资源简介 (共21张PPT)专题一实验与探究第1讲 教材基础实验和生物学科研史核心考点4 考查教材中涉及的著名生物学科研史内容索引核心串讲名卷优选检测反馈核 心 串 讲教材经典实验的研究方法1 制作DNA分子双螺旋结构模型——构建物理模型法。2 种群数量增长模型——构建数学模型法。3 分离各种细胞器——差速离心法。4 证明DNA进行半保留复制——同位素标记法和密度梯度离心法。5 分离叶绿体中的色素——纸层析法。6 分泌蛋白的合成和分泌过程——同位素标记法。7 验证细胞膜的流动性——荧光标记法。8 探究酵母菌的呼吸方式——对比实验法和产物检测法。9 赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌的实验——同位素标记法。10 摩尔根证明基因在染色体上——假说—演绎法。11 研究光合作用过程中C、O等元素的去向——同位素标记法。12 估算种群密度(运动能力强的生物)——标记重捕法。13 估算种群密度(运动能力弱的生物)——样方法。14 探究培养液中酵母菌种群数量的变化——抽样检测法。15 土壤中小动物类群丰富度的研究——取样器取样法。名 卷 优 选[2020江苏卷·20]同位素可用于追踪物质的运行和变化规律。在生物学科学史中，下列科学研究未采用同位素标记法的是( )A. 卡尔文等探明CO2中的碳在光合作用中的转化途径B. 赫尔希等利用T2噬菌体侵染大肠杆菌证明DNA是遗传物质C. 梅塞尔森等证明DNA进行半保留复制D. 温特证明胚芽鞘产生促进生长的化学物质D【解析】 卡尔文用14C标记CO2，研究CO2中的碳在光合作用中的转化途径，A不符合题意；赫尔希和蔡斯用35S和32P分别标记噬菌体的蛋白质和DNA，研究T2噬菌体侵染大肠杆菌实验，证明DNA是遗传物质，B不符合题意；梅塞尔森利用15N标记大肠杆菌DNA，结合密度梯度离心法，证明DNA的半保留复制，C不符合题意；温特证明胚芽鞘产生促进生长的化学物质的实验中未采用同位素标记法，D符合题意。(多选)[2024扬州模拟]下列关于科学方法与科学史实验的对应，错误的有( )AC选项 科学方法 实验A 荧光标记法 鲁宾和卡门分别标记H2O和CO2，证明光合作用产生的O2来自H2OB 提出假说 罗伯特森在电镜下观察到细胞膜暗—亮—暗三层结构，提出细胞膜由蛋白质—脂质—蛋白质三层结构构成【解析】 同位素标记法：鲁宾和卡门采用18O分别标记H2O和CO2，证明光合作用产生的O2来自H2O，A错误；建构模型：辛格和尼科尔森通过对细胞膜的功能分析，提出细胞膜的流动镶嵌模型，C错误。选项 科学方法 实验C 建构模型 辛格和尼科尔森通过对细胞膜的成分分析，提出细胞膜的流动镶嵌模型D 同位素标记法 卡尔文用14C标记CO2，追踪光合作用中碳元素的行踪，发现CO2被用于合成糖类等有机物的途径——卡尔文循环检 测 反 馈245131 [2025南通海门中学月考]调查法是生物学常用的方法之一，下列相关叙述正确的是( )A. 调查沿河岸分布的某植物种群密度时，宜采用五点取样法B. 调查某濒临灭绝的大型肉食动物的种群数量时，宜采用标记重捕法C. 调查某遗传病的遗传方式时，应选择尽可能多的患病家系作为样本D. 调查分布范围小而个体大的生物群落的物种丰富度时，应采用目测估计法C24513【解析】 沿河岸通常为长方形，因此调查沿河岸的某植物的种群密度时适宜采用等距取样法，A错误；濒临灭绝的动物数量极少而且是大型肉食动物，适合采用逐个计数的方法，不适合用标记重捕法，B错误；调查分布范围小而个体大的生物群落的物种丰富度时，应采用记名计算法，D错误。245132 [2025常州模拟]下列关于科学实验的说法，正确的是( )A. 摩尔根在总结遗传规律时，运用了假说—演绎法和归纳法B. 孟德尔发现灰色种皮的豌豆总开紫花，白色种皮的豌豆总开白花，于是首次提出了基因的连锁定律C. 希尔发现离体叶绿体的悬浮液(含H2O，不含CO2)，在光照下产生氧气，证明了光合作用中的氧气全部来自H2OD. 沃森、克里克根据富兰克林拍摄的DNA衍射图谱相关数据，构建出了碱基(A—T配对，C—G配对)在内部，脱氧核糖—磷酸在外部的DNA双螺旋结构A24513【解析】 摩尔根用红眼、白眼果蝇进行杂交实验，发现白眼的遗传和性别相关联，为解释该现象提出了“控制白眼的基因在X染色体上，而Y染色体上不含有它的等位基因”的假说，并通过测交实验证明了假说的正确性，进而证明萨顿的假说“基因在染色体上”是正确的，即摩尔根在总结伴性遗传规律时，运用了假说—演绎法和归纳法，A正确；孟德尔并不知道“基因”的存在，孟德尔没有提出基因的连锁定律，B错误；英国植物学家希尔发现，在离体叶绿体的悬浮液中加入铁盐或其他氧化剂(悬浮液中有H2O，没有CO2)，在光照下可以释放出氧气，但该实验没有证明光合作用中的氧气全部来自H2O，C错误；沃森、克里克主要以富兰克林拍摄的DNA衍射图谱照片的相关数据为基础，推算出DNA呈螺旋结构，D错误。245313 [2024南通模拟]在利用香蕉进行“DNA的粗提取与鉴定”实验中，下列相关叙述错误的是( )A. 研磨前先用液氮冷冻处理香蕉，有利于DNA的释放B. 香蕉研磨后离心取上清液，加入95%的冷酒精，有利于DNA析出C. 将出现白色丝状物的溶液倒入离心管中离心，弃上清液取沉淀D. 将DNA丝状物加入二苯胺试剂，沸水浴加热出现蓝色【解析】 将DNA丝状物先放入物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中，使其溶解，再加入二苯胺试剂，沸水浴加热出现蓝色，D错误。D245314 (多选)[2025常州前黄中学模拟]下列有关“DNA的粗提取与鉴定”“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述，错误的有( )A. 将洋葱研磨液离心后保留沉淀物并加入冷酒精静置后，可收集到DNAB. 将提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后，溶液即可变为蓝色C. 在沸水浴或微波炉内加热至琼脂糖熔化前需将适量的核酸染料加入并进行混匀D. 待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时需停止电泳并取出凝胶置于紫外灯下观察和照相ABC24531【解析】 将洋葱研磨液离心后保留上清液并加入冷酒精静置后，可收集到DNA，A错误；将丝状物溶于2 mol/L的5 mL的NaCl溶液中，然后向试管中加入4 mL的二苯胺试剂，沸水浴加热5 min，试管冷却后溶液呈现蓝色，B错误；在沸水浴或微波炉内加热至琼脂糖熔化，稍冷却后加入适量核酸染料混匀，C错误。245315 (多选)[2024盐城中学期初]某同学所做相关高中生物学实验得到的结果，如图a～d所示。下列叙述不正确的有( )BCDA. 图a视野中的橘黄色脂肪颗粒是经苏丹Ⅲ染液染色处理的B. 图b视野中发生质壁分离的细胞取自紫色洋葱鳞片叶内表皮C. 图c中位于最宽条带上的色素在层析液中的溶解度最高D. 图d细胞中染色体主要由蛋白质和RNA两种成分构成24531【解析】 紫色洋葱鳞片叶内表皮无色，而图中的液泡呈紫色，B错误；图c中位于条带最上方的色素在层析液中的溶解度最高，条带最宽只能说明色素含量最多，C错误；染色体主要含有DNA和蛋白质，D错误。谢谢观看Thank you for watching(共20张PPT)专题一实验与探究第2讲 探究性实验设计与分析内容索引核心串讲名卷优选体系建构基础回归基 础 回 归下表为研究黑洋葱多糖对2型糖尿病大鼠降血糖作用的部分实验步骤，请完成表格。实验目的 方法步骤要点制备黑洋葱多糖溶液 将纯化后的黑洋葱多糖配制成浓度为13.5 g/L的溶液建立模型鼠 取40只生理状态相近的健康大鼠，腹腔注射适量四氧嘧啶溶液，72 h后将大鼠禁食不禁水12 h，选取空腹血糖浓度大于7.0 mmol/L的大鼠为模型鼠①__________________ 取模型鼠20只，随机均分为组1和组2；另取10只健康大鼠作为组3(动物或实验)分组实验目的 方法步骤要点灌胃给药 组1按照200 mg/kg的标准，用生理盐水灌胃；组2②_______________________________________ 灌胃；组3③_______________________________ 灌胃；每天灌胃1次，持续灌胃4周④____________________ 每周使用血糖仪测定一次按照200 mg/kg的标准，用黑洋葱多糖溶液按照200 mg/kg的标准，用生理盐水测定空腹血糖浓度体 系 建 构核心考点1 实验设计的原理及对过程和结果的分析核 心 串 讲1 正确认识探究实验中的变量2 对照实验中对照组的设置类型对照实验是指一个实验，包括实验组和对照组。实验组是接受自变量处理的对象组，对照组(控制组)是不接受自变量处理的对象组。常用的对照类型有以下四种。(1) 空白对照：对照组为不作任何处理的对象组。这里的“不作处理”，并非什么因素都不给予，而是针对实验所要研究的因素不给予，以体现实验因素的有无对实验结果的影响。如在“探究影响酶活性的因素”实验中，1号试管加1 mL蒸馏水，2号试管加1 mL盐酸，3号试管加 1 mL NaOH溶液。该实验属于空白对照，对照组为1号试管，实验组为2号和3号试管。(2) 自身对照：实验组与对照组在同一对象上进行，不另设对照组。如“观察植物细胞的质壁分离和复原”的实验就属于自身对照。实验处理前的对象状况为对照组，实验处理后的对象变化为实验组。(3) 条件对照：给对照组施以某种实验处理，但不是所研究的实验因素，以突出实验实施的处理因素与实验所研究因素的差异，从一个侧面衬托实验因素对实验结果所造成的影响。如“动物激素饲喂小动物”的实验中，甲组饲喂甲状腺激素，乙组饲喂甲状腺激素抑制剂，丙组不饲喂药剂。该实验属于条件对照，同时具备空白对照。甲组为实验组，乙组为条件对照，丙组为空白对照。(4) 相互对照：不单独设置对照组，而是几个实验组相互对照。如在“探究酵母菌细胞呼吸的方式”实验中，有氧和无氧为相互对照。3 实验组与对照组的判断(1) 一般情况下，针对实验所要研究的因素，不作任何实验处理的对象组为对照组，如各种空白对照。(2) 用实验所研究的因素处理的对象组为实验组，未用实验所研究的因素处理的对象组为对照组。(3) 根据实验对象是否处于正常状态来确定。一般情况下，把处于正常生活状态下的实验对象确定为对照组。名 卷 优 选(多选)[2021江苏卷·17]下表和图为外加激素处理对某种水稻萌发影响的结果。萌发速率(T50)表示最终发芽率50%所需的时间，发芽率为萌发种子在总数中的比率。“脱落酸—恢复”组为1.0 mmol/L脱落酸浸泡后，洗去脱落酸。下列相关叙述正确的有( )AC激素浓度/(mmol/L) 平均T50/h 赤霉素 脱落酸0 83 830.01 83 870.1 82 1111.0 80 未萌发2.5 67 未萌发A. 0.1 mmol/L浓度时，赤霉素的作用不显著，脱落酸有显著抑制萌发作用B. 1.0 mmol/L浓度时，赤霉素促进萌发，脱落酸将种子全部杀死C. 赤霉素仅改变T50，不改变最终发芽率D. 赤霉素促进萌发对种子是有益的，脱落酸抑制萌发对种子是有害的【解析】 据表格数据可知，0.1 mmol/L浓度时，赤霉素组的平均T50为82，与对照组的平均T50相差较小，说明该浓度的赤霉素的作用不显著，脱落酸组的平均T50为111，明显高于对照组，说明脱落酸有显著抑制萌发作用，A正确；据表格数据可知，1.0 mmol/L浓度时，赤霉素组的平均T50为80，低于对照组的平均T50，说明赤霉素促进萌发， 1.0 mmol/L浓度时，脱落酸组不萌发，但不能说明脱落酸将种子全部杀死，B错误；综合分析曲线图和表格数据可知，赤霉素仅改变T50，使种子提前萌发，但不改变最终发芽率，C正确；不能说赤霉素促进萌发对种子是有益的，脱落酸抑制萌发对种子是有害的，要根据实际情况而定，D错误。(多选)[2025苏州中学期中]某兴趣研究小组为研究日照长短对菊花开花的影响，用不同日照长度对菊花顶部花芽和下部叶片作四组不同处理，实验结果如图所示。下列叙述正确的有( )ABDA. 该实验目的是探究菊花感受光周期刺激的部位是花芽还是叶片B. 由实验结果可推知，菊花感受光周期刺激的部位是下部叶片C. 若菊花提前开花，可在夜间进行闪烁光处理或延长日照时间D. 菊花的开花受基因表达、植物激素和环境因素的共同调节【解析】 根据实验的单一变量原则，自变量是光周期和光周期处理部位，因变量是植物是否开花，故本实验探究的是菊花感受光周期刺激的部位是顶部的花芽还是下部的叶片，A正确；从图中可知，无论是长日照还是短日照处理顶部花芽，只要用短日照处理下部叶片，植物都开花，说明菊花开花感受光周期刺激的部位是植物体的下部叶片，B正确；由图中实验结果可以推知，菊花是短日照植物，要使其提前开花，应该缩短光照时间，C错误；植物生长发育的调控，是由基因表达调控、激素调节和环境因素调节共同完成的，菊花的开花亦是如此，D正确。谢谢观看Thank you for watching(共16张PPT)专题一实验与探究第1讲 教材基础实验和生物学科研史核心考点2 观察类实验内容索引核心串讲名卷优选核 心 串 讲1 比较五个显微观察类实验实验名称 染色剂 常用实验材料观察细胞的减数分裂 无(固定装片) 蝗虫精母细胞减数分裂装片观察根尖分生区组织细胞的有丝分裂 甲紫溶液(或醋酸洋红液) 洋葱(葱、蒜)低温诱导植物细胞染色体数目的变化 甲紫(龙胆紫)溶液 蒜或洋葱观察叶绿体和细胞质的流动 无(不用染色) 菠菜叶(稍带些叶肉的下表皮)、藓类叶、新鲜的黑藻、番薯叶观察植物细胞的吸水和失水 无(不用染色) 成熟植物细胞，如紫色洋葱鳞片叶2 有关显微镜使用的注意点(1) 调节粗准焦螺旋使镜筒下降时，双眼要从侧面注视物镜镜头与玻片标本之间的距离，到快接近时(距离约为0.5 cm)停止下降。(2) 必须先用低倍物镜观察，找到要观察的物像，移到视野中央，然后再换用高倍物镜。(3) 换用高倍物镜时，应转动转换器，而不能直接转动物镜，此时双眼应从侧面观察物镜镜头与玻片的位置关系。(4) 换用高倍物镜后，不能再转动粗准焦螺旋，只能用细准焦螺旋来调节。(5) 换用高倍物镜后，若视野太暗，应先调节遮光器(换大光圈)或反光镜(用凹面反光镜)使视野明亮，再调节细准焦螺旋。(6) 显微镜成放大倒立的虚像，若物像偏左上方，则装片应向左上方移动。(7) 观察颜色深的材料，视野应适当调亮；反之则应适当调暗。名 卷 优 选[2025江苏卷·12]用秋水仙素处理大花葱(2n＝16)，将其根尖制成有丝分裂装片，如图为2个细胞分裂相。下列相关叙述正确的是( )1A. 解离时间越长，越有利于获得图甲所示的分裂相B. 取解离后的根尖，置于载玻片上，滴加清水并压片C. 图乙是有丝分裂后期的细胞分裂相D. 由于秋水仙素的诱导，图甲和图乙细胞的染色体数目都加倍C【解析】 解离时间过长，会使细胞过于酥软，导致细胞结构被破坏，不利于观察到清晰的分裂相，A错误；解离后的根尖，应先进行漂洗，洗去解离液，然后染色、压片，B错误；图乙中细胞的着丝粒分裂，姐妹染色单体分开移向细胞两极，处于有丝分裂后期，C正确；图甲细胞不处于有丝分裂后期，且染色体有32条，是秋水仙素诱导染色体数目加倍的结果，而图乙细胞处于正常的有丝分裂后期，着丝粒分裂导致其染色体数目加倍，并不是秋水仙素诱导的结果，D错误。[2024江苏卷·7]有同学以紫色洋葱为实验材料，进行“观察植物细胞的质壁分离和复原”实验。下列相关叙述合理的是( )A. 制作临时装片时，先将撕下的表皮放在载玻片上，再滴一滴清水，盖上盖玻片B. 用低倍镜观察刚制成的临时装片，可见细胞多呈长条形，细胞核位于细胞中央C. 用吸水纸引流使0.3 g/mL蔗糖溶液替换清水，可先后观察到质壁分离和复原现象D. 通过观察紫色中央液泡体积大小变化，可推测表皮细胞是处于吸水还是失水状态2D【解析】 制作临时装片时，通常是先滴一滴清水在载玻片上，然后将撕下的表皮放在清水上，再盖上盖玻片，A错误；用低倍镜观察刚制成的临时装片时，细胞核通常位于细胞的一侧，而不是中央，B错误；用吸水纸引流蔗糖溶液替换清水，可以观察到质壁分离现象，但要观察复原现象需要重新用清水替换蔗糖溶液，C错误；当液泡体积变大，说明细胞吸水，液泡体积变小，说明细胞失水，所以通过观察紫色中央液泡体积大小变化，可推测表皮细胞是处于吸水还是失水状态，D正确。(多选)[2023·江苏卷·15]中学实验需要使用显微镜观察，下列相关叙述错误的有( )A. 观察细胞中脂肪时，脂肪颗粒被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色B. 观察酵母菌时，细胞核、液泡和核糖体清晰可见C. 观察细胞质流动时，黑藻叶肉细胞呈正方形，叶绿体围绕细胞核运动D. 观察植物细胞质壁分离时，在低倍镜下无法观察到质壁分离现象3BCD【解析】 观察细胞中脂肪时，脂肪颗粒被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色，可借助显微镜观察到，A正确；观察酵母菌时，细胞核、液泡清晰可见，但核糖体观察不到，B错误；观察细胞质流动时，黑藻叶肉细胞呈长条形或不规则形，在显微镜下可观察到叶绿体围绕大液泡运动，C错误；低倍显微镜下可以观察质壁分离现象，也能看到质壁分离复原现象，D错误。[2025南通海门期末]下列有关生物学实验操作的叙述，正确的是( )A. 取黑藻幼嫩小叶制作临时装片，先用低倍镜观察叶绿体的结构和分布，再用高倍镜观察细胞质的流动B. 取洋葱鳞片叶内表皮制作临时装片，先用低倍镜观察原生质层的组成，再用高倍镜观察细胞的质壁分离C. 取大蒜根尖2～3 mm经解离、漂洗和染色后制片，先用低倍镜找到分生区，再用高倍镜观察分裂期细胞内染色体形态和分布D. 先将盖玻片放在血细胞计数板的计数室上，再在盖玻片边缘滴加1 mL培养液，立即在低倍镜下找到计数室，再换高倍镜进行计数C【解析】 观察叶绿体的结构和分布以及观察细胞质流动都需用高倍镜，A错误；在低倍镜下只能观察原生质层的位置，观察不到其组成，B错误；先将盖玻片放在血细胞计数板的计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余的培养液用滤纸吸去，待酵母菌全部沉降到计数室底部，再计数，D错误。谢谢观看Thank you for watching(共29张PPT)专题一实验与探究第1讲 教材基础实验和生物学科研史内容索引核心串讲名卷优选体系建构基础回归基 础 回 归1 判断下列说法是否正确。(1) 在高倍光学显微镜下，观察不到黑藻叶绿体的双层膜结构。______(2) 在氨基酸溶液中加入双缩脲试剂，混匀后逐渐变成紫色。______(3) 在厌氧发酵的果汁中加入酸性重铬酸钾溶液，混匀后由蓝色变成灰绿色。______(4) 叶绿体色素在层析液中的溶解度越高，在滤纸上扩散就越慢。______√×××(5) 纸层析法分离叶绿体色素时，以多种有机溶剂的混合物作为层析液。______(6) 在减数分裂模型的制作研究活动中，模拟减数分裂Ⅰ后期时，细胞同极的橡皮泥条颜色要不同。______(7) DNA的粗提取与鉴定时加入预冷的酒精溶液能抑制核酸水解酶活性，防止DNA水解。______(8) 微量离心管、蒸馏水和移液器在使用前均需进行高压蒸汽灭菌处理。______√×√×(9) PCR反应中温度周期性改变是为了让DNA聚合酶催化不同的反应。______(10) PCR反应中两种引物的碱基间应互补以保证与模板链的正常结合。______(11) 将凝胶放入电泳槽后，应确保加样孔内充满电泳缓冲液且没有气泡。______××√2 探究抗生素对细菌的选择作用实验中，在连续培养几代后，抑菌圈的直径缩小，说明抗生素对细菌产生了选择作用。从抑菌圈边缘的菌落上挑取细菌，原因是____________________________________。3 在进行植物扦插实验中，若两种浓度的生长素类调节剂促进插条生根效果基本相同，要想进一步确定最适浓度的做法是_______________ ________________________________。实际生产生活中，进行扦插时，保留有芽和幼叶的枝条比较容易生根，原因是_______________________ ___________________________________。抑菌圈边缘的细菌具有一定的耐药性在两浓度之间再缩小浓度梯度，配制溶液进行实验芽和叶在生长时能产生生长素，而生长素可促进扦插枝条生根体 系 建 构核心考点1 鉴定类实验核 心 串 讲1 归纳鉴定类实验项目 试剂 颜色 生物材料淀粉的检测 碘液 蓝色 脱色的叶片还原糖的检测 斐林试剂 砖红色沉淀 苹果或梨匀浆等脂肪检测 苏丹Ⅲ染液 橘黄色 花生种子切片蛋白质检测 双缩脲试剂 紫色 豆浆、稀蛋清等酒精的鉴定 重铬酸钾溶液 橙色→灰绿色 酵母菌CO2的鉴定 溴麝香草酚蓝溶液 蓝→绿→黄 酵母菌项目 试剂 颜色 生物材料绿叶中色素的提取和分离 提取液：无水乙醇； 分离液：分析液 ①胡萝卜素： 橙黄色； ②叶黄素：黄色； ③叶绿素a： 蓝绿色； ④叶绿素b： 黄绿色 新鲜的绿叶(如菠菜叶)DNA的粗提取与鉴定 二苯胺试剂 蓝色 新鲜洋葱等2 绿叶中色素的提取和分离实验的异常现象汇总(1) 收集到的滤液绿色过浅的原因分析：①未加石英砂(二氧化硅)，研磨不充分。②叶片颜色太浅或使用放置数天的叶片，色素(叶绿素)太少。③一次加入大量的无水乙醇，色素提取液浓度太低(正确的做法是少量多次加入无水乙醇提取色素)。④未加入碳酸钙或加入过少，色素分子被破坏。⑤研磨时间太长。(2) 滤纸条色素带重叠的原因分析：滤纸条上画的滤液细线比较粗或滤液细线不直。(3) 滤纸条上看不到色素带的原因分析：①提取色素使用的溶剂是水。②忘记画滤液细线。③滤液细线接触到层析液，且时间较长，色素全部溶解到层析液中。(4) 滤纸条上只呈现胡萝卜素、叶黄素色素带的原因分析：①所用叶片为“黄叶”。②研磨时忘记加碳酸钙导致叶绿素被破坏。3 高中生物学教材中有关颜色变化的实验汇总(1) 斐林试剂检测可溶性还原糖：还原糖＋斐林试剂→砖红色沉淀(需水浴加热)。(2) 苏丹Ⅲ染液检测脂肪：苏丹Ⅲ染液＋脂肪→橘黄色(一般需镜检)。(3) 双缩脲试剂检测蛋白质：蛋白质＋双缩脲试剂→紫色(含变性的蛋白质、蛋白类的酶)(4) 碘液检测淀粉：淀粉＋碘液→蓝色(萨克斯实验中需用酒精对绿叶脱色)。(5) DNA的染色与鉴定：DNA＋二苯胺→蓝色(需沸水浴后冷却观察)。(6) 台盼蓝使死细胞染成蓝色(利用膜的选择透过性，计数未被染色的酵母菌)。(7) 线粒体的染色：健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色。(8) 酒精的检测：橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成灰绿色。(9) CO2的检测：CO2可以使澄清的石灰水变浑浊，也可使溴麝香草酚蓝溶液由蓝变绿再变黄(通过观察变化的快慢或程度判断酵母菌的呼吸方式)。(10) 染色体(或染色质)的染色：染色体容易被碱性染料(如甲紫溶液或醋酸洋红液)染成深色。名 卷 优 选[2024江苏卷·3]某同学进行下列实验时，相关操作合理的是( )A. 从试管取菌种前，先在火焰旁拔棉塞，再将试管口迅速通过火焰以灭菌B. 观察黑藻的细胞质流动时，在高倍镜下先调粗准焦螺旋，再调细准焦螺旋C. 探究温度对酶活性的影响时，先将酶与底物混合，然后在不同温度下水浴处理D. 鉴定脂肪时，子叶临时切片先用体积分数为50%的乙醇浸泡，再用苏丹Ⅲ染液染色1A【解析】 从试管取菌种前，先在火焰旁拔棉塞，再将试管口迅速通过火焰，这样可以避免菌种被污染，A正确；在高倍镜下观察时，只能调节细准焦螺旋，B错误；探究温度对酶活性的影响时，应先将酶和底物分别在不同温度下处理，然后再混合，若先将酶与底物混合，再在不同温度下水浴处理，会在达到设定温度前就发生反应，影响实验结果，C错误；鉴定脂肪时，子叶临时切片先用苏丹Ⅲ染液染色，然后用体积分数为50%的乙醇洗去浮色，D错误。[2022江苏卷·5]下列有关实验方法的描述，合理的是( )A. 将一定量的胡萝卜切碎，加适量水、石英砂，充分研磨，过滤，获取胡萝卜素提取液B. 适当浓度蔗糖溶液处理新鲜黑藻叶装片，可先后观察到细胞质流动与质壁分离现象C. 检测样品中的蛋白质时，须加热使双缩脲试剂与蛋白质发生显色反应D. 用溴麝香草酚蓝溶液检测发酵液中酒精含量的多少，可判断酵母菌的呼吸方式2B【解析】 胡萝卜素不溶于水，可溶于有机溶剂，A错误；黑藻叶片含有叶绿体，呈绿色，所以用适当浓度蔗糖溶液处理新鲜黑藻叶装片可以在显微镜下观察叶绿体的运动情况，观察细胞质的流动，同时黑藻叶片是成熟的植物细胞，可以发生质壁分离，以叶绿体为观察指标，B正确；双缩脲试剂与蛋白质发生显色反应，不需要加热，C错误；酵母菌呼吸产生的二氧化碳可使溴麝香草酚蓝溶液由蓝变绿再变黄，不能用来检测酒精含量，D错误。[2023江苏卷·12]下列关于“绿叶中色素的提取和分离”实验的叙述，合理的是( )A. 用有机溶剂提取色素时，加入碳酸钙是为了防止类胡萝卜素被破坏B. 若连续多次重复画滤液细线可累积更多的色素，但易出现色素带重叠C. 该实验提取和分离色素的方法可用于测定绿叶中各种色素含量D. 用红色苋菜叶进行实验可得到5条色素带，花青素位于叶绿素a、b之间3B【解析】 用有机溶剂提取色素时，加入碳酸钙是为了防止叶绿素被破坏，A错误；画滤液细线时要间断画2～3次，即等上一次干了以后再画下一次，若连续多次重复画滤液细线虽可累积更多的色素，但会造成滤液细线过宽，易出现色素带重叠，B正确；该实验中分离色素的方法是纸层析法，可根据各种色素在滤纸条上呈现的色素带的宽窄来比较各色素的相对量，但该实验不能具体测定绿叶中各种色素含量，C错误；花青素存在于液泡中，溶于水但不易溶于层析液，故得到4条色素带，D错误。1 [2025盐城期中]下列鉴定实验中所用试剂与现象对应关系，错误的是( )选项 鉴定材料 试剂 可能的颜色(变化)A 核桃仁 适量苏丹Ⅲ染液 脂肪颗粒被染成橘黄色B 洋葱鳞片叶 二苯胺试剂 沸水浴后出现紫色C 鲜榨的甘蔗汁液 新配制的斐林试剂 60 ℃下蓝色变为砖红色D 通气培养的酵母菌培养液 酸性重铬酸钾溶液 橙色变为灰绿色B【解析】 可用洋葱鳞片叶提取DNA，提取的DNA可以用二苯胺试剂鉴定，反应条件是沸水浴，现象是出现蓝色，B错误；甘蔗富含蔗糖(非还原糖)，但并不意味着不含有还原糖，还原糖可以用新配制的斐林试剂来鉴定，通常选择在 50～65 ℃水浴条件下进行，现象是溶液的颜色由蓝色变为砖红色沉淀，C正确；酵母菌培养液中含有葡萄糖，通气培养只能说明酵母菌进行有氧呼吸产生二氧化碳和水，但是并不能确保将葡萄糖都消耗完，葡萄糖是还原糖，可以被酸性重铬酸钾(氧化剂)所氧化，溶液反应的颜色变化为橙色变为灰绿色，D正确。2 [2025南通启东中学月考]关于采用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物的实验，下列叙述正确的是( )A. 琼脂糖凝胶浓度的选择需考虑待分离DNA片段的大小B. 凝胶载样缓冲液中指示剂的作用是指示DNA分子的具体位置C. 在同一电场作用下，DNA片段越长，向负极迁移速率越快D. 琼脂糖凝胶中的DNA分子可在紫光灯下被检测出来A【解析】 琼脂糖凝胶的浓度会影响DNA分子在凝胶中的迁移率和分辨率，琼脂糖凝胶的浓度通常是根据所需分离的DNA片段大小来选择的。对于较大的DNA片段，比如基因组DNA或质粒DNA，通常选择较低浓度的琼脂糖凝胶，因为它们需要更大的孔径来有效迁移；而对于较小的DNA片段，比如PCR产物或酶切片段，则需要选择较高浓度的琼脂糖凝胶，以提供更好的分辨率和分离效果，A正确。凝胶载样缓冲液中的指示剂通常是一种颜色较深的染料，可以作为电泳进度的指示分子，当指示剂前沿接近凝胶边缘时(可看蓝色条带)，则停止电泳，B错误。在琼脂糖凝胶电泳中，当电场作用时，DNA片段在高于等电点的pH溶液中带负电，向正极迁移，同时DNA片段的迁移速率与其大小成反比，即DNA片段越长，迁移速率越慢，C错误。琼脂糖凝胶中的DNA分子需染色后，才可在波长为300 nm的紫外灯下被检测出来，D错误。谢谢观看Thank you for watching(共17张PPT)专题一实验与探究第1讲 教材基础实验和生物学科研史核心考点3 科研探究类实验内容索引核心串讲名卷优选核 心 串 讲1 比较六类模拟及探究类实验实验名称 自变量 因变量 无关变量通过模拟实验探究膜的透性 半透膜两侧溶液的浓度差 漏斗玻璃管液面的上升高度 半透膜种类、开始时的液面高度、温度等条件探究温度对淀粉酶活性的影响 不同温度(至少三种) 酶的活性(加碘液后溶液颜色的变化) pH、底物量、酶量、试管的洁净程度、反应时间、操作程序等探究pH对过氧化氢酶活性的影响 不同pH(至少三种) H2O2分解速率(气泡的数量或带火星的卫生香燃烧猛烈程度是观察指标) 温度、底物量、酶量、试管的洁净程度、反应时间、操作程序等实验名称 自变量 因变量 无关变量探究酵母菌的呼吸方式 氧气的有无 CO2生成量(澄清石灰水的浑浊程度等)；酒精的产生(酸性重铬酸钾检测) 葡萄糖溶液、石灰水的量、温度、pH、锥形瓶的洁净程度、连接导管的大小等探究生长素类似物促进插条生根的最适浓度 不同浓度的生长素类似物 扦插枝条的生根数量或长度 实验材料的一致性、激素浓度的准确性、处理时间的一致性等探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 时间 酵母菌数量 培养液的成分、培养条件、空间等2 血细胞计数板的计数与计算(1) 血细胞计数板通常有两种规格，一种是一个大方格分成16个中方格，每个中方格分成25个小方格；另一种是一个大方格分成25个中方格，每个中方格分成16个小方格。但无论哪种规格的计数板，每个大方格都有16×25＝400个小方格。(2) 计数方法对于16×25的计数板，计四角的4个中方格共100个小方格中的个体数量；而对于25×16的计数板，计四角和正中间的(共5个)中方格共80个小方格中的个体数量。如下图所示。(3) 计算方法①16×25型的计数板：细胞个数/mL＝100个小方格细胞总数/100×400×10 000×稀释倍数。②25×16型的计数板：细胞个数/mL＝80个小方格细胞总数/80×400×10 000×稀释倍数。名 卷 优 选[2025江苏卷·3]关于“研究土壤中小动物类群的丰富度”实验，下列叙述错误的是( )A. 设计统计表格时应将物种数和个体数纳入其中B. 可用采集罐采集土壤动物C. 不宜采用样方法调查活动能力强的土壤动物D. 记名计算法适用于体型小且数量极多的土壤动物1D【解析】 统计土壤动物类群丰富度时，需记录物种数目(类群数)和各物种的个体数量，因此表格中需包含物种数和个体数，A正确；采集土壤动物常用取样器取样法，用采集罐采集，B正确；土壤中的小动物活动能力较强、身体微小，不适合用样方法，应采用取样器取样法，C正确；记名计算法适用于个体较大、种群数量有限的物种，D错误。[2024江苏卷·5]关于“探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用”的实验，下列叙述正确的是( )A. 选用没有芽的枝条进行扦插，以消除枝条中原有生长素对生根的影响B. 扦插枝条应保留多个大叶片，以利用蒸腾作用促进生长调节剂的吸收C. 对照组的扦插基质用珍珠岩，实验组的扦插基质用等体积的泥炭土D. 用不同浓度的生长调节剂处理扦插枝条，也能获得相同的生根数2D【解析】 本实验的自变量是植物生长调节剂的浓度，选用扦插的枝条长势和带有的幼芽数量应大致相同，即保持无关变量相同且适宜，通常不用没有芽的枝条，因为芽能产生生长素促进扦插枝条生根，A错误；扦插枝条不应带有大叶片，防止过于旺盛的蒸腾作用使插条脱水，不利于生根，B错误；对照组的扦插基质用珍珠岩，实验组的扦插基质也应该用等体积的珍珠岩，保证无关变量相同且适宜，C错误；用不同浓度的生长调节剂处理扦插枝条，也能获得相同的生根数，因为植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用表现为两重性，D正确。[2023江苏卷·7]下列关于细菌和酵母菌实验的叙述，正确的是( )A. 通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的碳氮比B. 通常细菌的生长速度比酵母菌快，菌落比酵母菌菌落大C. 通常细菌培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌，酵母菌培养基用过滤除菌法除菌D. 血细胞计数板既可以用于酵母菌的数量测定，也可用于细菌的数量测定3A【解析】 不同微生物对营养物质的需求不一样，如培养酵母菌的培养基中含有较多的糖类物质(C)，培养细菌的培养基中含有更多的蛋白质、氨基酸(N)，因此通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的碳氮比，A正确；通常细菌的生长速度比酵母菌快，但由于细菌是原核细胞，细胞比真核的酵母菌小很多，所以细菌菌落通常比酵母菌菌落小，B错误；日常实验中细菌和酵母菌的培养基都是采用高压蒸汽灭菌，过滤除菌法通常用于含有不耐高温成分(例如维生素等)的培养基除菌，C错误；血细胞计数板常用于较大的细胞计数，不能直接用于细菌计数，D错误。[2024南京模拟]下列关于“培养液中酵母菌种群数量的变化”实验的叙述，错误的是( )A. 用显微镜观察、计数活酵母时，可将视野适当调暗B. 统计菌体数量时，不需要统计酵母菌芽体的数量C. 视野中细胞数目过多，应用无菌水适当稀释后再观察计数D. 血细胞计数板清洗后，若未吹干表面水分可能会导致统计结果偏小【解析】 统计菌体数量时，对于一半体积以上的芽体也需要统计数量，B错误。B谢谢观看Thank you for watching(共35张PPT)专题一实验与探究第2讲 探究性实验设计与分析核心考点2 探究类实验的综合考查内容索引核心串讲名卷优选检测反馈核 心 串 讲1 理清实验设计的流程2 实验设计中“使用恰当的语言表述”(1) “实验题目或目的”的描述要规范①句式一：“探究(或验证)自变量对因变量的影响”。②句式二：“探究(或验证)因变量与自变量之间的关系”或“因变量与自变量之间关系的研究”。(2) “实验步骤”的描述须准确①步骤一：实验前的准备选材：“选取年龄、性别相同，健康且发育状况相同的同种动物”或“选取长势相同、大小相似的同种植物”等。分组：“随机均分(或等分)为x组”。编号：“编号为A、B……组”或“编号为甲、乙……组”。②步骤二：实验中的处理实验时间和条件上用“一段时间”“适宜的温度、pH”等语言。对于试剂在量上难以做到准确的量化描述时，应尽可能用“定性”的语言表达，注意“等浓度”“等体积”“适量的”“一定量的”等词的运用。如实验组“用适量的某溶液”处理，对照组“用等量的蒸馏水(或生理盐水或清水)”处理，且“每组都在相同且适宜的条件下培养(或饲养)”或“观察相同的时间”。③步骤三：实验后的观测“一段时间后，观察(现象)或测量(数据)，做好记录(并计算出平均值)”。3 “六看法”解答实验评价题一看实验是否遵循单一变量原则；二看有无对照及对照设置是否合理；三看方案是否可操作、实验步骤是否完整、操作顺序是否合理；四看实验材料、仪器和药剂的选择与使用是否合理；五看实验结果的预期是否合理；六看实验结论是否来源于实验现象及数据。名 卷 优 选[2019江苏卷·30]为探究玉米籽粒发芽过程中一些有机物含量的变化，研究小组利用下列供选材料用具进行了实验。请分析并回答下列问题。材料用具：玉米籽粒；斐林试剂，双缩脲试剂，碘液，缓冲液，淀粉，淀粉酶等；研钵，水浴锅，天平，试管，滴管，量筒，容量瓶，显微镜，玻片，酒精灯等。(1) 为了检测玉米籽粒发芽过程中蛋白质(肽类)含量变化，在不同发芽阶段的玉米提取液中，分别加入__________试剂，比较颜色变化。该实验需要选用的器具有_________(填序号)。①试管 ②滴管 ③量筒 ④酒精灯 ⑤显微镜(2) 为了检测玉米籽粒发芽过程中淀粉含量变化，将不同发芽阶段的玉米籽粒纵切，滴加________，进行观察。结果显示，胚乳呈蓝色块状，且随着发芽时间的延长，蓝色块状物变小。由此可得出的结论是________________________________________。双缩脲①②③碘液在玉米发芽过程中，胚乳的淀粉逐渐减少(3) 为了验证上述蓝色块状物变小是淀粉酶作用的结果，设计了如下实验：在1～4号试管中分别加入相应的提取液和溶液(如图所示)，40 ℃温育30 min后，分别加入斐林试剂并60 ℃水浴加热，观察试管内颜色变化。①设置1号试管作为对照，其主要目的是________________________ ______________。②2号试管中应加入的X是______________的提取液。③预测3号试管中的颜色变化是_____________。若4号试管未出现预期结果(其他试管中结果符合预期)，则最可能的原因是_____________。排除用于实验的淀粉溶液中含有还原糖发芽前玉米蓝色→砖红色淀粉酶已失活[2025连云港中学期中]肉毒杆菌毒素(BTX)是由肉毒杆菌在繁殖过程中所产生的一种神经毒素蛋白。食用被BTX污染的食物，会导致肌肉麻痹。为了研究BTX引起肌肉麻痹的机制，研究人员分离蛙的腓肠肌及其相连的神经，获得生理状况一致的A、B、C三组腓肠肌标本，各组处理及记录结果如下。组别 处理 肌肉的收缩曲线有无A 用适宜强度的电流刺激标本A的神经 有B 在标本B的神经处注射适量的BTX溶液，用相同强度的电流刺激神经 有C 在标本C的突触间隙处注射等量的BTX溶液，用相同强度的电流刺激神经 无请回答下列问题。(1) 分析B、C两组的实验结果，可以得出结论是_________________ ______________________________________。(2) BTX导致肌肉麻痹的原因可能是BTX抑制乙酰胆碱的释放，也可能是BTX抑制乙酰胆碱与受体结合。为了证明上述猜测，需要增加D组，D组的实验思路是___________________________________________ _____________________________________________________________。预测D组的实验结果并得出结论：若标本D________(填“记录”或“没有记录”)到肌肉收缩曲线，则BTX抑制突触前膜释放乙酰胆碱；若标本D____________(填“记录”或“没有记录”)到肌肉收缩曲线，则BTX抑制乙酰胆碱与突触后膜受体结合。BTX不影响神经纤维上兴奋的传导，影响突触处兴奋的传递在腓肠肌标本D的突触处注射等量的BTX后，再注射适量乙酰胆碱，用相同强度的电流刺激神经，记录肌肉的收缩曲线记录没有记录【解析】(1) 分析表格内容可知，标本B的神经处注射适量的BTX溶液，标本C的突触间隙处注射等量的BTX溶液，标本B记录到了肌肉的收缩曲线，而标本C没有记录到肌肉的收缩曲线，说明BTX不影响神经纤维上兴奋的传导，但影响在突触处兴奋的传递。(2) D组的实验思路是在腓肠肌标本D的突触处注射等量的BTX后，再注射适量乙酰胆碱，用相同强度的电流刺激神经，记录肌肉的收缩曲线。预测D组的实验结果并得出结论：若标本D记录到肌肉收缩曲线，则BTX抑制突触前膜释放乙酰胆碱；若标本D没有记录到肌肉收缩曲线，则BTX抑制乙酰胆碱与突触后膜受体结合。检 测 反 馈24131 [2025盐城中学期中]胰脂肪酶抑制剂通过降低胰脂肪酶活性，减少消化器官中膳食脂肪的分解和吸收，进而改善肥胖和高脂血症等代谢性疾病的症状。奥利司他是市售胰脂肪酶抑制剂类减肥药，但会引起胃肠道不良反应。我国科研工作者从药食作物苦荞的麸皮中提取荞麦黄酮进行了实验，结果如图所示。下列相关描述正确的是( )A. 本实验的自变量是药物的浓度B. 在实验中，一定范围内的荞麦黄酮的效果与浓度呈正相关C. 荞麦黄酮可以安全替代奥利司他成为新的减肥药物D. 荞麦黄酮使胰脂肪酶为脂肪水解提供的能量减少B2413【解析】 本实验的自变量是药物的种类和浓度，A错误；虽然荞麦黄酮是从苦荞的麸皮中提取的，但是否会引起其他不良反应尚不明确，此外荞麦黄酮的抑制效果差于奥利司他，因此荞麦黄酮不一定可以安全替代奥利司他成为新的减肥药物，C错误；酶催化化学反应的原理是降低化学反应的活化能，不是为反应提供能量，D错误。24132 [2025宿迁模拟]对照原则是科学实验中的重要原则，下列实验中有关对照组的设计的叙述，错误的是( )A. 还原糖的鉴定实验中，可以设置清水组和葡萄糖组作对照B. 血浆对pH的调节实验中对照组也应该分别滴加相应剂量的HCl和NaOHC. 探究水温对加酶洗衣粉的效果影响实验，分别设置0 ℃和100 ℃作对照D. 探究酵母菌细胞呼吸的方式实验中两组均为实验组，相互对照C2413【解析】 血浆对pH的调节实验中，酸性条件和碱性条件为无关变量，故对照组也应该分别滴加相应剂量的HCl和NaOH，B正确；探究水温对加酶洗衣粉的效果影响实验中，高温、低温均为实验组，但设置0 ℃和100 ℃作对照，温度梯度过大，且实际生活中不用100 ℃水洗衣服，C错误；探究酵母菌细胞呼吸的方式实验中，两组均为实验组(都人为控制了变量，都是实验组)，相互对照，属于对比实验，D正确。24313 (多选)[2024泰州期末]为研究细胞分裂素类似物(6－BA)、生长素定向转运抑制剂(NPA)对顶端优势的影响，某科研小组用生长状况相同的一年生杨树枝条进行了实验，实验处理及结果如下表所示。下列分析不正确的有( )BD组别 顶芽处理 侧芽处理 侧芽生长情况甲 去除 涂抹蒸馏水 ＋＋＋＋乙 保留 涂抹一定浓度的6－BA ＋＋＋＋丙 保留 涂抹NPA ＋＋＋＋＋＋丁 保留 涂抹蒸馏水 ＋注：“＋”表示侧芽生长情况且数量越多表示生长越明显2431A. 乙组和丁组对比说明6－BA可以在一定程度上解除顶端优势B. 甲组和丙组的结果相对比，说明侧芽处的生长素只来自顶芽C. 综合分析四组结果可知，6－BA和NPA均能解除顶端优势，且在该实验条件下NPA效果比6－BA好D. 根据本题中6－BA和NPA的作用可知，二者都属于植物激素2431【解析】 乙组和丁组的自变量为是否用一定浓度的6－BA处理，两者都保留顶芽，但乙组涂抹一定浓度的6－BA后，侧芽生长明显，因此说明6－BA可以在一定程度上解除顶端优势，A正确；甲组和丙组的自变量是有无顶芽和侧芽是否涂抹NPA，变量不唯一，不能比较，因此甲组和丙组的结果不能说明侧芽处的生长素只来自顶芽，B错误；甲、乙、丁组实验结果说明6－BA能解除顶端优势，甲、丙、丁组实验结果说明NPA能解除顶端优势，且NPA组侧芽生长更明显，因此四组结果说明6－BA和NPA均能解除顶端优势，且该实验条件下NPA效果比6－BA好，C正确；6－BA和NPA能调节植物的生命活动，但都是人工合成的，属于植物生长调节剂，而植物激素是由植物体内产生的，D错误。24314 [2025南京期末]宫颈癌主要由人乳头瘤病毒(HPV)诱发，癌细胞转移成为影响病人预后的重要因素。基因沉默技术可通过阻断特定基因的异常表达进行调控，发挥治疗作用。科研人员进行了“PIK3CA基因沉默抑制PI3K/AKT信号通路的激活，对宫颈癌EMT的影响”的探究。EMT在肿瘤侵袭转移中发挥重要作用。E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白和波形蛋白是EMT的重要标志性因子。下表为相关探究步骤。探究步骤 具体内容观察分析、 提出问题 前期研究发现PIK3CA基因与宫颈癌密切相关，PI3K/AKT信号通路的激活参与肿瘤的发生发展。抑制肿瘤EMT能提高治疗效果和改善预后。由此提出问题：是否能抑制PI3K/AKT信号通路的激活进而抑制宫颈癌细胞发生转移探究步骤 具体内容提出假说 通过基因沉默技术抑制PIK3CA基因表达，可使PI3K/AKT信号通路的激活被抑制，导致EMT有关的①________________的表达受影响，从而防止癌细胞的转移扩散演绎推理、 作出预期 通过基因沉默技术可抑制PIK3CA基因表达，使PIK3CA、PI3K、AKT的表达量显著降低，使得PI3K/AKT信号通路的激活受到抑制，进一步导致EMT有关的E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白和波形蛋白的表达受到影响，抑制宫颈癌细胞的转移24312431探究步骤 具体内容②____________ 设计以下六组实验：a组(人宫颈癌细胞)、b组(人宫颈癌细胞＋转染空白载体质粒)、c组(人宫颈癌细胞＋转染PIK3CA过量表达载体)、d组(人宫颈癌细胞＋转染PIK3CA抑制表达质粒)、e组(人宫颈癌细胞＋PI3K/AKT信号通路拮抗剂)以及f组(③______________________)，进行相关实验④____________ 测定PIK3CA、PI3K、AKT以及EMT标志蛋白的表达量2431请回答下列问题。(1) 请补充完成表格中的内容：①____________；②____________；③_____________________________________________________________ _____；④____________。(2) 实验中，选择宫颈癌细胞系HeLa置于气体环境为_____________ _____________________的37 ℃恒温箱中进行传代培养，收集细胞悬液进行6组实验。实验设置b组的目的是_____________________________。标志性因子实验验证人宫颈癌细胞＋转染PIK3CA抑制表达质粒＋PI3K/AKT信号通路拮抗剂结果检测含有95%空气和 5%CO2的混合气体排除空白质粒对实验结果的影响2431(3) 实验采用实时定量PCR(qRT－PCR)和蛋白质印迹技术检测转染后各组细胞的特定基因表达情况，前者主要用来直接检测基因的________水平，后者需要进行凝胶电泳并制备特定表达蛋白的一抗和酶标二抗用以显色，通过单克隆抗体制备二抗的过程中需要给受体动物多次注射______________________以刺激机体产生相应的免疫细胞。转录特定表达蛋白的一抗2431(4) 实验结果显示d、e、f组宫颈癌细胞的转移明显受到抑制，细胞凋亡率明显增加。下图是利用蛋白质印迹技术检测到的特定蛋白的表达情况(灰度越深表达量越高)。分析图1实验结果可知，沉默PIK3CA基因与_____________________ ____均能降低PIK3CA、PI3K、AKT的表达，且两者效果具有________ ________；分析图2实验结果可知E-钙黏蛋白对宫颈癌细胞的转移具有________作用。抑制PI3K/AKT信号通路协同(叠加)作用抑制2431【解析】(1) 科研人员进行了“PIK3CA基因沉默抑制PI3K/AKT信号通路的激活，对宫颈癌EMT的影响”的探究，使用的科学研究方法是假说—演绎法。假说—演绎法的探究步骤包括观察分析、提出问题→提出假说→演绎推理、作出预期→②实验验证→④结果检测、记录。据题干信息“EMT在肿瘤侵袭转移中发挥重要作用。E－钙黏蛋白、N－钙黏蛋白和波形蛋白是EMT的重要标志性因子”可知，若抑制PIK3CA基因表达，可使PI3K/AKT信号通路的激活被抑制，导致EMT有关的重要性标志因子的表达受影响。设计六组对照实验，其中d组为人宫颈癌细胞＋转染PIK3CA抑制表达质粒、e组为人宫颈癌细胞＋PI3K/AKT信号通路拮抗剂，据题干信息PIK3CA基因沉默能抑制PI3K/AKT信号通2431路的激活，PI3K/AKT信号通路拮抗剂也能抑制该信号通路的激活，所以f组可设置为人宫颈癌细胞＋转染PIK3CA抑制表达质粒＋PI3K/AKT信号通路拮抗剂，研究两者共同作用对抑制宫颈癌细胞的转移的效果。(2) 本实验是将PIK3CA基因与质粒载体连接形成的重组DNA进行转染细胞，所以实验设置b组(人宫颈癌细胞＋转染空白载体质粒)，目的是排除质粒载体对实验结果的影响。(3) 实时荧光定量PCR是指在PCR指数扩增期间通过连续监测荧光信号出现的先后顺序及信号强弱的变化来即时分析模板DNA的拷贝数目，通过与加入已知量的标准品进行比较，可实现实时定量，该技术可直接检测基因的转录水平。蛋白质印迹技术利用抗原—抗体特异性结合的原理，其中一抗能与特定表达蛋白特异性2431结合，二抗能与一抗另一个部位特异性结合，所以制备二抗的过程中需要给受体动物多次注射一抗以刺激机体产生相应的免疫细胞。(4) 分析图1可知，d(人宫颈癌细胞＋转染PIK3CA抑制表达质粒)、e(人宫颈癌细胞＋PI3K/AKT信号通路拮抗剂)、f(人宫颈癌细胞＋转染PIK3CA抑制表达质粒＋PI3K/AKT信号通路拮抗剂)三组中PIK3CA、PI3K、AKT的表达量与a、b、c组比显著降低，且f组的表达量明显低于d组和e组。说明沉默PIK3CA基因与PI3K/AKT信号通路拮抗剂均能降低PIK3CA、PI3K、AKT的表达，二者作用效果具有协同效应。E－钙黏蛋白、N－钙黏蛋白和波形蛋白是EMT的重要标志性因子。分析图2可知，d(人宫颈癌细胞＋转染PIK3CA抑制表达质粒)、e(人宫颈癌细胞2431＋PI3K/AKT信号通路拮抗剂)、f(人宫颈癌细胞＋转染PIK3CA抑制表达质粒＋PI3K/AKT信号通路拮抗剂)三组中N－钙黏蛋白和波形蛋白含量显著低于a、b、c组，但E－钙黏蛋白含量显著高于a、b、c组，结合题干信息“实验结果显示d、e、f组宫颈癌细胞的转移明显受到抑制，细胞凋亡率明显增加”，说明E－钙黏蛋白对宫颈癌细胞的转移具有抑制作用。谢谢观看Thank you for watching 展开更多...... 收起↑ 资源列表 专题1 第1讲 核心考点1 鉴定类实验.pptx 专题1 第1讲 核心考点2 观察类实验.pptx 专题1 第1讲 核心考点3 科研探究类实验.pptx 专题1 第1讲 核心考点4 考查教材中涉及的著名生物学科研史.pptx 专题1 第2讲 核心考点1 实验设计的原理及对过程和结果的分析.pptx 专题1 第2讲 核心考点2 探究类实验的综合考查.pptx
资源列表