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1.2微生物的基本培养技术
（第一课时）
向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌，再经过发酵就可以制成酸奶。一般家庭自制酸奶可能会导致肠胃不适，主要原因是有杂菌混入。 那么怎么才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢？
这需要应用无菌技术和微生物的培养技术
从社会中来
微生物
指一切肉眼看不见或看不清楚的个体微小、结构简单的微小生物的总称。
微生物
原核:
真核
非细胞类：
细菌、放线菌、支原体、蓝藻等
酵母菌、霉菌等
真菌：
原生生物：
病毒、类病毒等
草履虫、变形虫、衣藻等
实验室培养微生物条件
1）提供微生物生长繁殖所需营养和环境条件
2）确保其它微生物无法混入
培养基
无菌技术
动物需从食物中获得物质
和能量，植物也需吸收水
等才能进行光合作用，哪
微生物生存繁殖，需要“吃”什么？
一.培养基
1.阅读教材P9-10相关内容。
2.思考下列问题：
（1）培养基的作用有哪些？
（2）培养基中要包含哪营养物质？
（3）培养基的种类有哪些？
1.基本成分：
⑴碳源
无机碳源：
有机碳源：
CO2、CO32-、HCO3-
牛肉膏、蛋白胨等
自养微生物
异养微生物
一.培养基
人们按照微生物对营养物质的不同需求，配置出的供其生长繁殖的营养基质。
水、碳源、氮源、无机盐
⑵氮源
无机氮源：
有机氮源：
NH4＋、NO3- 、N2 等
牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等
含CHON的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源
2.特殊营养：
维生素、碱基等（生长因子）
（牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有）
3.pH、氧气的需求：
在满足四种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物对_____、_____________以及_______的特殊要求
pH
特殊营养物质
氧气
（1）液体培养基
（2）固体培养基
配制成的液体状态的基质
在液体培养基中加入凝固剂（如琼脂），配制成的固体状态的基质。琼脂固体培养基是实验室中最常用的培养基之一。
按物理属性分类
4.种类：
加凝 固剂
琼 脂
按用途分类
①选择性培养基：
允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基
是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物。
②鉴别培养基：
快速鉴别培养基
牛肉膏蛋白胨培养基
是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基
分析营养构成？
二、无菌技术
获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵
使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）
消毒
用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子
灭菌
1.阅读教材P10-11相关内容。
2.思考下列问题：
（1）消毒与灭菌的目的是什么？
（2）消毒与灭菌的区别是什么？
（3）消毒与灭菌的对象有哪些？
（4）消毒有哪些方法？
（5）灭菌常见的方法有哪些？
泛指在培养微生物的操作中，避免杂菌污染的方法
无菌技术
①煮沸消毒法：
②巴氏消毒法：
③化学药剂消毒法：
④紫外线消毒法：
100℃煮沸5-6min
70-75℃下煮30min 或 80℃下煮15min（适用于不耐高温的液体）
酒精擦拭双手、氯气用于水源消毒等
（如超净工作台）
紫外线照射30min杀死物表或空气的微生物
★消毒★
100KPa，121℃下维持15-30min
★灭菌★
①湿热灭菌：
高压蒸汽灭菌：效果最好
流通蒸汽
沸水：
②干热灭菌
适用于能耐高温、需要保持干燥的物品160-170℃加热1-2小时。
③灼烧灭菌：
接种工具、试管口等易被污染物品或部位
1.细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理方法，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌（ ）
A．接种针、手、培养基
B．高压锅、手、接种针
C．培养基、手、接种针
D．接种针、手、高压锅
2.下列关于微生物的营养的说法,正确的是(　 )
A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源
B.凡是碳源都能提供能量
C.除水以外的无机物仅提供无机盐
D.无机氮源也可能提供能量
C
D
3、牛肉膏蛋白胨固体培养基叙述正确是（ ）
A．牛肉膏和蛋白胨都能提供碳源、氮源、磷酸盐、维生素
B．牛肉膏蛋白胨培养基需经高压蒸汽灭菌后调节pH
C．该培养基配方中，有机物含量多、无机盐含量少
D．该培养基中加入少量水即可制成液体培养基
C
4．下列是与微生物培养有关的问题，请回答：
（1）某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是_______，碳源是_________,氮源是______。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于_______培养基。从同化作用类型看，用该培养基培养的细菌属于______。
（2）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_____________和______________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯______附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
琼脂
葡萄糖
尿素
选择
异养型
干热灭菌
高压蒸汽灭菌
火焰
5.在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题：
(1)在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具_____(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是______________________。
(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒，其原因是紫外线能________________， 在照射前，适量喷洒________，可强化消毒效果。
(4)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是_________________________。
可以
在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少
破坏 DNA 结构
消毒液
未将锅内冷空气排尽
微生物的纯培养
1.概念：
包括配置培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。
在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体
由单一个体繁殖所获得的微生物群体
获得纯培养物的过程
纯培养步骤：
培养物
纯培养物
纯培养
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