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第40讲 动物细胞工程
目录 01 课标达标练 【题型一】动物细胞培养 【题型二】动物细胞融合技术与单克隆抗体 【题型三】动物体细胞核移植技术 02 能力突破练（新角度+新情境+新考法） 03 高考溯源练（含2025年高考真题）
题型一 动物细胞培养
1．细胞复苏是动物细胞培养中的重要环节，CO2培养箱是不可或缺的关键设备。下列关于CO2培养箱为细胞生长提供条件的叙述，错误的是（ ）
A．适宜的温度 B．适宜的湿度 C．5%CO2和95%O2的气体 D．无菌、无毒的空间
【答案】C
【解析】A、动物细胞培养需要适宜的温度（通常37℃），CO 培养箱可提供稳定的温度环境，A正确；
B、适宜的湿度可防止培养液蒸发，维持细胞正常渗透压，B正确；
C、动物细胞培养的气体环境通常为5%CO 和95%空气（含约21%O ），而非95%O ，高浓度O 可能抑制细胞呼吸或造成氧化损伤，C错误；
D、无菌、无毒的环境是细胞培养的基本要求，CO 培养箱通过过滤和消毒措施保障此条件，D正确。
故选C。
2．将人眼睑成纤维细胞传代培养后形成支架，在该支架上接种人口腔黏膜上皮细胞，并培养形成上皮细胞片层，分离得到的片层可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及（ ）
A．制备细胞悬液
B．置于CO2培养箱在适宜条件下培养
C．定期更换培养液
D．用胰蛋白酶处理后分离获得上皮细胞片层
【答案】D
【解析】A、制备细胞悬液是细胞培养的基础步骤，无论是成纤维细胞还是上皮细胞均需通过胰蛋白酶处理组织块获得单个细胞，A正确；
B、动物细胞培养需在含5% CO 的培养箱中进行，以维持培养液pH并提供适宜环境，B正确；
C、定期更换培养液可清除代谢废物并补充营养物质，是细胞培养的必要操作，C正确；
D、分离上皮细胞片层时，片层结构已形成，无需再次使用胰蛋白酶处理（仅需物理剥离），而题干中成纤维细胞传代培养时可能已使用过胰蛋白酶，D错误。
3．某动物细胞培养过程中，细胞贴壁生长至接触抑制时，需分装培养，实验操作过程如图。下列叙述错误的是（　　）

A．图中所示过程为原代培养
B．①中消化液不可以替换成胃蛋白酶
C．②中培养液需加入血清，有利于促进细胞增殖
D．若细胞不再出现接触抑制，细胞可能发生了癌变
【答案】A
【解析】A、动物组织经处理后的初次培养称为原代培养，将分瓶后的细胞培养称为传代培养，图示为传代培养，A错误；
B、胃蛋白酶的最适pH为1.5，在培养环境中失活，通常用胰蛋白酶处理粘壁细胞，B正确；
C、由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分，C正确；
D、贴壁细胞在生长增殖到表面相互接触时通常会停止分裂增殖，即接触抑制，而癌细胞的接触抑制现象丧
4．动物细胞培养是动物细胞工程的基础。下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（ ）
A．动物细胞培养的原理是细胞的全能性
B．正常细胞体外培养都具有贴壁生长的特点
C．动物细胞培养基中添加的动物血清需过滤除菌
D．传代培养的动物细胞都会获得不死性，可无限增殖
【答案】C
【解析】A、动物细胞培养的原理是细胞增殖，而细胞全能性是指细胞发育成完整个体的能力，与植物组织培养相关，A错误；
B、并非所有正常细胞都贴壁生长，如某些血细胞可悬浮生长，B错误；
C、动物血清含多种成分，高温灭菌会破坏其活性，需用过滤除菌法处理，C正确；
D、正常传代细胞分裂次数有限，仅癌变细胞可无限增殖，D错误。
故选C。
5．饲养细胞是指一些在体外培养中不分裂，但仍然保持代谢活性的细胞。在体外进行特定的动物细胞培养前，会先在培养基铺上一层饲养细胞，这些细胞能够分泌生长因子和其他必要的营养物质，支持目的细胞的生长。一旦培养基中目的细胞达到一定数量，饲养细胞便会逐渐死亡。下列说法正确的是（ ）
A．动物细胞培养基中除了合成成分，还需要加入动物血液等天然成分
B．动物细胞培养过程中加入的CO2是为了抑制呼吸作用，减少有机物消耗
C．饲养细胞可能经过了分裂抑制剂的处理
D．传代培养时，需要去除饲养细胞，否则将干扰目的细胞分离
【答案】C
【解析】A、动物细胞培养应在无毒、无菌的环境下进行，由合成培养基提供各种营养成分，但通常还需要添加血清（血浆）等天然成分，A错误；
B、动物细胞培养中加入CO 的主要作用是维持培养液的pH稳定，B错误；
C、饲养细胞不分裂但保持代谢活性，可能通过射线照射或分裂抑制剂（如DNA复制抑制剂）处理实现，C正确；
D、题干指出饲养细胞在目的细胞达到一定数量后会逐渐死亡，传代时无需额外去除，D错误。
故选C。
题型二 动物细胞融合技术与单克隆抗体
6．下列关于单克隆抗体制备的叙述中，错误的是（　　）
A．用特定抗原免疫小鼠后，可从小鼠脾脏中获取能产生相应抗体的B淋巴细胞
B．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后，需在特定的选择培养基中筛选杂交瘤细胞
C．杂交瘤细胞经过克隆化培养和抗体检测，可获得产生所需抗体的细胞株
D．最终分离筛选出的每一种杂交瘤细胞都可以产生针对多种病原体的抗体
【答案】D
【解析】A、用特定抗原免疫小鼠后，小鼠体内会产生针对该抗原的B淋巴细胞，这些细胞主要存在于脾脏中。因此，从小鼠脾脏中获取能产生相应抗体的B淋巴细胞是正确的操作，A正确；
B、B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后，会形成多种细胞类型（如未融合的B细胞、未融合的骨髓瘤细胞、B细胞自身融合体、骨髓瘤细胞自身融合体以及杂交瘤细胞）。通过特定的选择培养基（如HAT培养基），只有杂交瘤细胞能存活（因骨髓瘤细胞缺乏次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶，无法利用补救途径合成DNA；未融合的B细胞寿命短且无法增殖），B正确；
C、杂交瘤细胞经过克隆化培养（如有限稀释法或软琼脂平板法），可获得单细胞克隆；再通过抗体检测（如ELISA或免疫荧光），筛选出能稳定产生所需抗体的细胞株，C正确；
D、单克隆抗体的核心特点是单一特异性。每个杂交瘤细胞由一个B细胞（仅能产生一种抗体）与一个骨髓瘤细胞融合而来，因此最终筛选出的杂交瘤细胞只能产生针对单一抗原表位的抗体，而非多种病原体，D错误。
7．人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，常作为女性是否怀孕的检测指标。某科研人员将小鼠B细胞和骨髓瘤细胞融合后，经过筛选获得能稳定分泌抗HCG单克隆抗体的杂交瘤细胞。下列相关分析正确的是（　　）
A．从注射过HCG的小鼠脾脏中获取能大量增殖的B淋巴细胞
B．该过程涉及到的技术利用的原理有细胞膜的流动性和细胞增殖等
C．B细胞与骨髓瘤细胞融合后经一次筛选即可得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞
D．将抗体检测呈阴性的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内培养或在体外条件下大规模培养
【答案】B
【解析】A、注射HCG是为了使小鼠产生能分泌抗HCG的B淋巴细胞，但B细胞本身不能在体外大量增殖，需与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞后才具备此能力，A错误；
B、细胞融合依赖细胞膜的流动性，而筛选后的杂交瘤细胞需通过细胞增殖（有丝分裂）扩增，原理正确，B正确；
C、第一次筛选仅保留杂交瘤细胞（排除未融合或自身融合的细胞），需第二次筛选（克隆化培养、抗体检测）才能获得分泌特定抗体的细胞，C错误；
D、抗体检测呈阴性的细胞无法产生目标抗体，应淘汰，需选择阳性细胞进行培养，D错误。
8．下图是制备抗白细胞介素-6(IL-6)单克隆抗体的示意图。下列叙述正确的是（ ）
A．步骤①给小鼠注射IL-6后，应从脾中分离筛选T淋巴细胞
B．步骤②能分离出大量产生相同抗体的单一淋巴细胞
C．步骤③加入灭活病毒或PEG诱导细胞融合，体现了细胞膜的流动性
D．步骤④经过克隆化培养和抗体检测筛选出了杂交瘤细胞
【答案】C
【解析】A、步骤①给小鼠注射IL-6后，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞，A错误；
B、步骤②分离出多种B淋巴细胞，产生的抗体种类有多种，B错误；
C、步骤③是诱导细胞融合过程，诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法，细胞融合的过程体现了细胞膜的流动性，C正确；
D、步骤④是在选择培养基上筛选得到的杂交瘤细胞，在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长，D错误。
9．酶联免疫吸附技术是临床上常用的快速检测病原体感染的技术，可用于测定抗原、抗体。该技术测定抗原的工作原理如下图所示，有关叙述错误的是（　　）
A．该技术中用到的固相抗体和酶标抗体均可来自杂交瘤细胞
B．固相抗体和酶标抗体会竞争性结合抗原
C．若要检测患者是否产生了相应抗体，需将抗原固定在载体上
D．反应后，检测到的有色产物越多，说明患者感染情况越严重
【答案】B
【解析】A、该技术中用到的固相抗体和酶标抗体均可来自杂交瘤细胞产生的单克隆抗体，A正确；
B、由图可知，固相抗体和酶标抗体均可特异性结合抗原，但结合的位点不同，不存在竞争性结合，B错误；
C、该技术利用的原理是抗原、抗体的特异性结合，若要检测患者是否产生了相应抗体，可将抗原固定在载体上，加入患者血浆（或血清）后，再利用特异性结合相应抗体的酶标抗体进行检测即可，C正确；
D、患者感染情况越严重，则抗原、抗体的结合信号越强烈，有色产物越多，D正确。
10．某病毒S蛋白含有多种抗原决定簇。科研人员利用该病毒康复者血清中的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得了能分泌抗S蛋白抗体的杂交瘤细胞，用于制备抗S蛋白的单克隆抗体。下列说法错误的是（ ）
A．康复者血清中的B淋巴细胞在体外培养条件下不能大量增殖
B．可用灭活的病毒诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合
C．体外培养杂交瘤细胞时通入5%CO2的主要作用是维持培养液pH
D．经特定选择培养基筛选出的杂交瘤细胞可直接大规模培养生产目标抗体
【答案】D
【解析】A、康复者血清中的B淋巴细胞是已高度分化的细胞，不具备分裂能力，无法在体外长期增殖，A正确；
B、灭活病毒是诱导动物细胞融合的常用方法，适用于B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，B正确；
C、动物细胞培养时，5%CO 的作用是维持培养液的pH（通过碳酸氢盐缓冲系统），C正确；
D、选择培养基筛选出的杂交瘤细胞是包含多种类型的杂交瘤细胞，需进一步通过抗体检测和克隆化培养才能获得单一细胞株，D错误。
题型三 动物体细胞核移植技术
11．引起人对猫过敏的主要过敏原是猫唾液中的Feld1蛋白。某公司通过基因编辑敲除猫成纤维细胞的Feld1基因，再经体细胞核移植等技术培育低过敏宠物猫，过程如下图所示。此过程中不涉及的操作是（ ）
A．筛选敲除Feld1基因的成纤维细胞
B．卵母细胞的采集、培养和去核处理
C．使用物理或化学方法激活重构胚
D．移植前对供受体母猫进行配型检测
【答案】D
【解析】A、引起人对猫过敏的主要过敏原是猫唾液中的Feld1蛋白，而Feld1蛋白是由Feld1基因表达合成的，故需要筛选敲除Feld1基因的成纤维细胞，A不符合题意；
B、作为核移植受体细胞的去核卵母细胞一般处在减数第二次分裂中期，因此，需要对卵母细胞进行采集、培养和去核处理，B不符合题意；
C、需使用物理或化学方法激活重构胚，使重构胚完成分裂和发育进程，C不符合题意；
D、受体母猫—般不会对植入胚胎产生排斥反应，不需要进行配型检测，D符合题意。
12．克隆猴“中中”和“华华”的诞生过程如图所示，下列说法错误的是（　　）
A．它们的诞生应用的是克隆技术
B．它们的形态应与A猴相同
C．它们是由受精卵发育来的
D．该实验说明细胞核是细胞的控制中心
【答案】C
【解析】A、克隆指的是先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的卵细胞中，然后促使这一新细胞分裂繁殖发育成胚胎。当胚胎发育到一定程度后，再被植入动物子宫中使动物怀孕，便可产下与提供细胞核者基因相同的动物，“中中”和“华华”的培育利用的是克隆技术，A正确；
B、细胞核是遗传信息库，是细胞代谢和遗传的控制中心。在克隆的过程中，谁提供细胞核，克隆出来的生物就像谁。可见，“中中”和“华华”的形态应与供细胞核的母猴A相同，B正确；
C、其他普通猴是通过有性生殖，由精子和卵细胞结合成受精卵发育而来，而“中中”和“华华”的出世是以克隆的方式由体细胞发育而来，C错误；
D、“中中”和“华华”的形态与供细胞核的母猴A相同，该实验说明细胞核是细胞的控制中心，D正确。
故选C。
13．核移植技术除了研究生物学的基本问题外，在药物生产、优良种畜的培育和繁殖、拯救濒危动物、治疗性克隆等方面，具有重要的实际应用价值。下列关于动物细胞核移植技术应用的叙述，错误的是（　　）
A．细胞核移植技术可用于优良种畜的培育
B．细胞核移植技术的原理是动物细胞具有全能性
C．核移植技术与干细胞诱导技术结合，可用于修补人体损伤的器官
D．核移植技术可用于转基因动物的克隆，以保持转基因动物的性状
【答案】B
【解析】A、细胞核移植技术可通过克隆优良个体的细胞核来培育优良种畜，A正确；
B、细胞核移植技术的原理是细胞核的全能性，而非动物细胞的全能性，B错误；
C、核移植技术结合干细胞诱导分化，可定向培育器官用于修复损伤，属于治疗性克隆，C正确；
D、核移植技术克隆转基因动物的细胞核，可保留其遗传性状，D正确。
故选B。
14．2017年，某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请，其培育过程可选用如下技术路线。下列叙述错误的是（ ）
A．由图可知，三亲婴儿的培育采用了动物细胞核移植技术、动物细胞培养等技术
B．母亲携带的红绿色盲基因不会遗传给“三亲婴儿”
C．采集的精子必须经过获能处理后，才能用于体外受精
D．“三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因
【答案】B
【解析】A、从图中可以看到，先将捐献者卵母细胞去核，再把母亲卵母细胞的细胞核移植到去核的捐献者卵母细胞中，这运用了动物细胞核移植技术。 之后对重组细胞进行体外培养，使其发育到MⅡ期卵母细胞，这运用了动物细胞培养技术。所以三亲婴儿的培育采用了动物细胞核移植技术、动物细胞培养等技术，A正确；
B、红绿色盲基因位于X染色体上，属于细胞核基因。 母亲卵母细胞提供了细胞核，所以母亲携带的红绿色盲基因会通过细胞核遗传给“三亲婴儿”，B错误；
C、采集的精子必须经过获能处理后，才能用于体外受精，C正确；
D、“三亲婴儿”的细胞核基因一半来自父亲（精子提供），一半来自母亲（母亲卵母细胞的细胞核提供）。 细胞质基因来自卵母细胞捐献者（去核卵母细胞提供细胞质），所以“三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因，D正确。
故选B。
15．治疗性克隆有望解决供体器官短缺和免疫排斥等问题。下图为治疗性克隆的过程，有关叙述错误的是（ ）
A．细胞A常采用去核的卵母细胞
B．动物细胞的培养需提供95%空气和5%CO2的混合气体
C．胚胎干细胞分化为不同细胞的过程中发生了基因的选择性表达
D．该治疗过程应用了核移植、动物细胞培养和胚胎移植等技术
【答案】D
【解析】A、细胞A常采用去核卵母细胞作为移植的受体细胞，因为去核卵母细胞有激活动物细胞全能性的物质，且细胞体积大，易操作，所含营养物质丰富，A正确；
B、动物细胞的培养需提供95%空气（有利于细胞呼吸，进行正常代谢活动）和5%CO2（维持培养液的pH）的混合气体，B正确；
C、细胞分化的实质是基因的选择性表达，C正确；
D、该治疗性过程应用了核移植、动物细胞培养技术，并未涉及胚胎移植技术，D错误。
1．（2025·云南·二模）微生物菌种的高通量筛选使用含有多个小孔的微孔板为载体，结合灵敏、快速的检测仪器，实现了在同一时间对成千上万份菌株样品进行筛选。下列叙述错误的是（ ）
A．微孔板中加入特定的选择培养基可用来筛选能否产生抗体的杂交瘤细胞
B．若用微孔板培养杂交瘤细胞，需先进行稀释处理，才能用于筛选目的杂交瘤细胞
C．筛选对象可以是从自然界分离、诱变产生或通过生物技术改造的菌株
D．除了微生物菌种的高通量筛选，高通量筛选还可以用于微生物药物的筛选
【答案】A
【解析】A、选择培养基用于筛选融合的杂交瘤细胞（如HAT培养基淘汰未融合的细胞），但能否产生目标抗体需通过抗原-抗体特异性结合来检测，A错误；
B、微孔板培养杂交瘤细胞时，需进行有限稀释处理，确保每个孔中仅含单个细胞，从而保证后续筛选的抗体为单克隆来源，B正确；
C、高通量筛选适用于不同来源的菌株，包括自然分离、诱变或基因工程改造的菌株，C正确；
D、高通量筛选技术不仅用于菌种筛选，还可用于微生物药物（如抗生素）的活性检测，D正确。
故选A。
2．（2025·云南·二模）某科研团队利用动物细胞工程技术构建肝脏类器官，用于药物毒性检测，其流程为：诱导小鼠多能干细胞（iPS细胞）分化为多种类型肝细胞→三维培养构建出具有生理功能的肝脏类器官→置于不同浓度的待测药物中，检测细胞活力、肝细胞内相关酶活性等指标。下列相关叙述正确的是（ ）
A．iPS细胞分裂能力强，体外培养时会细胞贴壁且不发生接触抑制
B．三维培养获得肝脏类器官所使用的气体环境通常为95%空气和5%CO2
C．应增设“肝脏类器官+不含待测药物的生理盐水”组，排除无关变量干扰
D．若培养液中谷丙转氨酶活性显著升高，则说明该药物对肝脏毒性较弱
【答案】B
【解析】A、动物细胞（包括iPS细胞）体外贴壁培养时，普遍存在接触抑制现象，与细胞的分裂能力无关，Ａ错误；
B、动物细胞培养的标准气体环境为95%空气（提供氧气，满足细胞呼吸）和 5%CO2（维持培养液pH稳定），三维培养获得肝脏类器官的过程属于动物细胞工程技术范畴，遵循相同的气体环境要求，Ｂ正确；
C、实验设计中， “肝脏类器官＋不含待测药物的培养液”组属于空白对照，其作用是排除培养液本身、培养环境等无关变量对实验结果的干扰，确保检测指标的变化仅由待测药物引起，Ｃ错误；
D、谷丙转氨酶是肝细胞内相关酶，正常情况下主要存在于肝细胞内，若药物对肝脏毒性较强，则会导致肝细胞受损，谷丙转氨酶释放到培养液中，使其活性显著升高，Ｄ错误。
故选B。
3．（2025·湖南永州·一模）伤寒沙门氏菌的致病毒素是其细胞壁外的脂多糖（LPS）。研发LPS疫苗时常用多肽模拟LPS，两者相似程度越高，多肽与LPS竞争抗体的能力越强。科研人员用抗LPS单克隆抗体分别鉴定了多肽A、B与LPS抗原的相似程度，部分实验步骤如图a，结果如图b。下列叙述正确的是（ ）
A．抗LPS单克隆抗体的制备应从小鼠的血液中获得骨髓瘤细胞
B．与多肽结合的抗体在过程Ⅲ中会被洗脱下来
C．据图分析可知，用多肽B模拟LPS的效果较好
D．将筛选出的多肽注射到小鼠体内可激发细胞免疫和体液免疫
【答案】B
【解析】A、抗LPS单克隆抗体的制备应从小鼠的骨髓中获得骨髓瘤细胞，也可从外周血中获取，A错误；
B、与多肽结合的抗体在过程Ⅲ中会被洗脱下来，留下的是与LPS结合的抗体，B正确；
C、由题干知多肽模拟LPS抗原特征的相似程度越高，其与LPS竞争抗体结合位点的能力越强，与多肽结合的抗体会被洗脱掉，而未被洗脱的抗体因与LPS结合而残留在检测板上，未被洗脱的抗体越少的多肽效果越好。图乙显示加入多肽A的清洗后检测板上检出的抗体数量比加入多肽B的少，因此模拟LPS效果更好的多肽是多肽A，C错误；
D、将筛选出的多肽（通常不具有入侵细胞的特性）注射到小鼠体内一般可作为抗原激发体液免疫， D错误。
故选B。
4．（2025·湖南永州·一模）分离患者自身的树突状细胞（DC细胞）及杀伤细胞（CIK），二者经诱导、培养及肿瘤抗原活化后回输患者体内。处理后，成熟DC细胞能有效激活细胞毒性T细胞，成熟CIK可直接识别并杀伤肿瘤细胞。下列叙述正确的是（ ）
A．体外培养细胞时，培养基需要置于含95%O2和5%CO2的气体环境
B．DC细胞和B细胞都具有摄取和加工处理抗原的能力
C．不同的CIK回输患者体内可以识别多种肿瘤细胞，但会引起免疫排斥反应
D．活化的细胞毒性T细胞清除肿瘤细胞体现了免疫系统的防御功能
【答案】B
【解析】A、体外培养细胞时，培养基需要置于含95%空气和5%CO2的气体环境，A错误；
B、树突状细胞（DC）和B细胞均能摄取、加工处理抗原并呈递给T细胞，B正确；
C、CIK细胞的特异性由其受体决定，不同CIK可能识别不同的肿瘤细胞，但从患者体内分离的CIK细胞与患者细胞的HLA相同，不会引起免疫排斥反应，C错误；
D、活化的细胞毒性T细胞清除肿瘤细胞体现了免疫系统的监视功能，D错误。
故选B。
5．（2025·宁夏·二模）动物细胞培养是动物细胞工程的基础，培养过程中，动物组织经处理后的初次培养称为原代培养，分瓶之后的培养称为传代培养。下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（　　）
A．无论原代培养还是传代培养，大多数细胞是悬浮在培养液中生长增殖的
B．进行分瓶培养的原因之一是贴壁细胞发生接触抑制
C．动物细胞培养液中可添加抗生素防止杂菌生长
D．进行动物细胞培养需将培养液的pH调至7.2-7.4
【答案】A
【解析】A、原代培养过程中，多数种类的动物细胞需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，A错误；
B、正常分裂的细胞在培养瓶中会出现接触抑制现象，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖。当要获得大量细胞时，就要对原代培养的细胞分瓶，进行传代培养，B正确；
C、动物细胞进行体外培养时，无法从内环境中吸收营养物质，所需营养物质要从培养液中获取，培养液中需要加入糖类、氨基酸、无机盐等营养物质，同时还需要加入动物血清，以保证动物细胞的正常增殖过程，C正确；
D、血浆的pH中性偏碱，进行动物细胞培养需将培养液的pH调至7.2-7.4，以便于动物细胞更好地生长，D正确。
故选A。
6．（2025·河北·三模）甲型H1N1流感病毒表面的神经氨酸酶有4个抗原决定簇，一种抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体（Ab）。由多种抗原决定簇刺激机体产生的抗体称为多克隆抗体。如图为制备多克隆抗体和单克隆抗体的示意图，下列叙述正确的是（　　）
A．诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合不能使用灭活病毒诱导法
B．①②可用相同的选择培养基培养，用相同的方法筛选
C．多克隆抗体的产生需要多种B细胞参与
D．甲型H1N1流感病毒部分抗原结构改变后，会出现多抗失效而单抗有效的情况
【答案】C
【解析】A、诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合可用PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法，A错误；
B、筛选①是在选择培养基上进行筛选的，在该培养基上未融合的细胞和同种融合的细胞都会死亡，只有杂交瘤细胞能存活，筛选②筛选的是能产生特定抗体的杂交瘤细胞，具体做法是：将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每孔细胞不超过1个，通过培养让其增殖，因此①②所用的选择培养基种类和筛选方法都不同，B错误；
C、一种抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体（Ab），由多种抗原决定簇刺激机体产生的抗体称为多克隆抗体，因此需要多种B细胞参与，C正确；
D、甲型H1N1流感病毒部分抗原结构改变后，会出现原单抗失效，而对没有改变的其他抗原多抗仍有效，D错误。
故选C。
7．（2025·宁夏吴忠·一模）饲养细胞是指一些在体外培养中不分裂，但仍然保持代谢活性的细胞。在体外进行特定的动物细胞培养前，会先在培养基铺上一层饲养细胞，这些细胞能够分泌生长因子和其他必要的营养物质，支持目的细胞的生长。一旦培养基中目的细胞达到一定数量，饲养细胞便会逐渐死亡。下列说法正确的是（ ）
A．动物细胞培养基中除了合成成分，还需要加入动物血液等天然成分
B．动物细胞培养过程中加入的CO2是为了抑制呼吸作用，减少有机物消耗
C．饲养细胞可能经过了分裂抑制剂的处理
D．传代培养时，需要去除饲养细胞，否则将干扰目的细胞分离
【答案】C
【解析】A、动物细胞培养应在无毒、无菌的环境下进行，由合成培养基提供各种营养成分，但通常还需要添加血清（血浆）等天然成分，A错误；
B、动物细胞培养中加入CO 的主要作用是维持培养液的pH稳定，B错误；
C、饲养细胞不分裂但保持代谢活性，可能通过射线照射或分裂抑制剂（如DNA复制抑制剂）处理实现，C正确；
D、题干指出饲养细胞在目的细胞达到一定数量后会逐渐死亡，传代时无需额外去除，D错误。
8．（以3，4-DCQA为情境）随着咖啡消费水平的不断提高，咖啡内含物的生物活性功能越来越备受关注。二咖啡酰奎宁酸（3，4-DCQA）是咖啡的主要活性成分。有研究表明，3，4-DCQA能够抑制心肌细胞凋亡。某研究小组进一步进行了3，4-DCQA对心肌细胞凋亡影响的探究实验（其中TBHP能够诱导心肌细胞凋亡），部分实验数据如图所示。下列有关说法错误的是（ ）
A．进行心肌细胞培养时，可用胰蛋白酶处理心肌组织
B．Caspase-3、Bax基因高表达可能有利于抑制细胞增殖、促进细胞凋亡
C．当3，4-DCQA的浓度为10μM时，对TBHP诱导后细胞能起到一定的抗凋亡效果
D．3，4-DCQA最优给药浓度为160μM左右，当给药浓度超过160μM时抗凋亡能力下降，可能与大剂量使用产生的细胞毒性有关
【答案】D
【解析】A、一般情况下，进行动物细胞培养时需要用胰蛋白酶将动物组织块处理分散成单个细胞，A正确；
B、3，4-DCQA能够抑制心肌细胞凋亡，在图1中随着3，4-DCQA浓度的提高，Caspase-3、Bax基因表达量减少，这表明Caspase-3、Bax基因高表达可能有利于抑制细胞增殖、促进细胞凋亡，B正确；
C、由图2可知，相较于TBHP处理后的细胞存活率，当3，4-DCQA的浓度为10μM时，细胞存活率一定程度提升，即对TBHP诱导后细胞能起到一定的抗凋亡效果，C正确；
D、由图2可知，3，4-DCQA最优给药浓度为20μM左右，该浓度下抗凋亡效果最强，使用剂量小，当给药浓度超过160μM时抗凋亡能力下降，可能与大剂量使用产生的细胞毒性有关，D错误。
9．（以ADC为情境）为降低乳腺癌化疗副作用，科研人员在单克隆抗体技术基础上构建抗体-药物偶联物（ADC），ADC通常由单克隆抗体、接头和药物组成，制备和治疗过程如图1和2。已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。小鼠淋巴细胞中有这两种途径，但一般不分裂，而骨髓瘤细胞中没有S途径，却能分裂。下列叙述错误的是（ ）
A．图1过程对小鼠进行免疫处理后，应该从该小鼠的脾脏中获取B淋巴细胞
B．若①是在含氨基蝶呤试管中促融，只考虑两两融合，则管中能增殖的细胞只有2种
C．图1中a和b分别是单克隆抗体和药物，两部分通过接头结合在一起，从而获得ADC
D．图2中ADC进入癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出药物最终作用于细胞核
【答案】B
【解析】A、免疫细胞集中分布在脾脏，对小鼠进行免疫处理后，应该从该小鼠的脾脏中获取B淋巴细胞，A正确；
B、在筛选杂交瘤细胞时，试管中共有5种细胞：未融合的B细胞、互融的B细胞、未融合的瘤细胞、互融的瘤细胞、互融的B细胞和瘤细胞；其中只有互融的B细胞和瘤细胞1种细胞能增殖，B错误；
C、图1中的a是Y型抗体，b是药物，两部分通过接头结合在一起，从而获得ADC，C正确；
D、根据图2判断，ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体释放水解酶可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致癌细胞凋亡，D正确。
10．（2025·河北保定·三模）随着再生医学的发展，科学家尝试利用细胞工程技术培育人造器官用于器官移植。下图是人造肝脏培育的部分过程，相关叙述错误的是（ ）
A．从患者肝脏组织中获取肝脏干细胞时，需使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织块，使细胞分散
B．培养肝脏干细胞时，加入的细胞因子和生长因子只能促进细胞的增殖，不能诱导细胞分化
C．培养肝脏干细胞的培养液中需添加血清等天然成分，主要为细胞提供一些未知的营养成分
D．该技术为解决器官移植供体短缺问题提供了新的途径和希望
【答案】B
【解析】A、获取动物细胞通常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织块使其分散成单个细胞，A正确；
B、不同的细胞因子和生长因子既能促进细胞增殖，也能诱导细胞分化，B错误；
C、由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此培养基中添加血清主要为细胞提供一些未知的营养成分和生长因子等，C正确；
D、该技术可培育人造器官，为解决器官移植供体短缺问题提供了新的途径和希望，D正确。
1．（2025·江西·高考真题）诱导多能干细胞(ips细胞)在生物医药领域有广阔的应用前景。研究人员利用多种小分子化合物协同诱导小鼠胎儿成纤维细胞，成功获得ips细胞。下列叙述错误的是（　　）
A．小分子化合物改变了小鼠胎儿成纤维细胞的基因表达
B．小鼠胎儿成纤维细胞形成ips细胞的过程属于细胞分化
C．利用胰蛋白酶处理小鼠胎儿某些组织可获得分散的成纤维细胞
D．培养小鼠胎儿成纤维细胞和ips细胞时需提供一定浓度的CO2
【答案】B
【解析】A、小分子化合物通过调控基因表达使成纤维细胞重编程为ips细胞，改变了原有基因表达模式，A正确；
B、成纤维细胞形成ips细胞的过程是逆分化（去分化），而非细胞分化，B错误；
C、胰蛋白酶可分解细胞间质蛋白，使组织分散为单个细胞，符合动物细胞培养操作，C正确；
D、动物细胞培养通常需要5% CO2以维持培养液pH，成纤维细胞和ips细胞培养均需此条件，D正确。
2．（2025·广西·高考真题）科学家利用携带猪源细胞表面蛋白基因（GT）的NDV病毒靶向感染人体内癌细胞，从而强烈激活免疫系统，起到了较好的肿瘤治疗效果。下列有关说法正确的是（　　）
A．培养体外实验使用的癌细胞时，通常需添加血清
B．感染NDV-GT的癌细胞会被巨噬细胞特异性吞噬
C．经NDV-GT方法治愈的患者，体内不存在能识别GT蛋白的免疫细胞
D．人体正常细胞若被感染并表达了GT，不会被免疫系统识别为“非己”成分
【答案】A
【解析】A、动物细胞培养时，培养基中需添加血清等天然成分以提供细胞生长所需的营养物质和生长因子，因此培养体外实验使用的癌细胞通常需要添加血清，A正确；
B、巨噬细胞的吞噬作用属于非特异性免疫，不具有特异性，即使癌细胞被NDV-GT感染，其吞噬过程仍为非特异性，B错误；
C、NDV-GT治疗会激活免疫系统产生记忆细胞，这些细胞能够长期识别GT蛋白，因此治愈后患者体内仍存在识别GT蛋白的免疫细胞，C错误；
D、若正常细胞被感染并表达GT蛋白（异源蛋白），会被免疫系统识别为抗原，从而引发免疫反应，D错误。
3．（2025·贵州·高考真题）下图为PML蛋白单克隆抗体的制备过程。下列叙述正确的是（　　）
A．应使用总蛋白进行多次免疫且每次免疫间隔适宜时间
B．W细胞是先提取B淋巴细胞再用PML蛋白免疫而获得
C．步骤2的目的是去除不能产生特异性抗体的细胞
D．应选择孔2中的细胞进行后续处理以制备单克隆抗体
【答案】D
【解析】A、PML蛋白单克隆抗体的制备过程，应用PML蛋白作为抗原间隔多次免疫小鼠，目的是获得更多的能产生PML蛋白抗体的B淋巴细胞，A错误；
B、W细胞是先用PML蛋白免疫而获得相应的B淋巴细胞，后通过筛选提取能产生单一抗体的B淋巴细胞，B错误；
C、根据题意可知步骤1是诱导W细胞与骨髓瘤细胞融合，步骤2是利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，C错误；
D、根据电泳结果可知应选择孔2中的细胞进行后续处理以制备单克隆抗体，因为孔2中的细胞能特异性产生高密度PML蛋白，D正确。
4．（2025·甘肃·高考真题）肿瘤坏死因子α（TNF-α）是一种细胞因子，高浓度时可以引发疾病。研究者利用细胞工程技术制备了TNF-α的单克隆抗体，用于治疗由TNF-α引发的疾病，制备流程如下图。下列叙述正确的是（　　）
A．①是从小鼠的血液中获得的骨髓瘤细胞
B．②含未融合细胞、同种核及异种核融合细胞
C．③需用特定培养基筛选得到大量的杂交瘤细胞
D．④需在体外或小鼠腹腔进行克隆化培养和抗体检测
【答案】B
【解析】A、骨髓瘤细胞应该从骨髓中获取，A错误；
B、B细胞和骨髓瘤细胞的融合是随机的，可能有些细胞不发生融合，有些两两融合，有些多个融合，有同种核融合细胞，也有异种核融合细胞，B正确；
C、诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，但不能得到大量的，C错误；
D、进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养，抗体检测不是在小鼠腹腔内进行，D错误。
5．（2025·广东·高考真题）将人眼睑成纤维细胞传代培养后，再培养形成支架，在该支架上接种人口腔黏膜上皮细胞，培养一段时间后分离获得上皮细胞片层，可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及（ ）
A．制备细胞悬液
B．置于等适宜条件下培养
C．离心收集细胞
D．用胰蛋白酶消化支架后分离片层
【答案】D
【解析】A、动物细胞培养时，为增大细胞与培养液的接触面积，需要制备细胞悬液，A正确；
B、置于等适宜条件下培养，其中5%的CO2可维持培养液的pH，B正确；
C、在成纤维细胞传代培养过程中需要通过离心收集细胞，C正确；
D、不用胰蛋白酶消化支架，避免将上皮细胞片层分离成单独细胞，D错误。
6．（2025·湖北·高考真题）利用犬肾细胞MDCK扩增流感病毒，生产流感疫苗，具有标准化、产量高等优点。但MDCK细胞贴壁生长的特性不利于生产规模的扩大，严重制约疫苗的生产效率。研究人员通过筛选，成功获得一种无成瘤性的（多代培养不会癌变）、可悬浮培养的MDCK细胞——XF06.下列叙述错误的是（　　）
A．XF06悬浮培养可提高细胞密度，进而提升生产效率
B．细胞贴壁生长特性的改变是由于流感病毒感染所导致
C．可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒
D．采用无成瘤性细胞生产疫苗，是为了避免疫苗中有致瘤DNA的污染
【答案】B
【解析】A、悬浮培养的XF06细胞无需贴壁，可在培养液中自由增殖，从而提高细胞密度，扩大病毒产量，提升生产效率，A正确；
B、XF06细胞的贴壁特性改变是通过筛选获得的遗传特性，而非流感病毒感染所致（病毒感染仅用于扩增病毒，不改变宿主细胞生长方式），B错误；
C、流感病毒释放到细胞裂解液后，离心可分离细胞碎片（沉淀）与病毒（上清液），C正确；
D、无成瘤性细胞不含癌基因，可避免疫苗中混入致瘤性DNA片段，确保疫苗安全性，D正确；
7．（2025·北京·高考真题）动物细胞培养基一般呈淡红色。某次实验时，调控pH的CO2耗尽，培养基转为黄色。由此推断使培养基呈淡红色的是（ ）
A．必需氨基酸 B．抗生素
C．酸碱指示剂 D．血清
【答案】C
【解析】A、必需氨基酸是细胞生长的营养成分，不参与指示pH变化，A错误；
B、抗生素用于抑制微生物污染，与培养基颜色无关，B错误；
C、酸碱指示剂（如酚红）在培养基中用于显示pH变化，在低pH值时酚红使培养液呈黄色，而较高的pH值时使培养液呈紫色，pH值7.2-7.4时为红色，C正确；
D、血清提供生长因子，不直接导致颜色变化，D错误。
8．（2024·福建·高考真题）我国科研团队研制出全球首个以尿液中的抗原为靶标的戊肝诊断试剂盒，该成果属于单克隆抗体在临床上的应用。下列叙述错误的是（ ）
A．该试剂盒的研制过程应用了动物细胞融合技术
B．该试剂盒的检测原理为抗原抗体的特异性结合
C．该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创伤
D．该试剂盒还可用于其他类型病毒性肝炎的检测
【答案】D
【解析】A、依据题干信息，戊肝诊断试剂盒属于单克隆抗体的研究成果，单克隆抗体制备过程需要已免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，所以动物细胞融合技术，A正确；
B、该试剂盒的检测原理为抗原抗体的特异性结合，B正确；
C、依据题干信息，该试剂盒以尿液中的抗原为靶标，所以该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创伤，C正确；
D、抗体具有特异性，所以戊肝诊断试剂盒只能用于戊肝的检测，不能用于其他类型病毒性肝炎的检测，D错误。
9．（2024·海南·高考真题）海南龙血树具有药用和观赏价值，可利用植物组织培养技术产生愈伤组织，进而获得该种植株。动物细胞融合技术可将骨髓瘤细胞和产生特定抗体的B淋巴细胞融合形成杂交瘤细胞，进而制备单克隆抗体。下列有关这两种技术的叙述，正确的是（ ）
A．利用的原理均是细胞的全能性
B．使用的培养基均需添加葡萄糖和血清
C．培养时的温度和pH均相同
D．产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力
【答案】D
【解析】A、利用植物组织培养技术获得海南龙血树，利用的原理是细胞的全能性；制备单克隆抗体使用了动物细胞培养技术和细胞融合技术，这两种技术利用的原理分别是细胞的增殖和细胞膜的流动性，A错误；
B、利用植物组织培养技术获得海南龙血树，使用的培养基中添加的是蔗糖，不需添加葡萄糖和血清，B错误；
C、由于植物细胞和动物细胞生长所需的适宜温度和pH存在差异，所以培养时的温度和pH均不相同， C错误；
D、愈伤组织是外植体（离体的植物器官、组织或细胞）经脱分化形成的，杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和产生特定抗体的B淋巴细胞融合后形成的，因此产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力，D正确。
故选D。
10．（2024·江苏·高考真题）我国科学家利用人的体细胞制备多能干细胞，再用小分子TH34成功诱导衍生成胰岛B细胞。下列相关叙述错误的是（ ）
A．基因选择性表达被诱导改变后，可使体细胞去分化成多能干细胞
B．在小分子TH34诱导下，多能干细胞发生基因突变，获得胰岛素基因
C．衍生的胰岛B细胞在葡萄糖的诱导下能表达胰岛素，才可用于移植治疗糖尿病
D．若衍生的胰岛B细胞中凋亡基因能正常表达，细胞会发生程序性死亡
【答案】B
【解析】A、被诱导改变后，可使体细胞去分化成多能干细胞 这个说法是正确的。体细胞可以通过特定的因子导入和培养条件，基因的调控和表达模式的改变，使得原本专一功能的体细胞去分化成为多能干细胞，A正确；
B、小分子药物通常是通过调节现有的生物通路和基因表达来实现其功能，而胰岛素基因在人体所有细胞中都存在，但只有在胰岛细胞中才会表达 ，所以多能干细胞在诱导分化的过程中不会突然发生基因突变获得胰岛素基因，B错误；
C、胰岛B细胞在较高的血糖浓度下分泌胰岛素，降低血糖，所以衍生的胰岛B细胞需在葡萄糖的诱导下成功表达胰岛素，以确保衍生的胰岛B细胞能够正常发挥功能，才可用于移植治疗糖尿病，C正确；
D、凋亡基因的正常表达会导致衍生的胰岛B细胞发生程序性死亡，也就是发生细胞凋亡，D正确。
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第40讲 动物细胞工程
目录 01 课标达标练 【题型一】动物细胞培养 【题型二】动物细胞融合技术与单克隆抗体 【题型三】动物体细胞核移植技术 02 能力突破练（新角度+新情境+新考法） 03 高考溯源练（含2025年高考真题）
题型一 动物细胞培养
1．细胞复苏是动物细胞培养中的重要环节，CO2培养箱是不可或缺的关键设备。下列关于CO2培养箱为细胞生长提供条件的叙述，错误的是（ ）
A．适宜的温度 B．适宜的湿度 C．5%CO2和95%O2的气体 D．无菌、无毒的空间
2．将人眼睑成纤维细胞传代培养后形成支架，在该支架上接种人口腔黏膜上皮细胞，并培养形成上皮细胞片层，分离得到的片层可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及（ ）
A．制备细胞悬液
B．置于CO2培养箱在适宜条件下培养
C．定期更换培养液
D．用胰蛋白酶处理后分离获得上皮细胞片层
3．某动物细胞培养过程中，细胞贴壁生长至接触抑制时，需分装培养，实验操作过程如图。下列叙述错误的是（　　）

A．图中所示过程为原代培养
B．①中消化液不可以替换成胃蛋白酶
C．②中培养液需加入血清，有利于促进细胞增殖
D．若细胞不再出现接触抑制，细胞可能发生了癌变
4．动物细胞培养是动物细胞工程的基础。下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（ ）
A．动物细胞培养的原理是细胞的全能性
B．正常细胞体外培养都具有贴壁生长的特点
C．动物细胞培养基中添加的动物血清需过滤除菌
D．传代培养的动物细胞都会获得不死性，可无限增殖
5．饲养细胞是指一些在体外培养中不分裂，但仍然保持代谢活性的细胞。在体外进行特定的动物细胞培养前，会先在培养基铺上一层饲养细胞，这些细胞能够分泌生长因子和其他必要的营养物质，支持目的细胞的生长。一旦培养基中目的细胞达到一定数量，饲养细胞便会逐渐死亡。下列说法正确的是（ ）
A．动物细胞培养基中除了合成成分，还需要加入动物血液等天然成分
B．动物细胞培养过程中加入的CO2是为了抑制呼吸作用，减少有机物消耗
C．饲养细胞可能经过了分裂抑制剂的处理
D．传代培养时，需要去除饲养细胞，否则将干扰目的细胞分离
题型二 动物细胞融合技术与单克隆抗体
6．下列关于单克隆抗体制备的叙述中，错误的是（　　）
A．用特定抗原免疫小鼠后，可从小鼠脾脏中获取能产生相应抗体的B淋巴细胞
B．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后，需在特定的选择培养基中筛选杂交瘤细胞
C．杂交瘤细胞经过克隆化培养和抗体检测，可获得产生所需抗体的细胞株
D．最终分离筛选出的每一种杂交瘤细胞都可以产生针对多种病原体的抗体
7．人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，常作为女性是否怀孕的检测指标。某科研人员将小鼠B细胞和骨髓瘤细胞融合后，经过筛选获得能稳定分泌抗HCG单克隆抗体的杂交瘤细胞。下列相关分析正确的是（　　）
A．从注射过HCG的小鼠脾脏中获取能大量增殖的B淋巴细胞
B．该过程涉及到的技术利用的原理有细胞膜的流动性和细胞增殖等
C．B细胞与骨髓瘤细胞融合后经一次筛选即可得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞
D．将抗体检测呈阴性的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内培养或在体外条件下大规模培养
8．下图是制备抗白细胞介素-6(IL-6)单克隆抗体的示意图。下列叙述正确的是（ ）
A．步骤①给小鼠注射IL-6后，应从脾中分离筛选T淋巴细胞
B．步骤②能分离出大量产生相同抗体的单一淋巴细胞
C．步骤③加入灭活病毒或PEG诱导细胞融合，体现了细胞膜的流动性
D．步骤④经过克隆化培养和抗体检测筛选出了杂交瘤细胞
9．酶联免疫吸附技术是临床上常用的快速检测病原体感染的技术，可用于测定抗原、抗体。该技术测定抗原的工作原理如下图所示，有关叙述错误的是（　　）
A．该技术中用到的固相抗体和酶标抗体均可来自杂交瘤细胞
B．固相抗体和酶标抗体会竞争性结合抗原
C．若要检测患者是否产生了相应抗体，需将抗原固定在载体上
D．反应后，检测到的有色产物越多，说明患者感染情况越严重
10．某病毒S蛋白含有多种抗原决定簇。科研人员利用该病毒康复者血清中的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得了能分泌抗S蛋白抗体的杂交瘤细胞，用于制备抗S蛋白的单克隆抗体。下列说法错误的是（ ）
A．康复者血清中的B淋巴细胞在体外培养条件下不能大量增殖
B．可用灭活的病毒诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合
C．体外培养杂交瘤细胞时通入5%CO2的主要作用是维持培养液pH
D．经特定选择培养基筛选出的杂交瘤细胞可直接大规模培养生产目标抗体
题型三 动物体细胞核移植技术
11．引起人对猫过敏的主要过敏原是猫唾液中的Feld1蛋白。某公司通过基因编辑敲除猫成纤维细胞的Feld1基因，再经体细胞核移植等技术培育低过敏宠物猫，过程如下图所示。此过程中不涉及的操作是（ ）
A．筛选敲除Feld1基因的成纤维细胞
B．卵母细胞的采集、培养和去核处理
C．使用物理或化学方法激活重构胚
D．移植前对供受体母猫进行配型检测
12．克隆猴“中中”和“华华”的诞生过程如图所示，下列说法错误的是（　　）
A．它们的诞生应用的是克隆技术
B．它们的形态应与A猴相同
C．它们是由受精卵发育来的
D．该实验说明细胞核是细胞的控制中心
13．核移植技术除了研究生物学的基本问题外，在药物生产、优良种畜的培育和繁殖、拯救濒危动物、治疗性克隆等方面，具有重要的实际应用价值。下列关于动物细胞核移植技术应用的叙述，错误的是（　　）
A．细胞核移植技术可用于优良种畜的培育
B．细胞核移植技术的原理是动物细胞具有全能性
C．核移植技术与干细胞诱导技术结合，可用于修补人体损伤的器官
D．核移植技术可用于转基因动物的克隆，以保持转基因动物的性状
14．2017年，某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请，其培育过程可选用如下技术路线。下列叙述错误的是（ ）
A．由图可知，三亲婴儿的培育采用了动物细胞核移植技术、动物细胞培养等技术
B．母亲携带的红绿色盲基因不会遗传给“三亲婴儿”
C．采集的精子必须经过获能处理后，才能用于体外受精
D．“三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因
15．治疗性克隆有望解决供体器官短缺和免疫排斥等问题。下图为治疗性克隆的过程，有关叙述错误的是（ ）
A．细胞A常采用去核的卵母细胞
B．动物细胞的培养需提供95%空气和5%CO2的混合气体
C．胚胎干细胞分化为不同细胞的过程中发生了基因的选择性表达
D．该治疗过程应用了核移植、动物细胞培养和胚胎移植等技术
1．（2025·云南·二模）微生物菌种的高通量筛选使用含有多个小孔的微孔板为载体，结合灵敏、快速的检测仪器，实现了在同一时间对成千上万份菌株样品进行筛选。下列叙述错误的是（ ）
A．微孔板中加入特定的选择培养基可用来筛选能否产生抗体的杂交瘤细胞
B．若用微孔板培养杂交瘤细胞，需先进行稀释处理，才能用于筛选目的杂交瘤细胞
C．筛选对象可以是从自然界分离、诱变产生或通过生物技术改造的菌株
D．除了微生物菌种的高通量筛选，高通量筛选还可以用于微生物药物的筛选
2．（2025·云南·二模）某科研团队利用动物细胞工程技术构建肝脏类器官，用于药物毒性检测，其流程为：诱导小鼠多能干细胞（iPS细胞）分化为多种类型肝细胞→三维培养构建出具有生理功能的肝脏类器官→置于不同浓度的待测药物中，检测细胞活力、肝细胞内相关酶活性等指标。下列相关叙述正确的是（ ）
A．iPS细胞分裂能力强，体外培养时会细胞贴壁且不发生接触抑制
B．三维培养获得肝脏类器官所使用的气体环境通常为95%空气和5%CO2
C．应增设“肝脏类器官+不含待测药物的生理盐水”组，排除无关变量干扰
D．若培养液中谷丙转氨酶活性显著升高，则说明该药物对肝脏毒性较弱
3．（2025·湖南永州·一模）伤寒沙门氏菌的致病毒素是其细胞壁外的脂多糖（LPS）。研发LPS疫苗时常用多肽模拟LPS，两者相似程度越高，多肽与LPS竞争抗体的能力越强。科研人员用抗LPS单克隆抗体分别鉴定了多肽A、B与LPS抗原的相似程度，部分实验步骤如图a，结果如图b。下列叙述正确的是（ ）
A．抗LPS单克隆抗体的制备应从小鼠的血液中获得骨髓瘤细胞
B．与多肽结合的抗体在过程Ⅲ中会被洗脱下来
C．据图分析可知，用多肽B模拟LPS的效果较好
D．将筛选出的多肽注射到小鼠体内可激发细胞免疫和体液免疫
4．（2025·湖南永州·一模）分离患者自身的树突状细胞（DC细胞）及杀伤细胞（CIK），二者经诱导、培养及肿瘤抗原活化后回输患者体内。处理后，成熟DC细胞能有效激活细胞毒性T细胞，成熟CIK可直接识别并杀伤肿瘤细胞。下列叙述正确的是（ ）
A．体外培养细胞时，培养基需要置于含95%O2和5%CO2的气体环境
B．DC细胞和B细胞都具有摄取和加工处理抗原的能力
C．不同的CIK回输患者体内可以识别多种肿瘤细胞，但会引起免疫排斥反应
D．活化的细胞毒性T细胞清除肿瘤细胞体现了免疫系统的防御功能
5．（2025·宁夏·二模）动物细胞培养是动物细胞工程的基础，培养过程中，动物组织经处理后的初次培养称为原代培养，分瓶之后的培养称为传代培养。下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（　　）
A．无论原代培养还是传代培养，大多数细胞是悬浮在培养液中生长增殖的
B．进行分瓶培养的原因之一是贴壁细胞发生接触抑制
C．动物细胞培养液中可添加抗生素防止杂菌生长
D．进行动物细胞培养需将培养液的pH调至7.2-7.4
6．（2025·河北·三模）甲型H1N1流感病毒表面的神经氨酸酶有4个抗原决定簇，一种抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体（Ab）。由多种抗原决定簇刺激机体产生的抗体称为多克隆抗体。如图为制备多克隆抗体和单克隆抗体的示意图，下列叙述正确的是（　　）
A．诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合不能使用灭活病毒诱导法
B．①②可用相同的选择培养基培养，用相同的方法筛选
C．多克隆抗体的产生需要多种B细胞参与
D．甲型H1N1流感病毒部分抗原结构改变后，会出现多抗失效而单抗有效的情况
7．（2025·宁夏吴忠·一模）饲养细胞是指一些在体外培养中不分裂，但仍然保持代谢活性的细胞。在体外进行特定的动物细胞培养前，会先在培养基铺上一层饲养细胞，这些细胞能够分泌生长因子和其他必要的营养物质，支持目的细胞的生长。一旦培养基中目的细胞达到一定数量，饲养细胞便会逐渐死亡。下列说法正确的是（ ）
A．动物细胞培养基中除了合成成分，还需要加入动物血液等天然成分
B．动物细胞培养过程中加入的CO2是为了抑制呼吸作用，减少有机物消耗
C．饲养细胞可能经过了分裂抑制剂的处理
D．传代培养时，需要去除饲养细胞，否则将干扰目的细胞分离
8．（以3，4-DCQA为情境）随着咖啡消费水平的不断提高，咖啡内含物的生物活性功能越来越备受关注。二咖啡酰奎宁酸（3，4-DCQA）是咖啡的主要活性成分。有研究表明，3，4-DCQA能够抑制心肌细胞凋亡。某研究小组进一步进行了3，4-DCQA对心肌细胞凋亡影响的探究实验（其中TBHP能够诱导心肌细胞凋亡），部分实验数据如图所示。下列有关说法错误的是（ ）
A．进行心肌细胞培养时，可用胰蛋白酶处理心肌组织
B．Caspase-3、Bax基因高表达可能有利于抑制细胞增殖、促进细胞凋亡
C．当3，4-DCQA的浓度为10μM时，对TBHP诱导后细胞能起到一定的抗凋亡效果
D．3，4-DCQA最优给药浓度为160μM左右，当给药浓度超过160μM时抗凋亡能力下降，可能与大剂量使用产生的细胞毒性有关
9．（以ADC为情境）为降低乳腺癌化疗副作用，科研人员在单克隆抗体技术基础上构建抗体-药物偶联物（ADC），ADC通常由单克隆抗体、接头和药物组成，制备和治疗过程如图1和2。已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。小鼠淋巴细胞中有这两种途径，但一般不分裂，而骨髓瘤细胞中没有S途径，却能分裂。下列叙述错误的是（ ）
A．图1过程对小鼠进行免疫处理后，应该从该小鼠的脾脏中获取B淋巴细胞
B．若①是在含氨基蝶呤试管中促融，只考虑两两融合，则管中能增殖的细胞只有2种
C．图1中a和b分别是单克隆抗体和药物，两部分通过接头结合在一起，从而获得ADC
D．图2中ADC进入癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出药物最终作用于细胞核
10．（2025·河北保定·三模）随着再生医学的发展，科学家尝试利用细胞工程技术培育人造器官用于器官移植。下图是人造肝脏培育的部分过程，相关叙述错误的是（ ）
A．从患者肝脏组织中获取肝脏干细胞时，需使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织块，使细胞分散
B．培养肝脏干细胞时，加入的细胞因子和生长因子只能促进细胞的增殖，不能诱导细胞分化
C．培养肝脏干细胞的培养液中需添加血清等天然成分，主要为细胞提供一些未知的营养成分
D．该技术为解决器官移植供体短缺问题提供了新的途径和希望
1．（2025·江西·高考真题）诱导多能干细胞(ips细胞)在生物医药领域有广阔的应用前景。研究人员利用多种小分子化合物协同诱导小鼠胎儿成纤维细胞，成功获得ips细胞。下列叙述错误的是（　　）
A．小分子化合物改变了小鼠胎儿成纤维细胞的基因表达
B．小鼠胎儿成纤维细胞形成ips细胞的过程属于细胞分化
C．利用胰蛋白酶处理小鼠胎儿某些组织可获得分散的成纤维细胞
D．培养小鼠胎儿成纤维细胞和ips细胞时需提供一定浓度的CO2
2．（2025·广西·高考真题）科学家利用携带猪源细胞表面蛋白基因（GT）的NDV病毒靶向感染人体内癌细胞，从而强烈激活免疫系统，起到了较好的肿瘤治疗效果。下列有关说法正确的是（　　）
A．培养体外实验使用的癌细胞时，通常需添加血清
B．感染NDV-GT的癌细胞会被巨噬细胞特异性吞噬
C．经NDV-GT方法治愈的患者，体内不存在能识别GT蛋白的免疫细胞
D．人体正常细胞若被感染并表达了GT，不会被免疫系统识别为“非己”成分
3．（2025·贵州·高考真题）下图为PML蛋白单克隆抗体的制备过程。下列叙述正确的是（　　）
A．应使用总蛋白进行多次免疫且每次免疫间隔适宜时间
B．W细胞是先提取B淋巴细胞再用PML蛋白免疫而获得
C．步骤2的目的是去除不能产生特异性抗体的细胞
D．应选择孔2中的细胞进行后续处理以制备单克隆抗体
4．（2025·甘肃·高考真题）肿瘤坏死因子α（TNF-α）是一种细胞因子，高浓度时可以引发疾病。研究者利用细胞工程技术制备了TNF-α的单克隆抗体，用于治疗由TNF-α引发的疾病，制备流程如下图。下列叙述正确的是（　　）
A．①是从小鼠的血液中获得的骨髓瘤细胞
B．②含未融合细胞、同种核及异种核融合细胞
C．③需用特定培养基筛选得到大量的杂交瘤细胞
D．④需在体外或小鼠腹腔进行克隆化培养和抗体检测
5．（2025·广东·高考真题）将人眼睑成纤维细胞传代培养后，再培养形成支架，在该支架上接种人口腔黏膜上皮细胞，培养一段时间后分离获得上皮细胞片层，可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及（ ）
A．制备细胞悬液
B．置于等适宜条件下培养
C．离心收集细胞
D．用胰蛋白酶消化支架后分离片层
6．（2025·湖北·高考真题）利用犬肾细胞MDCK扩增流感病毒，生产流感疫苗，具有标准化、产量高等优点。但MDCK细胞贴壁生长的特性不利于生产规模的扩大，严重制约疫苗的生产效率。研究人员通过筛选，成功获得一种无成瘤性的（多代培养不会癌变）、可悬浮培养的MDCK细胞——XF06.下列叙述错误的是（　　）
A．XF06悬浮培养可提高细胞密度，进而提升生产效率
B．细胞贴壁生长特性的改变是由于流感病毒感染所导致
C．可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒
D．采用无成瘤性细胞生产疫苗，是为了避免疫苗中有致瘤DNA的污染
7．（2025·北京·高考真题）动物细胞培养基一般呈淡红色。某次实验时，调控pH的CO2耗尽，培养基转为黄色。由此推断使培养基呈淡红色的是（ ）
A．必需氨基酸 B．抗生素
C．酸碱指示剂 D．血清
8．（2024·福建·高考真题）我国科研团队研制出全球首个以尿液中的抗原为靶标的戊肝诊断试剂盒，该成果属于单克隆抗体在临床上的应用。下列叙述错误的是（ ）
A．该试剂盒的研制过程应用了动物细胞融合技术
B．该试剂盒的检测原理为抗原抗体的特异性结合
C．该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创伤
D．该试剂盒还可用于其他类型病毒性肝炎的检测
9．（2024·海南·高考真题）海南龙血树具有药用和观赏价值，可利用植物组织培养技术产生愈伤组织，进而获得该种植株。动物细胞融合技术可将骨髓瘤细胞和产生特定抗体的B淋巴细胞融合形成杂交瘤细胞，进而制备单克隆抗体。下列有关这两种技术的叙述，正确的是（ ）
A．利用的原理均是细胞的全能性
B．使用的培养基均需添加葡萄糖和血清
C．培养时的温度和pH均相同
D．产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力
10．（2024·江苏·高考真题）我国科学家利用人的体细胞制备多能干细胞，再用小分子TH34成功诱导衍生成胰岛B细胞。下列相关叙述错误的是（ ）
A．基因选择性表达被诱导改变后，可使体细胞去分化成多能干细胞
B．在小分子TH34诱导下，多能干细胞发生基因突变，获得胰岛素基因
C．衍生的胰岛B细胞在葡萄糖的诱导下能表达胰岛素，才可用于移植治疗糖尿病
D．若衍生的胰岛B细胞中凋亡基因能正常表达，细胞会发生程序性死亡
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