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河北正定中学高二下学期第一次月考
生物
（时间：75分钟 分值：100分）
一、单选题：每小题只有一个选项符合题意，共20小题，每小题2分，共40分
1．人体的三道防线能抵御病原体的攻击，在维持内环境的稳态中发挥着重要作用。下列叙述正确的是（　　）
A．人体的免疫调节不受神经调节和体液调节的影响
B．在第二道防线发挥作用的细胞不参与第三道防线
C．相比于浆细胞，记忆B细胞合成、分泌抗体相对迅速
D．若三道防线无法完全消灭病原体，则说明人的自我调节能力有限
2．马铃薯块茎形成幼苗的过程会受到光照条件的影响。图1、图2分别表示黑暗和光照下生长的幼苗。对幼苗生长情况的分析不合理的是（　　）
A．光照有利于叶绿体光合色素的形成，使幼苗由异养转化为自养
B．光照能促进细胞的伸长、抑制细胞的分化，利于植株的形态建成
C．光敏色素接受光刺激后，将信息传到细胞核内调控基因的表达
D．光照、基因的表达、激素的分泌，共同调控植物的生长发育
3．在某海岛封闭生态系统中，研究者对一种以植物果实为食的鸟类进行种群年龄结构调查，结果如下表（单位：只）。下列相关叙述正确的是（　　）
年龄（年） 0-1 1-2 2-3 3-4 4-5 5-6 ≥6
个体数 120 95 80 65 50 30 20
注：该鸟2年性成熟，5年后进入老年（繁殖能力显著下降）。
A．该种群的年龄结构为衰退型，在相当长的一段时间内，其种群数量将下降
B．若该岛气候稳定，无外来干扰，该种群的出生率和死亡率将长期保持相等
C．调查该鸟的种群密度时，若标记物导致部分标记个体更易被天敌捕食，则估算值偏大
D．若食物和空间等环境资源保持不变，即使幼鸟死亡率极高，其种群数量仍会趋于稳定
4．一个池塘生态系统中生产者固定的能量为A。初级消费者、次级消费者、分解者同化的能量依次为a1、a2、a3，三者呼吸消耗的能量依次是b1、b2、b3。下列叙述正确的是（　　）
A．该生态系统散失的能量为b1+b2+b3
B．第一营养级未利用的能量为A－a1
C．第二营养级生长发育繁殖的能量为a1－b1
D．a2的能量可通过粪便的形式流入a3
5．与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量均明显提高，在食品工业、医药工业、农牧业等许多领域得到了广泛的应用。下列有关发酵工程和传统发酵技术的描述，错误的是（　　）
A．传统发酵制作食醋时，需将发酵容器置于通风处并定期搅拌，以促进醋酸菌发酵产生醋酸
B．传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，发酵工程以单一菌种的液体发酵为主
C．单细胞蛋白是通过发酵工程从酵母菌等微生物细胞中提取获得的，可以作为食品添加剂
D．利用发酵工程生产的微生物农药，可利用微生物或其代谢物防治病虫害，属于生物防治
6．谷氨酸棒状杆菌（生长的最适pH为7.0）可以通过如图所示的代谢途径发酵生产L-谷氨酰胺。下列叙述正确的是（　　）

A．发酵初期控制pH为5.6，后调为7.0，有利于提高L-谷氨酰胺的产量
B．培养基和发酵设备都必须消毒以保证单一菌种发酵
C．与多次排出部分发酵产物相比，一次性排出更有利于提高发酵效率
D．发酵结束后可通过提取、分离和纯化等措施来获得产品
7．下图表示从土壤中筛选某种抗生素产生菌的过程，相关叙述正确的是（　　）
A．稀释涂布平板法统计的菌落数就是样品中活菌实际值
B．没有出现透明圈的菌株说明其不能产生抗生素
C．接种5种测试菌的接种环需要灼烧灭菌5次
D．测试菌2、5对筛选菌产生的抗生素具有较强抗性
8．某科研团队利用基因工程技术改造里氏木霉（工业上生产纤维素酶的重要菌株），用于生产人源溶酶体酶，流程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A．敲除内源纤维素酶基因的目的是避免发酵产物被降解
B．配制转基因里氏木霉的培养基时应用纤维素作为碳源
C．改造里氏木霉蛋白质分泌途径可以提高目标产物的分泌效率
D．用大肠杆菌代替里氏木霉获得的目标产物分子结构完全相同
9．潘灯玉露是最具代表性的软叶类多肉植物，因其叶片晶莹剔透等特点，深受广大植物爱好者青睐。但因潘灯玉露生长速度缓慢、分生能力有限，难以在短时间内大量取得无性繁殖材料。为进一步满足市场对潘灯玉露的大量需求，某实验团队利用植物组织培养技术对其进行繁殖，下表为外源激素对脱分化的影响的相关数据。下列叙述正确的是（　　）
剂量：mg/L NAA=0.10
6-BA=0.00 6-BA=0.05 6-BA=0.10 6-BA=0.50 6-BA=1.00
诱导脱分化率/% 6.7 26.7 53.3 66.7 40.0
A．选取无病虫害的潘灯玉露叶片为外植体，对其和其他实验用具进行灭菌
B．再分化需给予适当光照并按需调整培养基中植物激素等物质的用量
C．配制0.10 mg/LNAA+0.10 mg/L6-BA的MS培养基诱导脱分化的效果最好
D．该技术依据的原理是植物细胞的全能性，完成分化的试管苗可直接移栽入土
10．紫杉醇是存在于红豆杉体内的一种次生代谢物，具有高抗癌活性，被广泛用于乳腺癌等癌症的治疗。我国科学家经过多年研究，筛选出了高产紫杉醇的细胞。下列叙述正确的是（　　）
A．次生代谢物是植物生长所必需的一类小分子有机物
B．可从濒危植物红豆杉中直接提取紫杉醇，该方法会破坏植物资源但产量高
C．利用植物外植体获得高产紫杉醇细胞体现了植物细胞的全能性
D．细胞产物的工厂化生产不占用耕地，几乎不受季节和天气等的影响
11．中国科学家团队利用胚胎分割技术，首次成功获得了3只健康猴以及自体胚胎干细胞，下列叙述正确的是（ ）
A．为满足体外受精的需求，需给雌猴注射性激素实现超数排卵
B．早期胚胎培养时需添加动物血清，气体环境设置为95%和5%
C．获得的自体胚胎干细胞具有发育的全能性，可分化为猴体内的各种组织
D．胚胎分割时，需在桑葚胚时期对内细胞团进行均等分割来维持猴胚胎发育潜能
12．一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一种抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗（单克隆抗体），也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是（　　）
A．注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度影响大
B．单抗制备过程中通常将筛选出的特定浆细胞与骨髓瘤细胞融合
C．利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗
D．p72部分结构改变后可能会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况
13．胚胎工程通过体外受精、胚胎移植等技术手段，已成为驱动畜牧业生产效率变革的强大工具。下图以奶牛为例，阐释了利用该技术进行繁殖的过程。下列相关说法错误的是（ ）
A．精子需进行获能处理才能与成熟的卵子结合，观察到两个极体可以作为受精的标志
B．超数排卵需要注射的激素是促性腺激素，分割胚胎需将①均等分割
C．胚胎移植前，一般取原肠胚滋养层中的细胞进行胚胎性别鉴定
D．需要选择同种的生理状态相同的雌性个体作为接受胚胎的个体
14．多种方法获得的早期胚胎，均需移植给受体才能获得后代。图列举了几项技术成果。下列叙述正确的是（　　）
A．培养早期胚胎的试剂均须进行高压蒸汽灭菌
B．①②技术中均可用Ca 载体处理，但作用对象不同
C．①③技术中需取内细胞团进行性别鉴定，方可获得相应的奶牛或山羊
D．③可通过①②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良
15．猴的克隆胚胎在发育过程中往往出现基因的异常甲基化修饰以及胎盘发育异常，导致克隆成功率较低。我国科学家采用一定的技术手段对克隆胚胎进行处理，如图所示，提高了克隆成功率，并在2024年获得了首个活到成年的克隆猴。下列分析错误的是（　　）
A．成纤维细胞应注入去除纺锤体-染色体复合物的食蟹猴MII期卵母细胞
B．Kdm4d的mRNA和酶TSA通过影响表观遗传促进胚胎细胞的正常分化
C．囊胚b的滋养层将发育为胎盘，为克隆胚胎提供营养并改变其遗传特性
D．该技术在克隆具有特定疾病的模型动物以及辅助生殖等领域有广阔前景
16．科研人员利用基因工程技术将抗虫基因导入棉花细胞，培育出抗虫棉。在该过程中，需要使用多种分子工具。下列有关叙述正确的是（ ）
A．限制性内切核酸酶能识别特定核苷酸序列，并在指定位置断开氢键
B．单个脱氧核苷酸在DNA连接酶的作用下连接合成新的子链
C．质粒作为常用载体，应具备复制原点、启动子、终止子和多个限制酶切割位点等
D．将重组质粒导入棉花细胞最常用的方法是显微注射法
17．RT-PCR是将RNA逆转录（RT）成cDNA（与mRNA互补的DNA单链）和聚合酶链式反应（PCR）相结合的技术，具体过程如图所示，下列叙述正确的是（　　）
A．过程Ⅰ获得cDNA的过程与DNA复制过程中碱基配对方式相同
B．图中A、B两种引物在72°C时通过碱基互补配对结合到模板链
C．图中子链的合成均是以四种核糖核苷酸为原料从引物的一端开始的
D．过程Ⅱ中，若进行6轮循环，则共需要加入引物的数量为63个
18．为了在实验室条件下更加快速高效提取真菌DNA，某团队研究出了一种利用NaOH裂解细胞并快速提取DNA 的方法，主要操作步骤如下图。相关叙述错误的是（ ）

A．将真菌经液氮冷冻后进行研磨，可以获得已经充分破碎细胞的真菌粉末
B．利用NaOH溶液提取DNA，可省去低温下冷藏静置和用冷却酒精析出等步骤
C．NaOH溶液提取DNA 的时间不宜过长且不能剧烈震荡，以免造成DNA 损伤断裂
D．缓冲液除了中和碱性物质之外，还具有维持DNA 酶活性、促进微生物生长等功能
19．乳糖不耐症是由于乳糖酶（LCT）分泌少，不能完全消化分解母乳或牛乳中的乳糖所引起的非感染性腹泻。科研工作者利用生物技术培育出转基因低乳糖奶牛新品种，给患乳糖不耐症患者带来福音。下图为转基因低乳糖奶牛的培育流程，下列说法正确的是（　　）
A．若想得到更多转基因低乳糖奶牛，可在胚胎发育任何阶段利用胚胎分割技术将胚胎进行分割
B．扩增目的基因时，目的基因在PCR仪中经过4次循环，需要32个引物
C．从分子水平上检测转基因牛细胞中LCT基因是否表达的方法是核酸分子杂交技术
D．在转基因低乳糖奶牛的乳腺细胞中，可检测到的物质有LCT基因、LCTmRNA、LCT
20．甜玉米因可溶性糖含量高具有较高商品价值，科研人员拟构建超量表达G蛋白的重组Ti质粒培育转基因甜玉米，所用含G基因的DNA片段如图1，Ti质粒的酶切位点如图2。下列关于该基因工程操作的叙述，正确的是（　　）
A．M、N端分别添加SacI和NotI，可实现目的片段和Ti质粒正确连接构建重组质粒
B．强启动子需与RNA聚合酶结合后，才能启动G基因在甜玉米细胞中的翻译过程
C．质粒中T-DNA的作用是将G基因等目的片段整合到玉米细胞的染色体DNA上
D．农杆菌转化后筛选转基因甜玉米时，应在培养基中加入卡那霉素进行抗性筛选
二、多选题（共6小题，每小题3分，共18分。在每小题给出的四个选项中。有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全得1分，有选错得0分。）
21．T细胞通过T细胞受体（TCR）识别肿瘤抗原，为研究TCR与抗原结合的亲和力对肿瘤生长的影响，将高、低两种亲和力的特异性T细胞输入至肿瘤模型小鼠，检测肿瘤生长情况（图1）及评估T细胞耗竭程度（图2）。T细胞耗竭指T细胞功能下降和增殖能力减弱，表达耗竭标志物的T细胞比例与其耗竭程度正相关。下列叙述正确的是（ ）
A．T细胞的抗肿瘤作用体现了免疫自稳功能
B．T细胞在抗肿瘤免疫中不需要抗原呈递细胞参与
C．低亲和力T细胞能够抑制肿瘤生长
D．高亲和力T细胞更易耗竭且能抑制小鼠的免疫
22．下图为某湖泊生态系统中的部分食物网。据图分析，下列叙述正确的是（　　）

A．鹤既属于第二，又属于第三营养级
B．一般情况下，雕获得的能量不高于2.4×106kJ
C．碳元素从水草进入到鱼的主要形式是有机物
D．鼠和鹤的数量变化体现了生态系统的正反馈调节
23．隐甲藻是一种好氧的异养真核微藻。多在海水中腐烂的植物叶片上生长繁殖，是工业生产DHA（一种功能性脂肪酸）的藻类之一、从海洋中筛选获得的高产油脂隐甲藻，可用于DHA的发酵生产。下列叙述正确的是（ ）
A．隐甲藻可从腐烂的叶片获得生长必需的碳源
B．采集海水中腐烂的叶片，湿热灭菌后接种到固体培养基，以获得隐甲藻
C．选择培养基中可加入抑制细菌生长的抗生素，以减少杂菌生长
D．适当提高发酵时的通气量和搅拌速率均可增加溶氧量，以提高DHA产量
24．研究人员取某糖尿病患者（相关基因缺陷导致，具有遗传倾向）的成纤维细胞在体外将其重编程为iPS 细胞，再诱导iPS 细胞分化为胰岛B细胞后移植到该患者体内，实现了临床功能性治愈。下列叙述错误的是（ ）
A．培养iPS 细胞的培养液中含有蔗糖、氨基酸、无机盐等营养成分
B．诱导iPS 细胞分化成胰岛 B细胞的过程体现了细胞的全能性
C．上述移植过程相对于异体移植可以降低患者的免疫排斥反应
D．经过上述方式治愈的患者，其后代不会再患该种糖尿病
25．为了快速检测青蒿素，科研人员利用细胞工程技术制备了抗青蒿素的单克隆抗体，基本操作过程如图。下列相关叙述中正确的是（　　）
A．过程②可以加入灭活病毒诱导细胞融合，体现了细胞膜的选择透过性
B．过程③为用96孔板进行筛选，在该培养基上，只有杂交瘤细胞才能生长
C．过程④是克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞
D．过程⑤无论在体内或体外都可以进行，从细胞培养液或小鼠腹水中获得单克隆抗体
26．图示人体正常基因A突变为致病基因a及HindⅢ切割位点。AluⅠ限制酶识别序列及切割位点为，下列相关叙述正确的有（ ）
A．基因A突变为a是一种碱基增添的突变
B．用两种限制酶分别酶切A基因后，形成的末端类型不同
C．用两种限制酶分别酶切a基因后，产生的片段大小一致
D．产前诊断时，该致病基因可选用HindⅢ限制酶开展酶切鉴定
三、非选择题：本题共4小题，共42分。
27．经皮电刺激（TENS）是一种安全的电刺激镇痛技术（神经传递过程如图），其依据是“闸门控制学说”，“闸门”位于脊髓背角，传导兴奋的神经纤维包括并行的粗纤维（传导触觉信号）和细纤维（传导痛觉信号），这两类纤维分别以120m·s-1和2.3m·-1s的速度传导电信号，粗纤维传导的信号能短暂关闭“闸门”，阻断细纤维向大脑传递信号。
回答下列问题：
(1)TENS作用于皮肤，产生的兴奋沿着神经纤维向大脑皮层传递，兴奋时细胞膜的膜电位表现为__________________，膜电位发生变化的机理是___________________________。
(2)兴奋由大脑向肌肉传递的过程中，需通过突触传递信号，电信号传导到轴突末梢，突触小体内的__________________与突触前膜融合后释放__________________进入突触间隙，经扩散与突触后膜上的__________________结合后引起下一个神经元兴奋。
(3)能产生动作电位的细胞称为可兴奋细胞，包括神经细胞、肌肉细胞和__________________等类型。
(4)TENS镇痛的原理是___________________________。若动物手术中运用TENS镇痛，具体措施是___________________________。
28．中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜(甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖)为原料，在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值，工艺流程如图。请回答问题：
(1)为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作为___________，并不断提高其浓度，经多次传代培养(指培养一段时间后，将部分培养物转入新配的培养基中继续培养)以获得目标菌株。培养过程中宜采用___________法对样品中的活菌进行接种和计数，以评估菌株增殖状况。若某次取样中，对菌液稀释了105倍后，在每个平板上涂布菌液的体积为0.1mL，平板上的平均菌落数为220个，则菌液中H菌的细胞数为___________个/L。菌落数目需要每隔一段时间统计一次，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样做的目的是___________。
(2)发酵装置中搅拌器的作用是___________。
(3)基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，pH为10，菌株H可正常持续发酵60d以上。分析该系统不需要灭菌的原因是___________。
(4)菌株H还能通过分解餐厨垃圾(主要含蛋白质、淀粉、油脂等)来生产PHA，说明其能分泌___________。
29．图1模型图表示细胞融合技术的一些过程，图2是科学家通过不同方法培育优良种牛的过程，其中①～⑥表示操作过程。请回答以下问题：
(1)图1过程表示植物体细胞杂交技术部分过程，则a、b是通过酶解法获取的______，植物体细胞杂交技术的原理是______________________________________________________。
(2)图2中①过程涉及的精子需进行______，而良种母牛的激素处理中使用的激素是____________。当__________________，卵细胞膜外的透明带会发生生理反应，阻止后来的精子进入透明带；当__________________，卵细胞膜会发生生理反应，阻止其他精子入卵。②过程是将某抗病外源基因插入牛受精卵后培育成转基因牛，需要用到的工具酶有__________________。图2中显示的早期胚胎中b指的是______。
(3)欲在短时间内获得更多的良种奶牛，常常在图2④之前采用______技术进行操作，胚胎工程的最后一道“工序”是____________，该操作的实质是______________________________________________________。
30．PCR是获取目的基因的常用方法。它是利用生物体内DNA复制的原理，在体外复制特定的DNA片段的一种核酸合成技术。
(1)PCR的全称为____________，该技术需要的引物是一小段DNA，长度通常为____________。
(2)图1利用PCR技术克隆BG2基因时，DNA聚合酶只能催化子链沿______方向延伸，应选择图1中的引物______（填序号），引物的作用是______________________________________________________。PCR过程中的三个阶段分别是______________________________________________________。
(3)图2为ddNTP与dNTP的结构，ddNTP能按碱基互补配对插入子链并终止其延伸。使用序列5'-CCCTAA-GAAGCCG-TATCTAAC-3'（“-”表示不含G和C的片段）的DNA片段为模板链，进行PCR，除了必要的反应条件外，还添加了ddCTP，理论上可获得______种末端为“C”的不同长度的子链。耐高温DNA聚合酶需______激活。
试卷第1页，共3页
试卷第1页，共3页
1．D
A、内环境稳态的调节机制为神经-体液-免疫调节网络，免疫调节受神经调节和体液调节的共同调控，A错误；
B、第二道防线中的吞噬细胞既可参与非特异性免疫的吞噬过程，也可在第三道特异性免疫中发挥摄取、处理、呈递抗原、吞噬抗原-抗体复合物的作用，B错误；
C、只有浆细胞能合成并分泌抗体，记忆B细胞不具备分泌抗体的功能，其受到同种抗原刺激后会增殖分化为浆细胞，再由浆细胞产生抗体，C错误；
D、人体的自我调节能力是有一定限度的，若三道防线无法完全消灭病原体，说明免疫调节的能力已超出上限，即人的自我调节能力有限，D正确。
2．B
A、马铃薯块茎萌发初期，无法进行光合作用，这一阶段的营养完全依赖马铃薯块茎中储存的淀粉等有机物，属于异养生活，随着幼苗出土，光照被光敏色素感知，随之叶绿体开始发育、光合色素合成加速，幼苗的营养方式也随之由异养转化为自养，A正确；
B、对比图1和图2可知，光照能够使植物茎秆粗短、节间紧凑、叶片充分展开、根系发达，说明光照能够抑制细胞伸长、促进细胞的分化，从而利于植株的形态建成，B错误；
C、光敏色素是一种能够感受光信号的蛋白质，当它接受光刺激后，会将信息传到细胞核内，进而调控基因的表达，从而影响植物的生长、发育等过程，C正确；
D、植物生长发育的调控，是由基因表达调控、激素调节和环境因素调节共同完成的，因此光照、基因的表达和激素的分泌共同调控植物的生长发育，D正确。
3．C
A、该鸟2年性成熟、5年进入老年，因此生殖前期（0~2年）个体数为120+95=215只，生殖期（2~5年）个体数为80+65+50=195只，生殖后期（≥5年）个体数为30+20=50只，幼年个体数远多于老年个体数，年龄结构为增长型，短期内种群数量将上升，A错误；
B、当前种群为增长型，出生率大于死亡率，种群数量会先增长，达到环境容纳量后出生率和死亡率才会基本相等，并非长期保持相等，B错误；
C、鸟类活动能力强、活动范围广，调查其种群密度采用标记重捕法，计算公式为：种群总个体数=（初次标记数×重捕总数）/重捕中标记个体数。若标记物导致标记个体更易被天敌捕食，会使重捕到的标记个体数偏小，最终估算值偏大，C正确；
D、若幼鸟死亡率极高，会导致幼年个体大量死亡，年龄结构转为衰退型，种群数量会下降，不会趋于稳定，D错误。
4．C
A、生态系统散失的能量是所有生物呼吸作用消耗的能量总和，还包括生产者呼吸散失的能量，仅b1+b2+b3无法代表整个生态系统的散失能量，A错误；
B、第一营养级（生产者）同化量A的去向为自身呼吸消耗、流入第二营养级（a ）、流向分解者、未利用四个部分，因此未利用的能量为A减去生产者呼吸消耗量、a1、生产者流向分解者的能量，并非A－a1，B错误；
C、第二营养级同化量=呼吸消耗的能量+用于自身生长发育繁殖的能量，因此其生长发育繁殖的能量为a1－b1，C正确；
D、某营养级粪便中的能量属于上一营养级的同化量，a2的粪便能量属于a1的同化量，不属于a2的能量，因此不是a2的能量通过粪便流入分解者，D错误。
5．C
A、醋酸菌为好氧细菌，发酵产醋酸需要充足的氧气，通风和定期搅拌可增加发酵液中的溶氧量，利于醋酸菌发酵，A正确；
B、传统发酵通常利用自然环境中的混合菌种，以固体发酵、半固体发酵为主；发酵工程需要严格无菌环境，接种单一纯净的优良菌种，多采用液体发酵以提升发酵效率，B正确；
C、单细胞蛋白是指通过发酵获得的大量微生物菌体本身，而非从微生物细胞中提取的物质，可作为食品添加剂或饲料，C错误；
D、微生物农药是利用微生物本身或其代谢产物防治病虫害，没有使用化学农药，属于生物防治，D正确。
故选C。
6．D
1、发酵是利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。发酵过程：菌种选育→菌种的扩大培养→培养基的配制→灭菌和接种→发酵条件的控制→分离和提纯。
2、发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。
3、产品不同，分离提纯的方法一般不同。（1）如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来。（2）如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。
4、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。
5、发酵过程般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
A、谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0，因此发酵初期控制pH为7.0，有利于增加谷氨酸棒状杆菌的数量，后调为5.6，有利于提高谷氨酰胺合成酶的活性，进而提高L-谷氨酰胺的产量，A错误；
B、培养基和发酵设备都必须灭菌以保证谷氨酸棒状杆菌单一菌种发酵，避免杂菌污染，B错误；
C、由题图可知，L-谷氨酰胺会转化形成L-谷氨酸，及时通过发酵罐的放料管排出部分发酵产物，可以降低发酵罐中L-谷氨酰胺的含量，有利于提高发酵效率，C错误；
D、 L-谷氨酰胺是细胞代谢物，可通过提取、分离和纯化等措施来获得，D正确。
故选D。
7．D
A、稀释涂布平板法统计的菌落数是样品中活菌的估算值，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以统计的数值会比实际活菌数少，A错误；
B、没有出现透明圈，可能的原因有两种：一是该菌株不能产生抗生素，二是产生的抗生素对指示菌S没有抑制作用。不能直接判定其不能产生抗生素，B错误；
C、接种5种测试菌时，每次划线前都需要灼烧接种环，且接种完最后一种菌后也需要灼烧接种环，所以总共需要灼烧6次，C错误；
D、观察右侧的测试菌生长情况，测试菌2和5在筛选菌产生的抗生素作用下，生长情况较好，说明它们对该抗生素具有较强抗性，D正确。
8．C
A、纤维素酶的底物是纤维素，不会降解作为蛋白质的目的产物（人源溶酶体酶）。敲除内源纤维素酶基因的目的是减少无关内源蛋白的表达，节省表达资源、避免纤维素酶作为杂质干扰目的产物提纯，A错误；
B、该菌株已经敲除纤维素酶基因，无法合成纤维素酶分解利用纤维素，因此培养基不能用纤维素作为碳源，B错误；
C、改造里氏木霉的蛋白质分泌途径，可以使细胞合成的目的蛋白更高效地分泌到细胞外，提高目标产物的分泌效率，便于后续分离提取，C正确；
D、大肠杆菌是原核生物，没有内质网、高尔基体等细胞器，无法对人源溶酶体酶（真核蛋白）进行正确的折叠、加工，得到的产物空间结构和里氏木霉（真核菌株）合成的不同，D错误。
9．B
A、外植体只能进行消毒处理，若对外植体灭菌会杀死其活细胞，导致组织培养失败，仅实验用具需要灭菌，A错误；
B、再分化需光照以促进叶绿体形成，且需调整生长素/细胞分裂素比例以诱导器官形成，B正确；
C、由表格数据可知，NAA浓度固定为0.10mg/L时，6-BA浓度为0.50mg/L时诱导脱分化率最高，因此0.10mg/L NAA+0.50mg/L 6-BA的MS培养基诱导脱分化效果最好，C错误；
D．植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，但完成分化的试管苗需要先经过炼苗处理，适应外界环境后再移栽入土，直接移栽会导致成活率极低，D错误。
10．D
A、次生代谢物不是植物生长发育所必需的物质，初生代谢物才是植物生长必需的小分子有机物，A错误；
B、从濒危红豆杉中直接提取紫杉醇会破坏植物资源，且天然红豆杉中紫杉醇含量极低，产量很低，B错误；
C、细胞全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体或分化为各种细胞的潜能，利用外植体获得高产紫杉醇细胞并未体现上述过程，不能体现植物细胞的全能性，C错误；
D、细胞产物的工厂化生产是在室内可控的生物反应器中培养植物细胞，不占用耕地，几乎不受季节、天气等外界环境因素的影响，D正确。
11．C
A、实现超数排卵需给雌性个体注射促性腺激素，若注射性激素会通过负反馈调节抑制内源促性腺激素的分泌，反而无法达到超数排卵效果，A错误；
B、早期胚胎培养的气体环境为95%空气和5%CO ，B错误；
C、胚胎干细胞具有发育的全能性，具备分化为动物体内所有类型组织细胞的潜能，C正确；
D、内细胞团是囊胚阶段才分化形成的结构，桑葚胚阶段细胞尚未分化、无内细胞团结构，胚胎分割时需在囊胚期对内细胞团进行均等分割，D错误。
12．D
A、单抗的制作需要筛选，而多抗不需要筛选，抗原纯度越高，产生的多抗纯度越高，因此原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响小，A错误；
B、单抗制备过程中通常将经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，B错误；
C、非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72上有多种抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，所以向小鼠体内注入p72后，可以刺激小鼠产生多种抗p72的单抗，C错误；
D、p72部分结构改变只改变了部分抗原决定簇，因此由这部分抗原决定簇产生的抗体失效，但由于还存在由其他抗原决定簇刺激机体产生的抗体，所以多抗仍有效，D正确。
13．C
A、精子需经获能处理后才能与成熟的卵子结合形成受精卵，常以在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体或者雌、雄原核作为受精的标志，A正确；
B、为获得更多的卵子，需要给良种母畜注射促性腺激素，图中①处细胞是内细胞团细胞，对囊胚期的胚胎进行分割时需要注意将内细胞团均等分割，可以避免因切割不均，导致两个胚胎的分裂和进一步发育受影响，B正确；
C、在胚胎移植前应取囊胚中滋养层的细胞进行性别鉴定，C错误；
D、需要选择同种的生理状态相同（同期发情处理）的雌性个体作为接受胚胎的个体，D正确。
故选C。
14．B
A、培养早期胚胎的试剂中，含生物活性物质的试剂不能进行高压蒸汽灭菌，通常采用过滤灭菌等方法，A错误；
B、①试管动物技术：Ca 载体处理的是精子，使其获能。②克隆动物技术：使用Ca 载体激活重构胚，两者作用对象不同，B正确；
C、性别鉴定应取囊胚的滋养层细胞（将来发育成胎膜和胎盘），内细胞团将来发育成胎儿本身，取内细胞团会损伤胚胎，C错误；
D、②克隆技术可得到大量同种个体，所以③转基因动物可通过②克隆动物技术实现扩大化生 产，转基因技术可导入外源优良基因，所以①②可通过③转基因技术实现性状改良，但 ①试管动物技术主要用于培育有性生殖的后代，而非实现③的扩大化生产，D错误。
15．C
动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。原因：动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难。
A、在体细胞核移植（克隆）过程中，供体细胞（如成纤维细胞）的核需要注入去除了纺锤体-染色体复合物的MII期卵母细胞中，以确保供体细胞的基因组能够替代卵母细胞的基因组，A正确；
B、Kdm4d是一种组蛋白去甲基化酶，TSA（曲古抑菌素A）是一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂。它们通过调节表观遗传（如DNA甲基化和组蛋白修饰），促进克隆胚胎的正常发育和分化，B正确；
C、囊胚的滋养层确实会发育为胎盘，为胚胎提供营养，但胎盘不会改变胚胎的遗传特性，C错误；
D、通过克隆技术可以创建特定疾病的动物模型，用于研究疾病机制和药物开发。此外，该技术还可能用于辅助生殖，帮助解决不孕不育等问题，D正确。
故选C。
16．C
A、限制性内切核酸酶能识别特定核苷酸序列，但切割的是磷酸二酯键，而非氢键，A错误；
B、DNA连接酶用于连接DNA片段间的磷酸二酯键，形成重组DNA；而单个脱氧核苷酸聚合形成子链需DNA聚合酶催化，B错误；
C、质粒作为常用载体，需具备复制原点、启动子和终止子（调控基因转录）以及多个限制酶切割位点（便于外源基因插入），C正确；
D、将重组质粒导入植物细胞（如棉花）常用农杆菌转化法或基因枪法；显微注射法主要用于动物细胞（如受精卵），D错误。
故选C。
17．D
PCR技术是聚合酶链式反应的简称，利用DNA复制的原理，RT-PCR需要先完成逆转录过程再进行DNA复制，逆转录和DNA复制都遵循碱基互补配对原则。
A、过程I是逆转录过程，是以mRNA为模板合成cDNA，该过程的碱基配对方式为A-T、U-A、G-C、C-G，而DNA复制过程的碱基配对方式为A-T、T-A、G-C、C-G，二者碱基配对方式不完全相同，A错误；
B、引物是通过碱基互补配对结合到模板链上的，该过程是在复性阶段完成的，复性的温度一般为55-60°C，而不是72°C，72°C是延伸阶段的温度，B错误；
C、图中子链的合成是以四种脱氧核糖核苷酸为原料，从引物的一端开始进行合成，C错误；
D、过程Ⅱ中，若进行6轮循环，最终产生的DNA单链数为26=64（条），新合成的子链数为63条，则进行6轮循环，共需要加入引物的数量为63个，D正确。
故选D。
18．D
DNA粗提取选材的标准：DNA含量高，并且材料易得，由于哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和细胞器，因此不采用哺乳动物的血液。DNA粗提取和鉴定的原理：
1、DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化钠中溶解度最低）；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；
2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同；
3、DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
A、将真菌经液氮冷冻后进行研磨，可以获得已经充分破碎细胞的真菌粉末，有利于提取DNA，A正确；
B、NaOH呈碱性，碱溶液可能可以破坏细胞膜和细胞壁进而可以快速提取DNA，可省去低温下冷藏静置和用冷却酒精析出等步骤，B正确；
C、NaOH溶液提取DNA 的时间不宜过长且不能剧烈震荡，否则会造成DNA 损伤断裂，C正确；
D、缓冲液除了中和碱性物质之外，还可使DNA 酶失活、抑制微生物生长等功能，D错误。
故选D。
19．D
A、若想得到更多转基因低乳糖奶牛，可在胚胎发育到桑葚胚或囊胚利用胚胎分割技术将胚胎进行分割，A错误；
B、PCR技术大量扩增目的基因时，缓冲液中需要加入的引物个数计算公式为2n+1-2，因此若一个该DNA分子在PCR仪中经过4次循环，需要25-2=30个引物，B错误；
C、LCT基因表达产生的乳糖酶（LCT）为蛋白质，故从分子水平上检测转基因牛细胞中LCT基因是否表达的方法是抗原-抗体杂交，C错误；
D、由于通过基因工程把LCT基因导入牛胎儿成纤维细胞，再通过胚胎工程获得了转基因低乳糖奶牛，故牛胎儿成纤维细胞以及转基因低乳糖奶牛乳腺细胞都含有LCT基因，但是由于基因的选择性表达，只是在转基因低乳糖奶牛的乳腺细胞中含有LCTmRNA与LCT，在转基因低乳糖奶牛的乳腺细胞中，可检测到的物质有LCT基因、LCT mRNA和LCT，D正确。
20．C
A、分析酶切位点，N端在上游，M端在下游，所以M、N端分别添加Not Ⅰ和Sac Ⅰ可实现与Ti质粒的连接，A错误；
B、启动子与RNA聚合酶结合后启动的是基因的转录，B错误；
C、Ti质粒的T-DNA可将目的基因整合到植物细胞的染色体DNA上，C正确；
D、T-DNA上的抗性基因为潮霉素抗性基因，筛选转基因甜玉米时应加入潮霉素，卡那霉素抗性基因不在T-DNA上，D错误。
21．CD
免疫系统三大功能：①免疫防御，针对外来抗原性异物，如各种病原体。②免疫自稳，清除衰老或损伤的细胞。③免疫监视，识别和清除突变的细胞，防止肿瘤发生。
A、T细胞的抗肿瘤作用体现了免疫监视功能，A错误；
B、T细胞在抗肿瘤免疫中的增殖分化需要抗原呈递细胞的参与，B错误；
C、依据图1可知，低亲和力T细胞组与对照组相比较，肿瘤体积偏小，说明低亲和力T细胞能够抑制肿瘤生长，C正确；
D、依据图2可知，低亲和力组与高亲和力组相比较，表达耗竭标志物的T细胞比例明显偏低，T细胞耗竭指T细胞功能下降和增殖能力减弱，表达耗竭标志物的T细胞比例与其耗竭程度正相关，说明低亲和力组的T细胞功能大于高亲和力组，增殖能力强于高亲和力组，高亲和力T细胞更易耗竭，依据图1可知，高亲和力组肿瘤体积大于对照组，说明其能抑制小鼠的免疫，D正确。
故选CD。
22．AC
A、由图可知，鹤可以以第一营养级的植物为食，也可以第二营养级的鼠和鱼为食，因此鹤既属于第二，又属于第三营养级，A正确；
B、能量流动具有单向流动、逐级递减的特点，在相邻营养级间的传递效率为10%~20%，该食物网为某湖泊生态系统中的部分食物网，雕可能有其他的食物来源，因此雕获得的能量有可能高于2.4×106kJ，B错误；
C、鱼通过捕食获得水草中的碳，即碳元素从水草进入到鱼的主要形式是有机物，C正确；
D、鼠增多导致鹤增多，鹤增多导致鼠减少，可知鼠和鹤的数量变化体现了生态系统的负反馈调节，D错误。
故选AC。
23．ACD
消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物；灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
A、根据题目信息“隐甲藻是一种好氧的异养真核微藻，多在海水中腐烂的植物叶片上生长繁殖”可知，隐甲藻可从腐烂的叶片获得生长必需的碳源，A正确；
B、采集海水中腐烂的叶片进行湿热灭菌后，会杀死所有的微生物，此时接种到固体培养基上无法获得隐甲藻，B错误；
C、根据题目信息可知，隐甲藻为真核生物，抗生素可通过抑制细菌细胞壁合成或影响代谢过程来抑制细菌生长，不会影响真核生物的生命活动，因此在筛选或培养隐甲藻时，加入抗生素可有效抑制细菌杂菌，提高隐甲藻的纯度和生长效率，C正确；
D、根据题目信息可知，隐甲藻为好氧生物，因此利用隐甲藻进行DHA发酵生产时，适当提高发酵时的通气量和搅拌速率均可增加溶氧量，以提高DHA产量，D正确。
故选ACD。
24．ABD
A、动物细胞培养液需含葡萄糖（而非蔗糖）作为碳源，蔗糖常用于植物组织培养；培养液成分应包含氨基酸、无机盐、维生素等，但蔗糖不是动物细胞营养源，A错误；
B、细胞全能性指已分化细胞发育成完整个体的潜能，iPS细胞分化为胰岛B细胞仅形成特定细胞类型，未形成个体，故未体现全能性（体现的是分化潜能），B错误；
C、移植细胞源于患者自身成纤维细胞重编程，自体移植时主要组织相容性复合体（MHC）相同，免疫排斥反应显著低于异体移植，C正确；
D、该糖尿病由基因缺陷导致且具遗传倾向，治愈仅改变体细胞，未改变生殖细胞遗传物质，后代仍可能携带致病基因而患病，D错误；
故选ABD。
25．CD
A、过程②为诱导细胞融合，常用的方法有PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法等，细胞融合的过程体现了细胞膜的流动性，A错误；
B、过程③是用特定的选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞，B错误；
C、过程④是对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，C正确；
D、过程⑤是将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体，D正确。
故选CD。
26．BD
“分子手术刀”——限制酶：（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式，即黏性末端和平末端。
A 、对比 A 基因和 a 基因的序列，A 基因中 “AAGCTT” 变为 a 基因中 “AAGCTG” ，是碱基替换（T→G），并非碱基增添，A 错误；
B、HindⅢ 切割产生黏性末端，AluⅠ 切割后产生的是平末端，二者末端类型不相同，B正确；
C、a基因中有2个Hind Ⅲ切割位点，切割后产生3个片段，有3个Alu Ⅰ切割位点，切割后产生4个片段，用两种限制酶分别酶切a基因后，产生的片段大小不一致，C 错误；
D、因为正常基因 A 和致病基因 a 的 HindⅢ 切割位点数量不同，所以产前诊断时，该致病基因可选用 HindⅢ 限制酶开展酶切鉴定，D 正确。
故选BD。
27．(1) 外负内正 细胞膜对Na+的通透性增加，Na+内流
(2) 突触小泡 神经递质 特异性受体
(3)某些腺细胞
(4) 电刺激皮肤，使粗纤维兴奋，粗纤维传导的信号关闭“闸门”，阻断细纤维向大脑传递痛觉信号 在动物皮肤相关部位施加适宜强度的电刺激
28．(1) 唯一碳源 稀释涂布平板 2.2×1011 防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目
(2)增加培养液中的氧含量（或答增加溶解氧、或答使空气和发酵液充分混合），使菌种和培养液混匀（或答提高原料利用率）
(3)杂菌因失水过多而死亡，酶变性失活
(4)蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等
29．(1) 原生质体 植物细胞膜的流动性、植物细胞具有全能性
(2) 获能 促性腺激素 精子触及卵细胞膜时 精子入卵后 限制酶和DNA连接酶 囊胚腔
(3) 胚胎分割 胚胎移植 早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
30．(1) 聚合酶链式反应 20 30个核苷酸
(2) 5′→3′ 引物2和引物3 使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始延伸DNA链（与模板特异性结合，为DNA聚合酶提供延伸起点） 变性、复性、延伸
(3) 4##四 Mg2+
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