资源简介

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2024级高二下学期阶段性测试（生物）
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■保密★启用前 3．肌苷酸（IMP）是一种重要的呈味核苷酸，是嘌呤核苷酸生物合成过程中的一个中间
2024级高二阶段性测试 2026.4 代谢物。谷氨酸棒状杆菌的 IMP 合成途径及其代谢调节机制如图所示（①②等代表不同
的酶）。通常利用营养缺陷型菌株来生产 IMP。下列说法错误的是（ ）
生 物
注意事项：
1. 答卷前，考生务必将自己的姓名、考生号等填写在答题卡和试卷指定位置。
2. 回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。
如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案题号。回答非选择题时，将答案写在答题 A．可利用液体培养基扩大培养所需菌种
卡上。写在本试卷上无效。 B．可选择酶 合成缺陷型菌株用于生产 IMP
3. 考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
C．正常菌株中存在负反馈调节导致腺苷酸不能大量积累
一、单项选择题(本题包括 15 小题，每小题 2分，共 30 分)
D．腺苷酸能够抑制酶 的活性，补充腺苷酸有利于 IMP 积累
1．某中华老字号酿造企业豆瓣酱的主要生产流程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
4．科研人员通过对绵羊受精卵进行基因编辑和胚胎移植等操作，获得了羊毛长度显著长
于对照组的优良品系。下列叙述错误的是（ ）
A．为获取足够的卵子，需对供体绵羊注射促性腺激素进行超数排卵处理
B．为确保受体绵羊与供体绵羊生理状态一致，需进行同期发情处理
A．添加的面粉可以为米曲霉提供碳源
C．受精卵发育至桑葚胚阶段，细胞数量和胚胎总体积均增加
B．“蒸熟”既能破坏大豆细胞结构又能杀菌
D．对照组绵羊的选择需考虑年龄、性别等无关变量的影响
C．保温发酵时，酱豆中有机物的种类和含量均减少
5．植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂
D．后期发酵加入盐水的主要作用是调味和杀菌防腐
交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如下图所示。下列叙述错误的是（ ）
2．关于高中生物实验中涉及到的微生物培养与应用，下列说法正确的是（ ）
A．土壤中分解尿素的细菌可利用稀释涂布平板法进行分离与计数
B．利用醋酸菌制作果醋时，应拧紧瓶盖以促进充分发酵
C．酵母菌纯培养时，灼烧接种环后应快速蘸取菌液划线以防止杂菌污染
D．探究抗生素对细菌的选择作用时，应先将抗生素涂布于平板上再接种
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A．用纤维素酶和果胶酶处理雪莲茎尖外植体获得①
B．外植体形成①的过程中，经历了脱分化和再分化
A．过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异 C．用 X射线处理①可能获得去氢木香内酯高产的细胞
B．过程②中常采用灭活的仙台病毒或 PEG 诱导原生质体融合 D．悬浮培养的培养液中通常含有蔗糖、氨基酸和血清
C．过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素 8．微塑料由塑料废弃物风化形成，难以降解，会危害生态环境和人体健康。有人分离到
D．可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株 X和 Y两种微塑料降解菌，将总菌量相同的 X、Y、X+Y（X:Y=1:1）分别接种于含有等量
6．兰州百合栽培过程中易受病毒侵染，造成品质退化。某研究小组尝试通过组织培养技 微塑料的蛋白胨液体培养基中，培养一段时间后测定微塑料的残留率（残留率=剩余量/
术获得脱毒苗，操作流程如下图。下列叙述正确的是（ ） 添加量×100%），结果如下图。下列叙述正确的是（ ）
A．①为脱分化过程，1号培养基中的愈伤组织是排列规则的薄壁组织团块
A．用平板划线法能测定 X菌组中的活菌数
B．②为再分化过程，愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变或基因重组
B．Y菌组微塑料残留率较高，故菌浓度也高
C．3号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值大于 1
C．混合菌种对微塑料的降解能力高于单一菌种
D．百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，可以作为该研究中的外植体
D．能在该培养基中生长繁殖的微生物都能降解微塑料
7．天山雪莲的次生代谢物去氢木香内酯对 H2O2 诱导的肝损伤有保护作用，利用植物细
9．现代微生物学常采用“高通量筛选”技术对大量候选菌株进行快速检测与评价。科研
胞培养技术生产去氢木香内酯的大致流程如下图。下列叙述正确的是（ ）
人员利用该技术从土壤中筛选淀粉酶高产菌株的流程如图所示，其中吸光值大小与溶液
蓝色深浅呈正相关。下列说法错误的是（ ）
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将每个纯化的 用去核，可整个注入去核的卵母细胞中
从土壤样品中 培养一定时间 反应结束后，向每孔中
单菌落分别接 11．易错 PCR 是利用易发生碱基错误配对的 Taq 酶或改变 PCR 反应条件，降低 DNA 复制
分离纯化得到 后，向每孔中加 加入碘液，检测每孔溶
→ 种到 96 孔板的 → → 的准确性，使扩增产物出现较多突变位点的方法。易错 PCR 技术可用于改造催化效率较
数百个不同的 入可溶性淀粉 液的吸光值，筛选出淀
各个孔中，恒温、 低的天然酶。下列说法错误的是（ ）
细菌单菌落 溶液，继续培养 粉酶产量高的菌株
振荡培养 A．可通过改变 PCR 过程中复性温度来降低 DNA 复制的准确性
A．在上述筛选过程中，淀粉是唯一的碳源 B．易错 PCR 可定向改变天然酶基因的序列，使酶的催化效率提高
B．96 孔板的每个孔中，初始微生物的数量一致 C．改造后的基因某些突变位点对应的氨基酸序列不一定改变
C．吸光值最小的孔中的菌株为目的菌株 D．通过易错 PCR 技术改造后的天然酶在自然界原本不存在
D．高通量筛选技术可以大幅提高筛选效率
10．通过动物细胞工程技术，可以利用患者自身的细胞在体外诱导发育成特定的组织器 12．质粒 K中含有β-半乳糖苷酶基因，将该质粒导入大肠杆菌细胞后，其编码的酶可分
官，然后再移植回患者体内。图 1和图 2 表示利用自身细胞进行器官移植的两种方法， 解 X-gal，产生蓝色物质，进而形成蓝色菌落，如图所示。科研小组以该质粒作为载体，
其中诱导多能干细胞（iPS 细胞）类似于人类的胚胎干细胞。下列叙述正确的是（ ） 采用基因工程技术实现人源干扰素基因在大肠杆菌中的高效表达。下列叙述错误的是
（ ）
A．两种方法都需要运用动物细胞培养技 A．使用氯化钙处理大肠杆菌以提高转化效率，可增加筛选平板上白色和蓝色菌落数
术，需要将细胞置于含有 95%O 和 5%CO 的混合气体的 CO 培养箱中 B．如果筛选平板中仅含卡那霉素，生长出的白色菌落不可判定为含目的基因的菌株2 2 2
B．利用两种方法所获得的组织器官的遗传物质均与患者的完全相同，因此移植后不 C．因质粒 K中含两个标记基因，筛选平板中长出白色菌落即为表达目标蛋白的菌株
会发生免疫排斥反应 D．若筛选平板蓝色菌落偏多，原因可能是质粒 K经酶切后自身环化并导入大肠杆菌
C．可利用农杆菌转化法或显微注射法将Oct3/4 基因、Sox基因、c-Myc 基因和 Klf 13．某同学拟用限制酶（酶 1、酶 2、酶 3和酶 4）、DNA连接酶为工具，将目的基因（两
基因导入成纤维细胞 端含相应限制酶的识别序列和切割位点）和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。
D．图 2中卵母细胞去核实际去除的是纺锤体—染色体复合物，核移植时供体细胞不 限制酶的切割位点如图所示。
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的菌落，不一定含有目的
基因
C．若用 SphⅠ酶切，可通过琼脂糖凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否
D．若用 SphⅠ酶切，携带目的基因的受体菌在含 Amp（氨苄青霉素）和 Tet 的培养
下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是（ ） 基中能形成菌落
A．质粒和目的基因都用酶 3切割，用 E. coli DNA 连接酶连接 二、不定项选择题（本题包括 5 小题，每小题 3 分，共 15 分）
16．最早的双脱氧测序法是 PCR 反应体系中，分别再加入一种少量的双脱氧核苷三磷酸
B．质粒用酶 3切割、目的基因用酶 1切割，用 T4 DNA 连接酶连接
（ddATP、ddCTP、ddGTP 或 ddTTP），子链延伸时，双脱氧核苷三磷酸也遵循碱基互补配
C．质粒和目的基因都用酶 1和酶 2切割，用 T4 DNA 连接酶连接
对原则，以加入 ddATP 的体系为例：若配对的为 ddATP，延伸终止；若配对的为脱氧腺
D．质粒和目的基因都用酶 2和酶 4切割，用 E. coli DNA 连接酶连接
苷三磷酸（dATP），继续延伸；PCR 产物变性后电泳检测。通过该方法测序某疾病患者
14．制备荧光标记的DNA探针时，需要模板、引物、DNA 及对照个体的一段序列，结果如图所示。下列叙述正确的是（ ）
聚合酶等。在只含大肠杆菌 DNA聚合酶、扩增缓冲液、
H2O 和 4 种脱氧核苷酸（dCTP、dTTP、dGTP 和碱基被荧
光标记的 dATP）的反应管①~④中，分别加入如表所示
的适量单链 DNA。已知形成的双链 DNA 区遵循碱基互补
配对原则，且在本实验的温度条件下不能产生小于9个
连续碱基对的双链 DNA 区。能得到带有荧光标记的 DNA
A．上述 PCR 反应体系中只加入一种引物
探针的反应管有（ ）
B．电泳时产物的片段越小，迁移速率越慢
A．①② B．②③ C．①④ D．③④ C．5'-CTACCCGTGAT-3'为对照个体的一段序列
15．用氨苄青霉素抗性基因（AmpR）、四环素抗性基因（TetR）作为标记基因构建的质 D．患者该段序列中某位点的碱基 C突变为 G
粒如图所示。用含有目的基因的 DNA 片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达 17．X 染色体上的 D基因异常可导致人体患病，在男性中发病率为 1/3500，某患病男孩
（其母亲没有患病）X染色体上的基因 D和 H内各有一处断裂，断裂点间的染色体片段
载体（重组质粒），并转化到受体菌中。下列叙述错误的是（ ）
发生颠倒重接。研究者对患儿和母亲的 DNA 进行了 PCR 检测，所用引物和扩增产物电泳
A．若用HindⅢ酶切，目的基因转录的产物可能不同
结果如图。不考虑其他变异，下列分析错误的是（ ）
B．若用 PvuⅠ酶切，在含 Tet（四环素）培养基中
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A．上述甲基化重写没有改变小鼠体内的遗传信息
注：引物组合 S1 和 S2，R1 和 R2 可分别用于对正常基因 D和 H序列的扩增检测
B．体外培养卵母细胞，为防止污染需将培养皿密闭培养在二氧化碳培养箱中
A．该病患者中女性显著多于男性
B．用 R1 和 R2 对母亲和患儿 DNA 进行 PCR 检测的结果相同 C．移植后的囊胚进一步扩大，会导致滋养层破裂，胚胎从其中伸展出来
C．与正常男性相比，患病男孩 X染色体上的基因排列顺序发生改变 D．孤雌小鼠的诞生过程没有精子参与，其基因型与提供卵母细胞的雌鼠相同
D．利用 S1 和 S2 进行 PCR 检测，可诊断母亲再次孕育的胎儿是否患该病 三、非选择题(本题包括 5小题，共 55 分)
18．如图所示，将由 2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后重新 21. 甲醛（CH2O）是一种挥发性有机污染物，严重污染环境并危害人体健康。利用微生
偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是（ ） 物降解甲醛来治理甲醛污染，具有高效、环保、无二次污染等优点。回答下列问题：
A．双抗可同时与 2种抗原结合
(1)从富含甲醛的环境中分离甲醛分解菌时，应使用________（填“固体”或“液体”）
B．利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞
培养基，从营养物质角度考虑，该培养基的特点为 。
C．筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的 2种抗原
D．同时注射 2种抗原可刺激 B细胞分化为产双抗的浆细胞 (2)为提高降解效率，研究人员将甲醛分解基因导入筛选出的甲醛分解菌中，下表为相关
19．融合 PCR 技术采用具有互补末端的引物，形成具有重叠链的 PCR 产物，通过 PCR 产 限制酶的识别序列及酶切位点，下图为获得转基因甲醛分解菌的过程。
物重叠链的延伸，从而将不同来源的任意 DNA 片段连接起来。其原理如图所示，据图分
限制酶 识别序列及酶切位点 限制酶 识别序列及酶切位点
析正确的是（ ）
A．上述过程中使用的引物P2和 P3的碱基需 MboⅠ 5′…↓GATC…3′ SacⅠ 5′…GAGCT↓C…3′
要完全互补配对
SnaBⅠ 5′…TAC↓GTA…3′ BamHⅠ 5′…G↓GATCC…3′
B．设计引物的目的是为了能够从其 3'端开
始连接脱氧核苷酸
C．融合PCR的第一步两条链重叠部位可互为
另一条链的引物
D．若融合PCR的第二步获得128个融合基因，
理论上该过程消耗了 254 个引物
20．2022 年 3月 7日，上海交通大学医学院某研究团队利用基因编辑技术，对小鼠卵母
细胞的 7个甲基化印记控制区域进行 DNA 甲基化重写，并将一个极体注入修饰后的次级
卵母细胞中，成功创造了孤雌生殖的小鼠。下列叙述错误的有（ ）
①据图分析，甲醛分解基因的模板链是________（填“甲链”或“乙链”）。
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②已知甲醛分解基因中不含表中限制酶的识别序列。利用 PCR 技术扩增甲醛分解基因时， 在①过程进行之前对“毛花猕猴桃”用 X射线处理，对“软枣猕猴桃”用_______处理，
选择的引物应为________，为保证甲醛分解基因与载体正确连接，在所选引物上分别添 能在培养基上分裂生长的细胞是_______（不能用图中字母表示）。与传统有性杂交相比，
加的限制酶识别序列的情况是 （要求写 如图所示的细胞工程技术的优势是 。
出在何种引物的5′端或3′端添加何种限制酶的识别序列），不选择另外两种限制酶的 23．双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表
原因是 。 位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，
③将重组质粒导入甲醛分解菌后，将其在含新霉素的培养基培养，长出的呈________（填 其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图 1是某双特异性抗体作用图。图 2是科研
“黄色”或“白色”）的菌落为成功转化的转基因甲醛分解菌。 人员通过杂交一杂交瘤细胞技术生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗
(3) 请设计实验验证转基因甲醛分解菌降解甲醛的效率有所提高，写出实验思路 体的部分过程。请分析回答下列问题：
。
22．毛花猕猴桃营养价值极高，多种植在南方，20 多年前生长在山里，无人问津；软枣
猕猴桃果皮光滑无毛，果实营养丰富，耐寒。某科研所欲利用这两种猕猴桃体细胞，通
过细胞工程的方法培育出猕猴桃新品种，培育过程如下图所示。
(1)单克隆抗体的优点是 ,对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行________
和抗体检测，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
(2)图 2中①步骤注射癌胚抗原的目的是________。图2方框内需要经过________次筛选，
才能获取单克隆杂交一杂交瘤细胞。取一定稀释倍数的杂交瘤细胞悬液加入铺有饲养层
(1)从愈伤组织培养到试管苗的过程一般_______（填“不需要”或“需要”）提供光照， 细胞的多孔板中，适宜条件下培养并进行抗体阳性检测，抗体阳性检测的原理是________。
原因是_______。 若每孔中有很多细胞，阳性反应孔中的细胞还需多次稀释培养检测的目的是________。
(2)过程①通常用的操作方法是_______，过程②使用的化学法包括_______和_______。 (3)单克隆杂交一杂交瘤细胞在体外培养时，需要满足的条件是充足的营养，________的
(3)从过程④到过程⑤需要更换培养基，原因是 。 环境，适宜的温度、PH、渗透压，和适宜的气体环境等。
(4)过程②得到的两两融合的细胞有三种，因此需要进行筛选。已知用X射线处理会使染 (4)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作
色体受影响而导致细胞失去分裂能力；用碘乙酰胺处理会使细胞内的酶失活而抑制生长。 用更小，原因是________。
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24.CRISPR/Cas9基因编辑技术根据靶基因序列设计向导sgRNA，精确引导Cas9蛋白切割 (4)为进一步提高番茄的储存时间，可利用“反
与sgRNA配对的 DNA，如图 1所示。番茄的PG基因 义基因技术”将乙烯受体基因 ErsI 反向导入到
的表达产物能加速果实软化与成熟。科研人员欲构 番茄细胞中，使原有的 ErsI 基因翻译受抑制。
建 sgRNA-Cas9 载体，通过农杆菌转化法靶向敲除 已知右图中限制酶切割后露出的黏性末端碱基
番茄 PG 基因，获得耐储存的番茄新品种，过程如 序列不同，据图 3分析，扩增 ErsI 基因时，需
图 2所示（LB、RB分别为农杆菌中 T-DNA的左、右 在 A、B两端引物的 5'端分别添加限制酶___________的识别序列。推测“反义基因技术”
边界）。 提高番茄储藏时间的机理是 。
(1)据图 1分析，利用基因编辑技术培育耐储存番茄过程中，为避免因sgRNA与基因组中 25．某真菌的 W基因编码的纤维素酶可高效降解秸秆中的纤维素，在生物质能源开发中
的其他非目标位点结合而造成的“脱靶”现象，应适当________（填“增加”或“减少”） 具有重要的应用前景。科研人员拟通过基因工程技术，将 W基因导入放线菌中实现异源
sgRNA 碱基序列的长度。 表达。图 1为 W 基因的结构及限制酶切位点（转录方向为左→右），图 2为所用质粒载
体的结构，下表为 5种限制酶的识别序列与切割位点。请回答下列问题：
限制酶 BamHI EcoRI Mfe I KpnI HindⅢ
(2)据图 2分析，应选用限制酶________对重组载体 2进行切割，利用 DNA 连接酶构建
识别序列和切
sgRNA-Cas9 载体时容易出现反向连接现象，其原因是__________。研究人员欲通过 PCR
割位点（5'→3 G'GATCC G'AATTC C'AATTG G'GTAC'C A'AGCTT
判定其拼接方向，可选用图 2中的引物组合有________种。
'）
(3)据图 2分析，若要初步筛选基因组中成功导入 sgRNA-Cas9 序列的番茄细胞，可在培
(1)重组 DNA 技术的基本工具包括限制酶、DNA 连接酶和载体，其中限制酶的化学本质
养基中添加___________。
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是_______，其核心作用是________________。 需要____种酶。
(2)图 2 中质粒上的氨苄青霉素抗性基因属于_________，其作用是______________。作 （2）将构建的载体导入除去 BCL11A 基因的受体细胞，成功转化后，含 F1～F6与 R 扩
为受体的放线菌_____（填“能”或“不能”）具有氨苄青霉素抗性。质粒作为目的基因 增产物的载体表达荧光蛋白，受体细胞有荧光，含 F7与 R 扩增产物的受体细胞无荧光。
的“运输工具”，除了具备标记基因外，还需具备的条件有______________（写出两点）。 含 F7 与 R 扩增产物的受体细胞无荧光的原因是____。
(3)限制酶 MfeⅠ和EcoRⅠ切割后产生的黏性末端_______（填“能”或“不能”）被T4DNA （3）向培养液中添加适量的雌激素，含 F1～F4 与 R 扩增产物的受体细胞不再有荧光，
连接酶连接，判断依据是__________________。 而含 F5～F6与 R 扩增产物的受体细胞仍有荧光。若γ基因上游调控序列上与引物序列
(4)W基因转录的模板链是____________。为了获得能正确表达含 W基因的重组质粒，应 所对应的位置不含有 BCL11A 蛋白的结合位点序列，据此结果可推测，BCL11A 蛋白结合
使用____________限制酶切割图中含 W基因的 DNA 片段，使用_____________限制酶切 位点位于_____，理由是___。
割图中质粒。
三、附加题
1．福寿螺Mfcsg基因编码的多功能纤维素酶能够高效降解纤维素。研究人员利用无缝克
隆技术构建融合基因导入毛木耳中，以提高其纤维素降解能力，相关流程如图 1所示，
已知潮霉素对真菌细胞有毒性。限制性内切核酸酶 BsmB Ⅰ具有偏移剪切特性（切割位
点在识别序列之外），利用 BsmB Ⅰ可以实现多 DNA 片段无缝连接，其识别序列及切割
位点位于接头序列两侧。
（1）为将扩增后的产物定向插入载体指导荧光蛋白基因表达，需在引物末端添加限制酶
识别序列。据图可知，在 F1～F7 末端添加的序列所对应的限制酶是____，在 R 末端添
加的序列所对应的限制酶是_____。本实验中，从产物扩增到载体构建完成的整个过程共
高二生物试题 第 1 页 （共 2 页） 高二生物试题 第 2 页 （共 2 页）2024 级高二阶段性测试生物答案
1-5: CADCB 6-10：DCCAD 11-15：BCCDD 16-20：AC AB D BCD BCD
21.（11 分，除特殊标记外每空 1分）
（1）固体 以甲醛为唯一碳源
（2）甲链 引物 b和引物 c 在引物 b的 5′端添加 SacⅠ的识别序列（5′-GAGCTC-3′），在引物
c的 5′端添加 SnaBⅠ的识别序列（5′-TACGTA-3′）（2分） MboⅠ可同时切割 MboⅠ和 BamHⅠ的识
别序列，而标记基因（neor）中含有 BamHⅠ的识别序列，因此使用 MboⅠ或 BamHⅠ会破坏标记基因，不利
于筛选；目的基因应插入启动子和终止子之间，BamHⅠ的识别序列不在启动子与终止子之间，会造成启动
子丢失（2分） 白色
（3）在等量的以甲醛为唯一碳源的液体培养基中分别接种等量转基因甲醛分解菌和普通（或正常）甲醛
分解菌，适宜条件下培养一段时间后，检测培养基中的甲醛含量并比较（2分）
22.（9 分，每空 1分）
（1）需要 叶绿素的合成需要光照
（2） 用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁 聚乙二醇（PEG）融合法 高 Ca2+—高 pH 融合法
（3）诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同
(4)碘乙酰胺 杂种细胞 打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种
23.（10 分，除特殊标记外每空 1分）
（1）能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并可大量制备（2分） 克隆化培养
（2） 刺激小鼠产生相应的 B淋巴细胞 2（或两） 抗原与抗体特异性结合 保证分配到每个
孔中的细胞数不超过 1个，以获得能产生单一抗体的杂交瘤细胞（2分）
（3）无菌、无毒
(4)双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞
24.（11 分，除特殊标记外每空 1分）
（1） 增加
（2） SpeI 切割重组载体 1用的限制酶 SpeI 和 NheI，SpeI 和 NheI 切割 DNA 片段后产生的黏性末端
相同（2分） 3（2分）
（3）潮霉素
(4) XhoI 和 EcoRI（2 分） 反义基因转录的 mRNA 与 ErsI 基因转录的 mRNA 互补配对，抑制乙烯受体
的合成，乙烯无法发挥作用（2分）
25.（14 分，除特殊标记外每空 1分）
（1）蛋白质 识别双链 DNA分子的特定的识别序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开（2分
）
（2）标记基因 筛选重组 DNA 分子 不能 具备多个限制酶切点、能自我复制（2分）
（3）能 限制酶 MfeⅠ和 EcoRⅠ切割后产生的黏性末端相同（2 分）
（4）乙链 EcoRI 和 HindⅢ MfeⅠ和 HindⅢ
三、附加题（10 分，除特殊标记外每空 2 分）
（1）SalI（1 分） EcoRI（1 分） 6
（2） F7 与 R 扩增产物不含完整的启动子，荧光蛋白基因不表达
（3）引物 F4 与 F5 在调控序列上所对应序列之间的区段上 根据有无荧光情况判断，F1～F4 与 R
扩增产物上均有结合位点，因此结合位点位于 F4 所对应调控序列的下游（右侧）；F5～F6 与 R 扩增产
物上均无结合位点，可知结合位点位于 F5 所对应调控序列的上游（左侧），所以结合位点位于引物 F4 与
F5 在调控序列上所对应序列之间的区段上

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