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第十、十一单元素养评估卷
[时间：90分钟　满分：100分]
一、选择题(本大题共14小题，每小题3分，共42分。每小题列出的四个备选项中只有一个是符合题目要求的，不选、多选、错选均不得分)
1.核移植技术除了研究生物学的基本问题外，在药物生产、优良种畜的培育和繁殖、拯救濒危动物、治疗性克隆等方面，具有重要的实际应用价值。下列关于动物细胞核移植技术应用的叙述，错误的是(　　)
A.细胞核移植技术可用于优良种畜的培育
B.细胞核移植技术可用于人的生殖性克隆
C.核移植技术与干细胞诱导技术结合，可用于修补人体损伤的器官
D.核移植技术可用于转基因动物的克隆，以保持转基因动物的性状
2.开展生物技术与工程相关实践活动时，培养基(液)中营养物质的种类、浓度及比例会影响培养物的生长。下列相关叙述错误的是(　　)
A.哺乳动物早期胚胎培养需配制一系列不同成分的培养液
B.培养基中营养物质的浓度及比例会影响植物再分化的方向
C.与植物组织培养相比，动物细胞培养需要添加动物血清
D.扩大培养时，持续增加营养物质的浓度不利于提高菌种数量
3.实验小组利用甲和乙通过体细胞杂交培育新类型，①②③④表示过程。下列说法正确的是(　　)
A.制备a和b时，可使植物细胞处于微弱的膨胀状态后再用酶解法处理
B.a和b融合依赖膜的流动性，③表示融合后的原生质体进行有丝分裂后长出细胞壁
C.④过程可保持c的遗传性状，可迅速产生扩大其数量
D.①过程获得的a和b均保持了原来细胞的形态
4.在科学研究和制药等领域，经常要进行动物细胞培养。体外培养动物细胞时，需要为细胞分裂和生长提供营养。下列相关叙述正确的是(　　)
A.培养基中添加的葡萄糖主要用于细胞合成糖原
B.必须添加非必需氨基酸细胞才能正常生长分裂
C.培养基中不添加脂质，细胞中也会合成新的脂质
D.直接添加大量DNA有助于细胞快速的分裂增殖
5.塑料制品中的DBP(分子式C16H22O4)对人体有一定的危害，研究者从污染严重的河底淤泥中分离得到能分解DBP的微生物。下列叙述错误的是(　　)
A.可用平板划线法分离获得单菌落
B.以DBP为唯一碳源的液体培养基实现扩大培养
C.可用接种环挑取单菌落接种至斜面培养基中保存
D.接种、分离后使用过的器皿需先彻底灭菌再洗涤
6.SRY-PCR胚胎的性别鉴定技术可用于哺乳动物的性别控制，对畜牧繁育有重要意义。先从胚胎中取若干细胞提取DNA进行PCR扩增，用Y染色体上的性别决定基因(SRY基因)制备的特异性探针对扩增产物进行检测，若结果为阳性，则表明胚胎细胞中含SRY基因。下列叙述错误的是(　　)
A.①处理的作用是使受体母牛和良种母牛的子宫生理状态相同
B.若②为体内受精，则受精过程在良种母牛的输卵管中完成
C.若③为体外培养，则需培养到原肠胚期才能分割
D.图中采集到的甲细胞可用于SRY-PCR胚胎性别鉴定
7.下列有关生物技术安全性和伦理问题的叙述，错误的是(　　)
A.转基因植物合成的蛋白质，可能成为某些人群新的过敏源
B.设计试管婴儿技术必须获得政府部门的相关批准，以防滥用
C.如果转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题
D.生物武器具有传染性强、作用范围广等特点，应严格禁止
8.某同学从尖孢镰刀菌培养液中分离纯化得到一种耐热的碱性蛋白酶，测定该酶的化学性质可为该酶应用于生产创造适宜条件。下列探究思路不合理的是
(　　)
A.用不同pH的缓冲液分别处理该酶，探究该酶的最适pH
B.分别以蛋白质和淀粉为底物，探究该酶的专一性
C.控制不同的高温处理时间，探究该酶的热稳定性
D.适宜条件下测定酶促反应速率，探究该酶所提供的能量
9.菊花是两性花，LFY 基因是控制植物花分生组织形成的基因。过量表达LFY 导致植物提早开花。为使菊花花期提前，科学家制备了含有拟南芥过量表达的LFY 基因的转基因菊花。重组Ti质粒的部分信息及实验流程如下图所示，其中启动子均为真核细胞启动子。下列叙述正确的是(　　)
A.在含潮霉素的培养基上存活的农杆菌才可用于侵染菊花叶片
B.过程①②③所使用的培养基中植物激素的浓度和配比可以相同
C.Ⅰ是一团具有一定组织结构、松散的薄壁细胞团，具有较强的分裂和分化能力
D.诱导出芽和根的试管苗要先炼苗以适应外界的低湿强光环境才可进行移栽
10.稻米胚乳直链淀粉含量高会导致食用品质差。研究发现，水稻蜡质基因(Wx)编码直链淀粉合成酶。若Wx基因中第226位碱基是正常的G，该位点所在的内含子能被正常剪接，胚乳中直链淀粉含量高，基因型记作GG；若该位点突变成T，则不能被正常剪接，胚乳中直链淀粉的合成水平会降低，基因型记作TT。为检测Wx基因该位点碱基是G还是T，研究人员以待测水稻叶片总DNA为材料，以Wx基因片段设计引物如图所示，对PCR扩增产物经Acc Ⅰ 酶切后电泳。已知引物1为5'-GCTTCACTTC TCTGCTTGTG-3'，AccⅠ酶的识别位点为5'-GTATAC-3'，两引物之间无另外的AccⅠ酶的识别位点。下列叙述正确的是(　　)
A.该实验中需设计的引物2为5'-TTCAACTCTCGTTAAATCAT-3'
B.若酶切产物只能观察到450 bp左右的DNA条带，则表明该水稻品种为TT型
C.GT杂合型水稻品种酶切电泳结果为3条条带
D.组成上述两种淀粉合成酶的氨基酸的种类不同，数目相同
阅读下列材料，回答第11、12题。
　　利用基因工程技术改造酵母菌而生产的人胰岛素，为千千万万的糖尿病患者减轻了经济负担。胰岛素由A链和B链两条肽链组成。酵母菌生产人胰岛素的过程如图所示。
11.筛选获得能表达胰岛素基因的酵母菌后，需进行扩大培养，该过程需对酵母菌进行计数，使其达到一定数量后放入发酵罐中发酵。关于酵母菌的扩增、计数和发酵，下列叙述正确的是(　　)
A.将菌种放入摇瓶进行振荡培养，有利于酵母菌充分获得营养物质和O2
B.酵母菌计数可采用平板划线法，也可采用显微镜计数法
C.发酵时应确保发酵罐中无氧状态，使酵母菌进行厌氧呼吸产生酒精和CO2
D.酵母菌在不同发酵阶段要求的环境条件不同，但发酵产物相同
12.发酵后，需要从酵母菌培养物中分离纯化胰岛素。某同学对纯化得到的3种蛋白质进行凝胶电泳，结果如图所示(“+”“-”分别代表电泳槽的正极和负极)。已知甲的相对分子质量是乙的2倍，且甲、乙均由一条肽链组成。下列叙述错误的是(　　)
A.凝胶的孔隙大小分布有最大极限和最小极限
B.电泳缓冲液可维持合适的pH，并使溶液具有一定的导电性
C.甲、乙、丙在进行电泳时，迁移的方向是从下至上
D.甲、乙、丙3种蛋白质中，丙最可能是胰岛素
13.用不同浓度 NaCl 溶液处理拟南芥萌发的种子，检测其根的长度，结果如图 1所示。若同时施加乙烯合成抑制剂(AVG)进行实验，检测根的长度，结果如图2所示，植物中乙烯合成基因相对表达量与 NaCl的关系如图3所示。下列叙述错误的是(　　)
A.一定范围内，随着浓度的升高，NaCl对根生长的抑制愈发明显
B.图2 中使用的 NaCl溶液的浓度为120 mmol·L-1
C.NaCl可能通过影响乙烯基因的表达来促进根细胞的生长
D.乙烯和高浓度 NaCl在调节根细胞生长方面表现为协同作用
14.研究人员利用中华猕猴桃(果大、不抗寒)和狗枣猕猴桃(果小、抗寒)进行体细胞杂交，成功培育了果大、抗寒的可育杂种植株，其育种流程如图所示。下列叙述错误的是(　　)
A.利用灭菌后的聚乙二醇可诱导原生质体发生融合
B.可通过观察质膜表面的双色荧光来筛选融合的原生质体
C.杂种细胞需经过愈伤组织和胚状体阶段才能形成杂种植株
D.抗寒能力是鉴定杂种植株是否符合要求的检测指标之一
二、非选择题(本大题共5小题，共58分)
15.(8分)对疑似PRRS(猪繁殖与呼吸综合征)的病料(从得病的动物身上采集的组织或器官)进行病毒分离鉴定，获得一株高致病性PRRSV(猪繁殖与呼吸综合征病毒)，通过对高致病性PRRSV的N蛋白进行研究来探讨该蛋白的抗原特性，并制备抗N蛋白的单克隆抗体。回答下列问题。
(1)PRRSV的N蛋白基因的克隆：提取PRRSV中的总RNA，以其中相应的RNA作为模板，利用　　　　酶逆转录成cDNA。再以cDNA为模板进行　　　　扩增，从而获得N蛋白基因。
(2)表达N蛋白细胞的制备：用重组质粒　　　　合适的大肠杆菌细胞，为提高该过程的效率，需考虑重组质粒的　　　　　　　等。将筛选过的受体细胞在37 ℃下过夜培养。
(3)单克隆抗体的制备与检测：取免疫小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，待融合细胞生长到培养孔底面积的1/10时进行　　　　　　(填物质)筛选。检出的阳性孔用有限稀释法进行多次克隆化，建立单克隆抗体　　　　　　　　。最终获得的单克隆抗体是否达到实验要求的标志是　　　　　　 　　　.
　　　　　　　　　　　　　，与无关蛋白不发生反应。
16.(10分)芦笋是禾本科芦苇属植物的嫩芽，营养丰富，味道鲜美。S-(2-氨乙基)-L-半胱氨酸(AEC)可抑制芦笋组织的生长，此抑制作用可被赖氨酸或甲硫氨酸部分解除。某科研小组欲得到芦笋抗AEC细胞突变体。
(1)实验过程如下：
第一步：选择生长良好的芦笋愈伤组织用0.1%甲磺酸乙酯(EMS)处理24 h，洗去EMS继代培养2~3周。其中EMS的作用是　　　　　　　　；继代培养2~3周的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
第二步：转入含0.5 mg/L AEC的继代培养基中继续培养。其中0.5 mg/L AEC的作用是　　　　　　　　　　　　　　。
第三步：挑选存活的细胞团转入培养基继代培养3~4周，使细胞快速增殖。
第四步：将愈伤组织转移至分化培养基上使其分化成苗，3周后可出现丛状苗。在此过程中，由体细胞发育成的类似胚的结构称为　　　　　　　　。
第五步：取一定数量的单个试管苗切取长为0.5~1 cm的小段于诱导培养基上形成愈伤组织，此过程称为　　　　　　。按照试管苗次序将愈伤组织编号，每一块愈伤组织可以看作一个独立的细胞系。
第六步：将每个编号愈伤组织分别转移到含0.5 mg/L AEC的培养基上，淘汰　　　　　　　　　　　　　　　　　　的细胞系。
第七步：将每个抗性细胞系的一半愈伤组织接种到分化培养基上使其分化成苗，另一半用于氨基酸分析。
第八步：用氨基酸分析仪分析各抗性细胞系的氨基酸含量，并和　　　　　做比较，选择　　　　　　　　含量明显提高的抗性细胞系。对分化植株也做相应的检测以筛选出高氨基酸含量的再生植株无性系。
第九步：无性繁殖变异植株，观察农艺性状，并对其后代进行遗传学分析。其中变异植株进行无性繁殖而不是有性生殖的原因是　　　　　　　　　　　　.　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　 　
　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
(2)植物细胞中氨基酸的代谢是受末端产物调控的，当细胞中某种氨基酸的产量增多，末端产物会抑制相关酶的活性使这种氨基酸产量下降。这种调节方式属于　　　　　　。
(3)得到芦笋抗AEC突变体的过程中，选择细胞作为实验材料，而不是幼苗为实验材料的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。(答出2点)
17.(14分)人血清白蛋白(HSA)是由肝脏细胞合成的，具有重要的医用价值，原本只能从血清中提取，现利用基因工程的方法生产HSA。图甲为获取的含HSA基因的DNA片段及酶切位点，图乙是三种限制酶的识别序列，图丙为质粒结构示意图。请据图回答下列问题。
(1)①科研人员利用人肝细胞中的　　　　构建出　　　　文库，通过该方法合成的DNA含量较少，可通过PCR进行扩增获取较多的DNA分子，根据该基因的序列(5'-CTAGGTCGAAATTC…TCTCCAACGATCGG-3')，应选择作为PCR的引物是　　　　。
A.引物Ⅰ是5'-CTAGGTCGAAATTC-3'，引物Ⅱ是5'-CCGATCGTTGGAGA-3'
B.引物Ⅰ是5'-CTAGGTCGAAATTC-3'，引物Ⅱ是5'-TCTCCAACGATCGG-3'
C.引物Ⅰ是5'-GATCCAGCTTTAAG-3'，引物Ⅱ是5'-AGAGGTTGCTAGCC-3
D.引物Ⅰ是5'-GATCCAGCTTTAAG-3'，引物Ⅱ是5'-CCGATCGTTGGAGA-3'
②为使HSA基因能与质粒正确连接，根据图甲、乙、丙，应选择限制酶
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
切割目的基因。
(2)PCR扩增结束后需要对PCR产物进行检测，常采用电泳的方法。PCR产物加到加样孔中，加样孔一端应朝向电极的　　　　极。电泳一段时间后进行检测，若电泳带有　　　条，且与DNA Marker对比，产物大小正确，表明PCR扩增成功。
(3)现利用小鼠乳腺作为生物反应器生产该蛋白质，可将重组质粒通过　　　　法导入小鼠的　　　　细胞中，然后将转化的细胞进行培养，由于无法进行全体外胚胎培养，　　　　成为胚胎工程中获得转基因小鼠的唯一方法。利用　　　　　技术检测小鼠乳腺分泌物，可以判断目的基因是否表达。
18.(14分)番茄枯萎病是番茄主要病害之一。研究人员拟从新鲜蚯蚓粪中筛选出对番茄枯萎病有良好抑制效果的甲细菌，以期为番茄枯萎病提供生物防治。将蚯蚓粪加入无菌水中制成悬浮液，利用营养琼脂培养基(NA)进行分离后，将获得的不同甲菌株分别接种至细菌营养肉汤培养基(NB)。培养48 h后，进行“平板对峙实验”[该实验的操作：在有马铃薯葡萄糖培养基(PDA)的空白平板一侧放置一直径为5 mm番茄枯萎病菌的菌块，在平行另一侧放置直径为5 mm的经过处理(滴加甲菌液或清水)的滤纸片]，每组做3次重复实验，实验流程见图1。
(1)将3 g采集的蚯蚓粪加入盛有　　　　mL无菌水的三角瓶中，充分振荡，即成10-2稀释液，步骤Ⅰ使用的接种方法是　　　　　　　　　，实验流程先Ⅰ后Ⅱ的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
(2)以下关于“平板对峙实验”的叙述，正确的有哪些？　　　　。
A.对照组滤纸片用无菌水处理
B.实验组滤纸片用甲菌菌液处理
C.放置滤纸后随即测量并计算抑制率
D.该实验结果不能说明抑菌效果
(3)已知筛选的甲菌株能合成并分泌一种能抑制番茄枯萎病菌生长的细胞壁降解酶(PMG)。现研究人员获取得到PMG基因，并将其导入番茄细胞中，预期得到抗枯萎病的转基因植株。含PMG基因的DNA片段、Ti质粒的结构及限制酶切割位点如图2所示。
①大量扩增PMG目的基因可以用　　　　　　(中文名称)技术，扩增时所用的直接能源物质是　　　　。
②根据图2信息，将PMG基因与Ti质粒构建重组DNA分子时，应选用的限制酶是　　　　　　　　。
③将农杆菌放于　　　　　　的CaCl2溶液中处理，使其变为感受态细胞，再在低温条件下将农杆菌与重组质粒混合，最后进行短暂的　　　　　　处理，该短暂处理的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
将农杆菌涂布接种于添加有　　　　　　　　　的LB固体培养基上筛选含有重组质粒的农杆菌。用阳性农杆菌感染植物细胞，目的基因就会随　　　　整合到植物染色体DNA中，最后通过　　　　　　　技术培育出完整的转基因植株。
④为确定转PMG基因番茄植株能抗枯萎病，在个体水平上的检测方法是
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
19.(12分)糖尿病主要表现为高血糖和尿糖，长期的高血糖会导致多种器官受损、功能障碍。回答下列问题。
(1)人体主要依靠　　　　　　调节维持正常血糖浓度，参与调节的激素有多种，其中可以口服的有　　　　　　　　　　(写出两种即可)。
(2)给予健康小鼠高血糖刺激，小鼠血浆胰岛素含量的变化如下图所示。胰岛素的分泌取决于　　　　。0~5 min胰岛素可能来自　　　　　　细胞中之前储存的；20 min后，出现胰岛素分泌的第二次增多，原因可能是　　　　　　　　　　　　。某人患糖尿病，但注射胰岛素治疗无效，其患病原因可能是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
(3)药物K是国外开发的口服降糖药，可有效降低餐后血糖高峰。我国科研人员开发了具有自主知识产权的同类型新药N和H。为研究N和H二者联合对餐后血糖的影响，请根据提供的实验材料，完善实验思路，预测实验结果，并进行分析与讨论。
材料与用具：空腹健康小鼠若干只，溶于生理盐水的药物K、N、H，淀粉溶液，血糖检测仪等。(要求与说明：给药和淀粉方式为灌胃，答题时对小鼠的给药和淀粉剂量不作具体要求)
①完善实验思路：
a.将生理状态相同的空腹健康小鼠随机均分成　　　组，并编号，用血糖检测仪分别测定各组中每只小鼠的初始血糖浓度并记录；
b.甲、乙、丙组小鼠分别灌胃生理盐水+淀粉溶液、药物N+淀粉溶液、药物H+淀粉溶液，　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　，
每隔一定时间用血糖检测仪检测各组中每只小鼠的血糖浓度并记录；
c.对所得实验数据进行统计处理分析。
②预测实验结果：若药物N和药物H均能有效降低餐后血糖高峰，且二者共同作用效果更强，请设计一个坐标系，将除乙、丙组外的其余组的实验结果用曲线图表示。
③分析与讨论：
甲组血糖水平达到高峰后缓慢下降，是由于胰岛素　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　(答出2点即可)。
第十、十一单元素养评估卷
1.B　【解析】 动物细胞核移植技术是指将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术，因此利用细胞核移植技术可培育优良种畜，A正确；细胞核移植技术可用于人的治疗性克隆，我国禁止生殖性克隆人，B错误；核移植技术与干细胞诱导技术结合，可克隆出人体相应的器官，用于修补人体损伤的器官，C正确；利用核移植技术克隆转基因动物，获得的克隆动物遗传物质主要来自细胞核供体，可以保持转基因动物的性状，D正确。
2.B　【解析】 哺乳动物胚胎的培养液成分一般都比较复杂，除一些无机盐和有机物外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质，且需配制一系列不同成分的培养液用于培养不同发育时期的胚胎，A正确；培养基中植物激素的浓度及比例会影响植物再分化的方向，如生长素类与细胞分裂素类物质的比值大时有利于根的分化，比值小时有利于芽的分化，B错误；与植物组织培养相比，动物细胞培养需要添加动物血清，由于人们对动物细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分，促进细胞增殖和生长，C正确；扩大培养时，持续增加营养物质的浓度会提高外界溶液浓度渗透压，影响菌种正常生命活动，不利于提高菌种数量，D正确。
3.C　【解析】 使用酶解法制备a和b(原生质体)时，需先用较高渗透压的溶液处理植物细胞，使植物细胞失水，处于微弱的质壁分离状态，即处于微弱的收缩状态，然后用纤维素酶和果胶酶消化去除细胞壁，获得原生质体，A错误；a和b原生质体融合依赖膜的流动性，融合后的原生质体在适宜条件下再生出细胞壁后才能进行有丝分裂，B错误；④过程为组织培养过程，属于无性繁殖，可保持c的遗传性状，可迅速产生扩大其数量，C正确；①过程获得的a和b为原生质体，没有细胞壁，失去了原来细胞的形态，D错误。
4.C　【解析】 葡萄糖是细胞的主要能量来源，同时也是机体新陈代谢所必需的物质，培养基中添加葡萄糖的主要目的是提供碳源和能源，A错误；非必需氨基酸是指细胞可以自行合成的氨基酸，而必需氨基酸是指细胞不能自行合成，必须从培养基中获取的氨基酸，因此培养基中必须添加必需氨基酸，B错误；细胞具有一定的自我调节和合成能力，即使在培养基中没有添加外源性的脂质，细胞仍然能够通过自身的代谢途径合成新的脂质，C正确；直接添加DNA并不会促进细胞分裂，反而可能会干扰细胞的正常功能，D错误。
5.B　【解析】 利用平板划线法可分离获得单菌落，A正确；以DBP为唯一碳源的培养基为选择培养基，可以筛选出能分解DBP的微生物，扩大培养微生物需要用具有全面营养物质的培养基，B错误；斜面培养基常用于微生物的保存，通过接种环挑取单菌落接种至斜面培养基中，可以实现微生物的保存和传代，C正确；接种、分离后，使用过的器皿需先经彻底灭菌后再洗涤，以免造成环境污染，D正确。
6.C　【解析】 过程①为同期发情处理，使受体母牛子宫的生理状态与良种母牛相同，确保胚胎移植后能正常发育，A正确。受精作用是精子和卵细胞结合形成受精卵的过程，哺乳动物的受精过程在输卵管中完成，B正确。在进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行分割，C错误。题图中甲为胚胎的滋养层细胞，可用于DNA分析，进行性别鉴定，用SRY基因制备的特异性探针检测的结果若为阴性，表明胚胎细胞中不含SRY基因，说明没有Y染色体，将来发育为雌性动物；若结果为阳性，则表明胚胎细胞中含SRY基因，将来发育为雄性动物，D正确。
7.C　【解析】 转基因植物合成的蛋白质，可能成为某些人群新的过敏源；设计试管婴儿技术必须获得政府部门的相关批准，以防滥用；即使转基因植物的外源基因来源于自然界，也可能会产生安全性问题，如某些转基因植物产生的蛋白质可能会成为某些人的新的过敏源；生物武器具有传染性强、作用范围广等特点，应严格禁止。
8.D　【解析】 用不同pH的缓冲液分别处理该酶，自变量是pH，可以探究该酶的最适pH，A正确；分别以蛋白质和淀粉为底物，自变量是底物的种类，可以探究该酶的专一性，B正确；控制不同的高温处理时间，自变量是温度，可以探究该酶的热稳定性，C正确；酶作用的机理是降低化学反应所需要的活化能，不能为化学反应提供能量，D错误。
9.D　【解析】 重组质粒中含有潮霉素抗性基因，能表达出潮霉素抗性物质，在含潮霉素的培养基上存活的农杆菌不一定是导入了LFY基因的农杆菌，还有可能是只导入了普通质粒的农杆菌，因此只有在含潮霉素的培养基上存活并导入了LFY基因的农杆菌才可用于侵染菊花叶片，A错误；植物组织培养的培养基中的生长素和细胞分裂素的浓度和配比会影响愈伤组织的生长和分化，在脱分化形成愈伤组织的过程中要求生长素和细胞分裂素的比例相当，而在再分化过程中生长素和细胞分裂素比值高有利于根的分化，比值低有利于芽的分化，B错误；Ⅰ愈伤组织是一团无组织结构、排列疏松而无规则、高度液泡化的、呈无定形状态的、具有分裂能力的薄壁细胞，C错误；诱导出芽和根的试管苗要先炼苗以适应外界的低湿强光环境才可进行移栽，这样有助于试管苗逐渐适应室外环境，并减少在移栽后因气候和土壤变化而造成的伤害，D正确。
10.C　【解析】 引物的延伸方向为5'→3'，故题图所给引物1设计区碱基序列所在的DNA链为非模板链，引物1的碱基序列与非模板链的碱基序列相同，而引物2要以引物2设计区碱基序列所在的DNA链为模板，故引物2的碱基序列应与所给序列碱基互补配对，则该实验中需设计的引物2为5'-ATGATTTAACGAGAGTTGAA-3'，A错误。若酶切产物只能观察到450 bp左右的DNA条带，则表明第226位碱基是正常的G，该位点所在的内含子能被正常剪接，该水稻品种为GG型，B错误。若Wx基因中第226位碱基是正常的G，该位点所在的内含子能被正常剪接，胚乳中直链淀粉含量高，基因型记作GG；若该位点突变成T，则不能被正常剪接，胚乳中直链淀粉的合成水平会降低，基因型记作TT。故GT杂合型水稻品种的G能被酶切成两段，而T不能被酶切，故酶切电泳结果为3条条带，C正确。因G能被剪接，而T不能，故组成题述两种淀粉合成酶的氨基酸的数目不同，D错误。
11.A　【解析】 将菌种放入摇瓶进行振荡培养，有利于酵母菌充分获得营养物质和O2，A正确；平板划线法不可以用于酵母菌的计数，B错误；根据题干“筛选获得能表达胰岛素基因的酵母菌后，需进行扩大培养”可知，发酵初期需要通入一定量的氧气，促进酵母菌的繁殖，利于后期的扩大培养，C错误；酵母菌在不同发酵阶段要求的环境条件不同，发酵产物也不同，D错误。
12.C　【解析】 凝胶的孔隙有一定大小限制，有最大极限和最小极限，A正确；电泳缓冲液可维持合适的pH，并使溶液具有一定的导电性，B正确；由于甲的相对分子质量是乙的2倍，根据电泳结果可知，甲、乙、丙迁移的方向只能是从上向下，C错误；甲、乙均由一条肽链组成，而丙是由两条链组成的，则丙最可能是胰岛素，D正确。
13.C　【解析】 分析图1可知，自变量是NaCl的浓度，因变量是种子根长，图中随着NaCl溶液浓度的增加，NaCl对根生长的抑制作用增强，A正确。图2中施加NaCl溶液一组的种子根长和图1中施加NaCl溶液浓度为120 mmol·L-1的种子根长一样，所以图2 中使用的 NaCl溶液的浓度为120 mmol·L-1，B正确。分析图1：自变量是NaCl的浓度，因变量是种子根长，图中随NaCl溶液浓度增加，对根生长的抑制作用增强；分析图2：从图中可以看出AVG的使用可减轻NaCl溶液的抑制作用；分析图3：从图中可以看出NaCl溶液可促进乙烯合成基因的表达。综合分析，NaCl可能通过影响乙烯基因的表达来抑制根细胞的生长，C错误。乙烯和高浓度 NaCl在调节根细胞生长方面均表现为抑制生长，即表现为协同作用，D正确。
14.C　【解析】 诱导植物原生质体融合的方法有离心、振动、电刺激和聚乙二醇，因此，利用灭菌后的聚乙二醇可诱导原生质体发生融合，A正确；当观察到质膜表面含有红绿两种荧光时，说明两种原生质体已经融合，故可通过观察质膜表面的双色荧光来筛选融合的原生质体，B正确；杂种细胞经过愈伤组织和根、芽阶段也能形成杂种植株，C错误；该研究将中华猕猴桃(果大、不抗寒)和狗枣猕猴桃(果小、抗寒)进行体细胞杂交，成功培育了果大、抗寒的可育杂种植株，因此，抗寒能力是鉴定杂种植株是否符合要求的检测指标之一，D正确。
15.(1)逆转录　PCR
(2)转化　质量和浓度
(3)抗体　细胞株　抗N 蛋白的单克隆抗体可与N 蛋白发生特异性的结合
【解析】 (1)以RNA为模板合成cDNA的过程为逆转录，需要逆转录酶参与催化。以cDNA为模板，利用PCR技术可以对cDNA进行扩增，从而获得N蛋白基因。(2)制备表达N蛋白的细胞，需将N蛋白基因与质粒重组，并将重组质粒导入大肠杆菌细胞中。N蛋白基因进入大肠杆菌细胞内，并在大肠杆菌细胞内维持稳定和表达的过程称为转化。为提高转化的效率，需考虑重组质粒的质量和浓度等。(3)制备单克隆抗体时，首先取免疫小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，待融合细胞生长到培养孔底面积的1/10时进行抗体筛选。检出的阳性孔用有限稀释法进行多次克隆化，建立单克隆抗体细胞株。若最终获得的单克隆抗体可与N 蛋白发生特异性的结合，与无关蛋白不发生反应，则达到实验要求。
16.(1)作为诱变剂(诱发突变)　让愈伤组织生长　筛选得到抗AEC的细胞　胚状体　脱分化　无抗性和抗性差　原始愈伤组织　赖氨酸或甲硫氨酸　无性繁殖能保持亲本的优良性状，而有性生殖后代可能会出现性状分离
(2)负反馈调节
(3)空间利用率更高；周期更短；得到的变异体数目更多；得到的变异体都是抗性细胞而不是嵌合体
【解析】 (1)植物组织培养过程中，选择生长良好的芦笋愈伤组织用0.1%甲磺酸乙酯(EMS)处理24 h，EMS的作用是作为诱变剂(诱发突变)；继代培养2~3周的目的是让愈伤组织生长；继代培养基中0.5 mg/L AEC的作用是筛选得到抗AEC的细胞；植物组织培养过程中，由体细胞发育成的类似胚的结构称为胚状体；由外植体形成愈伤组织的过程是脱分化；0.5 mg/L AEC可抑制芦笋组织的生长，故将每个编号愈伤组织分别转移到含0.5 mg/L AEC的培养基上，可以淘汰无抗性和抗性差的细胞系；分析题意，AEC抑制芦笋组织生长的作用可被赖氨酸或甲硫氨酸部分解除，故可用氨基酸分析仪分析各抗性细胞系的氨基酸含量，并和原始愈伤组织作比较，其中赖氨酸或甲硫氨酸含量提高，说明抑制作用被解除，即为需要选择的目标植株；由于无性繁殖能保持亲本的优良性状，而有性生殖后代可能会出现性状分离，故变异植株进行无性繁殖而不是有性生殖。
(2)在一个系统中，系统本身工作的效果反过来又作为信息调节该系统的工作，这种调节方式叫反馈调节，如果结果是抑制和减弱最初发生变化的那种成分的变化，则为负反馈调节。植物细胞中氨基酸的代谢是受末端产物调控的，当细胞中某种氨基酸的产量增多，末端产物会抑制相关酶的活性使这种氨基酸产量下降，这种调节方式属于负反馈调节。
(3)由于细胞的空间利用率更高、周期更短、得到的变异体数目更多、得到的变异体都是抗性细胞而不是嵌合体，故得到芦笋抗AEC突变体的过程中，选择细胞作为实验材料，而不是幼苗为实验材料。
17.(1)①mRNA　cDNA　A　②BamHⅠ和EcoRⅠ
(2)负　1
(3)显微注射　受精卵　胚胎移植　抗原-抗体杂交
【解析】 (1)①人血清白蛋白(HSA)是由肝细胞合成的，为了获得HSA基因，可从人体的肝细胞中提取mRNA，通过逆转录获得cDNA(双链)，构建出cDNA文库。由碱基互补配对原则可知，该基因的两条链序列分别为5'-CTAGGTCGAAATTC…TCTCCAACGATCGG-3'、5'-CCGATCGTTGGAGA…GAATTTCGACCTAG-3'，PCR过程需要两种引物，该引物能分别与目的基因两条链的3'端通过碱基互补配对结合，故引物Ⅰ能与5'-GAATTTCGACCTAG-3'进行配对，为5'-CTAGGTCGAAATTC-3'，引物Ⅱ能与5'-TCTCCAACGATCGG-3'配对，为5'-CCGATCGTTGGAGA-3'，故选A。②选用限制酶Sau3AⅠ切割会破坏目的基因，故不能选择限制酶Sau3AⅠ切割目的基因。为了防止目的基因与质粒间的任意连接，应该选择Sau3AⅠ、EcoRⅠ切割质粒。Sau3AⅠ和BamHⅠ的黏性末端相同，故采用BamHⅠ、EcoRⅠ切割目的基因。
(2)将装有凝胶的胶托从胶盒中取出，放入电泳槽内，加样孔一端朝向负极，向电泳槽中加入电泳缓冲液，使其没过凝胶。电泳一段时间后进行检测，记录Marker每个条带的位置和相应DNA片段长度，若电泳带有1条，且与DNA Marker对比，产物大小正确，表明PCR扩增成功。
(3)将重组质粒导入动物细胞(受精卵)，常采用显微注射法。将早期胚胎通过胚胎移植技术导入雌性小鼠体内。为了检测小鼠乳腺分泌物中是否合成了人血清白蛋白(HSA)，可采用抗原-抗体杂交的方法。
18.(1)297　平板划线法　先分离纯化，再扩大培养
(2)AB
(3)①聚合酶链式反应　dNTP　②BamHⅠ和HindⅢ　③低温、低浓度　热刺激　使外源DNA分子更容易进入农杆菌，提高转化效率　氨苄青霉素或潮霉素　T-DNA　植物组织培养　④用番茄枯萎病菌感染转PMG基因的番茄植株，观察其抗病情况
【解析】 (1)为了将原液稀释10-2倍，可将3 g采集的蚯蚓粪加入盛有297 mL无菌水的三角瓶中，充分振荡。由图1可知，NA培养基中是连续平行划线的结果，故步骤Ⅰ使用的接种方法是平板划线法。步骤Ⅰ为接种，步骤Ⅱ为将NA培养基中获取的不同菌株分别接种至NB培养基，实验流程先Ⅰ后Ⅱ的目的是先分离纯化，再扩大培养。
(2)本实验的目的是探究甲菌菌液是否对番茄枯萎病有良好抑制效果，故实验组滤纸片用甲菌菌液处理，对照组滤纸片用无菌水处理，A、B正确；由于对照组没有用甲菌菌液处理，故培养至对照组枯萎病菌菌落长满时，通过对滴加甲菌菌液的实验组统计后，开始测量并计算抑制率，C错误；通过对比对照组和实验组的实验结果，可以说明该实验的抑菌效果，D错误。
(3)①PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，目的基因可以用聚合酶链式反应技术进行大量扩增。PCR技术扩增时所用的直接能源物质是dNTP，dNTP转变为脱氧核苷酸过程中，脱去磷酸基团，释放高能磷酸键中的能量。②由图2可知，两个标记基因上均有Bcl Ⅰ的识别位点，所以不能用Bcl Ⅰ，而质粒上无KpnⅠ的识别位点，所以构建表达载体应选用BamHⅠ和HindⅢ。③将农杆菌放在低温(高温对细菌不利)、低浓度(避免细胞失水)的CaCl2溶液中使细胞膜的通透性改变，成为感受态细胞，该状态为容易从周围环境中吸收外源DNA的状态，进而可提高转化效率。最后进行短暂的热刺激处理，使外源DNA分子更容易进入农杆菌，提高转化效率。卡那霉素抗性基因被限制酶HindⅢ破坏，因此将农杆菌涂布接种于添加有氨苄青霉素或潮霉素的LB固体培养基上筛选含有重组质粒的农杆菌。用农杆菌感染植物细胞时，目的基因会随T-DNA整合到植物染色体DNA中，最后通过植物组织培养技术培育出完整的转基因植株。④为确定转PMG基因番茄植株能抗枯萎病，在个体水平上的检测方法为用番茄枯萎病菌感染转PMG基因的番茄植株，观察其抗病情况。
19.(1)体液(激素)　肾上腺素、糖皮质激素、甲状腺激素
(2)血糖浓度　胰岛β　胰岛素基因表达增强　胰岛素无法与细胞膜上的相应受体结合，患者细胞膜上缺乏胰岛素受体
(3)①5　丁、戊组小鼠分别灌胃药物N+药物H+淀粉溶液、药物K+淀粉溶液
②
③促进组织细胞加速摄取、储存和利用葡萄糖；胰岛素抑制非糖物质转化成葡萄糖；胰岛素抑制肝糖原分解成葡萄糖
【解析】 (1)血糖平衡的调节既存在神经调节又存在体液(激素)调节，但是人体主要依靠体液(激素)调节维持正常血糖浓度，参与调节的激素有多种，其中可以口服的有肾上腺素、糖皮质激素、甲状腺激素，这三种激素的本质都不是蛋白质或多肽，口服不会水解失去其作用，而胰岛素和胰高血糖素口服会水解失去其作用，不可口服。
(2)胰岛素的分泌取决于血糖浓度。胰岛素由胰岛β细胞分泌，0~5 min胰岛素可能来自胰岛β细胞之前储存的；20 min后，出现胰岛素分泌的第二次增多，原因可能是胰岛素基因表达增强，使得胰岛素含量增多。胰岛素是激素，需要与相应受体结合发挥作用，某人患糖尿病，但注射胰岛素治疗无效，其患病原因可能是胰岛素无法与细胞膜上的相应受体结合，患者细胞膜上缺乏胰岛素受体。
(3)①实验遵循对照原则，结合题干“药物K是国外开发的口服降糖药，可有效降低餐后血糖高峰。我国科研人员开发了具有自主知识产权的同类型新药N和H。为研究N和H二者联合对餐后血糖的影响”可知，实验需要设置：灌胃生理盐水+淀粉溶液、药物N+淀粉溶液、药物H+淀粉溶液、药物N+药物H+淀粉溶液、药物K+淀粉溶液共5组实验。②预测实验结果：若药物N和药物H均能有效降低餐后血糖高峰，且二者共同作用效果更强，则除乙、丙组外的其余组的实验结果曲线图如答案所示。③甲组血糖水平达到高峰后缓慢下降，是由于胰岛素促进组织细胞加速摄取、储存和利用葡萄糖，胰岛素抑制非糖物质转化成葡萄糖，胰岛素抑制肝糖原分解成葡萄糖，从而降低血糖。

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