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24级高二学期期中校校联考
生物试题
一、单选题 （每题3分，共45分）
1．进行土壤中尿素分解菌的选择培养时，利用的培养基组分及含量如表所示。下列分析错误的是（ ）
组分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 H2O
含量 1.4g 2.1g 0.2g 10.0g 1.0g 15.0g 定容至1000mL
A．KH2PO4和Na2HPO4既可为菌体提供无机盐，又可调节培养基的pH
B．尿素既可为尿素分解菌提供氮源，又可对培养基中的微生物起选择作用
C．蒸馏水既可进行定容，又可对培养液进行稀释以便于计数
D．琼脂一般不可以为尿素分解菌提供碳源，只起到凝固剂的作用
2．精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长，但可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得精氨酸依赖型菌并进行筛选的过程示意图，过程①将紫外线照射处理过的菌液接种在培养基甲上，培养至菌落不再增加时，平板上的菌落如图所示。过程②向培养基甲中添加某种物质，继续培养。下列相关叙述正确的是（ ）

A．实验过程中用到的培养基和培养皿必须采用高压蒸汽灭菌法灭菌
B．从培养基乙中挑选菌落，用平板划线法接种在培养基上可分离出单菌落
C．培养基甲是一种选择培养基，过程②向培养基甲中添加鸟氨酸
D．菌落A是诱变产生的精氨酸依赖型菌种，为鸟氨酸发酵的优良菌种
3．《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢(‘酢’同‘醋’)法”的酿醋工艺：“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣(指菌膜)生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成。”下列叙述错误的是（ ）
A．“衣”位于变酸的酒表面，是由原酒中的酵母菌大量繁殖形成的
B．加水的目的是对酒进行稀释，避免渗透压过高杀死醋酸菌
C．该方法依据的原理是醋酸菌在氧气充足、糖源缺乏时将酒精转化为乙酸
D．“挠搅”有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧
4．猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）是一种对猪群具有高度传染性的病毒。GP3蛋白是PRRSV的重要抗原之一，能够诱导宿主产生特异性的免疫应答。为了对PRRSV进行快速检测，科研人员制备了PRRSV－GP3蛋白的单克隆抗体，过程如图所示。下列分析错误的是（ 　　）
A．将GP3蛋白注射到小鼠体内是为了获取能分泌抗GP3蛋白抗体的B细胞
B．培养细胞乙的培养基通常是加入了血清等天然成分的固体培养基
C．第1次筛选得到的细胞丙既能迅速大量增殖，又能产生抗体
D．第2次筛选可用多孔板对单个的杂交瘤细胞进行培养及抗体检测
5．下列有关生物技术与工程的叙述，正确的有几项（　 　）
①在发酵工程的发酵环节中，发酵条件的变化不仅会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物的代谢途径
②获取单细胞蛋白可采用提取、分离和纯化等措施
③农业生产上使用微生物农药防治病虫害，属于化学防治
④在进行体外受精时，需要使精子获能
⑤进行胚胎移植前，要对供体和受体进行免疫检查，以防止发生免疫排斥反应
⑥在DNA粗提取和鉴定实验中，用滤纸来滤研磨液
A．一项 B．两项 C．三项 D．四项
6．“筛选”是生物技术与工程中重要的环节。下列相关叙述正确的是（ ）
A．在添加尿素的马铃薯琼脂培养基上可筛选出能分解尿素的细菌
B．只要筛选出含有抗冻基因的番茄细胞，就代表抗冻番茄培育成功
C．取内细胞团细胞进行性别鉴定，可筛选出胚胎用于制备动物乳腺生物反应器
D．在临床试管婴儿术中，需利用遗传学诊断的方法筛选出所需的胚胎进行移植
7．下图表示基因工程中构建生产人乳铁蛋白的重组载体。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamH I、Hind Ⅲ、Sma I直线所示为三种限制酶的酶切位点（三种限制酶的识别序列和切割位点均不相同）。图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用几种限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因 为筛选出含有重组载体的大肠杆菌单菌落一般要连续进行两次培养，已知第二次是对第一次培养筛选出的菌落继续培养，则第二次需要在含哪种抗生素的固体培养基上进行（ ）
A．1种、四环素 B．1种、氨苄青霉素
C．2种、四环素 D．2种、氨苄青霉素
8．研究发现，大豆GmNF-YA19基因在干旱胁迫中有响应。科研人员利用PCR扩增GmNF-YA19基因，构建GmNF-YA19基因表达载体并转化烟草，实验过程如图1、2所示。下列说法正确的是（ ）
A．PCR扩增GmNF-YA19基因的前提是根据已知核苷酸序列合成一种引物
B．为获得能正确表达目的基因的重组质粒，应选用限制酶KpnⅠ、EcoRⅠ进行切割
C．终止子为一段DNA序列，其作用是使翻译在所需要的地方停下来
D．重组质粒转化烟草后，可使用含氨苄青霉素的培养基来筛选目的细胞
9．如图表示植株A（杂合子Aa）和植株B培育植株①②③④⑤的过程，下列说法正确的是（ ）
A．培育植株①的过程为单倍体育种，获得的植株为纯合子
B．选择植物的愈伤组织进行诱变处理获得优质的突变体，未体现细胞的全能性
C．需要通过植物组织培养技术获得的植株只有①③④
D．植株②③④与植株A是同一物种，⑤植株与植株A不是同一物种
10．人神经生长因子（hNGF）是一种对人的神经性疾病具有良好治疗作用的蛋白，国内科研团队利用基因编辑技术并结合细胞克隆制备了在唾液腺中特异高效表达hNGF蛋白的转基因猪，下图表示其生产流程。下列相关叙述正确的是（　 　）
A．从猪卵巢中采集卵母细胞后需培养到MⅠ期再利用显微操作技术去除细胞核
B．获得的重构胚需用电刺激、Ca2+载体和聚乙二醇等激活才能完成细胞分裂和发育进程
C．制备唾液腺生物反应器时，需对滋养层细胞做DNA分析筛选出所需的雌性胚胎
D．为使hNGF基因在唾液腺中高效表达，可将其与唾液淀粉酶基因的启动子等调控序列连接
11．现代生物工程的操作常常涉及如下图所示的流程，下列有关叙述正确的是（　 　）
A．若为植物体细胞杂交流程，常用灭活的病毒诱导①和②细胞的融合
B．若为动物体细胞核移植技术，融合得到的细胞③需培养到桑葚胚或囊胚时期再移植
C．若为胚胎移植技术的流程，④早期胚胎仅来源于体外受精或核移植
D．若为试管牛的生产流程，则获得①精子后可直接与②进行体外受精
12．高尔基体是有“极性”的，构成高尔基体的膜囊有顺面、中间和反面三部分。顺面接受由内质网合成的物质并转入中间膜囊进一步修饰加工，反面参与溶酶体酶（具有M6P标记）等蛋白质的分类和包装。下图是发生在高尔基体反面的3条分选途径。下列叙述错误的是（ ）

A．组成型分泌可能有利于物质的跨膜运输
B．可调节性分泌离不开细胞间的信息交流
C．M6P受体数量减少会抑制衰老细胞器的分解
D．高尔基体膜上的蛋白质全部处于流动状态中
13．研究发现，分泌蛋白的合成起始于游离的核糖体，合成的初始序列为信号序列，当它露出核糖体后，在信号识别颗粒的引导下与内质网膜上的受体接触，信号序列穿过内质网的膜后，蛋白质合成继续，并在内质网腔中将信号序列切除。合成结束后，核糖体与内质网脱离，重新进入细胞质。基于以上事实的推测，正确的是（ ）
A．核糖体与内质网的结合依赖于生物膜的流动性
B．附着在内质网上的核糖体合成的蛋白质都是分泌蛋白
C．用3H标记亮氨酸的羧基可追踪上述分泌蛋白的合成和运输过程
D．控制信号序列合成的基因片段发生突变可能不会影响该蛋白的继续合成
14．一项来自某大学的研究揭示了体内蛋白分选转运装置的作用机制，即为了将细胞内的废物清除，细胞膜塑形蛋白会促进囊泡（分子垃圾袋）形成，将来自细胞区室表面旧的或受损的蛋白质带到了内部回收利用工厂，在那里将废物降解，使组件获得重新利用。下列正确的是（ ）
A．细胞膜塑形蛋白在合成过程中，场所由核糖体提供，动力可由叶绿体提供
B．“分子垃圾袋”应主要由磷脂和蛋白质构成
C．“回收利用工厂”可能是溶酶体，“组件”可能是核苷酸
D．人体细胞内能形成囊泡的细胞器有内质网、高尔基体和中心体等
15.下图装置的b中是蒸馏水，半透膜允许单糖透过。a中先加入蔗糖溶液，一定时间后再加入蔗糖酶。最可能的实验现象是（ ）
A.在b中会测出葡萄糖、果糖和蔗糖酶
B.a中液面开始时上升，加酶后继续上升
C.a中液面开始时上升，加酶后，再上升后又下降
D.a中液面开始时先上升，加酶后不上升直接下降
二、解答题（5个大题，共55分）
16．（每空1分，共10分）细胞具有一套调控“自身质量”的生理过程，通过细胞自噬以确保自身生命活动的稳态。
(1)多肽链在 上合成，多肽链只有折叠成正确的 ，才具有正常的生物学功能。若发生错误折叠，则无法从内质网运输到 而导致在细胞内过多堆积。
(2)错误折叠的蛋白质会聚集，影响细胞的功能，细胞内损伤的线粒体等细胞器也会影响细胞的功能。研究发现，细胞通过下图所示机制进行调控。
①错误折叠的蛋白质会被 标记，被标记的蛋白会与 结合，被包裹进 ，最后融入溶酶体中。
②损伤的线粒体也可被标记，并最终与溶酶体融合，其中的生物膜结构在溶酶体中可被降解并释放出 、磷脂（甘油、磷酸及其他衍生物）和单糖等物质。细胞器之间存在由 组成的细胞骨架，锚定并支撑着各种细胞器。
(3)细胞通过上述过程对蛋白质和细胞器的质量进行精密调控，其意义是 （多选，选填字母）。
a．加快新陈代谢，促进物质排出细胞外
b．减少细胞内功能异常的蛋白质和细胞器，避免它们对细胞生命活动产生干扰
c．降解产物可被细胞重新利用，可节约物质进入细胞消耗的能量
(4)酵母菌的线粒体在饥饿、光照、自由基的攻击等条件下会损伤，进而出现“自噬”现象。“自噬”过程中线粒体会被双层膜包裹而成为“自噬体”，进而与溶酶体结合形成“自噬溶酶体”。下列关于线粒体自噬过程的叙述，不正确的是_______。
A．引起线粒体自噬的自由基若攻击蛋白质可导致其活性下降，攻击DNA可引起基因突变
B．“自噬体”和溶酶体结合形成“自噬溶酶体”的过程，体现了膜的选择透过性
C．若酵母菌所有线粒体完全“自噬”，则细胞呼吸产物积累会毒害细胞
D．线粒体自噬后形成的产物无用部分被排出细胞，避免对细胞造成损伤
17．（除标注外，每空1分，共12分）卡拉胶是一种大分子聚合物硫酸多糖，溶解性较差，可被卡拉胶酶降解。降解产物具有多种生物活性，如抗炎、抗凝血等，在食品、医药等领域具有广阔的应用前景。科研人员利用腐烂的角叉菜为材料，筛选了高产卡拉胶酶菌株，过程如图。
(1)筛选高产卡拉胶酶菌株的培养基为选择培养基，该种培养基的功能是 。（2分）
(2)从试管⑤中分别取0.2ml稀释液，涂布在三个完全培养基上，培养72小时后，三个培养基上的菌落数分别为：56、59、62，推测腐烂角叉菜液中菌株数为 个/mL。（2分）培养基中的卡拉胶被卡拉胶酶降解，在菌落周围形成透明圈。初筛培养基a的菌落分布如图，进一步纯化培养菌株时，应挑取图中的菌落是 （2分）（填字母），请说明理由 。（2分）
(3)复筛培养基b的接种方式是 。接种时，接种环应先在酒精灯上灼烧，冷却后再接种，原因是 （2分）。接种环在接种过程中需要灼烧的次数是 。
18．（除标注外，每空1分，共10分）克隆猫“大蒜”是我国首例完全自主培育的克隆猫，其培育过程如图所示。请回答下列有关问题：
(1)进行过程①和③时，通常将细胞置于 CO2培养箱中进行培养，CO2的作用是 。
(2)据图可知，克隆猫“大蒜”培育过程用到了 、 和 等技术。
(3)采集到的卵母细胞需在体外培养到 （填时期），然后可用 法去核。
(4)过程②通常用去核卵母细胞作受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为它的细胞质中可能含有 。（2分）
(5)克隆猫“大蒜”与死亡的猫“大蒜”的性状并不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是 。（2分）
19．（除标注外，每空2分，共14分）非洲猪瘟病毒（ASFV）主要感染猪的单核巨噬细胞系统，包括肺泡巨噬细胞。它会在肺泡巨噬细胞内复制增殖，进而导致发病。科研人员将Gluc（高斯荧光素酶）基因和EGFP（增强型绿色荧光蛋白）基因（两基因合计968bp）融合到ASFV病毒的K基因（大小为790 bp）中，构建出重组ASFV。已知Gluc能够催化底物产生荧光，EGFP能发出绿色荧光。通过这种双重标记策略，科研人员能对细胞内的病毒实时追踪，更深入地了解ASFV在细胞内的感染过程、传播路径以及致病机制。根据资料及所学内容，回答下列问题：
(1)构建出图1所示的融合基因，需要借助的工具酶有 。使用HindⅢ和BamHI两种酶同时进行切割的目的是 。
(2)科研人员提取重组病毒的DNA，应选用引物 组合进行PCR扩增，并通过如图2所示 （1分）技术对产物进行鉴定，其中条带 （1分）（填“1”或“2”）的出现可说明标记基因（Gluc和EGFP）已插入到ASFV的K基因中。
(3)科研人员将猪肺泡巨噬细胞（PAMS）培养一段时间后，平均分成A、B两组，其中A组接种普通ASFV，B组接种重组ASFV，放入含 （填气体条件）的恒温培养箱中培养48h。对两组细胞进行观察和检查，预测结果为： 。
(4)除了上述的观察和检测外，若还需检测该猪是否产生了ASFV抗体，还可采用的检测方法是 。
20．（除标注外，每空1分，共9分）木质纤维素是地球上最为丰富的可再生资源。中国科学家利用基因工程的方法构建了嗜热厌氧杆菌H，以花生壳、玉米芯等为原料发酵生产生物燃料乙醇，以期提高农业废弃物的整体利用价值。据此回答下列问题：
(1)研究者将取样器放入温泉底部取样，利用厌氧技术将样品稀释液接种到以纤维素为 的选择培养基中，在适宜条件下培养一段时间，加入刚果红后，出现 的即为初步筛选所得的降解纤维素的嗜热厌氧杆菌菌落。
(2)基于嗜热厌氧杆菌的特殊代谢能力（图a），研究人员构建了双功能醇醛脱氢酶基因（Adh）的过量表达载体，图b为构建表达载体时所需的关键条件。

①为保证双功能醇醛脱氢酶基因（Adh）能通过双酶切以正确方向插入质粒，需设计引物1和引物2，其中引物1包含图b中限制酶 的识别序列，且该序列位于引物1的 （填“5’端”或“3’端”）。
②将重组表达载体导入嗜热厌氧杆菌，然后置于含有 的选择培养基中进行筛选，经鉴定及扩大培养得到工程菌H。
(3)将构建的工程菌H进行摇瓶发酵，结果发现乙醇产量提高，副产物乙酸产量下降。结合其代谢途径，分析出现这种结果的原因 。（2分）
(4)嗜热厌氧杆菌最适生长温度为55～75℃，产物乙醇在温度超过50℃即可快速蒸馏出。相对于传统的发酵菌株，利用嗜热厌氧杆菌发酵产乙醇主要的优势有 （写出两点即可）。（2分）
24级高二学期期中校校联考
生物答案
1-5 CBABB 6-10 DCDDD 11-15 BDDBC
16.
【答案】(1) 核糖体 空间结构 高尔基体
(2) ① 泛素 自噬受体 吞噬泡 ② 氨基酸 蛋白质纤维
(3)b、c (4)B
17.
【答案】(1) 抑制杂菌生长，允许产卡拉胶酶的菌株生长
(2) 2.95×1012 菌落C 菌落小而透明圈大，说明该菌株产生卡拉胶酶的效率（或酶的活性）更高
(3) 平板划线法 先灼烧是杀死接种环上的杂菌，后冷却是避免接种环温度过高杀死接种的菌种 6
18.【答案】(1)维持（调节）培养液的pH
(2) 动物细胞培养 核移植 胚胎移植
(3) MII期 显微操作 (4)含有促进细胞核全能性表达的物质
(5)卵母细胞的细胞质遗传物质（基因）会对克隆猫的性状产生影响
19.
【答案】(1) 限制酶（HindⅢ和BamHI）和DNA连接酶 使目的基因（Gluc和EGFP）和载体（ASFV-K）定向连接（或减少目的基因及载体自连、增大目的基因正向连接的概率）
(2) 1和4 琼脂糖凝胶电泳（或电泳） 2
(3) 5%CO2（或5%CO2和95%空气） B组可观察到绿色荧光，检测到荧光素酶有活性；A组无荧光，荧光素酶无活性（或B组细胞变绿，有荧光产生；A组细胞不变绿，无荧光产生）
(4) 抗原—抗体杂交
20.
【答案】(1) 为唯一碳源 透明圈
(2) KpnI 5’端 红霉素
(3)Adb基因过量表达的Adh酶增多，与P酶竞争结合乙酰辅酶A
(4)①高温发酵可杀灭杂菌或抑制杂菌的生长，从而减少发酵污染；②高温能够促进乙醇的回收，有利于连续蒸馏；③嗜热厌氧菌在大规模培养时不需要供氧；④高温环境下微生物代谢活性及产物转化率较高。
试卷第10页，共10页

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