资源简介

高三
·生物学·
季春答案及解折
一、选择题
7.C【解析】处理3中，连续的暗期被白光W打断，没有
1.C【解析】糖尿病患者要控制体重，控糖，但不能不摄
开花，处理5中，连续的光期被打断开花，表明暗期的持
入糖类，A项错误：肥胖可能是由糖类摄人过多导致，B
续长度影向植物对光周期信号的感知，A项正确；由处
项错误；合理运动可以促进细胞呼吸，增加有机物的消
理6一9的结果，远红光可以改变植物对光周期信号的
耗，C项正确：节食诚肥不能完全阻断脂肪的合成，且脂
感知，使植物开花，B项正确，实验4中，暗期持续时间
肪是人体不可或缺的有机物，D项错误。
不足，4不会开花，C项错误；远红光可以改变光周期信
2.C【解析】十年禁渔是在原地保护长江物种，A项正
号，用远红光代替白光，实验3中的植物会开花，D项
正确。
确；外来鱼类种类增加，可能会挤占本地物种的生态位，
8.D【解析】SⅢ不可能由RⅡ或SⅡ突变而来，可以为
导致本地物种丰富度降低，B项正确；禁渔后鱼类种类
RⅡ36A转化为SⅢ提供间接证据，A项正确；RⅡ菌在
增加直接体现了物种多样性的恢复，C项错误；栖息地
固体培养基上形成的菌落表面是粗髓的，B项正确：通
破碎化，种群变小，不能与外界进行基因交流，增加近亲
过去除提取物中的某项成分来确定转化因子，X酶可能
繁殖概率、种群的适应力诚弱，D项正确。
是酯酶、蛋白酶、RNA酶或DNA酶，C项正确；乙组其
3.B【解析】黑藻叶片薄较容易制作临时装片且含有叶
他类型不能实现转化的原因不可能是SⅢ的DNA变
绿体作为参照，A项正确：质壁分离过程中，细胞失水，
性，因为RⅡ36A可以转化为SⅢ，D项错误。
原生质层收缩，所以细胞液浓度增大，吸水能力增强，位9C【解析】自然选择会使种群的基因频率发生定向改
于细胞质中的叶绿体聚集，B项错误；实验室室温10℃
变，A项正确：突变产生的新基因会使种群的基因频率
左右，K+、NO进入细胞需要载体蛋白的帮助，温度低
发生变化，B项正确；表观遗传不涉及碱基序列的改变，
会降低载体蛋白的活性，C项正确，二者结果不同，推测
但会影响基因表达，进而彭响到生物的生存能力，使其
尿素可能与K、NO的跨膜运输方式不同，D项正确。
基因频率发生变化，C项错误：受种内竞争的影响，部分
4.B【解析】减数第一次分裂分开的是同源染色体，不涉
个体的迁出会对种群的基因频率产生影响，D项正确。
及着丝粒分裂，A项错误；有丝分裂和减数分裂均出现10，B【解析】果酒发酵中，酵母菌在适宜条件下可成为
纺锤丝和染色体的变化，B项正确，T细胞通过有丝分
优势菌种从而抑削杂菊生长，A项正确，制作泡菜前用
裂进行增殖，不存在同源染色体配对现象，C项错误：精
开水烫洗容器属于消毒，只能杀死容器内外的部分微
原细胞会通过有丝分裂增加其数量，然后进行诚数分裂
生物，B项错误：牛奶采用巴氏消毒法处理，可以杀死
形成精细胞，D项错误。
大部分微生物并保留牛奶的营养成分，C项正确；培养
5.B【解析】膜融合体现了生物膜的流动性，A项正确；
基一般采用高压蒸汽灭菌法灭菌，灭菌后需冷却至适
宜温度再倒平板或接种，D项正确
液泡中含有水解酶，功能类似于动物细胞的溶酶体，B
11.B【解析】根据表格绘制如下食物网：
项错误；自噬降解产物（氨基酸、葡萄糖等）需通过膜上
鹰(F
载体蛋白转运至细胞质重新利用，C项正确；液泡是细
胞重要的渗透压调节结构，同时图示也显示其参与降解
狼(D)
蛇E)
过程，D项正确。
免(B)
田鼠(C)
6.C【解析】辣椒素易溶于乙醇、丙酮等有机溶剂，儿乎
不溶于水，推断其为脂溶性物质，喝含油脂的牛奶能溶
草(A)
解辣椒素，A项正确；辣椒素与TRPV1蛋白结合后，
生产者是生态系统的基石，A项正确：依据食物网，若
TRPV1蛋白的空间结构会发生改变以行使后续功能，B
田鼠消失，蛇因缺少食物而消失，进而导致鹰消失，B
项正确；TRPV1受体亦是Ca2+、Na+离子通道，C项错
项错误：鹰的入度>1，其食物种类多，能够降低其生存
误，TRPV1激活后，阳离子内流会导致神经元膜内电位
风险，C项正确：鹰和狼出度一0，它们没有捕食者，是
由负变为正，D项正确。
顶级消费者，D项正确。高三生物学试卷
本试卷满分 100 分，考试时间 75 分钟。
注意事项：
1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。
2．答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡对应题目的答案标号涂黑。如需改
动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本
试卷上无效。
3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
一、选择题：本题共 15 小题，每小题 2 分，共 30 分。在每小题给出的四个选项中，只有一
项符合题目要求。
1．2024—2027 年是体重管理年，聚焦于体重控制与健康管理。下列有关说法正确的是
A．糖尿病患者要控制体重，避免糖类的摄入
B．肥胖由摄入过多脂肪导致，与蛋白质的摄入无关
C．合理运动可以促进细胞呼吸，增加有机物的消耗
D．节食减肥可以阻断脂肪的合成，对健康无不良影响
2．长江十年禁渔政策实施以来，监测显示土著鱼类种类数比禁渔前增加 36 种，外来鱼类记录数从历史上
的 19 种上升至 30 种，但部分特有鱼类仍面临灭绝风险，栖息地破碎化是主要原因之一。下列有关说法错
误的是
A．禁渔属于就地保护生物多样性的一种具体措施
B．外来鱼类种类增加可能导致本地物种丰富度降低
C．禁渔后鱼类种类增加直接体现了基因多样性的恢复
D．栖息地破碎化增加近亲繁殖概率，种群的适应力减弱
3．为探究植物细胞发生质壁分离及自动复原的条件，秋季学期（实验室室温 10℃左右）某小组以黑藻叶
片为材料，置于不同浓度的 KNO3 或尿素溶液中进行观察，实验结果如下表。下列说法错误的是
溶液种类 质量浓度（g/mL） 植物细胞质壁分离及复原的情况
0.03 40min 后未发生质壁分离
KNO3 0.035 只有少数细胞在角隅处发生质壁分离，不能自动复原，滴加清 水后发生复原
0.045 发生质壁分离，不能自动复原，滴加清水后发生复原
0.05 发生质壁分离，不能自动复原，滴加清水后发生复原
0.03 40min 后未发生质壁分离
0.05 发生质壁分离，很快发生自动复原
尿素
0.055 较快发生质壁分离，自动复原时间较短
0.06 很快发生质壁分离，自动复原时间较长
A．黑藻叶片薄较容易制作临时装片且含有叶绿体作为参照
B．质壁分离过程中，细胞的吸水能力减弱且叶绿体聚集
C．KNO3 组未发生质壁分离自动复原可能与实验室温度较低有关
D．尿素组发生质壁分离自动复原可能与尿素跨膜运输方式有关
4．有丝分裂和减数分裂是真核细胞的重要分裂方式。下列有关叙述正确的是
A．细胞的每一次分裂都会发生着丝粒分裂
B．两种分裂均出现纺锤丝和染色体的变化
C．T 细胞增殖过程存在同源染色体配对现象
D．精子数量多仅与减数分裂过程中细胞数变化有关
5．下图为饥饿诱导下酿酒酵母内部发生的自噬过程。下列有关叙述错误的是
A．自噬小体与液泡的融合过程依赖于生物膜的流动性
B．推测液泡中含有水解酶，功能类似于动物细胞的高尔基体
C．自噬产生的氨基酸可通过液泡膜上的载体蛋白运回细胞质
D．液泡不仅参与细胞自噬，还能参与细胞内渗透压的调节
6．辣椒素是辣椒中引起“灼痛”感的主要成分，该物质易溶于乙醇、丙酮等有机溶剂，几乎不溶于水。
研究表明，辣椒素能与感觉神经元细胞膜上的 TRPV1 蛋白结合，激活该蛋白的离子通道结构域，引起
Ca2+、Na+等阳离子顺浓度梯度内流，最终产生痛觉。下列相关叙述错误的是
A．喝含油脂的牛奶能有效缓解灼痛感与辣椒素具有脂溶性直接相关
B．辣椒素与 TRPV1 蛋白结合后，TRPV1 蛋白的空间结构会发生改变
C．TRPV1 蛋白既是辣椒素的受体，也是运输 Ca2+、Na+的载体蛋白
D．TRPV1 激活后，阳离子内流会导致神经元膜内电位由负变为正
7．光敏色素是参与植物光周期的受体，有两种存在形式：吸收红光的 Pr 和吸收远红光的 Pfr。一项研究探
究了在植物生长的暗期施加不同闪光（白光 W、红光 R 或远红光 FR）或在光期给予黑暗对植物开花的影
响，实验处理与结果如下图所示。下列相关叙述错误的是
A．由实验结果可知光周期对植物开花的影响主要取决于暗期持续长度
B．远红光可以改变植物对光周期信号的感知
C．推断实验 4 中的植物会开花
D．若用远红光代替白光，实验 3 中的植物会开花
8．艾弗里及其同事利用肺炎链球菌的不同亚型（如：RⅡ、SⅡ、SⅢ等）进行如下实验：
甲组：SⅡ经诱变可产生 RⅡ，部分 RⅡ可回复突变为 SⅡ，但无法突变为 SⅢ；
乙组：RⅡ可存在多种亚型，分别与加热杀死的 SⅢ混合，只有 RⅡ36A 可以转化为 SⅢ；
丙组：
关于实验下列说法错误的是
A．甲组可为 RⅡ36A 转化为 SⅢ提供间接证据
B．RⅡ菌在固体培养基上形成的菌落表面是粗糙的
C．X 酶可能是酯酶、蛋白酶、RNA 酶或 DNA 酶
D．乙组其他类型不能实现转化的原因是 SⅢ的 DNA 变性
9．多种因素会影响种群基因频率，下列相关叙述错误的是
A．自然选择会使种群的基因频率发生定向改变
B．突变产生的新基因会使种群的基因频率发生变化
C．表观遗传不涉及碱基序列的改变，对种群的基因频率变化无影响
D．种内竞争可能会导致部分个体迁出，进而改变种群的基因频率
10．在发酵食品生产中，选择合适的灭菌或消毒方法至关重要。下列相关叙述错误的是
A．果酒发酵中，酵母菌在适宜条件下可成为优势菌种从而抑制杂菌生长
B．制作泡菜前用开水烫洗容器属于灭菌，可以杀死容器内的所有微生物
C．用巴氏消毒法处理牛奶可以杀死大部分微生物并保留牛奶的营养成分
D．培养基一般采用高压蒸汽灭菌，灭菌后需冷却至适宜温度再倒平板或接种
11．下表是某草原食物网抽象出的可计算的关系网络，其中出度表示相应物种的捕食者的种数，入度表示
相应物种的食物的种数。下列有关分析错误的是
草（A） 兔（B） 田鼠（C） 狼（D） 蛇（E） 鹰（F）
出度 2（B，C） 1（D） 2（E，F） 0 1（F） 0
入度 0 1（A） 1（A） 1（B） 1（C） 2（C，E）
A．草作为生态系统的基石，其出度必大于 0
B．若田鼠消失，蛇的入度=0，鹰的入度=1
C．鹰的入度>1，能够降低其生存风险
D．鹰和狼出度=0，都是顶级消费者
12．某生物公司从澳大利亚进口少量萨福克羊的冷冻雌性、雄性胚胎，将其移植到本地羊的子宫中用于生
产萨福克羊。下列有关说法错误的是
A．对进口胚胎适度胚胎分割能增加可用胚胎数量
B．选用遗传性状优秀的受体母羊能使其后代更优质
C．胚胎移植前对受体母羊发情处理利于胚胎存活和发育
D．生产的萨福克羊可自然交配或体外受精实现自主繁殖
13．研究人员在黑龙江省老爷岭南部（多为自然保护区）采用大样方调查收集狗獾洞穴信息并利用红外相
机监测获得狗獾的影像数据，计算出该区域狗獾的平均种群密度为 0.37 只/km2，利用 MaxEnt 模型评估狗
獾栖息地适宜性时，发现“林间小道”是贡献率最高的环境变量（30.9%），“居民区”次之（21.5%）。
下列推断不合理的是
A．红外相机能用于行为观察，无法用于估算种群密度
B．结合洞穴数与狗獾家族个体数可以提高种群密度估算的准确性
C．林间小道贡献率最高，可能因为林间小道便于狗獾行走和觅食
D．推测居民区附近的农田可为狗獾提供农作物和小型动物等食物
14．生命科学的研究离不开科学方法的运用。下列表述错误的是
A．预实验是每一项科学研究的必需环节
B．可根据实验数据建立、检验或修正数学模型
C．某一物种的生态位是在群落视角下研究的问题
D．同位素标记可用于示踪物质的运行和变化规律
15．真核细胞的核糖体由大小亚基组成，细胞的 rRNA 编码基因（rDNA）分布于多条染色体上，除
5SrRNA 外，真核生物的所有 rRNA 都在核仁内合成，其合成和装配的过程如图所示。下列有关说法正确
的是
A．核孔是大分子物质自由进出细胞核的通道
B．rRNA 加工过程中不涉及磷酸二酯键的断裂
C．核糖体蛋白的合成不需要 rRNA 的参与
D．核仁是 rRNA 合成、加工和装配核糖体亚基的重要场所
二、选择题：本题共 5 小题，每小题 3 分，共 15 分。在每小题给出的四个选项中，有一项
或多项符合题目要求。全部选对得 3 分，选对但选不全得 1 分，有选错得 0 分。
16．下列事实支持“线粒体起源于原始的需氧细菌”这一论点的是
A．线粒体能像细菌一样进行分裂增殖
B．细胞有序状态的维持需要能量的输入
C．需氧细菌有氧呼吸的第三阶段发生于细胞膜上
D．线粒体 DNA 和需氧细菌 DNA 具有双螺旋结构
17．为筛选适合黄芪（一种中药材）的微生物固氮菌肥的菌种，科研人员进行如下流程的实验：
土壤样品→制备土壤悬液→富集培养→梯度稀释涂布平板→单菌落→菌种鉴定
下列有关叙述正确的是
A．土壤取样时要在黄芪种植地多点取样且选取 0～2cm 表层土
B．为增加固氮菌的浓度，富集培养基中不应添加氮源
C．涂布操作时应待涂布器冷却后蘸取菌液在平板上涂布
D．观察菌落形态、颜色等特征可以初步判断固氮微生物的种类
18．原发性干燥综合征（pSS）患者主要因唾液腺等外分泌腺功能障碍而出现口干、吞咽困难等症状。下
图显示了该病发生过程中的免疫细胞相互作用。下列叙述正确的是
A．pSS 发生是由于机体免疫自稳功能异常所致
B．人体内的各种 B 淋巴细胞都能识别自身抗原
C．辅助性 T 细胞既参与体液免疫也参与细胞免疫
D．细胞毒性 T 细胞裂解靶细胞能体现细胞膜信息交流功能
19．科学家利用嫁接技术获得了地上结番茄、地下长马铃薯的“番茄薯”，而利用植物体细胞杂交技术获
得的“番茄—马铃薯”却未能实现这一目标。下列关于有关对比正确的是
选项 番茄薯 番茄—马铃薯
A 技术 原理 接穗、砧木形成层愈 合 细胞膜的流动性和细胞增殖
B 变异 类型 不可遗传变异 染色体结构变异
C 主要 环节 番茄接穗→马铃薯砧 木 植物细胞融合→植物组织培 养
D 优点 保持亲本的优良性状 打破生殖隔离，实现远缘杂 交
20．在某一种果蝇中，野生型果蝇的眼色为红色，隐性突变基因 a 纯合的果蝇眼色为白色，隐性突变基因
b 纯合的果蝇眼色为黄色。选一只纯合白眼果蝇（P1）与纯合的一只黄眼果蝇杂交，F1 均为红眼，F1 自由
交配产生的 F2 中红:黄:白=9:3:4。下列有关说法正确的是
A．F1 同时含有 A 和 B 基因
B．a 基因和 b 基因位于非同源染色体上
C．若 A/a 仅位于 X 染色体上，则 P1 为雌性
D．若 B/b 仅位于 X 染色体上，则 F2 中黄色个体为雄性
三、非选择题：本题共 5 小题，共 55 分。
21．（10 分）葛根是豆科多年生草质藤本植物，富含黄酮类化合物，具有重要的药用价值。某研究小组为
探究不同光照强度对葛根光合特性的影响，设置了三个处理组：T1 组（100%自然光）、T2 组（75%自然
光）和 T3 组（50%自然光），测定相关指标如下表所示。
表 1 不同遮荫处理对葛根光合参数的影响
处理 叶绿素 a （mg·g-1） 叶绿素 b （mg·g-1） 净光合速率 （μmol·m-2·s-1） 胞间 CO2 浓度（μmol·mol-1）
T1 1.4 0.381 11.55 257.67
T2 1.68 0.565 9.33 292.67
T3 1.93 0.663 2.61 409.00
（1）叶绿素主要吸收___________光，提取光合色素时，加入 CaCO3 的目的是___________。随着遮荫程
度增加，葛根叶片中叶绿素含量___________有利于减缓遮光对植物光合作用的影响。
（2）由表 1 知 T3 组的净光合速率显著低于 T1 组，从光合作用过程分析，其主要限制阶段可能是_______
____（填“光反应”或“暗反应”），判断依据是______________________________________________。
（3）植物在逆境条件下会产生大量的活性氧，会对细胞造成氧化损伤。抗氧化酶系统是植物清除活性
氧、维持细胞稳态的重要保护机制。研究人员测定了不同遮荫处理下葛根叶片的抗氧化酶活性及相关生理
指标，结果如下表所示：
丙
二
醛
含
处理 SOD(U·g-1FW) CAT(U·g-1·min-1)
量
（n
mo
l·g-
1）
T1 253.02 160.63 0.9 5
T2 176.30 101.97 0.9 9
T3 108.17 66.53 1.0 2
注：SOD 为超氧化物歧化酶，CAT 为过氧化氢酶，数值越大，酶活性越高；丙二醛是膜脂过氧化的终产
物，其含量反映细胞膜受损程度。
①活性氧主要包括超氧阴离子( )、过氧化氢(H2O2)等。SOD 可将 歧化为 H2O2 和 O2，而 CAT 可进
一步将 H2O2 分解为___________。从酶的作用机理分析，抗氧化酶能快速清除活性氧是因为酶能________
___________________________________。
②结合数据分析 T3 组丙二醛含量高的原因：__________________________________________________。
22．（11 分）生活中，长期精神压力可导致毛发脱落。科学研究发现压力刺激首先激活下丘脑—垂体—肾
上腺（HPA）轴，促进糖皮质激素（GC）的分泌。同时，交感神经末梢释放去甲肾上腺素（NE），作用
于毛囊周围的免疫细胞，GC 可抑制 T 细胞的增殖，而 NE 可促进巨噬细胞产生 IL-1β等炎症因子。
（1）HPA 轴中，下丘脑分泌的___________作用于垂体，促进垂体分泌___________，进而促进肾上腺皮
质分泌糖皮质激素，该调节方式属于___________调节。
（2）去甲肾上腺素作为神经递质由交感神经末梢通过___________方式释放，作用于巨噬细胞膜上的____
_______，引起细胞内 cAMP 水平升高，进而促进 NLRP3 炎症小体的组装。这一过程___________（填
“属于”或“不属于”）反射活动。
（3）NLRP3 炎症小体是一种多蛋白复合物，为揭示 NLRP3 炎症小体在压力诱导脱发中的作用，研究人员
进行了以下实验：将野生型小鼠和 NLRP3 基因敲除小鼠分别置于慢性束缚应激条件下饲养 4 周，相关数
据如下表所示：
毛
囊
干
细
分组 毛发脱落率(%) 皮肤 IL-1β水平 胞
存
活
率
(%)
野生型+应激 68.5 高 32.4
野生型+无应激 8.2 低 89.6
NLRP3 基因敲除+应激 15.3 低 76.8
NLRP3 基因敲除+无应激 7.8 低 91.2
①该实验的自变量是___________，因变量是___________________________________________________。
②根据实验结果，可得出的结论是____________________________________________________________。
（4）基于（3）的研究，请提出一种可能用于治疗压力性脱发的策略：____________________________。
23．（11 分）长白山苔原带是我国典型的高山苔原生态系统，原生优势种为牛皮杜鹃（常绿低矮灌木）。
近年来，受全球气候变暖影响，原分布于低海拔岳桦林带的草本植物——尖被藜芦迅速上侵至苔原带，成
为上侵能力强的草本植物。
（1）牛皮杜鹃生长速度缓慢、呈匍匐贴地生长，这是长期___________的结果。高山苔原生态系统抵抗力
稳定性较低，从生态系统结构角度分析其原因是________________________________________________。
（2）尖被藜芦株高可达 150～200cm，叶片大，光合作用强。限制其上侵的主要环境因素是__________
（填“温度”或“光照强度”）。
（3）研究人员调查多个样方内尖被藜芦上侵对植物生物量与土壤肥力的影响，结果如下表：
牛
皮
杜 速
鹃 效
上侵 程度 生 物 尖被藜芦生物量（g/m2） 土壤有机质（g/kg） 速效氮（mg/kg） 磷 （m
量 g/kg
） （g
/m2
）
Ⅰ
（无 上 920 0 125 60 6.5
侵）
Ⅱ
（轻 720 200 105 75 8
度）
Ⅲ （中 590 270 95 90 10.5
度）
Ⅳ
（重 500 330 88 105 12
度）
注：速效氮和速效磷分别是指土壤中较容易被植物吸收利用的氮和磷。
尖被藜芦生物量的增长率随上侵程度加剧呈现__________的特点，尖被藜芦上侵过程中与土壤肥力之间存
在反馈调节。请补充Ⅰ→Ⅱ演替中“尖被藜芦生物量——土壤速效氮磷含量”之间的反馈调节示意图，并
注明反馈类型。
（4）有研究者提出，可以通过引入尖被藜芦的天敌来控制其上侵速度。试评价这一方案的可行性并说明
理由：___________________________________________________________________________________。
24．（10 分）孟德尔豌豆杂交试验中的高茎与矮茎差异，是研究植物激素与基因关系的经典模型。科研人
员对野生型高茎豌豆（LeLe）和矮茎突变体（lele）进行了系列研究，发现 Le 基因控制赤霉素 3β-羟化酶
的合成，该酶催化无活性的 GA20 转化为有活性的 GA1。回答下列问题：
（1）孟德尔用纯合高茎与矮茎豌豆杂交，F1 全为高茎，F2 中高茎:矮茎≈3:1，这一实验结果符合________
___定律。在大肠杆菌重组表达实验中，野生型 Le 基因表达产物的酶活性显著高于突变型 le 基因，推断：
野生型豌豆茎中 GA1 的含量___________突变型、GA20 的含量____________突变型。
（2）若将突变基因 le 命名为 le-1，后续研究发现 Le 基因存在多种等位变异，如下表：
等位基因 突变类型 酶活性（相对值）
Le 100%
le-1 5%
le-2 0%
le-3 低于 le-1
注:图示只显示基因的一条链、只显示相关碱基。
①le-1 突变基因中由于发生了碱基的__________（填“增添”“缺失”或“替换”），导致酶活性中心第
229 位的丙氨酸变为苏氨酸。
②le-2 突变基因中由于碱基缺失导致重排，使 mRNA 上的__________提前出现，翻译产物肽链变短，le-2
属于__________（填“功能丧失”或“功能获得”）的等位基因。若要对 le-2 的突变位点进行精确定位，
可采用__________技术。
③现有基因型为 Lele-1 的高茎豌豆与 le-2le-3 的矮茎豌豆杂交，推测子代表现型及比例为_______________
__________________（假设配子及后代存活率相同）。
（3）综上分析，上述基因和激素的关系是_____________________________________________________。
25．（13 分）在植物基因工程研究中，准确鉴定启动子的时空表达特性至关重要。研究人员构建了
RFP/GFP 双荧光载体，过程如下：
注：Hind Ⅲ、Pst Ⅰ、Xba Ⅰ、Sac Ⅰ、EcoR Ⅰ为限制酶切位点，切口都位于其中轴线的两侧；CaMV 35S
为组成型启动子，在大多数组织和细胞中都能高效表达；GFP 为绿色荧光蛋白基因；RFP 为红色荧光蛋白
基因；Nos 为终止子。
（1）构建双荧光载体的过程中，去除载体 1 中 Xba Ⅰ和 Sac Ⅰ位点，目的是__________。T4 DNA 聚合酶
具有___________（填“5′→3′”或“3′→5′”）聚合酶活性，将限制酶切割产生的黏性末端补平为平末端，
操作步骤一、二中选用的限制酶为：①___________ ②___________；操作步骤三中优选用___________
（填“E.coli”或“T4”）DNA 连接酶进行连接反应。
（2）研究人员欲利用 RFP/GFP 双荧光载体验证番茄 E8 启动子是果实特异性启动子，利用 PCR 技术扩增
E8 启动子片段时，为便于其与 RFP/GFP 双荧光载体正确连接，应在引物的 5′端添加相应的限制酶识别序
列（如图），其中对引物Ⅰ应添加____________识别序列，进行 PCR 时复性温度过高，可能导致_______
_____。
（3）将得到的 E8 启动子与双荧光载体连接得到 E8-RFP/GFP 载体，导入相应受体细胞，实验方案如下：
组别 载体 受体材料 预期结果
绿色荧光
A RFP/GFP 双荧光载体 果实细胞 +，红色
荧光+
________
B E8-RFP/GFP 载体 果实细胞 ________
___？
________
C E8-RFP/GFP 载体 叶肉细胞 ________
___？
①设置 A 组实验的具体作用是________________________________________________________________。
②完善上表中的预期结果（用“+”表示有荧光，“-”表示无荧光）
（4）在植物基因工程中，RFP/GFP 双荧光载体除用于研究启动子时空表达的特异性，还有多项潜在应用
价值，下列三项有关应用正确的是___________。
A．通过比较 RFP 与 GFP 的荧光强度比值，定量分析启动子的驱动活性
B．可用目的基因置换载体中 RFP，通过红色荧光对目的蛋白进行定位
C．通过启动子研究基因表达的时空模式，可揭示植物发育的调控机制

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