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练真题(九)　生物技术与工程
(建议用时：35分钟；本套共19小题，每小题3分，共57分。)
1．(2025·甘肃卷T15)我国葡萄酒酿造历史悠久、传统发酵技术延续至今。发酵工程通过选育菌种和控制发酵条件等措施可优化传统发酵工艺，改善葡萄酒品质。下列叙述错误的是(　　)
A．传统发酵时，葡萄果皮上的多种微生物参与了葡萄酒的发酵过程
B．工业化生产时，酵母菌需在无氧条件下进行扩大培养和酒精发酵
C．通过诱变育种或基因工程育种能够改良葡萄酒发酵菌种的性状
D．大规模发酵时，需要监测发酵温度、pH值、罐压及溶解氧等参数
2．(2025·江苏卷T11)从种植草莓的土壤中分离致病菌，简易流程如下：制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是(　　)
A．制备的培养基可用紫外线照射进行灭菌
B．将土样加入无菌水混匀，梯度稀释后取悬液加入平板并涂布
C．连续划线时，接上次划线的起始端开始划线
D．鉴定后的致病菌，可接种在斜面培养基上，并在室温下长期保存
3．(2025·四川卷T6)研究人员用花椰菜(BB，2n＝18)根与黑芥(CC，2n＝16)叶片分别制备原生质体，经PEG诱导融合形成杂种细胞，进一步培养获得再生植株，其中的植株N经鉴定有33条染色体。下列叙述正确的是(　　)
A．两个原生质体融合形成的细胞即为杂种细胞
B．再生植株N的形成证明杂种细胞仍具有全能性
C．花椰菜和黑芥的原生质体能融合，证明两种植物间不存在生殖隔离
D．植株N的B组和C组染色体不能正常联会配对，无法产生可育配子
4．(2025·黑吉辽蒙卷T8)利用植物组织培养技术获得红豆杉试管苗，有助于解决紫杉醇药源短缺问题。下列叙述正确的是(　　)
A．细胞分裂素和生长素的比例会影响愈伤组织的形成
B．培养基先分装到锥形瓶，封口后用干热灭菌法灭菌
C．芽原基细胞由于基因选择性表达，不能用作外植体
D．紫杉醇不能通过细胞产物的工厂化生产来获取，植物组织培养优势明显
5．(2025·云南卷T14)孕酮具有促进子宫内膜增生，为受精卵着床做准备的作用。某奶牛场发现一头高产奶量母牛生产两胎后重复配种均未成功妊娠，该牛可正常排卵但孕酮量低于正常母牛。为获得该母牛的后代，下列说法正确的是(　　)
A．运用体外受精或人工授精技术可提高该牛的妊娠率
B．使用外源促性腺激素处理该牛获得更多卵子进而可获得多枚胚胎
C．体外受精或人工授精后形成受精卵移植到健康受体可提高存活率
D．使用该牛MⅡ期卵母细胞的细胞核进行核移植可获得可育后代
6．(2025·广东卷T5)将人眼睑成纤维细胞传代培养后，再培养形成支架，在该支架上接种人口腔黏膜上皮细胞，培养一段时间后分离获得上皮细胞片层，可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及(　　)
A．制备细胞悬液
B．置于5% CO2等适宜条件下培养
C．离心收集细胞
D．用胰蛋白酶消化支架后分离片层
7．(2025·山东卷T14)利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过程如图所示，下列说法错误的是(　　)
A．对牛乙注射促性腺激素是为了收集更多的卵母细胞
B．卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅰ中期进行
C．培养牛甲的体细胞时应定期更换培养液
D．可用PCR技术鉴定犊牛丁是否为转基因牛
8．(2025·重庆卷T4)为保护濒危哺乳动物甲，科研工作者将甲的近亲物种乙(种群数量多)进行了如图所示的研究，下列叙述正确的是(　　)
A．克隆动物的核基因组来源于甲、乙
B．体外受精需用获能的精子与MⅠ期的卵母细胞受精
C．囊胚①的内细胞团可发育为胎盘、个体
D．滋养层可影响内细胞团的发育
9．(2025·江苏卷T7)梅花鹿和马鹿杂交后代生命力强、茸质好，但自然杂交很难完成，人工授精能解决此难题。胚胎工程技术的应用，可提高繁殖率，增加鹿场经济效益。下列相关叙述合理的是(　　)
A．采集的精液无需固定、稀释，即可用血细胞计数板检测精子密度
B．人工授精时，采集的精液经获能处理后才能输入雌性生殖道
C．超数排卵处理时，常用含促性腺激素的促排卵剂
D．母体子宫对胚胎的免疫耐受性低下是胚胎移植的生理学基础
10．(2025·黑吉辽蒙卷T9)研究显示，约70%的小鼠体细胞核移植胚胎未能成功发育至囊胚期，且仅有约2%的胚胎移植到代孕母鼠后可正常发育。下列叙述错误的是(　　)
A．体细胞核进入去核的MⅡ期卵母细胞形成重构胚
B．移植前胚胎发育率低，可能是植入的体细胞核不能完全恢复分化前的功能状态
C．胚胎移植到代孕母鼠后成活率低，可能是早期胚胎未能及时从滋养层内孵化
D．为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植
11．(2025·江苏卷T19改编)图示人体正常基因A突变为致病基因a及Hind Ⅲ切割位点。AluⅠ限制酶识别序列及切割位点为，下列相关叙述正确的是(　　)
A．基因A突变为a是一种碱基增添的突变
B．用两种限制酶分别酶切A基因后，形成的末端类型相同
C．用两种限制酶分别酶切a基因后，产生的片段大小一致
D．产前诊断时，该致病基因可选用Hind Ⅲ限制酶开展酶切鉴定
12．(2025·陕晋宁青卷T7)科研人员通过对绵羊受精卵进行基因编辑和胚胎移植等操作，获得了羊毛长度显著长于对照组的优良品系。下列叙述错误的是(　　)
A．为获取足够的卵子，需对供体绵羊注射促性腺激素进行超数排卵处理
B．为确保受体绵羊与供体绵羊生理状态一致，需进行同期发情处理
C．受精卵发育至桑葚胚阶段，细胞数量和胚胎总体积均增加
D．对照组绵羊的选择需考虑年龄、性别等无关变量的影响
13．(2025·四川卷T8)微塑料由塑料废弃物风化形成，难以降解，会危害生态环境和人体健康。有人分离到X和Y两种微塑料降解菌，将总菌量相同的X、Y、X＋Y(X∶Y＝1∶1)分别接种于含有等量微塑料的蛋白胨液体培养基中，培养一段时间后测定微塑料的残留率(残留率＝剩余量/添加量×100%)，结果如下图。下列叙述正确的是(　　)
A．用平板划线法能测定X菌组中的活菌数
B．Y菌组微塑料残留率较高，故菌浓度也高
C．混合菌种对微塑料的降解能力高于单一菌种
D．能在该培养基中生长、繁殖的微生物都能降解微塑料
14．(2024·江西卷T12)γ-氨基丁酸在医药等领域有重要的应用价值。利用L-谷氨酸脱羧酶(GadB)催化L-谷氨酸脱羧是高效生产γ-氨基丁酸的重要途径之一。研究人员采用如图方法将酿酒酵母S的L-谷氨酸脱羧酶基因(gadB)导入生产菌株E．coli A，构建了以L-谷氨酸钠为底物高效生产γ-氨基丁酸的菌株E．coli B。下列叙述正确的是(　　)
A．上图表明，可以从酿酒酵母S中分离得到目的基因gadB
B．E．coli B发酵生产γ-氨基丁酸时，L-谷氨酸钠的作用是供能
C．E．coli A和E．coli B都能高效降解γ-氨基丁酸
D．可以用其他酶替代NcoⅠ和KpnⅠ构建重组质粒
15．(2024·湖南卷T5)某同学将质粒DNA进行限制酶酶切时，发现DNA完全没有被酶切，分析可能的原因并提出解决方法。下列叙述错误的是(　　)
A．限制酶失活，更换新的限制酶
B．酶切条件不合适，调整反应条件如温度和酶的用量等
C．质粒DNA突变导致酶识别位点缺失，更换正常质粒DNA
D．酶切位点被甲基化修饰，换用对DNA甲基化不敏感的限制酶
16．(2024·天津卷T5)胰岛素的研发走过了：动物提取—化学合成—重组胰岛素生产—胰岛素类似物生产等历程。有关叙述错误的是(　　)
A．动物体内胰岛素由胰岛B细胞合成并胞吐出细胞
B．氨基酸是化学合成胰岛素的原料
C．用大肠杆菌和乳腺生物反应器生产胰岛素需相同的启动子
D．利用蛋白质工程可生产速效胰岛素等胰岛素类似物
17．(2024·湖北卷T11)植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如下图所示。下列叙述错误的是(　　)
A．过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异
B．过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合
C．过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素
D．可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株
18．(2024·甘肃卷T16)甘加藏羊是甘肃高寒牧区的优良品种，是季节性发情动物，每年产羔一次，每胎一羔，繁殖率较低。为促进畜牧业发展，研究人员通过体外受精、胚胎移植等胚胎工程技术提高藏羊的繁殖率，流程如下图。下列叙述错误的是(　　)
A．藏羊甲需用促性腺激素处理使其卵巢卵泡发育和超数排卵
B．藏羊乙的获能精子能与刚采集到的藏羊甲的卵母细胞受精
C．受体藏羊丙需和藏羊甲进行同期发情处理
D．后代丁的遗传物质来源于藏羊甲和藏羊乙
19．(2024·新课标卷T5)某种二倍体植物的P1和P2植株杂交得F1，F1自交得F2。对个体的DNA进行PCR检测，产物的电泳结果如图所示，其中①～⑧为部分F2个体，上部2条带是一对等位基因的扩增产物，下部2条带是另一对等位基因的扩增产物，这2对等位基因位于非同源染色体上。下列叙述错误的是(　　)
A．①②个体均为杂合体，F2中③所占的比例大于⑤
B．还有一种F2个体的PCR产物电泳结果有3条带
C．③和⑦杂交子代的PCR产物电泳结果与②⑧电泳结果相同
D．①自交子代的PCR产物电泳结果与④电泳结果相同的占1/2
刷模拟(九)　生物技术与工程
(建议用时：35分钟；本套共15小题，每小题3分，共45分。)
1．(2025·江西赣州适应性检测)我国古代著作《天工开物》中有关于酒曲的制作过程：“……造者将麦连皮，井水淘净，晒干，时宜盛暑天。磨碎，即以淘麦水和作块，用楮叶包扎，悬风处，或用稻秸罨黄(稻草覆盖使其变黄)，经四十九日取用……”。下列叙述错误的是(　　)
A．利用酒曲酿酒时，糖的分解与代谢物的生成主要在无氧条件下完成
B．“将麦连皮，井水淘净”可避免麦皮破损，减少被杂菌污染的机会
C．“以淘麦水和作块”为酒曲的制作提供了天然野生菌种和少量营养
D．“稻秸罨黄”可保温保湿，是为了利于酵母菌、黄曲霉等微生物生长
2．(2025·湖北武昌质量检测)谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0，通过以下代谢途径发酵生产L-谷氨酰胺。下列叙述正确的是(　　)
A．提高谷氨酸脱氢酶和谷氨酸合成酶的活性有利于提高L-谷氨酰胺产量
B．发酵初期控制pH为7.0，后调为5.6，有利于提高L-谷氨酰胺产量
C．通过稀释涂布平板法，不能判断发酵过程中是否发生球状细菌污染
D．发酵结束后，采用过滤、沉淀的方法将菌体分离和干燥即可获得产品
3．(2025·重庆一中模拟)物质X是一种有害的难以降解的有机化合物。研究人员用含物质X、磷酸盐、镁盐以及微量元素溶液按照一定比例配制成培养基M，经过一系列培养、筛选，成功得到能高效降解物质X的目的菌株，主要步骤如图所示。下列说法错误的是(　　)
A．培养基M是选择培养基，物质X为目的菌株提供生长所需的氮源和碳源
B．振荡培养有利于目的菌株充分利用培养基中的营养物质
C．在④接种时，用平板划线法纯化目的菌株的效果比稀释涂布平板法差
D．在②接种培养后，用瓶中物质X含量最低的候选菌作为③选择接种对象
4．(2025·贵州铜仁质检)某种臭豆腐制作时需要将豆腐浸入含有乳酸菌、芽孢杆菌等微生物的卤汁中发酵。随着市场发展，人们逐渐开始尝试运用发酵罐生产臭豆腐。下列叙述错误的是(　　)
A．发酵过程中豆腐所含的蛋白质被分解成小分子的肽和氨基酸
B．发酵过程中乳酸菌会利用豆腐中的营养物质产生乳酸和CO2
C．发酵工程制作卤汁的菌种可从传统卤汁中进行选育
D．利用发酵罐生产臭豆腐更有利于发酵条件的控制
5．(2025·四川成都石室中学模拟)甲植物细胞的核基因具有耐盐碱效应，乙植物细胞的质基因具有高产效应。某研究小组用甲、乙两种植物(均为二倍体)进行体细胞杂交相关研究，最终获得了高产、耐盐碱的杂种植株丙，其基本操作流程如图。为获得目的植株，下列相关操作正确的是(　　)
A．对外植体消毒时，使用体积分数为95%的酒精比70%的酒精消毒效果更好
B．过程A可用纤维素酶和果胶酶处理，且在低渗溶液中进行以防止失水死亡
C．过程C中需用聚乙二醇(PEG)来诱导原生质体再生出新的细胞壁
D．过程D通常不需光照，形成的杂种植株还需做个体水平鉴定才能筛选出目的植株
6．(2025·福建龙岩质检)DHA俗称脑黄金，是构成人脑神经细胞膜的成分，若摄入不足会造成心脑血管方面的疾病。科研人员利用富含DHA但生长缓慢的绿色巴夫藻和不含DHA但生长迅速的四鞭藻，培育出DHA含量高又生长迅速的融合藻株，下列有关培育过程的叙述正确的是(　　)
A．细胞融合之前必须用胰蛋白酶处理两种藻，获得有活力的原生质体
B．两种原生质体融合成功的标志是观察到细胞核融合
C．细胞融合实验完成后，融合体系中含有的细胞类型有3种
D．通过第一次筛选获得的融合藻株还需进行克隆化培养和DHA检测
7．(2025·福建莆田质检)组蛋白H3是组成染色体的重要蛋白，其修饰方式不同可影响胚胎发育。我国科研人员进行体细胞核移植时，向重构胚细胞中注入去甲基化酶的mRNA，同时用酶抑制剂TSA处理，可改变组蛋白H3的修饰，“唤醒”相关基因的表达，成功培育出了第一批灵长类动物——食蟹猴，相关机理如图所示。下列分析正确的是(　　)
A．组蛋白H3甲基化可以“唤醒”相关基因的表达
B．组蛋白H3乙酰化引起的表型改变不属于表观遗传
C．去甲基化酶的mRNA进入重构胚细胞的细胞核起作用
D．酶抑制剂TSA的作用可能是抑制去乙酰化酶的活性
8．(2025·湖南长沙三模)科研人员将Sox2、Oct4、Lin-8和Klf4基因通过逆转录病毒转入遗传物质缺陷型小鼠成纤维细胞中，获得iPS细胞，进一步获得克隆鼠，相关流程如图。下列叙述错误的是(　　)
A．由于iPS细胞具有活跃的分裂能力，用它进行治疗时可能存在安全风险
B．为排除iPS细胞由培养基诱导产生，需以小鼠成纤维细胞直接培养作为对照
C．实验中需用显微注射法将载体逆转录病毒导入成纤维细胞
D．X鼠的遗传物质来自黑鼠和灰鼠，其体色为黑色
9．(2025·安徽淮北模拟)非洲猪瘟病毒(ASFV)是一种具有包膜的双链DNA病毒，病毒蛋白p30位于病毒的包膜上，在病毒进入宿主细胞时期具有重要作用。科研人员设计如下流程制备ASFV单克隆抗体。下列叙述错误的是(　　)
A．该流程利用了动物细胞融合和动物细胞培养技术
B．该单克隆抗体直接应用于人体可能会引起过敏反应
C．①是从免疫小鼠脾脏中提取的多种B淋巴细胞
D．②和③所进行的两次筛选过程都不需要用到ASFV
10．(2025·四川成都模拟)下图为利用黑鼠和白鼠的早期胚胎培育黑白嵌合鼠的过程。有关说法错误的是(　　)
A．经过图中①，细胞数量和胚胎总体积均不断增加
B．利用胚胎分割技术可实现嵌合鼠的快速繁殖
C．过程③操作前需对多只代孕母鼠进行同期发情处理
D．可用分割针取样滋养层细胞，做DNA分析鉴别嵌合鼠的性别
11．(2025·河南重点高中联考)在基因工程中，被用作载体的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。某进行改造后的质粒如图所示。用限制酶(酶1、酶2、酶3和酶4)、DNA连接酶为工具，将目的基因(两端含相应限制酶的识别序列和切割位点)和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体，并转化到受体菌中。下列叙述错误的是(　　)
A．若质粒和目的基因都用酶1切割，用T4 DNA连接酶连接的效率高于E．coli DNA连接酶
B．若质粒和目的基因都用酶2和酶4切割，重组质粒中的目的基因转录的产物可能不同
C．若质粒和目的基因都用酶3和酶4切割，能在含氯霉素的培养基上存活的细菌中含有目的基因
D．与用酶3和酶4处理相比，用酶1和酶4处理形成的重组质粒更容易转化到受体菌中
12．(2025·山东师大附中调研)生物技术与工程学相结合，可研究、设计、加工和鉴定相应的生物工程产品。下列叙述错误的是(　　)
A．二倍体植株的花药离体培养得到的单倍体植株可用于基因突变的研究
B．由iPS细胞产生的特定细胞，可以在新药的测试中发挥重要作用
C．制备单克隆抗体时，可用96孔板对杂交瘤细胞进行克隆化培养和筛选
D．PCR产物与凝胶载样缓冲液混合注入加样孔后，需缓慢加入电泳缓冲液并没过凝胶1 mm
13．(2025·辽宁锦州模拟)科研人员利用PCR技术扩增人乳铁蛋白基因，并进行电泳鉴定。下列叙述正确的是(　　)
A．目的基因扩增时，应添加的引物组合为引物Ⅰ、Ⅳ，或引物Ⅱ、Ⅲ
B．PCR循环6次可得到5种DNA分子，其中等长的DNA分子共52个
C．电泳所需缓冲液和酶应分装成小份在－20 ℃储存，使用前在室温下解冻
D．在利用琼脂糖凝胶电泳法检测PCR产物时，需要在凝胶载样缓冲液中加入核酸染料
14．(2025·辽宁辽南协作体模拟)干扰素是动物细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白，可用于对抗病毒的感染，但在体外难以保存。若将干扰素分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸，可在－70 ℃的条件下保存半年。下图是利用蛋白质工程设计生产干扰素的流程图，以下叙述正确的是(　　)
A．改造干扰素应首先从设计干扰素基因中的脱氧核苷酸序列出发
B．采用基因的定点突变技术或化学诱变技术均可以定向改造天然干扰素的基因序列
C．将新的干扰素基因插入启动子和终止密码子之间是其成功表达的条件之一
D．导入的新干扰素基因在大肠杆菌体内直接指导合成的蛋白质不是预期的新干扰素
15．(2025·福建福州质检)干扰素是一种具有干扰病毒复制作用的糖蛋白，具有抗病毒、抗肿瘤等作用。科研人员利用大肠杆菌构建干扰素工程菌，下图表示干扰素基因(目的基因)部分单链DNA序列，通过PCR技术可以扩增干扰素基因。构建基因表达载体时，需要选择合适的启动子。下列相关叙述正确的是(　　)
A．DNA不溶于酒精，但溶于2 mol·L-1的KCl溶液
B．PCR技术所需引物之一的前9个核苷酸为5′-GGTCAACAA-3′
C．启动子的作用是DNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录
D．若目的基因以图中单链为转录模板链，启动子应该与目的基因的左侧连接
练真题(九)
1．B　2．B　3．B　4．A　5．C　6．D　
7．B　[胚胎工程中，往往需要对雌性供体进行超数排卵处理，即注射促性腺激素促使其产生更多的卵母细胞，A正确；卵母细胞培养至MⅡ期(减数分裂Ⅱ中期)进行去核，B错误；动物细胞培养时，培养液需要定期更换，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，C正确；PCR技术可以检测受体细胞中是否导入目的基因，D正确。]
8．D　[克隆动物的核基因组来源于甲，细胞质中的基因来源于乙，A错误；体外受精需用获能精子与MⅡ期的卵母细胞受精，而不是MⅠ期，B错误；囊胚①的内细胞团可发育为个体，滋养层细胞发育为胎膜和胎盘的一部分，C错误；滋养层可影响内细胞团的发育，如滋养层细胞分泌的某些物质可能会影响内细胞团细胞的分化等，D正确。]
9．C　[采集的精液需要进行固定、稀释等处理后，才能用血细胞计数板检测精子密度，这样可以保证检测结果的准确性，A不合理；雌性动物的生殖道也可使精子获能，B不合理；超数排卵是指应用外源促性腺激素，诱发卵巢排出比自然情况下更多的成熟卵子，故可用含促性腺激素的促排卵剂进行超数排卵处理，C合理；母体子宫对胚胎的免疫耐受性高，一般不发生免疫排斥反应，D不合理。]
10．C　[体细胞核移植是将体细胞的核注入去核的MⅡ期卵母细胞中形成重构胚，A正确；移植前胚胎发育率低，一方面可能是植入的体细胞核不能完全恢复分化前的功能状态，另一方面可能是对动物胚胎进行操作的技术尚不完善，B正确；早期胚胎是在透明带内进行孵化的，C错误；动物胚胎细胞分化程度低，胚胎细胞核全能性较体细胞核更高，为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植，D正确。]
11．D　[由图可知，基因A突变为基因a，是由于T—A替换成了G—C，属于碱基的替换，A错误；Hind Ⅲ切割后形成的是黏性末端，AluⅠ切割后形成的是平末端，B错误；突变后的基因a中间片段不存在Hind Ⅲ的切割位点，存在AluⅠ的切割位点，基因a分别用Hind Ⅲ和AluⅠ酶切后产生的片段大小不一致，C错误；正常的基因A用Hind Ⅲ酶切后产生4个片段，突变后的基因a用Hind Ⅲ酶切后产生3个片段，D正确。]
12．C　[胚胎工程为获得足够的卵子，可以对供体雌性绵羊进行超数排卵处理，即注射促性腺激素以诱发卵巢排出比自然情况下更多的成熟卵子，A正确；为提高胚胎移植的成功率，需要使受体绵羊与供体绵羊生理状态保持一致，因此需要对受体进行同期发情处理，B正确；受精卵发育至桑葚胚的早期分裂阶段称为卵裂，此时期细胞的数量不断增加，但胚胎的总体积并不增加，C错误；对照组绵羊的年龄、性别等属于无关变量，无关变量应保持适宜且相同，D正确。]
13．C　[平板划线法主要用于微生物的分离和纯化，不能用于测定活菌数，测定活菌数常用稀释涂布平板法，A错误；Y菌组微塑料残留率较高，说明Y菌对微塑料的降解能力相对较弱，而不是菌浓度高，微塑料残留率与菌对微塑料的降解能力有关，而非直接与菌浓度相关，B错误；由图可知，X＋Y混合菌种组的微塑料残留率低于X菌组和Y菌组，说明混合菌种对微塑料的降解能力高于单一菌种，C正确；该培养基中含有蛋白胨，能在该培养基中生长、繁殖的微生物可能利用蛋白胨作为碳源和氮源等，不一定能降解微塑料，D错误。]
14．D　[根据题中流程图可知，研究人员利用PCR技术获取目的基因，该过程称为目的基因的“扩增”或“克隆”，是一个化学过程；而“分离”是一个物理过程，A错误。题干中说明了L-谷氨酸脱羧酶催化L-谷氨酸脱羧是高效生产γ-氨基丁酸的重要途径之一，即L-谷氨酸是高效生产γ-氨基丁酸的底物。E．coli B发酵生产γ-氨基丁酸时，L-谷氨酸钠的主要作用是作为发酵中酶促反应的底物，B错误。E．coli A是发酵生产γ-氨基丁酸的菌株，E．coli B是往E．coli A细胞中导入L-谷氨酸脱羧酶基因后构建的高效生产γ-氨基丁酸的菌株。E．coli A和E．coli B都不会高效降解γ-氨基丁酸，否则无法实现生产，C错误。根据图中信息，质粒上含有多克隆位点，其不仅可以被Nco Ⅰ和Kpn Ⅰ酶切，还可以被其他限制性内切酶酶切。只要在质粒的多克隆位点和目的基因两侧存在除Nco Ⅰ和Kpn Ⅰ外其他相同的限制性内切酶的酶切位点，就可以用相应酶替代Nco Ⅰ和Kpn Ⅰ构建重组质粒，D正确。]
15．B　[限制酶失活会使DNA完全不被酶切，此时应更换新的限制酶，A正确；酶切条件不合适通常会使切割效果下降，需调整反应条件如温度和pH等，调整酶的用量没有作用，B错误；质粒DNA突变会导致限制酶识别位点缺失，进而造成限制酶无法进行切割，此时应更换为正常质粒，C正确；质粒DNA上酶切位点被甲基化修饰，会导致对DNA甲基化敏感的限制酶无法进行酶切，此时应换用对DNA甲基化不敏感的限制酶，D正确。]
16．C　[动物体内胰岛素在胰岛B细胞核糖体上合成，经内质网、高尔基体加工、修饰后，经胞吐分泌出细胞，故A正确；胰岛素化学本质为蛋白质，基本组成单位为氨基酸，所以氨基酸是化学合成胰岛素的原料，故B正确；启动子具有物种及组织特异性，在利用大肠杆菌生产胰岛素时，需将胰岛素基因与大肠杆菌特异性启动子等调控元件重组在一起，导入大肠杆菌，而用乳腺生物反应器生产，需将胰岛素基因与乳腺中特异性表达基因的启动子等调控元件重组在一起，导入哺乳动物受精卵中，故C错误；速效胰岛素类似物不是天然胰岛素，科研人员通过对胰岛素基因进行改造，改变了胰岛素的氨基酸序列，从而有效抑制了胰岛素的聚合，由此研发出了速效胰岛素类似物，该技术属于蛋白质工程，故D正确。]
17．B　[酶解是为了去除植物细胞的细胞壁，过程①中酶处理的时间不同，说明两种亲本的细胞壁结构有差异，A正确；过程②为原生质体的融合，常用PEG诱导原生质体融合，灭活的仙台病毒可诱导动物细胞融合，不能用于植物，B错误；过程④脱分化和⑤再分化的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素，但在两个过程中比例不同，C正确；植物丙是植物甲和植物乙体细胞杂交形成的个体，应具备两者的遗传物质，因此可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株，D正确。]
18．B　[促性腺激素能作用于卵巢，藏羊甲需用促性腺激素处理使其卵巢卵泡发育和超数排卵，A正确；从卵巢中刚采集的卵母细胞需培养成熟(减数分裂Ⅱ中期)后才可与获能的精子进行体外受精，B错误；在胚胎移植前要对接受胚胎的受体和供体进行同期发情处理，使受体的生理状况相同，因此受体藏羊丙需和藏羊甲进行同期发情处理，C正确；后代丁是由藏羊甲的卵细胞和藏羊乙的精子结合形成的受精卵发育而来，因此后代丁的遗传物质来源于藏羊甲和藏羊乙，D正确。]
19．D　[由题可知，这2对等位基因位于非同源染色体上，假设A/a为上部两条带的等位基因，B/b为下部两条带的等位基因，由电泳图可知P1为AAbb，P2为aaBB，F1为AaBb，F2中①AaBB、②Aabb都为杂合子，③AABb占F2的比例为1/8，⑤AABB占F2的比例为1/16，A正确；电泳图中的F2的基因型依次为AaBB、Aabb、AABb、aaBB、AABB、AAbb、aabb、AaBb，未出现的基因型为aaBb，其个体PCR产物电泳结果有3条带，B正确；③AABb和⑦aabb杂交后代为Aabb、 AaBb，其PCR产物电泳结果与②⑧电泳结果相同，C正确；①AaBB自交子代为AABB(1/4)、AaBB(1/2)、aaBB(1/4)，其PCR产物电泳结果与④aaBB电泳结果相同的占1/4，D错误。]
刷模拟(九)
1．D　2．B　3．C　4．B　5．D　6．D　
7．D　[向重构胚细胞中注入去甲基化酶的mRNA，同时用酶抑制剂TSA处理，可改变组蛋白H3的修饰，说明组蛋白H3甲基化会抑制相关基因的表达，A错误；表观遗传学是指在基因的DNA序列没有发生改变的情况下，基因功能发生了可遗传的变化，并最终导致了表型的变化，组蛋白H3乙酰化引起的表型改变属于表观遗传，B错误；mRNA作为翻译的模板，去甲基化酶的mRNA进入重构胚细胞的细胞质起作用，C错误；酶抑制剂TSA的作用可能是抑制去乙酰化酶的活性，“唤醒”相关基因的表达，D正确。]
8．C　[由于iPS细胞具有活跃的分裂能力，若不受控制可能转化为癌细胞，所以用它进行治疗时可能存在安全风险，A正确；对照组可以排除干扰因素，为排除iPS细胞由培养基诱导产生，需以小鼠成纤维细胞直接培养作为对照，B正确；若用病毒作为基因的载体，则不需要进行显微注射导入受体细胞，C错误；X鼠的遗传物质来自黑鼠和灰鼠，图中克隆动物的体色与提供成纤维细胞的黑鼠体色相同，为黑色，D正确。]
9．D　
10．A　[经过图中①，细胞数量增加，但是胚胎总体积不变，A错误；利用胚胎分割，可以增加胚胎的数目，实现嵌合鼠的快速繁殖，B正确；过程③表示胚胎移植，进行胚胎移植前，需要对代孕母鼠进行同期发情处理，C正确；囊胚期的胚胎，取滋养层细胞，可以做DNA分析鉴别嵌合鼠的性别，D正确。]
11．C　[酶1切割质粒和目的基因产生的DNA片段末端为平末端，T4 DNA连接酶“缝合”双链DNA片段平末端的效率比E．coli DNA连接酶高，A正确；酶2和酶4切割质粒和目的基因产生的黏性末端相同，在DNA连接酶的作用下形成重组质粒时，目的基因可能倒接在质粒上，导致转录产物不同，B正确；若质粒和目的基因都用酶3和酶4切割，可以形成含有目的基因的重组质粒，在导入受体细胞时，导入的可能是重组质粒，也可能是不含目的基因的质粒，含有这两种质粒的受体菌均能在含氯霉素的培养基中生长，C错误；与用酶3和酶4处理相比，用酶1和酶4处理质粒和目的基因形成的重组质粒分子量较小，更容易转化到受体菌中，D正确。]
12．D　[二倍体花药离体培养的单倍体植株只有一个染色体组，控制每种性状的基因只有一个，该基因的突变会直接影响生物的性状，因此二倍体植株的花药离体培养得到的单倍体植株可用于基因突变的研究，A正确；iPS细胞为诱导多能干细胞，能分裂分、化产生的特定细胞，可以在新药的测试中发挥重要作用，B正确；制备单克隆抗体时，可用96孔板对杂交瘤细胞进行克隆化培养和筛选，利用的原理是抗原—抗体特异性结合，C正确；将电泳缓冲液加入电泳槽中，电泳缓冲液没过凝胶1 mm为宜，然后将扩增的PCR产物与凝胶载样缓冲液混合注入加样孔，D错误。]
13．B　[PCR技术扩增目的基因时，引物应与模板链的3′端互补配对，且两条引物分别结合在两条模板链上，这样才能使子链从5′端向3′端延伸，故应添加的引物组合为引物Ⅱ、Ⅲ，A错误；图示中的 PCR 循环6次，可以得到5种DNA分子，其中等长的DNA 分子共26－2×6＝52个，B正确；电泳所需缓冲液应分装成小份，并在－20 ℃储存，使用前从冰箱拿出放在冰块上缓慢融化，C错误；在利用琼脂糖凝胶电泳法检测PCR产物时，核酸染料是在配制凝胶时加入，不是在凝胶载样缓冲液中加入，D错误。]
14．D　[改造干扰素应首先从预期干扰素的功能出发，A错误；基因突变具有不定向性，所以化学诱变不能定向改造天然干扰素的基因序列，B错误；启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，从而驱动转录，而终止子提供转录终止的信号，因此将新的干扰素基因插入启动子和终止子之间是其成功表达的条件之一，C错误；动物体内有高尔基体和内质网对蛋白质进行加工，但是大肠杆菌属于原核生物，没有内质网和高尔基体，不能对蛋白质进行加工，能产生没有活性的干扰素，因此导入的新干扰素基因在大肠杆菌体内直接指导合成的蛋白质不是预期的新干扰素，还需要进行加工，D正确。]
15．B　[DNA不溶于酒精，但溶于2 mol·L-1的NaCl溶液，A错误；由于子链合成的方向是从子链的5′端到3′端，根据碱基互补配对原则，引物为5′-GGTCAACAA-3′和5′-TAAACTTCA-3′，B正确；启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被RNA聚合酶识别并结合，驱动基因转录，C错误；若目的基因以图中单链为转录模板链，且转录时mRNA自身的延伸方向为5′→3′，即转录是从DNA链的3′端开始的，故启动子应该与目的基因的右侧连接，D错误。]
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