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山西省怀仁市大地学校2024-2025学年高二下学期5月期中考试生物试题
一、单选题
1．下列关于传统泡菜制作的叙述，错误的是（　　）
A．泡菜中乳酸的质量分数为0.4%~0.8%时，泡菜的口味和品质最佳
B．制作泡菜的流程为选择菜料→调味装坛→密封发酵→配制并倒入盐水→成品
C．调味装坛时，晾干的菜料装至半坛时放入香辛料，继续装至八成满
D．添加盐水时，盐水需要煮沸冷却后倒入坛内，使盐水没过全部的菜料
2．下列关于家庭制作果酒、果醋的叙述，正确的是（　　）
A．果酒、果醋制作中利用的两种菌种均为好氧型微生物
B．果酒制作过程中，不能对材料多次反复冲洗，以防止菌种流失
C．可先进行果酒发酵，后通入无菌空气并降低温度进行果醋发酵
D．当缺少糖源时，醋酸菌产生的酶可以直接将酒精转化为乙酸和CO
3．无菌技术是一套系统性的操作规范，旨在防止微生物污染，广泛应用于医疗、实验室及制药等领域。下列叙述错误的是（　　）
A．获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染
B．无菌技术主要包括消毒和灭菌，煮沸是常用的消毒方法之一
C．玻璃吸管、培养皿等用具一般采用湿热灭菌的方法来灭菌
D．微生物接种时，火焰灼烧接种环，待其冷却后才能接触样本
4．下列关于细胞工程的叙述，正确的是（　　）
A．细胞工程均以细胞生物学或分子生物学为基本原理进行操作
B．人们可以有目的地通过在分子水平上进行操作，从而获得相应的细胞产品
C．将植物细胞的叶绿体导入酵母菌细胞中，这属于细胞工程的研究范畴
D．细胞工程的最终目的都是获得相应的特定细胞、组织、器官或个体
5．传统的基于慢病毒感染、胚胎基因编辑构建非人灵长类脑疾病动物模型常出现操作困难、编辑基因脱靶等问题。若要对非人灵长类动物的体细胞进行基因编辑并获得阳性克隆的细胞，利用体细胞核移植技术构建动物疾病模型更具有优势。下列说法错误的是（ ）
A．将经基因编辑的单个体细胞注入去核的MII期卵母细胞中
B．用电刺激、Ca2+载体等方法激活重构胚，促进其分裂、发育
C．进行胚胎移植前，要对供体和受体进行免疫检查，以防发生免疫排斥
D．重构胚必须移植到同种、生理状态相同的雌性子宫中才能发育成个体
6．耐高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。嗜热菌可以在高温环境中生存，其产生的淀粉酶最适温度较高。筛选能产生耐高温淀粉酶的嗜热菌过程如图1所示，其中I号培养基用碘液处理的结果如图2所示。下列叙述正确的是（ ）
A．图2中周围不显蓝色的菌落含有所需菌种
B．倒平板后对培养皿进行高压蒸汽灭菌
C．淀粉是图2所示固体培养基的唯一碳源
D．甲乙试管中均为选择培养基
7．CTLA-4和PD-1均是T细胞表面的受体分子，与特定分子结合后，能抑制T细胞激活或使T细胞凋亡，从而使机体肿瘤细胞免受T细胞攻击。抗CTLA-4或抗PD-1单克隆抗体具有较好的抗肿瘤效果。科研人员通过动物细胞融合技术将两种不同的杂交瘤细胞融合形成双杂交瘤细胞，双杂交瘤细胞能够悬浮在液体培养基中生长繁殖，其产生的抗CTLA-4和抗PD-1的双克隆抗体显示具有更好的疗效，如图所示。下列叙述不正确的是（　　）

A．双杂交瘤细胞无需识别CTLA-4和PD-1抗原，就能产生双特异性抗体
B．双克隆抗体与肿瘤细胞的结合具有更强的特异性，从而减少副作用
C．对培养到一定密度的双杂交瘤细胞进行传代培养时，无需使用胰蛋白酶处理
D．使用双克隆抗体治疗肿瘤的原理是让机体产生更强的细胞免疫反应
8．研究表明，髓系细胞触发受体2（TREM2）是一种免疫抑制受体，在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。因此，TREM2抗体药物有望提高肿瘤免疫疗法的疗效。下图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，下列说法正确的是（ ）
A．步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射TREM2蛋白和分泌TREM2抗体的杂交瘤细胞
B．经步骤②诱导后融合的细胞既能分泌TREM2抗体又可无限增殖
C．步骤③和④的培养孔中均含有TREM2蛋白，依据的原理都是抗原一抗体杂交
D．步骤⑥和植物组织培养均需使用二氧化碳培养箱进行大规模培养
9．为了对重金属污染的土壤进行生物修复，研究者将从杨树中克隆的重金属转运蛋白（HMA3）基因与外源高效启动子连接，导入杨树基因组中（如图）。
为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的HMA3基因，同时避免内源HMA3基因的干扰，在进行PCR扩增时，应选择的引物组合是（ ）
A．①+③ B．①+② C．③+② D．③+④
10．下列关于基因工程的说法正确的是（　　）
A．基因工程所需要的工具酶有限制酶、DNA连接酶和载体
B．质粒是一种裸露的、结构简单、独立于原核细胞拟核DNA之外的环状DNA分子
C．利用农杆菌转化法将目的基因插入T-DNA上进而整合到受体细胞的DNA中，其实质是基因重组
D．将某药用蛋白基因导入乳腺细胞中，获得乳腺生物反应器
11．下列相关实验操作正确的是（ ）
A．植物组织培养中，对外植体使用70%的酒精消毒30min，再用次氯酸钠消毒30s
B．在DNA的粗提取与鉴定实验中，粗提取的DNA中可能含有蛋白质
C．将配制的酵母培养基煮沸并冷却后，在酒精灯火焰旁倒平板
D．将接种环烧红，迅速蘸取酵母菌液在培养基上划线培养，获得单菌落
12．如图所示是5种限制酶所识别的DNA序列和酶切位点(↓表示酶切位点，切出的断面为黏性末端或平末端)。
限制酶1：—↓GATC—　
限制酶2：—CATG↓—
限制酶3：—G↓GATCC—　
限制酶4：—CCC↓GGG—
限制酶5：—AG↓CT—
下列有关说法错误的是（ ）
A．不同的限制酶可以切出相同的黏性末端
B．限制酶1可以识别并切割限制酶3所识别的DNA序列
C．限制酶3和4识别的序列都是由6个脱氧核苷酸组成的
D．DNA连接酶可连接由限制酶1和3切出的DNA片段，也可连接由限制酶1和2切出的DNA片段
13．科研人员通过PCR技术获得肝细胞特异性启动子——白蛋白启动子，将该启动子与Cre重组酶基因结合构建表达载体，培育出在肝细胞特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠。下列叙述正确的是（ ）
A．将该表达载体导入肝细胞以获得转基因小鼠
B．利用PCR技术获得白蛋白启动子需设计特异性的引物
C．构建该表达载体需要限制酶和DNA聚合酶
D．通过PCR等技术检测目的基因是否完成表达
14．生殖性克隆和治疗性克隆既有相同点，又有本质的区别。下列相关叙述错误的是（ ）
A．前者面临伦理问题，后者也会面临伦理问题
B．两者都涉及体细胞核移植技术，都与试管婴儿技术有本质的区别
C．前者为了产生新个体，后者为了治疗疾病
D．生殖性克隆人能丰富人类基因的多样性
15．中国首例“设计试管婴儿”的父母均为地中海贫血基因的携带者。此前，二人曾育有一女，此女患有重度地中海贫血。为了生一个健康的孩子，用孩子的脐带血帮助姐姐进行造血干细胞移植，设计了这个婴儿。下列有关叙述错误的是（　　）
A．“设计试管婴儿”和“试管婴儿”均为有性生殖
B．“设计试管婴儿”往往需要对胚胎进行遗传学诊断
C．“设计试管婴儿”应用了体细胞核移植、早期胚胎培养、胚胎移植等技术
D．“设计试管婴儿”与“试管婴儿”都要进行胚胎选择，但两者选择的目的不同
16．生物技术安全是国家安全体系的重要组成部分。规范生物技术研究、防止生物技术滥用，才能保障人民生命健康。下列关于生物技术的安全性和伦理问题的分析，合理的是（ ）
A．转基因作物若被动物食用，目的基因会转入到动物体细胞中
B．将a-淀粉酶基因与目的基因同时转入植物中，可防止基因污染
C．生殖性克隆和治疗性克隆的本质是相同的，都会面临伦理问题
D．若加工后的转基因产品不含转基因成分，则不必进行转基因标识
二、解答题
17．抗凝血酶Ⅲ是一种药用蛋白，对预防和治疗静脉血栓、心肌梗死、脑血管病变具有重要作用。为了提高抗凝血酶Ⅲ的产量，科研人员设计利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备抗凝血酶Ⅲ，并获得了成功。制作崂山奶山羊乳腺生物反应器的流程如图1所示。回答下列问题：
(1)获取抗凝血酶Ⅲ基因后，需通过PCR技术对该基因进行扩增，该技术的原理主要是_________，前提是______________。PCR技术的过程一般包括_______、________、子链延伸三个阶段，需要在反应体系中加入________________（写出两种）等物质。
(2)获取重组质粒后，将重组质粒导入受精卵。从崂山奶山羊A的卵巢中获取卵子和从崂山奶山羊B的睾丸中获取精子，其中精子要进行________处理才具备受精的能力。图1中步骤⑤是指_________，还需要提前对崂山奶山羊A和代孕奶山羊C进行___________处理，该项技术的优势是____________。
(3)科研人员通过实验获得三只转基因奶山羊D（甲、乙、丙）。科研人员对甲、乙、丙三只奶山羊和非转基因奶山羊进行了基因检测。检测结果显示非转基因奶山羊体内无抗凝血酶Ⅲ基因，甲、乙、丙三只奶山羊体内均含有抗凝血酶Ⅲ基因。进一步检测抗凝血酶Ⅲ的表达情况，结果如图2所示。
注：图中黑色条带为抗原—抗体杂交带，表示相应蛋白质的存在。M泳道条带为相应标准蛋白所在位置。
根据以上信息分析，该检测结果说明___________。
18．人体心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI）和肌钙蛋白C（cTnC），其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题：

(1)动物细胞培养时，培养基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要的营养成分外，往往还需加入一定量的_____________，以满足动物细胞培养的营养需要。动物细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是_____________。
(2)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的______。为了防止有害代谢物的积累，可采用_____________的方法，以便清除代谢物。
(3)每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是________。最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合。
(4)甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是________，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得_____________。
(5)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示：

据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是____________，可通过测定____________来判断待测抗原量。
(6)单克隆抗体的制备技术是在动物细胞融合技术上发展起来的，与常规的血清抗体相比，单克隆抗体最大的优点在于_____________。
19．天然蛋白t-PA（组织型纤溶酶原激活剂）是一种重要的蛋白酶，负责激活纤溶酶原，从而生成纤溶酶。纤溶酶能够降解血液中的纤维蛋白凝块，是心梗和脑血栓的急救药。研究证实，将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低其诱发出血的副作用。如图表示采取基因工程方法表达t-PA改良基因，制造改良t-PA蛋白的过程。回答下列问题：

(1)制造出性能优异的改良t-PA过程被称为_______工程，对t-PA的改造不能直接通过改造蛋白质实现，最终还必须通过_______来完成。
(2)t-PA突变基因最终需要与pCLY11质粒重组才能构建基因表达载体。pCLY11质粒DNA分子上有复制原点，可以保证质粒在受体细胞中能_______；有多个限制酶切位点，便于_______。
(3)对目的基因进行PCR扩增后，需要采用_______方法对目的基因产物进行鉴定，在凝胶中DNA分子的迁移速率一般与_______（答出两个）有关。凝胶中的DNA分子经过染色后，可以被_______检测出。
(4)构建重组质粒时需要选用限制酶_______切割质粒pCLY11。将重组质粒和经处理过的大肠杆菌细胞充分混合后。利用标记基因和牛肉膏蛋白胨培养基筛选成功导入了重组质粒的大肠杆菌菌株，具体操作是_______。
三、实验题
20．人工瘤胃模仿了牛、羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题：
(1)平板划线法____（填“能”或“不能”）用于实验室中分离纯化微生物。
(2)在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是____（填序号）。
①酒精灯；②培养皿；③显微镜；④无菌水；⑤接种针
(3)若在倒平板过程中不小心在皿盖和皿底之间部位溅上培养基，则该培养皿不能再使用的原因是____。
(4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上，筛选到了几株有透明降解圈的菌落（见图1）。图1中降解圈大小与纤维素酶的____有关。图1中降解纤维素能力最强的菌株是①，依据是____。
(5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4，在不同温度和pH条件下进行发酵，测得发酵液中酶活性的结果如图2，推测菌株____更适合用于人工瘤胃发酵，理由是____。
四、解答题
21．水稻种子中直链淀粉的含量过多会影响品质和口感。研究人员欲将一段DNA片段A插入淀粉合成酶基因（基因D）中，使之失活（失活的淀粉合成酶基因标记为基因d）.从而降低稻米中直链淀粉的含量。回答下列问题：
(1)基因型为DD的水稻种子经_____后形成愈伤组织，将愈伤组织细胞放入________酶溶液中处理后获得原生质体，与片段A进行一系列处理后的原生质体需_______后形成完整细胞，再进一步培育成新植株。
(2)通过PCR检测新植株中是否导入了片段A时，发现某些植株检测结果呈阳性.但种子中直链淀粉含量未显著下降，可能的原因有：①引物序列长度_______. 导致PCR产物特异性不强；②插入的片段A___________导致基因 D未失活。
(3)为检测转基因水稻中的片段A是否会扩散到其他物种导致基因污染，取基因型为dd的水稻植株（N）与杂草A、B一起种植。取各种植物细胞的DNA经酶切、PCR后进行电泳，结果如图所示：

注:A1、Bl为对应植株的子一代。
电泳时.点样孔位于____________（填“甲侧”或“乙侧”），结果表明.转基因水稻中的片段A通过基因交流转移到了杂草__________（填“A”“A1”“B”或“B1”）中。
(4)将抗除草剂基因导入水稻可获得抗除草剂水稻，在培育过程中可采取多种方法避免基因污染：①将目的基因转入到水稻细胞的___________（填细胞结构）中。②外源a淀粉酶基因可使含有该基因的花粉失去活性，请利用a-淀粉酶基因提出一条转基因措施：______________
参考答案
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 B B C C C A B A B C
题号 11 12 13 14 15 16
答案 B D B D C B
17．(1) DNA的半保留复制 要有一段已知该基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物 变性 复性 模板 DNA、引物、热稳定 DNA 聚合酶（Taq 酶）、dNTP（脱氧核苷酸）（任写两种）
(2) 获能 胚胎移植 同期发情 充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，大大缩短了供体本身的繁殖周期
(3) 乙、丙奶山羊体内的抗凝血酶Ⅲ基因能够表达，而甲奶山羊体内的抗凝血酶Ⅲ基因不能表达
18．(1) 动物血清 维持培养液的pH
(2) 抗生素 定期更换培养液
(3)加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的浆细胞
(4) 乙和丙 能产生抗cTnI抗体的杂交瘤细胞
(5) 与待测抗原结合，并催化检测底物生成产物 酶催化特定底物反应（酶促反应的）产物量
(6)能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备
19．(1) 蛋白质 改造t-PA基因
(2) 能在受体细胞中复制并稳定保存 外源DNA片段插入
(3) 琼脂糖凝胶电泳 凝胶浓度、DNA分子的大小和构象 （波长为300nm）的紫外灯
(4) XmaⅠ和BglⅡ 将经处理过的大肠杆菌接种到含新霉素的牛肉膏蛋白胨培养基，菌落呈白色的为成功导入了重组质粒的大肠杆菌菌株
20．(1)能
(2)③⑤/⑤③
(3)空气中的微生物可能在皿盖和皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要使用该培养皿培养微生物（答出皿盖和皿底之间的培养基被污染即可）
(4) 多少和活性（或数量和活性） 菌落①直径与降解圈的直径比值最小（或菌落①直径/降解圈直径最小或降解圈直径/菌落①直径最大）
(5) J4 发酵过程会产热和产酸，J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高（或J4菌株更适合在高温和酸性条件下生存）
21．(1) 脱分化 果胶酶和纤维素 再生细胞壁
(2) 过短 不位于基因D中
(3) 甲侧 B1
(4) 线粒体或叶绿体 将α-淀粉酶基因与抗除草剂基因导入细胞核的同一DNA分子中

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