环境时，K+运输速率受H+运输速率限制
B．运输H+时，载体蛋白空间结构不会改变
C．呼吸抑制剂会抑制K+的这两种运输方式
D．K+是一种信号分子，能诱发根细胞产生兴奋
10．（2025·广西） 某大型淡水湖入湖河口形成了碟形湖。丰水期碟形湖区与主湖区湖水相连，枯水期碟形湖与主湖水流隔断，见图。下列说法错误的是（　　）
A．枯水期时碟形湖与主湖之间存在物质交换
B．丰水期时碟形湖区和主湖区藻类密度通常相等
C．枯水期时碟形湖和主湖的能量金字塔均为正金字塔形
D．丰水期时相邻两个营养级之间的能量传递效率为10%~20%
11．（2025·广西） 科研人员对肥胖组与正常组小鼠的精子进行相关检测，结果见表。下列说法错误的是（　　）
表
检测指标 正常组 肥胖组
精子活动率（%） 45.67+5.49 21.37+3.70*
形态正常的精子（%） 83.38+2.87 61.32+2.46*
精子中组蛋白乙酰化水平 1.03±0.51 0.46±0.18*
A．肥胖导致精子活动率下降，进而使生育潜能降低
B．肥胖可能影响性激素的产生，进而影响精子的正常发育
C．精子中组蛋白乙酰化水平的高低，不会影响基因的表达水平
D．低水平的组蛋白乙酰化表观修饰可传递给子代，并使其容易肥胖
12．（2025·广西） 某种鱼的尾巴性状受常染色体上等位基因E/e控制，见表。已知雌鱼通常只与大尾巴雄鱼交配。现有一个EE60条、Ee120条和ee60条（每种基因型的雌、雄鱼数量相等）的种群，下列有关该种群自然繁殖后的分析，正确的是（　　）
表
基因组成 E_ ee
雄鱼尾巴性状 大尾巴 小尾巴
雌鱼尾巴性状 所有基因型个体的尾巴大小一致
A．多代后，小尾巴雄鱼将消失
B．子一代雌鱼中E基因频率降低
C．多代后，小尾巴雄鱼的尾巴更小
D．子一代雌、雄鱼中e基因频率相等
13．（2025·广西） 研究人员探究了不同浓度的油菜蜂花粉多酚（以下简称“多酚”）和药物Q对胰脂肪酶活性的影响（图a）；以及不同pH处理多酚后，多酚对该酶的酶促水解速率的影响（图b）。下列说法正确的是（　　）
A．单位时间内甘油的生成量，可作为以上实验的检测指标
B．在催化脂肪水解过程中，胰脂肪酶提供了大量的活化能
C．相同浓度下，药物Q对胰脂肪酶活性的抑制效果强于多酚
D．比较不同pH处理后的多酚，乙组对胰脂肪酶活性的抑制效果最弱
14．（2025·广西） 植物光敏色素phyB通常有Pr和Pfr两种构型，Pr吸收红光后转化为Pfr，但Pfr吸收远红光后又可逆转为Pr。遮阴会使环境中红光与远红光比值下降。下列分析错误的是（　　）
A．Pr吸收红光转化为Pfr不属于蛋白质变性
B．茎尖分生区细胞phyB含量比叶表皮细胞多
C．茎尖向光侧细胞的Pr与Pfr比值比背光侧大
D．茎尖向光侧细胞的Pr会与IAA结合抑制生长
15．（2025·广西） 褐飞虱是一种迁飞性害虫，每年春季自南向北逐步迁入水稻种植区，期间繁殖数代。某地采用灯诱监测褐飞虱成虫数量的动态变化，同时通过田间调查测定水稻单丛虫量（含所有龄级个体），结果见图。下列说法错误的是（　　）
A．分蘖期后，褐飞虱开始迁入
B．抽穗期有大量褐飞虱迁入
C．抽穗期末期灯诱虫量下降是因为大量个体死亡
D．黄熟期灯诱虫量上升是因为有大量褐飞虱迁出
16．（2025·广西） 某种二倍体鱼（XY型）会发生性逆转现象，研究人员运用基因编辑技术对雌鱼的雌激素合成主要基因进行敲除实验，并得到雌鱼性逆转的有关结果，见表。下列有关分析正确的是（　　）
表
组别 f基因 c基因 s基因 雌激素水平 鱼的性别
野生型 + + + ***** ♀
甲 + - + * ♂
乙 - + - ** ♂
丙 - - + * ♂
丁 + - - * ♂
戊 - + + ** ♂
己 + + - **** ♀
注：“+”表示不敲除基因；“-”表示敲除基因；“*****”表示野生型雌鱼正常的雌激素水平。
A．c、f基因都能直接控制合成少量且相等的雌激素
B．s、f基因的表达产物，共同促进c基因控制雌激素合成
C．饲喂外源雌激素，不能阻止甲、丙、丁三组雌鱼性逆转
D．乙、戊组鱼分别与己组鱼交配，后代性染色体组成不全是XX
17．（2025·广西） 为研究声波频率对大鼠情绪的影响，科学家进行了相关实验，结果见图。回答下列问题：
注：大鼠甜水偏好程度与其情绪愉悦程度正相关。
（1）大鼠耳内　 　受到声音刺激会产生兴奋。兴奋后恢复为静息电位的过程中，细胞膜外的电位变化是　 　，这主要是由　 　导致的。兴奋在听觉反射弧中的传递方向是　 　（选填“单向”或“双向”）的。
（2）实验结果表明，对大鼠情绪有正面影响的处理是　 　，理由是　 　。
（3）推测声波频率对大鼠情绪的影响主要是通过　 　侧大脑海马区进行的。如对实验中有负面情绪的大鼠补充外源多巴胺至正常水平，短期内其甜水偏好不能恢复，原因是　 　。
18．（2025·广西） 科学家利用衣藻和大肠杆菌设计了一种共培养系统。该系统中，工程化衣藻在光合作用时，会通过光呼吸竞争性消耗C5产生甘醇酸（光呼吸强度受CO2/O2比值影响）；工程化大肠杆菌利用甘醇酸合成高价值生物产品。实验过程及结果见图。回答下列问题：
注：μE为光照强度单位μmol.m-2.s-1
（1）第①阶段向培养液中通入3%CO2，目的是　 　。
（2）第②阶段大肠杆菌干重下降的主要原因是　 　。
（3）据图分析，限制第③阶段衣藻干重增加的主要因素是　 　；第④阶段衣藻和大肠杆菌的干重均增加，原因是　 　。
（4）该系统对助力实现碳中和目标的优势是　 　。
19．（2025·广西） 岩溶石漠化指脆弱的喀斯特生态系统在不合理的人为干扰下，植被退化导致土壤流失，岩石大面积裸露，呈现类似于荒漠化景观的现象。近年来，我国通过人工造林等生态工程，在石漠化治理方面取得了显著成效。回答下列问题：
（1）石漠化治理是通过人为干预改变演替的　 　，提高生态系统的　 　稳定性。
（2）石漠化治理初期，部分地区会通过种植豆科小灌木紫花苜蓿来改善土壤肥力，其原理是　 　。
（3）在石漠化治理时，还会基于“因地制宜，本土优先”的原则选择一些乔木，遵循的生态学原理是　 　。选择的这些乔木，生态位重叠较小，既避免竞争排斥，实现共存，又利于　 　（至少写出2方面）。
（4）治理过程中，群落常常会进入相对稳定的“藤灌阶段”，此时需要适当采伐群落中的藤本植物和灌木，目的是　 　。
20．（2025·广西） 某植物（XY型）的花色受2对等位基因（E/e和R/r）控制，遵循自由组合定律。已知E/e基因位于常染色体上，该植物花色产生机制见图（不考虑XY同源区段、染色体交换情况）。回答下列问题：
（1）将红花雌、雄株杂交，子一代表型及比例为红花：黄花：白花=9：3：4，据此不能确定R/r基因位于常染色体上，理由是　 　。对子一代的雌株作进一步分析：若　 　，则说明R/r基因位于X染色体上；若　 　，则说明R/r基因位于常染色体上。
（2）实验分析确定E/e与R/r基因都位于常染色体上。在某红花雌、雄株繁殖的子代群体中，红花占比显著降低。经初步研究确定是常染色体上的g基因发生显性突变，产生了抑制作用，被抑制的基因不能表达，但未知被抑制的是E还是R基因。
①生物兴趣小组选取基因型EERRgg与eerrGg为亲本，探究G基因的抑制对象。写出实验思路、预期结果和结论　 　。
②再选用基因型EeRrGg的雌、雄株为亲本进行杂交，子一代的表型及比例为红花：黄花：白花=3：9：4.请在答题卡作图区画出EeRrGg个体的基因在染色体上可能的位置关系图（用“○”表示细胞，用“‖”表示1对同源染色体），并用文字说明基因间的抑制关系及位置情况　 　。
21．（2025·广西） CAR-T是指通过基因工程技术表达CAR基因的T细胞。CAR-T能更好地识别肿瘤细胞表面特定抗原，在肿瘤治疗中疗效显著。构建CAR-T过程见图，回答下列问题：
（1）构建含CAR基因的重组质粒，选用的限制酶组合是　 　。
（2）将连接产物导入Ca2+处理后的大肠杆菌，使用添加氨苄青霉素的固体培养基培养。使用固体培养基的原因是　 　。
（3）将获得的重组质粒导入T细胞并成功表达后，为了研究CAR-T识别肿瘤细胞的特异性及抗肿瘤效果，除了有CAR-T与肿瘤细胞共同培养的实验组，还需设置的对照组有　 　，肿瘤细胞凋亡率的检测指标有　 　（至少写出2点）。
（4）研究发现，肿瘤细胞高表达的PD-L1与CAR-T表达的PD-1结合会启动免疫抑制。为了阻断免疫抑制，可采取的策略有抑制PD-1与PD-L1的结合以及　 　。同时，肿瘤周围组织过于致密会使CAR-T难以接触肿瘤细胞，也会影响疗效。可通过设计减弱原有PD-1启动的抑制通路和降解肿瘤胞外基质的途径解决上述两个问题。已知溶解酶可以降解细胞外基质，多种酶同时作用可提高降解效率；与PD-1连接的生物开关，在该PD-1与PD-L1结合后会被打开，释放P因子激活P启动子。依据上述特性构建新的重组质粒并使其在T细胞中表达。该新的重组质粒部分结构见图，其中①是　 　，②是　 　，③是　 　，④是　 　。
答案解析部分
1．【答案】D
【知识点】其它细胞器及分离方法；细胞器之间的协调配合；细胞骨架
【解析】【解答】A、核糖体是蛋白质的合成场所。促性腺激素作为蛋白质，其氨基酸的脱水缩合反应必然在核糖体上进行，A不符合题意；
B、高尔基体在分泌蛋白的加工中承担关键角色。它会对来自内质网的蛋白质进行进一步的加工、分类和包装，然后形成囊泡将其运送到细胞膜，B不符合题意；
C、细胞骨架是由蛋白质纤维组成的网状结构，它能为细胞内的物质运输提供“轨道”。囊泡包裹着促性腺激素，会沿着细胞骨架移动，从而实现精准运输，C不符合题意；
D、分泌蛋白的合成（核糖体）、加工（内质网、高尔基体）和运输（囊泡移动）整个过程都需要消耗能量。而线粒体是细胞的“动力车间”，是有氧呼吸的主要场所，负责为这些生命活动提供能量（ATP）。因此，该过程必须依赖线粒体，D符合题意。
故答案为：D。
【分析】首先在核糖体合成多肽链，随后进入内质网进行初步加工（如折叠、加糖链），形成有一定空间结构的蛋白质；接着内质网出芽形成囊泡，将蛋白质运输到高尔基体，高尔基体对蛋白质进行进一步加工、分类和包装，再通过囊泡运向细胞膜，最终分泌到细胞外。整个过程中，细胞骨架为囊泡运输提供路径支撑，而线粒体通过有氧呼吸产生ATP，为所有耗能步骤（合成、加工、囊泡移动）提供能量，即分泌蛋白的合成运输是核糖体、内质网、高尔基体、线粒体及细胞骨架共同作用的结果，缺一不可。
2．【答案】C
【知识点】微生物发酵及其应用；生态系统的物质循环
【解析】【解答】A、微生物分解有机物的过程会释放热量，导致环境温度变化。而每种微生物都有适宜的温度范围，温度过高或过低都会抑制微生物活性，进而影响分解效率，A不符合题意；
B、厨余垃圾成分复杂，包含淀粉、脂肪、蛋白质、盐分等。对其分类后，可针对不同成分选择适配的微生物，避免无关成分干扰，让微生物更高效地分解目标物质，从而提高资源利用效率，B不符合题意；
C、淀粉的化学组成是碳、氢、氧，不含氮元素。微生物生长需要碳源（提供能量和构建有机物的碳骨架）和氮源（用于合成蛋白质、核酸等含氮物质），因此淀粉只能作为微生物的碳源，无法作为氮源，C符合题意；
D、高盐环境会导致微生物细胞失水，抑制多数微生物的生长。选用耐高盐的微生物（如某些极端环境中的细菌、真菌），其细胞结构和代谢机制能适应高盐条件，可正常分解含盐量高的厨余垃圾，D不符合题意。
故答案为：C。
【分析】微生物分解厨余垃圾的效率，受自身营养需求和外界环境因素双重影响。从营养需求看，微生物需要碳源、氮源、无机盐、水和生长因子，不同营养物质的元素组成决定了其功能，如含碳不含氮的有机物（淀粉、葡萄糖）只能作为碳源，含氮有机物（蛋白质、尿素）可同时提供碳源和氮源。从环境因素看，温度、盐分、垃圾成分复杂度都会影响微生物活性，例如温度需在微生物适宜范围，高盐环境需匹配耐高盐菌株，分类处理可优化微生物的分解条件。只有满足微生物的营养需求并控制适宜的环境，才能实现厨余垃圾的高效分解和资源再利用。
3．【答案】D
【知识点】植物体细胞杂交的过程及应用
【解析】【解答】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，降解时需使用纤维素酶和果胶酶。几丁质酶主要用于分解真菌、昆虫等生物细胞壁中的几丁质，不适用于甘薯这类植物细胞，A不符合题意；
B、原生质体失去了细胞壁的保护，若处于低渗缓冲液中，水分会大量进入细胞导致其吸水涨破。因此需使用等渗缓冲液，维持原生质体的正常形态，防止失水或吸水受损，B不符合题意；
C、杂种植株M1的染色体数目为双亲染色体数之和，即甘薯（2N=90）与野生种（2N=30）的染色体总数，应为4N=120（而非2N=120）。同时，由于基因的选择性表达或双亲基因间的相互作用，M1不会简单表现出两个物种的所有性状，只会表达部分关键性状，C不符合题意；
D、MS培养基含有植物生长所需的多种无机盐、维生素、氨基酸等营养成分，营养全面且比例适宜，是植物组织培养和体细胞杂交中配制各种培养基（如愈伤组织诱导培养基、分化培养基）的常用基础培养基，D符合题意。
故答案为：D。
【分析】植物体细胞杂交是将不同种植物的体细胞，在体外去除细胞壁获得原生质体后，通过人工诱导融合形成杂种细胞，再将杂种细胞培养成完整杂种植株的技术。该过程中，细胞壁去除依赖纤维素酶和果胶酶，原生质体培养需维持等渗环境以避免损伤；杂种植株的染色体数目为双亲体细胞染色体数之和，其性状并非双亲性状的简单叠加，而是受基因选择性表达和基因互作影响；MS培养基因营养全面，是支撑杂种细胞脱分化、再分化形成完整植株的重要基础，整个过程需严格控制培养基成分和培养条件，以确保杂种植株的成功培育。
4．【答案】A
【知识点】估算种群密度的方法
【解析】【解答】A、样方法通过选取若干样方统计个体数量，再推算种群密度。若样方数量过少，可能因偶然因素导致结果偏离真实值；样方数量充足时，结果更接近种群实际数量，因此样方数量会直接影响调查结果的准确性，A符合题意；
B、逐个计数法适用于个体数量少、分布范围小的种群，结果接近真实值；样方法适用于个体数量多、分布较广的种群，结果是通过样方推算的估算值。两种方法的适用场景和数据性质不同，得到的结果通常不相等，B不符合题意；
C、运用样方法时，样方需随机选取，部分样方内可能没有线柱兰（如线柱兰分布不均的区域）。统计时需将这些样方的个体数计为0，才能保证估算结果的准确性，并非要求所有样方内均有线柱兰，C不符合题意；
D、若线柱兰个体数量较少，应选择逐个计数法以获得准确结果；若仍用样方法，缩小样方面积会导致样方内包含的个体数更少，估算误差更大，此时应增大样方面积或增加样方数量，而非缩小样方面积，D不符合题意。
故答案为：A。
【分析】种群密度调查中，逐个计数法和样方法的选择取决于种群的个体数量和分布范围。逐个计数法针对数量少、分布集中的种群，结果准确；样方法针对数量多、分布较广的种群，结果为估算值，其准确性受样方大小、数量和随机性影响。样方法操作时，样方需随机选取，即使样方内无调查个体也需计入统计，个体数量过少时不宜使用样方法，否则易产生大的估算误差。选择合适的调查方法并遵循操作规范，是确保种群数量调查结果可靠的关键。
5．【答案】C
【知识点】植物组织培养的过程；无性生殖和有性生殖
【解析】【解答】A、细胞全能性指已分化的细胞仍具有发育成完整生物体的潜能。虎尾兰的叶细胞是已分化细胞，通过叶插能发育成新植株，直接体现了细胞的全能性，A不符合题意；
B、该繁殖过程中，新植株的形成需要细胞分裂和分化，而植物激素（如生长素、细胞分裂素）会调节细胞的脱分化、再分化及器官形成，例如生长素促进根的分化，细胞分裂素促进芽的分化，整个过程受植物激素调控，B不符合题意；
C、有性生殖需经过雌雄配子结合形成受精卵，再由受精卵发育成新个体；而虎尾兰叶插是通过叶器官直接培育新植株，无配子结合过程，属于无性生殖中的营养生殖，不属于有性生殖范畴，C符合题意；
D、叶插过程中，叶片切口处的细胞首先会脱分化，从已分化状态恢复为未分化的愈伤组织；随后愈伤组织再分化，形成根、芽等器官，最终发育成新植株，因此包含脱分化及再分化两个关键阶段，D不符合题意。
故答案为：C。
【分析】植物营养生殖（如叶插、扦插、嫁接）的本质是利用植物器官的全能性，通过无性方式培育新个体。该过程中，细胞先脱分化形成愈伤组织，再经再分化形成完整植株，整个过程受植物激素调节，无需经过雌雄配子结合，属于无性生殖。有性生殖与无性生殖的核心区别在于是否有配子结合形成受精卵的过程，明确这一区别及植物细胞全能性的体现条件。
6．【答案】A
【知识点】癌症的预防与治疗；动物细胞培养技术；免疫系统的结构与功能；细胞免疫
【解析】【解答】A、体外培养癌细胞时，基础培养基虽含糖类、氨基酸等营养，但血清中含有细胞生长所需的未知生长因子、激素等成分，能更好满足癌细胞增殖需求，因此通常需添加血清，A符合题意；
B、巨噬细胞的吞噬作用不具有特异性，它能识别并吞噬衰老、损伤或被病原体感染的细胞，但不会针对“感染NDV-GT的癌细胞”这一特定目标进行特异性吞噬；具有特异性识别和杀伤作用的是效应T细胞等免疫细胞，B不符合题意；
C、经NDV-GT方法治疗后，患者体内会产生针对GT蛋白的免疫记忆细胞（如记忆T细胞、记忆B细胞）。这些细胞能长期留存，若后续再次出现GT蛋白（如癌细胞再次表达），可快速启动免疫反应，因此体内存在能识别GT蛋白的免疫细胞，C不符合题意；
D、GT蛋白是猪源细胞表面蛋白，属于人体自身不存在的“外源蛋白”。即使正常细胞被感染并表达GT，免疫系统仍会将其识别为“非己”成分，进而启动免疫反应清除该细胞，D不符合题意。
故答案为：A。
【分析】病毒靶向肿瘤治疗的核心是利用病毒携带外源基因（如GT）感染癌细胞，使癌细胞表达外源蛋白，从而激活免疫系统对癌细胞的特异性攻击。在相关技术中，体外培养癌细胞需依赖血清提供生长辅助；免疫反应中，巨噬细胞负责非特异性吞噬，特异性杀伤依赖效应T细胞，且免疫记忆会使体内留存识别外源蛋白的免疫细胞；同时，外源蛋白（如猪源GT）无论在癌细胞还是正常细胞表达，都会被免疫系统识别为“非己”，这是启动免疫攻击的关键前提。
7．【答案】B
【知识点】无机盐的主要存在形式和作用；动物激素的调节
【解析】【解答】A、高钙饮食可增加血钙来源，适度补充钙质，有助于缓解老年骨质疏松，A不符合题意；
B、甲状旁腺损伤严重会导致PTH分泌不足，血钙降低，神经肌肉兴奋性升高，会表现出抽搐等症状，而非肌无力，肌无力通常与血钙过高有关，B符合题意；
C、PTH升高血钙，CT降低血钙，二者作用相反，相互拮抗，共同调节血钙水平，C不符合题意；
D、抗维生素D佝偻病患者钙吸收障碍，血钙降低，会刺激PTH分泌增加，因此体内PTH水平较高，D不符合题意。
故答案为：B。
【分析】血钙水平受甲状旁腺激素（PTH）和降钙素（CT）的拮抗调节。PTH通过促进骨钙释放、减少肾脏钙排出升高血钙；CT通过促进骨钙沉积、增加肾脏钙排出降低血钙。血钙异常会引发相应的神经肌肉症状，如血钙过低导致抽搐，血钙过高导致肌无力。
8．【答案】C
【知识点】减数分裂概述与基本过程；减数第一、二次分裂过程中染色体的行为变化
【解析】【解答】A、题干明确“PDE3A酶催化cAMP水解→促使初级卵母细胞恢复减数分裂”，即cAMP需被水解（水平降低）才能启动减数分裂。若提高cAMP水平，会抑制该过程，导致初级卵母细胞成熟速度减慢，而非加快，A不符合题意；
B、初级卵母细胞的染色体复制发生在减数分裂前的间期，而非“恢复减数分裂时”。减数分裂恢复的标志是细胞从停滞状态进入减数第一次分裂，此时染色体已完成复制，每条染色体含两条姐妹染色单体，B不符合题意；
C、杂合突变个体（+/-）的基因型中，仍有一个正常的PDE3A基因可表达功能酶。表格中组别2（♂+/+×♀+/-）和组别5（♂-/-×♀+/-）的平均窝产仔数均约为7.4只，说明杂合突变个体的生殖功能正常。因此，杂合突变个体（♂+/-×♀+/-）相互杂交时，平均窝产仔数仍约为7.4只，C符合题意；
D、第3组母鼠基因型为-/-，即无法自身合成PDE3A酶。PDE3A酶激活剂的作用是激活已存在的PDE3A酶，而该母鼠体内无功能性PDE3A酶，注射激活剂无法发挥作用，因此不能提高其窝产仔数，D不符合题意。
故答案为：C。
【分析】进行有性生殖的生物，在由原始生殖细胞形成成熟生殖细胞的过程中，染色体只复制一次，而细胞经减数分裂连续分裂两次，最终使成熟生殖细胞中的染色体数目比原始生殖细胞的减少一半。在减数分裂过程中，同源染色体发生分离，非同源染色体自由组合，使分配到子细胞中的染色体组合类型出现多样性。不仅如此，在减数分裂过程中同源染色体联会时，非姐妹染色单体间还常常发生互换，进一步增加了生殖细胞遗传的多样性。
9．【答案】A
【知识点】三种跨膜运输方式的比较；被动运输；主动运输
【解析】【解答】A、低钾环境时，K+与H+通过同一载体蛋白协同运输，H+运输为K+运输提供动力，因此K+运输速率受H+运输速率限制，A符合题意；
B、运输H+的载体蛋白在转运过程中空间结构会发生改变，B不符合题意；
C、图中K+的一种运输方式是借助H+浓度差的协同运输（间接消耗ATP），另一种是高浓度K+区域的运输（推测为协助扩散，不消耗ATP）。呼吸抑制剂会抑制ATP产生，从而影响H+的主动运输（进而影响K+的协同运输），但不影响协助扩散方式的K+运输，C不符合题意；
D、K+是植物细胞的重要矿质元素，不是信号分子，也不会诱发根细胞产生兴奋，兴奋是动物细胞的电信号反应，D不符合题意。
故答案为：A。
【分析】植物根细胞吸收K+存在两种跨膜运输方式，一是与H+协同的主动运输（依赖H+的浓度差，间接消耗ATP），二是协助扩散（顺浓度梯度，不消耗ATP）。载体蛋白在转运离子时空间结构会改变，主动运输受呼吸作用影响，而协助扩散不受其直接影响。
10．【答案】B
【知识点】生态系统的能量流动；生态系统的物质循环
【解析】【解答】A、枯水期虽然碟形湖与主湖水流隔断，但可能通过其他途径（如生物迁移等）存在物质交换，A不符合题意；
B、丰水期碟形湖区和主湖区的环境（如光照、营养物质等）可能存在差异，藻类密度通常不相等，B符合题意；
C、能量金字塔通常都是正金字塔形，即营养级越高，能量越少，枯水期时碟形湖和主湖的能量金字塔均为正金字塔形，C不符合题意；
D、相邻两个营养级之间的能量传递效率一般为10%~20%，丰水期时也遵循这一规律，D不符合题意。
故答案为：B。
【分析】丰水期和枯水期的水文连接情况会影响湖区的物质交换、生物分布及能量传递。能量金字塔的形状由能量流动的单向性和逐级递减性决定，相邻营养级能量传递效率相对稳定。
11．【答案】C
【知识点】表观遗传
【解析】【解答】A、表格数据显示，肥胖组精子活动率（21.37%）显著低于正常组（45.67%）。精子活动率是评估生育能力的重要指标，活动率下降会直接降低精子与卵子结合的概率，进而导致生育潜能降低，A不符合题意；
B、性激素（如睾酮）对精子的发生和成熟至关重要。肥胖可能通过影响内分泌系统（如胰岛素抵抗、脂肪因子紊乱）干扰性激素的合成与分泌，而性激素异常会进一步影响精子的正常发育，导致形态正常精子比例下降（肥胖组61.32% vs 正常组83.38%），B不符合题意；
C、组蛋白乙酰化是重要的表观遗传修饰，其水平直接影响染色体的松散程度：乙酰化水平高时，染色体结构松散，基因易被转录因子结合，基因表达水平升高；乙酰化水平低时，染色体紧缩，基因表达受抑制。因此，精子中组蛋白乙酰化水平的高低会直接影响基因的表达水平，C符合题意；
D、表观遗传修饰（如组蛋白乙酰化）可通过生殖细胞传递给子代，属于“表观遗传印记”。若肥胖小鼠精子的低水平组蛋白乙酰化被传递，可能导致子代相关代谢基因（如脂肪合成、能量消耗相关基因）表达异常，使其更容易出现肥胖表型，D不符合题意。
故答案为：C。
【分析】实验结果直接表明，肥胖会导致精子活动率下降、形态正常精子比例降低，且伴随组蛋白乙酰化水平降低，三者共同影响生育能力。背后机制涉及两层逻辑：一是肥胖通过内分泌（性激素）影响精子发育，二是通过表观遗传（组蛋白乙酰化）调控精子基因表达，且该表观修饰可跨代传递。组蛋白乙酰化的核心功能是调控基因表达。
12．【答案】D
【知识点】基因频率的概念与变化
【解析】【解答】A、小尾巴雄鱼基因型为ee，其存在依赖种群中e基因的传递。初始种群中Ee个体可产生e配子，且雌鱼与大尾巴雄鱼（E_，包括EE和Ee）交配时，Ee雄鱼会将e基因传给子代，子代中仍可能出现ee基因型的小尾巴雄鱼，因此多代后小尾巴雄鱼不会消失，A不符合题意；
B、总个体120+60+60=240条，总基因数480个。E基因数量=60×2（EE）+120×1（Ee）=240个，e基因数量=120×1（Ee）+60×2（ee）=240个，初始E、e基因频率均为50%。雌鱼只与大尾巴雄鱼（EE、Ee）交配，大尾巴雄鱼中EE占比=（60/2）÷[（60/2）+（120/2）]=1/3，Ee占比=2/3，产生的配子中E占1/3×1 + 2/3×1/2=2/3，e占2/3×1/2=1/3；雌鱼（EE、Ee、ee各30条）产生的配子中E占（30×2 + 30×1）÷（30×2×3）=1/2，e占1/2。子一代雌鱼的基因频率由雌雄配子随机结合决定，E基因频率=2/3×1/2 + 2/3×1/2×1/2 + 1/3×1/2×1/2=1/2，与初始一致，未降低，B不符合题意；
C、题干中仅明确“ee雄鱼为小尾巴”，未提及“小尾巴”存在“大小差异”的表型分化，且基因型ee决定的性状是稳定的，不会因繁殖代数增加而出现“尾巴更小”的变化，C不符合题意；
D、子一代的基因频率由雌雄配子结合决定，与性别无关。结合选项B的配子计算，雌雄配子结合后，子一代整体E基因频率=1/2，e基因频率=1/2，因此雌、雄鱼中e基因频率均为1/2，完全相等，D符合题意。
故答案为：D。
【分析】雄鱼尾形是“基因型→表型”的直接体现，且表型影响交配机会（小尾巴雄鱼无交配权），但Ee雄鱼可传递e基因，使ee雄鱼持续存在。基因频率的计算需基于配子类型及比例，非随机交配会影响基因型频率，但不改变整体基因频率（子一代E、e仍为50%），且基因频率在雌雄个体中一致。性状表型由基因型决定，若题干未提及表型的渐变差异，则不存在“性状随世代变化”的情况。
13．【答案】A
【知识点】酶促反应的原理；探究影响酶活性的因素
【解析】【解答】A、胰脂肪酶催化脂肪水解生成甘油和脂肪酸，因此单位时间内甘油的生成量可作为实验的检测指标，A符合题意；
B、酶的作用是降低化学反应的活化能，而非提供活化能，B不符合题意；
C、由图a可知，相同浓度下，多酚使胰脂肪酶相对活性下降更明显，即多酚的抑制效果强于药物Q，C不符合题意；
D、酶促水解速率越低，说明多酚对胰脂肪酶活性的抑制效果越强。由图b可知，乙组酶促水解速率最低，抑制效果最强，D不符合题意。
故答案为：A。
【分析】同无机催化剂相比，酶显著降低了化学反应的活化能。酶是活细胞产生的具有催化作用的有机物，绝大多数酶是蛋白质。酶的催化作用具有专一性、高效性，并对温度、pH等条件有严格的要求。
14．【答案】D
【知识点】环境因素参与调节植物的生命活动
【解析】【解答】A、Pr吸收红光转化为Pfr是光敏色素的构型变化，属于蛋白质空间结构的可逆调整，并未破坏肽键或导致蛋白质功能丧失，而蛋白质变性是不可逆的结构破坏（如高温、强酸导致），因此该过程不属于蛋白质变性，A不符合题意；
B、光敏色素的主要功能是感知光信号，调控植物生长发育（如茎的伸长、开花等），茎尖分生区细胞是生长和分化的关键部位，对光信号的需求更旺盛，因此phyB含量通常比叶表皮细胞（主要功能是保护）多，B不符合题意；
C、向光侧接受更多光照，红光充足，Pr会大量转化为Pfr，导致Pr/Pfr比值较低；背光侧光照较弱（类似遮阴），红光与远红光比值下降，Pfr更易逆转为Pr，Pr/Pfr比值较高。因此茎尖向光侧的Pr与Pfr比值比背光侧大，C不符合题意；
D、光敏色素（Pr/Pfr）的作用是感知光信号，进而调控IAA的分布或代谢，而非直接与IAA结合。向光性生长中，IAA在背光侧积累导致背光侧生长快，向光侧生长慢，不存在“Pr与IAA结合抑制生长”的机制，D符合题意。
故答案为：D。
【分析】光敏色素Pr与Pfr的转换具有可逆性，红光促进Pr→Pfr，远红光促进Pfr→Pr，光环境（如遮阴）通过改变光比例影响二者比值。光敏色素主要分布在生长旺盛的部位（如茎尖），通过感知光信号间接调控激素（如IAA），而非直接与激素结合。向光性的本质是IAA的不对称分布，而非光敏色素与IAA的直接相互作用。
15．【答案】C
【知识点】种群的特征；种群的数量变动及其原因；种群数量的变化曲线
【解析】【解答】A、分蘖期时单丛虫量和灯诱虫量均较低，分蘖期后单丛虫量和灯诱虫量开始上升，说明褐飞虱开始迁入，A不符合题意；
B、抽穗期灯诱虫量和单丛虫量显著增加，表明有大量褐飞虱迁入，B不符合题意；
C、抽穗期末期灯诱虫量下降，结合单丛虫量仍较高，推测是大量褐飞虱由成虫发育为其他龄级个体（不再被灯诱），而非大量个体死亡，C符合题意；
D、黄熟期灯诱虫量上升，同时单丛虫量降低，说明有大量褐飞虱（成虫）迁出，D不符合题意。
故答案为：C。
【分析】通过灯诱虫量（成虫）和单丛虫量（所有龄级）的变化，分析褐飞虱在水稻不同生育期的种群动态。灯诱虫量反映成虫数量，单丛虫量反映整体种群数量，两者结合可判断迁入、繁殖和迁出过程。
16．【答案】D
【知识点】基因、蛋白质、环境与性状的关系
【解析】【解答】A、表格数据无法体现“c、f基因直接控制合成雌激素”。从组别对比看，敲除c基因（如甲、丙、丁）或f基因（如乙、丙、戊）均会导致雌激素水平下降，但未明确基因是“直接合成雌激素”（可能通过调控其他酶或通路间接影响）；且甲组（敲除c，保留f）雌激素水平为“*”，乙组（敲除f，保留c）为“**”，两者雌激素量不相等，A不符合题意；
B、若s、f基因共同促进c基因功能，那么敲除s或f基因应显著降低c基因作用下的雌激素水平。但己组敲除s基因（保留c、f），雌激素水平为“****”（接近野生型），说明s基因敲除对雌激素影响极小，无法证明s基因能促进c基因；同时，乙组敲除f基因（保留c、s），雌激素水平仅“**”，与“f促进c基因”的逻辑矛盾，B不符合题意；
C、雌鱼性逆转的核心原因是雌激素水平过低（表格中所有性逆转的雄鱼，雌激素水平均低于野生型雌鱼）。若饲喂外源雌激素，可补充体内雌激素不足，理论上能恢复或维持雌性特征，阻止性逆转，C不符合题意；
D、乙和戊组的性别为雄性，此时的性染色体不一定还是XX，有可能是XY（敲除基因后导致X变为Y）。当两者性染色体为XY时，与己组鱼交配的后代性染色体为XX或XY，D符合题意。
故答案为：D。
【分析】基因对性状的控制方式有两种，一种是通过控制酶的合成来控制代谢过程，进而间接控制性状；另一种是直接控制蛋白质的结构来控制性状。
17．【答案】（1）听觉神经元；由负电位变为正电位；K+外流；单向
（2）频率为300节拍/分钟的声波；与对照组相比，只有频率为300节拍/分钟的声波提高了大鼠甜水偏好程度，而大鼠甜水偏好程度与其情绪愉悦程度正相关
（3）右；其海马区的多巴胺受体表达量减少，短期内无法恢复正常水平
【知识点】细胞膜内外在各种状态下的电位情况；神经冲动的产生和传导；脑的高级功能
【解析】【解答】（1）大鼠耳内听觉神经元受到声音刺激会产生兴奋。兴奋后恢复为静息电位的过程中，细胞膜外的电位变化是由负电位变为正电位，这主要是由K+外流导致的。兴奋在听觉反射弧中的传递方向是单向的。
（2）对大鼠情绪有正面影响的处理是频率为300节拍/分钟的声波，理由是与对照组相比，只有频率为300节拍/分钟的声波提高了大鼠甜水偏好程度，而大鼠甜水偏好程度与其情绪愉悦程度正相关。
（3） 推测声波频率对大鼠情绪的影响主要是通过右侧大脑海马区进行的。如对实验中有负面情绪的大鼠补充外源多巴胺至正常水平，短期内其甜水偏好不能恢复，原因是其海马区的多巴胺受体表达量减少，短期内无法恢复正常水平。
【分析】反射的完成以神经元上兴奋的传导为基础。神经元受到刺激会产生兴奋。兴奋在神经纤维上以神经冲动的形式传导，在神经元之间通过突触传递。兴奋以电流的形式传导到轴突末梢时，突触小泡释放递质（化学信号），递质作用于突触后膜，引起突触后膜产生膜电位（电信号），从而将信号传递到下一个神经元。
18．【答案】（1）为衣藻光合作用提供原料
（2）培养系统中原有的甘醇酸耗尽，大肠杆菌缺乏碳源
（3）光照强度；光照强度提高导致衣藻光反应增强，一方面使衣藻暗反应合成有机物增多，另一方面CO2/O2比值下降使衣藻产生更多甘醇酸，为大肠杆菌提供更多碳源
（4）可以持续利用CO2合成高价值生物产品，经济效益高
【知识点】光合作用的过程和意义；影响光合作用的环境因素；微生物的分离和培养；光合作用综合；环境变化对光合作用中物质含量的影响
【解析】【解答】（1）衣藻进行光合作用需要CO2作为原料，第①阶段通入3%CO2，就是为了给衣藻的光合作用提供充足的碳源，保障其光合作用的顺利进行。
（2）工程化大肠杆菌依赖衣藻产生的甘醇酸作为碳源合成生物产品。第②阶段大肠杆菌干重下降，是因为培养系统中原本的甘醇酸被消耗殆尽，大肠杆菌缺乏碳源，无法继续生长繁殖，导致干重降低。
（3）第③阶段，光照强度为120μE，后续提高光照强度到240μE后，衣藻干重明显增加，说明此阶段限制衣藻干重增加的主要因素是光照强度。
第④阶段，光照强度提升至240μE，一方面增强了衣藻的光反应，使暗反应合成的有机物增多，衣藻干重增加；另一方面，光照增强导致CO2/O2比值下降，衣藻光呼吸增强，产生更多甘醇酸，为大肠杆菌提供了充足的碳源，大肠杆菌得以生长繁殖，干重也随之增加。
（4）该系统中，衣藻通过光合作用持续固定CO2，同时大肠杆菌利用衣藻产生的甘醇酸合成高价值生物产品，实现了CO2的资源化利用，既能减少大气中的CO2含量助力碳中和，又能产生经济效益，这是其助力碳中和目标的主要优势。
【分析】光合作用的过程分为光反应和暗反应两个阶段。在光反应中，叶绿体通过类囊体膜上的色素系统从太阳光中捕获能量，裂解水，生成高能化合物ATP和NADPH，同时释放氧气；NADPH和ATP携带能量参与叶绿体基质中的碳反应（卡尔文循环），最终将二氧化碳合成为糖分子，并将能量储存到糖分子中。
19．【答案】（1）方向和速度；抵抗力
（2）豆科植物根部共生的根瘤菌能够进行生物固氮
（3）协调；充分利用环境资源、为消费者提供多样化的食物和栖息空间
（4）控制种群密度适度，保证有机物积累速率最快
【知识点】种间关系；当地自然群落中若干种生物的生态位；生态系统的稳定性；生态工程依据的生态学原理
【解析】【解答】（1）生态系统的演替有其自然方向和速度，石漠化治理通过人工造林等干预措施，改变了群落自然演替的方向（如从退化的石漠化景观向植被覆盖的稳定景观转变）和速度（加快了恢复进程），所以第一空是方向和速度。抵抗力稳定性指生态系统抵抗外界干扰并保持自身结构与功能稳定的能力，治理后植被恢复、土壤条件改善，生态系统抵抗干扰的能力增强，因此第二空是抵抗力。
（2）紫花苜蓿属于豆科植物，其根部与根瘤菌存在共生关系。根瘤菌能将空气中的氮气转化为植物可吸收利用的含氮化合物（如氨），增加土壤中的氮元素含量，而氮是植物生长必需的营养元素，能有效改善土壤肥力，这就是种植紫花苜蓿改善土壤肥力的核心原理。
（3）“因地制宜，本土优先”原则强调根据当地的气候、土壤、地形等环境条件，选择适合本地生长的乔木，使生物与环境相适应，遵循的是生态学中的协调原理。生态位重叠小的乔木，对阳光、水分、养分等环境资源的需求差异较大，能减少竞争，实现共存；同时，不同乔木能提供多样化的食物（如叶片、果实、花蜜等）和栖息空间（如树干、树冠、树下区域），为昆虫、鸟类、小型哺乳动物等消费者创造适宜的生存环境，还能更充分地利用环境中的资源，提高生态系统的资源利用效率。
（4）群落进入“藤灌阶段”时，藤本植物和灌木生长旺盛，若不加以控制，会过度争夺阳光、水分、养分等资源，导致群落内种群密度过大，部分个体因资源不足生长缓慢，有机物积累速率下降。适当采伐能降低藤本植物和灌木的种群密度，使剩余个体获得更充足的资源，保证整个群落的有机物积累速率维持在较快水平，为后续群落向更稳定的阶段（如乔木阶段）演替奠定基础。
【分析】（1）一个群落替代另一个群落的过程叫作群落演替。群落演替可以分为初生演替和次生演替。人类活动会影响演替的进程和方向。
（2）生态系统能够通过自我调节作用抵御和消除外来一定限度的干扰，因而具有保持或恢复自身结构和功能的相对稳定，并维持动态平衡的能力。人类活动会影响生态系统的稳定性。
（3）一个物种在群落中的地位和作用，包括所处的空间位置，占用资源的情况，以及与其他物种的关系等，称为这个物种的生态位。
（4）生态工程以生态系统的自组织、自我调节功能为基础，遵循着整体、协调、循环、自生等生态学基本原理。
20．【答案】（1）未统计子一代不同性别的表现比例，无法确定基因位置；红花：百花=3：1；红花：黄花：白花=9：3：4
（2）将亲本杂交，统计子代表现型及比例。若子代中红花：白花=1：1，则G基因抑制E基因的表达；若子代中红花：黄花=1：1，则基因抑制R基因的表达；E和g，e和G分别位于一对同源染色体的两条染色体上，R/r位于另一条染色体上，或R和g，r和G分别位于一堆同源染色体的两条染色体上，E/e位于另一对染色体上，或
【知识点】基因的自由组合规律的实质及应用；基因连锁和互换定律；基因在染色体上位置的判定方法；9:3:3:1和1:1:1:1的变式分析
【解析】【解答】（1）要确定R/r基因的位置，需结合性别差异分析表型比例。仅统计子一代整体表型比例（红花：黄花：白花=9：3：4），未区分性别，无法判断R/r是在常染色体还是X染色体上。
若R/r位于X染色体上，红花雌株基因型为E-XRX-、红花雄株为E-XRY，杂交后子一代雌株中，E-XRX-（红花）与e X-X-（白花）的比例为3：1；若R/r位于常染色体上，子一代雌株的表型比例与整体一致，即红花：黄花：白花=9：3：4。
（2）①将基因型为EERRgg（红花，无抑制）与eerrGg（白花，含显性抑制基因G）的亲本杂交，统计子代表型及比例。若G基因抑制E基因：子代基因型为EeRrGg（E被抑制，表现为白花）和EeRrgg（E正常表达，表现为红花），表型比例为红花：白花=1：1；若G基因抑制R基因：子代基因型为EeRrGg（R被抑制，表现为黄花）和EeRrgg（R正常表达，表现为红花），表型比例为红花：黄花=1：1。
②子一代表型及比例为红花：黄花：白花=3：9：4，说明存在连锁关系。基因位置：E与g连锁、e与G连锁（位于一对同源染色体上），R/r位于另一对同源染色体上；或R与g连锁、r与G连锁（位于一对同源染色体上），E/e位于另一对同源染色体上。G基因抑制E基因的表达（或G基因抑制R基因的表达，需结合连锁情况对应）。作图时，用“○”表示细胞，“‖”表示同源染色体，将连锁的基因标注在同一条染色体上即可，如图：
或。
【分析】基因的自由组合定律的实质是：位于非同源染色体上的非等位基因的分离或组合是互不干扰的；在减数分裂过程中，同源染色体上的等位基因彼此分离的同时，非同源染色体上的非等位基因自由组合。
21．【答案】（1）EcoR I、Not I
（2）便于含有质粒的大肠杆菌形成单菌落
（3）肿瘤细胞单独培养、不含CAR基因的T细胞（正常T细胞）与肿瘤细胞共同培养；肿瘤细胞的体积、肿瘤细胞死亡数和存活数等
（4）使用PD-1抗体或PD-L1抗体；编码PD-L1序列；终止子；溶解酶基因序列；多种酶基因序列
【知识点】基因工程的应用；基因工程的基本工具（详细）；基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】（1）构建含CAR基因的重组质粒时，需选择能切割CAR基因和质粒且不破坏目的基因、启动子、终止子的限制酶。从图中可见，EcoR I和Not I在CAR基因和质粒上均有酶切位点，且不会破坏关键序列，因此选用的限制酶组合是EcoR I、Not I。
（2）使用固体培养基培养经Ca2+处理的大肠杆菌，是因为固体培养基便于含有质粒的大肠杆菌形成单菌落，从而实现对含重组质粒大肠杆菌的分离和筛选。
（3）对照组需设置：肿瘤细胞单独培养、不含CAR基因的T细胞（正常T细胞）与肿瘤细胞共同培养，以排除肿瘤细胞自身凋亡及正常T细胞对实验的干扰。肿瘤细胞凋亡率的检测指标可包括：肿瘤细胞的体积、肿瘤细胞死亡数和存活数等。
（4）为阻断免疫抑制，除抑制PD1与PDL1的结合外，还可使用PD1抗体或PDL1抗体，通过抗体竞争结合PD1或PDL1，阻断免疫抑制通路。新重组质粒中，①是编码PDL1序列（用于产生PDL1相关元件），②是终止子（终止转录），③是溶解酶基因序列（降解肿瘤胞外基质），④是多种酶基因序列（与溶解酶协同提高降解效率）。
【分析】（1）基因工程是一种DNA操作技术，需要借助限制酶、DNA连接酶和载体等工具才能进行。它的基本操作程序包括：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定。
（2）PCR反应需要在一定的缓冲液中才能进行，需提供DNA模板，分别与两条模板链结合的2种引物，4种脱氧核苷酸和耐高温的DNA聚合酶；同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。
1 / 1【高考真题】广西2025年高考真题生物试卷
1．（2025·广西） 在合成、加工及运输促性腺激素的过程中，需要垂体细胞内各种结构的协调配合。下列有关该过程的说法错误的是（　　）
A．合成场所位于核糖体 B．加工需要高尔基体
C．运输依赖于细胞骨架 D．不需要线粒体参与
【答案】D
【知识点】其它细胞器及分离方法；细胞器之间的协调配合；细胞骨架
【解析】【解答】A、核糖体是蛋白质的合成场所。促性腺激素作为蛋白质，其氨基酸的脱水缩合反应必然在核糖体上进行，A不符合题意；
B、高尔基体在分泌蛋白的加工中承担关键角色。它会对来自内质网的蛋白质进行进一步的加工、分类和包装，然后形成囊泡将其运送到细胞膜，B不符合题意；
C、细胞骨架是由蛋白质纤维组成的网状结构，它能为细胞内的物质运输提供“轨道”。囊泡包裹着促性腺激素，会沿着细胞骨架移动，从而实现精准运输，C不符合题意；
D、分泌蛋白的合成（核糖体）、加工（内质网、高尔基体）和运输（囊泡移动）整个过程都需要消耗能量。而线粒体是细胞的“动力车间”，是有氧呼吸的主要场所，负责为这些生命活动提供能量（ATP）。因此，该过程必须依赖线粒体，D符合题意。
故答案为：D。
【分析】首先在核糖体合成多肽链，随后进入内质网进行初步加工（如折叠、加糖链），形成有一定空间结构的蛋白质；接着内质网出芽形成囊泡，将蛋白质运输到高尔基体，高尔基体对蛋白质进行进一步加工、分类和包装，再通过囊泡运向细胞膜，最终分泌到细胞外。整个过程中，细胞骨架为囊泡运输提供路径支撑，而线粒体通过有氧呼吸产生ATP，为所有耗能步骤（合成、加工、囊泡移动）提供能量，即分泌蛋白的合成运输是核糖体、内质网、高尔基体、线粒体及细胞骨架共同作用的结果，缺一不可。
2．（2025·广西） 利用微生物分解厨余垃圾可实现资源的再利用。下列说法错误的是（　　）
A．厨余垃圾分解过程产生的热量，会影响分解效率
B．对组成复杂的厨余垃圾再分类，可提高利用效率
C．厨余垃圾中的淀粉，可作为微生物的碳源和氮源
D．含盐量高的厨余垃圾，可选用耐高盐的微生物分解
【答案】C
【知识点】微生物发酵及其应用；生态系统的物质循环
【解析】【解答】A、微生物分解有机物的过程会释放热量，导致环境温度变化。而每种微生物都有适宜的温度范围，温度过高或过低都会抑制微生物活性，进而影响分解效率，A不符合题意；
B、厨余垃圾成分复杂，包含淀粉、脂肪、蛋白质、盐分等。对其分类后，可针对不同成分选择适配的微生物，避免无关成分干扰，让微生物更高效地分解目标物质，从而提高资源利用效率，B不符合题意；
C、淀粉的化学组成是碳、氢、氧，不含氮元素。微生物生长需要碳源（提供能量和构建有机物的碳骨架）和氮源（用于合成蛋白质、核酸等含氮物质），因此淀粉只能作为微生物的碳源，无法作为氮源，C符合题意；
D、高盐环境会导致微生物细胞失水，抑制多数微生物的生长。选用耐高盐的微生物（如某些极端环境中的细菌、真菌），其细胞结构和代谢机制能适应高盐条件，可正常分解含盐量高的厨余垃圾，D不符合题意。
故答案为：C。
【分析】微生物分解厨余垃圾的效率，受自身营养需求和外界环境因素双重影响。从营养需求看，微生物需要碳源、氮源、无机盐、水和生长因子，不同营养物质的元素组成决定了其功能，如含碳不含氮的有机物（淀粉、葡萄糖）只能作为碳源，含氮有机物（蛋白质、尿素）可同时提供碳源和氮源。从环境因素看，温度、盐分、垃圾成分复杂度都会影响微生物活性，例如温度需在微生物适宜范围，高盐环境需匹配耐高盐菌株，分类处理可优化微生物的分解条件。只有满足微生物的营养需求并控制适宜的环境，才能实现厨余垃圾的高效分解和资源再利用。
3．（2025·广西） 甘薯是重要的农作物，为了改良甘薯品质，科学家利用甘薯（2N=90）与其近缘野生种（2N=30）进行体细胞杂交，选育得到杂种植株M1。下列说法正确的是（　　）
A．需用几丁质酶和果胶酶来降解甘薯细胞壁
B．为防止原生质体失水，需使用低渗缓冲液
C．M1具有两个物种的所有性状，且染色体数目为2N=120
D．在培育M1时，配制的各种培养基常以MS培养基为基础
【答案】D
【知识点】植物体细胞杂交的过程及应用
【解析】【解答】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，降解时需使用纤维素酶和果胶酶。几丁质酶主要用于分解真菌、昆虫等生物细胞壁中的几丁质，不适用于甘薯这类植物细胞，A不符合题意；
B、原生质体失去了细胞壁的保护，若处于低渗缓冲液中，水分会大量进入细胞导致其吸水涨破。因此需使用等渗缓冲液，维持原生质体的正常形态，防止失水或吸水受损，B不符合题意；
C、杂种植株M1的染色体数目为双亲染色体数之和，即甘薯（2N=90）与野生种（2N=30）的染色体总数，应为4N=120（而非2N=120）。同时，由于基因的选择性表达或双亲基因间的相互作用，M1不会简单表现出两个物种的所有性状，只会表达部分关键性状，C不符合题意；
D、MS培养基含有植物生长所需的多种无机盐、维生素、氨基酸等营养成分，营养全面且比例适宜，是植物组织培养和体细胞杂交中配制各种培养基（如愈伤组织诱导培养基、分化培养基）的常用基础培养基，D符合题意。
故答案为：D。
【分析】植物体细胞杂交是将不同种植物的体细胞，在体外去除细胞壁获得原生质体后，通过人工诱导融合形成杂种细胞，再将杂种细胞培养成完整杂种植株的技术。该过程中，细胞壁去除依赖纤维素酶和果胶酶，原生质体培养需维持等渗环境以避免损伤；杂种植株的染色体数目为双亲体细胞染色体数之和，其性状并非双亲性状的简单叠加，而是受基因选择性表达和基因互作影响；MS培养基因营养全面，是支撑杂种细胞脱分化、再分化形成完整植株的重要基础，整个过程需严格控制培养基成分和培养条件，以确保杂种植株的成功培育。
4．（2025·广西） 线柱兰是华南地区草坪中常见的兰科植物，花朵小巧精美。兴趣小组分别采用逐个计数法和样方法，对校园草坪中的线柱兰种群数量进行调查。下列说法正确的是（　　）
A．样方数量会影响样方法的调查结果
B．这两种调查方法得到的结果通常相等
C．运用样方法调查时，样方内均需有线柱兰
D．若线柱兰个体数量较少，可缩小样方面积
【答案】A
【知识点】估算种群密度的方法
【解析】【解答】A、样方法通过选取若干样方统计个体数量，再推算种群密度。若样方数量过少，可能因偶然因素导致结果偏离真实值；样方数量充足时，结果更接近种群实际数量，因此样方数量会直接影响调查结果的准确性，A符合题意；
B、逐个计数法适用于个体数量少、分布范围小的种群，结果接近真实值；样方法适用于个体数量多、分布较广的种群，结果是通过样方推算的估算值。两种方法的适用场景和数据性质不同，得到的结果通常不相等，B不符合题意；
C、运用样方法时，样方需随机选取，部分样方内可能没有线柱兰（如线柱兰分布不均的区域）。统计时需将这些样方的个体数计为0，才能保证估算结果的准确性，并非要求所有样方内均有线柱兰，C不符合题意；
D、若线柱兰个体数量较少，应选择逐个计数法以获得准确结果；若仍用样方法，缩小样方面积会导致样方内包含的个体数更少，估算误差更大，此时应增大样方面积或增加样方数量，而非缩小样方面积，D不符合题意。
故答案为：A。
【分析】种群密度调查中，逐个计数法和样方法的选择取决于种群的个体数量和分布范围。逐个计数法针对数量少、分布集中的种群，结果准确；样方法针对数量多、分布较广的种群，结果为估算值，其准确性受样方大小、数量和随机性影响。样方法操作时，样方需随机选取，即使样方内无调查个体也需计入统计，个体数量过少时不宜使用样方法，否则易产生大的估算误差。选择合适的调查方法并遵循操作规范，是确保种群数量调查结果可靠的关键。
5．（2025·广西） 切取虎尾兰的叶插入土壤，置于适宜条件下培养。一段时间后，切口处会长出新植株。下列有关该过程的说法错误的是（　　）
A．体现了细胞的全能性 B．受到植物激素的调节
C．属于有性生殖的范畴 D．包含脱分化及再分化
【答案】C
【知识点】植物组织培养的过程；无性生殖和有性生殖
【解析】【解答】A、细胞全能性指已分化的细胞仍具有发育成完整生物体的潜能。虎尾兰的叶细胞是已分化细胞，通过叶插能发育成新植株，直接体现了细胞的全能性，A不符合题意；
B、该繁殖过程中，新植株的形成需要细胞分裂和分化，而植物激素（如生长素、细胞分裂素）会调节细胞的脱分化、再分化及器官形成，例如生长素促进根的分化，细胞分裂素促进芽的分化，整个过程受植物激素调控，B不符合题意；
C、有性生殖需经过雌雄配子结合形成受精卵，再由受精卵发育成新个体；而虎尾兰叶插是通过叶器官直接培育新植株，无配子结合过程，属于无性生殖中的营养生殖，不属于有性生殖范畴，C符合题意；
D、叶插过程中，叶片切口处的细胞首先会脱分化，从已分化状态恢复为未分化的愈伤组织；随后愈伤组织再分化，形成根、芽等器官，最终发育成新植株，因此包含脱分化及再分化两个关键阶段，D不符合题意。
故答案为：C。
【分析】植物营养生殖（如叶插、扦插、嫁接）的本质是利用植物器官的全能性，通过无性方式培育新个体。该过程中，细胞先脱分化形成愈伤组织，再经再分化形成完整植株，整个过程受植物激素调节，无需经过雌雄配子结合，属于无性生殖。有性生殖与无性生殖的核心区别在于是否有配子结合形成受精卵的过程，明确这一区别及植物细胞全能性的体现条件。
6．（2025·广西） 科学家利用携带猪源细胞表面蛋白基因（GT）的NDV病毒靶向感染人体内癌细胞，从而强烈激活免疫系统，起到了较好的肿瘤治疗效果。下列有关说法正确的是（　　）
A．培养体外实验使用的癌细胞时，通常需添加血清
B．感染NDV-GT的癌细胞会被巨噬细胞特异性吞噬
C．经NDV-GT方法治愈的患者，体内不存在能识别GT蛋白的免疫细胞
D．人体正常细胞若被感染并表达了GT，不会被免疫系统识别为“非己”成分
【答案】A
【知识点】癌症的预防与治疗；动物细胞培养技术；免疫系统的结构与功能；细胞免疫
【解析】【解答】A、体外培养癌细胞时，基础培养基虽含糖类、氨基酸等营养，但血清中含有细胞生长所需的未知生长因子、激素等成分，能更好满足癌细胞增殖需求，因此通常需添加血清，A符合题意；
B、巨噬细胞的吞噬作用不具有特异性，它能识别并吞噬衰老、损伤或被病原体感染的细胞，但不会针对“感染NDV-GT的癌细胞”这一特定目标进行特异性吞噬；具有特异性识别和杀伤作用的是效应T细胞等免疫细胞，B不符合题意；
C、经NDV-GT方法治疗后，患者体内会产生针对GT蛋白的免疫记忆细胞（如记忆T细胞、记忆B细胞）。这些细胞能长期留存，若后续再次出现GT蛋白（如癌细胞再次表达），可快速启动免疫反应，因此体内存在能识别GT蛋白的免疫细胞，C不符合题意；
D、GT蛋白是猪源细胞表面蛋白，属于人体自身不存在的“外源蛋白”。即使正常细胞被感染并表达GT，免疫系统仍会将其识别为“非己”成分，进而启动免疫反应清除该细胞，D不符合题意。
故答案为：A。
【分析】病毒靶向肿瘤治疗的核心是利用病毒携带外源基因（如GT）感染癌细胞，使癌细胞表达外源蛋白，从而激活免疫系统对癌细胞的特异性攻击。在相关技术中，体外培养癌细胞需依赖血清提供生长辅助；免疫反应中，巨噬细胞负责非特异性吞噬，特异性杀伤依赖效应T细胞，且免疫记忆会使体内留存识别外源蛋白的免疫细胞；同时，外源蛋白（如猪源GT）无论在癌细胞还是正常细胞表达，都会被免疫系统识别为“非己”，这是启动免疫攻击的关键前提。
7．（2025·广西） 血钙水平受甲状旁腺激素（PTH）和降钙素（CT）共同调节，其机制见图。下列说法错误的是（　　）
A．高钙饮食可以适度缓解老年骨质疏松
B．甲状旁腺损伤严重会表现出肌无力病征
C．对血钙水平的调节，PTH和CT相互拮抗
D．抗维生素D佝偻病患者体内的PTH水平较高
【答案】B
【知识点】无机盐的主要存在形式和作用；动物激素的调节
【解析】【解答】A、高钙饮食可增加血钙来源，适度补充钙质，有助于缓解老年骨质疏松，A不符合题意；
B、甲状旁腺损伤严重会导致PTH分泌不足，血钙降低，神经肌肉兴奋性升高，会表现出抽搐等症状，而非肌无力，肌无力通常与血钙过高有关，B符合题意；
C、PTH升高血钙，CT降低血钙，二者作用相反，相互拮抗，共同调节血钙水平，C不符合题意；
D、抗维生素D佝偻病患者钙吸收障碍，血钙降低，会刺激PTH分泌增加，因此体内PTH水平较高，D不符合题意。
故答案为：B。
【分析】血钙水平受甲状旁腺激素（PTH）和降钙素（CT）的拮抗调节。PTH通过促进骨钙释放、减少肾脏钙排出升高血钙；CT通过促进骨钙沉积、增加肾脏钙排出降低血钙。血钙异常会引发相应的神经肌肉症状，如血钙过低导致抽搐，血钙过高导致肌无力。
8．（2025·广西） 研究发现，小鼠达到生殖年龄后，初级卵母细胞的细胞质基质内Ca2+浓度快速升高，激活PDE3A酶催化cAMP水解，最终促使停滞的初级卵母细胞恢复减数分裂。利用不同PDE3A基因型小鼠进行杂交，杂交情况及结果见表。下列分析正确的是（　　）
组别 1 2 3 4 5 6
♂ +/+ +/+ +/+ -/- -/- -/-
♀ +/+ +/- -/- +/+ +/- -/-
平均窝产仔数（只） 7.5 7.4 0 7.6 7.4 0
注：“+/+”表示野生型；“+/-”表示杂合突变：“-/-”表示纯合突变。
A．提高cAMP水平后，初级卵母细胞成熟速度加快
B．初级卵母细胞恢复减数分裂时，染色体开始复制
C．杂合突变个体相互杂交后，平均窝产仔数约为7.4只
D．给第3组的母鼠注射PDE3A酶激活剂，可提高其窝产仔数
【答案】C
【知识点】减数分裂概述与基本过程；减数第一、二次分裂过程中染色体的行为变化
【解析】【解答】A、题干明确“PDE3A酶催化cAMP水解→促使初级卵母细胞恢复减数分裂”，即cAMP需被水解（水平降低）才能启动减数分裂。若提高cAMP水平，会抑制该过程，导致初级卵母细胞成熟速度减慢，而非加快，A不符合题意；
B、初级卵母细胞的染色体复制发生在减数分裂前的间期，而非“恢复减数分裂时”。减数分裂恢复的标志是细胞从停滞状态进入减数第一次分裂，此时染色体已完成复制，每条染色体含两条姐妹染色单体，B不符合题意；
C、杂合突变个体（+/-）的基因型中，仍有一个正常的PDE3A基因可表达功能酶。表格中组别2（♂+/+×♀+/-）和组别5（♂-/-×♀+/-）的平均窝产仔数均约为7.4只，说明杂合突变个体的生殖功能正常。因此，杂合突变个体（♂+/-×♀+/-）相互杂交时，平均窝产仔数仍约为7.4只，C符合题意；
D、第3组母鼠基因型为-/-，即无法自身合成PDE3A酶。PDE3A酶激活剂的作用是激活已存在的PDE3A酶，而该母鼠体内无功能性PDE3A酶，注射激活剂无法发挥作用，因此不能提高其窝产仔数，D不符合题意。
故答案为：C。
【分析】进行有性生殖的生物，在由原始生殖细胞形成成熟生殖细胞的过程中，染色体只复制一次，而细胞经减数分裂连续分裂两次，最终使成熟生殖细胞中的染色体数目比原始生殖细胞的减少一半。在减数分裂过程中，同源染色体发生分离，非同源染色体自由组合，使分配到子细胞中的染色体组合类型出现多样性。不仅如此，在减数分裂过程中同源染色体联会时，非姐妹染色单体间还常常发生互换，进一步增加了生殖细胞遗传的多样性。
9．（2025·广西） 某植物根细胞吸收存在两种跨膜运输方式，见图。下列有关分析正确的是（　　）
A．低钾环境时，K+运输速率受H+运输速率限制
B．运输H+时，载体蛋白空间结构不会改变
C．呼吸抑制剂会抑制K+的这两种运输方式
D．K+是一种信号分子，能诱发根细胞产生兴奋
【答案】A
【知识点】三种跨膜运输方式的比较；被动运输；主动运输
【解析】【解答】A、低钾环境时，K+与H+通过同一载体蛋白协同运输，H+运输为K+运输提供动力，因此K+运输速率受H+运输速率限制，A符合题意；
B、运输H+的载体蛋白在转运过程中空间结构会发生改变，B不符合题意；
C、图中K+的一种运输方式是借助H+浓度差的协同运输（间接消耗ATP），另一种是高浓度K+区域的运输（推测为协助扩散，不消耗ATP）。呼吸抑制剂会抑制ATP产生，从而影响H+的主动运输（进而影响K+的协同运输），但不影响协助扩散方式的K+运输，C不符合题意；
D、K+是植物细胞的重要矿质元素，不是信号分子，也不会诱发根细胞产生兴奋，兴奋是动物细胞的电信号反应，D不符合题意。
故答案为：A。
【分析】植物根细胞吸收K+存在两种跨膜运输方式，一是与H+协同的主动运输（依赖H+的浓度差，间接消耗ATP），二是协助扩散（顺浓度梯度，不消耗ATP）。载体蛋白在转运离子时空间结构会改变，主动运输受呼吸作用影响，而协助扩散不受其直接影响。
10．（2025·广西） 某大型淡水湖入湖河口形成了碟形湖。丰水期碟形湖区与主湖区湖水相连，枯水期碟形湖与主湖水流隔断，见图。下列说法错误的是（　　）
A．枯水期时碟形湖与主湖之间存在物质交换
B．丰水期时碟形湖区和主湖区藻类密度通常相等
C．枯水期时碟形湖和主湖的能量金字塔均为正金字塔形
D．丰水期时相邻两个营养级之间的能量传递效率为10%~20%
【答案】B
【知识点】生态系统的能量流动；生态系统的物质循环
【解析】【解答】A、枯水期虽然碟形湖与主湖水流隔断，但可能通过其他途径（如生物迁移等）存在物质交换，A不符合题意；
B、丰水期碟形湖区和主湖区的环境（如光照、营养物质等）可能存在差异，藻类密度通常不相等，B符合题意；
C、能量金字塔通常都是正金字塔形，即营养级越高，能量越少，枯水期时碟形湖和主湖的能量金字塔均为正金字塔形，C不符合题意；
D、相邻两个营养级之间的能量传递效率一般为10%~20%，丰水期时也遵循这一规律，D不符合题意。
故答案为：B。
【分析】丰水期和枯水期的水文连接情况会影响湖区的物质交换、生物分布及能量传递。能量金字塔的形状由能量流动的单向性和逐级递减性决定，相邻营养级能量传递效率相对稳定。
11．（2025·广西） 科研人员对肥胖组与正常组小鼠的精子进行相关检测，结果见表。下列说法错误的是（　　）
表
检测指标 正常组 肥胖组
精子活动率（%） 45.67+5.49 21.37+3.70*
形态正常的精子（%） 83.38+2.87 61.32+2.46*
精子中组蛋白乙酰化水平 1.03±0.51 0.46±0.18*
A．肥胖导致精子活动率下降，进而使生育潜能降低
B．肥胖可能影响性激素的产生，进而影响精子的正常发育
C．精子中组蛋白乙酰化水平的高低，不会影响基因的表达水平
D．低水平的组蛋白乙酰化表观修饰可传递给子代，并使其容易肥胖
【答案】C
【知识点】表观遗传
【解析】【解答】A、表格数据显示，肥胖组精子活动率（21.37%）显著低于正常组（45.67%）。精子活动率是评估生育能力的重要指标，活动率下降会直接降低精子与卵子结合的概率，进而导致生育潜能降低，A不符合题意；
B、性激素（如睾酮）对精子的发生和成熟至关重要。肥胖可能通过影响内分泌系统（如胰岛素抵抗、脂肪因子紊乱）干扰性激素的合成与分泌，而性激素异常会进一步影响精子的正常发育，导致形态正常精子比例下降（肥胖组61.32% vs 正常组83.38%），B不符合题意；
C、组蛋白乙酰化是重要的表观遗传修饰，其水平直接影响染色体的松散程度：乙酰化水平高时，染色体结构松散，基因易被转录因子结合，基因表达水平升高；乙酰化水平低时，染色体紧缩，基因表达受抑制。因此，精子中组蛋白乙酰化水平的高低会直接影响基因的表达水平，C符合题意；
D、表观遗传修饰（如组蛋白乙酰化）可通过生殖细胞传递给子代，属于“表观遗传印记”。若肥胖小鼠精子的低水平组蛋白乙酰化被传递，可能导致子代相关代谢基因（如脂肪合成、能量消耗相关基因）表达异常，使其更容易出现肥胖表型，D不符合题意。
故答案为：C。
【分析】实验结果直接表明，肥胖会导致精子活动率下降、形态正常精子比例降低，且伴随组蛋白乙酰化水平降低，三者共同影响生育能力。背后机制涉及两层逻辑：一是肥胖通过内分泌（性激素）影响精子发育，二是通过表观遗传（组蛋白乙酰化）调控精子基因表达，且该表观修饰可跨代传递。组蛋白乙酰化的核心功能是调控基因表达。
12．（2025·广西） 某种鱼的尾巴性状受常染色体上等位基因E/e控制，见表。已知雌鱼通常只与大尾巴雄鱼交配。现有一个EE60条、Ee120条和ee60条（每种基因型的雌、雄鱼数量相等）的种群，下列有关该种群自然繁殖后的分析，正确的是（　　）
表
基因组成 E_ ee
雄鱼尾巴性状 大尾巴 小尾巴
雌鱼尾巴性状 所有基因型个体的尾巴大小一致
A．多代后，小尾巴雄鱼将消失
B．子一代雌鱼中E基因频率降低
C．多代后，小尾巴雄鱼的尾巴更小
D．子一代雌、雄鱼中e基因频率相等
【答案】D
【知识点】基因频率的概念与变化
【解析】【解答】A、小尾巴雄鱼基因型为ee，其存在依赖种群中e基因的传递。初始种群中Ee个体可产生e配子，且雌鱼与大尾巴雄鱼（E_，包括EE和Ee）交配时，Ee雄鱼会将e基因传给子代，子代中仍可能出现ee基因型的小尾巴雄鱼，因此多代后小尾巴雄鱼不会消失，A不符合题意；
B、总个体120+60+60=240条，总基因数480个。E基因数量=60×2（EE）+120×1（Ee）=240个，e基因数量=120×1（Ee）+60×2（ee）=240个，初始E、e基因频率均为50%。雌鱼只与大尾巴雄鱼（EE、Ee）交配，大尾巴雄鱼中EE占比=（60/2）÷[（60/2）+（120/2）]=1/3，Ee占比=2/3，产生的配子中E占1/3×1 + 2/3×1/2=2/3，e占2/3×1/2=1/3；雌鱼（EE、Ee、ee各30条）产生的配子中E占（30×2 + 30×1）÷（30×2×3）=1/2，e占1/2。子一代雌鱼的基因频率由雌雄配子随机结合决定，E基因频率=2/3×1/2 + 2/3×1/2×1/2 + 1/3×1/2×1/2=1/2，与初始一致，未降低，B不符合题意；
C、题干中仅明确“ee雄鱼为小尾巴”，未提及“小尾巴”存在“大小差异”的表型分化，且基因型ee决定的性状是稳定的，不会因繁殖代数增加而出现“尾巴更小”的变化，C不符合题意；
D、子一代的基因频率由雌雄配子结合决定，与性别无关。结合选项B的配子计算，雌雄配子结合后，子一代整体E基因频率=1/2，e基因频率=1/2，因此雌、雄鱼中e基因频率均为1/2，完全相等，D符合题意。
故答案为：D。
【分析】雄鱼尾形是“基因型→表型”的直接体现，且表型影响交配机会（小尾巴雄鱼无交配权），但Ee雄鱼可传递e基因，使ee雄鱼持续存在。基因频率的计算需基于配子类型及比例，非随机交配会影响基因型频率，但不改变整体基因频率（子一代E、e仍为50%），且基因频率在雌雄个体中一致。性状表型由基因型决定，若题干未提及表型的渐变差异，则不存在“性状随世代变化”的情况。
13．（2025·广西） 研究人员探究了不同浓度的油菜蜂花粉多酚（以下简称“多酚”）和药物Q对胰脂肪酶活性的影响（图a）；以及不同pH处理多酚后，多酚对该酶的酶促水解速率的影响（图b）。下列说法正确的是（　　）
A．单位时间内甘油的生成量，可作为以上实验的检测指标
B．在催化脂肪水解过程中，胰脂肪酶提供了大量的活化能
C．相同浓度下，药物Q对胰脂肪酶活性的抑制效果强于多酚
D．比较不同pH处理后的多酚，乙组对胰脂肪酶活性的抑制效果最弱
【答案】A
【知识点】酶促反应的原理；探究影响酶活性的因素
【解析】【解答】A、胰脂肪酶催化脂肪水解生成甘油和脂肪酸，因此单位时间内甘油的生成量可作为实验的检测指标，A符合题意；
B、酶的作用是降低化学反应的活化能，而非提供活化能，B不符合题意；
C、由图a可知，相同浓度下，多酚使胰脂肪酶相对活性下降更明显，即多酚的抑制效果强于药物Q，C不符合题意；
D、酶促水解速率越低，说明多酚对胰脂肪酶活性的抑制效果越强。由图b可知，乙组酶促水解速率最低，抑制效果最强，D不符合题意。
故答案为：A。
【分析】同无机催化剂相比，酶显著降低了化学反应的活化能。酶是活细胞产生的具有催化作用的有机物，绝大多数酶是蛋白质。酶的催化作用具有专一性、高效性，并对温度、pH等条件有严格的要求。
14．（2025·广西） 植物光敏色素phyB通常有Pr和Pfr两种构型，Pr吸收红光后转化为Pfr，但Pfr吸收远红光后又可逆转为Pr。遮阴会使环境中红光与远红光比值下降。下列分析错误的是（　　）
A．Pr吸收红光转化为Pfr不属于蛋白质变性
B．茎尖分生区细胞phyB含量比叶表皮细胞多
C．茎尖向光侧细胞的Pr与Pfr比值比背光侧大
D．茎尖向光侧细胞的Pr会与IAA结合抑制生长
【答案】D
【知识点】环境因素参与调节植物的生命活动
【解析】【解答】A、Pr吸收红光转化为Pfr是光敏色素的构型变化，属于蛋白质空间结构的可逆调整，并未破坏肽键或导致蛋白质功能丧失，而蛋白质变性是不可逆的结构破坏（如高温、强酸导致），因此该过程不属于蛋白质变性，A不符合题意；
B、光敏色素的主要功能是感知光信号，调控植物生长发育（如茎的伸长、开花等），茎尖分生区细胞是生长和分化的关键部位，对光信号的需求更旺盛，因此phyB含量通常比叶表皮细胞（主要功能是保护）多，B不符合题意；
C、向光侧接受更多光照，红光充足，Pr会大量转化为Pfr，导致Pr/Pfr比值较低；背光侧光照较弱（类似遮阴），红光与远红光比值下降，Pfr更易逆转为Pr，Pr/Pfr比值较高。因此茎尖向光侧的Pr与Pfr比值比背光侧大，C不符合题意；
D、光敏色素（Pr/Pfr）的作用是感知光信号，进而调控IAA的分布或代谢，而非直接与IAA结合。向光性生长中，IAA在背光侧积累导致背光侧生长快，向光侧生长慢，不存在“Pr与IAA结合抑制生长”的机制，D符合题意。
故答案为：D。
【分析】光敏色素Pr与Pfr的转换具有可逆性，红光促进Pr→Pfr，远红光促进Pfr→Pr，光环境（如遮阴）通过改变光比例影响二者比值。光敏色素主要分布在生长旺盛的部位（如茎尖），通过感知光信号间接调控激素（如IAA），而非直接与激素结合。向光性的本质是IAA的不对称分布，而非光敏色素与IAA的直接相互作用。
15．（2025·广西） 褐飞虱是一种迁飞性害虫，每年春季自南向北逐步迁入水稻种植区，期间繁殖数代。某地采用灯诱监测褐飞虱成虫数量的动态变化，同时通过田间调查测定水稻单丛虫量（含所有龄级个体），结果见图。下列说法错误的是（　　）
A．分蘖期后，褐飞虱开始迁入
B．抽穗期有大量褐飞虱迁入
C．抽穗期末期灯诱虫量下降是因为大量个体死亡
D．黄熟期灯诱虫量上升是因为有大量褐飞虱迁出
【答案】C
【知识点】种群的特征；种群的数量变动及其原因；种群数量的变化曲线
【解析】【解答】A、分蘖期时单丛虫量和灯诱虫量均较低，分蘖期后单丛虫量和灯诱虫量开始上升，说明褐飞虱开始迁入，A不符合题意；
B、抽穗期灯诱虫量和单丛虫量显著增加，表明有大量褐飞虱迁入，B不符合题意；
C、抽穗期末期灯诱虫量下降，结合单丛虫量仍较高，推测是大量褐飞虱由成虫发育为其他龄级个体（不再被灯诱），而非大量个体死亡，C符合题意；
D、黄熟期灯诱虫量上升，同时单丛虫量降低，说明有大量褐飞虱（成虫）迁出，D不符合题意。
故答案为：C。
【分析】通过灯诱虫量（成虫）和单丛虫量（所有龄级）的变化，分析褐飞虱在水稻不同生育期的种群动态。灯诱虫量反映成虫数量，单丛虫量反映整体种群数量，两者结合可判断迁入、繁殖和迁出过程。
16．（2025·广西） 某种二倍体鱼（XY型）会发生性逆转现象，研究人员运用基因编辑技术对雌鱼的雌激素合成主要基因进行敲除实验，并得到雌鱼性逆转的有关结果，见表。下列有关分析正确的是（　　）
表
组别 f基因 c基因 s基因 雌激素水平 鱼的性别
野生型 + + + ***** ♀
甲 + - + * ♂
乙 - + - ** ♂
丙 - - + * ♂
丁 + - - * ♂
戊 - + + ** ♂
己 + + - **** ♀
注：“+”表示不敲除基因；“-”表示敲除基因；“*****”表示野生型雌鱼正常的雌激素水平。
A．c、f基因都能直接控制合成少量且相等的雌激素
B．s、f基因的表达产物，共同促进c基因控制雌激素合成
C．饲喂外源雌激素，不能阻止甲、丙、丁三组雌鱼性逆转
D．乙、戊组鱼分别与己组鱼交配，后代性染色体组成不全是XX
【答案】D
【知识点】基因、蛋白质、环境与性状的关系
【解析】【解答】A、表格数据无法体现“c、f基因直接控制合成雌激素”。从组别对比看，敲除c基因（如甲、丙、丁）或f基因（如乙、丙、戊）均会导致雌激素水平下降，但未明确基因是“直接合成雌激素”（可能通过调控其他酶或通路间接影响）；且甲组（敲除c，保留f）雌激素水平为“*”，乙组（敲除f，保留c）为“**”，两者雌激素量不相等，A不符合题意；
B、若s、f基因共同促进c基因功能，那么敲除s或f基因应显著降低c基因作用下的雌激素水平。但己组敲除s基因（保留c、f），雌激素水平为“****”（接近野生型），说明s基因敲除对雌激素影响极小，无法证明s基因能促进c基因；同时，乙组敲除f基因（保留c、s），雌激素水平仅“**”，与“f促进c基因”的逻辑矛盾，B不符合题意；
C、雌鱼性逆转的核心原因是雌激素水平过低（表格中所有性逆转的雄鱼，雌激素水平均低于野生型雌鱼）。若饲喂外源雌激素，可补充体内雌激素不足，理论上能恢复或维持雌性特征，阻止性逆转，C不符合题意；
D、乙和戊组的性别为雄性，此时的性染色体不一定还是XX，有可能是XY（敲除基因后导致X变为Y）。当两者性染色体为XY时，与己组鱼交配的后代性染色体为XX或XY，D符合题意。
故答案为：D。
【分析】基因对性状的控制方式有两种，一种是通过控制酶的合成来控制代谢过程，进而间接控制性状；另一种是直接控制蛋白质的结构来控制性状。
17．（2025·广西） 为研究声波频率对大鼠情绪的影响，科学家进行了相关实验，结果见图。回答下列问题：
注：大鼠甜水偏好程度与其情绪愉悦程度正相关。
（1）大鼠耳内　 　受到声音刺激会产生兴奋。兴奋后恢复为静息电位的过程中，细胞膜外的电位变化是　 　，这主要是由　 　导致的。兴奋在听觉反射弧中的传递方向是　 　（选填“单向”或“双向”）的。
（2）实验结果表明，对大鼠情绪有正面影响的处理是　 　，理由是　 　。
（3）推测声波频率对大鼠情绪的影响主要是通过　 　侧大脑海马区进行的。如对实验中有负面情绪的大鼠补充外源多巴胺至正常水平，短期内其甜水偏好不能恢复，原因是　 　。
【答案】（1）听觉神经元；由负电位变为正电位；K+外流；单向
（2）频率为300节拍/分钟的声波；与对照组相比，只有频率为300节拍/分钟的声波提高了大鼠甜水偏好程度，而大鼠甜水偏好程度与其情绪愉悦程度正相关
（3）右；其海马区的多巴胺受体表达量减少，短期内无法恢复正常水平
【知识点】细胞膜内外在各种状态下的电位情况；神经冲动的产生和传导；脑的高级功能
【解析】【解答】（1）大鼠耳内听觉神经元受到声音刺激会产生兴奋。兴奋后恢复为静息电位的过程中，细胞膜外的电位变化是由负电位变为正电位，这主要是由K+外流导致的。兴奋在听觉反射弧中的传递方向是单向的。
（2）对大鼠情绪有正面影响的处理是频率为300节拍/分钟的声波，理由是与对照组相比，只有频率为300节拍/分钟的声波提高了大鼠甜水偏好程度，而大鼠甜水偏好程度与其情绪愉悦程度正相关。
（3） 推测声波频率对大鼠情绪的影响主要是通过右侧大脑海马区进行的。如对实验中有负面情绪的大鼠补充外源多巴胺至正常水平，短期内其甜水偏好不能恢复，原因是其海马区的多巴胺受体表达量减少，短期内无法恢复正常水平。
【分析】反射的完成以神经元上兴奋的传导为基础。神经元受到刺激会产生兴奋。兴奋在神经纤维上以神经冲动的形式传导，在神经元之间通过突触传递。兴奋以电流的形式传导到轴突末梢时，突触小泡释放递质（化学信号），递质作用于突触后膜，引起突触后膜产生膜电位（电信号），从而将信号传递到下一个神经元。
18．（2025·广西） 科学家利用衣藻和大肠杆菌设计了一种共培养系统。该系统中，工程化衣藻在光合作用时，会通过光呼吸竞争性消耗C5产生甘醇酸（光呼吸强度受CO2/O2比值影响）；工程化大肠杆菌利用甘醇酸合成高价值生物产品。实验过程及结果见图。回答下列问题：
注：μE为光照强度单位μmol.m-2.s-1
（1）第①阶段向培养液中通入3%CO2，目的是　 　。
（2）第②阶段大肠杆菌干重下降的主要原因是　 　。
（3）据图分析，限制第③阶段衣藻干重增加的主要因素是　 　；第④阶段衣藻和大肠杆菌的干重均增加，原因是　 　。
（4）该系统对助力实现碳中和目标的优势是　 　。
【答案】（1）为衣藻光合作用提供原料
（2）培养系统中原有的甘醇酸耗尽，大肠杆菌缺乏碳源
（3）光照强度；光照强度提高导致衣藻光反应增强，一方面使衣藻暗反应合成有机物增多，另一方面CO2/O2比值下降使衣藻产生更多甘醇酸，为大肠杆菌提供更多碳源
（4）可以持续利用CO2合成高价值生物产品，经济效益高
【知识点】光合作用的过程和意义；影响光合作用的环境因素；微生物的分离和培养；光合作用综合；环境变化对光合作用中物质含量的影响
【解析】【解答】（1）衣藻进行光合作用需要CO2作为原料，第①阶段通入3%CO2，就是为了给衣藻的光合作用提供充足的碳源，保障其光合作用的顺利进行。
（2）工程化大肠杆菌依赖衣藻产生的甘醇酸作为碳源合成生物产品。第②阶段大肠杆菌干重下降，是因为培养系统中原本的甘醇酸被消耗殆尽，大肠杆菌缺乏碳源，无法继续生长繁殖，导致干重降低。
（3）第③阶段，光照强度为120μE，后续提高光照强度到240μE后，衣藻干重明显增加，说明此阶段限制衣藻干重增加的主要因素是光照强度。
第④阶段，光照强度提升至240μE，一方面增强了衣藻的光反应，使暗反应合成的有机物增多，衣藻干重增加；另一方面，光照增强导致CO2/O2比值下降，衣藻光呼吸增强，产生更多甘醇酸，为大肠杆菌提供了充足的碳源，大肠杆菌得以生长繁殖，干重也随之增加。
（4）该系统中，衣藻通过光合作用持续固定CO2，同时大肠杆菌利用衣藻产生的甘醇酸合成高价值生物产品，实现了CO2的资源化利用，既能减少大气中的CO2含量助力碳中和，又能产生经济效益，这是其助力碳中和目标的主要优势。
【分析】光合作用的过程分为光反应和暗反应两个阶段。在光反应中，叶绿体通过类囊体膜上的色素系统从太阳光中捕获能量，裂解水，生成高能化合物ATP和NADPH，同时释放氧气；NADPH和ATP携带能量参与叶绿体基质中的碳反应（卡尔文循环），最终将二氧化碳合成为糖分子，并将能量储存到糖分子中。
19．（2025·广西） 岩溶石漠化指脆弱的喀斯特生态系统在不合理的人为干扰下，植被退化导致土壤流失，岩石大面积裸露，呈现类似于荒漠化景观的现象。近年来，我国通过人工造林等生态工程，在石漠化治理方面取得了显著成效。回答下列问题：
（1）石漠化治理是通过人为干预改变演替的　 　，提高生态系统的　 　稳定性。
（2）石漠化治理初期，部分地区会通过种植豆科小灌木紫花苜蓿来改善土壤肥力，其原理是　 　。
（3）在石漠化治理时，还会基于“因地制宜，本土优先”的原则选择一些乔木，遵循的生态学原理是　 　。选择的这些乔木，生态位重叠较小，既避免竞争排斥，实现共存，又利于　 　（至少写出2方面）。
（4）治理过程中，群落常常会进入相对稳定的“藤灌阶段”，此时需要适当采伐群落中的藤本植物和灌木，目的是　 　。
【答案】（1）方向和速度；抵抗力
（2）豆科植物根部共生的根瘤菌能够进行生物固氮
（3）协调；充分利用环境资源、为消费者提供多样化的食物和栖息空间
（4）控制种群密度适度，保证有机物积累速率最快
【知识点】种间关系；当地自然群落中若干种生物的生态位；生态系统的稳定性；生态工程依据的生态学原理
【解析】【解答】（1）生态系统的演替有其自然方向和速度，石漠化治理通过人工造林等干预措施，改变了群落自然演替的方向（如从退化的石漠化景观向植被覆盖的稳定景观转变）和速度（加快了恢复进程），所以第一空是方向和速度。抵抗力稳定性指生态系统抵抗外界干扰并保持自身结构与功能稳定的能力，治理后植被恢复、土壤条件改善，生态系统抵抗干扰的能力增强，因此第二空是抵抗力。
（2）紫花苜蓿属于豆科植物，其根部与根瘤菌存在共生关系。根瘤菌能将空气中的氮气转化为植物可吸收利用的含氮化合物（如氨），增加土壤中的氮元素含量，而氮是植物生长必需的营养元素，能有效改善土壤肥力，这就是种植紫花苜蓿改善土壤肥力的核心原理。
（3）“因地制宜，本土优先”原则强调根据当地的气候、土壤、地形等环境条件，选择适合本地生长的乔木，使生物与环境相适应，遵循的是生态学中的协调原理。生态位重叠小的乔木，对阳光、水分、养分等环境资源的需求差异较大，能减少竞争，实现共存；同时，不同乔木能提供多样化的食物（如叶片、果实、花蜜等）和栖息空间（如树干、树冠、树下区域），为昆虫、鸟类、小型哺乳动物等消费者创造适宜的生存环境，还能更充分地利用环境中的资源，提高生态系统的资源利用效率。
（4）群落进入“藤灌阶段”时，藤本植物和灌木生长旺盛，若不加以控制，会过度争夺阳光、水分、养分等资源，导致群落内种群密度过大，部分个体因资源不足生长缓慢，有机物积累速率下降。适当采伐能降低藤本植物和灌木的种群密度，使剩余个体获得更充足的资源，保证整个群落的有机物积累速率维持在较快水平，为后续群落向更稳定的阶段（如乔木阶段）演替奠定基础。
【分析】（1）一个群落替代另一个群落的过程叫作群落演替。群落演替可以分为初生演替和次生演替。人类活动会影响演替的进程和方向。
（2）生态系统能够通过自我调节作用抵御和消除外来一定限度的干扰，因而具有保持或恢复自身结构和功能的相对稳定，并维持动态平衡的能力。人类活动会影响生态系统的稳定性。
（3）一个物种在群落中的地位和作用，包括所处的空间位置，占用资源的情况，以及与其他物种的关系等，称为这个物种的生态位。
（4）生态工程以生态系统的自组织、自我调节功能为基础，遵循着整体、协调、循环、自生等生态学基本原理。
20．（2025·广西） 某植物（XY型）的花色受2对等位基因（E/e和R/r）控制，遵循自由组合定律。已知E/e基因位于常染色体上，该植物花色产生机制见图（不考虑XY同源区段、染色体交换情况）。回答下列问题：
（1）将红花雌、雄株杂交，子一代表型及比例为红花：黄花：白花=9：3：4，据此不能确定R/r基因位于常染色体上，理由是　 　。对子一代的雌株作进一步分析：若　 　，则说明R/r基因位于X染色体上；若　 　，则说明R/r基因位于常染色体上。
（2）实验分析确定E/e与R/r基因都位于常染色体上。在某红花雌、雄株繁殖的子代群体中，红花占比显著降低。经初步研究确定是常染色体上的g基因发生显性突变，产生了抑制作用，被抑制的基因不能表达，但未知被抑制的是E还是R基因。
①生物兴趣小组选取基因型EERRgg与eerrGg为亲本，探究G基因的抑制对象。写出实验思路、预期结果和结论　 　。
②再选用基因型EeRrGg的雌、雄株为亲本进行杂交，子一代的表型及比例为红花：黄花：白花=3：9：4.请在答题卡作图区画出EeRrGg个体的基因在染色体上可能的位置关系图（用“○”表示细胞，用“‖”表示1对同源染色体），并用文字说明基因间的抑制关系及位置情况　 　。
【答案】（1）未统计子一代不同性别的表现比例，无法确定基因位置；红花：百花=3：1；红花：黄花：白花=9：3：4
（2）将亲本杂交，统计子代表现型及比例。若子代中红花：白花=1：1，则G基因抑制E基因的表达；若子代中红花：黄花=1：1，则基因抑制R基因的表达；E和g，e和G分别位于一对同源染色体的两条染色体上，R/r位于另一条染色体上，或R和g，r和G分别位于一堆同源染色体的两条染色体上，E/e位于另一对染色体上，或
【知识点】基因的自由组合规律的实质及应用；基因连锁和互换定律；基因在染色体上位置的判定方法；9:3:3:1和1:1:1:1的变式分析
【解析】【解答】（1）要确定R/r基因的位置，需结合性别差异分析表型比例。仅统计子一代整体表型比例（红花：黄花：白花=9：3：4），未区分性别，无法判断R/r是在常染色体还是X染色体上。
若R/r位于X染色体上，红花雌株基因型为E-XRX-、红花雄株为E-XRY，杂交后子一代雌株中，E-XRX-（红花）与e X-X-（白花）的比例为3：1；若R/r位于常染色体上，子一代雌株的表型比例与整体一致，即红花：黄花：白花=9：3：4。
（2）①将基因型为EERRgg（红花，无抑制）与eerrGg（白花，含显性抑制基因G）的亲本杂交，统计子代表型及比例。若G基因抑制E基因：子代基因型为EeRrGg（E被抑制，表现为白花）和EeRrgg（E正常表达，表现为红花），表型比例为红花：白花=1：1；若G基因抑制R基因：子代基因型为EeRrGg（R被抑制，表现为黄花）和EeRrgg（R正常表达，表现为红花），表型比例为红花：黄花=1：1。
②子一代表型及比例为红花：黄花：白花=3：9：4，说明存在连锁关系。基因位置：E与g连锁、e与G连锁（位于一对同源染色体上），R/r位于另一对同源染色体上；或R与g连锁、r与G连锁（位于一对同源染色体上），E/e位于另一对同源染色体上。G基因抑制E基因的表达（或G基因抑制R基因的表达，需结合连锁情况对应）。作图时，用“○”表示细胞，“‖”表示同源染色体，将连锁的基因标注在同一条染色体上即可，如图：
或。
【分析】基因的自由组合定律的实质是：位于非同源染色体上的非等位基因的分离或组合是互不干扰的；在减数分裂过程中，同源染色体上的等位基因彼此分离的同时，非同源染色体上的非等位基因自由组合。
21．（2025·广西） CAR-T是指通过基因工程技术表达CAR基因的T细胞。CAR-T能更好地识别肿瘤细胞表面特定抗原，在肿瘤治疗中疗效显著。构建CAR-T过程见图，回答下列问题：
（1）构建含CAR基因的重组质粒，选用的限制酶组合是　 　。
（2）将连接产物导入Ca2+处理后的大肠杆菌，使用添加氨苄青霉素的固体培养基培养。使用固体培养基的原因是　 　。
（3）将获得的重组质粒导入T细胞并成功表达后，为了研究CAR-T识别肿瘤细胞的特异性及抗肿瘤效果，除了有CAR-T与肿瘤细胞共同培养的实验组，还需设置的对照组有　 　，肿瘤细胞凋亡率的检测指标有　 　（至少写出2点）。
（4）研究发现，肿瘤细胞高表达的PD-L1与CAR-T表达的PD-1结合会启动免疫抑制。为了阻断免疫抑制，可采取的策略有抑制PD-1与PD-L1的结合以及　 　。同时，肿瘤周围组织过于致密会使CAR-T难以接触肿瘤细胞，也会影响疗效。可通过设计减弱原有PD-1启动的抑制通路和降解肿瘤胞外基质的途径解决上述两个问题。已知溶解酶可以降解细胞外基质，多种酶同时作用可提高降解效率；与PD-1连接的生物开关，在该PD-1与PD-L1结合后会被打开，释放P因子激活P启动子。依据上述特性构建新的重组质粒并使其在T细胞中表达。该新的重组质粒部分结构见图，其中①是　 　，②是　 　，③是　 　，④是　 　。
【答案】（1）EcoR I、Not I
（2）便于含有质粒的大肠杆菌形成单菌落
（3）肿瘤细胞单独培养、不含CAR基因的T细胞（正常T细胞）与肿瘤细胞共同培养；肿瘤细胞的体积、肿瘤细胞死亡数和存活数等
（4）使用PD-1抗体或PD-L1抗体；编码PD-L1序列；终止子；溶解酶基因序列；多种酶基因序列
【知识点】基因工程的应用；基因工程的基本工具（详细）；基因工程的操作程序（详细）
【解析】【解答】（1）构建含CAR基因的重组质粒时，需选择能切割CAR基因和质粒且不破坏目的基因、启动子、终止子的限制酶。从图中可见，EcoR I和Not I在CAR基因和质粒上均有酶切位点，且不会破坏关键序列，因此选用的限制酶组合是EcoR I、Not I。
（2）使用固体培养基培养经Ca2+处理的大肠杆菌，是因为固体培养基便于含有质粒的大肠杆菌形成单菌落，从而实现对含重组质粒大肠杆菌的分离和筛选。
（3）对照组需设置：肿瘤细胞单独培养、不含CAR基因的T细胞（正常T细胞）与肿瘤细胞共同培养，以排除肿瘤细胞自身凋亡及正常T细胞对实验的干扰。肿瘤细胞凋亡率的检测指标可包括：肿瘤细胞的体积、肿瘤细胞死亡数和存活数等。
（4）为阻断免疫抑制，除抑制PD1与PDL1的结合外，还可使用PD1抗体或PDL1抗体，通过抗体竞争结合PD1或PDL1，阻断免疫抑制通路。新重组质粒中，①是编码PDL1序列（用于产生PDL1相关元件），②是终止子（终止转录），③是溶解酶基因序列（降解肿瘤胞外基质），④是多种酶基因序列（与溶解酶协同提高降解效率）。
【分析】（1）基因工程是一种DNA操作技术，需要借助限制酶、DNA连接酶和载体等工具才能进行。它的基本操作程序包括：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定。
（2）PCR反应需要在一定的缓冲液中才能进行，需提供DNA模板，分别与两条模板链结合的2种引物，4种脱氧核苷酸和耐高温的DNA聚合酶；同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。
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