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山东省实验中学2025~2026学年第二学期高二第一次诊断性考试生物试题
一、单选题
1．黄酒是我国古老的发酵酒之一，传统酿制中，先用蒸煮过的小麦或麸皮为原料，对之前发酵留存的少量酒曲（曲种）进行扩大制曲；再将酒曲和蒸煮后的糯米、大米混合处理一段时间后，添加足量酒母（含酵母菌）完成发酵，压榨成品。下列说法错误的是（　　）
A．小麦、麸皮等原料为酒曲中微生物的生长繁殖提供了碳源和氮源等营养物质
B．为避免制曲过程被杂菌污染影响黄酒品质，扩大制曲前需对留存的酒曲灭菌
C．糯米、大米蒸煮后立即与酒曲混合会导致酶空间结构改变而降低其催化效率
D．将酒曲混合糯米、大米处理一段时间，是为了获得酒母发酵时的底物葡萄糖
2．关于酵母菌的纯培养实验，下列说法正确的是（ ）
A．把含有凝固培养基的培养皿倒过来放置的过程称为“倒平板”
B．接种环在液体培养基中连续划线，将聚集的菌种逐步分散开来
C．在接种过程中，试管口、瓶口等部位可以通过灼烧来灭菌
D．经培养得到的单菌落一定是由单个酵母菌繁殖形成的纯培养物：
3．为高效检测抗菌剂的抗菌效果，研究人员构建了能够表达外源荧光素酶的重组菌Q，将其接种到有足量荧光素的液体培养基中，一段时间后添加待测抗菌剂，定时检测培养液的荧光强度。下列有关该实验的叙述，正确的是（　　）
A．培养基中只需要添加水、碳源、氮源和无机盐
B．实验过程中所用的培养基是一种选择培养基
C．在重组菌Q胞内的荧光素酶可催化荧光素水解
D．培养液的荧光强度变化可作为抗菌效果的判断依据
4．从种植草莓的土壤中分离致病菌，简易流程如下：制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是（　　）
A．制备的培养基可在超净工作台中用紫外线照射进行灭菌
B．将土样加入无菌水混匀，梯度稀释后取悬液加入平板并涂布
C．连续划线时，烧灼后的接种环接上次划线的起始端开始划线
D．鉴定后的致病菌，可接种在斜面培养基上，并在室温下长期保存
5．采集果园土壤进行微生物分离或计数。下列叙述正确的是（　　）
A．用于筛选尿素分解菌的培养基含有牛肉膏、尿素和无机盐等营养物质
B．在纯培养过程中，完成平板划线后，培养时需增加一个未接种的平板作为对照
C．土壤中分离得到的醋酸菌能在无氧条件下将葡萄糖分解成乙酸
D．稀释涂布平板法和平板划线法都能用于尿素分解菌的分离和计数
6．我国葡萄酒酿造历史悠久、传统发酵技术延续至今。发酵工程通过选育菌种和控制发酵条件等措施可优化传统发酵工艺，改善葡萄酒品质。下列叙述正确的是（　　）
A．传统发酵时，葡萄果皮上只有酵母菌参与了葡萄酒的发酵过程
B．工业化生产时，酵母菌需在无氧条件下进行扩大培养和酒精发酵
C．从自然界中筛选时，能得到性状改良后的葡萄酒发酵菌种
D．大规模发酵时，需要监测罐压、溶解氧及营养成分等参数
7．切取虎尾兰的叶插入土壤，置于适宜条件下培养。一段时间后，切口处会长出新植株。下列有关该过程的说法错误的是（　　）
A．体现了细胞的全能性
B．受到植物激素的调节
C．属于有性生殖的范畴
D．包含脱分化及再分化
8．甘薯是重要的农作物，为了改良甘薯品质，科学家利用甘薯（2N=90）与其近缘野生种（2N=30）进行体细胞杂交，选育得到杂种植株M1。下列说法正确的是（　　）
A．需用几丁质酶和果胶酶来降解甘薯细胞壁
B．为防止原生质体失水，需使用低渗缓冲液
C．M1具有两个物种的所有性状，且染色体数目为4N=120
D．在培育M1时，配制的各种培养基常以MS培养基为基础
9．为了获得抗白叶枯病的水稻品种，研究人员构建了含有抗病基因D的重组Ti质粒（如图），将重组Ti质粒导入水稻种子诱导的愈伤组织，最终获得抗病植株。下列叙述正确的是（　　）
A．水稻愈伤组织细胞中RNA聚合酶无法识别U6启动子
B．在含重组Ti质粒的农杆菌中U6启动子不能驱动卡那霉素抗性基因表达
C．农杆菌侵染愈伤组织后所用的筛选培养基中需加入卡那霉素
D．愈伤组织经再分化获得的植株一定会表达抗病基因D
10．从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如图。下列叙述正确的是（　　）
A．传代培养时，培养皿需密封防止污染
B．选取①的细胞进行传代培养比②更合理
C．直接用离心法收集细胞进行传代培养
D．细胞增长进入平台期可能与接触抑制有关
11．为解决二倍体普通牡蛎在夏季因产卵而出现肉质下降的问题，人们培育出三倍体牡蛎。利用普通牡蛎培育三倍体牡蛎合理的方法是（ ）
A．利用水压抑制受精卵的第一次卵裂，然后培育形成新个体
B．用被γ射线破坏了细胞核的精子刺激卵细胞，然后培育形成新个体
C．将早期胚胎细胞的细胞核植入去核卵细胞中，然后培育形成新个体
D．用化学试剂阻止受精后的次级卵母细胞释放极体，然后培育形成新个体
12．β-淀粉样蛋白（Aβ）的异常聚集是阿尔茨海默症的致病因素之一。研究者拟利用小鼠作为实验动物，通过细胞融合技术制备抗Aβ的单克隆抗体以用于该病的研究。下列叙述正确的是（　　）
A．从注射了Aβ抗原的小鼠体内获得了多种免疫的B细胞
B．杂交瘤细胞来自于小鼠浆细胞与骨髓瘤细胞的融合
C．杂交瘤细胞产生的抗体即为抗Aβ的单克隆抗体
D．抗Aβ的单克隆抗体可特异性治疗阿尔茨海默症
13．下图为PML蛋白单克隆抗体的制备过程。下列叙述正确的是（　　）

A．应使用总蛋白进行多次免疫且每次免疫间隔适宜时间
B．W细胞是先提取B淋巴细胞再用PML蛋白免疫而获得
C．步骤2的目的是去除不能产生特异性抗体的细胞
D．应选择孔2中的细胞进行后续处理以制备单克隆抗体
14．诱导多能干细胞（iPS细胞）在生物医药领域有广阔的应用前景。研究人员利用多种小分子化合物协同诱导小鼠胎儿成纤维细胞，成功获得iPS细胞。下列叙述正确的是（　　）
A．小分子化合物改变了小鼠胎儿成纤维细胞的基因表达
B．小鼠胎儿成纤维细胞形成iPS细胞的过程属于细胞分化
C．利用胃蛋白酶处理小鼠胎儿某些组织可获得分散的成纤维细胞
D．培养小鼠胎儿成纤维细胞时需定期更换培养基以维持无菌、无毒的环境
15．下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述正确的是（ ）
A．通常采用培养法或化学诱导法使精子获得能量后进行体外受精
B．哺乳动物体外受精后的早期胚胎培养不需要额外提供营养物质
C．克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程
D．将小鼠桑葚胚分割成2等份获得同卵双胎的过程属于有性生殖
16．二次克隆是指通过剖宫产获取克隆胎儿细胞进行的再次动物克隆，可避免供核细胞长期体外培养所造成的老化现象。研究发现，采用二次克隆来制备转基因克隆动物，无论是在重构胚的融合率、发育率还是移植受体妊娠率方面均明显高于传统的体细胞核移植。如图为二次克隆的简易流程图，下列说法正确的是（　　）
A．可通过使用蛋白酶合成抑制剂来激活重构胚
B．可将胚胎培养至囊胚或原肠胚进行胚胎移植
C．胎羊C细胞中线粒体DNA只来源于乙羊
D．二次克隆的重构胚融合率高是因为胎羊细胞的分化程度高
17．研究显示，约70%的小鼠体细胞核移植胚胎未能成功发育至囊胚期，且仅有约2%的胚胎移植到代孕母鼠后可正常发育。下列叙述错误的是（　　）
A．供体细胞进入去核的卵母细胞形成的重构胚需激活后才可移植到代孕母鼠
B．为提高胚胎成活率，可用分化程度低的胚胎细胞核移植
C．胚胎移植后成活率低，可能是早期胚胎未能及时孵化
D．移植前胚胎发育率低，可能是植入的体细胞核不能完全恢复分化前的功能状态
18．下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（　　）
A．设置一组只加二苯胺的对照组用来排除二苯胺受热变蓝的可能
B．滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解
C．研磨液离心后弃上清液，取沉淀加入预冷95%的酒精静置
D．提取到的白色丝状物是DNA纯净物，可用于获取相应目的基因
19．基因工程会用到多种限制酶，下列为部分限制酶的识别序列和酶切位点及其在某质粒上的酶切位点。下列叙述正确的是（　　）
A．Sau3AⅠ可切割BamHI和BclⅠ的识别序列，其不具有专一性
B．质粒分别被BamHI和BclI切割后，在DNA连接酶的作用下，可以避免发生环化
C．用Sau3AⅠ切割目的基因，用BamHI切割质粒，形成的重组质粒能被Sau3AⅠ切成5个片段
D．构建重组质粒时，切割该质粒的限制酶应选择BamHI和Sau3AⅠ
20．质粒P含有2个EcoRI、1个SacI和1个BamHI的限制酶切割位点。已知BamHI位点位于2个EcoRI位点的正中间，用上述3种酶切割该质粒，酶切产物的凝胶电泳结果如图，其中泳道①条带是未酶切的质粒P，泳道②③④条带为3种单酶切产物，泳道⑤⑥⑦条带为双酶切产物。下列叙述正确的是（　　）
A．DNA分子的迁移方向是从电源正极到负极
B．可确认泳道②③条带分别是SacI和EcoRI的单酶切产物
C．泳道⑤条带是SacI和EcoRI的双酶切产物
D．泳道①②说明质粒的碱基在酶切后部分丢失
二、多选题
21．猕猴桃醋生产的基本工艺流程如下，其中①②③表示发酵的三个环节，糖化是将淀粉转化为葡萄糖的过程。下列叙述正确的是（　　）
A．通过蒸煮可以杀灭猕猴桃自带的绝大多数微生物
B．环节②中酵母菌繁殖速率越快，发酵产物越多
C．③需要通入无菌空气的同时也需放气
D．麸曲中曲霉的主要作用是对糖类进行氧化分解环节
22．科研人员将光合系统相关基因整合到大肠杆菌后，该菌能在无碳源培养基中生长繁殖。下列叙述正确的是（　　）
A．必须整合光反应和暗反应系统的相关基因
B．暗反应所需的所有能量来源于细胞中的ATP
C．改造成功的大肠杆菌可用CO2作为唯一碳源
D．该菌在无碳源培养基中生长繁殖一定需要光照
23．下列高中生物学实验的部分操作，错误的是（　　）
选项 实验名称 实验操作
A 探究抗生素对细菌的选择作用 涂菌前，需将抗生素均匀涂抹在培养基平板上
B 制作果酒和果醋 葡萄酒酿造后，需打开瓶盖，促进葡萄醋的发酵
C 土壤中分解尿素的细菌的分离 与计数 稀释土壤样品时，每个梯度稀释时都需更换移液器枪头
D 酵母菌的纯培养 为获得纯培养物，接种环在连续划线操作时不需要灼烧
A．A B．B C．C D．D
三、单选题
24．研究人员用花椰菜（BB，2n=18）根与黑芥（CC，2n=16）叶片分别制备原生质体，经紫外线照射后诱导融合形成杂种细胞，进一步培养获得再生植株，其中的植株N经鉴定有33条染色体。下列叙述正确的是（　　）
A．两个原生质体融合形成的细胞即为杂种细胞，可培养得到杂种植株
B．再生植株N的染色体数量少于34可能是因为紫外线照射破坏染色体
C．花椰菜和黑芥的原生质体能融合，证明两种植物间不存在生殖隔离
D．植株N的B组和C组染色体不能正常联会配对，没有可育配子产生
25．利用犬肾细胞MDCK扩增流感病毒，生产流感疫苗，具有标准化、产量高等优点。但MDCK细胞贴壁生长的特性不利于生产规模的扩大，严重制约疫苗的生产效率。研究人员通过筛选，成功获得一种无成瘤性的（多代培养不会癌变）、可悬浮培养的MDCK细胞——XF06.下列叙述错误的是（　　）
A．XF06悬浮培养可提高细胞密度，进而提升生产效率
B．细胞贴壁生长特性的改变是由于流感病毒感染所导致
C．可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒
D．采用无成瘤性细胞生产疫苗，是为了避免疫苗中有致瘤DNA的污染
四、多选题
26．梅花鹿和马鹿杂交后代生命力强、茸质好，但自然杂交很难完成，人工授精能解决此难题。胚胎工程技术的应用，可提高繁殖率，增加鹿场经济效益。下列相关叙述不合理的是（　　）
A．采集的精液无需固定、稀释，即可用血细胞计数板检测精子密度
B．采集得到的卵母细胞需在体外培养至减数第一次分裂中期
C．胚胎移植成功的前提是供体、受体是同物种且生理状态相同
D．母体子宫对胚胎的免疫耐受性低下是胚胎移植的生理学基础
五、单选题
27．线粒体置换技术可用于预防母系线粒体遗传疾病。次级卵母细胞减数分裂Ⅱ中期（MII期）形成的纺锤体-染色体复合体（X）可用于该技术以获得正常个体，如图。下列说法正确的是（　　）

A．胚胎的遗传物质来自三个亲本，患者携带的色盲基因仍可能遗传给胎儿
B．重组次级卵母细胞可与获得能量后的精子完成受精作用
C．通过该技术获得的胚胎的DNA一半来自患者，一半来自供体
D．图示获得子代个体的生殖方式与动物克隆的生殖方式相同
六、多选题
28．过继性治疗适用于肿瘤晚期患者，是指将具有抗肿瘤活性的细胞回输给肿瘤患者机体进行治疗。过继性治疗相关过程如图所示。下列说法正确的是（　　）
A．过继性细胞治疗中，需从健康人体内获得细胞毒性T细胞
B．诱导培养时，免疫细胞发生了细胞增殖也发生了细胞分化
C．特异性筛选时，需要加入肿瘤细胞表面的特定抗原
D．过继性治疗过程中不会产生免疫排斥反应，同时具有特异性强的优点
29．图示人体正常基因A突变为致病基因a及HindⅢ切割位点。AluⅠ限制酶识别序列及切割位点为，下列相关叙述正确的有（ ）
A．基因A突变为a是一种碱基增添的突变
B．用两种限制酶分别酶切A基因后，形成的末端类型不同
C．用两种限制酶分别酶切a基因后，产生的片段大小一致
D．产前诊断时，该致病基因可选用HindⅢ限制酶开展酶切鉴定
七、单选题
30．DNA足迹法是检测DNA序列中结合蛋白识别部位的一种方法。DNA与蛋白质结合后，由于蛋白质的保护，DNaseⅠ酶无法对这一部位进行切割，可以运用此方法来确定启动子在DNA序列中的具体位置。某DNA片段上具有一个启动子，为研究其位置，研究小组决定用DNA足迹法对其进行检测。DNA片段上的DNaseⅠ酶酶切位点及各部分的长度如图1所示。对照组和实验组均加入等量的待测DNA样液，然后加入等量的DNaseⅠ酶，通过控制酶的用量和作用时间使每个DNA分子只发生一次磷酸二酯键的断裂。酶解后将对照组和实验组分别进行电泳检测所得片段的大小，对照组得到大小分别为10bp、40bp、50bp、90bp、100bp、140bp、150bp、180bp的8个片段，实验组得到大小分别为10bp、50bp、90bp、100bp、140bp、180bp的6个片段。为使结果可以更直观地呈现，研究小组在实验组DNA片段的一端用32P进行标记，重复上述实验过程，经DNaseⅠ酶酶切后电泳，再经放射性显影，条带结果如图2所示。下列说法正确的是（　　）
A．构成启动子的基本单位是脱氧核苷酸，启动子可与DNA聚合酶结合，启动转录
B．根据实验结果可以确定，启动子在DNA上的位置为A点附近
C．DNaseⅠ酶可作用于DNA的氢键和磷酸二酯键
D．根据图2条带结果，可知32P标记加在了DNA片段的a端
八、解答题
31．中央电视台《舌尖上的中国》栏目介绍了我国各地的美食，其中利用传统发酵技术制作的各类特色食品，如果醋、泡菜、腐乳等展现了人民群众的智慧。其中豆瓣酱是我国地方特色调味品，生产豆瓣酱时要将蚕豆瓣和米曲霉制作成豆瓣曲，再添加盐水、辣椒等调料进一步发酵。请回答下列问题：
(1)蚕豆经沸水漂浸、冷却后才可接种菌种，目的是_____________________________________________________________________（至少写两条）。
(2)为防止滋生细菌，破坏豆瓣曲的风味，人们在发酵过程中常添加一定浓度的盐水。若所加盐水浓度过高则会抑制发酵过程，原因是________________。
(3)某研究团队对发酵阶段传统工艺（盐度15%，温度37℃，发酵30天）进行改良，提升了豆瓣曲风味。两种工艺的结果比较如图所示。
新工艺建立了分段发酵模式，即前期盐度6%、温度12℃，中期盐度6%、温度37℃，后期盐度15%、温度37℃。前期保持较低温度的目的是________________；据图分析，工艺改良后豆瓣曲风味得以提升，是因为____________________________。
(4)为进一步改良发酵阶段传统工艺，研究团队决定继续探究豆瓣曲中微生物的种类和数量。取30g豆瓣曲溶于170mL无菌水中，在103稀释倍数下，取0.1mL菌液涂布3个孟加拉红琼脂培养基（孟加拉红是一种选择性抑菌剂，可抑制细菌生长并限制某些霉菌的蔓延），统计菌落数分别为50、60、70个，每克豆瓣曲中米曲霉菌数为____________。用该计数方法得到的菌体数量比实际值小，原因是____________________；若用显微镜计数法统计的结果比实际值偏大，原因是____________________。
32．不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉的次生代谢产物紫杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极低，导致了紫杉醇的供应严重不足。因此，研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如下图。请回答下列问题。
注：X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位或染色体消除，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理能使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。
(1)过程①中需将外植体经________消毒处理后接种于MS培养基上诱导____过程，产生愈伤组织。
(2)过程②中将愈伤组织加入________（较高/较低）渗透压的无菌酶液中，离心后弃去上清液，加入洗涤液多次洗涤后获得原生质体。多次洗涤的目的是____________________。
(3)融合前需用X射线照射________（红豆杉/柴胡）的原生质体，用____处理另一亲本的原生质体。
(4)采用二乙酸荧光素（FDA）法可测定原生质体活力。已知FDA本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过活细胞质膜，会留在细胞内发出荧光。据此应选择____（有/无）荧光的原生质体用于融合。融合前对原生质体在显微镜下用________计数，以确定原生质体密度。
(5)过程③常用的化学试剂是________，除此外还可以使用的化学方法是____________。经诱导融合后，再生细胞团只能来自于异源融合的原生质体，这是因为只有杂种细胞具备________能力。
(6)过程④中，再分化阶段所用培养基中当植物激素X多Y少时，未分化细胞群将分化出芽，则植物激素X、Y的名称分别是____________。利用图中技术进行育种的优点是____________________________________。
33．干扰素是动物体内合成的一种糖蛋白，可用于治疗病毒感染和癌症。下图为科研人员培育转基因克隆奶牛并从其乳汁中获取干扰素的过程。图中①～⑦表示相关的操作，如表表示相应限制酶和它们的识别序列及切割位点。回答下列问题：
限制酶 SpeⅠ BglⅡ EcoR Ⅰ BamHⅠ XbaⅠ
识别序列及切割位点
(1)图中过程①、②培养细胞所需的气体条件是___________；其中③过程将进行培养的供体细胞注入去核的卵母细胞中形成重构胚，该过程中卵母细胞的“去核”是指去除___________。
(2)为保证干扰素基因与质粒的正确连接，需对该基因两侧进行设计改造，需在基因两端分别添加___________限制酶识别序列，切割质粒时应选用的限制酶是___________。
(3)若希望通过单次移植获得同卵双胎以降低多胎妊娠风险，可在囊胚期采用激光辅助孵化联合内细胞团（ICM）均等分割技术。此操作必须确保___________，否则将导致胚胎发育异常或嵌合体形成。
(4)图中获得的转基因克隆奶牛D的性别是_______（填“雄性”或“雌性”或“雌性和雄性”），可取___________细胞鉴定性别。
参考答案
1．B
2．C
3．D
4．B
5．B
6．D
7．C
8．D
9．B
10．D
11．D
12．A
13．D
14．A
15．C
16．A
17．C
18．B
19．C
20．C
21．AC
22．ACD
23．AD
24．B
25．B
26．ABD
27．A
28．BCD
29．BD
30．D
31．(1)减少有机物消耗；避免高温抑制菌种活性
(2)米曲霉失水/细胞失水
(3) 抑制杂菌繁殖，同时保持霉菌有较高的数量 发酵中后期盐度升高，抑制细菌生长，米曲霉在竞争中占据优势，且温度升高提高了相应蛋白酶的活性，氨基酸态氮的含量增加（写出1条即可，意思相近即可）
(4) 4×106个 不是由单一菌体繁殖形成的菌落/米曲霉死亡（意思相近即可） 显微镜下统计的菌体既有活菌也有死菌（意思相近即可）
32．(1) 酒精和次氯酸钠 脱分化
(2) 较高 去除原生质体上残留的酶液/防止酶解过度（意思相近即可）
(3) 红豆杉 碘乙酰胺
(4) 有 血细胞计数板
(5) PEG/聚乙二醇 高Ca2+—高pH融合法 分裂
(6) 细胞分裂素、生长素（顺序不可变） 打破生殖隔离，实现远缘杂交育种
33．(1) 95%的空气和5%的CO2 纺锤体—染色体复合物
(2) BglⅡ和SpeⅠ BamHⅠ和XbaⅠ
(3)内细胞团均等分割
(4) 雌性 滋养层

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