资源简介

辽西重点高中2025-2026学年度下学期高二月考
生物试题
全卷满分100分，考试时间75分钟。
注意事项：
1.答题前，先将自己的姓名、准考证号填写在试卷和答题卡上，并将条形码粘贴在答题卡上的指定位置。
2.请按题号顺序在答题卡上各题目的答题区域内作答，写在试卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。
3.选择题用2B铅笔在答题卡上把所选答案的标号涂黑；非选择题用黑色签字笔在答题卡上作答；字体工整，笔迹清楚。
4.考试结束后，请将试卷和答题卡一并上交。
5.本卷主要考查内容：人教版必修1、2，选择性必修1、2、3.
一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。
1．海南海口石山火山群地区的土壤类似砂砾土壤，且富含矿物质，适宜种植葡萄，周边居民常利用传统发酵技术将葡萄酿制成葡萄酒或葡萄醋。下列叙述正确的是（　　）
A．家庭制作葡萄酒时，必须接种严格筛选的优良菌种以保证品质
B．制作葡萄酒时，将瓶盖打开利于排出酵母菌细胞呼吸产生的气体
C．利用葡萄酒制作葡萄醋时，需要通入空气并适当升高发酵温度
D．在葡萄酒的发酵过程中，微生物繁殖越快发酵产物产率越高
2．毛豆腐是用老豆腐经毛霉自然发酵制成的，成品表面覆盖白色菌丝，内部呈虎皮纹路，风味独特，制作流程如图所示。下列分析正确的是（ ）
A．底部透气的主要目的是使豆腐中的水分快速蒸发
B．①表示开水，使用开水处理豆腐可以防止杂菌污染
C．发酵过程中，豆腐中的蛋白质会被分解为小分子的肽和氨基酸
D．家庭制作的毛豆腐依赖毛霉单一菌种发酵的结果
3．研究人员筛选出了一种石油降解菌。下列叙述正确的是（　　）
A．制备石油降解菌的培养基时，应先灭菌再调节 pH
B．配制选择培养基时应以石油为唯一碳源
C．接种时，接种环在使用前后均需干热灭菌
D．倒平板时，培养基温度一般控制在60℃左右
4．生长圈法是微生物筛选的一种常用方法，其核心在于选用适当的营养缺陷型菌株作为指示菌，将待测菌株涂布于含有高浓度指示菌的平板上，若待测菌能合成并释放该缺失营养物，则指示菌会在该待测菌周围生长，形成明显的浑浊生长圈，如图所示。实验小组欲利用该方法筛选L-异亮氨酸高产菌，下列叙述错误的是（　　）
A．高浓度指示菌本身应当不具备合成L-异亮氨酸的能力
B．筛选L-异亮氨酸高产菌的培养基上应以L-异亮氨酸为唯一碳源
C．该培养基可能是一种固体培养基
D．生长圈直径与菌落直径的比值越大，菌株产L-异亮氨酸的能力越强
5．传统发酵工艺与各地的自然环境、历史文化紧密相连，是地域文化的重要载体。下列有关传统发酵技术叙述正确的是（　　）
A．传统发酵技术以混合菌种的液体发酵为主
B．制作果酒时，应将水果清洗干净并严格灭菌
C．制作泡菜时，液体表面出现的白膜是由乳酸菌大量繁殖导致
D．在果酒果醋的发酵过程中，发酵液的pH均会下降
6．研究表明，青蒿素并非在植物所有细胞中都能合成，它主要发生在叶片和幼嫩茎表面的分泌型腺毛中。某同学想通过植物细胞工程获得青蒿素，下图为其设计的过程示意图，有关说法正确的是（　　）
A．过程①要用酒精和次氯酸钠溶液对幼叶进行灭菌
B．过程②③可以选择相同的培养基进行诱导培养
C．经PEG诱导后产生的植株丁发生染色体数目变异
D．过程⑤通过对愈伤组织细胞的培养可从中大量提取青蒿素
7．紫杉醇是存在于珍稀植物红豆杉体内的一种高效抗癌物质。由于红豆杉是濒危植物，因此紫杉醇的供应严重不足。为满足临床需求，科学家尝试利用植物细胞工程生产紫杉醇。下列相关叙述正确的是（　　）
A．外植体需要用无水乙醇和适宜浓度的次氯酸钠溶液进行充分消毒
B．诱导外植体形成愈伤组织期间，每日需要用高光强的灯光进行照射
C．该方法主要利用促进细胞生长的培养条件，提高单个细胞中紫杉醇的含量
D．利用植物细胞工程生产紫杉醇，体现了生物多样性的直接价值
8．将人眼睑成纤维细胞传代培养后，再培养形成支架，在该支架上接种人口腔黏膜上皮细胞，培养一段时间后分离获得上皮细胞片层，可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及（ ）
A．制备细胞悬液
B．置于CO2恒温培养箱中培养
C．离心收集细胞
D．用胰蛋白酶消化支架后分离片层
9．科学家通过如图所示的方法将黑鼠的成纤维细胞诱导成iPS细胞，再将其细胞核移植到灰鼠的去核卵母细胞中，通过核移植技术获得克隆鼠。进一步研究发现，表观遗传修饰如DNA甲基化和组蛋白乙酰化在细胞重编程中起关键作用，利用Kdm4d的mRNA和TSA处理重构胚可显著提高胚胎的发育率和妊娠率。下列叙述错误的是（　　）
注：Kdm4d是组蛋白去甲基化酶，TSA是组蛋白脱乙酰酶抑制剂。
A．从卵巢中取出的卵母细胞可以直接作为核移植的受体细胞
B．可以通过显微操作去除卵母细胞的细胞核
C．可以用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程
D．Kdm4d和TSA可以改变重构胚的表观遗传，从而提高胚胎发育率
10．2017年，某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请，其培育过程可选用如下技术路线。据图分析下列叙述错误的是（　　）
A．培育“三亲婴儿”的过程中运用了核移植技术，属于无性繁殖
B．“三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因
C．培育“三亲婴儿”可避免母亲的线粒体疾病遗传给后代
D．该过程中所用的MⅡ期卵母细胞具有体积大易操作且营养物质丰富等特点
11．研究人员选择分别在 20℃、-20℃条件下保存的花菜、辣椒和蒜黄作为实验材料，进行“DNA的粗提取与鉴定”实验，部分实验步骤和DNA 鉴定结果如图1、图2所示。下列说法正确的是（　　）
A．该实验常利用DNA在酒精中溶解度较大的特性来提取DNA
B．“DNA的粗提取与鉴定”实验需要在无菌条件下进行
C．图1中，过滤后DNA主要存在于沉淀中，需用高浓度 NaCl溶液重新溶解
D．图2中，低温时蓝色深度更高，原因可能是低温抑制了酶的活性，DNA降解速率更慢
12．化疗会造成癌症病人血小板减少，血小板生成素（TPO）可促进血小板产生。研究人员将含人TPO基因的表达载体导入中国仓鼠卵巢细胞中，获得有生物活性的TPO并应用于临床。下列叙述正确的是（　　）
A．构建表达载体需要解旋酶和DNA聚合酶
B．通过用Ca2+处理中国仓鼠卵巢细胞来导入基因表达载体
C．表达载体包括TPO基因、标记基因、起始密码和终止密码等
D．用抗原—抗体杂交技术可检测TPO基因的表达情况
13．为提高小麦的抗旱能力，育种人员将从某种微生物中获得的抗旱基因E转入小麦幼胚组织细胞中，培育出了转基因抗旱小麦。下列相关叙述错误的是（ ）
A．可通过花粉管通道法直接将抗旱基因E转入受体细胞
B．可通过农杆菌转化法将抗旱基因E转入受体细胞
C．可提取该微生物的抗旱基因E的mRNA来合成cDNA
D．可在个体水平检测转基因抗旱小麦的抗旱水平
14．抗凝血酶是人体内一种非常重要的天然抗凝血蛋白，它在维持血液正常流动、防止血栓过度形成方面起着核心作用。如图是构建抗凝血酶基因表达载体所用的pBR质粒的结构及人抗凝血酶基因所在的DNA片段，现已知有引物甲：5′-GGACCCCGGG-3′；引物乙：5′-CATTTCTAGA-3′；引物丙：5′-CCTGGGGCCC-3′；引物丁：5′-GTAAAGATCT-3′。下列叙述正确的是（　　）
A．PCR扩增抗凝血酶基因时，需用限制酶SmaI处理引物甲和引物丙
B．构建表达载体时，为保证连接效率优先选用BglⅡ和SmaⅠ双酶切pBR质粒和获取抗凝血酶基因
C．可通过显微注射法将表达载体导入牛的受精卵构建乳腺生物反应器生产人抗凝血酶
D．若导入重组质粒的大肠杆菌能在含新霉素的培养基上生长，则说明表达载体构建成功
15．为研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素（多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症），某科研机构从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图所示。下列说法正确的是（　　）
A．该项研究运用了蛋白质工程的原理
B．Klenow酶是一种DNA连接酶
C．②过程还需要加入2种引物
D．合成的双链DNA有72个碱基对，其中嘌呤数等于嘧啶数
二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。
16．下列有关泡菜制作过程中，不同时期泡菜坛中乳酸菌含量的叙述，正确的是（ ）
A．制作泡菜初期并无乳酸菌存在 B．腌制过程中乳酸菌的数量会逐渐增多并达到最高峰
C．腌制后期乳酸菌的数量会下降 D．腌制的全过程乳酸菌的数量不变，活性有变化
17．利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史，某企业通过发酵制作酱油的流程如图所示。下列相关说法错误的是（　　）
A．米曲霉分泌的蛋白酶将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸
B．发酵池中乳酸菌和酵母菌不存在竞争关系
C．发酵池中出现气泡与乳酸菌无氧呼吸产生的CO2有关
D．发酵池发酵过程中，搅拌可缩短发酵时间
18．植物组织培养技术现已较为成熟，与其相关的植物细胞悬浮培养技术、快速繁殖技术、单倍体育种技术等也已经广泛应用于实际生产中。某兴趣小组尝试利用植物细胞悬浮培养技术培养胡萝卜细胞并获取番茄红素，设计了以下实验流程和培养装置（如图）。下列相关叙述错误的是（　　）
A．快速繁殖技术也被称为微型繁殖技术，例如植物枝条嫁接
B．在进行水稻的单倍体育种时，用秋水仙素处理单倍体植株的幼苗或其种子，可以使其染色体数目加倍
C．植物细胞悬浮培养过程中需要对外植体进行消毒，用到的试剂主要有酒精和次氯酸钠溶液
D．装置中的充气管应置于液面下方，该管可同时作为排气管
19．杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，被称为“钻石级”肉用绵羊。科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下图所示。下列相关叙述不正确的是（　　）
A．为了获得更多的卵母细胞，需用雌激素对雌性杜泊羊进行处理
B．从卵巢中采集的卵母细胞可直接与获能的精子进行体外受精
C．为避免代孕绵羊对植入胚胎产生免疫排斥反应，应注射免疫抑制剂
D．为了进一步扩大繁殖规模，可通过胚胎分割技术获得同卵双胞胎或同卵多胎
20．双脱氧测序法（Sanger法）是第一代DNA测序方法。在4支试管中分别加入4种dNTP和少量的1种ddNTP进行PCR，再把PCR产物变性，利用电泳进行分离，根据结果确定特定碱基的位置。通过该方法测定并比较某疾病患者与对照个体DNA模板链的一段碱基序列，结果如图所示。下列叙述正确的是（ ）
注：dNTP是PCR的四种原料；双脱氧核苷三磷酸（ddNTP）有ddATP、ddCTP、ddGTP、ddTTP四种；在DNA聚合酶作用下，ddNTP与dNTP竞争核苷酸链延长位点，以加入ddATP的体系为例；若配对的为ddATP，延伸终止；若配对的为dATP，继续延伸。
A．5'-CTACCCGTGAT-3'为对照个体的一段序列
B．ddNTP与dNTP竞争的延长位点为核苷酸链的5'末端
C．上述PCR反应体系通常需要足够多的模板链
D．患者该段序列中某位点的碱基T突变为C
三、非选择题：本题共5小题，共55分。
21．开展深海微生物研究对于开发海洋资源具有重要意义。我国研究人员采集了深海冷泉附近的沉积物样品，采用新型分离策略，纯化、鉴定得到了全新的拟杆菌菌株，并进一步研究了其生物学特性。
回答下列问题：
(1)研究者先制备培养基，然后采用______法灭菌，冷却后再接入沉积物样品，28℃厌氧培养一段时间后，获得了含拟杆菌的混合培养物。为了减少灭菌后培养皿与周围的物品接触被污染，灭菌前的操作是______。
(2)图甲是新菌株拟杆菌X在不同的培养基上的生长情况，可推测拟杆菌X在以______为碳源时生长状况最好；要检测培养基是否灭菌合格，对照组的操作是______。
(3)某同学对拟杆菌X进行纯培养，结果如图乙。其中①采用的纯培养技术是______法，第二至第五划线区域均无菌落，此过程出现的失误操作很可能是______。③不适于进行微生物数量测定，理由是______。
(4)研究人员常采用刚果红染色法鉴别纤维素分解菌，其原理是刚果红能与纤维素结合形成红色复合物，但不能与纤维素的水解产物结合成红色物质。将深海微生物接种到以纤维素为唯一碳源的刚果红固体培养基上，培养一段时间，挑选出纤维素分解能力强的菌株，其特点是观察到菌落周围______。
22．小香猪是我国珍贵的地方猪种，由于肉质鲜美广受消费者喜爱。某课题组开展了小香猪体细胞转入绿色荧光蛋白（GFP）基因并进行克隆的研究，其基本流程如图所示。请分析回答：
(1)过程①在原代培养时，细胞分裂生长到表面相互接触就会停止分裂增殖，这种现象叫_____________。动物细胞培养的培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有_______________。传代培养时，使用___________处理贴壁细胞，得到单个细胞后再接种到新的培养液里培养。
(2)过程③表示通过_____对卵母细胞去核，实际去除的是________。经过过程④操作后，可采用物理或化学方法，如__________（答出一种即可）方法激活重构胚，获得转基因重构胚胎。
(3)在转基因重构胚胎移植前开展遗传病筛查时，应选取胚胎的______细胞进行DNA分析。
(4)在过程⑤中，将克隆的胚胎移植到代孕母猪的输卵管中，胚胎移植前需对代孕母猪进行发情处理，这一操作的目的是______________。
23．分析以下两个关于植物细胞工程的活动回答：
Ⅰ.下图表示科学家通过植物细胞工程，培育“矮牵牛—粉蓝烟草”杂种植株的过程。根据所学知识完成下列问题：
(1)利用矮牵牛的茎尖分生组织经过一系列实验操作可得到新的矮牵牛植株的根本原因是______。
(2)植物体细胞杂交依据的生物学原理主要有______。人工诱导原生质体融合的方法基本可分为两大类——物理法和化学法，其中化学法包括______，植物体细胞融合完成的标志是______。
(3)“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种植株的体细胞内含______条染色体，属于______倍体植株。
Ⅱ.银杏的次生代谢产物，如银杏黄酮（具有抑制癌细胞增殖，扩张冠脉血管、增加冠脉血液流量和解除痉挛的作用）、银杏内酯（具有促进脑血微循环、抑菌抗炎的作用）等，一般从叶片中取得，但传统栽植方法周期长、成本高、受环境影响大，无法很好满足市场需求。因而利用组织培养技术，从愈伤组织中提取，具有一定的研究意义与应用前景。请回答下列相关问题：
(4)研究表明，选择银杏叶片比选择胚作为外植体材料成功率更低，原因可能是诱导叶片脱分化形成_______的难度较大。因此，往往选择细胞生长分裂旺盛的部位作为外植体，但外植体也不能太嫩，因为太嫩的组织细胞虽细胞分裂较旺盛，但在消毒时次氯酸钠等药品渗透也较快，在后续用_______多次冲洗也不易清除，导致细胞易失活甚至破裂。
(5)外植体愈伤组织试管苗植株
为获得银杏的次生代谢产物，_______（填A“需要”或B：“不需要”）走完如上述流程图的全过程。有关做法是：可以将愈伤组织转入到液体培养基中，进一步扩大培养，以提取有益次生代谢物，在此过程中需要做到无菌操作。与固体培养基培养愈伤组织相比，此做法的优点有哪两项_______。
A．与培养基的结合更加充分
B．受培养基中成分差异的影响较小
C．对环境不敏感
D．对营养物质的吸收更容易
(6)此外，研究表明，用通气较为不良的介质封口，如塑料膜或玻璃纸，可以提升黄酮和内酯的产量，可能原因是_______胁迫细胞诱导产生次生代谢物。
(7)学习了植物组培技术后，同学们尝试进行了以菊花枝条为外植体的组织培养，结果有同学在首次对菊花继代培养配制MS生根培养基时，忘记添加NAA（NAA：萘乙酸，为生长素类似物），结果与添加NAA的生根培养基中的菊花幼苗相比，无添加NAA培养基中的菊花幼苗也育生根，其原因可能是_______。不过其生根数量较少且根长较短，可能的原因是_______。
(8)请例举植物组织培养技术的应用_______（至少两项，上述中提到的除外）。
24．细胞工程在育种和药物生产领域应用十分广泛，阅读材料回答下列问题。
材料一：花椰菜是人们喜爱的蔬菜，种植时容易遭受病菌侵害。紫罗兰具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种。
(1)图1中②可用到的物理方法有______（填2种）。②后在黑暗的环境中进一步培养获得愈伤组织，该组织的特点是______（答2点）。
(2)逐渐改变再分化培养基中植物激素X和植物激素Y的浓度比，愈伤组织会发生如图2所示的变化。结合所学知识判断，植物激素X和Y分别是_______和______。
(3)图3为通过蛋白质电泳技术（基本原理类似DNA电泳技术）对亲本和某些待测植株中的特异性蛋白进行电泳的结果。据图判断，一定属于杂种植株的是______号。
材料二：科学家利用动物细胞工程成功制备了单克隆抗体，在此基础上制备的抗体—药物偶联物（ADC）更是为癌症的治疗开辟了崭新的路径，其作用机制如图4所示，请回答：
(4)如图4中ADC的抗体、药物的作用分别是_______、________。与传统肿瘤治疗中的化疗相比，ADC在临床应用上有何优势？_______。
25．乳糖酶缺乏症患者体内乳糖酶（LCT）的分泌量较少，导致患者无法完全消化母乳或牛乳中的乳糖，从而引起非感染性腹泻。工业化生产无乳糖奶粉时，需用乳糖酶将奶中的乳糖除去。
Ⅰ.为了提高乳糖酶的产量，科研人员从牧民的奶酪（一种近似固体的发酵牛奶制品）中分离纯化出了能高效生产乳糖酶的酵母菌，下图为流程示意图。请回答下列问题：
注：X-gal为乳糖酶的显色底物，乳糖酶可以将无色的X-gal分解成半乳糖和蓝色的溴靛蓝。
(1)X-gal是一种无色物质，能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色。从含X-gal的培养基中挑选目的菌时，应挑选的是_______。
Ⅱ.科学家采用基因工程技术将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组中，获得的转基因牛分泌的乳汁中乳糖含量大大降低，用到的质粒和目的基因的部分结构如图1和图2所示，不同限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：
限制酶 识别序列及切割位点
Hind Ⅲ 5 -A↓AGCTT-3
Sma I 5 -CCC↓GGG-3
Kpn I 5 -GGTAC↓C-3
Sal I 5 -G↓TCGAC-3
Nhe I 5 -G↓CTAGC-3
(2)为了将图2中的目的基因准确插入图1质粒中，需要在肠乳糖酶基因的两端分别添加限制酶_______的识别序列。为保证肠乳糖酶基因的正确复制和与质粒的正确连接，需要设计PCR 引物，请写出与β链结合的引物的序列：________（写10个碱基）。
(3)在构建基因表达载体时，肠乳糖酶基因应插入_______之间。将含有肠乳糖酶基因的表达载体导入受体细胞的常用方法是_______。
(4)利用胚胎工程技术将导入目的基因的受体细胞培育成个体，采用分子杂交技术检测肠乳糖酶基因在转基因奶牛中是否转录出mRNA 的大致思路为_______。
试卷第1页，共3页
试卷第1页，共3页
1．C
A、家庭制作葡萄酒的菌种来源于葡萄皮表面的野生型酵母菌，无需额外接种严格筛选的优良菌种即可完成发酵，A错误；
B、制作葡萄酒时若打开瓶盖，会导致杂菌和氧气进入发酵液，杂菌会污染发酵液，氧气会抑制酵母菌的无氧呼吸进而影响酒精产生，排气只需定期拧松瓶盖即可，不能打开瓶盖，B错误；
C、制作葡萄醋的菌种为醋酸菌，醋酸菌是好氧细菌，且其最适发酵温度（30~35℃）高于果酒发酵的最适温度（18~30℃），因此利用葡萄酒制作葡萄醋时需要通入空气并适当升高发酵温度，C正确；
D、葡萄酒发酵过程中，若微生物繁殖过快，会大量消耗发酵液中的营养物质用于自身生长增殖，反而会降低酒精的产率，D错误；
2．C
A、毛霉是需氧型微生物，底部透气的主要目的是为毛霉生长提供氧气，不是蒸发水分，A错误；
B、若用开水化开毛霉菌粉，高温会杀死毛霉，①应为冷却后的开水，B错误；
C、发酵过程中，毛霉产生的蛋白酶会将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，C正确；
D、家庭制作毛豆腐是自然发酵，依赖多种微生物共同作用，并非毛霉单一菌种发酵，D错误。
3．B
A、制备培养基的正确操作是先调节pH，再灭菌，若先灭菌再调节pH，调节pH过程会引入杂菌，A错误；
B、筛选石油降解菌时，使用石油作为唯一碳源的选择培养基，只有能降解利用石油的菌株可以生长繁殖，其他不能利用石油的微生物会被抑制，B正确；
C、接种环在使用前后需要进行灼烧灭菌，C错误；
D、倒平板时，培养基一般冷却至50℃左右，60℃温度过高易烫伤，温度过低培养基会提前凝固，D错误。
4．B
A、高浓度指示菌的作用是“依赖待测菌合成的L-异亮氨酸才能生长”。若指示菌自身能合成L-异亮氨酸，即使待测菌不能合成，指示菌也会生长，无法区分“待测菌是否合成”，因此指示菌需不具备合成L-异亮氨酸的能力，A正确；
B、生长圈法用于筛选能合成目标物质（L-异亮氨酸）的菌株，若培养基含有L-异亮氨酸，无论菌株能否自身合成，都可能存活，无法筛选出“高产菌”，B错误；
C、生长圈法需要观察“菌落周围是否形成浑浊生长圈”，而菌落的形成依赖固体培养基（液体培养基中菌会均匀分布，无法形成独立的菌落和生长圈），C正确；
D、生长圈是“待测菌产生的L-异亮氨酸支持指示菌生长的区域”，生长圈越大（相对于菌落），生长圈直径与菌落直径的比值越大，说明待测菌合成的L-异亮氨酸越多，即产L-异亮氨酸的能力越强，D正确。
5．D
A、传统发酵技术以混合菌种的固体或半固体发酵为主，并非以液体发酵为主，A错误；
B、制作果酒的菌种来源于水果表面的野生型酵母菌，若严格灭菌会杀死发酵所需的酵母菌，因此仅需将水果清洗干净即可，不能严格灭菌，B错误；
C、乳酸菌是厌氧型微生物，主要分布在泡菜发酵液的下层，液体表面的白膜是产膜酵母大量繁殖导致的，C错误；
D、果酒发酵过程中，酵母菌细胞呼吸产生的CO 溶于发酵液形成碳酸，使pH下降；果醋发酵过程中，醋酸菌代谢产生醋酸，也会使pH下降，因此二者发酵过程中发酵液pH均会下降，D正确。
6．C
A、过程①是对幼叶（外植体）进行消毒而非灭菌，灭菌会杀死外植体细胞，导致培养失败，A错误；
B、②脱分化、③再分化过程需要的生长素、细胞分裂素比例不同，培养基成分不同，B错误；
C、PEG诱导原生质体融合后，若两个原生质体融合得到植株丁，其染色体数目为原生质体的2倍，因此该过程可能发生染色体数目变异，C正确；
D、题干明确指出青蒿素主要在叶片和幼嫩茎表面的分泌型腺毛中合成，而愈伤组织细胞无法合成青蒿素，不能从中大量提取该物质，D错误。
7．D
A、外植体消毒需使用体积分数约70%的乙醇和适宜浓度的次氯酸钠处理，A错误；
B、诱导外植体形成愈伤组织的阶段为脱分化阶段，该阶段不需要光照，B错误；
C、该生产方式是通过优化培养条件促进愈伤组织细胞大量增殖，提升细胞总数量进而提高紫杉醇总产量，C错误；
D、生物多样性的直接价值包括药用、工业原料等实用价值，利用植物细胞工程生产紫杉醇作为抗癌药物，体现了生物多样性的直接价值，D正确。
8．D
A、动物细胞培养时，首先需要将组织分散为单个细胞制备成细胞悬液，才能进行后续的传代培养，题干中两种细胞的培养均涉及该操作，A不符合题意；
B、动物细胞培养的必需环境为CO2恒温培养箱，其中CO2的作用是维持培养液的pH稳定，该过程涉及该操作，B不符合题意；
C、细胞传代、接种前均需要通过离心操作分离收集细胞，该过程涉及该操作，C不符合题意；
D、胰蛋白酶的作用是分解细胞间的蛋白质，使细胞相互分散，若用胰蛋白酶消化支架，会破坏上皮细胞间的连接，无法获得完整的上皮细胞片层，因此该过程不涉及该操作，D符合题意。
9．A
A、从卵巢中取出的卵母细胞需要培养到减数分裂Ⅱ中期，才能作为核移植的受体细胞，A错误；
B、过程②是去除卵母细胞的细胞核，即通过显微操作去除纺锤体-染色体复合物，B正确；
C、需要用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，C正确；
D、根据题意推测，注入Kdm4d的mRNA可降低甲基化程度， 进行TSA处理能提高乙酰化程度，从而改变重构胚的表观遗传，使重构胚的与细胞分裂、分化相关基因的表达增加，进入发育进程，D正确。
10．A
A、三亲婴儿的培育经过了两性生殖细胞（精子和重组卵细胞）的结合，属于有性生殖，A错误；
B、三亲婴儿核基因来自父亲和母亲，细胞质（线粒体）基因来自卵母细胞捐献者，因此同时拥有三者的部分基因，B正确；
C、线粒体遗传病由细胞质基因控制，三亲婴儿的细胞质来自捐献者，因此可以避免母亲的线粒体遗传病遗传给后代，C正确；
D、核移植/受精过程选用MⅡ期卵母细胞，正是因为它具备体积大、易操作、营养物质丰富的特点，适合作为受体细胞，D正确。
11．D
A、该实验提取DNA的原理是DNA不溶于酒精，而蛋白质等杂质可溶于酒精，利用该特性使DNA析出，A错误；
B、“DNA的粗提取与鉴定”实验不需要无菌条件，B错误；
C、研磨破碎细胞后，DNA释放后溶解在研磨液中，过滤后DNA主要存在于滤液中，C错误；
D、二苯胺鉴定DNA时，蓝色深浅与DNA含量正相关；低温会抑制降解DNA的酶的活性，DNA降解速率更慢，最终提取得到的DNA更多，因此蓝色深度更高，D正确。
12．D
A、构建基因表达载体需要的工具酶是限制性核酸内切酶（限制酶）和DNA连接酶，解旋酶用于DNA复制时打开氢键，DNA聚合酶用于DNA链的合成，均不参与表达载体构建，A错误；
B、Ca +处理法仅适用于将目的基因导入原核生物感受态细胞，中国仓鼠卵巢细胞是动物细胞，目的基因导入动物细胞常用显微注射法，B错误；
C、基因表达载体的组分包括目的基因（TPO基因）、启动子、终止子、标记基因等，起始密码和终止密码是mRNA上的序列，不属于DNA层面的表达载体组分，C错误；
D、TPO基因的表达产物是TPO蛋白质，抗原—抗体杂交技术可通过特异性结合反应检测是否产生了目标蛋白，从而判断TPO基因是否成功表达，D正确。
13．A
A、花粉管通道法是将目的基因导入受精卵的方法，适用于整体植株的转化，而题干中受体细胞为幼胚组织细胞（属于体细胞），无法直接使用该方法，A错误；
B、农杆菌转化法适用于双子叶植物和部分单子叶植物，可通过农杆菌转化法将抗旱基因E转入受体细胞，B正确；
C、可提取该微生物的抗旱基因E的mRNA经逆转录合成cDNA，可获取抗旱基因E，C正确；
D、转基因作物的性状需在个体水平进行鉴定（如干旱胁迫实验），以确认目的基因是否表达出抗旱性状，D正确。
故选A。
14．C
A、PCR扩增抗凝血酶基因时，引物本身已经提前设计携带了限制酶识别序列，不需要限制酶处理引物，扩增获得目的基因片段后再用限制酶切割即可，A错误；
B、据图可知，SmaI和XmaI识别的序列一样，但是SmaI切割产生的是平末端，连接酶连接平末端效率低，所以优先选用BglⅡ和XmaI双酶切，B错误；
C、将基因表达载体导入动物细胞的常用方法为显微注射法，可通过显微注射法将表达载体导入牛的受精卵构建乳腺生物反应器生产人抗凝血酶，C正确；
D、空质粒本身也带有新霉素抗性基因，故导入空质粒的大肠杆菌也能在含新霉素的培养基上生长，因此不能说明重组表达载体构建成功，D错误。
15．A
A、该项研究以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系为基础，通过改造或合成基因，来改造现有蛋白质或制造一种新的蛋白质，属于蛋白质工程，A正确；
BC、②过程是单个的核苷酸连接到2条单链DNA的3端，所以Klenow酶是一种DNA聚合酶，单链DNA相当于引物，所以②过程不需要加入引物，BC错误；
D、合成的双链DNA含72×2-18=126个碱基对，其中嘌呤数等于嘧啶数，D错误。
16．BC
A、泡菜的制作是利用蔬菜表面的乳酸菌的代谢，因此发酵初期就有乳酸菌，A错误；
B、发酵初期，乳酸菌含量较少，到了中期，乳酸菌的含量会达到最大值，B正确；
C、腌制后期，由于乳酸积累，坛内pH值下降，抑制了乳酸菌的生长和繁殖，乳酸菌的数量会下降，C正确；
D、腌制的全过程乳酸菌的数量和活性都会发生变化，D错误。
17．BC
A、米曲霉发酵时可分泌蛋白酶，能将大豆等原料中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，A正确；
B、乳酸菌和酵母菌共同生活在发酵池中，会争夺营养物质和生存空间，存在竞争关系，B错误；
C、乳酸菌为厌氧微生物，无氧呼吸的产物只有乳酸，不产生CO ，发酵池中的气泡是酵母菌无氧呼吸产生CO 导致的，C错误；
D、发酵过程中搅拌能使微生物与营养物质充分接触，还可适当增加溶氧量，促进微生物的代谢繁殖，缩短发酵时间，D正确。
18．ABD
A、快速繁殖技术是指通过离体培养实现种苗规模化增殖，植物枝条嫁接不属于快速繁殖技术，A错误；
B、单倍体高度不育，不能形成种子，B错误；
C、植物细胞悬浮培养过程中需要对外植体进行消毒，消毒剂主要有酒精和次氯酸钠溶液，C正确；
D、充气管不能作为排气管，D错误。
19．ABC
A、胚胎工程中用促性腺激素处理供体雌性来促使雌性个体超数排卵，其目的是获得较多的卵母细胞，A错误；
B、从卵巢中采集的卵母细胞需要培养至减数第二次分裂中期才能与获能的精子进行受精，B错误；
C、胚胎移植的理论基础之一是受体子宫对外来胚胎没有免疫排斥反应，因此，不需要注射免疫抑制剂，C错误；
D、胚胎分割技术可以获得同卵双胎或同卵多胎，增加了胚胎的数量，因而可以扩大繁殖规模，为无性繁殖的手段，D正确。
20．AC
A、依据双脱氧测序法的原理，可以确定每个泳道中的条带（DNA片段）的3'终端的碱基，如+ddATP的泳道中出现的条带（DNA片段）的3'终端碱基就是A。另外由于每个片段的起始点相同，但终止点不同，因此可以通过比较片段的长度来确定DNA序列中每个位置上的碱基；图示电泳方向为从上→下，即对应的DNA片段为长→短，如对照个体的电泳结果最短的条带为+ddCTP泳道组的条带，则说明该PCR过程中产物5第一个延伸的碱基为C；以此类推，由于DNA子链延伸方向为5'→3'，因此对照个体的PCR产物中有一段序列为5'-CTACCCGTGAT-3'，A正确；
B、DNA子链延伸方向为5'→3'，新核苷酸（dNTP/ddNTP）是连接到核苷酸链的3'末端，因此ddNTP竞争的延长位点是3'末端，B错误；
C、因为配对的为ddNTP，延伸终止，所以在进行序列时，模板链的数量需要足够多，以确保DNA序列中的每一个碱基都有可能与ddNTP配对产生足够多不同长度的DNA片段，从而获得准确的DNA序列，C正确；
D、患者的测序结果为5'-CTACCTGTGAT-3'，对照个体的测序结果为5'-CTACCCGTGAT-3'，对比患者和对照个体的测序结果可知，患者该段序列中某位点的碱基C突变为T，D错误。
21．(1) 高压蒸汽灭菌 用牛皮纸（报纸）包扎培养皿
(2) 纤维素 将未接种的培养基置于相同条件下培养一段时间，观察是否有菌落产生
(3) 平板划线 第一区域划线结束后，接种环灼烧后未充分冷却 平板③的菌落数不在30~300之间，不适于微生物数目测定的计数
(4)出现透明圈，且透明圈的直径较大
22．(1) 接触抑制 血清 胰蛋白酶或胶原蛋白酶
(2) 显微操作 纺锤体-染色体复合物 电刺激、乙醇、钙离子载体等
(3)滋养层
(4)使代孕母猪生殖器官处于接受胚胎的生理状态
23．(1)矮牵牛的茎尖分生组织含有矮牵牛的全部遗传物质
(2) 细胞膜的流动性、植物细胞具有全能性 PEG（或聚乙二醇）促融、高Ca2+-高pH融合法 杂种细胞再生出细胞壁
(3) 38 四
(4) 愈伤组织 无菌水
(5) B AD
(6)低氧
(7) 植物体内可以产生内源生长素 植物体内可以产生的内源生长素较少
(8)基因工程育种、单倍体育种等育种
24．(1) 离心、电激、振动 排列疏松无规则、高度液泡化、分化程度低
(2) 细胞分裂素 生长素
(3)4、5
(4) 特异性识别、结合癌细胞（靶向定位） 杀伤癌细胞，诱导癌细胞凋亡 特异性强，可定向杀死癌细胞，减少对正常细胞的损伤，副作用小
25．(1)直径最大的蓝色菌落
(2) KpnI、SmaI 5'-GGTACCATGC-3'
(3) 启动子和终止子 显微注射法
(4)用放射性同位素标记的肠乳糖酶基因片段作探针，与从转基因个体的乳腺细胞中提取的mRNA杂交，观察是否出现杂交带，若出现杂交带，则说明肠乳糖酶基因在转基因奶牛中转录出了mRNA
答案第1页，共2页
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